Quito - Ecuador
NORMA TÉCNICA ECUATORIANA NTE INEN 266:2013
Primera revisión
AZUCAR. DETERMINACIÓN DEL AZÚCAR REDUCTOR
Primera edición
SUGAR. DETERMINATION OF REDUCTOR SUGAR
First edition
DESCRIPTORES: Tecnología de los alimentos, Azúcar y productos de azúcar, determinación del azúcar reductor
AL 02.04-303
CDU: 664.1
ICS: 67.180.10
CDU: 664.1
ICS: 67.180.10 AL 02.04-303
Norma Técnica NTE INEN
Ecuatoriana AZÚCAR 266:2013
Voluntaria DETERMINACIÓN DEL AZÚCAR REDUCTOR Primera revisión
2013-09
1. OBJETO
1.1 Esta norma describe el método para determinar el contenido de azúcar reductor en el azúcar.
2. ALCANCE
2.1 Este método permite medir la capacidad reductora de soluciones de azúcar blanco conteniendo
substancias reductoras, por ejemplo azúcar invertido, en una solución alcalina débil de un complejo
++
de Cu con tartrato.
2.2 Este método es aplicable a azúcar blanco y azúcar blanco de plantación con contenido de
azúcares reductores de hasta de 0,089%.
2.3 En el caso de la Determinación de Azúcares Reductores en Azúcar Blanco y en Azúcar Blanco de
Plantación, si el usuario tiene la libertad de elección de método, ICUMSA recomienda que se dé
preferencia al Método GS2/3/9-5.
3. DEFINICIONES
3.1 Azúcares reductores. Son mono- y oligosacáridos que contienen un grupo aldehídico o cetónico
libre que presenta un efecto reductor sobre ciertos agentes oxidantes.
3.2 Azúcar invertido. es una mezcla equimolar de glucosa y fructosa.
3.3 Substancias reductoras. Son la suma de azúcares reductores y otras substancias en productos
azucarados definidas por su poder reductor sobre los reactivos que se emplean en la determinación
de azúcares reductores. Como en el caso de azúcares reductores, su cantidad se expresa en la
mayoría de los casos como cantidad equivalente de azúcar invertido, que es la cantidad de azúcar
invertido que presenta igual poder reductor bajo las condiciones de la reacción.
4. METODOS DE ENSAYO
++
4.1 Fundamento. El complejo formado entre iones Cu y tartrato de sodio y potasio se reduce por
+
los azúcares reductores a Cu univalente que se precipita como Cu2O. El Cu2O precipitado se
determina por valoración iodométrica.
++
4.1.1 El Cu2O es oxidado por un exceso de yodo en solución acida a Cu y el exceso es retro-titulado
con tiosulfato de sodio.
++
4.1.2 La reacción entre los azúcares reductores y el complejo de Cu no es estequiométrica. La
cantidad de Cu2O formado depende de las condiciones de la reacción recomendadas que por tanto
deben ser seguidas estrictamente.
4.1.3 Se ha determinado que 1 mL de solución dé yodo de 0,01615 mol/L es equivalente a 1 mg de
azúcares reductores, tras haber considerado la corrección por el efecto reductor de la sacarosa.
4.1.4 La modificación del método Ofner original, realizada por A Emmerich, consiste en adoptar las
siguientes características del método del Instituto de Berlín:
[Link] La cantidad de cobre en el reactivo Ofner se incrementa en un 40 % para extender el rango de
medida desde menos de 20 mg hasta 25-30 mg.
[Link] Se incluye un valor blanco que tiene en cuenta la influencia de impurezas en los reactivos.
[Link] Se incluye un valor en frío para corregir la influencia de substancias reductoras en la muestra,
diferentes de los azúcares reductores, que forman Cu 2O y reaccionan con yodo a temperatura
ambiente
(Continúa)
DESCRIPTORES: Tecnología de los alimentos, Azúcar y productos de azúcar, determinación del azúcar reductor.
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NTE INEN 266 2013-09
[Link] Una de las principales ventajas del método Ofner en comparación con el método del Instituto
de Berlín es que la corrección por sacarosa, que permite considerar la capacidad reductora de la
sacarosa, es de solo 1 mg por cada 10 g de sacarosa. Esto es la mitad de la corrección utilizada en el
método del Instituto de Berlín y es mucho más constante y fiable.
4.2 Reactivos y materiales
[Link] Precauciones y advertencias de seguridad. Los usuarios de este método deberán consultar su
legislación nacional de Salud y seguridad y a los proveedores de productos químicos antes de
manipular estos reactivos
[Link] Usar solamente agua destilada o agua de calidad equivalente. Todos los reactivos deberán
ser de grado analítico o mejor a menos que se especifique lo contrario.
4.2.2 Carbón activo. en polvo.
4.2.3 Pequeños trozos de piedra pómez
4.2.4 Hidrogeno fosfato disódico, dodecahidratado Na 2HPO4 . 12 H2O
4.2.5 Ácido acético glacial 1,05 g/mL
4.2.6 Solución de ácido acético, aprox. 5 mol/L
4.2.7 Tartrato de sodio y potasio tetrahidratado (sal de Rochelle o Seignette)
4.2.8 Sulfato de cobre pentahidratado
4.2.9 Carbonato de sodio anhidro, Na2CO3.
4.2.10 Almidón soluble.
4.2.11 Ácido clorhídrico, aprox. 1 mol/L.
4.2.12 Ácido clorhídrico, aprox. 2 mol/L.
4.2.13 Solución Ofner, modificada. Pesar 7,0 g de sulfato de cobre pentahidratado, 10,0 g de
carbonato de sodio, 300 g de tartrato de sodio y potasio y 50 g de hidrógeno fosfato disódico en un
matraz de 1000 mL. Disolver en aprox. 900 mL de agua (calentando levemente para disolver si es
necesario). Calentar la solución durante 2 horas en un baño de agua hirviendo. Enfriar hasta
temperatura ambiente y enrasar. Añadir aprox. 10 g de carbón activo y agitar durante 5-10 min. Filtrar
la solución.
4.2.14 Solución de yodato de potasio 0,01667 mol/L. Secar el yodato de potasio durante 3 horas a
100 °C antes de usarlo. Pesar 3,5667 g de yodato de potasio, KIO 3 Trasvasar a un matraz aforado de
1000 mL, disolver en agua y enrasar.
4.2.15 Solución de almidón (indicador de yodo). Disolver 1 g de almidón soluble en 100 mL de
solución saturada de cloruro de sodio. Llevar la solución a ebullición durante unos pocos minutos.
[Link] Yoduro de potasio, KI.
[Link] Tiosulfato de sodio,
[Link] Yodo, I2.
4.2.16 Solución de tiosulfato de sodio, 0,1 mol/L. Pesar 24,818 g de tiosulfato de sodio. Trasvasar a
un matraz aforado de 1000 mL y disolver en 400 mL de agua destilada. Enrasar con agua.
Opcionalmente, emplear ampollas preparadas, por ej. Merck Art 1.09950.
(Continua)
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4.2.17 Solución de tiosulfato de sodio, 0,0333 mol/L. Diluir una solución de tiosulfato de sodio
0,1 mol/L hasta tres veces su volumen con agua y normalizar con yodato de potasio en 10 mL de
agua. Añadir 5 Ml de ácido clorhídrico aprox. 2 mol/Ml y 10,0 Ml de solución de yodato de potasio de
0,01667 mol/L. Cubrir el matraz Erlenmeyer con un vidrio reloj, agitar suavemente y colocar la
solución a oscuras durante aprox. 30 min. Valorar el yodo formado con una solución de tiosulfato de
sodio (5.19) hasta decolorar completamente añadiendo 1 mL de indicador de almidón justo antes del
punto final. Calcular el factor de la solución de tiosulfato.
En donde:
1
VTh = mL de solución de tiosulfato de sodio valorada
4.2.18 Solución de yodo, 0,05 mol/L. Disolver 53 g de yoduro de potasio (5.15) en 50 mL de agua
destilada en un matraz aforado de 1000 mL. Transferir 12,690 g de yodo (5.17) a este matraz,
disolver y llevar con agua hasta el enrase. Mantener esta solución protegida de la luz. Opcionalmente,
utilizar una ampolla preparada, por ej. Merck Art 1.09910.
4.2.19 Solución de yodo, 0,01667 mol/L. Diluir la solución de yodo 0,05 mol/L, hasta tres veces su
volumen con agua y normalizar con solución de tiosulfato de sodio 0,0333 mol/L. Pipetar 25,0 mL de
la solución de yodo 0,01667 mol/L en un matraz Erlenmeyer de 300 mL. Añadir 5 mL de ácido acético
mol/L y, después de agitar suavemente la mezcla, valorar por retroceso con solución de tiosulfato de
sodio 0,0333 mol/L . Añadir 1 mL de indicador de almidón justo antes de alcanzar el punto final.
Calcular el factor de la solución de yodo:
En donde:
VTh = mL de solución de tiosulfato de sodio valorada
fTh = factor de corrección para solución de tiosulfato de sodio
4.3 Equipos
4.3.1 Balanza analítica. Resolución 0,1 mg.
4.3.2 Balanza de precisión. Resolución 0,1 g.
4.3.3 Buretas. Capacidad 50 Ml
4.3.4 Matraces Erlenmeyer capacidad 300 mL
4.3.5 Matraces aforados. 1000 mL y 200 mL.
4.3.6 Pipetas. Capacidades 1 mL, 15 mL y 50 mL.
4.3.7 Vidrio de reloj. Para cubrir los matraces Erlenmeyer
4.3.8 Mechero Bunsen, trípode y malla de tela metálica
4.3.9 Baño de agua hirviendo
4.3.10 Baño de agua con circuito de agua fría.
4.3.11 Papel filtro
1
NOTA: corrige la solución de yodo utilizada al valor determinado experimentalmente de 0,01615 mol/L, para el que 1 mL
corresponde a 1 mg de azúcares reductores
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4.4 Procedimiento
4.4.1 Preparación de la muestra. La solución preparada para el ensayo deberá contener como
máximo 25 mg de azúcar invertido en 50 mL. Esto requiere que 40 g de azúcar blanco se diluyan con
agua hasta 200 mL.
4.4.2 “Valor en caliente”. Mezclar 50,0 mL de la solución preparada en un matraz Erlenmeyer con
50,0mL de la solución Ofner. Añadir algunos trozos de piedra pómez a la mezcla.
[Link] Llevar la mezcla hasta ebullición en 4 a 5 minutos usando el mechero Bunsen, el trípode y la
tela metálica. Hervir durante exactamente 5 min. Se considera que la ebullición se inicia cuando un
gran número de burbujas de vapor rompen por toda la superficie. Enfriar la mezcla en un baño de
agua con circulación de agua fría. Después de aprox. 10 minutos la mezcla deberá de haber
alcanzado la temperatura ambiente.
[Link] Añadir 1 mL de ácido acético concentrado. Añadir solución de yodo hasta que el color de la
mezcla se coloree con el típico color del yodo. Este procedimiento disuelve el Cu 2O formado con un
exceso de yodo. Registre este volumen como V1
4.4.3 Añadir 15 mL de ácido clorhídrico, 1 mol/L, vertiéndolo sobre las paredes internas del matraz de
manera que las gotas residuales sean llevadas a la solución. Cubrir el matraz con un vidrio de reloj y
moverlo suavemente durante 2 min. Hasta que el precipitado de Cu2O esté completamente disuelto.
4.4.4 Valorar la muestra con tiosulfato de sodio 0,0333 mol/L. Añadir 1 mL de solución de almidón
justo antes de alcanzar el punto final. Registrar este ^volumen como V2.
Repetir los pasos (a) y (b) con otra solución preparada mezclada con la solución Ofner y registrar el
promedio de las dos replicas V1 y V2 para el yodo y el tiosulfato respectivamente.
4.4.5 “Valor en frío”. Mezclar 50,0 mL de la muestra preparada con 50,0 mL de la solución Ofner.
[Link] Dejar la mezcla a temperatura ambiente durante 10 min.
[Link] Repetir el paso ([Link]) en 4.4.2. Registrar los valores V3 y V4 para el yodo y el tiosulfato
respectivamente.
4.4.6 “Valor del blanco”. Mezclar 50,0 mL de agua con 50 mL de la solución Ofner. Repetir los pasos
([Link]) y ([Link]) en 4.4.2. Registrar los valores V5 y V6 para el yodo y el tiosulfato
2
respectivamente.
4.5 Calculo
Cantidad de yodo añadido para el “Valor en caliente” = V1
Cantidad de tiosulfato añadido para el “Valor en caliente” = V2
Cantidad de yodo añadido para el “Valor en frío” = V3
Cantidad de tiosulfato añadido para el “Valor en frío” = V4
Cantidad de yodo añadido para el “Valor del blanco” = V5
Cantidad de tiosulfato añadido para el “Valor del blanco” = V6
4.5.1 Consumo de solución de yodo de 0,01667 mol/L corregido
“Valor en caliente” calculado,
“Valor en frío” calculado, B
“Valor del blanco” calculado,
2
NOTA - Es esencial que el tiempo entre la adición de solución de yodo y el comienzo de la valoración por retroceso sea igual
en el “Valor caliente” y en el “Valor frió”.
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En donde:
= factor de la solución de yodo, calculado en 5,21, y
4.5.2 Corrección por sacarosa D, es 0,1 mL de solución de yodo / g de sacarosa en la mezcla de la
reacción.
En donde:
s = cantidad de muestra en 50 mL de solución preparada (7.1).
4.5.3 Ejemplo de cálculos. 40 g de azúcar blanco se pesan y diluyen hasta 200 mL. 50,0 mL de esta
solución contienen 10 g de sacarosa.
Cantidad de solución de yodo añadida para el valor en caliente es 20 mL
Cantidad de tiosulfato de sodio consumido es 18,00 mL
Cantidad de solución de yodo añadido para el valor frio es 20,80 mL
Cantidad de tiosulfito de sodio consumido es 19,90 mL
Cantidad de yodo añadido para el valor blanco es 20 mL
Cantidad de tiosufato de sodio consumido es 20,00 mL
fTh calculado es 1,029; f 1 calculado es 1,031
A= (20,00. 1,031) - (18,80 - 1,029) = 1,27
B= (20,00. 1,031) - (19,90 - 1,029) = 0,14
C= (20,00. 1,031) - (20,00 - 1,029) = 0,04
D= 10,00. 0,1 = 1,00
Azucares reductores, mg/kg=
4.6 Precisión para azucares blancos y azúcares blancos de plantación que contengan entre 0,007%
y el 0,089% de azucares reductores, la diferencia absoluta entre dos resultados obtenidos bajo
condiciones de repetibilidad no deberá ser mayor del 0,006%. La diferencia absoluta entre dos
resultados obtenidos bajo condiciones de reproducibilidad no deberá ser mayor del 0,011
(Continua)
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APENDICE Z
Z.1 NORMAS A CONSULTAR
Esta norma no requiere de otras para su aplicación.
Z.2 BASES DE ESTUDIO
Libro de métodos 2011, Método GS 2/9-6 (2011) Determinación de azúcares reductores en azúcar
blanco y en azúcar blanco de plantación por el método volumétrico de ofner modificado ( ICUMSA),
Bartens, Berlin, 2011
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INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA
Documento: TÍTULO: AZÚCAR. DETERMINACIÓN DEL AZÚCAR Código:
NTE INEN 266 REDUCTOR AL 02.04-303
Primera revisión
ORIGINAL: REVISIÓN:
Fecha de iniciación del estudio: Fecha de aprobación anterior por Consejo Directivo 1978-06-01
Oficialización con el Carácter de Obligatoria
por Acuerdo No. 353 de 1980-03-12
publicado en el Registro Oficial No. 157 de 1980-03-28
Fecha de iniciación del estudio: 2012-07-19
Fechas de consulta pública: 2013-01-15 a 2013-02-15
Subcomité Técnico de:
Fecha de iniciación: Fecha de aprobación:
Integrantes del Subcomité:
NOMBRES: INSTITUCIÓN REPRESENTADA:
Mediante compromiso presidencial N° 16364, el
Instituto Ecuatoriano de Normalización – INEN, en vista
de la necesidad urgente, resuelve actualizar el acervo
normativo en base al estado del arte y con el objetivo de
atender a los sectores priorizados así como a todos los
sectores productivos del país.
Para la revisión de esta Norma Técnica se ha
considerado el nivel jerárquico de la normalización,
habiendo el INEN realizado un análisis que ha
determinado su conveniente aplicación en el país.
La Norma en referencia ha sido sometida a consulta
pública por un período de 30 días y por ser considerada
EMERGENTE no ha ingresado a Subcomité Técnico
Otros trámites: ♦4 Esta norma sin ningún cambio en su contenido fue DESREGULARIZADA, pasando de
OBLIGATORIA a VOLUNTARIA, según Resolución de Consejo Directivo de 1998-01-08 y oficializada
mediante Acuerdo Ministerial No. 235 de 1998-05-04 publicado en el Registro Oficial No. 321 del 1998-05-
20.
Esta NTE INEN 266:2013 (Primera revisión), reemplaza a la NTE INEN 266:1980
La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma
Oficializada como: Voluntaria Por Resolución No. 13288 de 2013-08-13
Registro Oficial No. (S) 84 de 2013-09-19
Instituto Ecuatoriano de Normalización, INEN - Baquerizo Moreno E8-29 y Av. 6 de Diciembre
Casilla 17-01-3999 - Telfs: (593 2)2 501885 al 2 501891 - Fax: (593 2) 2 567815
Dirección General: E-Mail:direccion@[Link]
Área Técnica de Normalización: E-Mail:normalizacion@[Link]
Área Técnica de Certificación: E-Mail:certificacion@[Link]
Área Técnica de Verificación: E-Mail:verificacion@[Link]
Área Técnica de Servicios Tecnológicos: E-Mail:inenlaboratorios@[Link]
Regional Guayas: E-Mail:inenguayas@[Link]
Regional Azuay: E-Mail:inencuenca@[Link]
Regional Chimborazo: E-Mail:inenriobamba@[Link]
URL:[Link]
