COMPLEXOMETRIA DEL PARACETAMOL
INTRODUCCIÓN
Se basa en la determinación de iones metálicos donde el agente titulante es un
ligando que forma un complejo con un ion metálico. Para titular iones metálicos
con un ligando complejante, la constante de formación del complejo debe ser
grande, para que la reacción de titulación sea estequiométrica y cuantitativa.
Requisito que no cumplen muchas veces un ligando unidentado a pesar de tener
una constante total grande, pero las constantes intermedias de cada paso son
pequeñas generándose un cambio gradual en la concentración del ion metálico,
no permitiendo una clara visualización del punto de equivalencia. En cambio la
valoración con los ligando multidentados como el EDTA, se da en una sola, por lo
cual la valoración del metal origina un cambio marcado en el punto de
equivalencia. Para llevar a cabo las valoraciones de cationes metálicos utilizando
EDTA, casi siempre es necesario utilizar un indicador complexométricas para
determinar cuándo se ha alcanzado el punto final. Los indicadores más comunes
son colorantes orgánicos como el Negro sinfónico, Negro eriocromo T, Rojo
eriocromo B o Murexida. Estos colorantes se unen a los cationes metálicos en
solución para formar complejos coloreados. Sin embargo, como el EDTA se une a
los cationes metálicos mucho más fuertemente que al colorante utilizado como
indicador, el EDTA desplaza el colorante de los cationes metálicos de la solución.
Un cambio de color en la solución indica que todo el colorante ha sido desplazado
de los cationes metálicos en solución, y que se ha alcanzado el punto final.
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE PARACETAMOL
Los analgésicos contra el dolor de cabeza, se preparan en diversas formulaciones,
las cuales pueden incluir frecuentemente uno o más de los siguientes compuestos:
Acetominofeno (Paracetamol) (Ingrediente activo de Tylenol, abreviado como AMF)
El Paracetamol químicamente es el N-(4-Hidroxifenil) Acetamida. Este es un
Antipirético y Analgésico No Opiaceo. Muchas preparaciones comerciales que se
venden libremente contienen Paracetamol en cantidades de hasta 400 mg y de
hasta 325 mg de Ibuprofeno. El método más usado para el control de calidad de
estas drogas es la determinación simultánea por HPLC en Fase Reversa,
utilizando un detector UV o DAD.
Excipiente es un material inerte que debe ser soluble en agua. No tiene interés
para nosotros en este análisis, aunque los fabricantes farmacéuticos también
deben controlar su contenido. El objetivo de la práctica es cuantificar el contenido
del Paracetamol y del Ibuprofeno de una tableta de venta comercial, extrayendo
los principios activos para el análisis por HPLC.
Materiales, Reactivos y Equipos
Reactivos
Acetonitrilo Grado HPLC
Agua Grado HPLC
Dihidrógeno Fosfato Monosódico G.
R.
Monohidrógeno Fosfato Disódico G.
R.
Estándares
Estándar Paracetamol USP
Estándar Ibuprofeno USP
MATERIALES DE VIDRIO
04 Frascos Volumétricos de 10 ml
01 Frasco Volumétrico de 25 ml
01 Frasco Volumétrico de 500 ml
01 Frasco Volumétrico de 1000 ml
01 Probeta de 500 ml
02 Vasos de Precipitado de 25 ml
01 Vaso de Precipitado de 100 ml
02 Pipetas Volumétricas de 2 ml
02 Pipetas Volumétricas de 5 ml
MATERIALES COMPLEMENTARIOS
01 Micropipeta de 100 a 1000 uL con Puntas descartables
04 Filtros de Jeringa de 0.45 um de Poro
01 Jeringa Hipodérmica para filtración
01 Mortero de Porcelana
Espátula de Vidrio
Equipos:
Balanza analitica
Sistema de filtración de solventes
PROTOCOLO
PREPARACIÓN DE SOLUCIONES, ESTÁNDARES Y MUESTRAS
Preparación de Buffer Fosfato pH = 7.00
En un vaso de 100 ml, pesar lo más exacto posible, las siguientes cantidades de
las siguientes sales:
NaH2PO4 : 8.400 g (Anhidro)
Na2HPO4 : 3.975 g (Anhidro)
Mezclar lo mejor posible y disolver con Agua Ultrapura (Grado HPLC) y verter la
solución en un frasco volumétrico de 500 ml. Llevar a volumen.
PREPARACIÓN DE FASE MÓVIL
Mezclar lo mejor posible las siguientes soluciones:
600 mL de Acetonitrilo Grado (60 %)
400 mL de Solución Buffer pH = 7.00 (40 %)
MUESTREO DE UN LOTE
Al realizar los análisis de control de calidad, la primera tarea es idear un método
adecuado para preparar una muestra representativa de las tabletas. Normalmente,
esto se llevaría a cabo mediante la selección de varios comprimidos y su análisis
para determinar la masa media de los analitos de interés en cada tableta, y la
variación de la masa en el lote. En aras de llevar a cabo un análisis rápido, solo se
va a llevar a cabo el análisis de una sola tableta.
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
Pesar 10 tabletas de la muestra y calcular la masa media y la desviación
estándar de las tabletas. Cada una de las tabletas contiene cerca de 400 mg de
Paracetamol.
Seleccione una tableta para el análisis y registrar su masa.
Utilizar un mortero para triturar la tableta en un polvo fino.
Pesar ~ 25 mg de este polvo directamente en un vaso de precipitados de 100 ml.
Registre la masa pesada.
Añadir ~ 40 mL de Acetonitrilo para disolver la muestra.
Trasvase la solución a un frasco volumétrico de 100 mL
Lavar el vaso con 2 porciones de aproximadamente 10 ml de fase móvil, y verter
la solución de lavado al frasco volumétrico de 100 mL.
Llevar a volumen con Solución Buffer Fosfato pH = 7.00 y homogenizar bien.
Transfiera una porción de la muestra a un vial de 1.5 o 2.0 mL, filtrando la
solución mediante un filtro de jeringa de 0.45 um.
PREPARACIÓN DE SOLUCIÓN STOCK PARACETAMOL E IBUPROFENO
1. Pesar lo más exactamente posible y sobre un vaso de precipitado de 25 mL, 25
mg Paracetamol y 20 mg de Ibuprofeno. Agregar 5 mL de Acetonitrilo Grado HPLC
y disolver lo mejor posible.
2. Transferir esta solución a un frasco volumétrico de 25 mL con Tapa de Vidrio.
Lavar el vaso de precipitado con 2 porciones de 5 mL de Acetonitrilo, vertiendo las
porciones de lavado al frasco volumétrico de 25 mL.
3. Llevar a volumen con Solución Buffer Fosfato pH = 7.00 y homogenizar por
inversión.
4. La solución así preparada, contiene una concentración de 1 mg/mL de
Paracetamol y 0.80 mg/mL de Ibuprofeno.
PREPARACIÓN DE SOLUCIÓN DE TRABAJO PARACETAMOL E
IBUPROFENO
1. Tomar 0, 250 y 500 uL de la Solución Stock Paracetamol e Ibuprofeno y verterla
en tres frasco volumétricos de 10 mL con Tapa de vidrio.
2. Llevar a volumen con la Fase Móvil.
3. Las soluciones así preparadas, tienen las siguientes concentraciones: [0, 25 y
50] mg/L de Paracetamol y [0, 20 y 40] mg/L de Ibuprofeno
Análisis y Cálculos de Resultados
Análisis
Colocar los estándares en viales de 1.5 o 2.0 mL.
Colocar los viales de los estándares y la muestra en el Sistema
Automuestreador.
Introducir los datos de programación para la corrida cromatográfica en el
software del instrumento, de acuerdo a las indicaciones del fabricante.
Llevar a cabo la corrida cromatográfica de los estándares. Registrar los
cromatogramas.
Construir la Curva de Calibración con los Estándares (Área vs Concentración)
Analizar la muestra.
Calcular la concentración de la muestra.
MÉTODO CROMATOGRÁFICO
Tipo de Elusión: Isocrática
Flujo: 0.8 mL/min
Columna: RP 18 (ODS)
Características Columnas: 150 mm x 4.6 mm ID x 5 um partícula
Horno de Columna: 25 – 30 °C
Detector: Arreglo de Diodos (DAD)
Longitudes de Onda: 260 nm
Volumen de Inyección: 20 uL
Tiempo de Análisis: 8 minutos
