LIPIDOS TOTALES Código: 8001602

Reactivo líquido para la determinación del índice de Lípidos Totales en Suero

PRESENTACION 200ml L.O. 530 LIQUIDO ESTABLE

Para uso de Diagnóstico In Vitro MATERIAL REQUERIDO PERO NO SUMINISTRADO

1. Acido Sulfúrico concentrado de grado ACS.
RESUMEN Y EXPLICACIÓN DE LA PRUEBA 2. Incubador a 100° C.
Lípidos Totales se refiere a los materiales lípidos que son 3. Micropipeta de 1.0 uL.
extraídos directamente del suero con solventes orgánicos. Su 4. Pipetas ó dosificadores de 1.0 mL y 2.0 mL
determinación puede ser usada para la evaluación de 5. Tubos de ensayo, tablero y cronómetro.
hiperlipidemia. Aún un aumento ligero en el nivel de Lípidos
indicará la necesidad para más pruebas específicas de lípidos, Por CONDICIONES DE LA REACCION
ejemplo, colesterol, triglicéridos. El presente procedimiento está LONGITUD DE ONDA 530nm
basado en un método modificado de sulfofosfovanilin como SELECCIÓN DE FILTRO 510-560 NM
describe Frings et al. TIPO DE REACCION PUNTO FINAL
TEMP. DE INCUBACION 100 ° C
TIEMPO DE INCUBACION 10 MINUTOS
FUNDAMENTOS DEL METODO VOLUMEN DE LA MUESTRA 10 uL
La prueba de sulfofosfovnilin tiene el siguiente mecanismo de VOLUMEN H2SO4 1.0 mL
reacción (4) : VOLUMEN DEL REACTIVO A COLOR 2.0 mL
VOLUMEN TOTAL 3.01 mL
1. Los lípidos no stuados reaccionan con ácido sulfúrico NORMAL BAJO 400 mg/dL
NORMAL ALTO 800 mg/dL
concentrado para producir iones de carbono.
VALOR DEL CALIBRADOR 600 mg/dL
2. Vanilin reacciona con ácido fosfórico para producir esters
fosfatos.
PROCEDIMIENTO AUTOMATIZADO:
3. El ion de carbono y esters fosfatos forman un complejo
Favor de referirse a las aplicaciones específicas de los instrumentos para
en color rosa que absorbe al máximo de 530 nm. aplicaciones.
4. La intensidad de color a 530 nm es directamente
proporcional a la concentración total de lípido. PROCEDIMIENTO MANUAL:
1. Etiquete los tubos BLANCO DE REACTIVO, CALIBRADOR,
REACTIVOS MUESTRA 1, etc.
2. Coloque 10 uL de la muestra en los tubos debidamente
INGREDIENTES ACTIVOS: 20 mM de Vanilin de Acido fosfórico.
etiquetados. Use D – H20 como muestra para blanco del
Estabilizador incluído
reactivo.
3. Añada 1.0 mL de ácido sulfúrico a cada tubo y mezcle bien.
PRECAUCIONES: Causa irritación. Evite contacto con la piel, ojos CUIDADO. Aplique el debido cuidado en el manejo del ácido.
y ropa. En caso de contacto, lave con abundante agua. 4. Caliente a 100° C por 10 minutos.
5. Coloque en agua fria por 5 minutos.
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD: Almacene a 15° - 30°C. 6. Añada 2.0 ml. de reactivo de Lípidos Totales y mezcle bien.
Estable hasta la fecha de caducidad si está bien cerrado. CUIDADO: Añada el reactivo a color lentamente y dirija el tubo
PROTEJASE DE LA LUZ. hacia abajo. Al mezclar con ácido sulfúrico generará calor.
Tenga precaución.
DETERIORO: El reactivo debe ser una solución clara, sin olor. La 7. Coloque en agua fría por 2 minutos.
turbidez o un color café indicarán deterioro. 8. Ajuste el instrumento a cero a 530 nm usando el blanco de
reactivo.
EQUIPO REQUERIDO 9. Lea y registre los valores de absorbancia para el calibrador,
control y desconocidos.
Espectrofotómetro manual o automático capaz de leer a 530 nm.
NOTA: Para una lectura directa del instrumento, coloque la lectura a la
RECOLECCION DE LA MUESTRA concentración estándar y lea las concentraciones desconocidas
PRECAUCIONES: directamente.
1. Se recomienda el suero de ayuno después de 24 horas.
2. Las muestras fuertemente hemolizadas no deben usarse. NOTA DEL PROCEDIMIENTO: La linealidad se extiende a 1250 mg/dL.
Las muestras que exceden este valor deben ser diluidas con 0.9% de
ALMACENAMIENTO DE LA MUESTRA solución de cloruro de sodio y ensaye de nuevo. Multiplique el resultado
El Equipo de Lípidos Totales aparece estable en suero por 48 horas a de la prueba por el factor de dilución para obtener el resultado final.
2° - 8° C. NO CONGELE.
ESTABILIDAD DEL PRODUCTO DE LA REACCION FINAL.
ADITIVOS Las muestras de la prueba deben leerse dentro de 10 minutos después
No se necesitan aditivos ó preservativos especiales. del desarrollo del color.

SUSTANCIAS INTERFERENTES
Young et al (5) han revisado los efectos de medicamento en Lípidos
Totales.

PROCEDIMIENTO
MATERIALES SUMINISTRADOS
Reactivo a color de Lípidos Totales y Calibrador Total de lípidos.
CALIBRACION. SENSIBILIDAD:
No es necesario desarrollar una curva de calibración con este Este procedimiento tiene una sensibilidad de 1.3 mg/dL por 0.001
procedimiento ya que la reacción es lineal en la variación de 0-25 unidad de absorbancia.
mg/dL, un calibrador y un blanco de reactivo deben determinarse con
cada juego de desconocidos ensayados. UN CALIBRADOR DE
LIPIDOS TOTALES, el cual se provee para este propósito. Las BIBLIOGRAFIA:
muestras que exceden 25mg/dL deben diluírse con D-H2O y ensaye 1. Tietz, N.W., Fund. Of Clin Chem. 2nd. Ed., W.B. Saunders,
de nuevo multiplicando el resultado de la prueba por el factor de Co., Philadelphia 1982, p 492.
dilución para obtener el resultado final. 2. Frings, C.S., y Dunn, R.T., Am J. Clin. Pat 53,89 (1970)
3. Frings, C.S., Fendley, T.W., Dunn, R.T., y Queen, C.A., Clin.
CONTROL DE CALIDAD: Chem 18, 673 (1972).
La confiabilidad de los resultados de la prueba debe ser monitoreada 4. Knoght, J.A., Anderson., S y Rawling, J.M., Clin. Chem. 18,
en la forma rutinaria usando materiales de control de calidad 199, (1972)
adecuados ( Normal y Anormal ) analizados en la misma manera que 5. Young, D.S. Pestaner, L.C., y Gibberman, V., Clin. Chem.
los desconocidos. La falla al alcanzar los valores ensayados del Vol. 21, p.368 D (1975)
control de suero preparado fresco debe ser investigada antes de que
los valores del paciente sean reportados.

CALCULO DE RESULTADOS

La siguiente ecuación se usa para determinar las concentraciones

desconocidas:

Abs. Desc.
Desconocido (mg/ dL) = ____________ X Conc. Cal. (mg/dL )
Abs. Cal.

EJEMPLO:
En una serie de pruebas, el calibrador tuvo una absorbancia = 0.464
mientras que la Abs. Desconocida = 0-409. La concentración de
Lípidos Totales de la desconocida es:

0.409
_______ = X 600 mg/dL = 529 mg/dl
0.464

LIMITACIONES.
La reacción de sulfofosfovanilin es específica para lípidos no saturados
solamente (4) los ácidos de saturación de grasa no reaccionarán. Los
detergentes y jabones pueden interferir con la reacción. Todo el
material de vidrio debe ser enjuagado con agua destilada antes de
usarse.

VALORES ESPERADOS: 400 – 800 MG/dL

La variación representa el 95% de intervalos de confiabilidad para las

muestras obtenidas de una población clínicamente normal. Se
recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores
esperados.

CARACTERISTICAS DE FUNCIONAMIENTO:

LINEARIDAD. Este método el lineal a 1250 mg/dL

PRECISION: Los sueros control normal y anormal fueron ensayados

20 veces cada uno para establecer la precisión de un solo ensayo y 10
días para establecer la precisión de ensayo a ensayo.

UN SOLO ENSAYO

MEDIA DESV. STD. % CV

NORMAL 525 20 3.8
ANORMAL 389 16 4.1

DE ENSAYO A ENSAYO

NORMAL 532 24 4.5

ANORMAL 387 21 5.4

ESPECIFICIDAD:
Distribuido por:
Una comparación de este procedimiento de Lípidos Totales con otro
Grupo Industrial MexLab S.A. de C.V.
método ampliamente conocido reveló un 98% de correlación con
01800-111-4343
muestras en la variación normal y anormal.
www.grupomexlab.com
Rev. 07-2011