Nº 131
Pág. 1: Validación de métodos en el la-
boratorio bioquímico - Parte I
Pág. 3: Valores de colesterol en una po-
blación estudiantil de Córdoba
Pág. 4: Agenda de Congresos
Boletín del Servicio Bibliográfico de Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Año XL - Abril 2006
http//:www.wiener-lab.com.ar
Director: Gustavo A. Capriotti - Redactor: Cristina M. Crepaldo - Editor Responsable: Wiener Laboratorios S.A.I.C. - 2000 - Rosario - Argentina
Validación de métodos en Cada vez que en el laboratorio se desea
implementar un nuevo método analítico,
previamente debe evaluarse la performan-
el laboratorio bioquímico ce del mismo. Esto se torna imprescindible
si se considera que dicho método generará
Parte I un resultado, el cual debe ser confiable y
fundamentalmente, debe ajustarse perfec-
González L.G.; Capriotti, G.A. - Centro de Investigación y Biotecnología tamente a los fines clínicos para los cuales
Wiener Laboratorios S.A.I.C. - Rosario - Argentina. está destinado.
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12345678901 a norma ISO 15.189 en su pun- error hay en el resultado obtenido con ponente de error aleatorio (imprecisión)
L
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to 5.5 “Procedimientos analíti-
cos”, especifica que los méto-
un sistema dado en un laboratorio.
Una vez conocido, es deseable estable-
y una de error sistemático (inexactitud).
Los requerimientos (goals) del CLIA se
dos empleados por el laboratorio deben cer como afectará esta cantidad de error basan fundamentalmente en el “estado
estar perfectamente validados y que toda a la interpretación de un resultado y si del arte” y derivan de programas de eva-
la información referida a su performan- esto va a comprometer o no la decisión luación interlaboratorial y de la perfor-
ce (exactitud, imprecisión, linealidad, futura que el médico pueda tomar con mance obtenida por laboratorios califi-
etc) debe estar debidamente registrada. un paciente al basarse en él. cados que emplean la metodología dis-
La CLSI (Clinical and Laboratory Stan- ponible en la actualidad. Una desventa-
dards Institute) define Validación como Especificación de los ja de esto, es que si consideramos que la
“todas las acciones destinadas a probar requerimientos de calidad performance de un método se ve muy
que un determinado proceso, sistema, influenciada por los permanentes avan-
equipamiento, o método trabaja de la Una vez que hemos llevado a cabo to- ces tecnológicos, el “estado del arte” irá
manera esperada y logra los resultados dos los experimentos, que hemos reuni- sufriendo modificaciones con el tiempo,
propuestos”. do los datos y hemos estimado los dife- con lo cual será inevitable que los crite-
La validación de un método analítico debe rentes tipos de error, surge la pregunta rios de aceptabilidad también deban ser
realizarse a través de un proceso standar- de si ese error puede ser considerado redefinidos continuamente.
dizado que involucra una serie de pasos: como aceptable o no. Para ello es impres- Los países europeos, por el contrario, han
• Definición “a priori” de las Especi- cindible que previamente hayamos es- empleado un criterio diferente en la de-
ficaciones o Requerimientos de Calidad. tablecido nuestras metas de aceptabili- finición de estos goals o requerimientos
Estas luego deberán ser aplicadas para dad en lo que a error se refiere. Desde de calidad analíticos: un criterio clíni-
poder juzgar si la performance del método Tonks han sido muchas las aproximacio- co, definido por la mínima calidad ana-
puede considerarse aceptable o no. nes realizadas para definir estas metas o lítica requerida y que aún puede consi-
• Diseño de un experimento cuidadosa- “goals” analíticos. derarse aceptable, para una situación
mente planeado de manera tal que, a La postura de los EE.UU, a través de lo clínica en la cual una decisión médica
partir de él se puedan obtener una de- establecido por el CLIA (Clinical debe ser tomada y un criterio biológico
terminada cantidad de datos. Laboratory Improvement Amend- basado en la variación biológica de la
• Análisis de esos datos empleando un ments), introduce el concepto de “Error determinación.
método estadístico apropiado, de manera Total”, considerado como la diferencia Contrariamente al CLIA, éstos conside-
de poder extraer conclusiones acertadas. máxima que puede tolerarse para una ran separadamente un criterio para la
No se debe perder de vista que, en defi- única medición en un “Proficiency Test imprecisión y otro para la inexactitud, y
nitiva, el objetivo único y final de la vali- Survey”. No debemos olvidar que el con- a partir de ellos se calcula el Error To-
dación de un método es estimar cuanto cepto de error total involucra una com- tal.
1
§ Validación de métodos...
El criterio basado en variabilidad bioló- Program) para las determinaciones de do sea juzgada como aceptable o no,
gica ha sido ampliamente aceptado Colesterol, Triglicéridos, y HDL coles- dependerá de cuanto error analítico sea
como el más satisfactorio. Su principal terol. permitido, de manera que no afecte o
ventaja es que es un modelo simple de La Tabla II muestra los distintos reque- limite el uso y la interpretación de un
entender y que existen en la bibliografía rimientos de calidad publicados para al- resultado.
gran cantidad de datos sobre variabili- gunas de las determinaciones de uso fre- El error total de una medición está com-
dad biológica. Su principal desventaja es cuente en el laboratorio clínico (valores puesto por un error aleatorio y uno sis-
que los criterios de aceptabilidad deri- actualizados al año 2006). temático y viene calculado por la siguien-
van de la aplicación de ciertas expresio- te expresión:
nes matemáticas cuyas fracciones son Tabla II
algo empíricas. En la Tabla I se mues-
CLIA Variabilidad Biológica
tran las distintas expresiones de cálculo
del Coeficiente de Variación (CV) como Determinación Error Total % Imprecisión % Inexactitud % Error Total %
medida de estimación de la imprecisión Glucosa ± 10% ó 6 mg/dL 2.9 2.2 6.9
del método y del Bias porcentual (B%) Colesterol ± 10 % 3.0 4.0 9.0
como medida de estimación de la in- Creatinina ± 15% ó 0.3 mg/dL 2.2 3.4 6.9
exactitud basados en el concepto de GOT ± 20% 6.0 5.4 15.2
variabilidad biológica, según se catego-
rice a la performance como óptima, de- Diseño de un plan ET = ES + ER ET = bias + 3s
seable o mínima. para validar un método En donde “s” es el desvío estándar del
Para algunas determinaciones los reque- método, estimado a partir del experi-
rimientos de calidad que surgen de apli- El diseño empleado debe cumplir con dos mento de replicación y “bias” es la dife-
car este criterio, resultan más estrictos condiciones: rencia promedio si se empleó un Test T,
de lo que puede lograrse con la metodo- • debe emplear ensayos o experimentos o la diferencia Yc - Xc si se empleó un
logía actualmente disponible. Por lo tan- específicos para estimar la magnitud de análisis de regresión. Como menciona-
to, por el momento deben ser sólo consi- los diferentes tipos de errores analíticos; mos anteriormente, esto se detallará en
derados como “targets” (o sea, aquellos • debe ser práctico en lo que respecta al el próximo número. A menudo se em-
hacia donde deseamos ir) y no estricta- tiempo, al esfuerzo requerido y a los cos- plean expresiones porcentuales para es-
mente como “criterios de aceptabilidad” tos. tos errores, en cuyo caso los términos
inflexibles. Los aspectos fundamentales de una va- deberán ser reemplazados por Bias % y
lidación incluyen como puntos primor- CV respectivamente.
Tabla I diales la evaluación de la precisión, exac- La performance del método podrá ser
titud y rango reportable. En considerada aceptable si el error total
IMPRECISION PERFORMANCE
algunas situaciones es im- calculado es menor al “error total máxi-
CV < 0.25 x CVI Optima portante agregar otros en-
CV < 0.50 x CVI Deseable
mo permitido”.
sayos como por ejemplo: lí- Los criterios de aceptabilidad de la per-
CV < 0.75 x CVI Mínima
mite de detección, interva- formance que propone el CLIA para sus
CV: Imprecisión del método estimada como CV total
lo de referencia, interferen- “tests de proficiencia” son una buena
CVI: Variabilidad Biológica intraindividual.
cias, recuperación, etc. Al- opción a la hora de establecer requeri-
INEXACTITUD PERFORMANCE gunos de estos experimen- mientos o especificaciones de calidad
B% < 0.125 x [CVI2 + CVG2]0.5 Optima tos serán descriptos, con analítica.
2
B% < 0.250 x [CVI + CVG ] 2 0.5
Deseable mayor detalle en el próximo
B% < 0.375 x [CVI2 + CVG2]0.5 Mínima número de este boletín. Conclusión
B%: Inexactitud del método estimada como Bias % Una vez completados los
CVI: Variabilidad Biológica intraindividual experimentos y obtenidos Lo expresado en este trabajo, tiene como
CVG Variabilidad Biológica grupal los correspondientes pará- objetivo fundamental proporcionar algu-
metros estimadores de los nas pautas generales para que cada la-
Otro criterio de bastante difusión para diferentes tipos de error, debe realizar- boratorio sea capaz de implementar su
establecer requerimientos de calidad es se el juicio acerca de la aceptabilidad de propio procedimiento de validación. No
el basado en la “Opinión de expertos”, la performance del método estudiado. debe perderse de vista que existen una
los cuales proveen conceptos interesan- gran variedad de factores propios de
tes que en general son de naturaleza to- Criterios para evaluar cada lugar, de su operatoria de trabajo,
talmente empírica. Un ejemplo de esto aceptabilidad de performance del instrumental empleado, etc, que
son los goals establecidos por el NCEP pueden afectar la performance espera-
(National Cholesterol Education Que la performance de un dado méto- da de un dado método.
2
§ Validación de métodos...
§ Valores de colesterol en...
Cada laboratorio debe poder demostrar
que la metodología empleada tiene un
buen desempeño bajo sus propias condi-
Valores de
ciones de trabajo y que está sustentada
en procedimientos debidamente estan-
darizados.
Colesterol en una población
Solamente de esta manera podrá cum-
plir con su principal responsabilidad: ga-
rantizar a sus pacientes la confiabilidad
estudiantil de Córdoba
de sus resultados.
Dres. Jorge Robledo; Leonardo Siccardi; Alberto Lubetkin; Lic. María Inés Rodríguez
Próximo nº: Parte II
[email protected]- Experimento de replicación
- Experimento de determinación de linealidad En el año 1997 se efectuó en la población estudiantil de Jovita, en la franja
- Experimento de comparación de métodos
de edades comprendida entre los 5 y los 17 años, el dosaje de colesterol en
sangre. En el año 2003, se repitió la experiencia, agregando en esta oportu-
Referencias
nidad las medidas de talla y peso. Estas actividades formaban parte del
- Norma Argentina IRAM:ISO 15189 - Programa Interinstitucional de Prevención y Educación en Salud (PIPES)
Primera Edición. en el que participaron entidades educativas, instituciones privadas, profe-
- David B. Tonks. A Study of the Accu- sionales de la salud, docentes de todos los niveles, alumnos de nivel medio
racy and Precision of Clinical Chemis- y habitantes de la localidad de Jovita, Pcia de Córdoba - Argentina.
try Determinations in 170 Canadian
Laboratories. Clin. Chem., Apr 1963;
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9:217-233. 12345678901
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os valores de referencia para
12345678901 cación.
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- Petersen H.; et al. Graphical interpre- 12345678901
la determinación de coleste-
12345678901 En el año 2003 se trabajó con la incor-
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tation of analytical data from compa- 12345678901
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rol son los que sugiere el orga- poración curricular, en el nivel medio,
rison of a field method with a Refer- nismo rector de estas normativas, el del tratamiento de temas referidos a fac-
ence Method by use of difference plots. National Cholesterol Education tores de riesgo cardiovascular, y sobre las
Clin. Chem., Nov 1997; 43:2039-2046. Program, y ellos son: ventajas de una nutrición adecuada
- Fraser C.; Petersen P.; Libeer J.; Ricós C. complementada con una buena activi-
Proposals for setting generally appli- Deseable: < 170 mg/dl
Moderadamente elevado: 170-199 mg/dl dad física. Las consignas principales de
cable quality goals solely based on biol- trabajo fueron “disminución del consu-
ogy. Ann Clin Biochem 1997; 34:8-12. Elevado: > 199 mg/dl
mo de grasas y aumento de la actividad
- CLIA - Clinical Laboratory Improve- Los valores obtenidos se reflejan en la física”.
ment Amendments. CLIA Final Rules. siguiente tabla: En el año 2004 se continuó con el trata-
- Ricós C. - Biological Variation Database miento en los colegios y, a través de un
and Quality Specifications. Update 2006. Tabla 1
convenio de exten-
- Current status of blood cholesterol 1997 (n = 756) 2003 (n = 1050) sión con la Univer-
measurement in clinical laboratories in Colesterolemia Nº alumnos % Nº alumnos % sidad Nacional de
the United States: a report from the
Laboratory Standardization Panel of the Deseable 637 84.3 639 60.9 Río Cuarto, se rea-
NCEP. Clin Chem 1988; 34:193-201. Mod. elevado 100 13.2 282 26.9 lizaron actividades
- James O. Westgard - Basic Method Elevado 19 2.5 129 12.3 (talleres, página
web, folletería, etc.)
Validation - 2nd Edition. dirigidas a comunicar y concientizar a la
Por convención se ha dado en llamar
- NCCLS EP5-A - Evaluation of Preci- población en general acerca de la nece-
“hipercolesterolémicos” a todos aquellos
sion Performance of Clinical Chemis- sidad de una alimentación sana.
que presentaron valores de 170 mg/dl o
try Devices. February 1999. En el año 2005 se realizó una reevalua-
superiores. De tal modo se puede obser-
- CLSI EP6-A - Evaluation of the Lin- ción de los niños y adolescentes caratu-
var el crecimiento muy marcado desde
earity of Quantitative Measure-ment lados como hipercolesterolémicos en
el año 1997 (13.2 + 2.5 = 25.7%) al 2003
Procedures. April 2003. 2003, a los efectos de poder medir los
(26.9 + 12.3 = 39.2%).
- NCCLS EP9-A - Method Comparison posibles cambios que se pudieran haber
Este panorama hizo pensar en la necesi-
and Bias Estimation Using Patient Sam- producido.
dad de una intervención, y se consideró
ples. December 1995. De una población total de 417 niños y
que el ámbito más adecuado para lograr
resultados lo constituía el área de la edu- adolescentes, 244 respondieron afirma-
§
§
§
3
§ Valores de colesterol en...
§ Agenda de Congresos
tivamente a la invitación y se les efec- mismo de 194 a 181 mg/dl, lo que en va-
tuó una extracción de sangre con la que lores porcentuales significa una disminu-
se realizó la determinación de coleste-
rol y otros parámetros bioquímicos.
ción promedio del 7.35%.
De los 65 alumnos 21 de ellos se hallan
Las siguientes tablas reflejan los resul- actualmente en la franja de ”modera- Agenda de Congresos
tados obtenidos específicamente en la damente elevados” y 13 de ellos en la
determinación de colesterol, parámetro franja considerada como deseable. Argentina
principal de nuestro trabajo y, a los fines Conjuntamente se efectuó una breve
de divulgación general, el más popular. encuesta tendiente a evaluar los cam- I Congreso Panamericano
En la Tabla 2 se puede ver que en la sec- bios de hábitos en alimentación y activi- de Zoonosis
ción «< 170 mg/dl» del año 2003 la can- dad física ocurridos en los últimos dos V Congreso Argentino de Zoonosis
tidad es «0» ya que la franja de alumnos años. El análisis de la misma permite su- II Congreso Bonaerense de
evaluados es la de los que presentaban poner que existe una correlación entre Zoonosis
valores > 170 mg/dl. Además, de los 244 la disminución de los niveles de coleste- La Plata, 10, 11 y 12 de Mayo, 2006
alumnos, 89 de ellos están en estos mo- rol, la disminución en la ingesta de gra- Organiza
mentos en la franja considerada como sas y el aumento de la actividad física. Asociación Argentina de Zoonosis
valor deseable (< 170 mg/dl). La franja Se ha logrado en un muy breve tiempo
Informes
de «170-199 mg/dl» se redujo de 167 una variación sustancial de los niveles
Calle 53 nº 1010
alumnos a 101 y la de «> 199 mg/dl» dis- de colesterol en el grupo evaluado. No (1900) La Plata, Argentina
minuyó de 77 alumnos a 54. es difícil imaginar el papel fundamental [email protected]
En la Tabla 3 se calculó el promedio de desarrollado por la educación y por ende www.zoonosis2006.com
colesterol de los 244 alumnos en el 2003 la relevante cuota de mérito que tiene
y en el 2005. Se observa un descenso del en los resultados obtenidos. Paraguay
Tabla 2 XVII Congreso
Latinoamericano de Bioquímica
Año 2003 Año 2005 Diferencia Clínica
Colesterolemia Nº alumnos % Nº alumnos % Nº alumnos % IV Congreso Nacional de
< 170 mg/dl 0 0.0 89 36.5 -89 36.5 Bioquímica Clínica
170-199 mg/dl 167 68.4 101 41.4 66 -27.0 Hotel Yacht y Golf Club
> 199 mg/dl 77 31.6 54 22.1 23 -9.4 Avda. del Yacht nº 11 (Lambaré)
Totales (n) 244 244 Asunción
4 al 7 de Abril de 2006
Tabla 3 Organizan
COLABIOCLI
Valor promedio de colesterol Asociación de Bioquímicos
2003 2005 del Paraguay
194 mg/dl 181 mg/dl Informes
TE: 595-21-223288
Diferencia [email protected]
-7.35% [email protected]
Tabla 4 Estados Unidos
Sub-muestra de 65 alumnos que, en el año 2003 estaban comprendidos en la zona AACC 2006 Annual Meeting
de colesterol elevado (mayor a 199 mg/dl) and Clinical Lab Exposition
Nº alumnos McCormick Place Convention
Colesterolemia Center, Chicago
2003 2005
23 al 27 de Julio de 2006
Menores de 170 mg/dl 13 Organiza
De 170 a 199 mg/dl 21 AACC
Mayores de 199 mg/dl 65 31
1850 K Street, NW - Suite 625 -
Totales (n) 65 65 Washington, DC USA 20006-2213
www.aacc.org/2006am/
§
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