REPLICACIÓN
REPLICACIÓN
REPLICACIÓN
● Capacidad de formar copias de sí mismo.
● La replicación se lleva a cabo en la fase de síntesis (S)
● Se determina que la información genética se transfiere de
una célula a otra.
● La representación estructural del ADN permite comprender
este proceso.
● La síntesis de las cadenas de ADN durante la replicación se
lleva a cabo en dirección 5’ → 3’ tanto en eucariotas como
procariotas.
● Tiene 3 características que la define: es semiconservadora,
bidireccional, antiparalela
SEMICONSERVADORA
En cada replicación se conserva una de las cadenas originales y otra es
sintetizada de novo. Anteriormente existían tres teorías que trataban de
explicar este proceso.
● Semiconservadora
En cada una de las moléculas hijas se conserva una de las
cadenas originales.
● Conservadora
Se sintetiza una molécula totalmente nueva(copia de la original),
por lo que tras la duplicación quedan, por un lado, las dos hebras
antiguas juntas y, por otro, las dos hebras nuevas.
● Dispersora o dispersante.
Las cadenas hijas constan de fragmentos de la cadena antigua y
fragmentos de la nueva.
EXPERIMENTO
Realizado por Matthew Meselson
y Franklin Stahl en 1957
BIDIRECCIONAL
Secuencias
● La replicación del ADN en eucariotas es bidireccional, ya
específicas ricas A y
que a partir del sitio de origen (ORI), se sintetizan las dos T, que controlan la
cadenas en ambos sentidos. replicación de una
● En organismos eucariotes, debido al gran tamaño del ADN, unidad de ADN
existen múltiples orígenes de replicación (sitios ORI), por lo llamada replicón.
que a la replicación se la considera multifocal.
● La presencia de bases A y T facilita la separación de las
hebras y la formación de la burbuja de replicación.
● En los cromosomas de bacterias y virus existe un origen
único de replicación. Permite la replicación de todo el ADN
circular, por lo que se afirma que la replicación es
monofocal.
DISCONTINUA O
ANTIPARALELA
● La replicación siempre se produce en sentido 5’ → 3’, y el extremo
3’-OH libre es el punto a partir del cual se produce la elongación del
ADN.
● Reiji Okazaki y Tsuneko Okazaki en 1960, descubrieron que una de
las nuevas cadenas del ADN se sintetiza en forma de fragmentos
cortos(fragmentos de Okazaki).
● Su longitud suele variar entre 1000 y 2000 nucleótidos en las
bacterias y entre 100 y 400 nucleótidos en eucariotas.
● La cadena que se sintetiza en el sentido que avanza la horquilla de
replicación se denomina hebra adelantada (leading strand).
Mientras que la que se sintetiza en sentido contrario al avance de la
horquilla se denomina hebra retrasada (lagging strand). Esperar a que la
horquilla avance.
REPLICACIÓN BIDIRECCIONAL Y DISCONTINUA
PROTEÍNAS QUE PARTICIPAN EN LA REPLICACIÓN
La maquinaria encargada de la replicación del ADN es muy compleja y está formada por un grupo de
proteínas que actúan en conjunto con una secuencia de ADN específica ya establecida. A
continuación se describen las enzimas que intervienen en el proceso de replicación y enseguida se
desarrollará el proceso mencionando las enzimas involucradas.
Helicasa: enzima encargada de separar las dos hebras del ADN mediante la rotura de los puentes de
hidrógeno que se establecen entre las bases nitrogenadas de las dos cadenas del ADN. Ocasiona
superenrollamientos positivos a los lados de la burbuja de replicación.
Proteínas de unión a cadena sencilla (SSB, singlestrand ADN binding proteins en procariotes y
RPA en eucariotes): evitan la formación de los puentes de hidrógeno entre las dos cadenas
separadas por la helicasa y permiten que se copien.
Topoisomerasas: son enzimas isomerasas que actúan sobre la topología del ADN, pueden cortar o
formar enlaces fosfodiéster ya sea una de las hebras (topoisomerasa I) o en las dos (topoisomerasa II)
que forman el ADN.
Primasa: es una enzima que sintetiza pequeños fragmentos de ARN de entre 8 y 10 nucleótidos de
longitud, conocidos como cebadores o primers, complementarios a un fragmento del ADN. La unión de
los cebadores al ADN proporciona un extremo 3´ necesario para que la ADN polimerasa lleve a cabo
su acción.
Rnasa H1: enzima encargada de retirar los cebadores de ARN durante la síntesis de los fragmentos
de Okazaki y en los procesos de reparación del ADN.
Ligasa: enzima que cataliza la formación del enlace fosfodiéster entre nucleótidos contiguos.
Telomerasa: es una ribonucleoproteína con actividad de ADN polimerasa dirigida por ARN
(transcriptasa inversa) capaz de sintetizar una secuencia determinada de ADN que permite el
alargamiento de los telómeros (extremos de los cromosomas eucariotas).
Antígeno nuclear de células en proliferación (PCNA): es un homotrímero que forma una estructura
de toroide, la cual es abierta transitoriamente por acción del factor de replicación C (RFC, replication
factor C), lo que permite su recircularización alrededor de la doble hélice del ADN a la altura del
extremo del primer en la cadena líder. La estructura toroide del PCNA alrededor de la cadena de ADN
permite su libre desplazamiento por la misma. PCNA interactúa con la ADN polimerasa, sirviendo
como una pinza que sostiene a la polimerasa en el extremo del primer y le permite sintetizar la
cadena de ADN.
ADN polimerasa: son las principales enzimas en este proceso. Son capaces de sintetizar nuevas
cadenas de ADN a partir de una hebra patrón o molde y las unidades estructurales correspondientes
(desoxirribonucleótidos).
Tipos de ADN polimerasa
● La polimerasa α (ADNpol α), también llamada primasa, inicia la síntesis del ADN mediante la
formación de un cebador ARN.
● Las polimerasas δ y ε (ADNpol δ y ADNpol ε) son responsables de la mayor parte de la
elongación de ambas hebras del ADN.
● La polimerasa β (ADNpol β) no interviene en la replicación y está involucrada en la reparación
de errores o daños en el ADN.
● La polimerasa γ (ADN pol γ) lleva a cabo la replicación del ADN mitocondrial.
● Existen otras polimerasas, como las polimerasas ζ (theta), η (eta) y ι (iota), cuya función no es
muy conocida, pero se cree que están involucradas sobre todo en mecanismos de reparación y
recombinación.
FASES DE LA REPLICACIÓN
La replicación se ha dividido en tres fases: inicio, elongación y
terminación.
INICIO
● Las zonas en el ADN donde se producen las burbujas de replicación
no son aleatorias, se sabe que existen secuencias de
aproximadamente 300 pb que indican los lugares precisos donde ha
de comenzar la replicación.
● Estos sitios son reconocidos por proteínas de reconocimiento del
sitio de origen.
● En eucariotes, se llaman secuencias de replicación autónoma (SRA).
● Cada burbuja de replicación posee dos horquillas de replicación.
ELONGACIÓN
● Es el proceso por el cual el ADN polimerasa
añade nucleótidos uno por uno
complementarios a la cadena molde, a
medida que avanza la horquilla, ayudada por
PCNA.
● Una vez presente la maquinaria de inicio de
la replicación, la horquilla avanza,
aumentando la tensión por delante de la
cadena.
● La síntesis es diferente en cada una de las
hebras de la horquilla de replicación; en la
cadena líder, la síntesis se realizará en forma
continua, y por el contrario, en la cadena
retrasada, la síntesis se realizará en forma
discontinua.
● El proceso de elongación es similar en
eucariotes que en procariotes
TERMINACIÓN
● El final de la replicación se produce cuando el ADN polimerasa llega
al extremo del fragmento de ADN.
● Uno de los pasos cruciales en el proceso de terminación es
completar la síntesis de la cadena retardada y unir los fragmentos de
Okazaki(maduración)
● Para que esta maduración suceda, existe un sistema de nucleasas
(FEN1/RTH1 + RNasa H1) encargado de eliminar el receptor de
ARN.
● Consiste en la replicación de los telómeros de las cadenas de ADN.
● En la replicación de los telómeros actúan las telomerasas.
● El acortamiento de los telómeros se ha vinculado con el
envejecimiento.
MECANISMO DE ACCIÓN DE LA
TELOMERASA
1) La telomerasa se une a su respectiva secuencia complementaria y
alarga el extremo saliente 3’.
2) Con este apareamiento empieza la primera elongación.
3) Una vez que se están añadiendo los dNTPs, la telomerasa se
desliza sobre el extremo 3’ previamente elongado.
4) La telomerasa elonga nuevamente el extremo 3’ saliente.
5) Se vuelven a repetir los pasos de translocación y elongación.
6) En la segunda fase la ADN polimerasa α rellena la otra hebra, y la
ligasa sella la mella que queda en la elongación
REPLICACIÓN MITOCONDRIAL
La replicación del ADN mitocondrial en mamíferos se ajusta al modelo del lazo de
desplazamiento o lazo D. Las dos hebras del ADN mitocondrial se pueden
diferenciar según su densidad, y existe una hebra ligera (L) y otra pesada (H).
En primer lugar, se inicia la replicación o síntesis de la nueva hebra L, sin que se
comience la replicación de la nueva hebra H. El origen de replicación de la hebra L
es diferente al de la hebra H, de forma que existen dos orígenes de replicación
diferentes, uno para cada una. Además, una vez iniciada la replicación de la nueva
hebra L, la síntesis es unidireccional y avanza desplazando a la otra hebra.
Cuando se han sintetizado aproximadamente dos tercios de la nueva hebra L,
comienza la síntesis de la nueva hebra H, en una sola dirección, opuesta a la de
síntesis de la hebra ligera L. Por consiguiente, la síntesis de la nueva hebra L
termina antes que la de la nueva hebra H.
