UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
Facultad de Ciencias Biológicas
Escuela Profesional de Genética y Biotecnología
INFORMES DE PRACTICAS DE LABORATORIO
Docentes: Gonzales Gonzales Rosa Antonia
Retuerto Prieto, Fernando Octavio
Asignatura: Biología Celular
Alumno: Antony Jhoan Bernal Paulet
Ciclo: 3ero
Semestre: 2023 - 1
INFORME DE PRACTICA 01
MICROSCOPÍA
1. INTRODUCCIÓN
El microscopio tuvo un gran impacto en el siglo XVII ya que su implementación nos
permitió estudiar y comprender la existencia de un mundo mas allá de lo que el ojo
humano alcanzaba a percibir. En el transcurso de los años surgieron diferentes
investigadores quienes han aportaron distintos avances sobre microscopia, tal es el caso
de Robert Hooke, quien fue el primero que acuñó el termino “célula” siguiendo sus
observaciones de una pieza de corcho con un simple microscopio óptico, a través de un
microscopio que ampliaba los objetos 300 veces su tamaño real, asimismo Anton Van
Leeuwenhoek quien fue capaz de observar diferentes tipos de células e incluso
bacterias. (Geoffrey et al 2011). En la actualidad los microscopios siguen siendo un
instrumento importante para el campo de la biología, siendo capaces ahora de aumentar
un objeto hasta mil veces su tamaño (en el caso de los microscopios ópticos) y habiendo
además modelos mas sofisticados y con mayor aumento como es el caso del
microscopio electrónico de barrido.
2. MARCO TEÓRICO
La microscopia hace referencia al empleo de cualquier tipo de microscopio que utilice
luz visible para observar muestras. Existen diversos tipos de microscopios y su poder de
resolución va variando a medida de que aumente su sofisticación.
Microscopio óptico compuesto: es el mas básico y tiene una serie de lentes y
utiliza luz visible como fuente de iluminación a través de este microscopio se
pueden examinar muestras muy pequeñas además de algunos de sus detalles, el
máximo poder de resolución que presenta este microscopio es de 0,2 um.
Microscopio de campo oscuro: Este microscopio se utiliza para examinar
microorganismos vivos que no son visibles al microscopio óptico común, que
no pueden teñirse con los métodos estándares o que resultan distorsionados por
la tinción que sus características no suelen ser notorias, este microscopio se
utiliza para visualizar espiroquetas como el Treponema Pallidum.
Microscopio de contraste de fase: Este tipo de microscopio permite
informacion mas detallada de algunas estructuras internas de microorganismos
vivos, además de que no es necesaria fijar ni teñir la muestra para ser
observada.
Microscopio de Fluorescencia: Este microscopio aprovecha las ventajas de la
fluorescencia de ciertas sustancias como el fluorocromo para poder ser
observadas, un ejemplo de ello son las observaciones de Mycobacterium
tuberculosis a través de este microscopio.
Microscopio electrónico de barrido: Este tipo de microscopio proporciona
imágenes tridimensionales de las muestras, este utiliza un cañón que emite un
haz de electrones, enfocado con precisión. La imagen que genera se denomina
microfotografía electrónica de barrido, el cual es especialmente útil para
estudiar las superficies celulares intactas y a los virus.
3. MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS
Los materiales usados para la practica fueron los siguientes:
Microscopio óptico
Laminas porta objeto
Laminas cubre objeto
Frasco gotero
Lápiz
Colores
Cuadernos de dibujo
Agua
Hebra de lana
Algodón
Recorte de periódico
Franela
Papel lente
La finalidad de la practica consistió en visualizar 3 muestras (Algodón, lana y letras impresas) a
diferentes aumentos en el microscopio óptico, los pasos que se siguieron fueron:
- Se procedió a identificar las diferentes partes del microscopio, se diferenció tanto las
partes mecánicas como ópticas, procediendo luego a dibujar a mano dicho instrumento
señalando sus partes.
- Seguidamente se prepararon 3 muestras en la lamina portaobjetos: la primera
conteniendo un recorte de letra de un periódico, colocándolo en posición de lectura; la
segunda muestra fue de un trozo de lana de color naranja; y la tercera muestra fue de
hebras de algodón, cabe resaltar que a las tres laminas se les añadió una gota de agua y
se les coloco una lamina cubreobjetos para ser fijadas.
- A cada muestra ya preparada se procedió a colocar en el microscopio para poder ser
visualizadas a 40x, 100x y 400x.
- Durante cada visualización a diferente aumento se registraron las características
observadas de cada muestra, asimismo se dibujo cada una.
4. RESULTADOS
Muestra: Recorte de periódico
Aumento: 40x
Descripción: a pesar de colocar la
imagen en posición de lectura, se
observa de manera invertida
Muestra: Recorte de periódico
Aumento: 100x
Descripción: La muestra se observa a mayor
detalle, incluso despigmentaciones
alrededor de la letra cosa que a simple vista
no se nota
Muestra: Recorte de periódico
Aumento: 400x
Descripción: Solo se observa un fragmento
de la letra, las zonas de despigmentación son
mas notorias, debido a que el tinte no
impregno todo el papel
Muestra: Hebra de lana
Aumento: 40x
Descripción: se observan pequeñas líneas de
color naranja cuya forma es aplanada
Muestra: Hebra de lana
Aumento: 100x
Descripción: Se hace más notoria la
morfología aplanada de cada hebra, y se
evidencia una pequeña linea intermedia en
cada una.
Muestra: Hebra de lana
Aumento: 400x
Descripción: Hebras de lana de color naranja
transparente cuyos lados externos son de
forma prominente y centro aplanado.
Muestra: Algodón
Aumento: 40x
Descripción: A dicho aumento, solo se
observan pequeñas líneas de color plomo
esparcidas por todo el portaobjetos.
Muestra: Algodón
Aumento: 100x
Descripción: Las hebras muestran una
morfología enroscada y transparente
Muestra: Algodón
Aumento: 400x
Descripción: A dicho aumento, los detalles
se hacen mas notorios, se observan
pequeños surcos alrededor de cada hebra, el
tono plomo paso a transparente.
5. DISCUSIÓN
En esta primera practica se pudo observar que a medida que aumenta el lente objetivo
las imágenes que se observan adquieren mas detalle, sin embargo, es necesario siempre
graduar la iluminación con el diafragma y el enfoque con los tornillos macrométrico y
micrométrico para obtenerlos. Cabe resaltar que la imagen obtenida por un microscopio
óptico es virtual e invertida, lo cual se pudo comprobar fácilmente en la muestra de
recorte de periódico, en el que a pesar de ser colocado en posición de lectura al ser
observado se encontraba en posición contraria en la que se colocó.
6. CONCLUSIONES
- El microscopio óptico compuesto nos permite ver objetos a distintas
resoluciones con un limite de resolución de 0,2 um.
- Es importante que, previo al manejo del microscopio en si, se deban manejar las
partes del mismo y su funcionalidad para una rápida captura de imagen.
- Para el ultimo lente objetivo x100 es importante usar el aceite de inmersión para
una mejor resolución de la imagen.
- Los cuidados antes y después de usar el microscopio resultan imprescindibles
para alargar la vida útil del mismo.
7. CUESTIONARIO
¿Por qué se usa el aceite de inmersión?
El aceite de inmersión se usa con el fin de conservar la dirección de los rayos de luz en
el máximo aumento. El aceite de inmersión tiene el mismo índice de refracción del
vidrio, de modo que este se convierte en parte óptica del microscopio, adicionalmente
tiene el mismo efecto que un aumento del diámetro del objetivo; por consiguiente,
mejora el poder de resolución de las lentes, cabe resaltar de que si no se usa aceite de
inmersión la imagen se torna borrosa y con mala resolución (Case et al 2011).
¿Qué son una preparación en fresco y una preparación fija?
Una preparación en fresco permite observar en los microorganismos la movilidad, el
color, el tamaño, la forma y la agrupación en su forma natural viva y sin alteraciones.
Sin embargo, la observación es difícil debido al escaso contraste, por la poca diferencia
entre el índice de refracción del medio y de los microorganismos (Case, 2001)
Las preparaciones fijas son aquellas que permanecen intactas, esto debido a que se
utiliza un material especial para que el cubreobjetos se quede adherido al portaobjetos
por años y la muestra no se deteriore.
¿Como se determina el aumento de lo observado en el microscopio?
El aumento total u observado en un microscopio se calcula a través del producto del
aumento del lente objetivo por el aumento del ocular. Por ejemplo, en los microscopios
usados en la practica los lentes oculares tenían 10x y uno de los objetivos era 40x, por
lo tanto el aumento total observado era de 400 veces.
¿Que es el limite de resolución?
El limite de resolución es la distancia mínima que separa dos puntos para poder ser
discriminados como tales (o el objeto mas pequeño que puede ser visualizado), es la
inversa del poder de resolución y depende principalmente de la longitud de onda
utilizada. (Valentich et al. 2008)
Los limites de resolución para:
El ojo humano: 0,1 mm
El microscopio óptico: 0,2 um
El microscopio electrónico: 2 a 10 A.
8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Olivas E., E. (2001). Manual de laboratorio de Microbiología básica. Programa de
Entrenamiento deportivo.. México: Universidad Autónoma de Ciudad Juárez.
Case, C. L., Funke, B. R., Tortora, G. J. (2007). Introducción a la
microbiología. Argentina: Médica Panamericana.
Valentich, M. A., Rovasio, R. A., Eynard, A. R. (2008). Histología y Embriología del
ser humano. Argentina: Editorial Médica Panamericana.