EL MICROSCOPIO
El término microscopio es la conjunción de dos voces griegas, por un lado “micro” que es equivalente a
“pequeño” y “skopein” que significa “observar”, en suma se refiere a la observación pequeña, o en menor
grado.
Que es un microscopio
El microscopio es un instrumento que permite observar estructuras que son demasiado pequeños que no se
perciben a simple vista.
La imagen que se obtiene es realmente una investigación sobre la composición de los objetos. Al estudio
y análisis de los objetos pequeños se lo denomina “microscopia”.
Historia del microscopio
Existen controversias sobre quien invento el microscopio, mientras unos afirman que fue inventado por Galileo
Galilei (por 1610) por lado de los italianos, Galilei presento su microscopio óptico utilizando dos lentes una
cóncava y una convexa.
unos afirman que el inventor verdadero fue Zacharias Janssen (por 1590) por opinión de los holandeses, ya
que su familia se dedicaba a la fabricación de gafas de forma que desde pequeño tuvo contacto con esta
industria, lo más seguro es que lo hiciera con ayuda de sus padres a finales del siglo XVI. En aquel entonces era
muy joven, así que cabe la posibilidad de que Hans Lippershey fabricara el primer microscopio y luego
Zacharias se hiciera cargo de la producción.
En 1619Cornelius Drebbel presento su diseño con dos lentes convexas eso también hace pensar que pudo
haber inventado el microscopio antes que Janssen.
Por otro lado, Robert Hookeen en el año 1655 construyo por primera vez un microscopio compuesto utilizable,
y su perfeccionamiento fue realizado por Antonie Leewenhoeck en el año 1674 y con esto abrieron paso a la
citología.
No se sabe a ciencia cierta cuál es el origen del microscopio a pesar del gran número de investigaciones que se
han llevado a cabo, pero al dia de hoy se considera que fue Zacharias Jassen quien invento el microscopio
compuesto que consta de dos lentes.
Sin embargo, es importante tener en cuenta que antes de la invención del microscopio ya era común la
utilización de lentes de aumento, también conocidas como lupas. Sin embargo, cuando se habla del invento
del microscopio se hace generalmente referencia a la idea del microscopio compuesto. En cualquiera de los
casos parece claro que el microscopio compuesto fue inventado en algún momento entre los años 1590 y
1620. En 1625 Giovanni Faber es la primera persona en referirse a este nuevo invento como microscopio.
Las observaciones microscópicas de Robert Hooke
Es posible que ni Zacharias Janssen ni su padre Hans Martens fueran conscientes del potencial científico del
microscopio. Uno de los primeros científicos en utilizar el microscopio con fines científicos fue Robert Hooke,
quien en 1665 publicó una de sus obras más importantes titulada Micrographia.
El libro Micrographia presentó ilustraciones de las observaciones realizadas por Robert Hooke mediante un
microscopio compuesto, incluyendo insectos, plantas, etc. que por primera vez se pudieron ver a gran escala.
Una de las aportaciones más importantes de Robert Hooke fue introducir la palabra célula para describir las
estructuras que observó en una muestra de corcho.
Algunas de las ilustraciones incluidas en Micrographia alcanzaban un aumento de hasta 50x. También es
importante destacar que Hooke introdujo la iluminación de las muestras mediante una vela. Esto permitió
observar las muestras con mejor claridad y es equivalente al sistema utilizado actualmente mediante un foco y
un condensador de luz.
El microscopio de Antonie Van Leeuwenhoek
Antonie van Leeuwenhoek (Delft, 1632-1723) hizo un paso importante en el campo de la microscopía al
descubrir una nueva técnica de fabricación de lentes que le permitió alcanzar aumentos de hasta 200x.
Antonie van Leeuwenhoek trabajaba inicialmente como comerciante de telas. Su interés por la microscopía
empezó con el objetivo de fabricar mejores lentes para analizar la calidad de las telas con las que comerciaba.
Los microscopios construidos por Antonie van Leeuwenhoek eran microscopios simples, es decir, de una sola
lente. Su avanzada técnica de fabricación le permitía obtener lentes de gran aumento a la vez que evitaba las
aberraciones de la luz que tenían todos los microscopios compuestos del momento. Esto lo permitió observar
el mundo a un nivel de aumento inalcanzado hasta el momento.
Antonie van Leeuwenhoek mantuvo en secreto sus técnicas de fabricación de lentes, pero no sus
descubrimientos. Durante años publicó los resultados de sus observaciones que incluyeron todo tipo de
fenómenos microscópicos. Algunas de las observaciones más importantes que documentó incluyen las fibras
musculares, distintos tipos de bacterias y los glóbulos rojos de la sangre. Su contribución a la ciencia hizo que
todavía hoy se le conozca como el padre de la microbiología.
Las aberraciones de los primeros microscopios
Durante sus dos primeros siglos de existencia, los microscopios compuestos estaban severamente limitados
por las aberraciones ópticas. Las aberraciones ópticas aparecen debido a características no ideales de las
lentes y a la naturaleza de la luz. A efectos prácticos, esto se traducía en una pérdida importante de nitidez en
las imágenes observadas y limitó la popularidad del microscopio entre los científicos.
Los dos tipos de aberración que tenían un mayor efecto en los primeros microscopios eran la aberración
cromática y la aberración esférica.
No fue hasta 1730 que el inventor Chester Moore Hall encontró una combinación de lentes que corregía
significativamente la aberración cromática. Chester Moore Hall tenía como objetivo reducir la aberración
cromática de los telescopios. Su descubrimiento pudo ser directamente aplicado a otros instrumentos ópticos
como los binoculares. Pocos años más tarde fue aplicado al microscopio y se empezaron a construir los
primeros objetivos libres de aberración cromática.
Un siglo más tarde, alrededor de 1830, Joseph Jackson Lister perfeccionó la idea de Chester Moore Hall para
corregir además la aberración esférica. Joseph Jackson Lister demostró que esta aberración podía ser
corregida variando la distancia entre lentes.
Partes del Microscopio
Parte Óptica
Reproduce y aumenta las imágenes:
Oculares: Es un lente o conjunto de lentes que aumentan a modo de lupa la imagen real proyectada por el
objetivo y permite que sea percibida en la orientación y posición correctas por el ojo observador. El elemento
del sistema óptico que se encuentra más próximo al ojo observador, suele llevar grabado el número de
aumentos (10X generalmente)
Lentes Objetivo: Genera una imagen ampliada y real invertida que se forma en el plano focal anterior del ocular,
están montados sobre un soporte rotatorio o revolver que permite cambiar de un objetivo a otro mediante un
simple giro. Existen dos tipos: los secos y los de inmersión. Los secos no requieren ningún medio líquido entre
ellos para poder observar la muestra. El objetivo de inmersión, comúnmente de 100 X está diseñado para
emplearse con aceite de inmersión para microscopía que se aplica sobre la preparación y se interpone entre
ésta y el objetivo.
Prismas: Descompone la luz en colores, refractan y reflejan
Parte de iluminación:
Dirige la luz hacia el objetivo y está comprendido por:
Fuente de luz: lámpara halógena de intensidad graduable situada en la base del microscopio.
Espejo.
Condensador (formado por lentes): es una lente o sistema de lentes situadas debajo de la platina y
que permite concentrar la luz en la muestra que se observa Existen distintos tipos de condensadores,
dependiendo de las necesidades y requerimientos de nuestra observación: abbe, de campo oscuro,
acromático, etc.
Diafragma: También conocido como iris, está situado debajo de la platina y del condensador, siendo
el encargado de regular la entrada de luz al condensador.
Parte mecánica:
Posee los elementos que sostienen a las partes del sistema óptico y de la iluminación.
Base: Contiene la base sobre la que se apoya el microscopio y la fuente de luz.
Brazo: Columna perpendicular a la base, puede ser arqueado o vertical y una a la base con el tubo.
Platina: Pieza metálica plana en la que se coloca la muestra en el portaobjetos, posee pinzas de
sujeción, tornillos del carro y un orificio en el eje óptico del tubo, que permite el paso de los rayos
luminosos hacia la muestra.
Tubo ocular: es una cámara oscura unida al brazo mediante una cremallera. Sostiene el mecanismo del
revólver con los objetivos en su parte inferior y los oculares en el extremo superior.
Tornillos de enfoque fino y rápido: Permite enfocar al mover la platina hacia arriba y hacia abajo. El
micrométrico lo hace de forma rápida y el micrómetro de forma lenta. Llevan un mando de bloqueo
que fija la platina una determinada altura.
Tornillos del carro: Es un dispositivo que se encuentra sobre la platina y que permite deslizar la lámina
de adelante hacia atrás y de derecha a izquierda.
Pinzas de sujeción: Ubicada en la platina, ayuda a sujetar el portaobjetos.
Mecanismo de revolver: Dispositivo giratorio que permite intercambiar los objetivos.
Interruptor: Botón situado en la base que permite el encendido o apagado del equipo.
Cabeza: Transmite la imagen desde el objetivo hasta el ocular.
Ajuste de iluminación: Perilla o botón que permite regular la intensidad de luz.
Magnificación. O amplificación se expresa en diámetros (x) nos da una idea del aumento final de la imagen en
cuanto la proporción del tamaño.
Resolución. Es el grado de separación que puede advertirse entre dos puntos adyacentes de un preparado,
ósea el más pequeño grado de separación en el cual dos detalles pueden ser distinguidos entre sí.
Tipos de microscopio
Existen diversos tipos de microscopios que fueron utilizados a través de la historia, y también existen
actualmente microscopios diseñados con un propósito en especial, algunos de estos son:
Microscopio electrónico de barrido
Microscopio óptico
Microscopio simple
Microscopio compuesto
Microscopio de luz ultravioleta
Microscopio de fluorescencia
Microscopio petrográfico
Microscopio en campo oscuro
Microscopio de contraste de fase
Microscopio de luz polarizada
Microscopio confocal
Microscopio electrónico
Microscopio electrónico de transmisión
Microscopio de iones en campo
Microscopio de sonda de barrido
Microscopio de efecto túnel
Microscopio de fuerza atómica
Microscopio virtual
Manejo del microscopio.
1er Paso. - Se saca el microscopio de su estuche o se quita su protector plástico, posterior mente se lleva a una mesa
estable de laboratorio.
2do paso. - Se procede a revisar el completo estable de funcionamiento de sus tres sistemas
3er paso. - Si presenta alguna alteración, polvo en alguno de los sistemas se procede a limpiar.
4to paso.- Se procede a realizar la obtención de luz, en los microscopios antiguos mediante el espejo, en los modernos
mediante el sistema de iluminación incorporado, posterior mente se regula la altura del condensador a la apertura del
diafragma, por ejemplo : al observar tejidos calcificados se requiere que el condensador este en su parte superior con el
diafragma bien abierto, en tejidos epiteliales el condensador deberá estar en la parte media o inferior, con el diafragma
medianamente abierto, esto de acuerdo al grosor espesor del tejido.
5to paso. - Se coloca la placa de muestra tomando en cuenta los siguientes aspectos: El cubre objetos deberá
encontrarse en la parte superior de la placa, si esta tiene alguna denominación ya sea numeral o literal se colocará a la
derecha del observador y por último la muestra deberá estar en la parte central del orificio de la platina.
6to paso. - Se soluciona el objetivo de campo colocando en eje óptico
7mo paso. - Se baja él tuvo óptico del microscopio con el tornillo macrometico hasta el tope inferior teniendo cuidado
de que el objetivo no choque y pueda romper la placa, en los modelos modernos se sube la platina, posteriormente se
procede a observar a través del ocular, luego con el tornillo micrométrico se aclara la imagen denominándose este
enfoque definitivo.
8vo paso. - De acuerdo a requerimiento se procederá a observar con los objetivos de pequeño, mediano, mayor
aumento, y de inmersión.
9no paso. - una vez incluido el estudio se procede a realizar los mismos pasos en forma inversa, 8vo, 7mo, etc.
CUIDADOS DEL MICROSCOPIO. El microscopio es un instrumento delicado que, si no se trata con debido cuidado, puede
dañarse y dar un rendimiento limitado.
1) El microscopio debe ser guardado en un lugar seco y protegido y de polvo
2) Al trasladar de un lugar a otro, debe ser cuidado con una mano del brazo y con otra por abajo del
soporte o plataforma.
3) Antes de usar el microscopio debe cerciorarse que las lentes accesibles estén limpias, de no ser así
habrá que limpiarlas con un paño sable, seco y limpio (preferiblemente de lino) o del papel de seda
4) Las lentes accesibles son: Oculares, objetivos y condensadores: no deben quitarse las lentes de su
lugar porque podría introducirse polvo al interior del microscopio
5) Cuando se usa aceite de inmersión, una vez terminada la observación, hay que quitar el aceite que
ha quedado en la lente que si se deja se reseca y adhiere a la lente, y después prácticamente
imposible quitarlo.
6) Para limpiar el exceso de aceite, se puede usar un lienzo limpio o papel especial.
7) Los lentes objetivos, el condensador y los oculares han sido cuidadosamente ajustados en la fábrica
de origen, por lo tanto, no deben ser desarmados por el observador: el poder definición del
microscopio depende de todas las lentes estén centradas y a la distancia correcta una de otras.
8) Los objetivos, el condensador y los oculares pueden ser limpiados con agua destilada.
9) La superficie del microscopio se puede limpiar simplemente con un lienzo húmedo en agua: La
cremallera del tornillo micrométrico debe ser limpiada ocasionalmente con una pequeña cantidad o
grasa delgada.
El tronillo micrométrico no necesita aceite
10) Hay necesidad de ajustar el tornillo micrométrico, cuando al subir tuvo del microscopio se baja solo
lentamente.