PCR ULTRA TURBIQUEST PLUS Ref.

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Instrucciones de Uso

Proteína C reactiva ultrasensible 3. - Calibrador PCR ultrasensible - Almacenar entre 2 - 8 ºC.

Verificar la concentración en el rótulo del frasco. Preparación líquida que
Finalidad . Sistema para la determinación cuantitativa ultrasensible de contiene PCR en material de origen humano y azida sódica 14,6 mmol/L.
proteína C-reactiva (PCR) en muestras de suero por inmunoturbidimetría.
El Calibrador PCR ultrasensible debe ser procesado exactamente como
[Solamente para uso diagnóstico in vitro.] propuesto en las instrucciones de las aplicaciones.

Los reactivos deben permanecer fuera de la temperatura de

Principio . Partículas de látex estabilizadas y recubiertas con
almacenamiento solamente por el tiempo necesario para obtenerse el
anticuerpo anti-proteína C-reactiva (PCR) son aglutinadas cuando la PCR
volumen a ser utilizado.
está presente en la muestra. La intensidad de la aglutinación, medida en
absorbancia, es proporcional a la cantidad de PCR. Los reactivos no abiertos, almacenados en las condiciones indicadas,
son estables hasta la fecha de caducidad impresa en el rótulo. Durante la
Características del sistema . La proteína C-reactiva es manipulación, los reactivos y el calibrador están sujetos a
considerada actualmente el mejor marcador del proceso inflamatorio contaminaciones de naturaleza química y microbiana que pueden causar
crónico arterial implicado en la génesis de la ateroesclerosis. Su reducción de su estabilidad.
determinación ha sido recomendada en la estratificación de los riesgos
de eventos coronarios. Por lo tanto, indivíduos que tienen
concentraciones séricas de PCR iguales o mayores a 1,0 mg/L poseen Precauciones y cuidados especiales
riesgo relativo elevado de presentar estos eventos. Homogeneizar los reactivos con suavidad por inversión antes de
utilizarlos. Evitar formación de espuma.
El producto PCR Ultra Turbiquest Plus Ref. 335 es un método
inmunoturbidimétrico fácilmente aplicable a analizadores automáticos El Calibrador PCR ultrasensible está preparado a partir de derivados de
capaces de medir absorbancias a 540 nm (530 a 550 nm), permitiendo la sangre humana y fue ensayado para determinar la presencia de HBsAg,
realización de la medición junto con los demás exámenes bioquímicos, anticuerpos anti-HCV y anti-HIV presentando resultados negativos. A
sin necesidad de utilización de instrumentos especiales. La medición pesar de haber sido utilizados tests validados y aprobados, ninguno de
inmunoturbidimétrica presenta un excelente desempeño operacional y ellos puede asegurar que productos derivados de la sangre humana estén
permite la evaluación de un gran número de muestras en un corto libres de agentes infectivos. Por lo tanto, los cuidados habituales de
intervalo de tiempo. El producto PCR Ultra Turbiquest Plus Ref. 335 posee seguridad deben ser aplicados en la manipulación del producto, que no
sensibilidad optimada que permite la determinación de la PCR con debe ser pipeteado con la boca. Se recomienda manipularlo como siendo
elevada precisión y exactitud, por ello posibilita su utilización como potencialmente infectivo.
marcador de proceso inflamatorio cronico. Todas estas características
agregan mayor practicidad y seguridad al usuario, además de propiciar El congelamiento de los reactivos 1 y 2 altera irreversiblemente la
una mayor agilidad al proceso analítico. funcionalidad de los mismos.

El Calibrador PCR ultrasensible trazable al Material de Referencia CRM Los cuidados habituales de seguridad deben ser aplicados en la
470/RPPHS (Institute for Reference Materials and Measurements, IRMM) manipulación de los reactivos, los que no deben ser pipeteados con la
es aplicable en la transferencia de exactitud a los sistemas analíticos. boca.

Metodología . Inmunoturbidimetría. Los reactivos contienen azida sódica que es tóxica. Se debe tener cuidado
para evitar la ingestión y en caso de contacto con los ojos lavar
Reactivos inmediatamente con gran cantidad de agua y buscar auxilio médico. La
azida sódica puede formar compuestos altamente explosivos con las
1. 1 - Reactivo 1 - Listo para su uso. Almacenar entre 2 - 8 ºC.
cañerias de plomo y de cobre. Por lo tanto, utilizar grandes volúmenes de
agua para descartar los reactivos.
No congelar.
Contiene tampón tris 20 mM pH 8,2 y azida sódica 14,6 mmol/L.
Materiales necesarios y no provistos
2. 2 - Reactivo 2 - Listo para su uso. Almacenar entre 2 - 8 ºC.
1. Analizador capaz de medir con exactitud absorbancia entre 530 y
No congelar.
550 nm.
Suspensión de partículas de poliestireno recubiertas con anticuerpo
(IgG) anti-PCR humana y azida sódica 14,6 mmol/L. 2. Producto Qualitrol Plus PCR Ultra Ref. 345.

01 Español - Ref.: 335

 Preparar las diluciones del Calibrador PCR ultrasensible utilizando
Muestra
solución de cloruro de sodio 150 mM (0,85%) como diluyente, según las
Usar solamente suero. El analito es estable por 2 días entre 2 - 8 ºC y hasta relaciones descriptas. La concentración de PCR en cada dilución resulta
30 días en temperatura igual o inferior a 20 ºC negativos, almacenado en de multiplicar el valor de PCR del calibrador por el factor de dilución
recipiente apropiado para congelamiento. Asegurar que las muestras correspondiente según indicado en la tabla.
estén descongeladas y homogeneizadas antes de su utilización. No usar
muestras con señales de contaminación o muestras congeladas y Punto de la calibración 1 2 3 4 5
descongeladas repetidas veces. Calibrador PCR ultrasensible (µL) 10 20 50 100 200
Solución NaCl (µL) 190 180 150 100 ----
Se debe crear un Procedimiento Operacional Estándar (POE) que
establezca procedimientos adecuados para la recolección, preparación y Factor de dilución 0,05 0,1 0,25 0,5 1,0
almacenamiento de la muestra. Destacamos que los errores debidos a la
muestra pueden ser mucho mayores que los errores ocurridos durante el La existencia de burbujas en el calibrador o cualquier muestra presente en
procedimiento analítico. la cubeta de muestras del equipo es causa común de errores en la
determinación del analito.
Como ningún ensayo conocido puede asegurar que las muestras de
sangre no transmitan infecciones, todas ellas deben ser consideradas Intervalo de calibraciones
como potencialmente infectivas. Por lo tanto, al manipularlas se debe Cuando el control de calidad lo indique.
seguir las normas establecidas para bioseguridad. Cuando se utilice un nuevo lote de reactivos.
Cuando se utilicen nuevos frascos de reactivos de un mismo lote, en caso
Para descartar los reactivos y el material biológico, sugerimos aplicar las de que una nueva calibración haya sido realizada durante la utilización del
normas locales, estatales o federales de protección ambiental. frasco anterior.

Interferencias Intervalo operacional . El intervalo operacional de medición es de

0,05 a 10 mg/L. Para concentraciones mayores, diluir la muestra con
Concentraciones de bilirrubina hasta 20 mg/dL, triglicéridos hasta
NaCl 150 mmol/L (0,85%), realizar nueva determinación y multiplicar el
1000 mg/dL, hemoglobina hasta 1000 mg/dL y factores reumatoides
resultado obtenido por el factor de dilución. Se sugiere verificar la
hasta 75 UI/mL no producen interferencias significativas.
linealidad metodológica y fotométrica por lo menos semestralmente
utilizando muestras con valores hasta 10,0 mg/L.
Preparo del reactivo de trabajo
Para aplicación monorreactivo . El conjunto de un frasco de Reactivo 1 y
Controle interno de calidad . El laboratorio debe mantener un
programa de control interno de calidad que defina claramente los
un frasco de Reactivo 2 permite preparar el Reactivo de Trabajo. Transferir
reglamentos aplicables, objetivos, procedimientos, criterios para
el contenido de un frasco de Reactivo 2 a un frasco de Reactivo 1 y
especificaciones de calidad y límites de tolerancia, acciones correctivas y
homogeneizar con suavidad. Identificar el frasco de Reactivo de Trabajo y
registro de las actividades. Deben utilizarse materiales de control para
anotar la fecha de caducidad. Estable 30 días entre 2 - 8 ºC, mantenido en
monitorear la imprecisión de la medición y los desvíos de la calibración.
recipiente cerrado, cuando no haya contaminación química o microbiana.
Opcionalmente, se puede preparar un menor volumen del Reactivo de Se recomienda utilizar el producto Qualitrol Plus PCR Ultra Ref. 345 -
Trabajo, utilizando la proporción de 4 volúmenes de Reactivo 1 y 1 (un) Labtest para control interno de calidad en ensayos de
volumen de Reactivo 2. inmunoturbidimetría.

Para preservar su desempeño, el reactivo debe permanecer fuera del Valores deseables o recomendados . Cuando la proteína
refrigerador solamente el tiempo necesario para obtenerse el volumen a C-reactiva es utilizada para evaluación de proceso inflamatório en
ser utilizado. evolución, es deseable que el valor 6,0 mg/L sea utilizado como punto de
corte.
Procedimiento En la evaluación de riesgo para eventos coronarianos, los valores
 deseables sustituyen los valores de referencia y fueron determinados a
Ver el Protocolo de Automación para el Sistema Labmax 240 .
partir de datos epidemiológicos tratados estadísticamente con el objetivo
Están disponibles aplicaciones para otros sistemas automáticos y semi- de establecer la concentración de PCR como factor de riesgo
automáticos. independiente para eventos coronarianos1.

Calibración . La concentración del analito en el material Calibrador

Riesgo PCR (mg/L)
PCR ultrasensible es trazable al Material de Referencia CRM 470/RPPHS
Bajo Inferior a 1,0
(Institute for Reference Materials and Measurements, IRMM).
Moderado 1,0 a 3,0
Calibración de 6 puntos Alto Superior a 3,0
Punto 0: NaCl 150 mmol/L (0,85%).
Punto 1 al 5: Calibrador PCR ultrasensible - Ref. 335.3 preparado según el
ejemplo a continuación.

02 Español - Ref.: 335

 5
Características de desempeño El error total (error aleatorio + error sistemático) estimado en los niveles
de decisión iguales a 1,5 mg/L y 3,0 mg/L es igual a 13,7% y 6,7%,
Estudios de Recuperación . En una muestra con concentración respectivamente. Los resultados indican que el método cumple con la
de proteína C reactiva igual a 1,2 mg/L se añadió diferentes cantidades del especificación deseable para Error Total (≤68,3%) basada en los
analito, obteniéndose los siguientes resultados: componentes de la VB.

Concentración (mg/L)
Efecto prozona . No fue observado efecto prozona en muestras con
concentración de PCR hasta 100 mg/L.
Recuperación
Inicial Añadida Esperada Encontrada
(%) Sensibilidad metodológica . Utilizándose la absorbancia mínima
1,2 1,3 2,5 2,63 105,3 
detectable como parámetro, la sensibilidad fotométrica en Labmax 240
1,2 3,8 5,0 5,08 101,6
es 0,026 mg/L que corresponde a una diferencia de absorbancia igual a
0,001.
Los errores sistemáticos proporcionales obtenidos en valores de
1,5 mg/L y 3,0 mg/L son 0,05 mg/L y 0,1 mg/L, respectivamente. El error
Efectos de la dilución de la matriz . Una muestra de
sistemático medio (3,4%) cumple con la especificación deseable para
concentración de PCR conocida fue utilizada para evaluar la respuesta del
Error Sistemático Total (≤±24,9%) basada en los componentes de la
sistema en las diluciones de la matriz con NaCl 150 mmol/L. Se encontró
variación biológica (VB). una recuperación de 104,8 %. El error sistemático medio (4,8%) cumple
con la especificación deseable para Error Sistemático Total (≤±24,9%)
Estudios de comparación de métodos . El método propuesto basada en los componentes de la VB.
fue comparado con método de tecnología semejante, habiéndose
obtenido los siguientes resultados:
Significado clínico . El reconcimiento de que el proceso
inflamatorio crónico está implicado en la génesis de la aterosclerosis
Método reveló la importante asociación de la inflamación de la pared arterial con
Método Labtest el desarrollo de enfermedad coronaria. Estudios recientes han
Comparativo
Número de muestras 16 demostrado que la PCRus es el marcador inflamatorio sérico de elección,
Intervalo de siendo un factor de riesgo independiente predictivo de eventos c
0,2 - 10 coronarianos2.
concentraciones (mg/L)
Método Labtest (mg/L) =
Ecuación de regresión La “III Directriz Brasilera sobre Dislipidemias y de Prevención de la
0,9458 x Comparativo + 0,0958
Coeficiente de correlación 0,996 Aterosclerosis” de la Sociedad Brasilera de Cardiología recomienda que
la determinación de la PCRus sea utilizada en la estratificación del riesgo
de eventos coronarios. Mientras, su determinación no se aplica a
Utilizando la ecuación de regresión, el error sistemático (bias) fue igual a fumadores, obesos, diabéticos, portadores de osteoartrosis, mujeres
1,0% y 2,2% en concentraciones de 1,5 y 3,0 mg/L. Los resultados del bajo terapia de reposición hormonal, personas medicadas con anti-
estudio comparativo cumplen con la especificación deseable para Error inflamatorios o con presencia de infecciones3.
Sistemático Total (≤±24,9%) basada en los componentes de la VB.
Para reducir la variabilidad intra-individual, la determinación de la PCRus
Estudios de precisión . Los estudios de precisión fueron debe ser realizada en individuos metabólicamente estables, que no
realizados utilizando muestras con concentraciones iguales a 0,28 mg/L, presentan evidencia de infección u otro proceso inflamatorio. El resultado
3,09 mg/L y 5,95 mg/L. debe obtenerse a través del promedio de las mediciones realizadas en dos
muestras recogidas con un intervalo de dos semanas. Una concentración
de PCR superior a 10,0 mg/dL indica la presencia de infección u otro
Repetitividad - Imprecisión intra-ensayo proceso inflamatorio e impide la utilización de este marcador en la
evaluación del riesgo coronario. Un resultado mayor a 10,0 mg/L no debe
N Media DE CV (%)
ser considerado y la PCR debe ser determinada nuevamente después de
Muestra 1 20 0,28 0,01 4,5
la resolución del processo1.
Muestra 2 20 3,09 0,05 1,7
Muestra 3 20 5,95 0,08 1,4
Observaciones

Reproducibilidad - Imprecisión total 1. La limpieza y el secado adecuados del material utilizado son factores
fundamentales para la estabilidad de los reactivos y obtención de
N Media DE CV (%)
resultados correctos.
Muestra 1 20 0,28 0,02 7,7
Muestra 2 20 3,09 0,08 2,7
Muestra 3 20 5,95 0,18 3,0

03 Español - Ref.: 335

2. El laboratorio clínico tiene por objetivo proveer resultados exactos y Presentación
precisos. La utilización de agua de calidad inadecuada es una causa
Producto Referencia Contenido
potencial de errores analíticos. El agua utilizada en el laboratorio debe
1 1 X 40 mL
tener la calidad adecuada para cada aplicación. Así, para preparar PCR Ultra
reactivos, utilizar en mediciones y para el uso en el enjuague final de la 335-1/50 2 1 X 10 mL
Turbiquest Plus
vidriería, el agua debe tener resistividad ≥1 megaohm.cm o conductividad 1 X 1 mL
≤1 microsiemens/cm y concentración de silicatos <0,1 mg/L. Cuando la
columna desionizadora está con su capacidad saturada ocurre liberación
de varios iones, silicatos y sustancias con gran capacidad de oxidación y El volumen de reactivo por ensayo en aplicaciones automáticas depende
reducción que deterioran los reactivos en pocos días o incluso en horas, de los parámetros de programación de cada equipo.
modificando los resultados de forma imprevisible. Por ello es
Están disponibles aplicaciones para sistemas automáticos y semi-
fundamental establecer un programa de control de calidad del agua.
automáticos.
3. El valor del calibrador PCR ultrasensible fue establecido utilizándose el
Informaciones al consumidor
procedimiento y el sistema PCR Ultrasensible Turbiquest Plus (Ref. 335)
según descripto en las instrucciones de uso. La exactitud de la calibración [Términos y Condiciones de Garantia]
podrá no ser adecuada cuando se use reactivo de otro fabricante.
Labtest Diagnóstica garantiza el desempeño de este producto dentro de
Referencias las especificaciones hasta la fecha de caducidad indicada en los rótulos,
siempre que los cuidados de utilización y almacenamiento indicados en
1. Pearson TA, Mensah GA, Alexander RW, et al. Circulation, 2003, los rótulos y en estas instrucciones sean seguidos correctamente.
107:499-51.

2. Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood

Cholesterol in Adults. JAMA 2001;285:2486-97.

3. Sociedad Brasileña de Cardiología. Arq Bras Cardiol, 2001; 77 Labtest Diagnóstica S.A.
(suppl III): 1-48. CNPJ: 16.516.296 / 0001 - 38
Av. Paulo Ferreira da Costa, 600 - Vista Alegre - CEP 33400-000
4. Sociedad Española de Bioquímica Clínica y Patología Molecular, Lagoa Santa . Minas Gerais Brasil - www.labtest.com.br
B a s e d e D a t o s d e Va r i a c i ó n B i o l ó g i c a . D i s p o n i b l e Servicio de Apoyo al Consumidor e-mail: [email protected]
en:<http://www.seqc.es/ar ticle/ar ticleview/330/1/170>
(acceso en 08/2005). Revisión: Junio, 2012 Copyright by Labtest Diagnóstica S.A.
Ref.: 300914 Reproducción bajo previa autorización
5. Labtest: Datos de archivo.

04 Español - Ref.: 335

 
PROTOCOLO DE AUTOMACIÓN PARA EL LABMAX
Item Name # PCUTP 1
DATA INFORMATION CALIBRATION
UNITS mg/L TYPE Spline
DECIMALS 2 STANDARD
#1 @ *0,05 #4 @ *0,50
ANALYSIS #2 @*0,10 #5 @*1,00
TYPE END #3 @*0,25 #6

Main W.Length 1 546 NORMAL RANGE

MALE FEMALE
Sub W.length 2
LOW HIGH LOW HIGH
Serum
METHOD Turbidimétrico Urine
Plasma
CORR.
CSF
SLOPE INTER Dialysis
Y= 1 X+ 0 Other

# Posición de 1 a 77 en el panel de testes.

@Ingresar la concentración del analito que figura en el material Calibrador PCR Ultra (Ref. 335.3)

Item Name # PCUTP 2

ASPIRATION DATA PROCESS
KIND Single Double READ ABSORBANCE LIMIT
VOLUME START END
SAMPLE 2.5 µL MAIN 49 50 LOW -3.000
REAGENT1 VOL 200 µL SUB 33 34 HIGH 3.000
REAGENT2 VOL 50 µL
FACTOR
ENDPOINT LIMIT 2
Blank correction 1.000 LINEAR CHECK(%)
Third Mix. OFF ON
R1 Blank Water Blank R1-Blank1 PROZONE CHECK
START END LIMIT(%)
MONITOR
FIRST
SECOND Low High
0 LEVEL POINT 1 THIRD Low High
SPAN 3

Item Name # PCUTP 3

AUTO RERUN SW AUTO RERUN CONDITION (ABSORBANCE)

ON OFF Absorbance Range

Lower ON OFF
AUTO RERUN RANGE (RESULTS)
Higher ON OFF
ON OFF ON OFF
Lower Higher
Serum
Urine Prozone Range ON OFF
Plasma
CSF
Dialysis
Other

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