MICROTUBULOS

 Forma de túbulo hueco con un β-tubulina

diámetro externo de 25 nm y con
longitudes que varían entre unos
pocos nm a µm.
 Son más rígidos que los MF.
 Genera fuerzas de propulsión.
α-tubulina

-
25 nm
TUBULINA: dímero (α y β) de proteínas globulares
El monómero de β-tubulina se une a
α-tubulina β-tubulina GDP que puede ser intercambiado
por GTP

GTP
Tubulina es una
GDP GTPasa

Dímeros de tubulina se
polimerizan formando un
MT
compuesto de 13
protofilamentos
- + ensamblados alrededor de
un tubo hueco
 Inmunoflorescencia: MT irradian desde la
Centrosoma en células animales:
región perinuclear
 Centro organizador de MT que se localiza cerca del núcleo.
 Contienen estructuras anulares formadas por -tubulina: sitio semilla para
inicio de la polimerización de α-β-tubulina y que representa el extremo (-) para
el crecimiento radial de los MT. Una vez que crecen los MT se desprenden de
-tubulina.
 Contiene también los centriolos que están formados por MT en disposición
cilíndrica.
 Los centriolos (ausentes en células vegetales) no participan en la formación
de los MT pero son semejantes a los cuerpos basales que forman los centros
organizadores de MT en cilios y flagelos.

Centriolo

microtúbulos material Células animales

Centrosoma pericentriolar
Polimerización de tubulina: formación de un microtúbulo
Etapas:
 Los dímeros de tubulina se asocian a
-tubulina sitio semilla para el inicio de α-tubulina
la polimerización y posteriormente
β-tubulina
tubulinas se asocian longitudinal-
mente para formar el protofilamento.
 Asociación lateral para formar hojas
curvas estables. +
 Formación de un MT de 13 2 veces más
polimerización
protofilamentos.

 Cuando la [αβ-tubulina] es > Cc hay

polimerización y cuando es < que Cc hay
despolimerización de los dímeros.
 GTP o GDP hace que la Cc para el
ensamblaje de los extremos (+) y (-) sea
Interacciones -
diferente.
laterales
 Con [αβ-tubulina] es > Cc para la
polimerización, los dímeros se agregan más
al extremo (+).
 Cuando la [αβ-tubulina] es > Cc (+) pero
<Cc(-), los MT agregan subunidades a un
extremo y lo disocian del otro.

Polaridad del protofilamento y del

MT Interacciones longitudinales entre dímeros
y laterales entre protofilamentos.
α-tubulina se expone en un extremo
y la β-tubulina en el otro.
 -tubulina

-tubulina

El complejo en anillo se ubica en un extremo del MT:

- Fluorescencia (verde) y MET (oro) se observan los componentes de -
tubulina marcados en el extremo del MT.
- Modelo: este complejo (hilera de subunidades -tubulina) actuaría como
núcleo o semilla para el ensamblaje de los MT, uniendo subunidades de αβ-
tubulina.
- Este modelo se apoya en la ubicación de los anticuerpos marcados con oro
dirigidos contra los componentes de -tubulina (rojo y amarillo).
 Los MT alternan ciclos de crecimiento y
acortamiento (inestabilidad dinámica)

Microtúbulo en crecimiento
Crecimiento Retracción

La disposición de los MT unidos se modifica

continuamente a medida que crecen nuevos MT y
MET se retraen los MT preexistentes

- Utilizando -tubulina como semilla, se

forman los MT: adición de monómeros,
hidrólisis de GTP, formación de casquete.
- Retracción: pérdida rápida de
subunidades en su extremo libre
(tubulina-ADP).

Microtúbulo en retracción
 Desflecado de los MT

Microtúbulo en crecimiento Microtúbulo en retracción

La estabilización selectiva
de los MT

Polaridad celular
Célula no polarizada Célula polarizada
La polaridad y organización de las células depende de los MT

H-E. Epitelio intestinal

Esquema de célula
intestinal secretora

Los enterocitos poseen dominios celulares

diferenciados, uno apical y otro basolateral.
Por ello se dice que son células polarizadas.
Tienen un citoesqueleto bien orientado y un
tráfico vesicular muy desarrollado que
distribuye elementos y moléculas de manera
desigual entre los dominios mencionados.

Epitelio cilíndrico simple con células secretora de Célula del páncreas exocrino secretora de proteínas
mucoproteínas
Proteínas motoras de los MT: CINESINAS y DINEÍNAS

Dominio
motor Dominio motor: sitios de unión para ATP (ATPasa) y MT
Cabeza

Polipéptidos asociados: dominio de unión a vesícula u orgánulo

Tallo

Polipéptidos
asociados

Cinesina Dineína
 La cola se fija a una
vesícula y las cabezas
interactúan con el MT.

La energía de la
hidrólisis del ATP
permiten alterar la
conformación de las
cabezas para que se
desplacen por el MT
 El camuflaje algunos organismos depende de los MT

Pez plano Pulpo

Los MT son los responsables del cambio de color de ciertos organismos.

La capacidad de cambiar de color de algunas especies se debe a unas

células llamadas CROMATÓFOROS. Éstas contienen en su interior
pigmentos concentrados en una pequeña zona (en estos casos). Cuando el
animal cambia de color es porque los MT, mediante la dineína y la kinesina,
expanden el pigmento del cromatóforo, hacia toda la célula de manera que
ésta cambie de color.
 Distribución de vesículas y
orgánulos

centr
osom
a Vesícula unida a la dineína
Vesícula unida a kinesina
Microtúbulo Azul: MT; Rojo: Mitocondrias; Verde: Núcleo

Fibroblasto
+

Proteína motora Microtúbulo

Microtúbulo Vesícula
Localización diferencial de los MT

Centrosomas duplicados se separan y los

Centrosoma cerca de núcleo.
MT forman huso mitótico (segregación y
MT se extienden a la periferia
distribución de cromosomas).
Metafase

Inmunofluorescia de una célula en metafase.

Las flechas indican la ubicación de los MT
polares, astrales y cinetocóricos/cromosómicos.

Anafase

 MT polares solapados deslizan

unos sobre otros empujando y
separando los polos por acción
de proteínas motoras (cinesinas).
 MT astrales tiran de los polos del
huso y los separan por acción de
proteínas motoras (dineína).
Cooperación de CINESINA y MIOSINA
en el córtex celular

 Córtex rico en MF.

 MT-cinesina-vesículas.
 MF-miosina-vesículas.
Modelo general del transporte mediado por cinesina y
dineína en una célula típica.

COMT

 Transporte anterógrado depende de cinesina y lleva componentes desde el

centro organizador de MT al cortex.

 Tansporte retrógrado depende de dineína y lleva componentes en sentido

opuesto.
Proteínas que regulan la dinámica de los MT: proteínas asociadas a MT (MAP)

Existen muchos tipos de

MAPs en función del
tipo de célula.

El espacio entre MT depende de la longitud del dominio de proyección de las MAPs

MAP2 Tau Brazo largo Brazo corto

Los MT sirven como pistas para el tráfico normal de la carga celular a lo largo
de las proyecciones axonales de las neuronas.

Tau se une a los MT y

facilita su estabilidad
MT

En las neuronas los extremos (+) se orientan hacia el botón

terminal mientras que en las dendritas la polaridad es mixta.
Los MT pueden asociarse entre sí para formar nuevas
estructuras

Disposición Estructura

Simple

C B A
B A
Doble

Triple

El MT (A) es completo (13 protofilamentos).

Los MT (B) y (C) son incompletos (10 protofilamentos).
 Cilio
Flagelo

Cuerpo basal
Cuerpo basal Los extremos (-) de los MT de cilios
y flagelos se unen a un cuerpo
basal

Cuerpo basal es igual a la de los

centriolos (9 tripletes de MT con un
MT completo el A y dos incompletos,
el B y el C)

Centríolos
Diferencias entre cuerpo basal y centríolos

 Ubicación
Los cuerpos basales cerca de la superficie celular
Los centriolos cerca del núcleo

 Matriz centrosómica
Cuerpos basales no poseen
Centriolos si poseen

 Cantidad de unidades
Cuerpos basales sólo una
Centriolos presentan dos, perpendiculares
 Disposición de los microtúbulos en un cilio o en un flagelo
ESTRUCTURA DE UN AXONEMA (microtúbulos y proteínas)

Disposición "9+2". Se refiere a los 9 pares fusionados de MT en la parte de afuera de un cilindro, y

de 2 MT no fusionados en el centro.
Brazos de dineina ciliar adosados a los MT sirven como motores moleculares

Cilios y fagelos poseen una estructura interna muy similar; la diferencia radica en la longitud.
Flagelo de espermatozoide

M.O. Espermatozoides MEB. Espermatozoides

MET. Espermatozoides. En el corte

longitudinal se observan los MF y el
axonema en el corte transversal
Cilios Cilios observados al MEB

Lámina basal

H-E. Epitelio respiratorio

Cilio realiza movimientos cíclicos (atrás y

adelante) para el desplazamiento de materiales
sobre los tejidos.
Movimiento de cilios y flagelos
 Proteínas asociadas al MT.
 Algunas unen MT otras otorgan fuerza que determina la ondulación:
dineína ciliar.

A B
 MET de dobletes
en un axonema
tratado con
proteasa que
degrada nexina.

Completo
A

B
Incompleto
Dineína ciliar
La actividad de la dineína es la que desplaza un túbulo sobre otro y produce el movimiento del
cilio/flagelo.

Dineína

Cuerpo Cuerpo
basal basal
 Filamentos intermedios
 Función estructural
 Soporte mecánico en tejido epitelial.
 No participan en la motilidad celular.
 Son estructuras estables.
 Subunidades proteicas que se
ensamblan para formar cordones.
Filamentos de queratina en citosol
y núcleo de célula de riñón de rata  Diámetro de ~10 nm.
 ATP/GTP.
 Principales proteínas de los FI en mamíferos

LAMINAS NUCLEARES Laminas: A, B y C Lámina nuclear

QUERATINAS Ácidas y Básicas Epitelios

Vimentina; Desmina; Fibroblastos;

FI TIPO III Proteína ácida Músculo;
fibrilar gliar; Periferina Células gliales;
Neuronas periféricas

NEUROFILAMENTOS NF-L; NF-M; NF-H Neuronas (axones)

 Los FI tienen una organización estructural común

Dominio N-terminal globular Dominio C-terminal globular

Cabeza Cola

Dominio -hélice central

 Ensamblaje de las subunidades de los FI

Monómero de FI

Dímeros paralelos
enrollados por el dominio
central con los extremos
amino y carboxilo hacia el
mismo lado.

Dímeros antiparalelos se
asocian y forman un
tetrámero
 Asociación de tetrámeros forman el Protofilamento

8 protofilamentos enrollamiento

Son apolares
Estructura de
una cuerda
 MET: filamento de 10 nm Inmunofluorescencia: lamina (azul) asociado a la
envoltura nuclear; queratina (rojo) desde la
envoltura nuclear hasta la MP.

 Ensamblaje de filamentos requiere interacciones entre proteínas:

filamentos de queratina; FI tipo III.

 Enlaces cruzados entre FI y otras estructuras celulares: Proteínas

Asociadas a FI (PAFI).

 Durante la división celular los FI se transforman en estructuras

dinámicas.
FI de localización nuclear. LAMINA: Lamina nuclear

Forman malla ortogonal

 Soporte estructural al núcleo.

 Punto de anclaje de la cromatina y asociación
con proteínas nucleares regulando la
transcripción.

Tetrámero
2 juegos ortogonales de filamentos
Se desensambla y reconstituye en cada ciclo
de división.
2 juegos ortogonales de filamentos
Interfase División

Laminas fosforiladas

Fragmento de EN

Profase
 FI de localización citoplamático: Queratina
Están en células epiteliales y sus derivados (pelo y uñas)

Inmunofluorescencia: FI en naranja MET: FI en haces paralelos

Fotografías que muestran diferentes tipos de

queratinas que forman una red que rodea al
núcleo y se ramifica por todo el citoplasma.
Estructuras especializadas: anclan la red de filamentos de queratina a las membranas para mantener
las células unidas y dar RESISTENCIA MECANICA

Desmosomas: célula-célula
Filamentos de queratina

En células epiteliales, los FI se unen a la membrana en regiones especializadas de contacto (desmosomas).

 Hemidesmosomas
- Conectan a las células con la matriz extracelular.
- Unen células epiteliales con la lámina basal, en especial a las fibras de colágeno.

En células epiteliales, los FI se unen a la membrana en regiones especializadas de contacto (hemidesmosomas).

Estructura de una neurona Neurofilamentos

Microtúbulos

H-E. Cuerpos neuronales, axones y células

de la glia. Neurofilamentos

Inmunofluorescencia para NF-L (verde).

 Neurofilamentos
Axones más gruesos conducen más rápido el potencial eléctrico.

MET. Entrecruzamiento de haces a través de

puentes de proteínas

MET. Corte transversal del axón

 Esclerosis Lateral Amiotrófica (ELA)
 Pérdida progresiva de neuronas motoras
 Atrofia muscular
 Parálisis y muerte
 No afecta funciones mentales ni
sensibilidad

En pacientes de ELA se ha observado una

acumulación anormal de neurofilamentos tanto en
soma como en axones neuronales.

La desorganización de los neurofilamentos

interrumpe el transporte de materiales y orgánulos
celulares que viajan desde el soma hasta los
terminales del axón y viceversa, produciendo un
daño neuronal.

Stephen Hawking
La identificación de FI en las biopsias de los tejidos de tumores de origen no
identificado se realiza por métodos inmunocitoquímicos, que utilizan anticuerpos
inmunofluorescentes específicos para cada tipo de filamento.

La detección de queratina muestra un origen

epitelial,
mientras que la presencia de neurofilamentos
sugeriría que es de origen del sistema nervioso.

Los Neurofilamentos atraviesan el citoplasma y las

prolongaciones neuronales
Bibliografía

-Introducción a la Biología Celular. Bruce Alberts et

Al. 2ª Ed. 2005. Panamericana.

-La Célula. Cooper Geoffrey M. 6ª Ed. 2014. Marban.

- Biología Celular y Molecular. Lodish H. 5ª Ed. 2006.