Generalidades de Virología

Dr. Manuel González

Docente Virología
Universidad de Guayaquil
 Contenido
• Historia de la virología.
• Concepto de virus.
• Estructura y morfología de los virus.
• Diferencia con otros microorganismos: Viriones, bacteriófagos,
priones.
 Virus: Historia

◼ Dimitri Ivanowsky
◼ Científico ruso
◼ Virus del Mosaico del
Tabaco
◼ 1892
◼ Demostró que el
agente causante de la
enfermedad no era
retenido por un filtro
de porcelana utilizado
para remover
bacterias.
 Virus: Historia
◼ Martinus Beijerinck
◼ 1898
◼ Científico holandés
◼ Obtuvo resultados
similares a Ivanowsky
◼ Aportación
◼ Agente causante más
pequeño que una
bacteria.
◼ Acuño el término Virus
 Virus: Historia
◼ Friederich Loeffler y
Paul Frosch
◼ 1898
◼ Científicos alemanes
◼ Estudiantes de Robert
Koch
◼ Aporte
◼ Agente causante no
podía ser retenido por
los filtros para retener
bacterias.
Virus: Historia
◼ Vilhem Ellerman y Olaf
Bang
◼ 1908
◼ Identificó virus como
agentes causante de
leucemia
◼ Peyton Rous
◼ 1911
◼ Virus como agentes
causantes de tumores
cancerosos sólidos
◼ “Rous Sarcoma Virus”
peste rosa
 Virus: Historia

◼ Frederick Twort
◼ 1915
◼ Describió un virus
◼ Virus de la viruela
 Virus: Historia

Felix d’ Hérelle
◼ 1917
◼ Acuño el término
bacteriofago
◼ Habilidad de formar
placas de lisis en
sembrados de bacterias
en placas Petri.
 Virus: Historia
◼ En humanos
◼ Virus causante de Fiebre
amarilla
◼ Carlos Juan Finlay
◼ Cubano-1880
◼ Walter Reed y Jesse
Lazear
◼ Estadounidenses -1899
◼ James Carroll
◼ Estadounidense – 1911
◼ Juan Guiteras
◼ Cubano - 1911
Virus: Historia
◼ Virus de la Influenza
◼ 1933
◼ Wilson Smith
◼ Christopher Andrews
◼ Patrick Laidlaw
 Concepto
• Virus = latín “veneno”.

• Características
• Carecen sistemas enzimáticos de producción de energía para síntesis de ácido
nucleico y proteínas.
• Pequeño tamaño – nanómetros.
• Estructura simple.

• “LOS VIRUS SON PARÁSITOS INTRACELULARES OBLIGADOS QUE NECESITAN

DE LA MAQUINARIA REPLICATIVA DE LA CÉLULA PARA REPRODUCIRSE Y
PRODUCIR PROGENIE”
Son organismos vivos?
• NO VIVOS - INERTES
• No cumplen ciclo biológico de vida:
• Nacer -- crecer -- desarrollarse -- morir.

• VIVOS
• Efectos sobre los hospedadores que infectan:
• Infección
• Enfermedad
• Cáncer

• Los virus están en el umbral entre lo vivo y lo inerte.

• “Los virus se consideran vivos cuando están dentro de la célula”

 Origen
• Teorías:

• Regresión celular
• Células parásitas que con el tiempo perdieron genes de replicación.

• Origen molecular-celular
• Fragmentos de ADN o ARN que escaparon de un organismo celular mayor

• Coevolución
• Aparecieron desde las primeras etapas de vida en el tierra.

• [Link]
Estructura
Ácido nucleico
• Contiene la información genética
del virus.

• Son la base de la infectividad del

virus.

• Puede ser DNA o RNA.

• Llamado también nucleoide.

• Si está asociado a proteínas forma

core viral.
Cápside
• Formada por pequeñas unidades llamadas capsómeros.
• Nucleocápside: ácido nucleico + cápside.

• Funciones:
• Protección del ácido nucleico.
• Permitir unión del virus con receptores en superficie de la célula.
• Estimulan la respuesta inmune.
• Reprimir la expresión de genes virales tempranos.
• Interacción espacial con la polimerasa viral.
Envoltura
• Cubierta de lipoproteinas de igual composición a la membrana
celular.
• Su presencia o no determina la resistencia del virus al medio externo
(importante para la transmisión).

• Funciones:
• Protección del ácido nucleico.
• Permitir unión del virus con receptores en superficie de la célula.
• Estimulan la respuesta inmune.
 Morfología
• Se conoce como simetría.
• Está dada por la estructura de la nucleocápside.
• Puede ser:
• Icosaédrica.
• Helicoidal.
• Mixta.
• Especial.
 Icosaédrica

• Poliedro regular 20 caras triangulares, 30

aristas y 12 vértices.

• Capacidad de rotación.

• Los capsómeros se sintetizan independiente

del genoma, no contacto directo entre
cápside y ácido nucleico – favorece formación
de cápsides vacías = virus no infeccioso.
Helicoidal
• Forma de cilindro.

• Capsómeros se sintetizan
alrededor del genoma, no
cápsides vacías.
Mixta
• Combina simetría icosaédrica y
helicoidal.

• Característica de las bacteriófagos.

Especial
• Forma características de cada virus.

Ladrillo= viruela Rabia=bala

• Virión: partícula viral completa e infecciosa.
• Bacteriófago: virus que infecta bacterias.
• Prión: es una proteína mal plegada capaz de transmitir su forma mal
plegada a otras variedades de la misma proteína.
• Viroide: son agentes infecciosos que no poseen proteínas ni lípidos y
están constituidos por una cadena cíclica corta de ARN.
• Virusoide: es un tipo de ARN infeccioso circular monocatenario que
requiere un virus auxiliar para infectar la célula.
 Clase 2
Dr. Manuel González
Docente de Virología
Temario
• Composición química.
• Clasificación de los virus.
• Acción de agentes químicos y físicos.
• Características genómicas.
• Inactivación, congelamiento, esterilización y desinfección.
 Composición química
• Los virus están compuestos de:

• Ácido nucleico.
• Proteínas.
• Glúcidos y lípidos.
Ácido nucleico
• Contiene la información genética
del virus.

• Son la base de la infectividad del

virus.

• Puede ser DNA o RNA.

• Llamado también nucleoide.

• Si está asociado a proteínas forma

core viral.
• Disposición:
• Simple cadena.
• Doble cadena.
• Segmentado.
• Parcialmente bicatenario.

• Polaridad:
• Positiva.
• Negativa
Actividad correctora de errores.

La ARN polimerasa no tiene actividad correctora de errores.

“LOS VIRUS CON GENOMA ARN TIENEN MAYOR TASA DE MUTACIÓN QUE LOS VIRUS CON GENOMA ADN”
Toda mutación produce cambios en las
propiedades biológicas del virus?
 Proteínas
• Constituyen la mayor parte del virus.
• Pueden ser: Estructurales y no estructurales.
 • Proteínas estructurales

• Mantienen la estructura del virus

• Pueden ser:
• 1.- De superficie
• Capsómeros
• Peplómeros (proyecciones de la envoltura o espículas)

• Funciones:
• Protección del genoma contra medio externo.
• Afinidad por los receptores de la célula (adsorción).
• Estimulan respuesta inmune.

• 2.- Internas
• Se ubican en la cara interna de la envoltura, debajo de la cápside.
• Pueden ser:
• Estructurales
• No estructurales
• Proteínas no estructurales
• No forman parte importante cualitativamente de la estructura viral.
• Enzimas requeridas para la replicación.
Glúcidos y lípidos
• Presentes en la envoltura viral.
 Efectos de los agentes físicos y químicos
sobre los virus
• Es importante conocer la sensibilidad o resistencia de los virus a
agentes físicos y químicos para:

• Determinar formas de transmisión.

• Usar métodos para inactivar virus en materiales, agua, etc.
• Conocer viabilidad de muestras para diagnóstico virológico.
• Conservar adecuadamente los virus para estudio, vacunas, etc.
 Agentes físicos
• 1.- Temperatura
• La mayoría de los virus son lábiles al calor (termolábiles).
• La vida media de la mayoría de los virus puede ser medida en:
• Segundos a 60°C
• Minutos a 37°C
• Horas a 4°C
• Días a -20°C
• Meses a -70°C
• años a -176°C (nitrógeno líquido).
• 2.- PH y medio iónico
• Los virus se conservan mejor en medios isotónicos y PH fisiológico,
aunque existen algunos que pueden soportar rangos amplios de PH y
fuerzas iónicas. Ej: enterovirus.
• 3.- Radiaciones
• La radiación ultravioleta y la ionizante alteran el genoma viral e
inactivan el virus.
 Agentes químicos
• 1.- Solventes de lípidos

• La presencia o no de envoltura determina

la sensibilidad del virus a los solventes de
lípidos.

• Virus envueltos se inactivan fácilmente con

éter, cloroformo, sales biliares, detergentes
aniónicos).

• Los virus desnudos resisten estos agentes.

 Clasificación de los virus
• Pueden clasificarse de acuerdo a:

• Su hospedador.
• Forma de transmisión.
• Tropismo por determinados tejidos.
• Características físicas, químicas y estructurales.
• 1.- De acuerdo a su hospedador pueden ser:

• Virus de vertebrados.
• Virus de animales.
• Virus de plantas.
• Virus de bacterias
• 2.- De acuerdo a su tropismo pueden ser:
• Adenovirus adenoides
• Hepatitis hepatocito
• 3.- De acuerdo a su forma de transmisión
pueden ser:

• Respiratorios, como influenza, sincitial

respiratorio.

• Entéricos, como enterovirus, hepatitis.

• Cutáneo-mucosa, como los herpes.

• Ingresar directamente a la sangre, como

arbovirus (por picaduras de insectos) o como
VIH (transfusiones sanguínneas).
• 4.- De acuerdo a características físicas,
químicas y estructurales.

• Es el más utilizado actualmente.

• El Comité Internacional de Taxonomía
Viral (ICTV) es la entidad que clasifica
los virus.
Nomenclatura
1. Reino (-viria)
2. Phylum (-viricota)
3. Subphylum (-viricotina)
4. Clase (-viricetes)
5. Orden (-virales)
6. Suborden (-virineae)
7. Familia (-viridae)
8. Subfamilia (-virinae)
9. Género (-virus)
10. Especie (nombre del virus)

Actualmente existen 4 reinos, 16 filums, 2 subfilums, 36 clases, 55 órdenes, 8 subórdenes, 168 familias,
103 subfamilias, 1421 géneros, 68 subgéneros, 6590 especies.
• Criterios para definir familias:

• Tipo de ácido nucleico, estructura del genoma y forma de replicación.

• Tamaño del virus y simetría.
• Número de capsómeros (icosaédrico) o diámetro de la hélice (helicoidales).
• Presencia o no de envoltura.
• Lugar de ensamblaje de la partícula viral.
• Forma de salida de la célula hospedera.
• Cada especie puede tener virus con diferencias antigénicas entre sí,
que se han detectado mediante técnicas serológicas. Es lo que
llamamos serotipo.
• Los serotipos pueden tener uno o varios tipos genéticos.

• Cuando la diferencia genética entre virus de un mismo serotipo es

menor al 6%, es un genotipo.
• Cuando la diferencia genética entre virus de un mismo serotipo es
menor al 1%, es una cuasiespecie.
• Clasificación de Baltimore
• En este sistema los virus están agrupados en grupos dependiendo de
su tipo de genoma y en su método de replicación.
 Esterilización y desinfección
• Esterilización: ausencia total de microorganismos.
• Desinfección: es la destrucción de la infectividad potencial de un
material determinado.
 Esterilización
• Se pueden lograr por tres métodos:
• Físicos, como la temperatura y la radiación.
• Químicos.
• Mecánicos, como la filtración.
 • Métodos físicos

• 1.- Temperatura
• A)Calor húmedo
• Usa el autoclave.
• Útil para ropa, material de goma soluciones tamponadas sin proteínas.
• Protocolo: 120°C durante 20-30 minutos a 11/2 atmósfera de presión.

• B)Calor seco
• Usa la estufa.
• Útil para material de vidrio, metal (quirúrgico)
• Protocolos:
• 200°C durante 60 minutos.
• 180°C durante 90 minutos.
• 160°C durante 120 minutos.
• 2.- Radiación
• Se usa en materiales que no resisten el calor como plásticos, sondas,
endoscopios o también en laboratorios. etc.
• Se usa la luz ultravioleta.
 • Métodos químicos

• Se usa en materiales que no resisten el calor como plásticos, sondas,

endoscopios, etc.
• El más utilizado es óxido de etileno.
• También puede usarse el glutaraldehído, sobre todo para superficies.
 • Filtración

• Se usan membranas con poros de 0,2 um

 Desinfección
• 1.- En superficies de hospitales o laboratorios.
• Se puede usar:
• Hipoclorito de sodio al 10%
• Glutaraldehído al 2%

• 2.- Piel:
• Se puede usar:
• Alcohol iodado al 2%
• Cloroheximida al 0,5-1%.
• Etanol 70%.
Cultivo Viral
Dr. Manuel González
Cultivo viral
• Es la replicación y propagación de un virus en condiciones in vitro.
• También se conoce como aislamiento viral.
• Se puede realizar en:
• Animales de laboratorio.
• Huevos embrionados.
• Cultivos celulares.

• Luego del aislamiento, se debe realizar la identificación viral.

• Requerimientos:
• Bioseguridad.
• Uso de EPP.
• Aplicación de buenas prácticas microbiológicas.
• Infraestructura.
• Equipamiento.
• Personal entrenado.
 Preparación de las muestras

• Antes de realizar un cultivo viral, las muestras deben descontaminarse

con:
• Antibiótico.
• Antimicótico.
• Centrifugación.

• Para eliminar la flora bacteriana.

 Animales de laboratorio
• Es el método más antiguo.

• Se puede realizar en:

• Ratones lactantes y adultos.
• Cobayos.
• Conejos.
• Primates.
• Actualmente casi no se usan por:
• Alto costo de mantenimiento de los animales.
• Infraestructura compleja y costosa (bioterios).
• Riesgo de manipulación.
• Virus latentes en los animales.

• Se usan con fines de investigación sobre infectividad, inmunidad,

oncogenicidad, vacunas, entre otros.
 Huevos embrionados
• Se usan huevos de gallina y a veces de pato, con embriones de 7 a 14 días.

• Pueden inocularse en:

• Cavidad anmiótica – mixovirus.
• Cavidad alantoidea – paramixovirus.
• Membrana corioalantoidea – herpesvirus.

• Ventajas:
• Son estériles.
• Carecen de respuesta inmune.
• Pocos virus latentes.

• Actualmente su uso está restringido a la producción de la vacuna contra influenza.

 Cultivos celulares
• Son células que se mantienen viables en frascos o tubos con medios
nutritivos enriquecidos con suero, antibiótico, vitaminas, a 37°C y en
condiciones estériles.

• Pueden ser:
• Cultivos primarios.
• Líneas celulares.
 Cultivos primarios

• Obtenidos del primer cultivo in vitro de células obtenidas directamente de

un organismo.

• Poseen un número normal de cromosomas.

• Al cabo de unos pasajes las células mueren.

• Los más usados son:

• Fibroblastos de riñón de primates.

• Sirven para multiplicar varios tipos de virus.

 Líneas celulares

• Pueden ser:
• Diploides.
• Continuas.
 Diploides

• Obtenidas a partir de cultivos primarios.

• Conservan morfología intacta.

• Número normal de cromosomas.

• Capacidad de replicación de 50 a 80 veces.

• Tienen sensibilidad a muchos virus.

• Las más usados son:

• MRC-5 – riñón de mono rhesus
 Continuas

• Son células de cultivo primario que se transforman.

• Características:
• Replicación ilimitada (líneas inmortales).
• Número de cromosomas variable.
• Son sistemas celulares nuevos.

• Algunas líneas continuas:

• VERO – riñón de mono verde africano.
• HeLa – cáncer de cervix.
• BHK – riñón de hámster.
• C6/36 – células de mosquito.
 Detección de virus en cultivos celulares
• La multiplicación del virus en el cultivo se puede identificar de varias
formas:
• Acción citopatogénica (efecto citopático).
• Inmunofluorescencia.
• Reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
• Detección de antígenos virales.
 Medición de la actividad biológica viral
• La infectividad se mide la cantidad de inóculo viral necesario para
obtener una respuesta específica del hospedador.

• La determinación cuantitativa de la infectividad se llama titulación.

• Título viral es el número de unidades infecciosas presentes en el

inóculo por unidad de volumen.

• Unidad infecciosa es la mínima cantidad de virus que se necesita

inocular en un hospedador para obtener una respuesta específica.