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Ecotoxicológica del Río Desaguadero: Kori Chaca

Este documento describe una investigación ecotoxicológica de las aguas contaminadas del Río Desaguadero cerca de Kori Chaca, Oruro, debido a las actividades de la mina de oro allí. Se utilizará el protocolo de Castillo (2004) con cebollas (Allium cepa) para determinar los niveles de contaminación mediante el crecimiento radicular en diferentes diluciones de lixiviados. El objetivo es evaluar los efectos tóxicos de los metales pesados vertidos en el río y proteger el ecosistema y la
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Ecotoxicológica del Río Desaguadero: Kori Chaca

Este documento describe una investigación ecotoxicológica de las aguas contaminadas del Río Desaguadero cerca de Kori Chaca, Oruro, debido a las actividades de la mina de oro allí. Se utilizará el protocolo de Castillo (2004) con cebollas (Allium cepa) para determinar los niveles de contaminación mediante el crecimiento radicular en diferentes diluciones de lixiviados. El objetivo es evaluar los efectos tóxicos de los metales pesados vertidos en el río y proteger el ecosistema y la
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1

Evaluación Ecotoxicológica De Aguas Contaminadas Del Río Desaguadero Sector Kori

Chaca A Través De Diluciones Lixiviadas

Capriles Arteaga Ribaldo1, Moya Ramirez Neyda Yuly.2,Quintanilla Soto Alexander Iber3

Carrera Ingeniería Agronómica (Mención: Riegos y Suelos)1, Carrera Ingeniería Agronómica

(Mención: Desarrollo )2, Carrera Ingeniería Agronómica (Mención: Riegos Y Suelos)3, Facultad

de Ciencias Agrarias y Naturales, Universidad Técnica de Oruro

Ecología INGA - 5202 “B”

M Sc. Ing. Pérez Lovera Milton Robert

Univ. Luzmila López Trujillano

5 de septiembre del 2023


2

Resumen

La conforme investigación se realizará en el rio Desaguadero a la altura de Kori Chaca,

localizada en la zona nor-oeste de la ciudad de Oruro, en el lugar está ubicada la mina Kori Chaca

(puente de oro)enfocada en la explotación aurífera-argentífera a cielo abierto, para la extracción

de estos minerales se hace uso de agua y cianuro de sodio, el cual es capaz de separar las

moléculas de oro de otros elementos y mediante piscinas de lixiviación y cañerías el oro es

separado quedando el agua restante del lavado de minerales, donde pese a medidas ambientales

de la empresa minera Inti Raymi las aguas contaminadas terminan su recorrido desembocando en

el rio Desaguadero provocando la contaminación del agua y por ende ocasionando una

contaminación de metales pesados por la zona.

Es por consiguiente que la presente investigación se realizará en base a estudios ecotoxicológicos

con la cebolla (Allium cepa) para lograr determinar diferentes niveles de contaminación que

tienen cuerpos hídricos del río Desaguadero sector Kori Chaca por lo que para la evaluación de la

calidad de aguas se empleará el protocolo de Gabriela Castillo (2004) en el cual se hará

seguimiento en base al protocolo de dicho ensayo para definir las sustancias toxicas del agua y en

donde se requiere hacer uso de la cebolla (Allium cepa) en donde en base al crecimiento –

desarrollo radicular que mostrará en distintas concentraciones de las diluciones lixiviadas del río

Desaguadero sector Kori Chaca podremos establecer los niveles de contaminación existentes.

Palabras claves: ecotoxicológica, diluciones, lixiviados, protocolo


3

Summary

This research will be conducted in the Desaguadero river at the height of Kori Chaca, located in

the north-western area of the city of Oruro, in the place is located the Kori Chaca mine (gold

bridge) focused on the gold-argentine open pit mining, for the extraction of these minerals is

made using water and sodium cyanide, This is capable of separating the gold molecules from

other elements and through leaching pools and pipes the gold is separated, leaving the remaining

water from washing the minerals. Despite the environmental measures taken by the Inti Raymi

mining company, the contaminated water ends up flowing into the Desaguadero River, causing

water contamination and thus causing heavy metal contamination in the area.

It is therefore that this research will be conducted based on ecotoxicological studies with the

bioindicator onion (Allium cepa) to determine different levels of contamination that have water

bodies of the Desaguadero River Kori Chaca sector so that for the evaluation of water quality will

be used the protocol of Gabriela Castillo (2004) in which will be followed based on the protocol

of the test to define the toxic substances in the water and where it is required to make use of the

bioindicator onion (Allium cepa) in which based on the growth - root development that is

required to make use of the bioindicator onion (Allium cepa). The protocol of this test will be

used to define the toxic substances in the water and where it is necessary to make use of the

bioindicator onion (Allium cepa) where based on the growth - root development that will show in

different concentrations of the dilutions leached from the Desaguadero river in the Kori Chaca

sector, we will be able to establish the existing levels of contamination.

Keywords: ecotoxicologicy, dilutions, leachates, bioindicator, protocol.


4

1. INTRODUCCIÓN

(Estela I Planes, Julio Silvio Fuchs 2015) la ecotoxicología es la disciplina

científica que estudia el efecto de las sustancias y compuestos químicos sobre los

ecosistemas. Una característica de esta diciplina es que los conocimientos científicos y las

tecnologías que desarrolla se utiliza para resolver problemas ambientales concretos.

(Bethy Mamani & Ivan Biamont & Brígida Calsin, 2019) Las actividades

antropogénicas extractivas no reguladas vierten sus desechos a cuerpos de agua sin

cumplir estándares y estos compuestos metálicos presentan un potencial toxicológico

cuando sedimentan.

En consideración de que la ciudad de Oruro se dedicó a la minería (1785), la

contaminación de aguas, es uno de los más peligrosos puesto que los metales pesados

están considerados como los contaminantes más peligrosos que se encuentran en los

ecosistemas debido a sus niveles de persistencia y toxicidad

En vista de los efectos del medio ambiente y cultivos, que están siendo muy

visibles producto de la contaminación, se procedió a realizar una investigación

ecotoxicología de agua contaminada con la cebolla (Alliun Cepa) para poder conocer el

grado de contaminación que causa el lavado de metales pesados en el Río Desaguadero

Sector Kori Chaca

(Bittermann & Haberl, 1998). La sostenibilidad de cualquier sistema,

especialmente de los ecosistemas, requiere en su operación de indicadores que puedan

servir como herramientas de información para la evaluación de las consecuencias

ambientales derivadas de las actividades sociales y económicas.

2. ANTECEDENTES DE INVESTIGACIÓN
5

La mina Kori chaca (Puente de oro) localizada en la zona nor-oeste de la ciudad de

Oruro, la cual se trata de la minería de cielo abierto encargada de la empresa privada Inti

Raymi (EMIRSA). En el año 2004 comenzó con el proyecto de explotación de la minade

oro, que a diario se excavo un promedio de 20.000 toneladas de material, luego se

pulverizaron y se acumulaban en plataformas de lixiviación, hasta el día de hoy son

rociadas con agua con cianuro para poder extraer las presentes partículas de oro. Diario se

usa una cantidad de 60 a 70 toneladas de cianuro, a esto también tiene un uso excesivo de

agua, la mina usa asta 6240m3 al día de 25.000 m3 de agua potable al año

Tras 15 año de funcionamiento la mina Kori Chaca, tiene varias consecuencias

para sus alrededores, el trasporte pesado de cianuro es muy arriesgado y altamente tóxico

y el desecho de este ha ocasionado una severa contaminación en los cuerpos hídricos y

sedimentos afectando al desarrollo normal del ecosistema y pobladores del lugar.

La presente evaluación ecotoxicológica, trata de validar si realmente se generan

efectos ecotoxicológicos por la actividad minera de Kori Chaca, empleando el protocolo

de Castillo (2004) que se refiere a ensayos ecotoxicológicos por medio de bioensayos

estandarizados de toxicidad aguda, utilizando bulbos de cebolla (Allium cepa), donde se

ira evaluando el crecimiento de las raíces de acuerdo al nivel de contaminación lixiviada

3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La mina de kori Chaca cerca de la ciudad de Oruro, causa contaminación en aguas

residuales que la empresa minera vierte al rio desaguadero a al altura Kori Chaca y que

afecta a la población local y la actividad agropecuaria de los alrededores

3.1. JUSTIFICACIÓN
6

La presente investigación que se realizará se justifica a causa de la contaminación

causada por la explotación minera - aurífera, donde esta tiene como consecuencia efectos

dañinos en todo ecosistema del lugar, en consecuencia, es necesario realizar estudios

ecotoxicológicos donde se podrán determinar cuáles serán los niveles de contaminación

que existen en los restos de materiales lixiviados del rio Desaguadero sector de la mina de

Kori Chaca y su efecto dañino en las aguas del rio Desaguadero.

3.2. PREGUNTAS DE INVESTIGACIÓN

3.2.1. Pregunta Explicativa

¿ Qué resultados ecotoxicológicos se presentarán en el desarrollo de la

cebolla (Allium cepa) cuando es expuesto a cuerpos hídricos

contaminados del rio Desaguadero sector Kori Chaca?

3.2.2. Pregunta Descriptiva

¿ Cómo se pueden especificar las características que presentarán los

restos materiales de los lixiviados contaminados del rio Desaguadero

sector Kori Chaca?

3.2.3. Pregunta Correlacional

¿ Habrá una diferencia importante en el crecimiento - desarrollo

radicular al emplear diferentes diluciones de los restos de materiales

lixiviados en la cebolla (Allium cepa)?

4. OBJETIVOS

4.1. OBJETIVO GENERAL


7

 Evaluar mediante ecotoxicología el desarrollo de la cebolla (Allium cepa) al

estar expuesto a cuerpos hídricos contaminados del rio Desaguadero sector

Kori Chaca.

4.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS

 Describir las características que tienen los restos materiales de los lixiviados

contaminados del rio Desaguadero sector Kori Chaca.

 Determinar las diferencias de crecimiento – desarrollo radicular al emplear

distintas diluciones de los restos de materiales lixiviados en lacebolla (Allium

cepa)

5. HIPÓTESIS

5.1. HIPÓTESIS DE INVESTIGACIÓN

Las diferentes diluciones de los restos materiales de los lixiviados son capaces de

producir efectos nocivos en el crecimiento – desarrollo radicular de la cebolla

(Allium cepa) a causa de la contaminación de los cuerpos hídricos por la explotación

minera – aurífera del lugar.

5.2. HIPÓTESIS ESTADÍSTICA

Factor 𝛼𝑖

Ho. 𝜇lrt1 = 𝜇lrt2 = 𝜇lrt3 = 𝜇lrt4 = 𝜇lrt5

Hi. 𝜇lrt1 ≠ 𝜇lrt2 ≠ 𝜇lrt3 ≠ 𝜇lrt4 ≠ 𝜇lrt5

Factor 𝛽𝑗

Ho = 3ij ulrti = ulrtj

Hi = 3ij ulrti ≠ ulrtj


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Interacción 𝛼 y 𝛽 ij

Ho. (𝛼 ∗ 𝛽)𝑖𝑗 = 0

Hi. (𝛼 ∗ 𝛽)𝑖𝑗 ≠ 0

6. MARCO TEÓRICO

6.1. MARCO CONCEPTUAL

Para resolver problemas ambientales concretos Ecotoxicología: es la disciplina

científica que estudia el efecto de las sustancias toxicas y compuestos químicos sobre

los ecosistemas bióticos incluyendo a los humanos . Una característica de esta

disciplina es que los conocimientos científicos y las tecnologías que desarrolla se

utilizan ( Julio Silvio 2015)

Contaminación: Uno de los problemas más significativos con respecto al control

ambiental es la contaminación ambiental que nos indica la presencia en el ambiente

de cualquier agente (físico, químico o biológico) o bien de una combinación de varios

agentes en lugares, formas y concentraciones tales que sean o puedan ser nocivos

para la salud, la seguridad o para el bienestar de la población, (Alva 2008)

Ecotoxicología: La Ecotoxicología es una rama de la toxicología y se enfoca en los

efectos tóxicos de los contaminantes sobre el componente biótico del ecosistema,

incluyendo a los seres humanos. (Carriquiriborde, 2021)

Ecosistema: Es la comunidad en la relación con el ambiente inanimado que actúan

como un conjunto. El componente biótico se ha añadido el componente abiótico del

ambiente externo, lo cual produce un sistema relativamente autoestable (Luvy

Villalobos 2006)
9

Contaminante: el cambio indeseable en las características del aire, el agua, el suelo,

que afecta gravemente al ambiente. Los contaminantes pueden entrar al ambiente de

modo natural, o por actividades humanas. Y parte de los contaminantes permanecen

en las áreas en que se producen, y las demás son llevados por los vientos o agua

corriente. (Villalobos, 2006)

Contaminantes lixiviados: La materia orgánica presente en los residuos sólidos

urbanos se degrada formando un líquido contaminante, denominado lixiviado.

Además, este líquido arrastra todo tipo de sustancias nocivas incluso cancerígenas . Si

no se controlan adecuadamente, los lixiviados pueden contaminar los suelos y las

aguas superficiales y subterráneas. La humedad de los residuos y la lluvia son los dos

factores principales que aceleran la generación de lixiviados. (Fernández, 2006)

Contaminación de minas: La contaminación ambiental ocasionada por la minería

trae consecuencias nocivas e irreparables al medioambiente; la minería ha estado

presente ya desde tiempo atrás provocando un descontrol realizado por las actividades

mineras. . La contaminación minera no sólo afecta el agua, sino todos los sistemas

ambientales: suelo, aire, flora y fauna. (“La contaminación ambiental ocasionada por

la minería en la provincia de El Oro,” 2020)

Bioensayos de toxicidad: Para evaluar los efectos perjudiciales potenciales de un

químico (u otro agente) sobre la biota, es necesario establecer una relación

cuantitativa reproducible entre la exposición a las sustancias químicas.

La mayoría de los datos toxicológicos ambientales actuales provienen de ensayos de

laboratorio controlados y generalmente involucran productos químicos individuales y

poblaciones muy pequeñas de organismos de prueba. (leticia paluso 2021)


10

Bioindicador: Los bioindicadores miden los efectos de la contaminación en el

ambiente y en los propios seres vivos, por tanto, ofrecen información sobre los

riesgos para otros organismos, el ecosistema y también para el ser humano (Anze et

al., 2007)

Se numeró los principales requisitos para el uso de indicadores biológicos: deben ser

sensibles y rápidos ante la presencia de distintos contaminantes con una amplia

respuesta frente a un variado espectro de clases y grados de estrés. Deben ser ubicuos,

abundantes y de fácil muestreo, con un tamaño de muestra adecuado para su

determinación en laboratorio, relativamente sedentarios para reflejar las condiciones

locales. Además, los estadios del ciclo vital deben ser suficientemente largos para

permitir determinar un registro de la calidad del ambiente (Metcalfe, 1989)

Allium cepa como bioindicador: El test de Allium cepa es de utilidad para conducir

investigaciones sobre aguas superficiales o subterráneas, efluentes cloacales u otras.

El Programa Internacional de Bioensayos Vegetales, La Real Academia Sueca de las

Ciencias, entre otros, alientan su uso como bioindicador para ensayos de biotoxicidad

y genotoxicidad. (Firbas, 2011).

La importancia del Allium cepa test radica en que es un excelente modelo de ensayo

in vivo donde es posible evaluar el daño producido por una sustancia o solución de

interés. Es ventajoso el uso del Allium cepa test por emplearse como indicador, que

permite configurar un modelo excelente para realizar ensayos sobre sustancias conta

6.2. MARCO NORMATIVO – LEGAL

Ley N° 1333, que se promulgo el 27 de abril de 1992, Ley del Medio Ambiente.
11

En el artículo 19, nos menciona que debemos preservar, conservar, mejor y restaura

el medo ambiente, a fin de elevar la calidad de vida.

ARTICULO 24º.- Para los efectos de la presente Ley, se entiende por Evaluación de

Impacto Ambiental (EIA) al conjunto de procedimientos administrativos, estudios y

sistemas técnicos que permiten estimar los efectos que la ejecución de una

determinada obra, actividad o proyecto puedan causar sobre el medio ambiente

ARTICULO 31º.- Queda prohibida la introducción, depósito y tránsito por territorio

nacional de desechos tóxicos, peligrosos, radioactivos u otros de origen interno y/o

externo que por sus características constituyan un peligro para la salud de la

población y el medio ambiente. El tráfico ilícito de desechos peligrosos será

sancionado e conformidad a las penalidades establecidas por Ley

ARTICULO 39º.- El Estado normará y controlará el vertido de cualquier sustancia o

residuo líquido, sólido y gaseoso que cause o pueda causar la contaminación de las

aguas o la degradación de su entorno. Los organismos correspondientes

reglamentarán el aprovechamiento integral, uso racional, protección y conservación

de las aguas.

En el artículo 71 trata sobre los recursos minerales que manifiesta lo siguiente: “Las

operaciones extra mineras, durante y una vez concluidas su actividad deberán

contemplar la recuperación de las áreas aprovechadas con el fin de reducir y controlar

la erosión, estabilizar los terrenos y proteger las aguas corrientes y termales”.

El artículo 70 nos indica lo siguiente: “la explotación de los recursos minerales debe

desarrollarse considerando el aprovechamiento integral de las materias primas, el

tratamiento de materiales de desecho, la disposición segura de colas, relaves y


12

desmontes, el uso eficiente de energía y el aprovechamiento nacional de los

yacimientos”.

En el artículo 71 trata sobre los recursos minerales que manifiesta lo siguiente: “Las

operaciones extra mineras, durante y una vez concluidas su actividad deberán

contemplar la recuperación de las áreas aprovechadas con el fin de reducir y controlar

la erosión, estabilizar los terrenos y proteger las aguas corrientes y termales”.

6.3. MARCO REFERENCIAL (ESTADO DEL ARTE)

Evaluación ecotoxicológica de los sedimentos del humedal urbano

estuario los molles: base para un programa de monitoreo: Los Molles, ecosistema

que se encuentra fuertemente presionado por la actividad humana (debido a

expansión urbana) e interviniendo sus aguas (al recibir descargas de aguas residuales

de una planta de tratamiento y aguas servidas), lo que altera su calidad y la de sus

sedimentos. Para evaluar la calidad de estos últimos, se realizaron pruebas de

toxicidad estandarizadas al exponer los organismos, Allium cepa y Artemia salina L

la recolección de muestras se realizó en el mes de octubre de 2022. Los resultados de

la experiencia previa en laboratorio presentaron datos poco concluyentes para Allium

cepa debido a la baja concentración del tóxico en el medio de exposición (Ayara

alfaro2022)

Ensayo de toxicidad aguda con Allium cepa L mediante la

evaluación de la inhibición del crecimiento promedio de raíces de cebolla:

Cuando se trabaja con bulbos de diámetro pequeño, las pruebas se realizan en tubos

de ensayo de 10 cm de longitud x 1,5 cm de ancho; en el caso de bulbos de mayor

diámetro pueden utilizarse tubos o recipientes de mayor volumen, dependiendo del


13

tamaño de los mismos. Es importante destacar que la profundidad de los recipientes

debe ser tal que, al término de la prueba, la elongación máxima no alcance el fondo

del recipiente (Fiskesjö, 1985). En la prueba se utilizan cinco concentraciones de la

muestra, un control negativo, y uno o dos controles positivos (ver capítulo 6

“Aseguramiento y control de calidad de bioensayos”), cada una con doce réplicas. El

ensayo se inicia con el llenado de los tubos con cada una de las diluciones y

controles; este llenado deber hacerse hasta el borde del tubo. A continuación, se

colocan los bulbos limpios sobre la boca del tubo, cuidando que la zona radicular

quede inmersa en el líquido, Los tubos se colocan en una gradilla, la cual se localiza

sobre una mesa que no presente vibraciones y se mantienen a temperatura ambiente

(20 °C) por un periodo de 72 horas. Debe evitarse la iluminación directa. Dos veces

al día durante el periodo de prueba se debe restablecer el volumen perdido por

evaporación o absorción. Para restablecer este volumen se utiliza la muestra o

dilución correspondiente. Se recomienda inclinar el bulbo sin sacar las raíces del

tubo, adicionando cuidadosamente el volumen con ayuda de una pipeta (Castillo G.

2004)

Estudio De Ecotoxicidad Y Genotoxicidad En El Área Metropolitana De

La Paz: En este estudio se realizó estudios de ecotoxicidad y genotoxicidad en el

área metropolitana de La Paz. Cada muestra fue examinada con tres bioindicadores:

Allium cepa, Vicia faba y Drosophila melanogaster. Se determinó grados de

ecotoxicidad y concentraciones subtóxicas, para con estas últimas establecer el

potencial genotóxico de las muestras. Como control negativo se empleó agua de grifo

y como control positivo H2O2 al 0.02% y 0.5 M. Se obtuvo que estos ríos presentan

diferentes grados de toxicidad. (Elias C. Paz O. 2017)


14

Optimización del ensayo de toxicidad utilizando el bioindicador allium

cepa como organismos de prueba: A lo largo de los años se han realizado cambios

técnicos en la prueba de Allium cepa para permitir una evaluación más completa de

sustancias químicas, como mezclas complejas, que constituyen la mayoría de las

muestras ambientales, y sustancias puras. Así, el seguimiento ambiental se convierte

en una herramienta fundamental a través de la cual evaluar el estado de conservación

y/o grado de degradación de los ecosistemas, otorgar subsidios para proponer

estrategias de conservación de áreas naturales y planes de recuperación de

ecosistemas degradados. ( Sandra regina 2012)

Cuando un bulbo de cebolla (Allium cepa) se rehidrata, se produce una

estimulación del crecimiento de las células, lo cual permite la elongación de las raíces

de la planta. Sin embargo, cuando la hidratación se lleva a cabo en presencia de

sustancias tóxicas, la división celular de los meristemas radiculares puede inhibirse,

ya sea retardando el proceso de mitosis o destruyendo las células. Este tipo de

alteraciones generalmente impide el crecimiento normal de la raíz y, por tanto, su

elongación. El efecto puede determinarse en forma indirecta, mediante la

comparación de la elongación de las raíces de cebollas expuestas al tóxico con las de

cebollas no expuestas, luego de un periodo de 72 hr de prueba. La cuantificación del

efecto se realiza estableciendo el porcentaje de inhibición del crecimiento de las

raíces respecto a la longitud promedio de las raíces del control. (Fiskesjö, 1985, 1993,

1997)

Estudio Diagnóstico de la Ecotoxicidad de Afluentes del Río

Guadalquivir, en el área comprendida entre Las Tipas y El Angosto de San Luis,

Tarija: El presente trabajo evaluó el nivel de Ecotoxicidad presente en los afluentes


15

del río Guadalquivir, a través del empleo de semillas de Lactuca sativa y bulbos de

Allium cepa como bioindicadores. De este diagnóstico y del cálculo del nivel de

toxicidad se puede afirmar que existe fitotoxicidad en algunos de los cuerpos de agua

estudiados. (Angulo, 2015)

7. METODOLOGÍA

7.1. UBICACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN

Figura 1

La recolección de muestra se estará ubicada en la sector Kori Chaca, departamento

de Oruro con las coordenadas de Latitud. -17.9613° o 17° 57' 41", Longitud.

67.17068° o 67° 10' 14" a una altitud 3,710 m s n. m. a 5 kilómetros de la ciudad de

Oruro

Nota 1. Ubicación de la zona noreste de la ciudad de Oruro, el muestreo, sector

Kori Chaca. Tomado por la aplicación Google Earth 2023. Moya. N. 02/09/23.
16

7.2. MATERIALES Y EQUIPOS

7.2.1. Material biológico

 Bulbos de cebolla (Allium cepa)

7.2.2. Material de gabinete

 Programa estadístico

 Computadora

 Bolígrafo o lápiz

 Cuaderno de apuntes

 Planilla de apuntes

 Cámara

7.2.3. Material de laboratorio

 Tubos de ensayo de vidrio dependiendo el tipo de bulbos a utilizar

 Gradillas o soporte de tubos de ensayo

 Regla

 Guantes de látex

 Guardapolvo

 Papel filtro

 Embudo

 Bisturí

 Vaso de precipitación

 Agua destilada
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7.2.4. Material de campo

 Balde de plástico mediano

 Guantes de látex

 Pala pequeña

 Sombrero

7.3. PROCEDIMIENTO METODOLÓGICO

7.3.1. Protocolo base de la investigación

La presente investigación se realizará de acuerdo al protocolo de Gabriela

Castillo (2004). Cuando un bulbo de cebolla (Allium cepa) se rehidrata, se

produce una estimulación del crecimiento de las células, lo cual permite la

elongación de las raíces de la planta. Sin embargo, cuando la hidratación se

lleva a cabo en presencia de sustancias tóxicas, la división celular de los

meristemas radiculares puede inhibirse, ya sea retardando el proceso de

mitosis o destruyendo las células. Este tipo de alteraciones generalmente

impide el crecimiento normal de la raíz y, por tanto, su elongación. (Fiskesjö,

1985, 1993, 1997)

El efecto puede determinarse en forma indirecta, mediante la comparación de

la elongación de las raíces de cebollas expuestas al tóxico con las de cebollas

no expuestas, luego de un periodo de 72 hr de prueba. La cuantificación del

efecto se realiza estableciendo el porcentaje de inhibición del crecimiento de

las raíces respecto a la longitud promedio de las raíces del control.

7.3.2. Flujograma y descripción procedimental

ESTUDIO ECOTOXICOLOGICO CON EL


BIOIDICADOR CEBOLLA (ALLIUN CEPA)
18

Inicio del proyecto

Trabajo de campo Trabajo de laboratorio Trabajo en gabinete

Protocolo Castillo (2004) Protocolo Castillo (2004) Análisis estadístico

Punto de muestreo Limpieza y pelado


de bulbos
Obtención de la muestra

Ubicación de bulbos en
los tubos

Colocación de tubos en
gradillas

Agregado de soluciones a
los tubos

Medición de longitud de
raíces

Nota del autor: Flujograma establecido de acuerdo al protocolo de Gabriela castillo (2004)

7.3.3. Análisis de laboratorio

Para la elaboración del laboratorio, se debe seleccionar bulbos de

cebolla(Alliun Cepa ) de unos 1,5 cm de diámetro, para el montaje de la


19

prueba, los bulbos deben limpiarse eliminarse la epidermis seca y removiendo,

con un bisturí o instrumento punzante, los restos de tejidos y raíces y áreas

radiculares(figura2) se llena de los tubos con cada una de las diluciones y

controles; este llenado deber hacerse hasta el borde del tubo. A continuación,

se colocan los bulbos limpios sobre la boca del tubo, cuidando que la zona

radicular quede inmersa en el líquido: En la prueba se utilizan cinco

concentraciones de la muestra.

7.4. DISEÑO DE INVESTIGACIÓN

7.4.1. Factores y variables de estudio

Factores

 Diluciones lixiviadas

 Tiempo 72 hrs.

Variable

 Longitud radicular, altura de la planta (cm y/o mm)

Niveles

 Los niveles de concentración serán al 100%, 50%, 25%, 12%, 6% y el

testigo H20.

7.4.2. Exploración, descripción, evaluación e interpretación de datos (pruebas

estadísticas a utilizar)

Prueba estadística de ANOVA

En esta investigación la prueba estadística más recomendada a llevarse a cabo

será el de ANOVA de dos vías, ya que presentamos 2 factores y 1 variable.


20

El análisis de varianza de dos vías, también conocido como plan factorial

con dos factores, sirve para estudiar la relación entre una variable

dependiente cuantitativa y dos variables independientes cualitativas

(factores) cada uno con varios niveles. El ANOVA de dos vías permite

estudiar cómo influyen por si solos cada uno de los factores sobre la variable

dependiente (modelo aditivo) así como la influencia de las combinaciones

que se pueden dar entre ellas (modelo con interacción).

El efecto de la interacción doble consiste en estudiar si la influencia de uno

de los factores varía dependiendo de los niveles del otro factor.

Yijk = 𝜇 + 𝛼𝑖 + 𝛽𝑗 + (𝛼 ∗ 𝛽)𝑖𝑗 + 𝐸𝑖𝑗k

Yijk: observación cualquiera (variable de estudio: longitud radicular, cm y/o mm).

𝜇: Media general de la longitud radicular.

𝛼𝑖: i-esimo factor alfa de diluciones de lixiviados del río Desaguadero.

𝛽𝑗: j-esimo factor beta el tiempo de crecimiento en la raíz.

(𝛼 ∗ 𝛽)𝑖𝑗: Efecto de la interacción de i-esimo factor alfa y el j-esimo factor beta

𝐸𝑖𝑗k: Error experimental

Prueba de Tukey

La prueba de Tukey, es una prueba estadística utilizada general y

conjuntamente con ANOVA. La prueba Tukey se usa en experimentos que

implican un número elevado de comparaciones. Es de cálculo sencillo


21

puesto que se define un solo comparador, resultante del producto del error

estándar de la media por el valor tabular en la tabla de Tukey usando como

numerador el número de tratamientos y como denominador los grados de

libertad del error.


22

8. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

Tabla 1. Cronograma de actividades.

Fecha

Actividad Inicio Final

Inicio del perfil del proyecto 22/08/23 05/09/23

Primera defensa del perfil 07/09/23 07/09/23

Entrega del perfil de proyecto corregidos 12/09/23

Segunda defensa del perfil de proyecto 14/09/23 14/09/23

Ingreso a laboratorio para capacitación de


15/09/23 23/09/23
equipos

Ingreso a campo 16/09/23 23/09/23

Redacción y presentación del proyecto final 03/10/23 03/10/23

Entrega del artículo académico 10/10/23

Nota: Esta tabla muestra las actividades a realizarse en este trabajo de investigación.

9. PRESUPUESTO ESTIMADO

10. REFERENCIAS

ACTIVADOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES HOSPITALARIAS.

https://sired.udenar.edu.co/7928/1/91964.pdf

Alva, L. (2008). Evaluación Preliminar de la toxicidad. Ciencia Unisalle, 6–223.

‌Andres, J., Chaves, B., David, J., Jojoa, P., De Nariño, U., De, F., & Agrícolas, C.

(2016). EVALUACIÓN ECOTÓXICA DE UN REACTOR DE LODOS

Angulo Reyes, R. (2015). Estudio Diagnóstico de la Ecotoxicidad de Afluentes del Río

Guadalquivir, en el área comprendida entre Las Tipas y El Angosto de San Luis,


23

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11. ANEXOS
FIGURA 1

26

Nota 1. Ubicación de la zona noreste de la ciudad de Oruro, el muestreo,

sector Kori Chaca. Tomado por la aplicación Google Earth 2023.

1. FIGURA 2

Procedimiento del protocolo de Castillo (2004)

Nota 2. Gráfico de los pasos a seguir en la prueba con Allium cepa. 1. Limpieza y

pelado de bulbos, 2. Ubicación de bulbos en tubos para exposición a las soluciones de

ensayo, 3. Colocación de tubos en soporte, 4. Agregado de soluciones a tubos durante

el ensayo, 5. Medición de longitud de raíces al finalizar el tiempo de exposición de

los bulbos.
27

Nombre del laboratorio: _____________________________ Fecha de inicio: __________________

Nombre del técnico: _________________________________ Fecha de terminación: ____________

Informar la longitud en cm

CONCENTRACIÓ %
RÉPLICA RÉPLICA RÉPLICA RÉPLICA RÉPLICA
MUESTRA D.S. PROMEDIO
N Núm. 1 Núm. 2 Núm. 3 Núm. 4 Núm.5 INHIBICIÓN

CONTROL POSITIVO

CONTROL NEGATIVO

4
28

Nota 3. Planilla sugerida para el control del crecimiento radicular de la cebolla

(Allium cepa), según protocolo Castillo (2004).

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