Inmunoensayos
INTRODUCCIÓN
Definición
Técnicas de diágnostico clínico,
basadas en las reacciones
antígeno-anticuerpo, a través de
las cuales es posible determinar:
Grupos sanguíneos,
Infecciones,
Proteínas,
Hormonas, etc.
Clasificación
Aglutinación directa
Aglutinación indirecta
Floculación
Inmunocromatografía
Tipo de muestra
Sangre completa
Suero
Plasma
Orina
Separación del suero
Separación del plasma
AGLUTINACIÓN
Definición
Inmunoensayo basado en la unión de antígenos
partIculados con anticuerpos presentes en el suero del
paciente, produciendo agregados o aglutinados de
células o bacterias.
Aglutinación directa (reacciones febriles, rosa de bengala)
Hemaglutinación (grupos sanguíneos)
Aglutinación indirecta (Perfil reumatoide: ASO, PCR, FR)
GRUPO SANGUÍNEO
Técnica
Interpretación
REACCIONES FEBRILES
GENERALIDADES
• Prueba basada en la aglutinación
directa.
• Antígenos en suspensión de
Salmonella, Brucella y Rickettsia
(Proteus OX19), que reaccionan con
los anticuerpos del paciente.
• Útiles para el diagnóstico de
salmonelosis, brucelosis y rickettsiosis.
ANTÍGENOS FEBRILES
• Tífico O (Salmonella typhi, Ag. Somático)
• Tífico H (Salmonella typhi, Ag. Flagelar)
• Paratífico A (Salmonella paratyphi, Ag.
Flagelar)
• Paratífico B (Salmonella paratyphi, Ag.
Flagelar)
• Proteus OX-19 (Rickettsia, Ag. Somático)
• Brucella abortus (Brucella abortus, Ag.
Somático)
MATERIAL
TÉCNICA
Tífico O Tífico H Paratífico A Paratífico B Brucella Proteus
1:20 (80 µl)
1:40 (40 µl)
1:80 (20 µl)
1:160 (10 µl)
1:320 (5 µl)
TÉCNICA
• Mezclar con aplicadores
• Rotar 2 minutos
• Interpretar la prueba
Grado de aglutinación
+ ++ +++ ++++
INTERPRETACIÓN
Tífico O Tífico H Paratífico A Paratífico B Brucella Proteus
• Memoria 1:20 (80 µl)
inmunológica 1:40 (40 µl)
1:80 (20 µl)
1:160 (10 µl)
• Infección
latente 1:320 (5 µl)
Grado de aglutinación
+ ++ +++ ++++
Aglutinación de microorganismos 25% 50% 75% 100%
en porcentaje
AGLUTINACIÓN INDIRECTA
DEFINICIÓN
• También denominada aglutinación
pasiva
• Es una reacción de aglutinación, en
la que interactúan: antígenos solubles
recubiertos con partículas inertes, y
los anticuerpos del paciente.
• Particulas inertes utilizadas: látex,
poliestireno, bentonita
• Requiere de placas de campo
oscuro
PERFIL REUMATOIDE: ASO, FR, PCR
• ASO o AELO. Prueba para determinar antiestreptolisina O
• FR. Prueba para determinar factor reumatoide
• PCR. Prueba para determinar la proteína C reactiva
MATERIAL
TÉCNICA
M + -
M + -
Interpretación
INMUNOCROMATOGRAFÍA
TÉCNICA
Definición
La inmunocromatografía es una técnica
inmunológica que permite visualizar la reacción
antígeno-anticuerpo en un casete de PVC, el cual
contiene papel de nitrocelulosa marcado por las
zonas de conjugado y captura, en las que se
llevará a cabo la reacción.
Fundamento
Aplicación
Permite realizar determinaciones rápidas y económicas.
Con esta técnica se puede diagnosticar desde enfermedades Tipo de muestra: sangre,
infecciosas, hasta detectar hormonas e inclusive sustancias de plasma, orina, saliva.
abuso
Pruebas que se pueden realizar con la inmunocromatografía:
VIH
HCV
HBsAg
Chagas
SARS COV-2
Prueba de embarazo
Antígeno prostático
Antidoping
Prueba rápida de embarazo para
determinar HGC (hormona
gonadotropina coriónica humana)
Técnica Interpretación de resultados
1. Colocar el campo de trabajo.
2. Retirar la prueba del empaque.
3. Colocarse los guantes de látex y la bata.
4. Abrir el frasco anaclín (etiquetado con: nombre, edad,
fecha y FUR), en donde se encuentra la muestra de orina de
la paciente (la primera del día).
5. Retirar la tapa del casete de prueba.
6. Sumergir la almohadilla durante 10 segundos en la orina.
7. Tapar la prueba e interpretar los resultados en un rango de
40 segundos hasta 5 minutos como máximo. Y reportar el
resultado.
Prueba SARS COV-2
Inmunocromatografía coloidal por flujo lateral. Funciona al detectar la respuesta inmune del
paciente, detectando los anticuerpos IgM e IgG.
Interpretación
C (control)
T1 (IgG)
T2 (IgM)
S (Muestra)
IgM-/IgG- No hay evidencia de infección por
SARS-Cov 2.
IgM+/IgG- Probable infección reciente sin
anticuerpos protectores.
IgM+/IgG+ Probable Infección reciente con
anticuerpos protectores en desarrollo.
IgM-/IgG+ Probable infección pasada con
anticuerpos protectores.
Tener Anticuerpos protectores IgG no excluye
la posibilidad de una eventual reinfección.