I.
INTRODUCCION
II. OBJETIVOS
III. FUNDAMENTO TEORICO
III.1. Estufa de convección forzada
Una estufa de convección forzada es un instrumento utilizado para mantener
una temperatura constante en el laboratorio y para secar o calentar
materiales1. En el laboratorio de microbiología de alimentos, se utiliza en la
preparación y esterilización de muestras de alimentos para el análisis
microbiológico (G. F. Tortora , 2016).
III.2. Autoclave vertical (esterilización en calor húmedo)
La autoclave vertical es una herramienta crucial en el laboratorio de
microbiología de alimentos, que se utiliza para la esterilización de materiales
y muestras de análisis. Utiliza el calor húmedo para eliminar los
microorganismos y garantizar la esterilidad (Hocking AD , 2006).
III.3. Cocinilla
Una cocinilla es un dispositivo utilizado para calentar líquidos y materiales
de muestra en el laboratorio de microbiología de alimentos. Es necesario
para la preparación de medios de cultivo y la realización de experimentos
(Adams MR , 2008).
III.4. Estufa para cultivos microbianos
Una estufa para cultivos microbianos es una herramienta utilizada en el
laboratorio de microbiología de alimentos para cultivar microorganismos. El
equipo crea un ambiente controlado donde se pueden reproducir las
condiciones necesarias para el crecimiento de los organismos (ICMSF ,
2009)
III.5. Baño maría
Un baño maría se utiliza en el laboratorio de microbiología de alimentos para
calentar gradualmente las muestras y la preparación de medios de cultivo. Es
especialmente útil para un calentamiento uniforme y suave que permite
mejores resultados en los experimentos (MR , 2008).
III.6. Balanza analítica
Una balanza analítica es una herramienta esencial en el laboratorio de
microbiología de alimentos para medir con precisión pequeñas cantidades de
material. Es una tarea crucial en la preparación de medios de cultivo y en la
realización de experimentos precisos (MR , 2008).
III.7. Microscopio
Un microscopio es un instrumento utilizado en el laboratorio de
microbiología de alimentos para observar organismos. Es crucial para la
identificación y visualización de las diferentes cepas de microorganismos
presentes en una muestra de alimento (ICMSF , 2009).
III.8. Equipo de fermentación (biorreactor)
El equipo de fermentación o biorreactor se utiliza en laboratorios de
biotecnología para llevar a cabo procesos fermentativos. El biorreactor
proporciona un ambiente controlado para el crecimiento, la alimentación y el
mantenimiento de microorganismos en una solución líquida (Villarreal ,
2009).
III.9. Pipeteador boeco
Un pipeteador Boeco es una herramienta automatizada en el laboratorio de
microbiología de alimentos que se utiliza para la transferencia precisa de líquidos
(muestra y reactivos). Proporcione una mayor precisión y reduzca la contaminación
cruzada (Jay , 2005).
III.10. Destilador de agua
Un destilador de agua es un instrumento utilizado en el laboratorio de
microbiología de alimentos que produce agua destilada para la preparación
de medios de cultivo y para la limpieza de equipos de laboratorio (FAO ,
2012).
III.11. Contador de colonias
Un contador de colonias es un instrumento utilizado en el laboratorio de
microbiología de alimentos para contar el número de colonias de
microorganismos presentes en una muestra de alimento. Permite un cálculo
más preciso del número de células bacterianas comparado con la estimación
visual (FAO , 2012).
III.12. Estereoscopio
Un estereoscopio es un instrumento utilizado en el laboratorio de
microbiología de alimentos para observar y examinar muestras de alimentos
y cultivos microbianos en tres dimensiones. Es particularmente útil para
observar estructuras tridimensionales (G. Tortora , 2016).
IV. MATERIALES Y METODOS
V. RESULTADOS Y DISCUSION
VI. CONCLUSIONES
VII. RECOMENDACIONES
VIII. CUESTIONARIO
VIII.1. Defina los términos: Higiene y asepsia.
Higiene: Es el conjunto de medidas y prácticas destinadas a mantener y
promover la salud y prevenir enfermedades mediante la limpieza y
desinfección de superficies, objetos y entornos, así como el cuidado personal
y la adopción de hábitos saludables.
Asepsia: Es la ausencia total de microorganismos patógenos, es decir, la
esterilización de objetos, superficies y ambientes para evitar la
contaminación y prevenir infecciones.
VIII.2. Defina los términos bactericida y bacteriostático.
Bactericida: Es una sustancia o agente que es capaz de matar bacterias,
eliminando completamente la población bacteriana.
Bacteriostático: Es una sustancia o agente que inhibe el crecimiento y
reproducción de bacterias, pero no las mata directamente. Detiene la
proliferación bacteriana mientras está presente, pero las bacterias pueden
recuperarse si se elimina el agente bacteriostático.
VIII.3. Mencione 3 desinfectantes que recomendaría usar para
efectos prácticos de análisis y procesos microbiológicos en el
laboratorio de la FIIA -UNASAM.
Al elegir desinfectantes para el laboratorio de microbiología, es importante
utilizar aquellos que sean efectivos contra una amplia gama de
microorganismos y que no interfieran con los análisis. Algunas opciones
recomendadas podrían ser:
Alcohol etílico al 70%: Es efectivo contra bacterias y algunos virus, y es de
uso común en el laboratorio.
Hipoclorito de sodio (cloro): Es un desinfectante ampliamente utilizado
debido a su acción efectiva contra bacterias, virus y hongos.
Glutaraldehído: Es un potente desinfectante utilizado para la desinfección de
equipos y superficies en laboratorios microbiológicos.
VIII.4. Como efectúa Ud. La esterilización de los materiales de vidrio
para trabajos de análisis microbiológico. Explique el proceso y sus
parámetros de control.
La esterilización de los materiales de vidrio en el laboratorio de
microbiología se puede realizar mediante calor húmedo, calor seco o
métodos químicos. El método más común es la esterilización con calor
húmedo a través de la autoclave.
El proceso de esterilización con calor húmedo en la autoclave implica
someter los materiales a altas temperaturas y presiones, normalmente 121°C
y 15 psi (libras por pulgada cuadrada) durante un tiempo determinado
(generalmente 15-20 minutos). Estas condiciones de calor y presión son
letales para la mayoría de los microorganismos, incluidas las esporas
bacterianas más resistentes.
Los parámetros de control incluyen la correcta carga de la autoclave para
permitir la penetración del vapor en todos los materiales, la medición y
ajuste de la temperatura y presión correctas, así como la verificación
periódica de la efectividad de la esterilización a través de pruebas de control
biológico.
VIII.5. Porque razón el uso del calor húmedo es mas recomendable
que el uso del calor seco en procesos de esterilización.
El uso del calor húmedo (vapor) es más recomendable que el calor seco en procesos
de esterilización debido a que el calor húmedo tiene una mayor eficacia en la
destrucción de microorganismos, incluidas las esporas bacterianas, en un tiempo de
exposición más corto. Esto se debe a que el vapor puede penetrar y distribuirse
fácilmente en el material, asegurando una esterilización más completa.
En contraste, el calor seco necesita más tiempo para alcanzar las altas temperaturas
necesarias para lograr la esterilización completa, lo que puede dañar algunos
materiales sensibles al calor y prolongar el tiempo de procesamiento. El calor
húmedo es más rápido, más eficiente y generalmente se considera el método
preferido para esterilizar materiales de laboratorio y equipos.
VIII.6. Cuales son las formas de calor seco que se usa en procesos de
análisis microbiológico. Ejemplifique.
En procesos de análisis microbiológico, las formas de calor seco más
comúnmente utilizadas son:
Incineración: Es la combustión controlada de material mediante un mechero
Bunsen o un horno de mufla. Se utiliza para esterilizar asas de siembra,
alambres y otros instrumentos metálicos.
Estufas: Son aparatos eléctricos que mantienen una temperatura constante y
controlada para esterilizar equipos, vidrio y algunos materiales que no
pueden ser sometidos a altas temperaturas. Por ejemplo, se pueden usar para
esterilizar tubos de ensayo y pipetas.
VIII.7. Defina medio de cultivo e indique la composición nutricional
del agar nutritivo y el caldo nutritivo.
Medio de cultivo: Es una preparación artificial que proporciona los
nutrientes necesarios para el crecimiento de microorganismos en el
laboratorio. Estos medios permiten a los científicos estudiar y cultivar
bacterias, hongos y otros microorganismos en condiciones controladas.
Agar nutritivo: Es un medio sólido utilizado para el cultivo de
microorganismos. Su composición nutricional típica es:
Peptona: 5 g/L
Extracto de carne: 3 g/L
Agar: 15 g/L
Agua destilada: 1000 mL
Caldo nutritivo: Es un medio líquido utilizado para el cultivo de
microorganismos en tubos de ensayo o matraces. Su composición nutricional
típica es:
Peptona: 5 g/L
Extracto de carne: 3 g/L
Agua destilada: 1000 mL
VIII.8. A que se denomina medio de cultivo selectivo.
Un medio de cultivo selectivo es aquel que contiene ingredientes o agentes
que inhiben el crecimiento de ciertos tipos de microorganismos mientras
permiten el crecimiento de otros. Estos medios se utilizan para aislar y
favorecer el crecimiento de microorganismos específicos en una mezcla de
diferentes microorganismos presentes en una muestra.
Un ejemplo de medio de cultivo selectivo es el agar MacConkey, que
contiene sales biliares y cristal violeta para inhibir el crecimiento de
bacterias Gram positivas y favorecer el crecimiento de bacterias Gram
negativas.
VIII.9. Indique Ud. según su criterio las tres reglas básicas de trabajo
en procesos de análisis microbiológico a tener presente en el
laboratorio.
Limpieza y desinfección: Mantener un ambiente de trabajo limpio y
desinfectado es fundamental para evitar la contaminación cruzada y asegurar
resultados precisos.
Uso adecuado de equipos y materiales: Es importante utilizar los
instrumentos y materiales de laboratorio correctamente y seguir las
instrucciones de uso para obtener resultados fiables y reproducibles.
Trazabilidad de las muestras: Registrar y etiquetar adecuadamente las
muestras y los resultados obtenidos es esencial para identificar y rastrear la
procedencia de cada muestra y evitar confusiones o errores en el análisis.
VIII.10. Aplique Ud. Los métodos de siembra comúnmente empleados
en determinaciones microbiológicos
Los métodos de siembra más comúnmente empleados en determinaciones
microbiológicas son:
Siembra en superficie: Se aplica una muestra sobre la superficie de un
medio sólido y se extiende uniformemente con un asa de siembra o espátula.
Se utiliza para obtener colonias aisladas y contar la cantidad de unidades
formadoras de colonias (UFC) por unidad de volumen o peso de la muestra.
Siembra por estría: Se realiza utilizando el asa de siembra para extender la
muestra de manera secuencial en diferentes secciones del medio sólido,
diluyendo la muestra progresivamente. Este método se utiliza para obtener
colonias aisladas.
Siembra por vertido: Se agrega la muestra líquida directamente sobre la
superficie del medio de cultivo en una placa de Petri. Se emplea para contar
UFC/ml de líquidos o para obtener una siembra más uniforme de
microorganismos.
VIII.11. ¿Qué diferencia existe entre agar y caldo referido a su
composición y función como cultivos microbiológicos?
La diferencia entre agar y caldo radica en su consistencia y función como
cultivos microbiológicos:
Agar: Es un medio sólido que contiene agar, un polisacárido gelatinoso
derivado de algas marinas. Su función principal es proporcionar una
superficie sólida para el crecimiento de colonias bacterianas y otros
microorganismos. El agar permite obtener colonias aisladas y facilita el
recuento de microorganismos.
Caldo: Es un medio líquido sin agar. Su función principal es permitir el
crecimiento de microorganismos en forma de suspensión en el medio
líquido. Se utiliza para cultivos en tubos de ensayo o matraces, y es útil para
propagar grandes cantidades de microorganismos o para realizar pruebas
bioquímicas.
VIII.12. Según el material analizado, indique usted tres
recomendaciones mas importantes para un buen trabajo en el
laboratorio de microbiología de alimentos.
Asegurar la trazabilidad de las muestras: Registrar correctamente la
información de la muestra, el origen, la fecha y los análisis requeridos para
evitar confusiones y errores durante el proceso.
Utilizar técnicas asépticas: Prevenir la contaminación cruzada durante el
manejo de las muestras y los cultivos para obtener resultados precisos y
confiables.
Realizar controles de calidad: Incluir controles positivos y negativos en
cada análisis para verificar la eficacia de los métodos de siembra y la
esterilización de los medios, asegurando resultados confiables.
IX. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICOS
Adams MR, Moss MO. «Microbiología de los Alimentos. La Real Sociedad de Química.» , 2008.
FAO. «Manual de microbiologia.» , 2012.
Hocking AD, Pitt JI, Samson RA, Thrane U. «Avances en Micología de los Alimentos. Saltador.» ,
2006.
ICMSF. «Microorganismos en los Alimentos Ensayos Microbiológicos en la Gestión de la
Seguridad Alimentaria. Springer Science & Business Media.» , 2009.
Jay, JM. «Microbiología moderna de los alimentos (7ª ed.). Saltador.» , 2005.
MR, Adams. «Microbiología de los Alimentos. La Real Sociedad de Química.» , 2008.
Tortora, GJ, Funke, BR y Case, CL. «Microbiología: una introducción. Educación Pearson.» ,
2016.
Tortora, GJ. «Microbiología una introducción. Educación Pearson.» , 2016.
Villarreal, P. y Azaola, A. «Fermentación en biorreactores de lecho móvil empacado. Revista
científica, 19(3), 248-258.» , 2009.
