Corynebacterium

Son bacilos Gram positivos inmóviles, aerobios facultativos. Muy ubicuos que colonizan el
ambiente, a animales y al hombre. Estos pueden originar varias enfermedades, como la difteria en
sus formas cutánea y respiratoria, también podemos encontrar algunas cepas de corynebacterium
que son patógeno oportunista del aparato urinario.

1. TAXONOMÍA
Dominio Bacteria

Orden Actinomycetales

Familia Corynebacteriaceae

Género Corynebacterium.

Existen varias especies que se encuentran ampliamente distribuidos en la naturaleza (C.

diphtheriae, C. ulcerans, C. jeikeium, C. amycolatum, C. urealyticum, C. pseudotuberculosis) y que
pueden producir variadas infecciones en humanos y animales.

Corynebacterium difteriae produce la difteria en sus formas cutánea y respiratoria, enfermedad

controlada por vacunación sólo en algunos países y con un aumento de incidencia por la
inmigración y el rechazo a la vacunación.

Corynebacterium urealyticum es un patógeno oportunista del aparato urinario. No es ácido

alcohol resistente y su crecimiento es lento.

Otras especies del género Corynebacterium consideradas colonizantes han surgido como
patógenos oportunistas al aumentar el número y la supervivencia de los pacientes
inmunocomprometidos. Las especies zoonóticas se asocian frecuentemente con heridas, celulitis y
linfadenitis, pero también se han descrito cuadros similares a tosferina (C. ulcerans y C.
pseudotuberculosis). Otras se han aislado de abscesos, sangre, endocarditis y enfermedad
respiratoria (C. pseudodifteriticum y C. striatum) o difteria cutánea (C. ulcerans y C. striatum).
 2. HÁBITAT
Las corinebacterias están ampliamente distribuidas en la naturaleza encontrándose en el suelo, el
agua, productos alimenticios y también forman parte de la flora normal en la mucosa y piel del
hombre y animales. El género incluye más de 68 especies, 53 de las cuales pueden producir
infección oportunista en el hombre o ser transmitidas por contacto con animales (zoonosis). Las
especies: Corynebacterium bovis, C. mutissium, C. xerosis y C. hoffmani habitan en la piel de todos
los seres humanos, especialmente en la zona axilar. Cuando detectan el sudor, se multiplican
rápidamente, dando lugar al característico olor de las axilas.

Muchas de ellas también forman parte de tracto respiratorio, digestivo o genitourinario, algunas
están en nichos específicos (C. amycolatum o C. jeikeium) y las especies lipofílicas tienen
resistencia amplia a distintos antimicrobianos.

3. CARACTERÍSTICAS MORFOLOGICAS Y TINTORIALES:

Esta especie corresponde a bacilos Gram positivos, pleomórficas, inmóviles, no encapsuladas, ni
forman esporas, se encuentran aisladas, en parejas o agrupadas formando una especie de V, de
letras chinas, son aerobios estrictos que colonizan el ambiente, a animales y al hombre.

Su pared celular tiene ácidos micólicos de cadena corta y otros ácidos (palmítico, esteárico y
oleico), que le confieren lipofilia. Las células crecen bien en medios de cultivo generales como agar
sangre, dando lugar a colonias más o menos secas y de tamaño variable.

4. CARACTERÍSTICAS DEL CULTIVO: todos necesitan biotina para su crecimiento y algunas cepas

requieren además tiamina y ácido p-aminobenzoico. Su crecimiento es favorecido por la
adición de sangre y suero
- Medios de cultivos para la siembra de hisopados y homogeneizados de membrana:

* Medio Agar Sangre Cistina Telurito (ASCT).

* Medio Löeffler. Se aconseja para la observación de la morfología bacteriana.

* Agar Sangre.

* Caldo Todd Hewitt con 3 % de sangre.

El tiempo para el transporte no debe exceder las 24 horas

- Siembra de la muestra
 Las muestras clínicas deben ser sembradas sin demora.
 Si el hisopado faríngeo o nasofaríngeo se encuentra deshidratado, colocarlo en un caldo
Todd Hewitt con 3% de sangre estéril.
 Incubar durante 18h y resembrar en un medio ASCT.
 Si el hisopo fue enviado en el medio de transporte de Amies y/o si se dispone del
Homogenizado de membrana, realizar la siembra en los medios ASCT y agar sangre.
 Incubar los cultivos a 37ºC en aerobiosis y microaerofilia (5-10% CO2).
 Examinar las placas de ASCT y AS a las 18h, 24h, 48h y 72h, C. diphtheriae desarrolla
colonias negras en el medio de cultivo ASCT.
 Sembrar caldo nitrato, medio úrea, DNasa, y realizar las pruebas de catalasa y la
pirazinamidasa a partir de las colonias negras con morfología y microscopía compatibles
con C. diphtheriae y sembrar de las mismas colonias agar sangre, para realizar la
identificación

5. CARACTERÍSTICAS DE LAS COLONIAS

Aerobios y anaerobios facultativos

Temperatura de crecimiento: La mayoría de las especies crecen a temperaturas de 25-37°.

pH: 6-8

 Colonias pequeñas
 Grisáceas
 Cremosas, húmedas
 Con hemólisis alfa en caso C. pseudotuberculosis
 Adherencia al agar, esta última característica solo presente en algunas especies-
Corynebacterium diphtheriae

Medios de cultivos.
Agar sangre, Agar Triptitasa de Soya, agar chocolate. Estos medios permiten el crecimiento de la
bacteria y pueden ser utilizados para estudio de laboratorio y para el diagnóstico de infecciones
causadas por la bacteria. Es importante tener en cuenta que la apariencia de las colonias puede
variar en función del medio del cultivo utilizado.
Selectivos diferenciales:
Agar cisteína- telurito

- Medio Agar Sangre Cistina Telurito

Corynebacterium diphtheriae reduce el telurito del medio a telurito metálico, el cual precipita y
produce el desarrollo de colonias negras, gris acero, de 1 a 3 mm de diámetro.

Medio Agar Sangre:

Se diferencian cuatro biotipos: gravis, intermedius, mitis y belfantis

C. diphtheriae biotipo intermedius: son más pequeñas, planas, cremosas, transparentes, no

hemolíticas.

El resto de biotipos son más grandes, blancas y opacas

- Corynebacterium urealyticum.
Medio Agar Sangre:

Crece a 37 ºC en agar sangre de cordero al 5%. A las 24 h de incubación, las colonias son muy
pequeñas, menores de 2 mm de diámetro; a las 48-72 h alcanzan un tamaño entre 2 y 4 mm de
diámetro y sus características macroscópicas son: colonias redondas, lisas y blanquecinas. Crece
bien en agar chocolate, a veces se pueden observar cocobacilos con una morfología más cocoide
que bacilar

Morfología de las colonias

Tamaño: 2-4mm tienen forma de baston o palo, lisas o rugosas, pueden ser de color blancas,
amarillas o grises.

6.- Características Bioquímicas

-Catalasa positiva.

- La mayoría, pero no todas, las especies fermentan los hidratos de carbono y generan moléculas
de ácido láctico.

-Necesitan de cepas lipídicas para desarrollarse.

Esta especie se subdivide en cuatro biotipos en función de la morfología de sus colonias y sus
propiedades bioquímicas: belfanti, gravís, intermedius y mitis. Los biotipos intermedius y belfanti
rara vez se asocian a la difteria.
7.- TOXINAS, ENZIMAS Y FACTORES DE VIRULENCIA

 C. diphteriae es el patógeno más importante para el ser humano, mide de 2 a 6 micras, es
pleomórfico, tiene gránulos metacromáticos y puede o no producir toxina, dependiendo de su
infección por un bacteriófago y de la concentración de hierro en el medio. La toxina diftérica es un
polipéptido que produce la muerte celular por inhibición de la síntesis proteica contiene un gen
tox.

Los efectos sistémicos severos incluyen miocarditis, neuritis y daño renal producido por la
exotoxina de C. diphtheriae. Aunque hay cepas no toxigénicas que producen lesiones similares
pero más benignas.

La toxina es codificada por un bacteriófago que posee el gen fox. El gen fox reside en un profago
lisogénico en el cromosoma bacteriano.

Sólo las cepas que tienen el profago con el gen fox son capaces de producir toxina diftérica.

No todas las cepas de C. diphtheriae son toxigénicas. C. ulcerans y C. pseudotuberculosis también

pueden portar el profago y producir toxina diftérica.
La secuenciación del genoma completo ha mostrado la existencia de neuraminidasa y fosfolipasa,
ureasa y otros factores de virulencia.

8.- Estructura antigénica

Estás bacterias tienen una pared gruesa compuesta principalmente de peptidoglicano y ácido
teicoico. La pared celular también tiene otros compuestos, lipoproteínas, proteínas de unión de la
pared celular y polisacáridos.

-El antígeno más importante es el antígeno D, que se encuentra en la superficie de la bacteria y es

responsable de la respuesta inmune de huésped. Este antígeno está formado por una toxina
llamada diphteria toxin (dt) y un polisacárido llamado glucosamina.

-El antígeno K se encuentra en la cápsula bacteriana y está compuesto principalmente por

polisacáridos. Otros antígenos importantes incluyen A, B, C que están presentes en diferentes
especies de Corynebacterium.

-El antígeno O es una parte de lipopolisacarido presente en superficie de algunas bacterias como la
Corynebacteria difteria, participa en la respuesta inmune a la infección. Contiene
arabinogalactanos.

-El factor cordón es una estructura presente en C. diphteria que contribuye a la patogenecidad y
puede actuar como antígeno reconocido por sistema inmune del huésped destacando una
respuesta inmune específica.

9.- Determinantes de patogenecidad

La estructura antigenica de la Corynebacterium se relaciona con su capacidad para producir

toxinas y adherirse a las células de huésped. La toxina difterica producida por C. difteria es una
exotoxina, que inhibe la síntesis proteíca en la célula huésped, lo que puede causar daño tisular y
necrosis en el sitio de infección. Está depende en gran parte en la concentración de hierro.

-Factor cordón: está estructura contribuye a la adherencia de la bacteria a las células epiteliales
del huésped, lo que facilita su entrada en el organismo y posterior colonización.

-Antigeno K: está involucrado en la adherencia de la bacteria a las células del huésped, lo que
facilita su entrada y colonización en el organismo. Se ha observado que induce la respuesta
inmune poco efectiva, lo que permite a la bacteria evadir los mecanismos de defensa y persistir de
el.

-Fimbrias y adhesivas: las fimbrias son estructuras filamentosas.Permiten la adherencia a las

células del huésped, lo que facilita su invasión.

-Lipopolisacaridos: pueden desencadenar una respuesta inflamatoria en el huésped, lo que

contribuye a los síntomas de la enfermedad.

- Proteínas secretadas: estás proteínas incluyen enzimas como hialuronidasa y neueominidasa,

que ayudan a disolver tejidos y facilitan la invasión de bacterias.
10-. Factores predisponentes en el humano para infecciones (Corynebacterium difteria)

Lesiones cutáneas (quemaduras, heridas abiertas)

Exposición a alimentos y ambientes contaminados con secreciones con personas enfermas.

Personas que viven en condiciones insalubres o de hacinamiento.

Condiciones patologas e infecciones por otros agentes.

Uso prolongado de medicamentos.

Presencia de anticuerpos extraños (suturas, catéteres, protesis).

Infecciones

Las corynebacterium pueden causar diferentes infecciones incluyendo.

-Piel: como el acné, foliculitis y celulitis.

-Tracto urinario: cistitis y pielonefritis.

-Oido: otitis externa.

-Vias respiratorias superiores: faringitis y sinusitis.

-Ojo: conjutivitis y queratitis.

-Articulaciones y hueso: osteomelitis, artritis séptica.

-Corazon: endocarditis, miocarditis, arritmias e insuficiencia cardíaca congestiva.

-SNC: parálisis de paladar suave de los músculos locomotores o de grupo musculares selectos.

Difterica: enfermedad respiratoria aguda que puede causar la muerte.

-Septicemia: infección grave en todo el cuerpo que al igual que la anterior puede ser mortal sino se
trata adecuadamente.

11.- Difteria

La difteria respiratoria es una infección aguda faríngea o cutánea causada principalmente por
cepas toxigénicas del el bacilo gram positivo Corynebacterium diphtheriae, y raramente por otras
especies de Corynebacterium, menos comunes.

La difteria respiratoria tiene distribución universal y prevalece en zonas de baja cobertura

vacunal.Difteria de las vías respiratorias. Se transmite por microgotitas respiratorias se desarrolla 2
o 6 días después del periodo de incubacion. El exudado se transforma en una seudomembrana
formada por bacterias, linfocitos, células plasmáticas, fibrina y células muertas que puede recubrir
las amígdalas, la úvula y el paladar, y se puede extender en la parte superior hasta la nasofaringe y
en la parte inferior hasta la laringe. Los primeros síntomas incluyen odinofagia, malestar general y
fiebre, con posterior formación de una pseudomembrana sobre la faringe inicialmente blanca que
luego se vuelve negra, y que puede extenderse por la vía respiratoria hasta obstruirla
completamente; su extracción forzada causa sangrado de la mucosa. Un tercio de los pacientes
presentan grandes adenopatías cervicales y submandibulares que confieren el aspecto clásico de
«cuello de toro», y que pueden sangrar o necrosarse. La tasa de mortalidad es de
aproximadamente el 10% sin tratamiento, y se produce por asfixia o miocarditis.

La toxicidad cardíaca se observa en hasta el 25%-30% de los pacientes, unos 10 días después del
inicio de los síntomas. Se produce una miocarditis aguda, que puede causar disfunción sistólica,
arritmias y bloqueo auriculoventricular, con una mortalidad del 30% sin tratamiento. La presencia
de pseudomembrana amigdalina y de adenopatías cervicales grandes predicen la afectación
cardíaca.

La toxicidad neurológica es menos frecuente (5%), y también se relaciona con la gravedad del
cuadro respiratorio. Durante la fase de estado, se produce una neuropatía motora local que se
manifiesta como debilidad del paladar blando y la faringe posterior y que puede asociar debilidad
bulbar y neuropatías oculomotoras. También se puede observar una neuropatía motora
descendente que afecta a los miembros y al diafragma, una polineuropatía sensitiva en guante y
calcetín o una disfunción autonómica que puede ocurrir hasta 3 meses después de la resolución
del cuadro respiratorio. La recuperación completa es la norma, y la clínica revierte al bloquear la
toxina.

Difteria cutánea

La difteria cutánea se adquiere por el contacto de la piel con otras personas infectadas. El
microorganismo coloniza la piel y llega al tejido subcutáneo a través de interrupciones de la
barrera de la piel. En primer lugar se forma una pápula, que posteriormente se transforma en una
úlcera crónica que no desaparece, la cual se recubre en algunas ocasiones de una membrana
grisácea. Pueden aparecer signos sistémicos de la enfermedad como resultado de los efectos de la
exotoxina. C. diphtheriae se aísla habitualmente con otros patógenos, y la infección no responde a
antitoxina, por lo que se ha discutido su patogenicidad. Las lesiones pueden ser reservorios y
fuentes de diseminación de la infección.

Por lo general, las lesiones de la piel se producen en los miembros y tienen apariencia variable; a
menudo no son distinguibles de otras enfermedades crónicas de la piel. Algunos pacientes
presentan úlceras que no curan, perforadas, en ocasiones con una membrana grisácea.Son típicos
el dolor, la sensibilidad al tacto, el eritema y el exudado. Puede afectar a la piel y causar dolor,
enrojecimiento e hinchazón como otras infecciones bacterianas de la piel.

Otras especies de Corynebacterium

Muchas otras especies de Corynebacterium forman parte de la microflora natural del ser humano
y son capaces de producir enfermedad. Corynebacterium jeikeium es un patógeno oportunista
bien conocido en los pacientes inmunodeprimidos, fundamentalmente en los que tienen
alteraciones hematológicas o catéteres intravasculares. Corynebacterium urealyticum esta especie
es un patógeno importante del aparato urinario. Como su nombre indica, C. urealyticum, el cual
constituye un importante productor de ureasa, puede producir la suficiente ureasa como para
alcalinizar la orina, lo que hace posible la formación de cálculos renales o piedras de estruvita.

Otras corinebacterias productoras de ureasa que se asocian a infecciones del aparato urinario son
Corynebacterium amycolatum, Corynebacterium glucuronolyticum y Corynebacterium riegelü. C.
amycolatum se encuentra en la piel, pero no en la bucofaringe. Esta especie es la que se aisla con
mayor frecuencia en las muestras clínicas. Corynebacterium minutissimum coloniza la piel de las
personas sanas y se ha asociado con el eritrasma, una infección superficial de la piel que consiste
en la formación de placas maculosas pruríticas de coloración rojizo-amarronada que se localizan
principalmente en la ingle

C. minutissimum produce eritrasma y otras especies del género Corynebacterium.

Corynebacterium pseudotuberculosis y Corynebacterium ulcerans están íntimamente relacionados
con C. diphtheriae y pueden portar el gen de la difteria. Aunque C. ulcerans puede producir una
enfermedad indistinguible de la difteria, son raras las infecciones por C. pseudotuberculosis en el
ser humano.

Las especies saprofitas de Corynebacterium pueden producir infecciones invasivas, generalmente

bacteriemia, endocarditis o complicaciones metastásicas en pacientes susceptibles, por
comorbilidad o inmunosupresión. Es una causa frecuente de infección nosocomial.

12.- Diagnóstico

Muestra: para la pruebas de difteria se utiliza una muestra de exudado faríngeo o nasofaringeo.
Está muestra se obtiene mediante un hisopo estéril que se introduce en la garganta o en la nariz
del paciente para recolectar células y secreciones.

Coloración de Gram: bacilos Gram positivos

Agar azul de metileno: Pueden mostrar bacilos con forma de microesferas con una disposición
característica.

Agar sangre: las muestras deben ser aislada en este medio de cultivo para descartar la posibilidad
de Streptococcus hemolítico. El agar sangre es un medio enriquecido para este microorganismo.

Incubación: se debe realizar a 37°C durante 18-48h en microaerofilia.

Pueden presentar colonias pequeñas beta hemolíticas. Si no se observan colonias de interés, se

puede considerar negativo o flora habitual.

Agar cisteína telurita: es un medio selectivo, el telurito inhibe la proliferación de casi todas las
bacterias respiratorias de las vías superiores y bacilos Gram negativos e incubado a 37°C en CO2 al
5%. Las placas se examinan de 18 a 24h después. En 36 a 48h las colonias en medio de telurita son
los suficientes definidas para el reconocimiento de C.difteria estás colonias pasan a ser negras con
una halo café.

Pruebas bioquímica: catalasa (+), ureasa (-) 24h, nitrato 24-48h (+), Dnasa (+).

Pruebas de toxigenicidad

Existen varios métodos:

El método de Elek modificado descrito por la unidad de referencia de la difteria de la OMS. Un

disco de papel que contiene antitoxina (10 UI/disco) se coloca en una placa de agar. Los cultivos en
los que se deben comprobar la toxigenicidad se inoculan (cuando menos se eligen 10 colonias) de
7 a 9mm del disco. Después de 48h de inoculacion la antitoxina que se difunde desde los cultivos
toxigenos y ha producido bandas de precipitina entre el disco y el crecimiento bacteriano.

PCR

Método de base en la reacción de la cadena polimerasa para la detección del gen de la toxina
difterica (tox). Los análisis de PCR para tox también se pueden utilizar directamente en los
especímenes de los pacientes antes que se disponga de los resultados de cultivo. Un cultivo
positivo confirma una análisis de PCR positivo. Un cultivo negativo después de la antibioterapia
junto con el análisis de PCR positivo indica que el paciente posiblemente tiene difteria.

Elisa: se puede emplear enzimainmunoanalisis de absorción para detectar toxina difterica de cepas
de C. diphteria clínicas.

Tira inmunocromatografica: permite detectar toxinas de la difteria en cuestión de horas. Este

análisis es muy sensible.

13.- Tratamiento

El aspecto más importante del tratamiento de la difteria es la administración precoz de la

antitoxina difterica con el fin de neutralizar de forma específica la exotoxina antes de que está se
una a la célula del organismo anfitrión. La muerte celular es inevitable tras la internalización de la
toxina.

Se usa tratamiento antibiótico con penicilina o eritromicina para destruir las células de C.difteria e
inhibir la producción de exotoxina.

También es importante el reposo en cama, el aislamiento para evitar una diseminación secundaria
y en los pacientes con difteria respiratoria, el mantenimiento de la permeabilidad de la vía aerea.
La vacunación con el toxoide es necesario tras la recuperación del paciente, ya que un gran
número de individuos no logran fabricar anticuerpos protectores con posterioridad a una infección
natural.

14.- Epidemiología

Agente causal: C.difteria.

Reservorio: portador o enfermo.

Puerta de salida: vías respiratorias.

Transmisión: directa contacto con secreciones.

Puerta de entrada: vía respiratoria o oral

Hospedero: hombre no inmunizado.

Se transmite por propagación de gotas por contacto directo con infecciones cutáneas, en menor
grado por medio de fómites o nasales y continúan albergando el organismo por semanas o meses.
La difteria es inusual en localizaciones dónde se utiliza la inmunización generalizada.

15.- Medidas preventivas

Vacunación la inmunización. es el pilar fundamental de prevención la difteria.

Higiene personal: lavarse las manos con agua y jabón especialmente después de usar el baño,
antes de comer y después de tocar superficies públicas.

Evitar compartir objetos personales: toallas, cepillos de dientes y utensilios de cocina.

Evitar contacto con personas contagiadas o sospecha.

Lavado de manos.

Mantener buena salud en general.