UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA
“Norte de la Universidad Peruana”
FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL
Shuitute s/n Chacapampa – Celendín - Telefax: 076-555307
Practica N° 01
PREPARACION DE UN MEDIO DE CULTIVO BACTERIANO
Microbiología
Alumna:
Leiva Cahuana Marisol Antuaneth.
I. INTRODUCCIÓN.
El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de los
microorganismos. La composición precisa dependerá de la especie que se quiera cultivar, porque
las necesidades nutricionales varían considerablemente. Hay microorganismos muy poco exigentes
que crecen bien en medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que necesitan
determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer. MERK (2002)
II. OBJETIVOS
o Saber preparar agar mac conkey (asilar enterobacterias)
o Aprender a preparar los medios de cultivo más comunes que se utilizan para el cultivo
de los microorganismos.
III. MARCO TEÓRICO.
III.1. Medios de cultivo
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros
componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos. La diversidad metabólica de estos es tan grande que la variedad de
medios de cultivo es enorme, no existiendo un medio de cultivo universal adecuado para
todos ellos, ni siquiera refiriéndonos a las bacterias con exclusividad.
III.2. constituyentes habituales de los medios de cultivo
A continuación, se da una idea general sobre algunos de los constituyentes habituales de los
medios de cultivo. AGAR. Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios
de cultivo. En el agar bacteriológico el componente dominante es un polisacárido que se
obtiene de ciertas algas marinas y que presenta la indudable ventaja de que a excepción de
algunos microorganismos marinos, no es utilizado como nutriente. Un gel de agar al 1-2%
se licua alrededor de los 100ºC y se gelifica alrededor de los 40ºC, dependiendo de su grado
de pureza.
III.2.1. extractos.
Su preparación consiste en que ciertos órganos o tejidos animales o vegetales (p.e. carne,
hígado, cerebro, semillas, etc.) son extraídos con agua y calor y posteriormente
concentrados hasta la forma final de pasta o polvo. Estos preparados deshidratados son a
menudo empleados en la elaboración de los medios de cultivo. Los más utilizados son el
extracto de carne, de levadura y el de malta.
III.2.2. peptonas.
Son mezclas complejas de compuestos orgánicos, nitrogenados y sales minerales, que se
obtienen por digestión enzimática o química de proteínas animales o vegetales (soja caseína
carne, etc.). Las peptonas son muy ricas en pépticos y aminoácidos, pero pueden ser
deficientes en determinadas vitaminas y sales minerales.
[Link] corporales.
Con frecuencia es necesario añadir a los medios de cultivo de algunos patógenos sustancias
como sangre completa, sangre desfibrinada, plasma o suero sanguíneo, sobre todo para
conseguir el primer aislamiento a partir del hospedador. La sangre no puede ser esterilizada,
y por tanto debe de ser obtenida en condiciones asépticas directamente de un animal sano, y
adicionada al medio de cultivo después de que este haya sido auto clavado. Los fluidos
corporales no solo aportan factores de crecimiento sino que también aportan sustancias que
neutralizan a inhibidores del crecimiento de algunas bacterias. Un ejemplo podría ser la
catalasa presente en las células sanguíneas destruye el peróxido de hidrógeno que algunas
bacterias que no poseen este enzima acumulan como producto del metabolismo del
oxígeno.
[Link] amortiguadores.
Para mantener el pH dentro del rango optimo del crecimiento bacteriano a veces, es
necesario añadir algunos componentes al medio de cultivo. Debido a que la mayoría de as
bacterias son neutrófilas, se suelen emplear sales del tipo de los fosfatos bisodicos ò
bipotásicos u otras sustancias como las peptonas para prevenir la desviación del pH.
[Link] de ph.
Con el objeto de poder detectar variaciones en el pH debido a fermentaciones u otros
procesos, se hace necesario a veces añadir indicadores acido-base que nos lo indiquen.
[Link] reductores.
Con el objetivo de crear en los medios de cultivo condiciones que permitan el desarrollo de
los gérmenes microaerofilos ò anaerobios se añaden estos agentes reductores siendo, los
más empleados la cisteina y el tioglicolato entre otros.
[Link] selectivos.
La adición de determinadas sustancias a un medio de cultivo puede convertirlo en
selectivo. Así, por ejemplo, la adición de cristal violeta, sales biliares, azida sodica, telurito
potasico, antibióticos, etc., a la concentración adecuada hará que actúen como agentes
selectivos frene a determinados microorganismos.
III.3. tipos de medios de cultivo medios generales.
Son aquellos que permiten el crecimiento de una gran variedad de microorganismos.
[Link] de enriquecimiento.
Son aquellos que favorecen el crecimiento de u determinado tipo de microorganismo sin
llegar a inhibir totalmente el crecimiento de los demás.
[Link] selectivos.
Son aquellos que permiten el crecimiento de un tipo de microorganismos determinado,
inhibiendo el desarrollo de los demás.
[Link] diferenciales.
Son aquellos en los que se pone de manifiesto propiedades que un determinado tipo de
microorganismos posee.
IV. MATERIALES Y MÉTODO.
a) Materiales.
o Balanza
o Mechero
o Probeta 500 mil
o Matraz
o Agitador
o Papel indicador
o Tubos de ensayo
o Algodón
o Vaso de precipitados
o Vidrio de reloj
o HCI
o NaOH
b) Método
o En la balanza medir 50.03 g de agar mac conkey y mezclar con 1L de agua en dos vasos
de precipitación.
o Reposar 10 a 15 minutos.
o Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1
minuto para disolverlo por completo.
o Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lbs de presión) durante 15 minutos.
o Enfriar aproximadamente a 45°C. Vaciar en cajas de Petri estériles.
o Conservar en refrigeración de 2 a 8ºC, hasta la siembra de este cultivo.
V. CONCLUSIONES
En conclusión, hemos podido ver como se realiza un cultivo mac conky, en este
experimento, lo realizamos de acuerdo con lo que el docente nos explica sobre cada paso
que realizaba.
