INFORME DE LABORATORIO Nº 4
MANEJO DE ANIMALES DE LABORATORIO
CURSO : FARMACOLOGÍA ALIMENTARIA
CARRERA: NUTRICIÓN Y DIETÉTICA
2023 - I
I. INTRODUCCIÓN
En investigación, ha estado utilizando animales de laboratorio para la investigación médica y
científica durante muchos años. Sin embargo, el uso de animales en el laboratorio ha sido
controvertido debido a cuestiones éticas en torno a su uso. Los animales de laboratorio se someten a
una serie de procedimientos que pueden alterar su homeostasis, afectando su fisiología y
comportamiento. Es importante considerar el manejo y la habituación diarios antes de los
procedimientos para minimizar el estrés y la incomodidad tanto para los animales como para la
persona (1). Cuando se trata de la administración de fármacos, es un tema amplio con diferentes
técnicas, métodos y vías de administración para diferentes propósitos (2).
El uso de ratones de laboratorio como modelos animales en farmacología enfatiza la importancia de
las pruebas con animales para comprender los efectos y la seguridad de los medicamentos en
humanos. Sin embargo, esto puede presentar algunos desafíos y limitaciones asociados con el uso de
animales de laboratorio en la investigación, como la variabilidad individual en la respuesta a los
medicamentos y los posibles efectos secundarios (3).
En cuanto a la regulación sobre el uso experimental de animales, se debe asegurar el bienestar de los
animales utilizados en investigación y se deben seguir estándares éticos y de calidad en su manejo y
uso. Se deben utilizar medidas para minimizar el estrés y el dolor de los animales durante el estudio y
la monitorización continua de los animales durante el procedimiento anestésico (4).
II. OBJETIVOS
● Manejar algunos animales de laboratorio de uso más frecuente.
● Conocer y manejar apropiadamente los modelos experimentales.
● Aprender a observar el comportamiento que exhiben los organismos en condiciones
normales.
● Aprender el sacrificio y recolección de muestras de animales de laboratorio.
III. MATERIALES
a) Materiales de laboratorio
● 3 Ratas
● 5 Ratones
● Guantes de latex
● Mascarilla
● Aguja tuberculina y de 5 ml
● Heparina
● Sondas orogástricas para animales
● Pentobarbital
● Equipo de disección
IV. METODOLOGÍA
V. RESULTADOS
Para la prueba con los ratones se les administró el anestésico pentobarbital. En la siguiente
tabla los datos obtenidos:
RATONES
VÍA DE PESO VOL. Tiempo de
INDIVIDUO Observación *
ADMINISTRACIÓN (grs) (ml) efecto
Nº1: Blanco Oral 40.5 0.15 +20 min 0
grado de
sedación**:
● Etapa 4
Nº2: Cabeza Oral 37.8 1.00 instantáneo +++
grado de
sedación:
● Murió al
instante
Nº3: Cola Intramuscular 38.7 0.15 7 min +++
grado de
sedación:
● Etapa 0
Nº4: Lomo Subcutánea 41.2 0.15 3:20 min +++
grado de
sedación:
● Etapa 1
Nº5: Pata Intraperitoneal 38.7 0.15 2:20 min +++
grado de
sedación:
● Etapa 0,
muerte
posterior
*Evaluación de la intensidad del efecto
sin efecto = 0
Leve = +
Moderado = ++
Intenso = +++
**Grado de sedación (5)
Para la prueba con las ratas se les administró el anestésico Halatal (ketamina). En la siguiente
tabla los datos obtenidos:
RATAS
VÍA DE PESO Tiempo de
INDIVIDUO VOL. (ml) Observación*
ADMINISTRACIÓN (grs) efecto
Nº1: Cola Subcutánea 111.0 Agua: 0.5 – –
Nº2: Cabeza Intramuscular - oral 223.8 Agua: 0.1 – –
Agua: 2.0
Nº3: Blanco Intraperitoneal 215.0 Agua: 0.15
Med: 0.45 +20 min 0
grado de
sedación**:
● Etapa 3
*Evaluación de la intensidad del efecto
sin efecto = 0
Leve = +
Moderado = ++
Intenso = +++
**Grado de sedación (5)
VI. DISCUSIÓN
En las tablas anteriores se muestra el resultado de las vías de administración que se le colocó el
medicamento a las ratas y ratones, donde se ve que con los ratones el que murió al instante fue al que
se le administró por vía oral esto se puede deber a que fue una dosis alta del medicamento, mientras
que los demás tuvieron efecto entre 2 a más de 20 minutos y todos tuvieron un grado de sedación
intenso efecto el que murió al instante. Con respecto a las ratas el que murió solo se le administró el
medicamento por vía intraperitoneal ya que a las restantes solo se les administró agua destilada, se
empezó a notar desvanecimiento pasando los 20 minutos donde su grado de sedación fue moderado,
vimos que le tomó más tiempo que al ratón morir ya que se le administró una dosis no tan alta del
medicamento. Los ratones, son los animales más difíciles para el logro de una verdadera anestesia
quirúrgica sin que se produzca la muerte. Algunas de las causas más comunes de los fallos son la
excesiva pérdida de calor, la hipotermia y las rápidas alteraciones de intercambios de gases(6). Por
otro lado, la dosis y el tiempo de acción de los fármacos varían según la vía de administración (cuadro
1) (7); por ejemplo, mediante la vía intravenosa se aplican analgésicos como alfaxalona- alfadolona,
metohexitona, tiopentona, pentobarbital sódico, entre otros. La alfaxalona se administra 20 mg/kg IV
por inyección lenta, el cual induce una anestesia profunda con analgesia en 10 segundos. Su efecto
máximo es de 5 a 8 minutos, la duración de sueño es de 10 min y el tiempo de recuperación total es de
20-30 minutos. La metohexitona, es de 6 mg/kg por inyección IV lenta, el cual induce la anestesia en
10 segundos; su efecto dura de 3-4 min y la recuperación completa tarda unos 50 minutos; mientras
que el pentobarbital sódico, puede administrarse mediante la vena de la cola de 35 a 70 mg/kg según
el sexo, la cepa, entre otros( ). En la vía intraperitoneal, también se administra pentobarbital sódico,
sin embargo, la dosis que se aplica es mucho más alta (de 50 a 90 mg/kg) en comparación con los
niveles de anestesia para perros y gatos (30-35 mg/kg). Por vía intramuscular, mencionan que
mediante la administración de ketamina a 44 mg/kg para ratones se logra la anestesia quirúrgica, y la
recuperación de los animales es entre 15-30 min aproximadamente( 6).
En cuanto a las ratas, se observa que las dosis son menores en comparación a la de los ratones (cuadro
2). Por ejemplo, la dosis de pentobarbital sódico para ratas es de 30 a 60mg/kg para vías IV e IP; y de
Ketamina es de 50 a 100 mg/kg para vía intraperitoneal(6).
Cuadro 1
Fuente: Servicio de cirugía e investigación experimental- Hospital del niño San Borja
Cuadro 2
Fuente: Servicio de cirugía e investigación experimental- Hospital del niño San Borja
Por otra parte, la autopsia en los animales de experimentación es un recurso valioso para
obtener información sobre la causa de la muerte, el nivel de enfermedad o lesión, el impacto
del tratamiento y para identificar cualquier condición patológica previamente no detectada.
Existen diferentes técnicas de necropsia en animales de experimentación, y para su
realización se toman en cuenta ciertas consideraciones como, la especie animal, los datos de
la historia clínica, equipo de bioseguridad en este caso disponer de las condiciones de un
laboratorio de patología con campana de bioseguridad y la bioseguridad personal. En el caso
de ratones, se debe fijar al animal en una placa de disección, en posición cubito ventral, esto
con el propósito de tener comodidad para realizar la necropsia. Asimismo, se aplican tres
incisiones; en la primera, se examina la piel y el tejido subcutáneo buscando lesiones o
cambios morfológicos, aquí se confirman las lesiones observadas en el examen clínico. En la
segunda, se apertura de cavidad abdominal; se toma la pared abdominal con una pinza cerca
del cartílago xifiode levantándose firmemente, se realiza una incisión para dejar entrar el aire
para separar las vísceras de la pared abdominal. En la tercera incisión, se examinan los
órganos in situ, donde se procede a cortar la sínfisis mandibular, se examina la cavidad oral.
Además, se retrae suavemente hacia abajo para extraer lengua, laringe, tráquea y esófago de
la cabeza y el cuello; y , posteriormente, se continúa retrayendo para separar el corazón, el
timo, y pulmones con la aorta para que finalmente se extraiga el bloque torácico(7).
Figura 1.- Técnicas de necropsia en ratones. (Fuente: Departamento de Patología, Instituto
Nacional de Higiene Rafael Rangel. Diplomado Patología en Animales de Experimentación,
Julio-octubre, 2017).
En las ratas, como primer paso se realiza un examen externo donde, incluye la evaluación de su
condición corporal. Además, se debe pesar al animal, hacer un registro de cualquier lesión externa,
revisar y registrar los cambios de color de la piel y las mucosas. Asimismo, examinar los ojos, la boca,
los dientes, las aberturas nasales, la región ano-genital (para buscar signos de diarrea, prolapso rectal o
vaginal) y registrar cualquier anormalidad. Posterior a ello, se da inicio a la apertura de las cavidades
y extracción de órganos y vísceras. Después de extraer todas las vísceras internas de las cavidades
torácica y abdominal, se lleva a cabo un examen minucioso de todos los órganos, que es uno de los
aspectos más críticos de la autopsia. Durante este proceso, se registran los pesos ya mencionados y se
realiza una evaluación subjetiva de la forma y condición de cada órgano (8).
Figura 2.- Técnicas de necropsia en ratas. (Fuente: Departamento de Patología, Instituto
Nacional de Higiene Rafael Rangel. Diplomado Patología en Animales de Experimentación,
Julio-octubre, 2017).
VII. CONCLUSIONES
● Cuando se trata de ciertos animales de laboratorio, como los ratones, es importante
recordar que el uso de animales en la investigación es un tema controvertido y se
deben seguir los estándares éticos y de bienestar animal. Realizado por personal
capacitado y experimentado y debe seguir las prácticas establecidas para minimizar el
dolor y la angustia de los animales (4). Es importante que todas las investigaciones
con animales se realicen de manera responsable y de acuerdo con los estándares
éticos y de bienestar animal establecidos.
● Sobre el conocimiento y el manejo apropiado de los modelos experimentales en
ratones de laboratorio, es esencial garantizar la validez y relevancia de los resultados
obtenidos. Es importante entender que los ratones de laboratorio son una herramienta
importante para la investigación científica, pero también son animales vivos que
merecen respeto y cuidado. El manejo adecuado requiere personal capacitado y
experimentado que pueda garantizar el bienestar de los animales y minimizar los
efectos negativos sobre su salud. Además, para obtener resultados precisos y
relevantes, es necesario conocer las características específicas de los ratones de
laboratorio, como su genética y comportamiento.
● Aprender a observar el comportamiento que exhiben los organismos en condiciones
normales en ratones de laboratorio es que se necesita una mejor comprensión de su
fisiología, comportamiento y respuesta a diversos estímulos. La observación
cuidadosa de los ratones de laboratorio en condiciones normales es importante para
proporcionar una base para evaluar los resultados experimentales, ya que cualquier
cambio en el comportamiento o la fisiología del animal puede ser un indicador de la
eficacia o los efectos secundarios de un tratamiento o sustancia en particular.
● Aprender a sacrificar y recolectar muestras de animales de laboratorio, en este caso
ratones, es un proceso crítico y delicado que debe ser realizado por personal
capacitado y experimentado. La recolección de muestras y la eutanasia de los
animales son partes importantes del proceso de investigación porque brindan
información valiosa sobre la fisiología y el comportamiento de los animales. Sin
embargo, es importante asegurarse de que se lleven a cabo de forma ética y con
respeto por el bienestar animal.
VIII. CUESTIONARIO
1) ¿Por qué es importante saber manejar los animales de laboratorio?
Los animales son imprescindibles en la investigación biomédica, ya que permiten
avanzar en el conocimiento de enfermedades, los animales son seres de organismo
complejo y van a permitir el estudio de la enfermedad en seres vivos más parecidos a
nosotros. Luego de hacer el estudio con ellos se puede conjeturar lo que sucederá con
los humanos (8).
2) ¿Cuáles son los cuidados ambientales a considerar en animales de experimentación?
Los cuidados ambientales a considerar en animales de experimentación son las
condiciones ambientales adecuadas: el entorno en el que se mantienen los animales
debe ser lo más similar posible a su hábitat natural y satisfacer sus necesidades
especiales, como temperatura, iluminación, humedad, ventilación y ruido; vivienda:
los animales deben tener suficiente espacio para su tamaño y suficiente espacio para
el movimiento y actividades como el juego y la exploración. Además, es importante
que la sala de estar esté limpia y libre de todas las sustancias tóxicas que puedan
afectar la salud de los animales; alimentación: los animales deben disponer de
alimento suficiente para cubrir sus necesidades nutricionales y proporcionarles los
nutrientes que necesitan para su crecimiento y desarrollo. Además, el acceso a agua
limpia y fresca es fundamental para la salud y el bienestar; control de enfermedades y
parásitos: es importante implementar medidas preventivas como la limpieza y
desinfección periódica de los locales y el tratamiento veterinario adecuado para
combatir enfermedades y parásitos que puedan afectar la salud de los animales;
atención y tratamiento veterinario: los animales deben recibir atención veterinaria
regular, incluidos controles de salud, vacunas y medicación si es necesario. Además,
el personal de manejo debe estar capacitado para manejar y cuidar adecuadamente a
los animales y minimizar el estrés y el dolor que pueden experimentar durante los
procedimientos experimentales (9).
3) ¿Cómo se define un animal no tradicional de experimentación (ANTE)?
Un animal no tradicional de experimentación (ANTE) se define como una especie
animal que no se utiliza tradicionalmente en la investigación y la docencia, y que
puede ser mantenida, manipulada o sacrificada en relación con el proyecto de
investigación. Esto incluye, entre otros, invertebrados, peces, anfibios, reptiles,
pájaros, roedores inusuales, conejos, cerdos, primates y animales genéticamente
modificados.
Es importante mencionar que aunque estos animales no suelen ser utilizados en
experimentos, esto no significa que deban ser subestimados o tratados con falta de
respeto. Por el contrario, su manipulación y experimentación deben seguir los mismos
principios éticos y cuidados que los animales normales de laboratorio, ya que todos
los animales deben ser tratados con respeto y consideración por su bienestar (10).
4) Investigue cómo se debe realizar la disposición final de los animales de
experimentación
La disposición final de los animales de experimentación debe realizarse de manera
cuidadosa y responsable. Para ello, se deben seguir los siguientes pasos: Identificar y
registrar los animales que van a ser sacrificados, y llevar un registro detallado de las
condiciones en las que se encuentran. Seleccionar el método de sacrificio más
adecuado para cada especie animal, teniendo en cuenta las normativas y regulaciones
vigentes. Llevar a cabo el sacrificio de manera rápida y efectiva, asegurándose de que
el animal muera sin dolor ni sufrimiento innecesario. Realizar la eliminación
adecuada de los residuos biológicos generados durante el proceso de sacrificio y
disposición de los cadáveres de manera apropiada. Siempre que sea posible, utilizar
métodos de eliminación que minimicen el impacto ambiental y cumplan con las
normativas y regulaciones vigentes (11).
IX. REFERENCIAS
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sujeción de ratas y ratones de laboratorio. Spei domus, 9(19), 39–47.
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sustancias. Umh.es.
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3. Gonçalves, I. D., Quincoces, J. A., Santos, R. P., Santos, G. A. A., Olave, E., & Pardi, P. (s/f).
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411dad