Enzimas
Curso Premédico - Facultad de Medicina.
Profesora: Carol Andrea Castillo Parra
ENZIMAS
Son proteínas que actúan como
catalizadores:
• Modificando la velocidad de la
reacción que catalizan
• Rebajando la energía de
activación de la reacción que
regulan.
ENZIMAS
Para que una reacción se lleve a
cabo las moléculas deben
alcanzar un estado energético
determinado (energía de
activación).
Puede conseguirse esta energía,
de dos formas:
ENZIMAS
Aumentando la
temperatura.
Sin embargo, las
enzimas se
desnaturalizan a
esa T. Además, esa
energía debe
proceder de otra
reacción, lo que
aumenta el gasto
energético.
ENZIMAS
Con enzimas
Las enzimas
rebajan la energía
de activación
ENZIMAS
Sin enzimas
Con enzimas
ENZIMAS:
PROPIEDADES DE LAS REACCIONES ENZIMÁTICAS
• EFICACIA DE LA CATÁLISIS
• Son los catalizadores más potentes: actúan en concentraciones muy
pequeñas
• La velocidad de catálisis es muy alta (108-1020 veces que sin enzimas)
• El rendimiento es muy alto
• Las condiciones de reacción son suaves (fisiológicas)
ENZIMAS:
PROPIEDADES DE LAS REACCIONES ENZIMÁTICAS
• EFICACIA DE LA CATÁLISIS
• ESPECIFICIDAD
Puede ser:
• Absoluta o de sustrato. (v.g. ureasa)
• Relativa o de reacción
• Estereospecificidad (v.g. D-aminooxidasas)
• De grupo (v.g. hexoquinasas)
• De clase (v.g. estearasas)
ENZIMAS:
PROPIEDADES DE LAS REACCIONES ENZIMÁTICAS
• EFICACIA DE LA CATÁLISIS
• ESPECIFICIDAD
ENZIMAS:
PROPIEDADES DE LAS REACCIONES ENZIMÁTICAS
• EFICACIA DE LA CATÁLISIS
• ESPECIFICIDAD
• REGULACIÓN
• Mediante la cantidad de enzima, regulando la
expresión génica (transcripción)
• Mediante el control de la actividad enzimática
ENZIMAS
Nomenclatura
1. OXIDORREDUCTASAS • Regulan reacciones REDOX
Sin transferencia de hidrógenos • Existen dos tipos esenciales:
• Con transferencia de
hidrógenos
• Sin transferencia de
hidrógenos
ENZIMAS
Nomenclatura
1. OXIDORREDUCTASAS • Regulan reacciones REDOX
Con transferencia de hidrógenos • Existen dos tipos esenciales:
• Con transferencia de
hidrógenos
• Sin transferencia de
hidrógenos
ENZIMAS
Nomenclatura
2. TRANSFERASAS • Transfieren grupos funcionales
ENZIMAS
Nomenclatura
3. HIDROLASAS •Rotura de enlaces por medio de
agua
ENZIMAS
Nomenclatura
4. LIASAS •Rotura o formación de
moléculas sin intervención de
agua.
•Suele producirse adición a
dobles enlaces: C=C, C=O,
C=N
ENZIMAS
Nomenclatura
5. ISOMERASAS Cambio de posición de grupos
dentro de la molécula
ENZIMAS
Nomenclatura
6. LIGASAS O SINTETASAS Formación de enlaces con
rotura de ATP
ENZIMAS
Mecanismo de acción
Formación del Transformación
Activación deldel Liberación de los
complejo enzima- complejo
complejoE-S
enzima-
en E-P productos y de la
sustrato (enzima-productos)
sustrato enzima
ENZIMAS
Cinética enzimática
• Es la concentración de sustrato a la
que la velocidad de reacción es la
mitad de la velocidad máxima.
• Es una medida de la afinidad de la
enzima por el sustrato:
KM alta AFINIDAD baja
ENZIMAS
Cinética enzimática
¿Cómo calcular la
velocidad máxima?
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
• Moduladores ambientales
– pH
Cada enzima tiene su pH óptimo de actuación
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
• Moduladores ambientales
– pH
– T
La velocidad enzimática aumenta con la T
hasta un valor crítico en el que la proteína se
inactiva por desnaturalización
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
• Moduladores ambientales
– pH
– T La concentración salina puede llegar a precipitar
– s una proteína e inactivarla
• Cocatalizadores
• Activadores e inhibidores
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
• Moduladores ambientales
• Cocatalizadores
Algunas enzimas requieren la presencia de una molécula no
proteica para la catálisis: son las proteínas CONJUGADAS u
HOLOENZIMAS
APOENZIMA: parte proteica
Según la complejidad de la
porción no proteica:
• Cofactor
• Coenzima
• Grupo prostético
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
• Moduladores ambientales
• Cocatalizadores
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
• Moduladores ambientales
• Cocatalizadores
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
• Moduladores ambientales
• Cocatalizadores
GRUPO PROSTÉTICO
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
• Moduladores ambientales
• Cocatalizadores
• Activadores e Inhibidores
– REGULACIÓN ALOSTÉRICA La unión no covalente de una
molécula a la enzima, en un
sitio diferente del centro
activo (sitio alostérico)
provoca un cambio
conformacional que modifica
la afinidad de la enzima por el
sustrato.
El regulador alostérico puede
ser activador o inhibidor
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
• Moduladores ambientales
• Cocatalizadores
• Activadores e Inhibidores Púlsame
– REGULACIÓN ALOSTÉRICA
Las enzimas alostéricas son
grandes, oligoméricas y su cinética
no se ajusta a la curva de Michaelis-
Menten, por presentar
cooperativismo:
La unión del sustrato a un centro
activo favorece la unión de más
sustratos a los demás centros
activos de las demás subunidades.
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
• Moduladores ambientales
• Cocatalizadores
• Activadores e Inhibidores
– REGULACIÓN ALOSTÉRICA
TIPOS
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
• Moduladores ambientales
• Cocatalizadores
• Activadores e Inhibidores
– REGULACIÓN NO ALOSTÉRICA (ISOSTÉRICA)
• El inhibidor o activador actúa sobre el centro activo.
• La enzima muestra una cinética de Michaelis-Menten, aunque
alterada respecto de la gráfica normal.
• Puede ser:
• IRREVERSIBLE: si el enzima queda modificado
covalentemente, alterando su estructura terciaria. Su
reversión requiere la acción enzimática.
• REVERSIBLE: La inactivación no es permanente.
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
⚫ INHIBICIÓN IRREVERSIBLE
– Ejemplo: zimógenos o proenzimas
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
⚫ INHIBICIÓN IRREVERSIBLE
–Ejemplo: compuestos organofosforados:
• Actúan sobre enzimas serínicas
• Únicamente sobre la Ser activa
• Insecticidas: Parathion, Malathion
• Inhibidores de la Acetilcolinesterasa
•Neurogases
DFP:
Diisopropil fluorofosfato H3C CH3
Ser CH CH2 OH CH
Los animales envenenados Ser CH CH2 O P O
con este gas quedan H3C CH3 CH
paralizados, debido a la CH H3C CH3
imposibilidad de transmitir F P O
adecuadamente los
CH
impulsos nerviosos. H3C CH3
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
⚫ INHIBICIÓN REVERSIBLE
– La inactivación no es permanente.
– Según su modo de actuación puede ser:
⚫ Competitiva: se unen al centro activo del enzima
⚫ Acompetitiva: se une al complejo E-S
⚫ No competitiva: puede unirse a ambos
E+S E-S E-P
Ic Iac
Inc
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
• INHIBICIÓN REVERSIBLE: COMPETITIVA
– El inhibidor se fija al centro activo de la enzima libre, impidiendo la fijación del substrato.
– Los inhibidores compiten con el sustrato por el centro activo, debido a su similar estructura espacial.
– Se revierte su efecto aumentando la concentración de sustrato
Cinética de la inhibición competitiva
VM: Constante
KM: Aumenta
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
• INHIBICIÓN REVERSIBLE: ACOMPETITIVA
– El inhibidor se une al complejo E-S, inactivándolo.
– La inhibición acompetitiva es poco frecuente en las reacciones de un
solo sustrato, pero es corriente en las reacciones de dos sustratos.
Cinética de la inhibición acompetitiva
VM: disminuye
KM: disminuye
ENZIMAS
Factores que influyen en la actividad enzimática
⚫ INHIBICIÓN REVERSIBLE: NO COMPETITIVA
– El inhibidor se fija a la enzima independientemente de que lo haga o no el
substrato; el inhibidor, por tanto, no impide la fijación del substrato a la
enzima, pero sí impide la acción catalítica.
– Esta inhibición se caracteriza por que no se puede revertir el efecto del
inhibidor, aumentando la concentración del substrato.
– Ejemplo : inhibición de la deshidrogenasa del gliceraldehido-3-fosfato por
la yodo-acetamida:
Enzima-SH + I-CH2 - CONH2 Enzima-S-CH2 - CONH2 + IH
Cinética de la inhibición No competitiva
VM: Disminuye
KM: Permanece igual
ENZIMAS: Isoenzimas
• Es un modo de regulación que consiste en la existencia de distintas
formas moleculares de una misma enzima que presentan o muestran
especificidad por el mismo sustrato y realizan la misma función.
• Su distribución varía con los tejidos y la localización subcelular, de
forma que unas se encuentran en el citoplasma, otras en las
mitocondrias, algunas en cloroplastos, etc.
• Se diferencian entre sí por su composición de aminoácidos, al estar
codificadas por genes distintos (con un origen evolutivo común, por
duplicación génica)
ENZIMAS: Isoenzimas
La lactato deshidrogenasa cataliza la transformación de pirúvico
a láctico, que se produce en condiciones de anoxia, dando lugar a
una fermentación a partir de la glucosa.
ENZIMAS: Isoenzimas
Está formada por 5 isoenzimas, con el mismo peso molecular, con
una estructura tetramérica: combinaciones de 2 tipos de cadenas,
M y H.
LDH-1 (H4): en corazón, músculos y eritrocitos.
LDH-2 (H3M): en sistema retículoendotelial y leucocitos.
LDH-3 (H2M2): en pulmones.
LDH-4 (HM3): en riñones, placenta y páncreas.
LDH-5 (M4): en hígado y músculo esquelético.
ENZIMAS: Isoenzimas
⚫ Estas isoenzimas presentan carácterísticas cinéticas distintas.
KM piruvato baja (afinidad alta) Tejido especializado en el uso
M4 V máx alta anaeróbico de la glucosa con
alta formación de lactato
KM piruvato alta (afinidad baja) Especializado en el uso
aeróbico del pirúvico. Sólo se
H4 emplea la ruta anaeróbica en
V máx pequeña
emergencias.
Enzimología Clínica
⚫ Es la aplicación del conocimiento de las
enzimas en el diagnóstico, tratamiento,
evolución y pronóstico de las enfermedades.
⚫ Se utilizan como marcadores de ciertas
patologías
⚫ En el diagnóstico de enfermedades genéticas
PRINCIPALES ENZIMAS SÉRICAS EN EL
DIAGNÓSTICO CLÍNICO
ENZIMA SÉRICA PRINCIPAL USO DIAGNÓSTICO
Aminotransferasas
Aspartato aminotransferasa (TGO) Infarto de miocardio
Alanina aminotransferasa (TGP) Hepatitis viral
Amilasa y lipasa Pancreatitis aguda
Creatina kinasa (CPK) Trastornos musculares e infarto de
miocardio
Gama glutamil transpeptidasa (GGT) Enfermedades hepáticas
Alcoholismo
Deshidrogenasa láctica (LDH) Infarto de miocardio
(isoenzimas)
Fosfatasa ácida Carcinoma metastásico de próstata
Fosfatasa alcalina Trastornos óseos y enfermedades
(isoenzimas) hepáticas obstructivas 47
CONCLUSIONES
• Las enzimas son catalizadores biológicos eficaces y
altamente específicos
• El análisis de las enzimas plasmáticas ayudan al
diagnóstico, pronóstico y evolución de las
enfermedades
• A través de la terapia génica se logra subsanar las
deficiencias o los defectos en la función de las enzimas
