UNIVERSIDAD DE GRANADA

FACULTAD DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE MEDICINA

TESIS DOCTORAL
FACTORES ASOCIADOS A ESTEATOSIS HEPÁTICA
DIAGNOSTICADA POR ECOGRAFÍA EN NIÑOS Y
ADOLESCENTES OBESOS

Ángela Salmerón Ruiz

Granada, 17 de diciembre de 2015

Editor: Universidad de Granada. Tesis Doctorales
Autora: Ángela Salmerón Ruiz
ISBN: 978-84-9125-437-9
URI: [Link]
 UNIVERSIDAD DE GRANADA
FACULTAD DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE MEDICINA

TESIS DOCTORAL
FACTORES ASOCIADOS A ESTEATOSIS HEPÁTICA
DIAGNOSTICADA POR ECOGRAFÍA EN NIÑOS Y
ADOLESCENTES OBESOS

Ángela Salmerón Ruiz

Granada, 17 de diciembre de 2015

A mis padres
.
FACTORES ASOCIADOS A ESTEATOSIS HEPÁTICA DIAGNOSTICADA
POR ECOGRAFÍA EN NIÑOS Y ADOLESCENTES OBESOS

Tesis Doctoral presentada por Ángela Salmerón Ruiz para optar al grado de
Doctora por la Universidad de Granada.

Directores de Tesis

Dra. ÁNGELES RUIZ EXTREMERA, Profesora Titular de Pediatría del

Departamento de Pediatría de la Facultad de Medicina de la Universidad de
Granada.

Dr. FRANCISCO JAVIER SALMERÓN ESCOBAR, Catedrático del Departamento

de Medicina de la Facultad de Medicina de la Universidad de Granada.

Dr. ANGEL CARAZO GALLEGO, Técnico Superior de la Unidad de Apoyo a la

Investigación del Hospital Universitario San Cecilio de Granada.
Esta Tesis Doctoral ha sido realizada por la doctorando Ángela Salmerón Ruiz
en el Área de Apoyo a la Investigación del Hospital Universitario San Cecilio y
concluida el 11 de noviembre de 2015.

Fdo. Ángela Salmerón Ruiz

AUTORIZACIÓN PARA LA PRESENTACIÓN DE LA TESIS

Dra. ÁNGELES RUIZ EXTREMERA, PROFESORA TITULAR DE PEDIATRÍA DEL

DEPARTAMENTO DE PEDIATRÍA DE LA FACULTAD DE MEDICINA DE LA
UNIVERSIDAD DE GRANADA,

CERTIFICA: Que la presente Tesis, titulada ¨FACTORES ASOCIADOS A

ESTEATOSIS HEPÁTICA DIAGNOSTICADA POR ECOGRAFÍA EN NIÑOS
Y ADOLESCENTES OBESOS¨, de la que es autora Dña. Ángela Salmerón Ruiz,
ha sido realizada bajo mi dirección en el Área de Apoyo a la Investigación del
Hospital Universitario San Cecilio de Granada.

Revisado el presente trabajo, considero que tiene la calidad científica necesaria

para ser defendido ante el Tribunal que se designe al efecto, por lo que:
AUTORIZO la presentación de la presente Tesis para su defensa y obtención del
Grado de Doctor por la Universidad de Granada.

Y para que conste y surta sus efectos en el expediente correspondiente, expido la

presente certificación en Granada a 11 de noviembre de 2015.

Fdo. Dra. Ángeles Ruiz Extremera

AUTORIZACIÓN PARA LA PRESENTACIÓN DE LA TESIS

Dr. FRANCISCO JAVIER SALMERÓN ESCOBAR, CATEDRÁTICO DEL

DEPARTAMENTO DE MEDICINA DE LA FACULTAD DE MEDICINA DE LA
UNIVERSIDAD DE GRANADA,

CERTIFICA: Que la presente Tesis, titulada ¨FACTORES ASOCIADOS A

ESTEATOSIS HEPÁTICA DIAGNOSTICADA POR ECOGRAFÍA EN NIÑOS
Y ADOLESCENTES OBESOS¨, de la que es autora Dña. Ángela Salmerón Ruiz,
ha sido realizada bajo mi dirección en el Área de Apoyo a la Investigación del
Hospital Clínico Universitario San Cecilio de Granada.

Revisado el presente trabajo, considero que tiene la calidad científica necesaria

para ser defendido ante el Tribunal que se designe al efecto, por lo que:
AUTORIZO la presentación de la presente Tesis para su defensa y obtención del
Grado de Doctor por la Universidad de Granada.

Y para que conste y surta sus efectos en el expediente correspondiente, expido la

presente certificación en Granada a 11 de noviembre de 2015.

Fdo. Dr. Javier Salmerón Escobar

AUTORIZACIÓN PARA LA PRESENTACIÓN DE LA TESIS

Dr. ÁNGEL CARAZO GALLEGO, TÉCNICO SUPERIOR DE LA UNIDAD DE APOYO

A LA INVESTIGACIÓN DEL HOSPITAL UNIVERSITARIO SAN CECILIO DE
GRANADA,

CERTIFICA: Que la presente Tesis, titulada “FACTORES ASOCIADOS A

ESTEATOSIS HEPÁTICA DIAGNOSTICADA POR ECOGRAFÍA EN NIÑOS
Y ADOLESCENTES OBESOS¨, de la que es autora la Dña. Ángela Salmerón Ruiz,
ha sido realizada bajo mi dirección en el Área de Apoyo a la Investigación del
Hospital Clínico Universitario San Cecilio de Granada.

Revisado el presente trabajo, considero que tiene la calidad científica necesaria

para ser defendido ante el Tribunal que se designe al efecto, por lo que:
AUTORIZO la presentación de la presente Tesis para su defensa y obtención del
Grado de Doctor por la Universidad de Granada.

Y para que conste y surta sus efectos en el expediente correspondiente, expido la

presente certificación en Granada a 11 de noviembre de 2.015.

Fdo. Dr. Ángel Carazo Gallego

AGRADECIMIENTOS
Agradezco profundamente a mis directores de tesis Ángeles Ruíz Extremera,
Javier Salmerón y Ángel Carazo por su inmensa paciencia durante este largo
tiempo, y por despertar en mi el interés en la investigación. He aprendido a ser
sistemática, a aplicar la lectura y el método científico a los problemas clínicos.
Su ejemplo, dedicación y ánimo han sido fundamentales para llevar a cabo este
trabajo.

A Alejandro Goicoechea Vera y a Juan Manuel Fernández por la ayuda a la hora

de reclutar a los pacientes. A Maximiliano Garofano, radiólogo infantil, por la
paciencia y dedicación a este trabajo. Al grupo de investigación CTS-227, por su
participación en las determinaciones analíticas y elaboración de resultados.

Quiero mencionar a todos los miembros del Servicio de Radiodiagnóstico del

Hospital Universitario Virgen de las Nieves, por compartir con vosotros el día a
día de mi vida personal y profesional, por haberme enseñado tanto sobre la
especialidad de forma tan generosa, y por haberme inculcado el concepto
precioso y clásico de la visión clínica de la medicina.

Me gustaría dedicar un agradecimiento especial a mis padres y hermana por su

cariño y compresión durante todos los años de mi vida. A ellos les debo la
visión de entrega a mi profesión y el procurar estar al servicio de mis pacientes.

A Iñaki, al pequeño Iña y a Olivia por todo su amor.

A todos los niños y sus familias, sin ellos esta tesis no tendría sentido
Abreviaturas

- 4-HNA: Hidroxinonenal
- AdipoR: Receptores Transmembrena de la Adiponectina
- AGL: Ácidos Grasos Libres
- ALT: Alanino Aminotransferasa
- AMA: Anticuerpor Antimitocondriales
- AMPK: Adenosin Monofosfato Protein Kinasa
- ANA: Anticuerpos Antinucleares
- APO C3: Apolipoproteina C3
- AST: Aspartato Aminotransferasa
- AVENA: Alimentación y Valoración del Estado Nutricional en
Adolescentes
- CEH: Células Estrelladas Hepáticas
- CMV: Citomegalovirus
- COX-2: Ciclooxigenasa Inducible por Citoquinas
- DC: Células Dendítricas
- DHEAS: Sulfato de Dehidroepiandrosterona
- DM2: Diabetes Mellitus tipo 2
- EHGNA: Enfermedad de Hígado Graso No Alcoholico
- EHNA: Esteatohepatitis No Alcoholica
- eNOS: Endotelial Óxido Nítrico Sintetasa
- ERNS: Especies Reactivas de Nitrógeno
- EROS: Especies Reactivas de Oxígeno
- GGT: Gamma Glutamil Transferasa
- GPx: Glutation Peroxidasa
- GRD: Glutation Reductasa
- GSH: Glutation Reducido
- GSSG: Glutation Oxidado
- GWAS: Genome Wide Association Studies
- H202: Peróxido de Hidrógeno
- HB: Hemoglobina
- HDL: Lipoproteinas de Alta Densidad
- HOMA: Índice de Evaluación del Modelo Homeostático
- IDF: Federación Internacional de Diabetes
- IL-1β: Interleuquina-1β
- IL-6: Interleuquina 6
- IMC: Índice de Masa Corporal
- INFγ : Interferon γ
- iNOS: Inducible Óxido Nítrico Sintetasa
- IOFT: International Obesity Trask Forcé
- JAK2: Janus Activated Kinasas
- KC: Células de Kupffer
- LDL: Lipoproteinas de Baja Densidad
- MCP-1: Proteina Quimiotáctica de Monocitos-1
- MDA: Malonildialdehído
- NADPH: Nicotin Adenina Dinucleótido Fosfato Reducida
- NHANES: Encuesta Nacional de Salud y Nutrición
- NNMT: Nicotinamida N Metil Transferasa
- nNOS: Neuronal Óxido Nítrico Sintetasa
- NO: Óxido Nítrico
- NOS: Óxido Nítrico Sintetasa
- O2•¯: Anión Radical Superóxido
- ObR: Receptores Específicos de la Leptina
- OMS: Organización Mundial de la Salud
- ONOO¯: Peroxinitrito
- PAD: Presión Arterial Diastólica
- PAS: Presión Arterial Sistólica
- PPAR: Peroxisome Proliferator-Activated Receptor
- PUFAs: Ácidos Grasos Poliinsaturados
- QTL: Quantitative Trait Loci
- RI: Resistencia a la Insulina
- RL: Radicales Libres
- ROS: Especies Reactivas de Oxígeno
- SLR: Receptor Soluble de Leptina
- SM: Síndrome Metabólico
- SNC: Sistema Nervioso Central
- SNP: Polimorfismo de Nucleótidos
- SOCS3: Supresores de la Señal de las Citoquinas 3
- SOD: Superóxido Dismutasa
- SRABP-1: Sterol Regulatory Element Binding Protein
- STAT: Signal Transducer Activators of Transcription
- sTNFα-R: Forma Soluble del Receptor del Factor de Necrosis Tumoral α
- T3: Tiroxina
- T4: Triyodotiroinina
- TAB: Tejido Adiposo Blanco
- TG: Triglicéridos
- TNF- α: Factor de Necrosis Tumoral α
- TSH: Hormona Estimulante del Tiroides
- UCP3: Proteina Desacoplante Mitocondrial 3
- VHA: Virus de la Hepatitis A
- VHB: Virus de la Hepatitis B
- VHC: Virus de la Hepatitis C
- VLDL: Lipoproteínas de Muy Baja Densidad
 INDICE

Índice

1 INTRODUCCION .......................................................................... 1

1.1 OBESIDAD ....................................................................................................... 3

1.1.1 CONCEPTO DE OBESIDAD ......................................................................... 3
1.1.2 ÍNDICE DE MASA CORPORAL O ÍNDICE QUELETET ................................... 6
1.1.3 PREVALENCIA DE OBESIDAD .................................................................... 6
1.1.4 ETIOLOGÍA Y FISIOPATOLOGÍA DE LA OBESIDAD ................................... 10
1.1.5 INFLUENCIA DE LA OBESIDAD INFANTIL Y EN LA ADOLESCENCIA EN LA
SALUD..................................................................................................... 13

1.2 RESISTENCIA A LA INSULINA Y SÍNDROME METABÓLICO EN NIÑOS Y

ADOLESCENTES ........................................................................................................ 14
1.2.1 CONCEPTOS ............................................................................................ 14
1.2.2 CUANTIFICACIÓN DE LA RESISTENCIA A LA INSULINA........................... 17
1.2.3 COMORBILIDADES ASOCIADAS A LA RESISTENCIA A LA INSULINA
(TABLA 3) ............................................................................................... 18

1.3 TEJIDO ADIPOSO ........................................................................................... 20

1.3.1 ADIPOCITOQUINAS PRINCIPALES ........................................................... 24

1.4 ESTRÉS OXIDATIVO ...................................................................................... 35

1.5 ENFERMEDAD DE HÍGADO GRASO NO ALCOHOLICA................................... 39

1.5.1 CARGA GENÉTICA EN LA ENFERMEDAD DE HÍGADO GRASO NO
ALCOHOLICA .......................................................................................... 42
1.5.2 OTROS FACTORES ETIOLÓGICOS EN EL DESARROLLO DE EHGNA .......... 44
1.5.3 CLÍNICA DE EHGNA EN NIÑOS ................................................................ 51
1.5.4 DIAGNÓSTICO ......................................................................................... 51

2 HIPÓTESIS Y OBJETIVOS .......................................................... 57

2.1 HIPÓTESIS ..................................................................................................... 59

2.2 OBJETIVOS .................................................................................................... 59

2.2.1 OBJETIVO PRINCIPAL ............................................................................. 59
2.2.2 OBJETIVOS SECUNDARIOS ...................................................................... 59

1
 ÍNDICE

3 PACIENTES Y MÉTODOS ........................................................... 61

3.1 PACIENTES .................................................................................................... 63

3.1.1 CRITERIOS DE INCLUSIÓN ...................................................................... 63
3.1.2 CRITERIOS DE EXCLUSIÓN ...................................................................... 64

3.2 MÉTODOS ...................................................................................................... 64

3.2.1 METODOLOGÍA CLÍNICA ......................................................................... 64
3.2.2 RECOGIDA Y ANÁLISIS DE LAS MUESTRAS SANGUÍNEAS ........................ 66
3.2.3 ANÁLISIS DE LOS DATOS ......................................................................... 69
3.2.4 CONSIDERACIONES ÉTICAS..................................................................... 69

4 RESULTADOS............................................................................ 71

4.1 ANÁLISIS DESCRIPTIVO ................................................................................ 73

4.1.1 CARACTERÍSTICAS GENERALES DE LOS PACIENTES ............................... 73
4.1.2 ANTECEDENTES PERINATALES Y TIEMPO DE EVOLUCIÓN DE LA
OBESIDAD ............................................................................................... 73
4.1.3 INSULINA, ÍNDICE HOMA Y PÉPTIDO C ................................................... 74

4.2 ANÁLISIS BIVARIANTE ............................................................................... 74

4.2.1 ANÁLISIS DE PARÁMETROS ESTUDIADOS EN TODOS LOS PACIENTES Y
EN LOS NIÑOS Y ADOLESCENTES ............................................................ 74
4.2.2 ESTUDIO DE LA ESTEATOSIS HEPÁTICA ................................................. 77
4.2.3 INDICE HOMA Y ESTEATOSIS EN RELACIÓN A LA EDAD Y EL SEXO......... 79
4.2.4 ANÁLISIS MULTIVARIANTE..................................................................... 80
4.2.5 ESTUDIO DE TRANSAMINASAS................................................................ 81

5 DISCUSION................................................................................ 87

6 CONCLUSIONES......................................................................... 95

7 ARTÍCULOS Y COMUNICACIONES .............................................. 99

7.1 ARTÍCULOS .................................................................................................. 101

7.2 COMUNICACIONES ...................................................................................... 101

8 BIBLIOGRAFÍA........................................................................ 103

2
 INDICE

Índice de figuras

• FIGURA 1. ACCION DE LA INSULINA………………………………………………………..………15

• FIGURA 2. CLASIFICACIÓN DE ADIPOQUINAS SEGUN SUS PRINCIPALES
ACCIONES………………………………………………………………………………………………..……...22
• FIGURA 3. ADIPOCITOQUINAS PRINCIPALES………………………………………………….24
• FIGURA 4. ADIPONECTINA Y SU ESTRUCTURA……………………………………………….31

• FIGURA 5. TEORÍA DEL DOBLE IMPACTO………………………..……………………………..41

• FIGURA 6. PROGRESIÓN HGNA A EHNA…………………………………………………………42

• FIGURA 7. LIPOTOXICIDAD……………………………………………………………………………..46

• FIGURA 8. INDICE HOMA EN RELACIÓN AL SEXO, EDAD Y ESTEATOSIS…………81

3
 ÍNDICE

Índice de tablas

• TABLA 1. OBESIDAD INFANTIL………………………………………………………………….……..8

• TABLA 2. PREVALENCIA SOBREPESO POR 100 HABITANTES…….. ………….. ….. ….9

• TABLA 3. COMORBILIDADES ASOCIADAS A LA RESISTENCIA A LA INSULINA………………..19

• TABLA 4. EXPRESION DE ADIPOQUINAS EN TEJIDO CELULAR SUBCUTANEO Y

GRASA VISCERAL…………………………………………………………………………………………….21
• TABLA 5. CARACTERÍSTICAS DE LOS NIÑOS Y ADOLESCENTES OBESOS…………75
• TABLA 6. MARCADORES DE ESTRÉS OXIDATIVO SISTÉMICO, CITOQUINAS
PROINFLAMATORIAS Y ADIPOQUINAS EN NIÑOS Y ADOLESCENTES OBESOS...76
• TABLA7. CARACTERÍSTICAS DE LOS NIÑOS Y ADOLESCENTES OBESOS Y LA
PRESENCIA DE ESTEATOSIS HEPÁTICA…………………………...…………………………….. 78
• TABLA 8. RESULTADOS DE LOS MARCADORES DE ESTRÉS OXIDATIVO Y
ADIPOQUINAS EN LOS NIÑOS Y ADOLESCENTES OBESOS Y PRESENCIA DE
ESTEATOSIS HEPÁTICA…………………………………………………………………………………...79
• TABLA 9. ANÁLISIS DE LAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS DE LOS PACIENTES Y
AUMENTO DE LA ALT……………………………………………………………………………………...82
• TABLA 10. ANÁLISIS MULTIVARIANTE DE LAS CARACTERÍSTICA CLÍNICAS DE
LOS PACIENTES Y ALT…………………………………………………………………………………….83
• TABLA 11. ESTRÉS OXIDATIVO Y ALT NORMAL Y AUMENTADA……………………...83
• TABLA 12. CITOQUINAS Y ADIPOQUINAS SEGÚN ALT NORMAL O
AUMENTADA…………………………………………………………………………………………………..84
• TABLA 13. RESULTADOS DE LAS VARIABLES BIOQUÍMICAS Y SEXO EN LOS
NIÑOS Y ADOLESCENTES OBESOS SEGÚN ALT NORMAL O AUMENTADA………85
• TABLA 14. RESULTADOS DE LOS MARCADORES DE ESTRÉS OXIDATIVO Y
ADIPOQUINAS EN LOS NIÑOS Y ADOLESCENTES OBESOS SEGÚN ALT NORMAL O
AUMENTADA…………………………………………………………………………………………………86

4
 INTRODUCCION

1 INTRODUCCION

1
 INTRODUCCION

2
 INTRODUCCIÓN

1.1 OBESIDAD
La obesidad es una enfermedad crónica multifactorial, fruto de la interacción
entre el genotipo y el medio ambiente

La obesidad infantil predispone a alteraciones del metabolismo

hidrocarbonado (resistencia a la insulina y diabetes tipo 2), hipertensión,
hiperlipemia, enfermedad hepática y renal y disfunción reproductiva. Esta
condición incrementa el riesgo de obesidad en la vida adulta y de enfermedad
cardiovascular[1].
La obesidad infantil es un trastorno complejo. Su prevalencia ha aumentado de
manera tan significativa en los últimos años, que muchos lo consideran uno de
los problemas de salud pública más graves del siglo XXI. La Encuesta Nacional
de Salud y Nutrición (NHANES) indica que la prevalencia de la obesidad está
aumentando en todos los grupos de edad pediátrica, en ambos sexos, y en
diversos grupos étnicos y raciales. Muchos factores, incluyendo la genética, el
medio ambiente, el metabolismo, estilo de vida y hábitos alimenticios, se cree
que desempeñan un papel en el desarrollo de la obesidad. Sin embargo, más del
90% de los casos son idiopáticos, menos del 10% se asocian a causas
hormonales o genéticas.

1.1.1 CONCEPTO DE OBESIDAD

El concepto intuitivo de obesidad es la acumulación excesiva de tejido adiposo

que conduce a un incremento en el riesgo presente y futuro de padecer
patologías asociadas, así como de mortalidad[2]. Debido a que las
complicaciones médicas graves de la obesidad, son menos comunes en niños y
adolescentes que en adultos, y debido también a que los datos longitudinales
sobre la relación entre el peso de la infancia y la morbilidad y mortalidad de
adultos son más difíciles de interpretar, no existe una definición única y
universal de la obesidad en la infancia y la adolescencia[1].

3
 INTRODUCCION

La cuantificación del contenido graso corporal del niño, necesaria para la

definición de obesidad, puede ser realizada de forma directa y precisa mediante
técnicas específicas (bioimpedanciometría, densitometría de absorción dual de
rayos X (DEXA) o hidrodensitometría)[3]. Sin embargo, su limitada
disponibilidad, duración y coste económico han hecho que, desde la perspectiva
clínica, se universalice la estimación directa del contenido graso corporal
mediante el empleo del índice de masa corporal (IMC) o índice Queletet[2].
Antes se definía la obesidad en niños y adolescentes cuando el peso partido por
el peso medio para cada talla y sexo excedía de 120%, según gráficas británicas
o americanas. Actualmente se define en función del IMC. Algunos
investigadores han utilizado los términos sobrepeso, obesidad y obesidad
mórbida para referirse a los niños y adolescentes cuyos pesos superiores a los
esperados para las alturas en un 20%, 50% y 80-100%, respectivamente.
Los valores normales de IMC varía con la edad, sexo y estado puberal. En
Estados Unidos definen la obesidad a partir del percentil 95 para el IMC en la
infancia y la adolescencia de las gráficas de Must (obtenidas del estudio
NHANES I “1er Estudio de Nutrición y Salud Nacional” y recomendadas por la
Organización Mundial de la Salud (OMS)) o de las del centro para la prevención
de enfermedades (CDC), basadas en los 5 estudios NHANES I a V realizados en
Estados Unidos[4]. Estas tablas se han generado utilizando datos de la NHANES
1988-1994[5]. Mediante consenso de comités de expertos han recomendado
que los niños y los adolescentes se consideran con sobrepeso u obesidad si el
IMC supera el percentil 85 o 95, en las curvas generadas a partir de la 1963-
1965 y 1966-1970 NHANES, o superior a 30 kg/m2 a cualquier edad[6].
En Europa este umbral definitorio de obesidad sería el percentil 97 de las
gráficas francesas de Rolland-Cachera (recomendadas por el Grupo Europeo de
Obesidad Infantil)[4].
Tratando de unificar criterios en todo el mundo, la IOTF (Internacional Obesity
Task Force) consiguió reunir a casi 200.000 niños y jóvenes de 0 a 25 años de
edad mezclando seis estudios nacionales de diversos continentes (Estados

4
 INTRODUCCIÓN

Unidos, Brasil, Reino Unido, Holanda, Hong Kong y Singapur) y se diseñaron las
curvas de centiles para cada estudio que a la edad de 18 años pasaran por 25 y
30 kg/m2, límites de definición de sobrepeso y obesidad en adultos. Las seis
curvas se promediaron para obtener los puntos de corte específicos para cada
sexo y edad de 2 a 18 años que definieran obesidad y sobrepeso en la infancia y
adolescencia[7].
En nuestro medio, la Guía de Práctica Clínica para la Prevención y Tratamiento
de la Obesidad Infanto-juvenil 1 postula como criterios para definir el sobrepeso
y la obesidad los valores de los percentiles 90 y 97, respectivamente,
específicos por edad y sexo de la distribución del IMC referido a los datos y
curvas de Hernández et al del año 1988 2.
Existe evidencia de que un niño presenta un exceso de grasa corporal cuando
su IMC supera el percentil 95 para su edad y sexo[8] y de que su definición
óptima se obtiene aplicando, de forma más restrictiva, el punto de corte de +2
DE por encima del valor medio de este parámetro estimado en individuos de la
misma población, edad y sexo[9], coincidiendo así con la propuesta de la
OMS[10]. Teniendo en cuenta que el establecimiento de comorbilidades
asociadas a la obesidad ocurre, con frecuencia, en etapas posteriores de la vida,
tampoco existe consenso actualmente sobre la definición del concepto de
obesidad mórbida en la infancia y adolescencia, proponiendo algunos autores
los límites de +3 SDS de IMC o 200% del peso corporal ideal para la talla como
posibles «puntos de corte» para definirla[2].

1
Grupo de trabajo de la guía sobre la prevención y el tratamiento de la obesidad
infantojuvenil. Centro Cochrane Iberoamericano, coordinador. Guía de practica clínica
sobre la prevención y el tratamiento de la obesidad infantojuvenil. Madrid: Plan de
Calidad para el Sistema Nacional de Salud del Ministerio de Sanidad y Política Social.
Agencia d`iAvaluació de Tecnología i Recerca Mediques; 2009. Guía de practica clínica:
AATRM N.◦ 2007/25.

2Hernandez M, Castellet J, Narvaiza JL, Rincon JM, Ruiz I, Sanchez E, et al. In: Hernandez
M, Fundacion F, Orbegozo, editors. Curvas y tablas de crecimiento. Madrid: Editorial
Garsi;1988

5
 INTRODUCCION

1.1.2 ÍNDICE DE MASA CORPORAL O ÍNDICE QUELETET

El IMC, aunque es una medida imperfecta, refleja de forma continua la grasa

corporal. Calculado como el peso (kg) dividido por la altura (m2), es indicativa,
de forma fiable, del tamaño del cuerpo y puede ser fácilmente cuantificado en la
clínica diaria. Muestra buena correlación con el contenido graso tanto en
adultos como en niños[11],[12], si bien, su interpretación en términos de
contenido graso corporal experimenta variaciones de acuerdo con el sexo, la
edad, el grado de maduración en niños y adolescentes, siendo sus mayores
limitaciones su incapacidad para discernir el grado de desarrollo de masa
muscular y para informar respecto a la distribución del contenido graso entre
los distintos depósitos corporales[4]. Pese a estas limitaciones, el empleo del
IMC como estimación indirecta del contenido graso corporal es universal y,
consecuentemente, la definición de obesidad, tanto en el adulto como en el
niño, se ha formulado en relación a este índice. El IMC no ha sido utilizado
constantemente o validado en niños menores de 2 años. Dado que el peso varía
de forma continua en lugar de un modo gradual, la utilización de estos criterios
arbitrarios es problemática y puede ser engañosa.

1.1.3 PREVALENCIA DE OBESIDAD

Es la enfermedad crónica más prevalente en la infancia y la adolescencia en los

países occidentales. Constituye la epidemia del siglo XXI, como bien señala la
OMS, debido a la intensidad con la que la incidencia y prevalencia del
sobrepeso/obesidad se está incrementando en todos los rangos de edad,
incluida la edad infantil [1, 13]. La OMS afirmó que en 2013 había 42 millones
de niños con sobrepeso u obesidad en todo el mundo 3.

3
[Link]

6
 INTRODUCCIÓN

En Estados Unidos, país que lidera las cifras de prevalencia, el coste

hospitalario anual por obesidad entre 6 y 17 años ha alcanzado los 127
millones de dólares.
El National Health and Nutrition Examination Surveys declaraba en 2012
(publicado en septiembre de 2014) una incidencia muy preocupante de
obesidad en niños y adolescentes norteamericanos, estable desde 2009,
existiendo una prevalencia de obesidad del 16.9% y de sobrepeso de 14.9%,
existiendo diferencias por sexos (17,2 en niñas frente a 16,7 en niños en la
prevalencia de obesidad), existiendo preferencia en determinadas razas,
advirtiendo una cifra mayor de obesidad entre los negros mejicanos
americanos, hispanos y raza negra no hispana[14].
En Europa se constata el mismo fenómeno, ya en 2005, el IOTF señalaba de
forma clara a España e Inglaterra como los dos países desarrollados en donde
más ha crecido y más crecerá la obesidad infantojuvenil en los próximos años.
En España, siguiendo los criterios del IOTF, se encuentra una de las
prevalencias más altas de Europa, entre el 6 y el 15% según las regiones
estudiadas. Según el estudio “enKid”, que recoge niños de todas las
comunidades españolas, la obesidad es más prevalente en el sexo masculino,
entre 6 y 13 años de edad, en familias de menor nivel socioeconómico y
educacional, hábitat urbano y sur de España (Andalucía y Canarias)[15]. Así lo
han corroborado en un estudio realizado en Andalucía Oriental, en el que
observan un 10% de niños por encima del percentil 97 del estudio enKid[16].
Asimismo, el estudio AVENA (Alimentacion y Valoracion del Estado Nutricional
en Adolescentes), desarrollado en el periodo 2000-2002 sobre una muestra de
2.320 adolescentes con edades comprendidas entre los 13 y los 18 años,
demostró una prevalencia de sobrepeso mas obesidad del 25,7% y 19,1% en
varones y mujeres, respectivamente[17].
Según el informe anual del Sistema Nacional de Salud 2012 (revisado en junio
de 2015) se estima que la prevalencia de obesidad infantil (2 a 17 años), se ha
mantenido relativamente estable desde 1987. Un 27,8% de esta población

7
 INTRODUCCION

padece obesidad o sobrepeso. De cada 10 niños 1 presenta obesidad y 2

sobrepeso, con proporción similar en ambos sexos y sin diferencias
sustanciales respecto a 2006 4 (frente al 4,9% de obesidad reportado por el
estudio PAIDOS en el año 1984). Andalucía es la cuarta comunidad autónoma
con mas prevalencia de sobrepeso infantil por cada 100 habitantes, con un
ligero predominio en hombres.

Tabla 3. OBESIDAD INFANTIL

POBLACIÓN INFANTIL AMBOS SEXOS NIÑAS NIÑOS

Normopeso/peso insuficiente 72.2% 73.5% 71%
Sobrepeso 18.3% 16.9% 19.5%
Obesidad 9.6% 9.6% 9.6%
OBESIDAD INFANTIL. Ministerio de Sanidad, Servicios sociales e Igualdad/Instituto
Nacional de Estadística. Encuesta Nacional de Salud de España, 2011/2012 (2013)

4
Encuesta Nacional de Salud de España 2012. Ministerio de Sanidad y Consumo. Gobierno
de España http://
[Link]/estadEstudios/edtadisticas/sisInfSanSNS/tablasEstadisticas/[Link]

8
 INTRODUCCIÓN

Tabla 4. PREVALENCIA SOBREPESO POR 100 HABITANTES (2 A 17 AÑOS)

2011
TOTAL HOMBRES MUJERES
Baleares 26.5 22.8 29.9
País Vasco 25.5 25.9 25
Galicia 23.8 27 20.3
Andalucía 21.3 24.2 18.4
Canarias 20.6 21.3 19.9
Castilla y León 20.3 20.9 19.6
Extremadura 19.8 15.9 23.5
Castilla la Mancha 19.6 20.7 18.4
España 18.3 19.5 16.9
Melilla 18 18.6 17
Asturias 17.2 15.2 19.9
Comunidad Valenciana 16.2 16.8 15.7
Madrid 16.2 17.8 14.6
Navarra 15.8 15.5 16.2
Murcia 15.1 19.2 9.8
Cataluña 14.4 15.1 13.6
Aragón 13.4 11.4 15.6
La Rioja 12.4 16.4 8.2
Cantabria 9.6 13.4 5.3
Ceuta 7.9 14 0
OBESIDAD INFANTIL. Ministerio de Sanidad, Servicios sociales e Igualdad/Instituto
Nacional de Estadística. Encuesta Nacional de Salud de España, 2011/2012 (2013)

Estos datos, junto con el sustancial gasto sanitario atribuido a la obesidad y a

sus patologías derivadas (estimado por el Ministerio de Sanidad y Consumo en
el año 2012 en un 7% del gasto sanitario anual) han determinado la puesta en
marcha de diversas iniciativas orientadas a la prevención y a la intervención
terapéutica precoz en el niño afectado de obesidad, como fue la elaboración de

9
 INTRODUCCION

Guía de Práctica Clínica para prevención y el tratamiento de la obesidad

infantojuvenil[8].

1.1.4 ETIOLOGÍA Y FISIOPATOLOGÍA DE LA OBESIDAD

Una de las dificultades más importantes para el adecuado entendimiento de la

obesidad infantil es que, bajo el denominador común de una acumulación
excesiva de grasa corporal, subyacen etiologías y, por lo tanto, entidades
patológicas radicalmente diferentes. El gran incremento de prevalencia de la
obesidad infantil es debido al desequilibrio entre la ingesta y el gasto
energético propio del estilo de vida occidental. Sin embargo, existe un
porcentaje de casos derivados de la existencia de alteraciones genéticas,
endocrinológicas o sindrómicas subyacentes que, si bien es cuantitativamente
limitado, crece de forma continuada al tiempo que lo hacen nuestros
conocimientos fisiopatológicos de la obesidad infantil[2].

[Link] OBESIDAD EXÓGENA O COMÚN

La más frecuente de las entidades englobadas en la obesidad infantil. En ella, la

coexistencia de una nutrición hipercalórica, con desequilibrios energéticos
positivos durante periodos de tiempo (se estima que el desequilibrio debe
rondar las 100/200 kcal/día en los niños[18]) e inadecuadamente estructurada
(relación proteína-energía alterada, alimentación suplementada con aditivos
tales como carbohidratos o grasas sin aumentar la proporción de proteínas) y
de unos niveles reducidos de actividad física, propios del estilo de vida
occidental actual, influidos a su vez por el poder adquisitivo de las familias[19],
son determinantes. No obstante, existen estudios recientes que afirman que la
vida sedentaria en la población infantil puede ser consecuencia de la obesidad y
no causa (debido a la existencia de asociación mediante estudios transversales

10
 INTRODUCCIÓN

que no implican causalidad), hallazgos que se derivan del poco impacto en la

reducción de la obesidad con el cambio de actividad física incluso se cuestionan
el papel de la actividad física como estrategia de prevención en la población
infantil[20].
Se considera que existen determinados periodos críticos (intrauterino,
neonatal, primeros meses de vida y adolescencia) en donde una cambio
nutricional o en la dieta, puede tener efectos sobre la composición corporal y la
función metabólica (aumento de peso, adipogénesis, hiperinsulinemia y
expresión de genes obesogénicos)[21].
Se ha relacionado también con el destete precoz (destetados a los alimentos
sólidos a los 4 meses)[22].
McGavock et al[23] demostraron que una baja capacidad cardiorrespiratoria y
si esta baja actividad es continuada en el tiempo, se asocian significativamente
con el aumento de peso y el riesgo de sobrepeso en niños de 6-15 años. El
análisis de una cohorte de 902 niños en edad escolar mostró una mayor
circunferencia de la cintura y desproporcionado aumento de peso durante 12
meses de seguimiento en aquellos niños con baja actividad cardiorrespiratoria.
Los niños que reunían estas condiciones tenían 3,5 veces mayor riesgo de tener
sobrepeso y era un factor independiente asociado a incremento del IMC.
Se ha sugerido también que la falta de sueño adecuado en los niños pequeños se
asocia con el aumento del IMC. Esta observación es independiente de otras
variables de confusión (por ejemplo, la actividad física)[24].
No todos los sujetos expuestos al mismo ambiente nutricional «obesogénico» y
a similares limitaciones de actividad física desarrollan obesidad o lo hacen en
similar grado. Esto es debido a que estos factores «exógenos» actúan sobre una
base «endógena», la información genética propia de cada individuo, lo cual
explicaría, al menos en parte, la gran heredabilidad familiar de la obesidad[25].
En los últimos años, los estudios de GWAS (Genome Wide Association Studies),
que podríamos traducir como «estudios hologenómicos de asociación», han
perseguido, mediante el estudio de extensas cohortes de sujetos afectados de

11
 INTRODUCCION

distintas patologías, hallar nuevos genes, QTL (quantitative trait loci) o

haplotipos que permitan una mejor identificación del riesgo individual para el
desarrollo de dichas enfermedades[26]. De acuerdo con la 12ª actualización
del mapa genético para la obesidad publicada, existen 253 quantitative trait
locus (QLT) para esta patología[27].

[Link] OBESIDAD MONOGÉNICA

Es consecuencia de la alteración de un único gen, ya sea por deficiencia,

delección o mutación. Constituyen una minoría dentro de la población obesa
infantil, siendo muy intensa y de inicio precoz. Se pueden sistematizar en tres
grandes categorías:
- Patología en genes del sistema adipocito–hipotalámico (eje leptina-
melanocortina).
- Receptor gamma para sustancias proliferadoras de peroxisomas-
subunidad número 3, músculo-específica, de la fosfatasa 1.
- Patología en los genes asociados con el desarrollo del hipotálamo[2].

[Link] OBESIDAD ASOCIADA A SÍNDROMES POLIMALFORMATIVOS

Aunque existen múltiples síndromes polimalformativos asociados a la

obesidad, los que con mayor frecuencia la presentan son los siguientes:
- Síndrome de Prader-Willi
- Pseudo hipoparatiroidismo
- Síndrome de Laurence-Moon-Biedl (Bardet-Biedl)
- Síndrome de Cohen
- Síndrome de Down
- Síndrome de Turner

12
 INTRODUCCIÓN

[Link] OTRAS CAUSAS

Existen múltiples situaciones clínicas que condicionan obesidad, así como

ciertos tratamientos con capacidad obesogénica.
Trastornos hormonales:
- Déficit de hormona de crecimiento
- Resistencia a hormona de crecimiento
- Hipotiroidismo
- Deficiencia de leptina o resistancia
- Exceso de glucocorticoides (Síndrome de Cushing)
- Pubertad precoz
- Síndrome de ovario poliquístico
- Tumores secretores de prolactina
Tratamientos
- Cortisol y glucocorticoids
- Sulfonil-ureas
- Antidepresivos tricíclicos
- Anticonceptivos orales
- Insulina
- Risperidona

1.1.5 INFLUENCIA DE LA OBESIDAD INFANTIL Y EN LA ADOLESCENCIA

EN LA SALUD

Un niño obeso tiene un 80% de posibilidades de ser obeso a los 35 años. Esta
predisposición, conocida como “tracking”, es más evidente en varones, obesos
severos y antecedentes de obesidad en padres. A medida que aumenta la edad
el riesgo se incrementa, así, un niño obeso de 5 a 9 años será un adulto obeso en

13
 INTRODUCCION

un 69% de los casos, si es obeso entre 10 y 14 años llega a tener un 83% de

posibilidades[28].
El adolescente con sobrepeso, independientemente de su índice de masa
corporal en la edad adulta (incluso en el caso de que adelgazara), tiene un
riesgo relativo de 1,8 de mortalidad de cualquier causa y de 2,3 de causa
cardiovascular entre los 68 y 73 años con respecto al adolescente con peso
normal. El sobrepeso es predictor de riesgo para la salud sobre todo en la
adolescencia, más que en la edad adulta[1].
Entre las complicaciones descritas de la obesidad, que ya se ponen de
manifiesto en la infancia, destaca el síndrome metabólico, el síndrome de apnea
del sueño, el asma, la colelitiasis, los problemas ortopédicos, los problemas
psicológicos y la discriminación social y escolar. A los 6 años el niño ya ha
captado el mensaje social de que ser gordo es malo[29].

1.2 RESISTENCIA A LA INSULINA Y SÍNDROME METABÓLICO EN NIÑOS Y

ADOLESCENTES

1.2.1 CONCEPTOS

Como consecuencia del exceso de tejido adiposo es posible objetivar toda una
serie de alteraciones en los diferentes órganos y sistemas.
La complicación metabólica más importante es el síndrome de resistencia a la
insulina (RI) definido como la incapacidad de la insulina plasmática para, en
concentraciones habituales, promover la captación periférica de glucosa,
suprimir la gluconeogénesis hepática e inhibir la producción de lipoproteínas
de muy baja densidad (VLDL), lo que ocasiona un aumento de la producción de
insulina, necesaria para mantener la homeostasis de la glucosa, que puede
derivar en una intolerancia a los hidratos de carbono e, incluso, en una Diabetes
Mellitus tipo 2 (DM2) cuando esta capacidad compensadora fracasa (FIG. 1).

14
 INTRODUCCIÓN

La sensibilidad a la insulina varía entre una y diez veces en los sujetos sanos. Un
50% aproximadamente de esta variabilidad puede atribuirse a hábitos de vida
(alimentación y actividad física) y el otro 50% a características genéticas. Las
diferencias étnicas son también importantes, siendo la población de origen
europeo la más sensible a la insulina. El sobrepeso y la obesidad (sobre todo la
central) se asocian con resistencia a la insulina, aunque puede darse también en
sujetos con peso normal[30].

HEPATOCITO
Neoglucogénesis Glucogenogénesis -

Energía - Glucosa
+ Glucógeno
+ -
Glucolisis Glucogenolisis Alta
concentración de
glucógeno
CÉLULA MUSCULAR +
Inhibición de la AG
producción VLDL
Inhibe la liberación de aminoácidos a sangre +
Glucogenogénesis TG
Glucosa + Glucógeno
Glucogenolisis

-
VLDL - TG +
ADIPOCITO Acúmulo de TG

+
+ -

Acúmulo de AG (poco porcentaje)

Figura 1 . ACCIÓN DE LA INSULINA

15
 INTRODUCCION

La RI se considera la base fisiopatológica de «una serie de variables

relacionadas que tienden a coexistir en el mismo individuo y que pueden ser de
enorme importancia en la génesis de la enfermedad coronaria, incluyen
alteraciones del metabolismo de los hidratos de carbono, de los lípidos e
hipertensión arterial», conformando lo que definió Gerald Reaven en el año
1988 como el síndrome X[31]. Posteriormente, se han propuesto diferentes
nombres para su denominación, de los cuales, el que se estableció con más
firmeza fue el de síndrome metabólico (SM) 5,[32] conocido como la agrupación
de resistencia a la insulina, hipertensión, dislipema y obesidad, cuya
importancia radica en que ayuda a identificar individuos con riesgo de
desarrollar DM2 y enfermedad cardiovascular. Las interrelaciones de sus
elementos y el papel de la resistencia a la insulina no están del todo perfilados,
pero parece ser la responsable primera del SM[33].
El SM en la pubertad fue definido por el Panel de expertos del Programa de
Educación Nacional de Colesterol de EEUU, adult treatment panel, III y debe de
cumplir al menos tres de estos cinco criterios: obesidad central con perímetro
de cintura mayor del percentil 90 para la edad y sexo, triglicéridos por encima
de 110 mg/dl, HDL-colesterol por debajo de 40 mg/dl, tensión arterial superior
al percentil 90 para su edad y sexo y alteraciones del metabolismo
hidrocarbonato (glucemia basal alterada o intolerancia hidrocarbonada).
Posteriormente, en el año 2007, la federación internacional de diabetes (IDF)
postuló una modificación sobre los criterios de la ATP – III en donde existe un
criterio sine quam non (circunferencia de cintura superior a las referencias
proporcionadas para cada grupo étnico), como medida de obesidad central,
junto con otras dos[34], por lo que según la IDF, los criterios formulados para el
diagnóstico de SM en niños y adolescentes, junto con la presencia de obesidad
abdominal como requisito fundamental, son[35, 36]:
- Edad de 6 a 10 años: el SM no puede ser diagnosticado, debiendo prestar
atención individualizada a las comorbilidades presentes y a la historia

5
Muñoz-Calvo MT, Argente J. Síndrome metabólico. Rev EspPed. 2009;65:423—32.

16
 INTRODUCCIÓN

familiar, recomendando la reducción ponderal cuando el perímetro de

cintura alcanza o supera el percentil 90 de las referencias por grupo étnico.
- Edad 10 a 16 años: cintura > p90 por grupo étnico junto con 2 o más de :
triglicéridos (TG) > de 150 mg/dl, HDL < 40 mg/dl, presión arterial sistólica
(PAS) > 130 mmHg, presión arterial diastólica (PAD) > 85 mmHg, glucemia
en ayunas > 100 mg/dl o DM diagnosticada.
- Edad igual o superior a 16 años: cintura > 94 cm para varones caucásicos y
> 80 cm para mujeres caucásicas junto con 2 o más de : TG > de 150 mg/dl o
en tratamiento específico, HDL < 40 mg/dl (varones) o < 50 mg/dl
(mujeres), PAS > 130 mmHg, PAD > 85 mmHg o en tratamiento específico,
glucemia en ayunas > 100 mg/dl o DM diagnosticada.

1.2.2 CUANTIFICACIÓN DE LA RESISTENCIA A LA INSULINA

Existen muchas formas de cuantificar la resistencia a la insulina, pero de

ninguna se han definido los valores normales en las edades pediátricas. La
característica que mejor la define es la existencia de glucemia normal con tasas
de insulina elevadas. Parámetros analíticos basales como la insulinemia y el
índice de evaluación del modelo homeostático (HOMA) (insulina en ayunas en
µU/mL por glucosa en ayunas en mmol/L dividido por 22,5) proporcionan una
aproximación válida a la magnitud del problema[37]. En un estudio español con
adultos no diabéticos se calculó el percentil 90 de HOMA en 3,8[38] y este
punto de corte se ha extrapolado a niños y adolescentes en muchas
publicaciones. En otro estudio en nuestro país con niños de 7 a 16 años se
establece el punto de corte en estas edades más bajo que en adultos, en 3,0[39].
La prevalencia de síndrome metabólico en niños y adolescentes varía entre 3 y
14%, según edad y definición que se utilice. Llega al 28% en los adolescentes
con obesidad[40].

17
 INTRODUCCION

1.2.3 COMORBILIDADES ASOCIADAS A LA RESISTENCIA A LA INSULINA

(TABLA 3)

Los individuos insulina resistentes permanecen normoglucémicos si su

páncreas es capaz de responder segregando grandes cantidades de insulina y se
hacen diabéticos cuando no pueden mantener este grado de hiperinsulinemia
compensatoria por fracaso de las células beta. Se ha demostrado una aparición
más reciente de la DM2 en sujetos que han sido obesos desde la infancia. En
Estados Unidos, donde la obesidad infantil es epidémica, la intolerancia
hidrocarbonada es muy prevalente en obesos (25% de niños prepúberes y 21%
de púberes) y la DM2 aparece en el 4% de los adolescentes obesos[41].
Otra patología relacionada con la resistencia a la insulina es la hipertensión
arterial (aumenta la absorción renal de sodio y la actividad adrenérgica y
antagoniza la acción del óxido nítrico).
Aumento de dislipemia aterogénica, debido a que produce hipertrigliceridemia
con aumento de colesterol-VLDL, descenso de colesterol-HDL, y partículas de
LDL-colesterol más pequeñas, densas y aterogénicas, aumento de las apoB y
apoCIII. Igualmente se observan niveles elevados de homocisteina,
considerados factores de riesgo cardiovascular, pudiendo ser, en parte, los
responsables. Por tanto, aumenta el riesgo de enfermedad cardiovascular
(coronaria, cerebrovascular y periférica), primera causa de morbimortalidad en
el mundo desarrollado[42].
Otras complicaciones tales como tendencia a la trombosis, estado
proinflamatorio, enfermedad de hígado graso no alcohólico (EHGNA),
hiperuricemia, hiperandrogenismo, talla alta, pseudoacromegalia y aumento de
la incidencia de cáncer se relacionan a largo plazo con la resistencia a la
insulina y síndrome metabólico[30].

18
 INTRODUCCIÓN

Tabla 3. COMORBILIDADES ASOCIADAS A LA OBESIDAD Y SÍNTOMAS MÁS

CARACTERÍSTICOS.

COMORBILDADES HORMONALES:

- Eje hipotálamo-hipofiso-suprarrenal:
- Aumento producción cortisol
- Aclaramiento urinario
- ACTH con incremento de testosterona y DHEA-S (adrenarquia prematura y maduración
esquelética avanzada)
- Eje somatotropo:
- Crecimiento aumentado para su edad cronológica (adecuado para la edad ósea)
- Eje hipófiso-gonadal:
- Disminución de SHBG (mayor biodisponibilidad de testosterona y estradiol)
- Incremento de la aromatización de andrógenos a estrógenos (adelanto puberal en niñas,
retraso puberal y ginecomastia en niños)
- SOP en niñas adolescentes (acné, hirsutismo, irregularidad menstrual, resistencia a
insulina
COMORBILIDADES VASCULARES: COMORBILIDADES RESPIRATORIAS:

- Disminución de la frecuencia - Tendencia a hipoventilación (hipoxemia e

y gasto cardiaco hipercapnia)
- Arritmias - Infecciones respiratorias
- HTA - Disnea de esfuerzo
- Arteriosclerosis - Asma
- Patología coronaria - SAOS
COMORBILIDADES COMORBILIDADES ORTOPÉDICAS:
GASTROINTESTINALES:
- Compensadoras del exceso de peso (incurvación
- Esteatohepatitis no femoral, genu valgo)
alcohólica - Artropatías agudas y crónicas
- Litiasis biliares - Alteraciónes de alineamiento y curvatura de columna
- Defícit de oligoelementos vertebral
(hierro) - Enfermedad de Legg-Calvé-Perthes
- Enfermedad de Blount (tibia vara)
COMORBILIDADES OTRAS COMORBILIDADES:
EMOCIONALES:
- Pseudotumor cerebri
- Rechazo de la imagen - Colecistitis
corporal y alteraciones de la - Pancreatitis
socialización - Intertrigo (infecciones locales)
- Ansiedad, estrés, depresión - Estriación cutánea
- Ingesta compulsiva: binge - Proteinuria por glomerulopatía (glomerulomegalia)
eating
ACTH: hormona corticotropa; DHEA-S: sulfato de dehidroepiandrosterona; SHBG: proteína
transportadora de esteroides sexuales; SOP: síndrome de ovario poliquístico; SAOS: síndrome de
apnea obstructiva del sueño.

19
 INTRODUCCION

1.3 TEJIDO ADIPOSO

La distribución anatómica de la grasa constituye un elemento ampliamente

reconocido como factor determinante del riesgo de complicaciones asociadas
con la obesidad. La adiposidad visceral supone un mayor riesgo de
complicaciones metabólicas y cardiovasculares que la adiposidad subcutánea.
El tejido adiposo también puede diferenciarse morfológicamente y
funcionalmente en tejido adiposo blanco (TAB) y tejido adiposo pardo o
marrón. Los adipocitos pardos se especializan en la producción de calor a partir
de su almacenamiento lipídico y se encuentran únicamente en mamíferos.
Morfológicamente son multiloculares, contienen menos lípidos que los blancos,
siendo particularmente ricos en mitocondrias. En humanos, el tejido adiposo
pardo rodea el corazón y los grandes vasos durante la infancia, tendiendo a
desaparecer con el tiempo, de forma tal que solo queda presente en los
cojinetes grasos.
El TAB provee una reserva de combustible a largo plazo. En los mamíferos
representa la principal reserva de energía y se distribuye en múltiples
depósitos corporales, tanto interna como subcutáneamente, al igual que en
ganglios linfáticos y en el músculo esquelético. Adicional al almacenamiento de
combustible, actúa como aislante térmico y como protector de órganos[43]. En
los individuos obesos se produce una aumento notable del TAB debido a
hiperplasia o hipertrofia de los adipocitos. El TAB había sido considerado
tradicionalmente como un reservorio energético pasivo, donde la energía se
acumula en forma de triglicéridos durante periodos de consumo alimentario
excesivo o es movilizada cuando el aporte calórico es insuficiente (en periodos
de ayuno o ejercicio prolongado)[44]. Actualmente, es reconocido, que el tejido
adiposo es un órgano endocrino productor de una amplia variedad de
proteínas, denominadas colectivamente «adipocitoquinas»[45] (Fig 2) (leptina,
adiponectina, visfatina, vaspina y citoquinas proinflamatorias como la
interleuquina (IL)-6 y factor de necrosis tumoral alfa (TNF)-α, entre otras)

20
 INTRODUCCIÓN

(Tabla 4), con receptores específicos en el hipotálamo para regular el apetito y

la saciedad. Estos factores pudieran favorecer la aparición de un estado
proinflamatorio, de RI y/o de daño endotelial.

TABLA 4. PREDOMINANT EXPRESSION OF DIFFERENT ADIPOKINES IN

SUBCUTANEUS OR VISCERAL TISSUE
Subcutaneus Visceral

Leptin Tumor necrosis factor-α

Adiponectin Visfatin

Retinol binding protein-4 Interleukin-6

Acylation stimulating protein Interleukin-8

Adipsin

Plasminogen activator inhibitor-1

Angiotensinogen

Resistin

Marra F, Bertolani C: Adipokines in liver disease. Hepatology. 2009 Sep; 50(3):957-69

21
 INTRODUCCION

Figura 2.: ADIPOQUINAS (clasificación según acciones principales) Marra F,

Bertolani C: Adipokines in liver disease. Hepatology. 2009 Sep; 50(3):957-69

Asimismo, se han aislado receptores en el adipocito para la mayoría de las

hormonas hipofisarias e hipotalámicas, denominadas «adipotropinas»,
indicando en conjunto que existe un «diálogo endocrinológico» entre el
adipocito y el sistema nervioso central, y viceversa[2] participando así en la
regulación energética y en el metabolismo de los carbohidratos. Las citoquinas
pro inflamatorias, como TNF-α e IL–6, en particular, parecen jugar un papel
fundamental en la modulación de la sensibilidad a la insulina de los tejidos
periféricos y se han asociado con el desarrollo de RI en adultos[46]. Además, la
glucosa induce el estrés oxidativo y el aumento del factor nuclear–KB

22
 INTRODUCCIÓN

vinculante y aumenta la transcripción del factor nuclear – KB dependiente de

genes pro inflamatorios (TNF-α e IL–6) [47, 48].
Por otro lado, la obesidad tiene una estrecha relación con la RI. Generalmente,
la RI aumenta con el incremento del contenido de grasa corporal. Los ácidos
grasos libres no esterificados (AGL) que se generan aumentan en plasma y se
encuentran con un hígado y un músculo resistentes a la insulina. Esta mayor
oferta de AGL en hígado conduce a: aumento de gluconeogénesis. Incremento
en la producción de triglicéridos: aumento de VLDL, LDL, con efecto
aterogénico. Disminución de HDL. Mayor producción de sustancias con
actividad protrombótica como: Fibrinógeno, PAI1. EHGNA por depósito de
triglicéridos.
En músculo, se acumula tejido graso y se estimula la utilización de AGL como
fuente de energía en lugar de glucosa (favorecido por la RI). Esta glucosa no
utilizada a nivel muscular, sumada a la mayor producción de glucosa hepática,
genera hiperglicemia. En respuesta a esto, el páncreas incrementa la secreción
de insulina (hiperinsulinismo) que compensa la situación manteniendo una
glucemia basal normal.
La activación de la inmunidad innata conduce a la liberación de citoquinas por
células del sistema inmune (macrófagos, monocitos). Estas contribuyen a la
acción protrombotica y proinflamatoria. Produce también cambios en las
lipoproteínas plasmáticas, enzimas, proteínas transportadoras y receptores
tanto en animales como en humanos, especialmente en estos últimos puede
producir incremento de la síntesis hepática de VLDL, disminuir su
aclaramiento, reducir los niveles de colesterol HDL y modificar su composición.
Desde el punto de vista genético, una variedad de genes han sido asociados al
desarrollo de síndrome metabólico: genes reguladores de lipólisis,
termogénesis, metabolismo de la glucosa y del músculo. No se debe dejar de
señalar la influencia de factores genéticos y ambientales sobre el peso al nacer;
porque la subnutrición fetal puede ser negativa para el desarrollo de la función

23
 INTRODUCCION

de las células β pancreáticas y de los tejidos sensibles a la insulina cuya causa

pudiera estar relacionada con la activación de genes vinculados a la RI.
Los factores ambientales son importantes modificadores sobre la expresión del
síndrome metabólico, así la inactividad física promueve el desarrollo de
obesidad y modifica la sensibilidad a la insulina en el músculo. Las dietas con
alto contenido graso son desfavorables para el síndrome metabólico y
contribuyen al desarrollo de hipertensión arterial y obesidad. Fármacos como
corticoides, antidepresivos, antipsicóticos, antihistamínicos podrían tener como
efecto adverso síndrome metabólico porque conducen a dos de sus
características: obesidad e intolerancia a la glucosa.

1.3.1 ADIPOCITOQUINAS PRINCIPALES

Figura 3. EFECTO ADIPOQUINAS EN LA ESTEATOSIS HEPÁTICA Y LA

REGENERACIÓN DEL PARÉNQUIMA HEPÁTICO Marra F, Bertolani C: Adipokines
in liver disease. Hepatology. 2009 Sep; 50(3):957-69

24
 INTRODUCCIÓN

[Link] LEPTINA

La leptina es una hormona polipeptídica de 167 aminoácidos (16KDa.). Procede

del griego leptos que significa delgado, también se le ha llamado hormona ob.
Es producto de genes obesogénicos, secretada principalmente en el tejido
adiposo y en menor medida por el estómago, intestino, placenta y testículos[49,
50]. Se descubrió en 1992 como la responsable del fenotipo de los ratones
ob/ob, incapaces de sintetizar leptina, con hiperfagia y con una fuerte tendencia
a la obesidad[51].

- MECANISMO DE ACCIÓN

La leptina es una hormona pleiotrópica, con múltiples acciones biológicas,

relacionadas con la homeostasis energética.
La acción de la leptina es mediada por receptores específicos (ObR) presentes
en la membrana plasmáticas de células del sistema nervioso central y en
órganos periféricos (existen numerosos receptores hepáticos). Se han
identificado 6 isoformas de receptores de leptina (ObRa – ObRf).
- ObRb: receptor implicado en la mayor parte de los efectos de la leptina
mediante la transducción de señales, desde la membrana plasmática hasta el
núcleo a través de la activación de JAK2 (Janus Activated Kinasas) y del sistema
STAT (Signal Transducer and Activators of Transcription).
- ObRe: receptor soluble para las formas complejas de leptina circulante,
generado mediante rotura del receptor de membrana, encargado de regular la
secreción de leptina (cuando aumenta disminuye la secreción de leptina)[50]
La secreción de leptina es proporcional a la masa grasa, a través de señales
antiobesogénicas regula la ingesta de alimento (reprimiendo la sensación de
hambre), tono simpático y el gasto energético en situaciones de exceso de
energía a través de la vía hipotalámica. Se desconoce el mecanismo mediante el
cual la leptina atraviesa la barrera hematoencefálica. Se ha descrito una

25
 INTRODUCCION

disminución de la permeabilidad de dicha barrera a la hormona durante el

fenómeno de “resistencia a leptina”, asociado a la edad y la obesidad[51].
- Acción metabólica: La leptina, tanto a nivel del SNC como de los tejidos
periféricos, incrementa la termogénesis y la lipólisis[52]. Además, se ha
descrito que la leptina inhibe la síntesis de insulina e incrementa la sensibilidad
periférica a la misma[53].
- Maduración sexual, tanto central como periférica[54]. Los niños obesos
presentan alteraciones tanto al inicio de la pubertad (que se adelanta) que
podría estar relacionado con un incremento inusualmente temprano de la
concentración de leptina[55, 56] .
- Hígado graso: En los ratones Ob/Ob se observa esteatosis hepática,
suponiendo que la leptina ejerce una papel protector frente al hígado graso a
través del sistema nervioso central (SNC) y directamente vía activación de la
AMPK (adenosin monofosfato protein kinasa)[57, 58], igualmente en la
lipodistrofia generalizada, otra condición del déficit de leptina, el aporte de esta
mejora el hígado graso[59].
- Sistema inmune. La hormona tendría un importante papel modulando la
actividad T-helper y podría estar implicada en la patofisiología de algunas
enfermedades autoinmunes[60]. Igualmente se ha descrito, en modelos
animales con déficit de leptina, una mayor susceptibilidad a la infección viral y
bacteriana así como aumento de hepatotoxicidad y mortalidad tras la inyección
de endotoxinas[61].
Adicionalmente presenta un papel protector en modelos animales con hígado
alcohólico[62, 63].
- Papel profibrogénico[64] y regenerativo: debido a que en ratones Ob/Ob
existe una disminución de fibrogénesis que se revierte con la administración de
leptina pero no con la reducción de la ingesta se supone que presenta un fuerte
papel profibrogénico[65] en donde intervienen muchos tipos de células. La
leptina activa las células Kupffer (KC) y macrófagos y estimula a las células
endoteliales para producir factor de crecimiento β[64].

26
 INTRODUCCIÓN

Activa las células estrelladas hepáticas (CEH) (productoras de colágeno 1 que

interviene en la fibrosis hepática) mediante el estímulo del ObRb[66]. Una vez
activada la CEH contribuye a la expresión de leptina mientras que la
disminución de la concentración de leptina en la CEH se asocia con un aumento
de la concentración de adiponectina[67]. La leptina activa la NADPH
(nicotinamida adenina dinucleotido fosfato reducida) oxidasa y produce
productos de la degradación de oxígeno, los cuales regulan la expresión de
quimioquinas y la fagocitosis de cuerpos apoptóticos[68, 69]
Se desconoce si la resistencia a la leptina se acompaña de resistencia de las
células no parenquimatosas hepáticas a la acción inflamatoria y fibrogénica de
la leptina, en ratones con déficit de leptina existe alteración de la regeneración
hepática, tanto tras la hepatectomía parcial como tras la administración de
tóxicos[70, 71], sin embargo la administración de leptina exógena no consigue
restaurar el parénquima lo que sugiere que la deficiencia crónica de leptina
causa perturbaciones complejas en la capacidad de regeneración de los
hepatocitos[72].
- La leptina se ha involucrado en el desarrollo de cáncer, tanto directamente
como a través del aumento de la angiogénesis. Actúa sobre células
endoteliales[73] regulando la expresión del factor de crecimiento endotelial
por las CHE[74]. La disminución de la leptina se asocia con disminución de
angiogénesis y de focos preneoplásicos en esteatohepatitis experimental[75].
En el hepatocarcinoma humano existe un aumento de la concentración de ObR,
en el tumor pobremente diferenciado, con alta vascularización, existe mayor
concentación de ObR, demostrando la relación leptina/ObR con la angiogénesis
del hepatocarcinoma[76, 77].
La leptina promueve la proliferación, migración e invasión de las células de
hepatocarcinoma[77] e induce proliferación y poder metastatizante en el
colangiocarinoma[78].

27
 INTRODUCCION

- CONCENTRACIÓN SÉRICA DE LEPTINA

En general, la leptina se incrementa tras la ingesta y se reduce drásticamente en

situación de ayuno prolongado[79].
La leptina inhibe la síntesis y secreción de insulina, mientras que la insulina
estimula la secreción de leptina. Esta retoalimentación entre ambas hormonas
ha sido denominada por algunos autores como el “eje adipoinsular”[53]. En
niños no obesos, los niveles de leptina se correlacionan con los niveles de
insulina, independientemente del índice de masa corporal[80].
El principal factor del que depende la concentración sérica de leptina es la
cantidad de TAB, llegando a alcanzar concentraciones muy elevadas en obesos.
En individuos no obesos, además del IMC, la edad, el sexo, la diabetes y la
pubertad tienen gran influencia en la concentración sérica de leptina. En
adultos no obesos, las mujeres presentan concentraciones superiores (hasta
cuatro veces) a los hombres, incluso tras normalizarse con el IMC[81]. En niñas
también se han descrito concentraciones superiores a los niños,
correlacionadas con el IMC[82]. Durante la pubertad, la concentración sérica de
leptina se incrementa, pero con diferencias importantes según el sexo. En niños
la concentración de leptina se estabiliza hacia la mitad de la pubertad y decrece
hacia el final de la misma. En cambio, en niñas la concentración de leptina se
incrementa gradualmente hasta la completa maduración sexual y decrece
únicamente cuando la pubertad ha finalizado[83].

- RESISTENCIA A LA LEPTINA

En animales no obesos, se ha observado que la adición de leptina exógena

inhibe enormemente la sensación de hambre y provoca una reducción severa
del volumen de tejido graso. En cambio, en modelos de animales obesos (tanto
en obesidad inducida por la dieta como por alteraciones genéticas) la adición

28
 INTRODUCCIÓN

exógena de leptina apenas tiene efecto, lo que indica la aparición de resistencia

a leptina en condiciones de obesidad[84].
En animales no obesos, se ha observado la aparición de resistencia a leptina en
relación a la edad. En animales viejos, la leptina suministrada directamente en
el encéfalo tiene mucho más efecto que la suministrada de forma periférica, en
cambio en animales jóvenes, no se observan diferencias[51]. Este dato lleva a
pensar que la resistencia a leptina relacionada con la edad, en animales no
obesos, se debe principalmente a una reducción de la permeabilidad de la
barrera hematoencefálica a la hormona.
La resistencia a la leptina observada en obesos tiene su origen tanto en la
reducción de la permeabilidad de la barrera hematoencefálica como en la
represión de la expresión de los receptores, en el SNC y en tejidos
periféricos[85-88] aunque hasta la fecha se desconocen los mecanismos
moleculares implicados en este fenómeno. Se ha especulado mucho sobre la
posibilidad de que la resistencia a la leptina sea causa de obesidad, o bien
consecuencia de la misma. Aunque aún no se puede responder a esta cuestión,
algunos autores opinan que ciertos polimorfismos genéticos en los receptores
de leptina pueden estar en el origen de una resistencia innata leve, tanto en
déficits de transporte de leptina como en alteración de ObRb, incluyendo el
aumento de expresión de los supresores de la señal de las citoquinas 3 (SOCS3),
moléculas que inhiben la señal de la leptina[50] ya que empeoran la señal
postreceptor y conducen a una disminución de la activación del AMPK[89], que
se incrementaría considerablemente si el individuo desarrolla obesidad[90].
Algunos nutrientes pudieran tener un papel importante, ya que la fructosa
induce hiperleptinemia y resistencia hepática de la leptina mediante la vía
STAT3[91].

29
 INTRODUCCION

- INFLUENCIA DE LA LEPTINA SOBRE LA APARICION DE DIABETES

MELLITUS TIPO 2 EN LA OBESIDAD

Se ha propuesto que la resistencia a la leptina que desarrollan los individuos

obesos en todos los tejidos, está relacionada con el desarrollo de diabetes. La
disminución de receptores de leptina en las células β, secretoras de insulina,
tendría como consecuencia la inhibición del eje “adipoinsular”, lo que
provocaría hiperinsulinemia que, a la larga, contribuiría al DM2[92].
Numerosos trabajos han correlacionado, en individuos obesos, la concentración
de leptina con el índice de masa corporal y con la resistencia a insulina medida
mediante el índice HOMA[93]. Sin embargo los estudios que han tratado de
relacionar la concentración de leptina con la presencia de DM2 en individuos no
obesos, son contradictorios e inconcluyentes.

[Link] ADIPONECTINA

La adiponectina es un polipéptido de 247-aminoácidos que circula en

concentraciones séricas relativamente altas (5,30 µg / mL), por lo que es la
adipoquina más abundante y específica de tejido adiposo. Los adipocitos
sintetizan y liberan la adiponectina en una serie de complejos o isoformas
diferentes de orden superior que incluyen trímeros (bajo peso molecular),
hexámeros (mediano peso molecular) y 18 meros (elevado peso molecular)[94-
96] (figura 4).

Cada isoforma de adiponectina tienen funciones biológicas diferentes. La

isoforma metabólicamente más activa y sensibilizadora de insulina es la de
elevado peso molecular, es además la que más se reduce durante la obesidad.
Las isoformas triméricas y hexaméricas parecen tener más influencia sobre el
control de la saciedad, en el hipotálamo [94, 95].

30
 INTRODUCCIÓN

Es secretada fundamentalmente por adipocitos maduros y de forma muy escasa

por hepatocitos[97].

Los niveles de adiponectina varían de forma fisiológica según sexo, edad y

origen étnico. En concreto, son mayores en las mujeres, a medida que
incrementa la edad, y en las razas caucásicas en comparación con Asia o África
[97].

Figura 4. Adiponectina y su estructura. (A) dominio de la organización del protómero

de adiponectina. Rojo: péptido señal, naranja: región variable; azul: región colágeno;
verde: dominio globular. Los números indican los límites de la región. (B) estructura
cristaloide que constituye un homotrímero dominio de adiponectina, conformado por la
tríple hélice del dominio de colágeno (C) Representación de oligomerización trimérica,
hexamérica y octadecamérica de la adiponectina. La ubicación del enlace disulfuro
responsable de la asociación se visualiza en el hexámero. Adaptado de [94].

31
 INTRODUCCION

Los niveles de adiponectina disminuyen de forma paradójica al incrementarse

el volumen de tejido adiposo [98]. Los niveles de adiponectina sérica están
relacionados de forma inversa con el IMC, la cantidad grasa corporal, los niveles
séricos de insulina en ayunas y de triglicéridos. Los mecanismos moleculares
implicados en la reducción de adiponectina en pacientes obesos no son del todo
conocidos, aunque varios estudios sugieren una relación con el desarrollo de
resistencia a insulina en adipocitos [99].

La adiponectina es un polipéptido con potente actividad anti-inflamatoria,

antidiabética, antiaterogénica y sensibilizadora de la insulina. Por tanto,
niveles bajos de adiponectina sérica se ha relacionado con RI y
SM, lipodistrofia, síndrome de ovario poliquístico, hipertensión arterial,
aterosclerosis y a la enfermedad cardiovascular, incluyendo el síndrome
coronario agudo[97]. En la configuración de la RI, cada vez hay más evidencia
del papel hepatoprotector de la adiponectina en hígado graso no alcohólico.

En el parénquima hepático, además posee actividad antifibrogénica y anti-

inflamatoria, debido a que inhibe la actividad de los macrófagos hepáticos (KC),
respectivamente [97]. En los hepatocitos presenta un importante papel
antiapoptótico[97].

Debido a las razones anteriormente expuestas la adiponectina presenta un

atractivo potencial terapéutico en el hígado graso no alcohólico.

- SEÑALIZACIÓN DE ADIPONECTINA:

Inicialmente, en 2003, se han descrito dos receptores transmembrana de la

adiponectina (AdipoR1, AdipoR2)[95]. El receptor AdipoR1 es más abundante
en el sistema músculo esquelético y AdipoR2 en el hígado [95]. Otro receptor
adicional de membrana celular es la T-cadherina, pero carece de un dominio
intracelular y su efecto en la señalización celular es desconocido [97].

32
 INTRODUCCIÓN

En el hígado, a pesar de que la señalización postreceptor está por esclarecer,

AdipoR1 inhibe la gluconeogénesis y aumenta la sensibilidad a la insulina
mediante la activación de la vía de la AMPK (proteinkinasa del 5-AMP cíclico),
mientras que AdipoR2 aumenta la captación de glucosa por la activación de la
vía del receptor activado de proliferador de peroxisoma α (PPAR-α) [100].

- REGULACIÓN TRANSCRIPCIONAL Y POST TRASLACIONAL DE LA

ADIPONECTINA Y SUS RECEPTORES

Estimulada por varios factores de transcripción implicados en adipogénesis,

como PPAR, FoxO1 (Forkhead box protein O1), C / EBP (CCAAT-enhancer-
binding proteins) y SREBP, y es suprimido por la hipoxia, inflamación,
represores de la transcripción, como NFAT (Nuclear factor of activated T-cells)
y CREB (cAMP response element-binding protein), y factores proinflamatorios
como como TNF, IL-6 e IL-18. Cuando se altera la multimerización de la
adiponectina se reducen sus niveles plasmáticos condicionando obesidad y
resistencia a la insulina. Existen proteínas reticuloendoplasmáticas, como Ero1-
Lα, ERp44 (Endoplasmic reticulum resident protein 44) y DSBA-L, que presenta
un papel crítico en la regulación de la multimerización de la adiponectina y / o
secreción, y podrían constituir posibles dianas terapéuticas para mejorar la
sensibilidad a insulina y otros problemas asociados[96].

En tejido adiposo, muscular y hepático, los niveles de receptores de

adiponectina AdipoR1 y AdipoR2 están regulados en respuesta a cambios en las
condiciones nutricionales, probablemente para modificar el metabolismo de la
glucosa y la sensibilidad a la insulina, sin embargo, hay datos contradictorios
sobre esta teoría entre diferentes estudios en modelos de roedores [101, 102].

33
 INTRODUCCION

[Link] RESISTINA:

El péptido hormona resistina (o FIZZ3) es un factor de secreción producido en

adipocitos y ha demostrado desempeñar un papel importante en la resistencia
a la insulina inducida por la obesidad[94].

La resistina se expresa en los adipocitos de los roedores y los macrófagos de los

seres humanos, y su producción se incrementa con la alimentación, la obesidad
y la disminución de los ligandos de PPAR γ.

Los estudios que demuestran un papel causal de la resistina en la homeostasis

de la glucosa se basan en modelos animales con alteraciones de los niveles de
resistina sérica. En estos estudios la infusión o sobre-expresión de resistina
conduce a la hiperglicemia, sobre todo por aumento de la producción de
glucosa hepática[94]. Una de las vías moleculares que producen RI activada por
resistina consiste en la amplificación de SOCS 3, que inhibe la unión IRS-PI3K
(vía de señalización de insulina)[103].

La importancia de la acción de la resistina en los seres humanos es menos clara,

ya que no todos los estudios informan acerca de un aumento en suero de la
resistina en obesos con DM2[94], sin embargo, hay que señalar que el genotipo
- 420G / G de la región promotora de resistina, se ha asociado con elevada
transcripción de genes resistina, con aumento de los niveles de suero de
resistina, que conducen a obesidad y RI.

A pesar del gran interés generado por el descubrimiento de resistina en 2001 y

de que es una hormona importante en la regulación de varios tejidos y órganos,
incluyendo el hipotálamo, los adipocitos y el hígado, son escasos los
conocimientos acerca de las vías de señalización intracelular por la cual la
resistina induce su efectos metabólico [94].

34
 INTRODUCCIÓN

[Link] PROTEINA DE UNIÓN 4 DEL RETINOL:

La proteína de unión-4 del retinol es una molécula que causa resistencia

sistémica a insulina secundaria a la alteración de la señalización de la insulina
en el músculo y los adipocitos, y que conduce a la activación de la
gluconeogénesis en el hígado[94].

Varios estudios han demostrado evidencias de correlación intensa tanto en

roedores como en personas obesas entre los niveles séricos de la proteína de
unión 4 del retinol y el síndrome metabólico[94].

1.4 ESTRÉS OXIDATIVO

Durante el metabolismo normal de la célula, se producen radicales libres (RL)

que se eliminan del medio por el sistema de defensa antioxidante. La principal
fuente de RL de la célula es la mitocondria, que da lugar a grandes cantidades
de anión radical superóxido (O2•¯), que rápidamente se transforma en peróxido
de hidrógeno (H2O2) por la superóxido dismutasa (SOD). El H2O2 se transforma
en agua gracias a la glutation peroxidasa (GPx), que utiliza glutation reducido
(GSH) como cofactor, transformándose este último en glutation oxidado (GSSG).
El GSH es fundamental para el mantenimiento del estado rédox de la célula, por
eso es fundamental su regeneración una vez que se utiliza para descomponer el
H2O2. De su regeneración se encarga la glutation reductasa (GRd), que utiliza
NADPH como cofactor, que se transforma en NAD+. En el estrés oxidativo se
produce un desequilibrio en el sistema de sustancias prooxidantes/RL con
predominio de estos últimos[103]. Los altos niveles de RL conducen a daño en
lípidos, proteínas y DNA. El hidroxinonenal (4-HNA) y el malonildialdehído
(MDA) son marcadores del daño oxidativo inducido a macromoléculas lipídicas,
los grupos carbonilo y la nitrotirosina son marcadores del daño oxidativo

35
 INTRODUCCION

inducido a proteínas y la 8-hidroxi-2-deoxiguanosina se considera como

marcador del daño oxidativo al DNA.

Los RL O2•¯, H2O2, además de otros, se denominan especies reactivas de oxígeno

(EROs). También existen las llamadas especies reactivas de nitrógeno (ERNs),
entre las que se encuentran el óxido nítrico (NO) y el peroxinitrito (ONOO¯),
producto de reacción del NO y el O2•¯. El NO se sintetiza por la óxido nítrico
sintetasa (NOS), la cual puede existir en tres isoformas denominadas neuronal
(nNOS), endotelial (eNOS) e inducible (iNOS). Dos de ellas, nNOS y eNOS son
dependientes de calcio, se expresan de forma constitutiva en la célula y son
responsables de la producción de bajos niveles de NO (fisiológicos) durante
cortos periodos de tiempo. La iNOS, sin embargo, es independiente de calcio y
no se expresa, en la mayoría de los tejidos, en condiciones normales. La iNOS es
una enzima relacionada con los procesos de inflamación a través de la
formación de ONOO¯ y su expresión se puede inducir por citoquinas tales como
Interleuquina-1β (IL-1β), TNFα o Interferonγ (INFγ) en células del sistema
inmune, como los macrófagos[104].

La obesidad se considera como una enfermedad inflamatoria crónica con un

descenso en las defensas antioxidantes y un aumento de los marcadores de
estrés oxidativo en sangre e hígado. Existen estudios que afirman que la
obesidad “per se”, sin hiperinsulinemia, se asocia a un estado redox
reducido[103]. En los muy escasos trabajos realizados en niños parece existir
un aumento de la actividad de la GPx[105].

El tejido adiposo está compuesto de adipocitos y la fracción estromovascular,

que incluye macrófagos. Los adipocitos segregan las llamadas adipoquinas,
entre las que se incluyen leptina, adiponectina, visfatina, IL-6, proteína
quimiotáctica de monocitos-1 (MCP-1). Los macrófagos, por su parte, segregan
TNFα, IL-6, MCP-1, resistina y adipsina. En el obeso, el aumento de tejido
adiposo conduce a un aumento en la secreción de leptina y otros factores
conduce a un aumento del número de macrófagos infiltrados y por tanto un

36
 INTRODUCCIÓN

aumento en la producción de TNFα, que a su vez da lugar a un aumento en la

producción de leptina y otras citoquinas inflamatorias, mientras que se
produce un descenso de adiponectina. El incremento en la secreción de leptina
y/o descenso en la producción de adiponectina también puede contribuir a la
acumulación de macrófagos activados creándose un círculo viciosos con
producción de más citoquinas inflamatorias (TNFα, IL-1, IL-6)[106]. Se ha visto
que MCP-1 y TNFα alteran el adipocito aumentando su RI señalando una vez
más que la RI relacionada con la obesidad podría ser, al menos en parte, una
enfermedad inflamatoria crónica iniciada en el tejido adiposo[107]. La RI en el
adipocito limita la captación de glucosa por el mismo, produciéndose un
aumento de la glucemia, lo que a su vez induce un aumento de la secreción de
insulina pancreática.

En adipocitos, la resistencia a insulina produce un aumento de la actividad de la

lipasa sensible a hormona, produciéndose un aumento en los niveles de AGL en
sangre. Estos AGL pueden entrar en el hígado donde pueden ser oxidados en la
mitocondria para formar ATP o esterificados para producir TG para su
almacenamiento. En el hígado, la hiperinsulinemia induce expresión de SREB-
1c, lo que da lugar a la activación de todos los genes lipogénicos, con lo que
aumenta el contenido de AGL que pueden seguir las dos vías que señalamos
antes. Al mismo tiempo, la hiperglucemia activa ChREBP, que activa
transcripcionalmente piruvato quinasa y todos los genes lipogénicos. SREB-1c y
ChREBP, están activando toda la maquinaria para transformar la glucosa en
ácidos grasos. Como consecuencia de esto aumenta el malonil-coa, que inhibe
CPT-1, la proteína responsable para el transporte de ácidos grasos a la
mitocondria. En definitiva, aumenta el contenido de ácidos grasos en el hígado,
por la entrada desde la periferia y la síntesis de novo a partir de la
glucosa[104].

El aumento de AGL en el hígado da lugar a defectos en la CTE, lo que produce

un aumento de RL. Debido a esto, los ácidos grasos se acumulan en el citosol, lo

37
 INTRODUCCION

que hace que se metabolicen en peroxisomas y microsomas, aumentando aún

más los niveles de RL. Esto, a su vez, hace que aumente la oxidación de lípidos y
los metabolitos resultantes de esto, MDA y 4-HNE, que pueden aumentar, a su
vez, los efectos del estrés oxidativo. Por ejemplo, MDA y 4-HNE producen una
disminución en el contenido de GSH, aumentan la producción de TNFα,
promueven el influjo de células proinflamatorias en el hígado, y activan las
CEH, conduciendo a deposición de colágeno, fibrosis y la continuación de la
respuesta inflamatoria. Todo esto conduce a necrosis del hepatocito,
inflamación y fibrosis en el hígado, todas las características histológicas de la
esteatohepatitis no alcohólica (EHNA)[108].

La adiponectina mejora la sensibilidad a la insulina incrementando la oxidación

hepática de ácidos grasos. La adiponectina también tiene acción
antiinflamatoria suprimiendo la producción hepática de TNFα. La adiponectina
exógena dada a ratones con EHNA promueve la pérdida de peso y mejora la
resistencia a la insulina, la esteatosis y la inflamación. Los niveles de
adiponectina en un grupo de niños con EHGNA fue significativamente más bajo
que en el grupo control. Estos niveles séricos de adiponectina podrían ser un
marcador precoz de EHNA en niños obesos[109].

Las últimas investigaciones muestran una estrecha relación entre la iNOS y

resistencia a la insulina. El simple hecho de inflamación en adipocitos implica
liberación de NO por la iNOS de los macrófagos activados. La mayoría de los
inductores de resistencia a la insulina incrementan la expresión de la iNOS. Los
inhibidores de iNOS previenen la resistencia a la insulina inducida por
lipolisacáridos en ratas. No se conoce como la iNOS causa o aumenta la
resistencia a la insulina[110]. Las citoquinas estimulan la expresión tanto de la
iNOS como de la isoforma de la ciclooxigenasa inducible por citoquinas (COX-
2). La expresión de COX-2 da lugar a una sobreproducción de prostaglandinas
inflamatorias y tromboxanos. Además, el NO producido por la iNOS estimula

38
 INTRODUCCIÓN

directamente la actividad de las isoformas de COX, incrementando aún más la

producción excesiva de mediadores inflamatorios.

1.5 ENFERMEDAD DE HÍGADO GRASO NO ALCOHOLICA

La EHGNA es una entidad clínica que se caracteriza por la presencia de un

acumulo de grasa en los hepatocitos, que puede asociarse con fenómenos
necroinflamatorios con o sin fibrosis, sin que medie en su desarrollo el estímulo
del alcohol u otra causa hepática conocida. Fue descrita por primera vez en
1980 por Ludwing y cols tras encontrar esteatosis hepática en un grupo de
pacientes no consumidores de alcohol[111]. Es un problema clínico emergente
entre la población obesa[112] y es probablemente la causa más frecuente de
enfermedad hepática en la edad pediátrica.

Esta entidad incluye un amplio espectro de lesiones hepáticas que van desde la
simple esteatosis hepática sin inflamación, en donde existe acumulo de grasa en
los hepatocitos por encima de los existentes fisiológicamente (<5%), a la
esteatohepatitis no alcohólica (EHNA), que puede presentar distintos grados de
inflamación y fibrosis, y la resultante cirrosis hepática[113, 114]. Aunque este
síndrome tiene una etiología multifactorial, la obesidad es el factor que se
asocia de forma más consistente[112].

La EHGNA es a día de hoy la causa más común de enfermedad hepática crónica,

tanto en niños como en adultos en los países occidentales, convirtiéndose en
una epidemia[115, 116], en particular existe un alarmante aumento de niños
afectados por EHGNA con datos de prevalencia que oscilan desde 7,6% en la
población pediátrica general hasta el 34,2% en jóvenes obesos o con
sobrepeso[117].

39
 INTRODUCCION

En la edad pediátrica se asocia con SM, obesidad abdominal (central),

dislipemia (hipertrigliceridemia y/o hipercolesterolemia) y RI, por lo que la
EHGNA se considera la manifestación hepática del SM, incluso, no existe un
acuerdo sobre si la EHGNA contribuye al SM o viceversa[118].

En la actualidad se señala al EHGNA como la enfermedad hepática más común

en Norteamérica entre los adolescentes, generalmente con sobrepeso. Muchos
detalles referentes a la EHGNA en niños son desconocidos, incluyendo la
manera exacta en que el EHNA pediátrico difiere del adulto.

Una gran parte de niños con síndrome metabólico y EHNA no se diagnostican,

pudiendo en la adolescencia presentar un curso rápido de la enfermedad hacia
formas más severas (cirrosis), de hecho existen datos epidemiológicos que
ponen de manifiesto un aumento espectacular de la incidencia de SM en
adolescentes urbanos principalmente debido a la sobrealimentación y el
sedentarismo[119].

Aunque el EHGNA está casi universalmente presente en los individuos obesos,

no todos progresan a EHNA, del mismo modo, que se puede ser no obeso
físicamente y presentar EHNA. Esto implica que la progresión a EHNA es
multifactorial.

Originalmente en la patogenia del EHNA se postuló la hipótesis de múltiples

impactos (FIGURA 5 y 6) de forma que el primer impacto lo constituye los AGL
que condicionan esteatosis (histológicamente < 5%), de esta forma el hígado es
más susceptible a impactos secundarios como la acción de adipoquinas, estrés
oxidativo y la respuesta inmune que provocan posteriormente, conduciendo a
EHNA y a fibrosis avanzada, por tanto la RI puede actuar, a la vez como primer
y segundo impacto[116, 120]

40
 INTRODUCCIÓN

Figura 5. TEORÍA DEL DOBLE IMPACTO

La esteatosis o primer impacto se produce como consecuencia de la

acumulación de los lípidos en el hígado, mientras la mayoría de los lípidos se
almacenan en forma de TG, existen otros metabolitos lipídicos como los ácidos
grasos, colesterol, esfingolípidos y fosfolípidos que también son acumulados.

41
 INTRODUCCION

Figura 6. PROGRESIÓN HGNA A EHNA

1.5.1 CARGA GENÉTICA EN LA ENFERMEDAD DE HÍGADO GRASO NO

ALCOHOLICA

La variabilidad que existe en la gravedad de la enfermedad y la tasa de

progresión sugieren que exista un componente genético. La esteatosis hepática
se considera una enfermedad poligenética con afectación de múltiples loci,
existen estudios que han demostrado que los indios asiáticos tiene una
predisposición genética a la acumulación de grasa hepática a pesar de tener un
IMC normal debido a la tendencia de presentar mayor grasa visceral[121].

42
 INTRODUCCIÓN

El locus principal 22q13 que alberga al gen PLPLA3, la existencia de un

polimorfismo de nucleótidos (SNP) rs738409 mostró una asociación con
EHGNA a través de GWAS[122, 123], esta expresión es significativamente
mayor en diversas etnias. Este SNP se encuentra situado en el tercer exón del
gen y es expresado principalmente por el hígado y el tejido adiposo, está
involucrado en la hidrólisis de TG introduciendo una sustitución de aa
Isoleucina a Metionina (I148M) que suprime la función. El polimorfismo
PNPLA-I148M se ha demostrado que asocia aumento de necroinflamación,
esteatosis severa y fibrosis[124]. Otros polimorfismos rs738409 está presente
en pacientes con EHGNA y mayor cifra de insulina en ayunas, resistencia a la
insulina y elevación de transaminasas[125]. Aunque no existe suficiente
evidencia científica existen estudios que afirman que el genotipo GG rs738409
PNPLA3 homocigoto presentan un riesgo 5 veces superior para el desarrollo de
hepatocarcinoma[126].

Igualmente el polimorfismo PLPLA3 S453, presente en población

afroamericana, se ha asociado con presentar menor contenido de grasa
hepática suponiendo por lo tanto riesgo más bajo de EHNA[127].

Otros GWAS identifican variaciones genéticas comunes en o cerca de LYPLAL1,

PPP1R3B, NCAN y GCKR, las cuales están presentes frecuentemente en
población europea, y están relacionados con esteatosis en EHNA y fibrosis[122]
y variaciones en FDST1, COL13A1, EFCAB4B,PZP como el loci causante de
esteatosis, grado de actividad de EHNA, grado de fibrosis, inflamación lobular y
niveles de alanina aminotransferasa (ALT), presentes en población caucásica.

Igualmente se han demostrado varios loci que confieren protección o

susceptibilidad para EHGNA, esteatosis o rápida progresión de esta, como SCAP
rs2101247 disminuye el riesgo de EHGNA en mujeres con SM[128], aunque los
mecanismos de este no están claros todavía. SNPS rs2276736, rs3772630 y
rs3772627 confieren protección para HGNA en población india[129]. En contra
alteraciones en el gen de la proteína desacoplante mitocondrial 3 (UCP3)[130],

43
 INTRODUCCION

gen SRABP-1C (sterol regulatory element binding protein)[131], proteína

adaptadora APPL1 y 2[132], gen nicotinamida N metil transferasa
(NNMT)[133] y el gen SOD2 confieren susceptibilidad[134].

Otro gen implicado en EHGNA es el gen de la proteína transportadora de la

Apolipoproteina C3 (APO C3), presenta variantes alélicas (c-482T, T-455C o
ambas) en población no asiática está relacionada con incremento de EHGNA y
con RI[135].

1.5.2 OTROS FACTORES ETIOLÓGICOS EN EL DESARROLLO DE EHGNA

[Link] LÍPIDOS Y LIPOTOXICIDAD

La composición en la dieta de lípidos juega un importante papel en EHGNA, no

todos los lípidos actúan de similar manera, de forma que existen dos tipos de
ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs): n-6 PUFA como ácido linoléico y
araquidónico y n-3 PUFA como el ácido alfa linoléico, ácido eicosapentaenoico y
docosahexaeinoico. Los n-6 presentan capacidad de producir eicosanoides
proinflamatorios, sin embargo los n-3 presentan actividad anti inflamatoria
condicionando disminución de la lipogénesis y disminución de la
esteatosis[136]. Existen estudios que demuestran que una alta proporción
entre n6:n3 en los hepatocitos y en la circulación están asociados con la
severidad de EHGNA[137].

La lipotoxicidad es el mecanismo mayor por el que se produce disfunción del

hepatocito y progresión de la EHGNA, condicionada por el exceso de AGL en
sangre con tasas altas que provocan un disbalance en la proporción de estos en
relación a los TG que normalmente se encuentran en los hepatocitos. En
pacientes con EHGNA se produce una sobrecarga lipídica hepática,

44
 INTRODUCCIÓN

principalmente por la existencia de una liberación continua de AGL desde la

circulación sanguínea hacia el hígado. Los AGL atraviesan la membrana
plasmática de los hepatocitos por difusión o gracias a una proteína
transportadora (CD36 o caveolin-1), además existe otra vía de producción de
AGL a través de la lipogénesis de la glucosa en el hígado. Este aumento de la
concentración de AGL intrahepatocitarios se compensa por un incremento de
su β-oxidación mitocondrial y a través de la exportación de los TG en forma de
VLDL[138]. Esta acumulación de TG en los hepatocitos actúa como un
mecanismo protector frente a la toxicidad inducida por sus metabolitos
(lipotoxicidad)[138].

Existen estudios experimentales en ratones que demuestran que la viabilidad

del hepatocito depende de este mecanismo protector, así la incubación de AGL
insaturados en los hepatocitos, produce una importante acumulación de TG sin
afectar a la viabilidad de la célula, mientras que la incubación de AGL saturados,
produce una menor acumulación de triglicéridos y como consecuencia se
produce la activación de la apoptosis celular, produciendo la muerte del
hepatocito (FIGURA 7).

45
 INTRODUCCION

Figura 7. LIPOTOXICIDAD

[Link] RESISTENCIA A LA INSULINA

La obesidad y el SM son factores de riesgo tanto para EHGNA como para la

EHNA[139]. En población asiática se ha demostrado la existencia de pacientes
que no presentaban síndrome metabólico pero si RI y EHNA. La obesidad
central se postuló como el principal factor en la patogenia de EHNA. Existen
estudios con EHNA demostrada con biopsia que postulan la correlación no solo
de la grasa abdominal, sino también del resto de la grasa corporal, en la
severidad de la enfermedad[140].

46
 INTRODUCCIÓN

[Link] FRUCTOSA

Es un isómero de la glucosa cuyo uso se ha incrementado como edulcorante

artificial sustitutivo a la sacarosa por su menor precio. Mediante la proteína
facilitadora del transporte de la glucosa (GLUT 5) se absorbe en el intestino
delgado llegando al hígado a través de la vena porta en donde se produce la
fosforilación del carbono produciendo 3 metabolitos intermediarios[141].

La fructosa puede producir hepatotoxicidad indirecta agravando el síndrome

metabólico y aumentando los niveles de TG y disminuyendo los de HDL-
colesterol. Además los metabolitos de la fructosa causan depleción de ATP
induciendo estrés metabólico[140]. La ingesta de altos niveles de fructosa
condiciona alteración de la flora intestinal provocando activación del eje
intestino hígado e induce bajas endotoxemias que predisponen a EHGNA.

Existen estudios que han demostrado que un aumento del consumo de fructosa
se relacionan con aumento de la circunferencia de la cintura y del tejido
adiposo visceral sin cambio en el total de grasa corporal[142].

Los efectos directos de la toxicidad de la fructosa pueden ser debidos a la

acumulación en el hepatocito de fructosa 1 fosfato que condiciona productos
finales de glicación avanzada, 17 veces más rápido que la glucosa, provocando
inflamación y fibrosis mediante estrés oxidativo y síntesis de citoquinas (TNF-α
e IL-6) por medio de la activación de las CEH[143].

47
 INTRODUCCION

[Link] INMUNIDAD

En el hígado se encuentran células linfoides que son fenotípicamente y

funcionalmente distintas que sus homólogas en la circulación periférica y en
otros órganos (Células B, natural Killer, CD4+ y CD8+), dentro de las células no
linfoides las KC y las células dendríticas (DC) juegan un papel fundamental en la
respuesta inmune.

La EHGNA condicionan que se expresen tipos inmaduros de DC en respuesta a

la estimulación de lipopolisacáridos de bacterias intestinales condicionando la
secreción de citoquinas inflamatorias y contribuyendo a empeorar la
enfermedad[144].

La inmunidad innata es el factor más importante en la inflamación del

parénquima en las enfermedades hepáticas como la EHNA, está mediada por
inmunidad innata que incluyen neutrófilos, macrófagos (KC), natural Killer y
natural Killer T.

Las KC, derivadas de los monocitos, son la mayor población de macrófagos

hepático, durante la lesión hepática se produce la diferenciación rápida de
monocitos hacia KC siendo indistinguible de las verdaderas KC[145]. Se
encuentran situadas en los sinusoides hepáticos por lo que son las primera
células que contactan con inmunorreactivos exógenos, fagocitándolos y
expresando antígenos de estos, condicionando la producción de mediadores
pro inflamatorios tales como citoquinas, prostaglandinas, óxido nítrico y
productos intermediarios de las especies reactivas de oxígeno (ROS). Las KC
tienen un papel significativo en el control de procesos inflamatorios e
inmunológicos por lo que una dieta alta en grasa aumenta las KC y el estado
proinflamatorio. Además se produce sobreactivación de las células NKT y
muerte celular condicionando la producción de EHNA[146].

48
 INTRODUCCIÓN

[Link] CITOQUINAS

La síntesis de citoquinas (IL-6, TNF-α) están involucradas en alteraciones

inflamatorias y metabólicas de las fases más tempranas de la lesión hepática y
condicionan la síntesis de otras citoquinas que, de forma conjunta, inducen
migración celular e inician procesos de curación incluyendo la fibrosis[147]. Se
ha encontrado relación entre los niveles de TNF-α (aumentado tanto el
receptor como la forma soluble en hígado y tejido adiposo) y EHNA. Igualmente
se ha demostrado que la IL-6 condiciona RI a través de la regulación de SOCS3 y
la supresión de estos en ratones obesos condiciona sensibilización a
insulina[148].

En seres humanos se ha demostrado niveles elevados de IL6, RI y aumento del

estrés oxidativo en pacientes con EHGNA (incluso mayores que en hepatitis
virales crónicas)[149].

[Link] ADIPONECTINA /VISFATINA / LEPTINA

La adiponectina es una hormona sintetizada por los adipocitos con función anti
inflamatoria a través de la secreción de citoquinas anti inflamatorias (IL-10),
sus niveles están disminuidos en EHNA.

La visfatina es una adipocitoquina expresada y secretada por tejido adiposo

visceral. Su producción está regulada por citoquinas (IL-6, TNF-α) y
lipopolisacáridos de la flora intestinal, además presentan acción paracrina
provocando sobre el tejido visceral acción proadipogénica y lipogénica, por lo
que la sobre expresión de visfatina condiciona la diferenciación de células
preadipocitarias a adipocitos maduros y promueve la acumulación de grasa a
través de la activación del transporte de insulina[150].

49
 INTRODUCCION

La leptina es una hormona que condiciona una retroalimentación negativa en

los adipocitos, presenta acción lipostática. Los niveles de leptina se
correlacionan directamente con la gravedad de EHGNA y con la progresión
EHNA, en donde los niveles de leptina están elevados independientemente del
IMC[151].

[Link] FLORA MICROBIOTA INTESTINAL

Existe evidencia que relaciona la flora intestinal con la progresión de EHGNA a

EHNA, a través del eje intestino-hígado de forma que productos bacterianos
tales como el ADN, lipopolisacáridos y peptidoglicanos llegan al hígado a través
del sistema portal y activan receptores de superficie celular que como resultado
desencadenan inflamación, transducción de señales inflamatorias y
fibrosis[152]. Se ha demostrado que la flora intestinal en pacientes obesos
(mayor porcentaje de firmicutes) es distinta que la presente en sujetos con
normopeso (mayor porcentaje de bacteroides). La barrera mucosa actúa como
filtro para el paso de estos, existen estudios que demuestran un aumento de
permeabilidad intestinal y de proliferación bacteriana en pacientes con EHGNA
y EHNA[153].

Además las bacterias producen etanol endógeno aumentando el estrés

oxidativo y la inflamación hepática[154].

50
 INTRODUCCIÓN

1.5.3 CLÍNICA DE EHGNA EN NIÑOS

Esta enfermedad suele ser poco expresiva porque los pacientes suelen estar
asintomáticos o presentar manifestaciones inespecíficas, como astenia o
molestias en hipocondrio derecho.

En la exploración física, pueden presentar hepatomegalia (33-55%) y acantosis

nigricans (36-49%), siendo éste último un hallazgo descrito solamente en
niños.

La acantosis nigricans, consiste en un engrosamiento e hiperpigmentación de la

piel, de localización intertriginosa, que ha sido considerada como un marcador
de hiperinsulinemia y de resistencia a la insulina[155].

Otros signos, como son la esplenomegalia, la presencia de borde duro en el

hígado, eritema palmar y teleangiectasias, sugieren la presencia de una
enfermedad hepática avanzada con evolución cirrógena.

1.5.4 DIAGNÓSTICO

[Link] EXAMEN CLÍNICO:

Hay una correlación significativa entre el grado de esteatosis hepática y el

índice cintura/cadera, señalando la importancia de la grasa intraabdominal o
visceral como predictor del hígado graso que es un precursor del EHNA[114].

51
 INTRODUCCION

[Link] PRUEBAS DE LABORATORIO:

Los estudios de laboratorio en el EHNA muestran una elevación moderada (2-4

veces por encima de lo normal) de los niveles séricos de transaminasas en el
70-100% de los casos, con una razón AST/ALT<1 en la mayoría de los casos,
cuando este índice se invierte sugiere la presencia de patología avanzada. Los
niveles de albúmina, bilirrubina y el tiempo de protrombina son normales a
menos que exista cirrosis. Es frecuente la hipertrigliceridemia, y los niveles de
ferritina están elevados en el 53-62% de los casos. En adultos pueden existir
anticuerpos antinucleares a títulos bajos[114, 156].

[Link] TÉCNICAS DE IMAGEN:

La ecografía es la técnica más asequible y económica para detectar depósitos

grasos en el hígado, además de ser la primera técnica de elección a utilizar, a
pesar de que su sensibilidad decrece para discernir gravedad entre los distintos
grados de EHNA[157, 158].
A pesar de que la biopsia hepática es el único método eficaz para el diagnóstico
de esta entidad, en la práctica clínica es todavía motivo de controversia cuando
está indicada su realización. Esto se debe a que, en general los pacientes se
encuentran asintomáticos, el pronóstico en la mayoría de los casos es bueno, no
existe un tratamiento bien establecido, y que la biopsia es una técnica con un
coste económico y no se encuentra exenta de complicaciones. Muchos
hepatólogos sólo recomiendan la biopsia en pacientes con enzimas hepáticas
persistentemente anormales una vez eliminados otros factores de riesgo[159].

52
 INTRODUCCIÓN

- ECOGRAFÍA EN MODO B

La ecografía es la técnica más asequible y económica para detectar depósitos

grasos en el hígado, además de ser la primera técnica de elección a utilizar, a
pesar de que su sensibilidad decrece para discernir gravedad entre los distintos
grados de EHNA[157, 158].

Valora la presencia de grasa de forma subjetiva, dividiendo los grados de

esteatosis en cuatro de forma cualitativa:

Grado 0, normal: ecogenicidad homogénea y similar a la corteza renal o a bazo.

Grado 1, leve: aumento de ecogenicidad leve, ligeramente superior a corteza

renal o a bazo.

Grado 2, moderado: aumento difuso de la ecogenicidad con mala visualización

del diafragma o ramas portales.

Grado 3, severa: aumento de ecogenicidad que impide la visualización de

diafragma ni de ramas portales.

El principal problema es que es explorador dependiente y no distingue entre

esteatosis y fibrosis[160].

- RM MORFOLÓGICA CUALITATIVA

Se basa en técnicas de desplazamiento químico para diferenciar entre la

densidad de protones de grasa y de agua del hígado. Secuencias en FASE(F) y
OPUESTO DE FASE(OF). El hígado normal tiene la misma IS en F y OF mientras
que cuando hay esteatosis la IS cae en OF.

53
 INTRODUCCION

- RM CUANTITATIVA

Se basa también en técnicas de desplazamiento químico mediante el cálculo de

la fracción de densidad de protones de grasa en el hígado y fracción de
densidad de protones de grasa. Es un marcador estandarizado y reproducible y
parece ser el más objetivo en la cuantificación de la grasa hepática. Es una ratio
que surge de dividir la cantidad de protones de grasa móviles entre la suma de
la densidad de protones de grasa y agua móviles. Ha mostrado resultados
prometedores en niños comparándolo con la biopsia. Requiere un postproceso
con algoritmos específicos y software para cálculo automático que no está
disponible en todos los equipos actualmente. Se postula que los niveles
normales en niños son 5-6% aunque todavía está por establecer.

- ESPECTRO-RM

Es el método no invasivo más exacto para cuantificar la cantidad de grasa

hepática y se usa como valor de referencia en muchos estudios. Muestra el
espectro del hígado con los picos producidos por el agua y la grasa. En
condiciones normales el pico de agua es dominante y se encuentra en 4,7 ppm y
el de la grasa suele distribuirse en varios picos muy pequeños que no se suelen
ver. Cuando hay esteatosis el pico dominante es el de la grasa. Sin embargo no
está ampliamente disponible y estudia sólo porciones del hígado. Además la
adquisición y análisis es compleja, consume mucho tiempo de máquina y
postproceso y sólo está disponible en determinados centros especializados en
investigación. Por eso no hay muchas esperanzas en que esta técnica tenga una
amplia implantación y en niños no hay apenas estudios[160-162].

54
 INTRODUCCIÓN

- TÉCNICAS PARA MEDIR FIBROSIS:

FIBROSCAN

O elastografía de transición: mide la rigidez del hígado en kPa. Tiene

limitaciones en un 5% de los pacientes, sobre todo en casos de obesidad y
ascitis. Tiene también algunas desventajas técnicas como una profundidad de
medida fija y que no se ve en qué zona se toma la medida. Los valores normales
están entre 6,5 y 7 kPa. Tiene alta S y E en la distinción entre fibrosis leve y
severa[163].

ELASTOSONOGRAFIA

(ARFI, Shear wave, según las casas comerciales: Siemens y GE) La técnica es un
método para cuantificar virtualmente la rigidez hepática con un software
integrado en un ecógrafo convencional. Consiste en emitir un tren de pulsos
cortos de alta energía y frecuencia de repetición baja con un transductor
modificado. Los pulsos alteran mecánicamente el tejido y provocan ondas que
producen microdesplazamientos locales perpendiculares a la dirección de los
pulsos acústicos. Permite medir la velocidad de propagación de las ondas, un
parámetro biológico considerado análogo a la elasticidad de los tejidos,
expresado en m/s. Existe un aumento en la velocidad conforme aumenta el
grado de fibrosis. Con esta técnica es difícil distinguir entre niños sanos y con
estadios precoces de fibrosis (F0-F1). Pero sí permite discriminar entre niños
con fibrosis establecida (>F2) de fibrosis leve (F1). Podrían definirse dos zonas
de seguridad en las que sin necesidad de biopsia la fibrosis hepática puede
cuantificarse con sensibilidad o especificidad elevadas. Hasta 1,23 m/s la
sensibilidad es muy alta. De 1,24 m/s a 1,62 m/s, es una zona de incertidumbre.
A partir de 1,62 m/s la especificidad es muy alta.

55
 INTRODUCCION

Los estudios sobre la utilidad de esta técnica en el seguimiento de la

enfermedad hepática crónica en los niños son escasos pero con resultados
prometedores usando el Fibroscan y la biopsia hepática como referentes.

La esteatosis no se relaciona con la velocidad de propagación de las ondas,

aunque algunos artículos dicen que disminuye la velocidad, pero la actividad
necroinflamatoria sí de forma significativa.

Es una nueva herramienta con ventajas probadas en adultos. La exactitud

diagnóstica es similar a la del Fibroscan, de hecho se plantea como una
alternativa, pero tiene ventajas añadidas: puede usarse en pacientes con
espacios intercostales pequeños, con ascitis y con obesidad mórbida[164].

ELASTO-RM

Mide también la elasticidad de los tejidos midiendo la velocidad de las ondas. Es

superior en la evaluación de la fibrosis ya que la obesidad no es una limitación y
permite estudiar el hígado entero. Sin embargo los datos son muy escasos por
su baja disponibilidad y sus altos costes que limitan su uso en la práctica clínica
siendo necesario realizar estudios para valorar esta técnica en niños[165].

Para la realización de todas las técnicas de resonancia magnética se necesitan

tiempos largos de máquina, haciéndola poco práctica en la clínica diaria,
además en niños es necesario sedación y anestesia con bastante frecuencia.

56
 HIPÓTESIS Y OBJETIVOS

2 HIPÓTESIS Y OBJETIVOS

57
 HIPOTESIS Y OBJETIVOS

58
 HIPÓTESIS Y OBJETIVOS

2.1 HIPÓTESIS

La EHGNA es un problema clínico emergente entre la población obesa. Esta

entidad incluye un amplio espectro de lesiones hepáticas que van desde la
simple esteatosis hepática sin inflamación, a la EHNA con la posible evolución a
cirrosis hepática.
Aunque este síndrome tiene una etiología multifactorial, la obesidad es el factor
que se asocia de forma más consistente. Muchos detalles referentes a la EHGNA
en niños son desconocidos, incluyendo los mecanismos implicados en su
desarrollo, habiendo asumido los mismos mecanismos que en el adulto. La
mayoría de las publicaciones incluyen pacientes de rango de edad muy amplio y
analizan los resultados sin diferenciar a niños y adolescentes.
Nuestra hipótesis se basa en la idea de que los mecanismos implicados en la
EHGNA es distinta en niños y adolescentes.

2.2 OBJETIVOS

2.2.1 OBJETIVO PRINCIPAL

Conocer en pacientes obesos si la prevalencia de esteatosis hepática es distinta

en los niños prepúberes frente a los adolescentes.

2.2.2 OBJETIVOS SECUNDARIOS

- Identificar factores de riesgo: familiares, somatométricos, metabólicos y

bioquímicos (citoquinas, estrés oxidativo) que diferencien a los niños y
adolescentes obesos con y sin esteatosis.
- Conocer qué factores influyen en los pacientes obesos con y sin aumento de
transaminasas.

59
 HIPOTESIS Y OBJETIVOS

60
 PACIENTES Y METODOS

3 PACIENTES Y MÉTODOS

61
 PACIENTES Y METODOS

62
 PACIENTES Y METODOS

Diseño de estudio: Estudio de cohortes prospectivo.

Ámbito de estudio Hospital Universitario San Cecilio de Granada.

3.1 PACIENTES

La cohorte de pacientes está compuesta por 157 niños y adolescentes

españoles, entre 4-15 años de edad.

3.1.1 CRITERIOS DE INCLUSIÓN

Todos los sujetos de estudio tenían un IMC o índice de Quetelet superior al

percentil 95 según la edad y el sexo, usando las bases de datos de referencia
para el IMC de niños españoles 6. Los pacientes fueron incluidos en la cohorte de
forma consecutiva cuando fueron remitidos a la consulta de endocrinología
Pediátrica con diagnóstico de obesidad, según las “Curvas de Referencia para la
Tipificación Ponderal de la población infantil y juvenil” del grupo colaborativo
AEP-SENC-SEEDO (Asociación Española de Pediatría y Sociedad Española para
el Estudio de la Obesidad) del año 2002.
- Los participantes en el estudio no consumían alcohol o medicaciones
esteatogénicas.
- Aceptación de participar en el estudio con la firma del Consentimiento
informado

6
Hernández M, Sánchez E, Sobradillo B. Curvas y tablas de crecimiento. In: Argente J, Carrascosa A, Gracia R,
eds. Tratado de Endocrinología Pediátrica y de la Adolescencia. 2nd ed. Barcelona: Doyma; 2000:1441–99.

63
 PACIENTES Y METODOS

3.1.2 CRITERIOS DE EXCLUSIÓN

Fueron excluidos del estudio a los niños que recibían medicación o tenían otra
enfermedad asociada o no a la obesidad que pudiera alterar el índice de
evaluación del modelo homeostático ( HOMA-IR) o propiciar la esteatosis
hepática. Como por ejemplo, los pacientes tratados con corticoides, presencia
de diabetes tipo I, déficit de alfa-1-antitripsina, hepatitis infecciosa o síndrome
de Wilson.

3.2 MÉTODOS

3.2.1 METODOLOGÍA CLÍNICA

[Link] ANAMNESIS

Se recogió en la historia clínica del paciente los antecedentes familiares de

obesidad, diabetes tipo 2 (en primer o segundo grado), alteración del
metabolismo lipídico o de enfermedad hepática, edad, sexo, grupo étnico, peso
al nacer, duración de la lactancia materna, consumo de fármacos o tóxicos,
hábito tabáquico o consumo de alcohol en adolescentes.
Se preguntó por la presencia de síntomas especialmente dolor abdominal no
específico o fatiga.

[Link] EXPLORACIÓN

Se registraron las siguientes variables clínicas: peso, talla, índice de masa

corporal (peso en kilogramos/altura en metros cuadrados), presión arterial

64
 PACIENTES Y METODOS

sistólica y diastólica, presencia de acantosis nigricans, hepatomegalia o

esplenomegalia.
El peso se obtuvo con una báscula clínica (precisión de 100 g) con el niño
desnudo o en ropa interior pero descalzo, colocado sobre el centro de la báscula
sin apoyarse en sitio alguno, comprobándose periódicamente la escala con un
peso conocido.
La talla se tomó con un estadiómetro (modelo Holtain, amplitud 840-2060 mm)
con precisión de 0.1 cm, estando el niño de pie, descalzo y erecto, con sus
talones, nalgas y parte media superior de la espalda en contacto con la guía
vertical de medición. Los tobillos juntos, los brazos colocados con las palmas
hacia dentro, y la cabeza levantada cómodamente, procurando un plano
imaginario entre el borde inferior de la órbita y conducto auditivo externo.
Con el fin de comparar los valores de IMC en todas las edades y sexos, se calculó
la puntuación del IMC z-score[7].

[Link] MÉTODO DIAGNÓSTICO DE LA ESTEATOSIS HEPÁTICA

A 127 pacientes se le practicó una ultrasonografía hepática para definir la

presencia de hígado graso por un experto radiologo, usando un aparato Toshiba
Powervisión 6000 scaner (Toshiba Medical, Otawara, Japan) con un
transductor de 3,5-6 MHz.
El radiólogo desconocía las condiciones clínicas y analíticas de los pacientes.
Los parámetros usados por el radiólogo para el diagnóstico de esteatosis
fueron: evidencia de hiperecogenicidad difusa del hígado en relación a los
riñones, atenuación ecográfica y pobre visualización de los vasos intrahepáticos
y diafragma[160]. Como control de calidad un 10% de los sujetos fueron
reevaluados y el coeficiente de variación de los resultados fue inferior al 1%.

65
 PACIENTES Y METODOS

3.2.2 RECOGIDA Y ANÁLISIS DE LAS MUESTRAS SANGUÍNEAS

[Link] RECOGIDA DE MUESTRAS

Las muestras sanguíneas fueron obtenidas después de 10 horas de ayuno y

divididas en tubos de plasma y suero. Para la determinación de parámetros
bioquímicos, la sangre fue procesada y analizada por los métodos de rutina en
el laboratorio general del Hospital Universitario San Cecilio de Granada. Para
cada paciente se determinó, glucosa (miligramos por decilitro), insulina
(microunidades por mililitro), TG (miligramos por decilitro), colesterol total
(miligramos por decilitro), LDL colesterol (miligramos por decilitro), HDL
colesterol (Miligramos por decilitro), ALT (unidades por litro), AST (unidades
por litro) y gamma glutamil-transferasa (GGT) (unidades por litro).
El Índice HOMA-IR (Homeostasis model assesment, modelo homeostático con
datos basales) fué calculado según la siguiente fórmula: Insulina (µU/mL) x
glucosa (mmol/L)/22,5.
Se congelaron 2ml de suero a –80ºC para estudio de los niveles de adipoquinas,
TNF-α receptor soluble de TNF-α y los marcadores de estrés oxidativo.
En todos los niños con aumento de transaminasas se amplió el estudio para
excluir otras enfermedades metabólicas, víricas o autoinmunes capaces de
provocarla (hepatitis vírica, enf. Wilson, fibrosis quística, déficit de alfa-1-
antitripsina, estudio del metabolismo del hierro, función tiroidea y
autoanticuerpos).

[Link] ANÁLISIS DE LA MUESTRA HEMATOLÓGICA

• Los parámetros hematológicos se determinaron con el analizador ISAZA

COULTER S-PLUS JR. Los parámetros bioquímicos mediante el analizador

66
 PACIENTES Y METODOS

automático HITACHI 717 (Boehringer Mannheim) siguiendo los métodos

habituales de nuestro hospital.
• En los niños con ALT elevada se determinarón los anticuerpos
antinucleares (ANA) y antimitocondriales (AMA) mediante el analizador
automático Atom (inmunofluorescencia indirecta) con células Hep-2
para ANA y con antígenos presentes en hígado, riñón y estómago de rata
para los AMA. Los marcadores del Virus del la hepatitis A (VHA) y Virus
de la hepatitis b (VHB) por enzimoinmunoensayo convencional (Abbott),
CMV (Instituto Berhing). El Virus de la hepatitis C (VHC) mediantes
ELISA3 (Ortho), RIBA3 (Chiron ). Las hormonas tiroideas mediante
inmunoensayo competitivo para la triyodotironina (T4) total y tiroxina
(T3 ) libre y un test inmunométrico para la hormona estimulante del
tiroides (TSH) (IMMULITE 2000). La alfa-fetoproteína mediante
enzimoinmunoensayo de micropartículas (MEIA Axsym AFP).
• La determinación de la concentración en suero de las citoquinas se
midieron en plasma. La adiponectina (nanogramos por mililitro), leptina
(nanogramos por mililitro), TNF-α (picogramos por mililitro), IL-6
(picogramo por mililitro), y MCP-1 (picogramo por mililitro) se midieron
por Luminex 100 Sistema Integrado de 2,3 software en los 200 Bio-Plex
Sistema (Bio-Rad, Austin, TX). Los ensayos se realizaron de acuerdo a las
instrucciones del fabricante. La forma soluble de TNF-α receptor (sTNFα-
R) se determinó por inmunoensayo ligado a enzimas (ELISA) (Bender
Med Systems, Viena, Austria). No se detectó reactividad cruzada con TNF
humano-α (<1 ng / ml) o TNF-beta (<100mg/ml). El receptor soluble de
leptina (SLR) se determinó por ELISA (Enzo Ciencias de la Vida, de
Plymouth Meeting, PA). La determinación de los niveles de sulfato de
dehidroepiandrosterona (DHEAS) se realizó mediante ELISA (IBL-
International, de Hamburgo, Alemania).

67
 PACIENTES Y METODOS

• Los marcadores de estrés oxidativo fueron analizados en muestras

simples de sangre. Para la determinación de los niveles de nitritos, las
muestras de plasma fueron desproteinizadas y los sobrenadantes se
utilizaron para medir la cantidad de nitrito mediante la reacción de
Griess a 550 nm, en un lector de microplacas (TRIAD serie, Dynex
Technologies, Chantilly, VA)[166]. Las concentraciones se calcularon de
acuerdo con una curva estándar y expresada en nanomoles por
mililitro. Para la actividad específica de la GPx eritrocitaria y GRD, los
eritrocitos se lisaron y se utiliza sobrenadantes. Las actividades
específicas se midieron después de la oxidación de los NADPH durante
3 minutos a 340 nm en un espectrofotómetro UV (Thermo Spectronic,
Biomate3, Rochester, NY) i.

La actividad de ambas enzimas se expresa en nanomoles por miligramo

de hemoglobina (HB). Las formas GSH y GSSG se determinó en el lisado
de células sanguíneas. Ambos GSH y GSSG se midieron mediante un
método fluorométrico que fue ligeramente modificado[167]. Las
muestras se incubaron con ophthalaldehydo y se midió la fluorescencia
en un lector de placas espectrofluorómetro (TRIAD Series, Dynex
Technologies). Usando una curva normal de concentraciones conocidas
de GSH para el procesamiento de las muestras. Para medir la
concentración de GSSG, los sobrenadantes se preincubaron con N-
etilmaleimida, y luego se alcalinizó con NaOH. Se midió la fluorescencia
y las concentraciones de GSSG se calcularon de acuerdo con una curva
estándar. Los niveles de GSH y GSSG se expresan en nanomoles por
miligramo de HB.

68
 PACIENTES Y METODOS

3.2.3 ANÁLISIS DE LOS DATOS

Ciento cincuenta y siete niños y adolescentes obesos fueron incluidos en el

estudio. Los sujetos fueron clasificados según la situación puberal de la
siguiente manera: Grupo 1-pacientes sin signos de madurez sexual de acuerdo
con los niveles de DHEAS (59 niños); grupo 2-pacientes diferentes estadios de
Tanner 7 y con altos niveles de DHEAS (98 adolescentes). Para el estudio de los
factores asociados con esteatosis hepática, cada paciente se clasificó de acuerdo
con la ausencia o presencia de esteatosis hepática detectada por ecografía.

Los análisis estadísticos se realizaron utilizando el paquete estadístico para

Ciencias Sociales (SPSS 15.0, SPSS Inc, Chicago, IL).

Los resultados se presentan como media ± desviación estándar. El análisis

estadístico se realizó con la prueba t de muestras independientes para
comparar las variables con distribución normal, mientras que para las variables
sin distribución normal se usó la prueba de Mann-Whitney. Las correlaciones
lineales se calcularon por el Coeficiente de correlación de Pearson. El grado de
asociación se determinó mediante el cálculo de la odds ratio (OR) y su intervalo
de confianza del 95% (IC del 95%) por medio Regresión logística. El criterio de
significación estadística fue p <0,05.

3.2.4 CONSIDERACIONES ÉTICAS

El presente estudio se desarrolló de acuerdo con la última versión de la

Declaración de Helsinki y los requerimientos locales. Antes de la inclusión del

7
Tanner JM. Groowth at Adolescence. Oxford, UK, Blackwell Scientific; 1962: 28-39

69
 PACIENTES Y METODOS

primer sujeto de estudio, el protocolo fue aprobado por el Comité de Ética del
Hospital San Cecilio.

El modelo de consentimiento informado genérico puede encontrarse como

Anexo I.

Los investigadores fueron los responsables de obtener el consentimiento

informado FIRMADO, para los sujetos participantes. Los pacientes mayores de
12 años y todos los padres de los sujetos de estudio firmaron el consentimiento
informado después de recibir una hoja de información explicando el objeto del
estudio. Los consentimientos informados se firmaron por duplicado (original
para el investigador y copia para el sujeto participante (padres/tutores).

Confidencialidad de los datos. En todas las fases del estudio se respetó lo

establecido por la Ley de Protección de Datos. Se mantuvo la confidencialidad
de todos los datos de carácter personal, los cuales quedaron anonimizados en la
base de datos central, que, además, ha estado protegida por una contraseña que
sólo era conocida por el personal autorizado implicado en el estudio.

70
 RESULTADOS

4 RESULTADOS

71
 RESULTADOS

72
 RESULTADOS

4.1 ANÁLISIS DESCRIPTIVO

4.1.1 CARACTERÍSTICAS GENERALES DE LOS PACIENTES

Se incluyeron en el estudio 157 niños obesos de ellos, 78 (49,7%) eran niñas y

79 (50,3%) niños, con una media de edad de 10,7 años ± 2,4 (entre 4 y 15
años). La media del índice de masa corporal fue de 28,6 ± 3,7 (entre 22 y 44) y
la media del IMC-z-score corregido por edad y sexo fue de 2,23 ± 0,03 (entre 1,7
y 4). Solamente 2 (1,9%) niños tenían acantosis nigricans, 6 (5,7%) niños
tenían hepatomegalia y de ellos 5 eran niños y una niña. Al valorar los
antecedentes familiares de diabetes o trastornos lipídicos: 55 (37,4%) no
tenían antecedentes, el resto, 34 tenían antecedentes de diabetes (21,8%) en la
familia, 28 trastornos lipídicos (18,4%) o ambos en 35 pacientes (22,4%). No
fue recogido en 5 pacientes (3.18 %)

4.1.2 ANTECEDENTES PERINATALES Y TIEMPO DE EVOLUCIÓN DE LA

OBESIDAD

El 90% de los pacientes incluidos en el estudio tuvieron un peso normal al

nacer (2500-4000g), el 4,7% tuvo un peso inferior a 2500g y el 5,3% pesó más
de 4000g. El 65% recibió lactancia materna exclusiva con una media en meses
de 4,03 ± 3. El resto se alimento con lactancia artificial o mixta. El tiempo de
evolución de la obesidad pudo ser recogido en 134 niños con una media de 5,7
± 2,8 años.

73
 RESULTADOS

4.1.3 INSULINA, ÍNDICE HOMA Y PÉPTIDO C

El 71,3% de los niños tenían un Péptido C superior a 2, presentando una

correlación positiva con las cifras de insulina (Rho de Spearman = 0,800 y un
valor de p<0,001), del índice HOMA (Rho de Spearman = 0,789 y un valor de
p<0,001) y con la edad de los pacientes (Rho de Spearman = 0,518 y un valor de
p<0,001).

4.2 ANÁLISIS BIVARIANTE

4.2.1 ANÁLISIS DE PARÁMETROS ESTUDIADOS EN TODOS LOS

PACIENTES Y EN LOS NIÑOS Y ADOLESCENTES

El resto de las variables estudiadas se muestran en la tabla 5 y 6 en los niños y

adolescentes obesos. Los niños (G1) eran más obesos que los adolescentes y las
tasas de colesterol total eran más altas. En el grupo de adolescentes, la insulina,
glucosa y el índice HOMA fueron significativamente más altos con respecto a los
niños.
Las variables asociadas de forma significativa con el estrés oxidativo y
citoquinas están representadas en la tabla 6. GPx, la fracción TNFα/RTNFα, el
receptor soluble de la leptina (SLR) y la adiponectina están más elevadas en el
grupo 1, mientras que la leptina y la leptina libre están más elevadas en el
grupo 2. SLR presenta una correlación negativa con la leptina en el todos los
pacientes (Coeficiente de correlación de Pearson -344; p<0,01).

74
 RESULTADOS

Tabla 5. CARACTERÍSTICAS DE LOS NIÑOS Y ADOLESCENTES OBESOS

Total G1 G2
Características P
n=157 n=59 n=98
Género masculino: n (% ) 79 (50) 30 (51) 49 (50) 0,921
DHEAS 129 ± 6 71,5 ± 4 162 ± 7 0,001
IMC (z-score) 2,23 ± 0,03 2,4 ± 0,4 2,1 ± 0,2 0,001
Años de obesidad 5,7 ± 0,2 4,6 ± 2 6,3 ± 3 0,684
Glucosa (mg/dL) 84 ± 0,7 81,5 ± 1,1 85 ± 0,8 0,022
Insulina (µU/mL) 15,8 ± 0,8 11,5 ± 0,8 17 ± 1 0,001
Péptido C (mg/dL) 3,3 ± 0,6 2,1 ± 0,1 4±1 0,143
Índice HOMA 3,1 ± 0,2 2,3 ± 0,2 3,5 ± 0,2 0,001
Colesterol total (mg/dL) 163 ± 2,9 172 ± 4,5 157 ± 3,7 0,004
Triglicéridos (mg/dL) 87 ± 3,8 91 ± 3 85 ± 4,3 0,320
LDL-C (mg/dL) 98 ± 2,3 101 ± 3,7 95 ± 3 0,227
HDL-C (mg/dL) 50,5 ± 0,8 52 ± 1,3 50 ± 1 0,225
Bilirrubina total (mg/dL) 0,36 ± 0,01 0,30 ± 0,02 0,40 ± 0,01 0,011
Apolipoproteína A (mg/dL) 132,5 ± 1,7 135 ± 2,8 131 ± 2,2 0,252
Apolipoproteína B 100 (mg/dL) 68 ± 1,9 69 ± 4,1 67 ± 2 0,784
ALT (UI/L) 23 ± 1 24 ± 1,6 23 ± 1,2 0,583
AST (UI/L) 25 ± 0,9 28 ± 1 24 ± 1,2 0,024
GGT (U/L) 15 ± 0,6 14,8 ± 0,7 15 ± 0,6 0,672

ALT: alanino aminotransferasa; AST: aspartato aminotransferasa; BMI: índice de masa

corporal; DHEA: dehidroepiandrosterona sulfato; GGT: gamma glutamiltransferasa; HDL:
lipoproteinas de alta densidad; HOMA-RI: índice de evaluación del modelo homeostático;
LDL: lipoproteinas de alta densidad. Grupo 1, 59 niños; grupo 2, 98 adolescentes. Los
resultados están expresados como media ± DE. En negrita se encuentran aquellas p
estadísticamente significativas.

75
 RESULTADOS

Tabla 6. MARCADORES DE ESTRÉS OXIDATIVO SISTÉMICO, CITOQUINAS

PROINFLAMATORIAS Y ADIPOQUINAS EN NIÑOS Y ADOLESCENTES OBESOS

Total G1 G2
Parámetro P
n=157 N=59 n=98
GSH(nmol/mg HB) 4,8 ± 0,1 4,7 ± 0,2 4,8 ± 0,2 0,742
GSSG(nmol/mg HB) 1,0 ± 0,06 0,99 ± 0,07 1,0 ± 0,07 0,925
GST(nmol/mg HB) 5,9 ± 0,13 5,7 ± 0,2 5,9 ± 0,17 0,461
GSSG/GSH 0,22 ± 0,01 0,21 ± 0,02 0,22 ± 0,08 0,925
GPx (nmol/mg HB) 36,0 ± 0,9 39,2 ± 1,4 34,5 ± 1,2 0,015
GRd (nmol/mg HB) 2,5 ± 0,08 2,6 ± 0,1 2,4 ± 0,1 0,190
LPO (nmol/mL) 8,5 ± 0,23 8,6 ± 0,4 8,3 ± 0,3 0,527
Nitritos (nmol/mL) 8,7 ± 0,3 9 ± 0,5 8,5 ± 0,4 0,357
RTNFα (pg/mL) 1,90 ± 0,08 1,80 ± 0,1 2,03 ± 0,1 0,190
TNFα (pg/mL) 7,7 ± 0,4 7,4 ± 0,6 7,8 ± 0,5 0,618
TNFα/ RTNFα 4,9 ± 0,4 5,5 ± 0,8 4,5 ± 0,3 0,001
MCP-1 (pg/mL) 448 ± 34 390 ± 37 484 ± 49 0,183
Leptina (ng/mL) 25,8 ± 1,1 22,4 ± 1,6 27,9 ± 1,6 0,024
SLR (ng/mL) 16,3 ± 0,6 19,8 ± 0,9 14,6 ± 0,6 0,001
Índice leptina libre (FLI) 20 ± 1,4 14,5 ± 2 22,2 ± 1,8 0,005
IL6 (pg/mL) 11,6 ± 1,8 14,6 ± 3,8 9,9 ± 1,7 0,199
Resistina (pg/mL) 53,9 ± 5 52,8 ± 6,6 54,6 ± 7,1 0,864
Adiponectina (ng/mL) 83,9 ± 1,9 89,7 ± 2,6 80,4 ± 2,6 0,019

GPx: glutation oxidasa; GRd: glutation reductasa; GSH: glutataion reducido; GSSG: glutation
oxidado; HB: hemoglobina; IL: interleuquina; MCP: proteina quimiotáctica de monocitos; SLR:
receptor soluble de leptina; TNF-α: factor de necrosis tumoral-α; TG: glutation total. Grupo 1,
59 niños; grupo 2, 98 adolescentes. Los resultados están expresados en media ± DE. En negrita
se expresan aquellas p estadísticamente significativas.

76
 RESULTADOS

4.2.2 ESTUDIO DE LA ESTEATOSIS HEPÁTICA

La presencia de esteatosis hepática fue evaluada en 127 pacientes (51 en el

grupo 1 y 76 en el grupo 2) y los sujetos que presentaron esteatosis fueron 57
con una prevalencia del 44,9%, no encontrando diferencias respecto a la edad o
el sexo. En el grupo 1 presentaron esteatosis 20/51 (39,2%) frente a 37/76
(48,7%) en el grupo 2.
En la Tabla 7 y 8 se muestran las variables asociadas con esteatosis hepática y
las diferencias estadísticamente significativas entre grupos.
En la tabla 7 están representadas el IMC (z-score) y la bioquímica sanguínea. En
el grupo 1, el HDL-C fue más bajo en los niños con esteatosis. En el grupo 2 los
factores asociados con la esteatosis fueron: mayor niveles de insulina, de índice
HOMA, péptido C, ALT, AST y triglicéridos.
El resto de parámetros bioquímicos estudiados no mostraron diferencias
estadísticamente significativas.

77
 RESULTADOS

Tabla 7. CARACTERÍSTICAS DE LOS NIÑOS Y ADOLESCENTES OBESOS Y LA

PRESENCIA DE ESTEATOSIS HEPÁTICA

G1 G2
No Esteatosis P No P
Esteatosis
esteatosis esteatosis
N=31 (61%) N=20 (39%) N=39 N=37(48,7%)
(51,3%)
IMC (z score) 2,4 ± 0,06 2,4 ± 0,06 0,999 2,08 ± 0,03 2,2 ± 0,04 ## 0,019
ALT UI/L 22 ± 1,4 27,4 ± 3,9 0,135 19,5 ± 1,1 27,5 ± 2,6 0,007
AST UI/L 26,1 ± 1,2 29 ± 2,1 0,203 21,7 ± 0,8 26 ± 2,7 0,007
GGT UI/L 15,4 ± 1,3 14 ± 0,9 0,453 14,6 ± 1 15,6 ± 0,9# 0,476
Hierro (μg/mL) 84 ± 5,6 69 ± 6 0,089 83,2 ± 5 79,06 ± 4# 0,533
HDL-C (mg/dL) 54,4 ± 1,7 48,5 ± 1,7 0,026 50 ± 1,6 48 ± 1,7 0,427
Triglicéridos (mg/dL) 82 ± 8,4 98 ± 14 0,302 75,3 ± 6,2 95,2 ± 7,6 0,047
Hombres, n(%) 14 (54) 12 (46) 21 (52,5) 19 (47,5)
Mujeres, n(%) 17 (68) 8 (32) 0,392 18 (50) 18 (50) 1.000
Insulina (μU/mL) 12 ± 1,3 11,2 ± 1,1 0,668 13,3 ± 0,83 22,7 ± 2,1### 0,001
Péptido C (mg/dL) 2,1 ± 0,2 2,2 ± 0,2 0,738 2,5 ± 0,1 6,5 ± 2,0### 0,043
HOMA-RI 2,4 ± 0,3 2,4 ± 0,2 0,999 2,7 ± 0,2 4,7 ± 0,5### 0,001

La presencia de esteatosis hepática fue evaluada en 127 sujetos. Grupo 1, 51 niños; grupo 2, 76
adolescentes. Las diferencias estadísticamente significativas entre esteatosis en grupo1 y grupo 2 se
encuentran marcadas como (##) (P<0.010) y (###) (P<0.001). Los resultados están expresados en
media ± DE. En negrita se expresan aquellas p estadísticamente significativas. ALT: alanina
aminotransferasa; AST: aspartato aminotransferasa; IMC: índice de masa corporal; HDL:
lipoproteínas de alta densidad; HOMA-RI: índice de evaluación del modelo homeostático .

En la tabla 8 se muestran los marcadores de estrés oxidativo y la medida de los

niveles de adipoquinas. En el grupo 1 los niños con esteatosis muestran niveles
elevados de GSSG y resistina y un descenso de la actividad específica de GRd y
de GPx. En el grupo 2, los adolescentes con esteatosis tienen niveles mayores de
GSSG, GST, del índice GSSG/GST y de leptina. La GPx y el receptor soluble de la
leptina fueron más bajos en el grupo de pacientes adolescentes con esteatosis.
Al comparar estas variables entre los dos grupos con esteatosis, los
adolescentes fueron menos obesos pero tenían mayores niveles de insulina,
índice HOMA y péptido C (Tabla7) y menores tasas de SLR y adiponectina que
los niños obesos con esteatosis (Tabla 8).

78
 RESULTADOS

Tabla 8. RESULTADOS DE LOS MARCADORES DE ESTRÉS OXIDATIVO Y

ADIPOQUINAS EN LOS NIÑOS Y ADOLESCENTES OBESOS Y PRESENCIA DE
ESTEATOSIS HEPÁTICA

G1 G2
No esteatosis Esteatosis P No esteatosis Esteatosis P
N=31 N=20 N=39 N=37
#
GSSG (nmol/mg HB) 0.78 ± 0.06 1.13 ± 0.15 0.028 0.8 ± 0.06 1.2 ± 0.14 0.013
GSHT (nmol/mg HB) 5.5 ± 0.3 5.9 ± 0.4 0.421 5.4 ± 0.2 6.3 ± 0.3 0.014
GSSG/GSH 0.19 ± 0.03 0.24 ± 0.03 0.228 0.18 ± 0.01 0.25 ± 0.03 0.028
GPx (nmol/mg HB) 40.7 ± 1.5 35.8 ± 4 0.052 38.1 ± 1.6 32.6 ± 2 0.035
GRd (nmol/mg HB) 2.8 ± 0.1 2.3 ± 0.2 0.017 2.7 ± 0.2 2.2 ± 0.2 0.081
Resistin (ng/mL) 45.4 ± 6.5 72.4 ± 15 0.036 56.5 ±15 57.3 ± 8.3 0.963
Leptin (ng/mL) 22 ± 2 24.1 ± 3 0.547 23.6 ± 1.6 30.8 ± 2.8 0.026
###
SLR (ng/mL) 20.7 ± 1.3 19.1.± 1.6 0.442 16 ± 1 13.4 ± 0.8 0.048
###
Adiponectin (ng/mL) 87.7 ± 4.2 94.1 ± 2.8 0.267 84.7 ± 3.7 76.7 ± 4.6 0.178

La presencia de esteatosis hepática fue evaluada en 127 sujetos. Grupo 1, 51 niños; grupo 2, 76
adolescentes. Las diferencias estadísticamente significativas entre esteatosis en grupo1 y grupo 2
se encuentran marcadas como (##) (P<0.010) and (###) (P<0.001). Los resultados están
expresados en media ± DE. En negrita se expresan aquellas p estadísticamente significativas. GPx:
glutation oxidasa; GRd: glutatión reductasa; GSH: glutatión reducido; GSSG: glutatión oxidado; HB:
hemoglobina; SLR: receptor soluble de la leptina.

4.2.3 INDICE HOMA Y ESTEATOSIS EN RELACIÓN A LA EDAD Y EL SEXO

Como se observa en la figura 8, la asociación entre el Índice HOMA y esteatosis,

difiere en relación a la edad y el sexo. En el grupo 1, no hay diferencias entre los
niños y las niñas con y sin esteatosis en el HOMA, en el grupo 2 los valores son
superiores en ambos sexos pero sobretodo en varones con esteatosis.
El incremento del índice HOMA en adolescentes (Tabla5) es fundamentalmente
de los varones. En relación a la glucosa todos los sujetos de estudio tenían una
normoglicemia en ayunas (nivel de glucosa en ayunas inferior a 110mg/dL).

79
 RESULTADOS

Por tanto el incremento del índice HOMA es a expensas de un incremento de

insulina. Finalmente hay una correlación entre la edad y el HOMA (Coeficiente
de correlación de Pearson 0,511; p<0,001) pero no entre el índice HOMA y los
años de obesidad.

4.2.4 ANÁLISIS MULTIVARIANTE

El análisis multivariante mostró que el descenso en la actividad de GRd fue el

único factor independiente relacionado con la esteatosis en el Grupo 1 (odds
ratio [OR] 0,165; 95% IC: 0,03 –0,84; P=0,030); también, el análisis muestra
una tendencia a que el incremento de los niveles de resistina está relacionado
con la esteatosis con un valor de p=0,064 cercana a la significación (OR 3,9;
95% IC: 0,958–15,874). El resto de marcadores inflamatorios no mostraron
diferencias estadísticamente significativas.
En el grupo 2 los factores independientes relacionados con la esteatosis fueron
el incremento de GSSG (OR 6,8; 95% IC: 1,6–28,7; P=0.010) y del HOMA-IR (OR
1,9; 95% IC: 1,17–3,1; P=0,009). Al comparar la esteatosis entre el grupo de
niños y adolescentes, el único factor independiente encontrado fue los niveles
mayores de HOMA en el grupo 2 (OR 2,45; 95% IC: 1,4–4,3; P=0,002).

80
 RESULTADOS

Figura 8. HOMA-IR en relación al sexo y esteatosis. Los sujetos han sido clasificados en 4
grupos según el sexo y al grupo al que pertenecían (niños G1; adolescentes G2). Los puntos
negros representa el índice HOMA-RI en sujetos sin esteatosis hepática y los puntos blancos
representan el índice HOMA-RI en sujetos con esteatosis. La media del índice HOMA-RI está
representada como una línea horizontal en cada grupo. Media HOMA-RI en todos los pacientes
(_____ ), media HOMA-RI en pacientes con esteatosis (ooooo ), media HOMA-RI en pacientes sin
esteatosis (......... ). La media HOMA-RI en niños del grupo G2 presenta diferencias
estadísticamente significativas con el grupo de niños G1 (P=0.001) y las niñas del grupo
G1(P=0.040). La media del índice HOMA-RI en sujetos con esteatosis hepática difiere
significativamente de los sujetos sin esteatosis en los niños del grupo G2 (P=0.002) y niñas del
grupo G2 (P=0.025).

4.2.5 ESTUDIO DE TRANSAMINASAS.

[Link] CARACTERÍSTICAS GENERALES DE LOS PACIENTES Y AUMENTO

DE LA ALT
En la tabla 9, se recogen los resultados. Solamente 18 (12%) de los pacientes
presentaron aumento de la ALT con predominio en los niños 13 (72%) y 5
( 28%) niñas con un valor de p = 0,056. Las características de los pacientes con
aumento de ALT frente a los que tenían unas tasas normales, fueron: mayor
índice HOMA, mayor IMC-z-score, triglicéridos, AST, péptido C y esteatosis
hepática con menores tasas de HDL-C.

81
 RESULTADOS

Tabla 9. ANÁLISIS DE LAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS DE LOS PACIENTES Y

AUMENTO DE LA ALT

ALT Normal ALT Aumentada

( n = 128) ( n = 18)
Sexo: niño, n (%) 63 (49) 13 (72) 0,056
Edad de los pacientes (años) 10,8 ± 2 10,2 ± 2 0,352
DHEAS 130 ± 6 117 ± 11 0,361
IMC (Z score) 2,21 ± 0,3 2,41 ± 0,4 0,026
Peso al nacer g 3376,3 ± 594,1 3167,06 ± 517,7 0,170
Antecedentes fam. n (%) 78/122 (64) 7/16 (44) 0,119
Insulina (µU/mL) 14,44 ± 8,3 18,27 ± 13,6 0,304
Índice HOMA-RI 2,98 ± 1,7 3,86 ± 2,8 0,011
Colesterol total (mg/dL) 163,2 ± 33,3 159,56 ± 49,1 0.763
HDL-C (mg/dL) 51,01 ± 9,3 45,93 ± 11,2 0,050
Trigliceridos (mg/dL) 82,37 ± 42,5 117,61 ± 53,9 0,015
Apolipoproteina A (mg/dL) 132,82 ± 17,6 128,83 ± 29,4 0,604
GGT (UI/L) 14,61 ± 5,7 16,76 ± 5,6 0,149
AST (UI/L) 23,11 ± 5,5 39,61 ± 19,5 0,002
AST/ALT > 1 88/128 (69) 4/14 (22) 0,001
Peptido C (mg/dL) 2.69± 1.4 9.45± 22.4 0,001
Esteatosis n(%) 44/106 (41,5) 10/15 (67) 0,06

La alanino transferasa (ALT) fue evaluada en 146 pacientes. Grupo ALT normal con 128 sujetos y
Grupo ALT aumentada con 18 pacientes. Los resultados están expresados en media ± DE. En negrita
se expresan aquellas p estadísticamente significativas. DEHAS: Dehidroepiandrosterona sufato ;IMC:
índice de masa corporal (z score); HOMA-RI: índice de evaluación del modelo homeostático; HDL-C:
lipoproteína de alta densidad; GGT: gamma glutamiltransferasa; AST: aspartato aminotransferasa

El análisis multivariante mediante regresión logística mostró que de los

parámetros analizados solamente la AST y los triglicéridos fueron variables
independientes (Tabla 10).

82
 RESULTADOS

Tabla 10. ANÁLISIS MULTIVARIANTE DE LAS CARACTERÍSTICA CLÍNICAS DE LOS

PACIENTES Y ALT

I.C. 95% para EXP(B)

B E.T. Wald gl Sig. Exp(B)
Inferior Superior
AST 0,261 0,058 20,313 1 0,001 1,298 1,159 1,455
Trigliceridos 0,018 0,007 6,5 1 0,011 1,018 1,004 1,032
Constante -11,1 2,161 26,376 1 0,000 0

[Link] PARÁMETROS DE ESTRÉS OXIDATIVO Y AUMENTO DE ALT

En la Tabla 11 se analiza el comportamiento de los parámetros de estrés

oxidativo entre los pacientes con ALT normal y aumentada, evidenciando que
se encuentran más elevados en los pacientes que tienen la ALT aumentada, en
cambio la GPx y GRd esta disminuida.

Tabla 11. ESTRÉS OXIDATIVO Y ALT NORMAL Y AUMENTADA

ALT Normal ALT Aumentada P

( n = 128) ( n = 18)
GSSG(nmol/mg HB) 0,96 ± 0,5 1,17 ± 0,4 0,095
GSH(nmol/mg HB) 4,64 ± 1,2 5,58 ± 0,9 0,007
GSHT(nmol/mg HB) 5,61 ± 1,3 6,75 ± 1,2 0,003
GSSG/GSH 0,22 ± 0,1 0,20 ± 0,06 0,220
GPx (nmol/mg HB) 36,59 ± 10 34,97 ± 11,4 0,010
GRd (nmol/mg HB) 2,58 ± 0,8 2,33 ± 1 0,001
NITRITOS 8,7 ± 2,7 8,9 ± 2,9 0,837

La alanino transferasa (ALT) fue evaluada en 146 pacientes. Grupo ALT normal con 128
sujetos y Grupo ALT aumentada con 18 pacientes. Los resultados están expresados en
media ± DE. En negrita se expresan aquellas p estadísticamente significativas.

[Link] ESTUDIO DE ADIPOQUINAS, CITOQUINAS PROINFLAMATORIAS Y

ALT
En la mayoría de los parámetros analizados no hemos encontrado
diferencias estadísticamente significativas, solamente la resistina se

83
 RESULTADOS

encontraba más alta en el grupo de ALT aumentada y una tendencia a

mayor adiponectina en el mismo grupo con diferencias casi significativas
(Tabla 4)

Tabla 12. Citoquinas Y ADIPOQUINAS SEGÚN ALT NORMAL O AUMENTADA

ALT Normal ALT Aumentada P

( n = 128) ( n = 18)
Leptina (ng/mL) 25,39± 13,5 28,40 ± 12,4 0,389
SLR (ng/mL) 16 ± 5,6 20,1 ± 6,7 0,023
Resistina (pg/mL) 50,02 ± 60 79,37 ± 60 0,037
Adiponectina (ng/mL) 82,87 ± 24,3 92,24 ± 20,2 0,082
TNFα receptor (pg/mL) 0,52 ± 0,05 0,55 ± 0,09 0,835
TNFα soluble (pg/mL) 1,86 ± 0,6 1,97 ± 0,51 0,492
TNFα libre (pg/mL) 1,33 ± 0,73 1,41 ± 0,62 0,688
MCP1 (pg/mL) 5,83 ± 0,68 6 ± 0,62 0,336
IL6 ((pG/mL) 1,6 ± 1,1 1,9 ± 1,2 0,406

La alanino transferasa (ALT) fue evaluada en 146 pacientes. Grupo ALT normal con 128 sujetos y
Grupo ALT aumentada con 18 pacientes. Los resultados están expresados en media ± DE. En negrita se
expresan aquellas p estadísticamente significativas.

[Link] ESTUDIO DE NIÑOS Y ADOLESCENTES OBESOS SIN Y CON

AUMENTO DE TRANSAMINASAS

En la tabla 13 Y 14 se muestran los resultados del comportamiento de las

variables bioquímicas y del estrés oxidativo y citoquinas respectivamente. En el
grupo de niños los factores relacionados con aumento de ALT fue menor tasa de
glucosa y apolipoproteina A y HDL-C, así como aumento de la AST. En los
adolescentes el aumento de ALT se relaciona con la esteatosis mayor IMC
(z score), insulina HOMA, triglicéridos, AST, GGT y péptido C. Al valorar las
diferencia entre los niños con ALT elevadas del grupo 1 y 2, en el grupo 1 los
niños con esteatosis eran más obesos pero en el grupo de adolescentes tenían
mayores tasa de glucosa, insulina, HOMA, GGT y péptido C (Tabla 13)

84
 RESULTADOS

Tabla 13. RESULTADOS DE LAS VARIABLES BIOQUÍMICAS Y SEXO EN LOS NIÑOS

Y ADOLESCENTES OBESOS SEGÚN ALT NORMAL O AUMENTADA.

G1 G2

Variables ALT ALT ALT P ALT ALT p

normal aumentada normal aumentada
Total n (%) 48 (86) 8 (14) 80(89) 10 (11)

Hombre n (%) 23 (79,3) 6 (20,7) 0,15 40 (85,1) 7 (14,9) 0,198

Mujer n (%) 25 (92,6) 2 (7,4) 40 (93) 3 (7)
BMI (Z score) 2,43± 0,3 2,49± 0,7 0,809 2,09 ± 0,2 2,35 ± 0,2** 0,003
Peso al nacimiento (g) 3370±665 3107±443 0,313 3372 ± 564 3209 ± 629 0,367
Glucosa (mg/dL) 82,4 ± 8 76,1 ± 7 0,05 84,3 ± 8 87,2 ± 8** 0,301
Insulina (µU/mL) 11,6±6 10,93±8 0,786 16 ± 9 25 ± 14** 0,05
HOMA-IR 2,4±1,3 2,2±1,8 0,777 3,3 ± 1,9 5,3 ± 2,2** 0,05
Cholesterol Total (mg/dL) 173,1± 29,8 165,4 ± 61,8 0,748 157,4 ± 35 154,4 ± 39 0,829
HDL-C (mg/dL) 52,4± 9,6 44,3 ± 9,9 0,05 51 ± 10 47,1 ± 13 0,441
Trigliceridos (mg/dL) 88,4± 52 111,13 ± 55,2 0,263 79 ± 35 123 ± 55 0,05
Apolipoprotein A (mg/dL) 138,5 ± 16 114,6 ± 16 0,002 130 ± 18 140,5 ± 28 0,32
Apolipoproteina B ( mg/dL) 70,2 ± 18 63,2 ± 23 0,496 68 ± 15 65,2 ± 20 0,742
GGT (UI/L) 14,9 ± 6 14,4 ± 3 0,815 14,7 ± 5 19 ± 6* 0,03
AST (UI/L) 25,3 ± 5,1 40,6 ± 10 0,004 24 ± 5,04 39 ± 24 0,05
Peptide C (mg/dL) 2,1 ± 0,8 2,06 ± 0,6 0,893 3,1 ± 1 15,8 ± 3,5** 0,05
Steatosis n(%) 16/42 (38) 4/7 (57) Ns 28/64 (44) 6/8 (75)* 0,09

Los parámetros bioquímicos fueron evaluados en 56 sujetos del grupo 1 (niños), de los cuales
48 presentaban ALT normal y 8 aumentada. En el grupo 2 (adolescentes) se evaluó a 90 sujetos,
de los cuales 10 presentaban cifras normales de ALT y 10 aumentadas. Los resultados están
expresados en media ± DE. En negrita se expresan aquellas p estadísticamente significativas.

85
 RESULTADOS

Tabla 14. RESULTADOS DE LOS MARCADORES DE ESTRÉS OXIDATIVO Y

ADIPOQUINAS EN LOS NIÑOS Y ADOLESCENTES OBESOS SEGÚN ALT NORMAL O
AUMENTADA

G1 G2
ALT normal ALT aumentada P ALT normal ALT aumentada P
48 (86) 8 (14) 80(89) 10 (11)
GSSG (nmol/mg HB) 0,95 ± 0,4 1,1 ± 0,42 0,028 0,96 ± 0,6 1,3 ± 0,4 0,248
GSH (nmol/mg HB) 4,53 ± 1,3 5,53 ± 0,84 0,025 4,72 ± 1,1 5,63 ± 1 0,045
GSHT (nmol/mg HB) 5,5 ± 1,4 6,64 ± 1,2 0,050 5,6 ± 1,3 6,8 ± 1,3 0,022
GSSG/GSH 0,22 ± 0,15 0,19 ± 0,05 0,998 0,22 ± 0,1 0,22 ± 0,06 0,129
GPx (nmol/mg HB) 39,1 ± 9,8 39,01 ± 10 0,976 35 ± 10 31,4 ± 12 0,355
GRd (nmol/mg HB) 2,69 ± 0,7 2,4 ± 0,8 0,373 2,5 ± 0,8 2,27 ± 1,2 0,581
Resistin (ng/mL) 47,8 ± 4 88,4 ± 8 0,034 51,5 ± 5 71,3 ± 8 0,410
Leptin (ng/mL) 22,2 ±12 24,4 ± 12 0,647 27,3 ± 1,3 32 ± 2,8 0,340
SLR (ng/mL) 15,3 ± 5,3 12,4.± 10 0,630 22,1 ± 1,5 21,1 ± 2### 0,887
Adiponectin (ng/mL) 86,8 ± 20 101,6 ± 3,1 0,001 80,5 ± 2,5 83,8 ± 2,5 ## 0,713

Se evaluó el estrés oxidativo y adipoquinas en 56 sujetos del grupo 1 (niños), de los cuales 48 presentaban
ALT normal y 8 aumentada. En el grupo 2 (adolescentes) se evaluó a 90 sujetos, de los cuales 10 presentaban
cifras normales de ALT y 10 aumentadas. Los resultados están expresados en media ± DE. En negrita se
expresan aquellas p estadísticamente significativas.

Al valorar el estrés oxidativo y las citoquinas (Tabla 14), en el grupo 1 el

aumento de ALT se relacionó con mayores tasas de GSSG, GSH, GSHT, resistina y
adiponectina. En los adolescentes (grupo 2) solamente el aumento de GSHT
resultó mas alto que en los que no tenían aumento de transaminasas. Al
comparar el grupo 1 y 2 con aumento de transaminasas, solamente se
encontraron diferencias estadísticamente significativas en el SLR, los
adolescentes (grupo 2) tenían mas receptor y menos adiponectina.

Análisis multivariante del aumento de ALT en niños y adolescentes

En los niños no entra ningún parámetro en la ecuación. En los adolescentes la
mayor tasa de triglicéridos fue el único factor independiente relacionado con el
aumento de ALT ô = 1,04; CI 95% (1,01;1,08) p=0.002. El HOMA más elevado
mostró diferencias casi significativa ô = 1,33; CI 95% (0,96;1,83) p = 0,09. El
resto de parámetros de estrés oxidativo y citoquinas no fueron significativos.

86
 DISCUSION

5 DISCUSION

87
 DISCUSION

88
 DISCUSION

Pocos estudios han analizado los factores asociados a la enfermedad de hígado

graso no alcohólico en sujetos obesos, comparando la edad prepuberal con el
período puberal. El objetivo de nuestro estudio fue analizar, en una cohorte de
niños y adolescentes obesos, la asociación de la esteatosis hepática con una
serie de parámetros que incluyen los datos bioquímicos, citoquinas
proinflamatorias, adipoquinas y marcadores de estrés oxidativo sistémico. Los
resultados obtenidos destacan diferencias en los factores asociados a la
esteatosis hepática en niños y adolescentes obesos.

Aunque los pacientes fueron incluidos consecutivamente en nuestro cohorte

por la presencia de un IMC por encima del percentil 95, el grupo de niños
fueron más obesos que los adolescentes (Tabla 5). Estas diferencias en el grado
de obesidad, junto con variaciones en otros parámetros (Tablas 5 y 6 ), son
probablemente una consecuencia de los cambios fisiológicos que se producen
durante la pubertad. Se ha descrito en la literatura la presencia de niveles
elevados de leptina durante el periodo de la pubertad, ya que la concentración
de leptina está implicada en la maduración sexual, y de forma más evidente en
adolescentes obesos[55, 56], en correlación negativa con su receptor
soluble.[50, 168, 169]
La prevalencia esteatosis hepática encontrada en nuestra cohorte está de
acuerdo con los resultados publicados anteriormente[170-173] (Tabla 5), en
artículos más recientes se demuestran prevalencias ligeramente
inferiores[117]. Tampoco hemos encontrados diferente prevalencia entre los
sexos. Aunque muchos estudios han informado de un predominio masculino
entre los niños y adolescentes obesos que presentaban esteatosis hepática[170,
171], otros no han observado tales diferencias[174]. Estas discrepancias están
probablemente relacionados con las diferencias ambientales y genéticas entre
las cohortes.
Los factores asociados en este estudio con esteatosis hepática en adolescentes
obesos se han descrito como factores determinantes para la obesidad

89
 DISCUSION

adulta[99, 120, 144, 175, 176]; e incluyen alteraciones de lípidos, IMC, HOMA -
IR, la actividad de aminotransferasa, los niveles de leptina, y estrés oxidativo
(Tabla 7 y 8). La esteatosis hepática en niños obesos se asocia únicamente con
los niveles de estrés oxidativo y de resistina. Por otra parte, aunque los niveles
de aminotransferasa fueron normales en la mayor parte de nuestra muestra, el
aumento de ALT y AST en adolescentes obesos con esteatosis (Tabla 7) sí
constituye una manifestación temprana de potencial enfermedad hepática
grave.
El papel del HOMA-IR en el desarrollo de esteatosis merece una atención
especial (Tabla 7, Fig. 8), porque la resistencia a la insulina se cree que es un
proceso clave en el origen y la progresión de EHGNA durante la obesidad[175-
177]. Sin embargo, en nuestro estudio el HOMA- IR se asoció con la esteatosis
hepática sólo en el grupo de adolescentes. Se puede argumentar que los
pacientes sin esteatosis pero con un HOMA-IR elevado podrían presentar una
esteatosis hepática leve, que no es detectable por ecografía. También
observamos varios pacientes con esteatosis pero con bajo HOMA-IR (Fig. 8), sin
embargo, esta situación es rara en pacientes adultos con obesidad mórbida.
Otra consideración es que los sujetos con esteatosis hepática pueden tener
resistencia a la insulina de bajo grado desarrollada en los tejidos del hígado y
tejido adiposo sin ninguna repercusión en el HOMA -IR sistémico.
En modelos animales, se ha comunicado resistencia local pero no sistémica a la
insulina[178]. También es posible que en la esteatosis hepática desarrollada
por el grupo de niños no juegue ningún papel significativo la resistencia a la
insulina. Sin embargo, está claro que la relación entre la resistencia a la insulina
y la esteatosis hepática en niños obesos no es lo mismo que en los adultos. Un
estudio anterior (relativo a una cohorte italiana ) tiene comunicado una
correlación entre la esteatosis hepática y HOMA-IR entre los sujetos
prepúberes[173]. Esta cohorte presenta una media de valores de HOMA-IR
(3,16) y marcadas diferencias en relación con la esteatosis; estos resultados
difieren de los encontrados en el presente estudio. En nuestra opinión, debido a

90
 DISCUSION

la naturaleza transversal de ambos estudios, la causalidad no puede ser

determinada de forma inequívoca.
La media de los valores de HOMA-IR en otras cohortes de niños prepuberales
obesos están de acuerdo con nuestros resultados, es decir, 1,8 en una cohorte
española[179] y 2,4 en una inglesa[180]. Además, este último artículo informó
de un aumento del HOMA-IR durante la progresión de la pubertad,
especialmente en los niños.
En nuestro estudio, el estrés oxidativo resultó ser un proceso relevante en el
desarrollo de esteatosis hepática en niños y adolescentes (Tabla 8). La
disminución de la actividad específica de GPx y GRd observadas en pacientes
con esteatosis podrían explicarse como consecuencia de daño oxidativo en la
síntesis de estas enzimas. De hecho, estudios previos han reportado una
disminución en actividad de radicales libres de eritrocitos de enzimas de
barrido en situaciones de estrés oxidativo elevado[181, 182]. La
sobreproducción de radicales libres se cree que es un factor relevante
relacionado con el origen y la posterior progresión de la enfermedad de hígado
graso[183]. Las principales fuentes del estrés oxidativo celular son el retículo
endoplasmático y la mitocondria[184, 185]. La disfunción mitocondrial en la
obesidad está estrechamente relacionado con dietas hipercalóricas[186], y un
artículo sugirió que esta disfunción se produce incluso antes de la aparición de
resistencia a la insulina durante el desarrollo del hígado graso no
alcohólico[187]. De acuerdo con estos hallazgos, los antioxidantes han sido
considerados como posibles opciones en el tratamiento del hígado graso no
alcohólico, pero los resultados hasta la fecha no han sido muy
satisfactorios[188, 189].
Otro hallazgo en el presente estudio que ilustra la particularidad de los niños,
se registró en el aumento de los niveles de resistina en pacientes con esteatosis
(Tabla 7). La resistina se caracterizó inicialmente en roedores como una
adipoquina relacionada con el desarrollo de resistencia a la insulina (de ahí su
nombre)[190]; sin embargo, en los seres humanos, es también expresada por

91
 DISCUSION

las células inmunitarias que se infiltra en el tejido adiposo, el hígado y otros

tejidos[191]. Aunque la resistina en humanos ha sido relacionada con los
procesos de estrés oxidativo e inflamación[192, 193], nosotros no encontramos
correlacion con los marcadores proinflamatorios o de estrés oxidativo. El papel
de la resistina en la fisiopatología en humanos está poco clara; de hecho, el
receptor de la resistina celular aún no ha sido clonado.
Todos los estudios están sujetos a un cierto grado de sesgo, y el cuidado debe
por tanto, estar orientado a ser especialmente cuidadoso con las conclusiones
extraídas. En nuestro caso, el sesgo de selección fue controlado por la inclusión
consecutiva de los sujetos en la cohorte y al excluir a los pacientes con
tratamientos farmacológicos o con patologías, excepto la obesidad, que podría
propiciar esteatosis hepática. Los sujetos fueron clasificados como niños o
adolescentes utilizando 2 métodos: etapas de Tanner y los niveles de DHEAS;
por consiguiente, podemos afirmar que prácticamente todos los incluidos en el
grupo 1 son niños en situación prepuberal.
Una posible sesgo de clasificación es el método usado para diagnosticar hígado
graso. En la actualidad, los métodos no invasivos, tales como la tomografía
computarizada, resonancia magnética o ecografía, se utilizan para evaluar los
cambios esteatósicos en el hígado[194], pero ninguno de estos métodos puede
realmente sustituir la biopsia de hígado, por lo que sigue siendo el criterio
estándar. Consideraciones éticas impiden el diagnóstico de hígado graso no
alcohólico mediante biopsia hepática, especialmente en pacientes con
transaminasas normales. Mediante ultrasonido no es posible detectar
esteatosis si la cantidad de grasa en el hígado es menor del 30%[195]. De
hecho, el concepto de hígado graso que se utiliza en nuestro estudio debe
entenderse como ''esteatosis detectada por ultrasonido''. Las técnicas actuales
de resonancia magnética y elastoultrasonografía ofrecen la posibilidad de
evaluar de forma cuantitativa la presencia de infiltración grasa hepática, pero
son técnicas, a día de hoy, no validadas en niños, a la espera de más estudios
concluyentes[160, 164, 165]

92
 DISCUSION

La naturaleza del método utilizado para evaluar resistencia a la insulina

también podría influir en las conclusiones extraídas. El HOMA-IR es un método
sustituto que no siempre puede reemplazar los enfoques basados en la prueba
de tolerancia a la glucosa. Sin embargo, se ha correlacionado satisfactoriamente
con la prueba de tolerancia a la glucosa en niños y adolescentes con glucemia
normal[196].
La EHGNA es muy común en adultos, hasta el punto que puede ser la
enfermedad crónica del hígado más común en Estados Unidos[159]. En este
país la prevalencia de EHGNA es del 20% (rango del 14 al 39%) y la de EHNA
del 2% (rango del 1,2 al 4,8%). La prevalencia de EHGNA se incrementa a un
74% en personas obesas y hasta un 90% en personas con obesidad mórbida.
Otras asociaciones comunes son la diabetes mellitus tipo 2 y la hiperlipémia.
Los datos actuales señalan que niños con edades comprendidas entre 5 y 15
años pueden verse afectados, y que los niños desarrollan EHNA con más
frecuencia que las niñas[197, 198] (a diferencia de los adultos donde las
mujeres padecen la enfermedad con más frecuencia, aunque estudios más
recientes señalan que los hombres pueden afectarse en la misma
proporción[156, 199]).
Los estudios de laboratorio en el EHNA muestran una elevación moderada (2-4
veces por encima de lo normal) de los niveles séricos de transaminasas en el
70-100% de los casos y es frecuente la hipertrigliceridemia.
En la cohorte de nuestro estudio la prevalencia de aumento de ALT fue del 12%
con una tendencia (p = 0,056) casi significativa a ser mas prevalente en niños
(73%) frente a 37% en niñas.
La adiposidad central, la hiperleptinemia y la hiperinsulinemia son los
principales factores que determinan la asociación entre sobrepeso y elevación
de la ALT sérica[200] pudiendo jugar la leptina un papel crucial en la
fibrogénesis del EHNA. El EHNA pediátrico es una seria complicación de la
obesidad infantil, habiéndose documentado casos de cirrosis.

93
 DISCUSION

Se considera que la EHNA es la manifestación hepática del SM en adultos y

puede estar asociado también con EHNA en niños. Aunque se ha comunicado
que la RI está presente virtualmente en todos los casos de EHNA (98%)[201,
202], incluso en niños obesos antes de la pubertad y adolescentes. Nuestros
resultados concuerdan con los descritos cuando se analizan los factores en
todos los niños mostrando relación entre el aumento de la ALT y el
metabolismo de la glucosa alterado, también se encuentran mayores tasas de
leptina, adiponeptina y resistina pero cuando se analizan por separado los
niños prepuberes y los adolescentes, solamente presentan RI este último grupo.
Por lo que en los pequeños el metabolismo de la glucosa no está alterado. Hay
alteraciones comunes por incremento de estrés oxidativo en ambos y el grupo 1
presenta también mayores niveles de resistina y adiponectina.
En conclusión los factores implicados en el aumento de ALT en niños
prepuberes es distinto a los adolescentes.
En nuestra opinión, las limitaciones antes mencionadas no son tan importantes
como para invalidar la principal conclusión de nuestro estudio, a saber, que los
factores asociados con hígado graso no alcohólico difieren entre niños obesos y
adolescentes. Por otra parte, nuestros resultados proporcionan nuevas
perspectivas para la investigación futura, tales como el papel preciso de la
resistina y el HOMA-IR en los sujetos obesos prepúberes. Por último, la
significativa relevancia del estrés oxidativo en la esteatosis sugiere la posible
participación de factores hereditarios implicados en la producción y la
compactación de los radicales libres.

94
 CONCLUSIONES

6 CONCLUSIONES

95
 CONCLUSIONES

96
 CONCLUSIONES

El análisis y discusión crítica del conjunto de observaciones y resultados

experimentales contenidos en esta memoria nos ha permitido formular las
siguientes conclusiones

• En el estudio de hígado graso no alcohólico (EHGNA), las

conclusiones son:
1. Los paciente obesos en edad pediátrica tienen una prevalencia de
esteatosis del 45%, parecida en niños y adolescentes.
2. Los factores asociados con esteatosis hepática en adolescentes obesos
están muy relacionados con los descritos en la obesidad de los adultos e
incluyen aumento de triglicéridos, mayor IMC y alteraciones en el
metabolismo de la glucosa, puesto de manifiesto por mayores tasas de
insulina, índice HOMA y péptido C. Muestran también mayores tasa de
transaminasas, de los niveles de leptina, y estrés oxidativo. En cambio
existe una disminución en el receptor soluble de la leptina,
evidenciando ya cierto grado de resistencia a la leptina.
3. Los factores asociados con la esteatosis hepática en niños obesos
prepuberes, son distintos a los obesos adolescentes, ya que se asocia
únicamente con los niveles de estrés oxidativo y de resistina.
4. La resistencia a la insulina medida por el índice HOMA se comporta
igual en niños y en niñas prepuberes con y sin esteatosis. Igual sucede
con el grupo de adolescentes pero, aunque no aparecen diferencias
entre sexo, sí que influye en los adolescentes con esteatosis y de forma
más evidente en los niños.

• En el estudio de los factores relacionados con el aumento de ALT:

5. El 12% de la población obesa de nuestra cohorte tiene aumento de

transaminasa con una tendencia a ser más frecuente en niños que en
niñas y con mayor IMC.

97
 CONCLUSIONES

6. Los factores implicados en el aumento de transaminasas en la población

de estudio global se relacionan con alteraciones en el metabolismo de la
glucosa (mayor Índice HOMA, péptido C, triglicéridos y disminución de
HDL-C), mayor estrés oxidativo y mayores tasas de RSL y resistina.
7. En el grupo de niños prepuberes se relaciona con incremento de estrés
oxidativo, resistina y adiponectina en cambio en los adolescentes las
diferencias se encuentran en las alteraciones del metabolismo de la
glucosa y estrés oxidativo.

CONCLUSIÓN FINAL

Aunque la prevalencia de esteatosis y de aumento de ALT en niños y

adolescentes obesos es parecida, los factores asociados a su desarrollo son
distintos. Predominando en adolescentes las alteraciones del metabolismo de la
glucosa y en ambos aumento del estrés oxidativo

PERSPECTIVAS

Nuestros resultados proporcionan nuevas perspectivas para la investigación

futura ya que los mecanismos por los que se desarrolla la esteatosis en los
niños prepuberes no están claros y son muy distintos a los adolescentes y a los
descritos en adultos. El papel de la resistina y la medida de la resistencia a la
insulina por otros métodos distintos al HOMA deberían ser clarificados.

Por último, la significativa relevancia del estrés oxidativo en los resultados en

ambos grupos sugiere la posible participación de factores hereditarios, entre
otros.

98
 ARTICULOS Y COMUNICACIONES

7 ARTÍCULOS Y COMUNICACIONES

99
 ARTICULOS Y COMUNICACIONES

100
 ARTICULOS Y COMUNICACIONES

7.1 ARTÍCULOS

• Ruiz-Extremera Á, Carazo Á, Salmerón Á, León J, Casado J, Goicoechea A,

Fernandez JM, Garofano M, Ocete E, Martín AB, Pavón E, Salmerón J.
Factors associated with hepatic steatosis in obese children and
adolescents. J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2011;53(2):196-201. Doi:
10.1097/MPG.0b013e3182185ac4. PubMed PMID: 21788762.

7.2 COMUNICACIONES

• A Ruíz-Extremera, A Goicoechea, A Salmeróm, J León, A Carazo, J

Casado, JM Fernandez García, M Garofano, E Ocete, A Martín, P Muñoz
de Rueda, J Salmerón. Marcadores plasmáticos de estrés oxidativo (EO)
y citoquinas en la enfermedad del hígado graso no alcohólica (EHGNA)
en la obesidad infatil. XXXIII Congreso Nacional Anual de la Asociación
Española para el Estudio del Hígado. 20-22 Febrero de 2008. Madrid.
Gastroenterologia y Hepatologia. Volumen 31; 131, Extraordinario 1,
Febrero 2008.

• Ruiz Extremera A, Carazo A, Salmerón Ruiz A, Casado J, Leon J,

Fernández JM, Garófano M, Ocete E, Gila A, Sanjuán L, Salmerón J. La
esteatosis hepática en niños obesos prepúberes no está relacionada con
la resistencia a la insulina (RI). XXXIV Congreso de la Asociación
Española para el estudio del Hígado. Póster. Madrid. 25-27 Febrero
2009.

• A. Ruiz Extremera, A. Carazo Gallego, A. Salmerón Ruiz, J. Casado, J.

León, J.M. Fernández, M. Garofano, E. Ocete, A. Gila, L. Sanjuán, J.
Salmerón. The liver steatosis in pre-puberal obese children is not
related to the resistance to insulin. 44th Annual Meeting of the European
Association for the Study of the liver. Copenhagen, Denmark. Póster.
April 22-26, 2009.

101
 ARTICULOS Y COMUNICACIONES

• A Salmerón Ruiz, A Ruiz Extremera, A Carazo, M Garófano, J Salmerón.

Marcadores plasmáticos de estrés oxidativo (EO) y citoquinas en la
enfermedad de hígado graso no alcohólico (EHGNA) diagnosticada por
ecografía en la obesidad infantil. 31 congreso de la SERAM. Granada.
Junio de 2012

102
 BIBLIOGRAFÍA

8 BIBLIOGRAFÍA

103
 BIBLIOGRAFIA

104
 BIBLIOGRAFÍA

1. Ogden CL, Yanovski SZ, Carroll MD, Flegal KM: The epidemiology of obesity.
Gastroenterology 2007, 132(6):2087-2102.
2. Martos-Moreno GA, Argente J: [Paediatric obesities: from childhood to
adolescence]. An Pediatr (Barc) 2011, 75(1):63 e61-23.
3. Wells JC, Fewtrell MS: Measuring body composition. Archives of disease in
childhood 2006, 91(7):612-617.
4. Speiser PW, Rudolf MC, Anhalt H, Camacho-Hubner C, Chiarelli F, Eliakim A,
Freemark M, Gruters A, Hershkovitz E, Iughetti L et al: Childhood obesity. The
Journal of clinical endocrinology and metabolism 2005, 90(3):1871-1887.
5. Fiore H, Travis S, Whalen A, Auinger P, Ryan S: Potentially protective factors
associated with healthful body mass index in adolescents with obese and
nonobese parents: a secondary data analysis of the third national health
and nutrition examination survey, 1988-1994. Journal of the American
Dietetic Association 2006, 106(1):55-64; quiz 76-59.
6. Flegal KM, Ogden CL, Wei R, Kuczmarski RL, Johnson CL: Prevalence of
overweight in US children: comparison of US growth charts from the
Centers for Disease Control and Prevention with other reference values
for body mass index. The American journal of clinical nutrition 2001,
73(6):1086-1093.
7. Cole TJ, Bellizzi MC, Flegal KM, Dietz WH: Establishing a standard definition
for child overweight and obesity worldwide: international survey. BMJ
2000, 320(7244):1240-1243.
8. Freedman DS, Wang J, Maynard LM, Thornton JC, Mei Z, Pierson RN, Dietz WH,
Horlick M: Relation of BMI to fat and fat-free mass among children and
adolescents. Int J Obes (Lond) 2005, 29(1):1-8.
9. Reilly JJ: Descriptive epidemiology and health consequences of childhood
obesity. Best practice & research Clinical endocrinology & metabolism 2005,
19(3):327-341.
10. de Onis M, Blossner M: The World Health Organization Global Database on
Child Growth and Malnutrition: methodology and applications.
International journal of epidemiology 2003, 32(4):518-526.
11. Freedman DS, Khan LK, Serdula MK, Dietz WH, Srinivasan SR, Berenson GS:
Inter-relationships among childhood BMI, childhood height, and adult
obesity: the Bogalusa Heart Study. International journal of obesity and
related metabolic disorders : journal of the International Association for the
Study of Obesity 2004, 28(1):10-16.
12. Martos-Moreno GA, Barrios V, Martinez G, Hawkins F, Argente J: Effect of
weight loss on high-molecular weight adiponectin in obese children.
Obesity (Silver Spring) 2010, 18(12):2288-2294.
13. Obesity prevalence among low-income, preschool-aged children - United
States, 1998-2008. MMWR Morbidity and mortality weekly report 2009,
58(28):769-773.

105
 BIBLIOGRAFIA

14. Ogden CL, Carroll MD, Kit BK, Flegal KM: Prevalence of obesity and trends in
body mass index among US children and adolescents, 1999-2010. JAMA :
the journal of the American Medical Association 2012, 307(5):483-490.
15. Serra Majem L, Ribas Barba L, Aranceta Bartrina J, Perez Rodrigo C, Saavedra
Santana P, Pena Quintana L: [Childhood and adolescent obesity in Spain.
Results of the enKid study (1998-2000)]. Medicina clinica 2003,
121(19):725-732.
16. Soriguer F, Garcia-Garcia E, Santiago P, Millon MC: [Childhood obesity in East
Andalusia, Spain]. Medicina clinica 2005, 125(19):756-757.
17. Moreno LA, Mesana MI, Fleta J, Ruiz JR, Gonzalez-Gross M, Sarria A, Marcos A,
Bueno M: Overweight, obesity and body fat composition in spanish
adolescents. The AVENA Study. Annals of nutrition & metabolism 2005,
49(2):71-76.
18. Butte NF, Ellis KJ: Comment on "Obesity and the environment: where do
we go from here?". Science 2003, 301(5633):598; author reply 598.
19. Samani-Radia D, McCarthy HD: Comparison of children's body fatness
between two contrasting income groups: contribution of height
difference. Int J Obes (Lond) 2011, 35(1):128-133.
20. Froberg A: "Couch-potatoeism" and childhood obesity: The inverse
causality hypothesis. Preventive medicine 2015, 73:53-54.
21. Moreno LA, Rodriguez G: Dietary risk factors for development of childhood
obesity. Current opinion in clinical nutrition and metabolic care 2007,
10(3):336-341.
22. Huh SY, Rifas-Shiman SL, Taveras EM, Oken E, Gillman MW: Timing of solid
food introduction and risk of obesity in preschool-aged children.
Pediatrics 2011, 127(3):e544-551.
23. McGavock JM, Torrance BD, McGuire KA, Wozny PD, Lewanczuk RZ:
Cardiorespiratory fitness and the risk of overweight in youth: the Healthy
Hearts Longitudinal Study of Cardiometabolic Health. Obesity (Silver
Spring) 2009, 17(9):1802-1807.
24. Carter PJ, Taylor BJ, Williams SM, Taylor RW: Longitudinal analysis of sleep
in relation to BMI and body fat in children: the FLAME study. BMJ 2011,
342:d2712.
25. Svensson V, Jacobsson JA, Fredriksson R, Danielsson P, Sobko T, Schioth HB,
Marcus C: Associations between severity of obesity in childhood and
adolescence, obesity onset and parental BMI: a longitudinal cohort study.
Int J Obes (Lond) 2011, 35(1):46-52.
26. Pare G: Genome-wide association studies--data generation, storage,
interpretation, and bioinformatics. Journal of cardiovascular translational
research 2010, 3(3):183-188.
27. Rao KR, Lal N, Giridharan NV: Genetic & epigenetic approach to human
obesity. The Indian journal of medical research 2014, 140(5):589-603.

106
 BIBLIOGRAFÍA

28. Guo SS, Wu W, Chumlea WC, Roche AF: Predicting overweight and obesity in
adulthood from body mass index values in childhood and adolescence.
The American journal of clinical nutrition 2002, 76(3):653-658.
29. Reilly JJ, Methven E, McDowell ZC, Hacking B, Alexander D, Stewart L, Kelnar CJ:
Health consequences of obesity. Archives of disease in childhood 2003,
88(9):748-752.
30. Ten S, Maclaren N: Insulin resistance syndrome in children. The Journal of
clinical endocrinology and metabolism 2004, 89(6):2526-2539.
31. Reaven GM: Banting Lecture 1988. Role of insulin resistance in human
disease. 1988. Nutrition 1997, 13(1):65; discussion 64, 66.
32. Moya M: [Comorbid states in paediatric and adolescent obesity. A
simplified approach to their diagnosis: the metabolic syndrome]. An
Pediatr (Barc) 2011, 74(5):289-292.
33. Cook S, Weitzman M, Auinger P, Nguyen M, Dietz WH: Prevalence of a
metabolic syndrome phenotype in adolescents: findings from the third
National Health and Nutrition Examination Survey, 1988-1994. Archives of
pediatrics & adolescent medicine 2003, 157(8):821-827.
34. Alberti KG, Zimmet P, Shaw J: The metabolic syndrome--a new worldwide
definition. Lancet 2005, 366(9491):1059-1062.
35. Zimmet P, Alberti G, Kaufman F, Tajima N, Silink M, Arslanian S, Wong G,
Bennett P, Shaw J, Caprio S: The metabolic syndrome in children and
adolescents. Lancet 2007, 369(9579):2059-2061.
36. Zimmet P, Alberti KG, Kaufman F, Tajima N, Silink M, Arslanian S, Wong G,
Bennett P, Shaw J, Caprio S: The metabolic syndrome in children and
adolescents - an IDF consensus report. Pediatric diabetes 2007, 8(5):299-
306.
37. Haffner SM, Kennedy E, Gonzalez C, Stern MP, Miettinen H: A prospective
analysis of the HOMA model. The Mexico City Diabetes Study. Diabetes care
1996, 19(10):1138-1141.
38. Ascaso JF, Romero P, Real JT, Priego A, Valdecabres C, Carmena R: [Insulin
resistance quantification by fasting insulin plasma values and HOMA
index in a non-diabetic population]. Medicina clinica 2001, 117(14):530-
533.
39. Tresaco B, Bueno G, Pineda I, Moreno LA, Garagorri JM, Bueno M: Homeostatic
model assessment (HOMA) index cut-off values to identify the metabolic
syndrome in children. Journal of physiology and biochemistry 2005,
61(2):381-388.
40. Tapia Ceballos L, Lopez Siguero JP, Jurado Ortiz A: [Prevalence of metabolic
syndrome and its components in obese children and adolescents]. An
Pediatr (Barc) 2007, 67(4):352-361.
41. Sinha R, Fisch G, Teague B, Tamborlane WV, Banyas B, Allen K, Savoye M,
Rieger V, Taksali S, Barbetta G et al: Prevalence of impaired glucose

107
 BIBLIOGRAFIA

tolerance among children and adolescents with marked obesity. The New
England journal of medicine 2002, 346(11):802-810.
42. Fernandez-Real JM, Ricart W: Insulin resistance and chronic cardiovascular
inflammatory syndrome. Endocrine reviews 2003, 24(3):278-301.
43. Rosen ED, Spiegelman BM: Adipocytes as regulators of energy balance and
glucose homeostasis. Nature 2006, 444(7121):847-853.
44. Palomer X, Perez A, Blanco-Vaca F: [Adiponectin: a new link between
obesity, insulin resistance and cardiovascular disease]. Medicina clinica
2005, 124(10):388-395.
45. Beltowski J: Adiponectin and resistin--new hormones of white adipose
tissue. Medical science monitor : international medical journal of experimental
and clinical research 2003, 9(2):RA55-61.
46. Muller S, Martin S, Koenig W, Hanifi-Moghaddam P, Rathmann W, Haastert B,
Giani G, Illig T, Thorand B, Kolb H: Impaired glucose tolerance is associated
with increased serum concentrations of interleukin 6 and co-regulated
acute-phase proteins but not TNF-alpha or its receptors. Diabetologia
2002, 45(6):805-812.
47. Aljada A, Friedman J, Ghanim H, Mohanty P, Hofmeyer D, Chaudhuri A,
Dandona P: Glucose ingestion induces an increase in intranuclear nuclear
factor kappaB, a fall in cellular inhibitor kappaB, and an increase in
tumor necrosis factor alpha messenger RNA by mononuclear cells in
healthy human subjects. Metabolism: clinical and experimental 2006,
55(9):1177-1185.
48. Tripathy D, Mohanty P, Dhindsa S, Syed T, Ghanim H, Aljada A, Dandona P:
Elevation of free fatty acids induces inflammation and impairs vascular
reactivity in healthy subjects. Diabetes 2003, 52(12):2882-2887.
49. Shklyaev S, Aslanidi G, Tennant M, Prima V, Kohlbrenner E, Kroutov V,
Campbell-Thompson M, Crawford J, Shek EW, Scarpace PJ et al: Sustained
peripheral expression of transgene adiponectin offsets the development
of diet-induced obesity in rats. Proceedings of the National Academy of
Sciences of the United States of America 2003, 100(24):14217-14222.
50. Myers MG, Cowley MA, Munzberg H: Mechanisms of leptin action and leptin
resistance. Annual review of physiology 2008, 70:537-556.
51. Zhang Y, Scarpace PJ: Circumventing central leptin resistance: lessons from
central leptin and POMC gene delivery. Peptides 2006, 27(2):350-364.
52. Friedman JM, Halaas JL: Leptin and the regulation of body weight in
mammals. Nature 1998, 395(6704):763-770.
53. Kieffer TJ, Habener JF: The adipoinsular axis: effects of leptin on pancreatic
beta-cells. American journal of physiology Endocrinology and metabolism 2000,
278(1):E1-E14.
54. Shimizu F, Matsuzaki T, Iwasa T, Tanaka N, Minakuchi M, Kuwahara A, Yasui T,
Furumoto H, Irahara M: Transition of leptin receptor expression during

108
 BIBLIOGRAFÍA

pubertal development in female rat pituitary. Endocrine journal 2008,

55(1):191-198.
55. Dunger DB, Ahmed ML, Ong KK: Effects of obesity on growth and puberty.
Best practice & research Clinical endocrinology & metabolism 2005, 19(3):375-
390.
56. Kaplowitz PB: Link between body fat and the timing of puberty. Pediatrics
2008, 121 Suppl 3:S208-217.
57. Andreelli F, Foretz M, Knauf C, Cani PD, Perrin C, Iglesias MA, Pillot B, Bado A,
Tronche F, Mithieux G et al: Liver adenosine monophosphate-activated
kinase-alpha2 catalytic subunit is a key target for the control of hepatic
glucose production by adiponectin and leptin but not insulin.
Endocrinology 2006, 147(5):2432-2441.
58. Rabe K, Lehrke M, Parhofer KG, Broedl UC: Adipokines and insulin
resistance. Mol Med 2008, 14(11-12):741-751.
59. Javor ED, Ghany MG, Cochran EK, Oral EA, DePaoli AM, Premkumar A, Kleiner
DE, Gorden P: Leptin reverses nonalcoholic steatohepatitis in patients
with severe lipodystrophy. Hepatology 2005, 41(4):753-760.
60. Lago F, Dieguez C, Gomez-Reino J, Gualillo O: Adipokines as emerging
mediators of immune response and inflammation. Nature clinical practice
Rheumatology 2007, 3(12):716-724.
61. Yang SQ, Lin HZ, Lane MD, Clemens M, Diehl AM: Obesity increases
sensitivity to endotoxin liver injury: implications for the pathogenesis of
steatohepatitis. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United
States of America 1997, 94(6):2557-2562.
62. Tomita K, Azuma T, Kitamura N, Tamiya G, Ando S, Nagata H, Kato S, Inokuchi
S, Nishimura T, Ishii H et al: Leptin deficiency enhances sensitivity of rats to
alcoholic steatohepatitis through suppression of metallothionein.
American journal of physiology Gastrointestinal and liver physiology 2004,
287(5):G1078-1085.
63. Balasubramaniyan V, Murugaiyan G, Shukla R, Bhonde RR, Nalini N: Leptin
downregulates ethanol-induced secretion of proinflammatory cytokines
and growth factor. Cytokine 2007, 37(1):96-100.
64. Ikejima K, Takei Y, Honda H, Hirose M, Yoshikawa M, Zhang YJ, Lang T, Fukuda
T, Yamashina S, Kitamura T et al: Leptin receptor-mediated signaling
regulates hepatic fibrogenesis and remodeling of extracellular matrix in
the rat. Gastroenterology 2002, 122(5):1399-1410.
65. Leclercq IA, Farrell GC, Schriemer R, Robertson GR: Leptin is essential for the
hepatic fibrogenic response to chronic liver injury. Journal of hepatology
2002, 37(2):206-213.
66. Marra F: Leptin and liver tissue repair: do rodent models provide the
answers? Journal of hepatology 2007, 46(1):12-18.
67. Ding X, Saxena NK, Lin S, Xu A, Srinivasan S, Anania FA: The roles of leptin
and adiponectin: a novel paradigm in adipocytokine regulation of liver

109
 BIBLIOGRAFIA

fibrosis and stellate cell biology. The American journal of pathology 2005,
166(6):1655-1669.
68. De Minicis S, Candelaresi C, Marzioni M, Saccomano S, Roskams T, Casini A,
Risaliti A, Salzano R, Cautero N, di Francesco F et al: Role of endogenous
opioids in modulating HSC activity in vitro and liver fibrosis in vivo. Gut
2008, 57(3):352-364.
69. Jiang JX, Mikami K, Shah VH, Torok NJ: Leptin induces phagocytosis of
apoptotic bodies by hepatic stellate cells via a Rho guanosine
triphosphatase-dependent mechanism. Hepatology 2008, 48(5):1497-1505.
70. Leclercq IA, Field J, Farrell GC: Leptin-specific mechanisms for impaired
liver regeneration in ob/ob mice after toxic injury. Gastroenterology 2003,
124(5):1451-1464.
71. Yang S, Lin HZ, Hwang J, Chacko VP, Diehl AM: Hepatic hyperplasia in
noncirrhotic fatty livers: is obesity-related hepatic steatosis a
premalignant condition? Cancer research 2001, 61(13):5016-5023.
72. Leclercq IA, Sempoux C, Starkel P, Horsmans Y: Limited therapeutic efficacy
of pioglitazone on progression of hepatic fibrosis in rats. Gut 2006,
55(7):1020-1029.
73. Sierra-Honigmann MR, Nath AK, Murakami C, Garcia-Cardena G,
Papapetropoulos A, Sessa WC, Madge LA, Schechner JS, Schwabb MB, Polverini
PJ et al: Biological action of leptin as an angiogenic factor. Science 1998,
281(5383):1683-1686.
74. Aleffi S, Petrai I, Bertolani C, Parola M, Colombatto S, Novo E, Vizzutti F, Anania
FA, Milani S, Rombouts K et al: Upregulation of proinflammatory and
proangiogenic cytokines by leptin in human hepatic stellate cells.
Hepatology 2005, 42(6):1339-1348.
75. Kitade M, Yoshiji H, Kojima H, Ikenaka Y, Noguchi R, Kaji K, Yoshii J, Yanase K,
Namisaki T, Asada K et al: Leptin-mediated neovascularization is a
prerequisite for progression of nonalcoholic steatohepatitis in rats.
Hepatology 2006, 44(4):983-991.
76. Ribatti D, Belloni AS, Nico B, Di Comite M, Crivellato E, Vacca A: Leptin-leptin
receptor are involved in angiogenesis in human hepatocellular
carcinoma. Peptides 2008, 29(9):1596-1602.
77. Saxena NK, Sharma D, Ding X, Lin S, Marra F, Merlin D, Anania FA:
Concomitant activation of the JAK/STAT, PI3K/AKT, and ERK signaling is
involved in leptin-mediated promotion of invasion and migration of
hepatocellular carcinoma cells. Cancer research 2007, 67(6):2497-2507.
78. Fava G, Alpini G, Rychlicki C, Saccomanno S, DeMorrow S, Trozzi L, Candelaresi
C, Venter J, Di Sario A, Marzioni M et al: Leptin enhances
cholangiocarcinoma cell growth. Cancer research 2008, 68(16):6752-6761.
79. Kolaczynski JW, Considine RV, Ohannesian J, Marco C, Opentanova I, Nyce MR,
Myint M, Caro JF: Responses of leptin to short-term fasting and refeeding

110
 BIBLIOGRAFÍA

in humans: a link with ketogenesis but not ketones themselves. Diabetes

1996, 45(11):1511-1515.
80. Malmstrom R, Taskinen MR, Karonen SL, Yki-Jarvinen H: Insulin increases
plasma leptin concentrations in normal subjects and patients with
NIDDM. Diabetologia 1996, 39(8):993-996.
81. Saad MF, Damani S, Gingerich RL, Riad-Gabriel MG, Khan A, Boyadjian R,
Jinagouda SD, el-Tawil K, Rude RK, Kamdar V: Sexual dimorphism in plasma
leptin concentration. The Journal of clinical endocrinology and metabolism
1997, 82(2):579-584.
82. Morales A, Wasserfall C, Brusko T, Carter C, Schatz D, Silverstein J, Ellis T,
Atkinson M: Adiponectin and leptin concentrations may aid in
discriminating disease forms in children and adolescents with type 1 and
type 2 diabetes. Diabetes care 2004, 27(8):2010-2014.
83. Apter D: The role of leptin in female adolescence. Annals of the New York
Academy of Sciences 2003, 997:64-76.
84. Wilsey J, Zolotukhin S, Prima V, Scarpace PJ: Central leptin gene therapy fails
to overcome leptin resistance associated with diet-induced obesity.
American journal of physiology Regulatory, integrative and comparative
physiology 2003, 285(5):R1011-1020.
85. Munzberg H, Myers MG, Jr.: Molecular and anatomical determinants of
central leptin resistance. Nature neuroscience 2005, 8(5):566-570.
86. Bingham NC, Anderson KK, Reuter AL, Stallings NR, Parker KL: Selective loss
of leptin receptors in the ventromedial hypothalamic nucleus results in
increased adiposity and a metabolic syndrome. Endocrinology 2008,
149(5):2138-2148.
87. Liu ZJ, Bian J, Liu J, Endoh A: Obesity reduced the gene expressions of leptin
receptors in hypothalamus and liver. Hormone and metabolic research =
Hormon- und Stoffwechselforschung = Hormones et metabolisme 2007,
39(7):489-494.
88. El-Haschimi K, Pierroz DD, Hileman SM, Bjorbaek C, Flier JS: Two defects
contribute to hypothalamic leptin resistance in mice with diet-induced
obesity. The Journal of clinical investigation 2000, 105(12):1827-1832.
89. Vila L, Roglans N, Alegret M, Sanchez RM, Vazquez-Carrera M, Laguna JC:
Suppressor of cytokine signaling-3 (SOCS-3) and a deficit of
serine/threonine (Ser/Thr) phosphoproteins involved in leptin
transduction mediate the effect of fructose on rat liver lipid metabolism.
Hepatology 2008, 48(5):1506-1516.
90. Scarpace PJ, Zhang Y: Elevated leptin: consequence or cause of obesity?
Frontiers in bioscience : a journal and virtual library 2007, 12:3531-3544.
91. Roglans N, Vila L, Farre M, Alegret M, Sanchez RM, Vazquez-Carrera M, Laguna
JC: Impairment of hepatic Stat-3 activation and reduction of PPARalpha
activity in fructose-fed rats. Hepatology 2007, 45(3):778-788.

111
 BIBLIOGRAFIA

92. Seufert J: Leptin effects on pancreatic beta-cell gene expression and

function. Diabetes 2004, 53 Suppl 1:S152-158.
93. Widjaja A, Stratton IM, Horn R, Holman RR, Turner R, Brabant G: UKPDS 20:
plasma leptin, obesity, and plasma insulin in type 2 diabetic subjects. The
Journal of clinical endocrinology and metabolism 1997, 82(2):654-657.
94. Galic S, Oakhill JS, Steinberg GR: Adipose tissue as an endocrine organ.
Molecular and cellular endocrinology 2010, 316(2):129-139.
95. Chandran M, Phillips SA, Ciaraldi T, Henry RR: Adiponectin: more than just
another fat cell hormone? Diabetes care 2003, 26(8):2442-2450.
96. Liu M, Liu F: Transcriptional and post-translational regulation of
adiponectin. The Biochemical journal 2010, 425(1):41-52.
97. Polyzos SA, Kountouras J, Zavos C, Tsiaousi E: The role of adiponectin in the
pathogenesis and treatment of non-alcoholic fatty liver disease. Diabetes,
obesity & metabolism 2010, 12(5):365-383.
98. Arita Y, Kihara S, Ouchi N, Takahashi M, Maeda K, Miyagawa J, Hotta K,
Shimomura I, Nakamura T, Miyaoka K et al: Paradoxical decrease of an
adipose-specific protein, adiponectin, in obesity. Biochemical and
biophysical research communications 1999, 257(1):79-83.
99. Marra F, Bertolani C: Adipokines in liver diseases. Hepatology 2009,
50(3):957-969.
100. Yamauchi T, Nio Y, Maki T, Kobayashi M, Takazawa T, Iwabu M, Okada-Iwabu
M, Kawamoto S, Kubota N, Kubota T et al: Targeted disruption of AdipoR1
and AdipoR2 causes abrogation of adiponectin binding and metabolic
actions. Nature medicine 2007, 13(3):332-339.
101. Bullen JW, Jr., Bluher S, Kelesidis T, Mantzoros CS: Regulation of adiponectin
and its receptors in response to development of diet-induced obesity in
mice. American journal of physiology Endocrinology and metabolism 2007,
292(4):E1079-1086.
102. Beylot M, Pinteur C, Peroni O: Expression of the adiponectin receptors
AdipoR1 and AdipoR2 in lean rats and in obese Zucker rats. Metabolism:
clinical and experimental 2006, 55(3):396-401.
103. Azuma K, Oguchi S, Matsubara Y, Mamizuka T, Murata M, Kikuchi H, Watanabe
K, Katsukawa F, Yamazaki H, Shimada A et al: Novel resistin promoter
polymorphisms: association with serum resistin level in Japanese obese
individuals. Hormone and metabolic research = Hormon- und
Stoffwechselforschung = Hormones et metabolisme 2004, 36(8):564-570.
104. Rao CV: Nitric oxide signaling in colon cancer chemoprevention. Mutation
research 2004, 555(1-2):107-119.
105. Mandato C, Lucariello S, Licenziati MR, Franzese A, Spagnuolo MI, Ficarella R,
Pacilio M, Amitrano M, Capuano G, Meli R et al: Metabolic, hormonal,
oxidative, and inflammatory factors in pediatric obesity-related liver
disease. The Journal of pediatrics 2005, 147(1):62-66.

112
 BIBLIOGRAFÍA

106. Wellen KE, Hotamisligil GS: Obesity-induced inflammatory changes in

adipose tissue. The Journal of clinical investigation 2003, 112(12):1785-1788.
107. Xu H, Barnes GT, Yang Q, Tan G, Yang D, Chou CJ, Sole J, Nichols A, Ross JS,
Tartaglia LA et al: Chronic inflammation in fat plays a crucial role in the
development of obesity-related insulin resistance. The Journal of clinical
investigation 2003, 112(12):1821-1830.
108. Browning JD, Horton JD: Molecular mediators of hepatic steatosis and liver
injury. The Journal of clinical investigation 2004, 114(2):147-152.
109. Punthakee Z, Delvin EE, O'Loughlin J, Paradis G, Levy E, Platt RW, Lambert M:
Adiponectin, adiposity, and insulin resistance in children and
adolescents. The Journal of clinical endocrinology and metabolism 2006,
91(6):2119-2125.
110. Sugita H, Fujimoto M, Yasukawa T, Shimizu N, Sugita M, Yasuhara S, Martyn JA,
Kaneki M: Inducible nitric-oxide synthase and NO donor induce insulin
receptor substrate-1 degradation in skeletal muscle cells. The Journal of
biological chemistry 2005, 280(14):14203-14211.
111. Ludwig J, Viggiano TR, McGill DB, Oh BJ: Nonalcoholic steatohepatitis: Mayo
Clinic experiences with a hitherto unnamed disease. Mayo Clinic
proceedings 1980, 55(7):434-438.
112. Garcia-Monzon C, Martin-Perez E, Iacono OL, Fernandez-Bermejo M, Majano
PL, Apolinario A, Larranaga E, Moreno-Otero R: Characterization of
pathogenic and prognostic factors of nonalcoholic steatohepatitis
associated with obesity. Journal of hepatology 2000, 33(5):716-724.
113. Mehta K, Van Thiel DH, Shah N, Mobarhan S: Nonalcoholic fatty liver disease:
pathogenesis and the role of antioxidants. Nutrition reviews 2002,
60(9):289-293.
114. Roberts EA: Nonalcoholic steatohepatitis in children. Current
gastroenterology reports 2003, 5(3):253-259.
115. Vernon G, Baranova A, Younossi ZM: Systematic review: the epidemiology
and natural history of non-alcoholic fatty liver disease and non-alcoholic
steatohepatitis in adults. Alimentary pharmacology & therapeutics 2011,
34(3):274-285.
116. Nobili V, Svegliati-Baroni G, Alisi A, Miele L, Valenti L, Vajro P: A 360-degree
overview of paediatric NAFLD: recent insights. Journal of hepatology 2013,
58(6):1218-1229.
117. Anderson EL, Howe LD, Jones HE, Higgins JP, Lawlor DA, Fraser A: The
Prevalence of Non-Alcoholic Fatty Liver Disease in Children and
Adolescents: A Systematic Review and Meta-Analysis. PloS one 2015,
10(10):e0140908.
118. Alisi A, Feldstein AE, Villani A, Raponi M, Nobili V: Pediatric nonalcoholic
fatty liver disease: a multidisciplinary approach. Nature reviews
Gastroenterology & hepatology 2012, 9(3):152-161.

113
 BIBLIOGRAFIA

119. Steinberger J, Daniels SR, Eckel RH, Hayman L, Lustig RH, McCrindle B, Mietus-
Snyder ML: Progress and challenges in metabolic syndrome in children
and adolescents: a scientific statement from the American Heart
Association Atherosclerosis, Hypertension, and Obesity in the Young
Committee of the Council on Cardiovascular Disease in the Young; Council
on Cardiovascular Nursing; and Council on Nutrition, Physical Activity,
and Metabolism. Circulation 2009, 119(4):628-647.
120. Day CP, James OF: Steatohepatitis: a tale of two "hits"? Gastroenterology
1998, 114(4):842-845.
121. Petersen KF, Dufour S, Feng J, Befroy D, Dziura J, Dalla Man C, Cobelli C,
Shulman GI: Increased prevalence of insulin resistance and nonalcoholic
fatty liver disease in Asian-Indian men. Proceedings of the National Academy
of Sciences of the United States of America 2006, 103(48):18273-18277.
122. Speliotes EK, Yerges-Armstrong LM, Wu J, Hernaez R, Kim LJ, Palmer CD,
Gudnason V, Eiriksdottir G, Garcia ME, Launer LJ et al: Genome-wide
association analysis identifies variants associated with nonalcoholic fatty
liver disease that have distinct effects on metabolic traits. PLoS genetics
2011, 7(3):e1001324.
123. Kawaguchi T, Sumida Y, Umemura A, Matsuo K, Takahashi M, Takamura T,
Yasui K, Saibara T, Hashimoto E, Kawanaka M et al: Genetic polymorphisms
of the human PNPLA3 gene are strongly associated with severity of non-
alcoholic fatty liver disease in Japanese. PloS one 2012, 7(6):e38322.
124. Rotman Y, Koh C, Zmuda JM, Kleiner DE, Liang TJ: The association of genetic
variability in patatin-like phospholipase domain-containing protein 3
(PNPLA3) with histological severity of nonalcoholic fatty liver disease.
Hepatology 2010, 52(3):894-903.
125. Bhatt SP, Nigam P, Misra A, Guleria R, Pandey RM, Pasha MA: Genetic
variation in the patatin-like phospholipase domain-containing protein-3
(PNPLA-3) gene in Asian Indians with nonalcoholic fatty liver disease.
Metabolic syndrome and related disorders 2013, 11(5):329-335.
126. Liu YL, Patman GL, Leathart JB, Piguet AC, Burt AD, Dufour JF, Day CP, Daly AK,
Reeves HL, Anstee QM: Carriage of the PNPLA3 rs738409 C >G
polymorphism confers an increased risk of non-alcoholic fatty liver
disease associated hepatocellular carcinoma. Journal of hepatology 2014,
61(1):75-81.
127. Romeo S, Kozlitina J, Xing C, Pertsemlidis A, Cox D, Pennacchio LA, Boerwinkle
E, Cohen JC, Hobbs HH: Genetic variation in PNPLA3 confers susceptibility
to nonalcoholic fatty liver disease. Nature genetics 2008, 40(12):1461-1465.
128. Sun S, Wang M, Song H, Wu T, Wei H, He S, Ding Z, Ji G: SCAP gene
polymorphisms decrease the risk of nonalcoholic fatty liver disease in
females with metabolic syndrome. Journal of genetics 2013, 92(3):565-570.
129. Zain SM, Mohamed Z, Mahadeva S, Rampal S, Basu RC, Cheah PL, Salim A,
Mohamed R: Susceptibility and gene interaction study of the angiotensin II

114
 BIBLIOGRAFÍA

type 1 receptor (AGTR1) gene polymorphisms with non-alcoholic fatty

liver disease in a multi-ethnic population. PloS one 2013, 8(3):e58538.
130. Xu YP, Liang L, Wang CL, Fu JF, Liu PN, Lv LQ, Zhu YM: Association between
UCP3 gene polymorphisms and nonalcoholic fatty liver disease in Chinese
children. World journal of gastroenterology : WJG 2013, 19(35):5897-5903.
131. Musso G, Bo S, Cassader M, De Michieli F, Gambino R: Impact of sterol
regulatory element-binding factor-1c polymorphism on incidence of
nonalcoholic fatty liver disease and on the severity of liver disease and of
glucose and lipid dysmetabolism. The American journal of clinical nutrition
2013, 98(4):895-906.
132. Barbieri M, Esposito A, Angellotti E, Rizzo MR, Marfella R, Paolisso G:
Association of genetic variation in adaptor protein APPL1/APPL2 loci
with non-alcoholic fatty liver disease. PloS one 2013, 8(8):e71391.
133. Sazci A, Ozel MD, Ergul E, Aygun C: Association of nicotinamide-N-
methyltransferase gene rs694539 variant with patients with
nonalcoholic steatohepatitis. Genetic testing and molecular biomarkers 2013,
17(11):849-853.
134. Namikawa C, Shu-Ping Z, Vyselaar JR, Nozaki Y, Nemoto Y, Ono M, Akisawa N,
Saibara T, Hiroi M, Enzan H et al: Polymorphisms of microsomal
triglyceride transfer protein gene and manganese superoxide dismutase
gene in non-alcoholic steatohepatitis. Journal of hepatology 2004,
40(5):781-786.
135. Petersen KF, Dufour S, Hariri A, Nelson-Williams C, Foo JN, Zhang XM, Dziura J,
Lifton RP, Shulman GI: Apolipoprotein C3 gene variants in nonalcoholic
fatty liver disease. The New England journal of medicine 2010, 362(12):1082-
1089.
136. Seki H, Tani Y, Arita M: Omega-3 PUFA derived anti-inflammatory lipid
mediator resolvin E1. Prostaglandins & other lipid mediators 2009, 89(3-
4):126-130.
137. Araya J, Rodrigo R, Videla LA, Thielemann L, Orellana M, Pettinelli P, Poniachik
J: Increase in long-chain polyunsaturated fatty acid n - 6/n - 3 ratio in
relation to hepatic steatosis in patients with non-alcoholic fatty liver
disease. Clin Sci (Lond) 2004, 106(6):635-643.
138. Goldberg IJ, Ginsberg HN: Ins and outs modulating hepatic triglyceride and
development of nonalcoholic fatty liver disease. Gastroenterology 2006,
130(4):1343-1346.
139. Sinn DH, Gwak GY, Park HN, Kim JE, Min YW, Kim KM, Kim YJ, Choi MS, Lee JH,
Koh KC et al: Ultrasonographically detected non-alcoholic fatty liver
disease is an independent predictor for identifying patients with insulin
resistance in non-obese, non-diabetic middle-aged Asian adults. The
American journal of gastroenterology 2012, 107(4):561-567.
140. Choudhary NS, Duseja A, Kalra N, Das A, Dhiman RK, Chawla YK: Correlation
of adipose tissue with liver histology in Asian Indian patients with

115
 BIBLIOGRAFIA

nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD). Annals of hepatology 2012,

11(4):478-486.
141. Lim JS, Mietus-Snyder M, Valente A, Schwarz JM, Lustig RH: The role of
fructose in the pathogenesis of NAFLD and the metabolic syndrome.
Nature reviews Gastroenterology & hepatology 2010, 7(5):251-264.
142. Ibrahim MM: Subcutaneous and visceral adipose tissue: structural and
functional differences. Obesity reviews : an official journal of the International
Association for the Study of Obesity 2010, 11(1):11-18.
143. Leung C, Herath CB, Jia Z, Goodwin M, Mak KY, Watt MJ, Forbes JM, Angus PW:
Dietary glycotoxins exacerbate progression of experimental fatty liver
disease. Journal of hepatology 2014, 60(4):832-838.
144. Rana D, Duseja A, Dhiman RK, Chawla Y, Arora SK: Maturation defective
myeloid dendritic cells in nonalcoholic fatty liver disease patients release
inflammatory cytokines in response to endotoxin. Hepatology international
2013, 7(2):562-569.
145. Schulz C, Gomez Perdiguero E, Chorro L, Szabo-Rogers H, Cagnard N, Kierdorf
K, Prinz M, Wu B, Jacobsen SE, Pollard JW et al: A lineage of myeloid cells
independent of Myb and hematopoietic stem cells. Science 2012,
336(6077):86-90.
146. Tang T, Sui Y, Lian M, Li Z, Hua J: Pro-inflammatory activated Kupffer cells
by lipids induce hepatic NKT cells deficiency through activation-induced
cell death. PloS one 2013, 8(12):e81949.
147. Tilg H, Diehl AM: Cytokines in alcoholic and nonalcoholic steatohepatitis.
The New England journal of medicine 2000, 343(20):1467-1476.
148. Hotamisligil GS: Inflammation and metabolic disorders. Nature 2006,
444(7121):860-867.
149. Kumar A, Sharma A, Duseja A, Das A, Dhiman RK, Chawla YK, Kohli KK, Bhansali
A: Patients with Nonalcoholic Fatty Liver Disease (NAFLD) have Higher
Oxidative Stress in Comparison to Chronic Viral Hepatitis. Journal of
clinical and experimental hepatology 2013, 3(1):12-18.
150. Fukuhara A, Matsuda M, Nishizawa M, Segawa K, Tanaka M, Kishimoto K,
Matsuki Y, Murakami M, Ichisaka T, Murakami H et al: Visfatin: a protein
secreted by visceral fat that mimics the effects of insulin. Science 2005,
307(5708):426-430.
151. Uygun A, Kadayifci A, Yesilova Z, Erdil A, Yaman H, Saka M, Deveci MS, Bagci S,
Gulsen M, Karaeren N et al: Serum leptin levels in patients with
nonalcoholic steatohepatitis. The American journal of gastroenterology 2000,
95(12):3584-3589.
152. Compare D, Coccoli P, Rocco A, Nardone OM, De Maria S, Carteni M, Nardone G:
Gut--liver axis: the impact of gut microbiota on non alcoholic fatty liver
disease. Nutrition, metabolism, and cardiovascular diseases : NMCD 2012,
22(6):471-476.

116
 BIBLIOGRAFÍA

153. Ley RE, Turnbaugh PJ, Klein S, Gordon JI: Microbial ecology: human gut
microbes associated with obesity. Nature 2006, 444(7122):1022-1023.
154. Zhu L, Baker SS, Gill C, Liu W, Alkhouri R, Baker RD, Gill SR: Characterization
of gut microbiomes in nonalcoholic steatohepatitis (NASH) patients: a
connection between endogenous alcohol and NASH. Hepatology 2013,
57(2):601-609.
155. Arslan N, Buyukgebiz B, Ozturk Y, Cakmakci H: Fatty liver in obese children:
prevalence and correlation with anthropometric measurements and
hyperlipidemia. The Turkish journal of pediatrics 2005, 47(1):23-27.
156. Reid AE: Nonalcoholic steatohepatitis. Gastroenterology 2001, 121(3):710-
723.
157. Saverymuttu SH, Joseph AE, Maxwell JD: Ultrasound scanning in the
detection of hepatic fibrosis and steatosis. Br Med J (Clin Res Ed) 1986,
292(6512):13-15.
158. Mathiesen UL, Franzen LE, Aselius H, Resjo M, Jacobsson L, Foberg U, Fryden A,
Bodemar G: Increased liver echogenicity at ultrasound examination
reflects degree of steatosis but not of fibrosis in asymptomatic patients
with mild/moderate abnormalities of liver transaminases. Digestive and
liver disease : official journal of the Italian Society of Gastroenterology and the
Italian Association for the Study of the Liver 2002, 34(7):516-522.
159. Younossi ZM, Diehl AM, Ong JP: Nonalcoholic fatty liver disease: an agenda
for clinical research. Hepatology 2002, 35(4):746-752.
160. Koplay M, Sivri M, Erdogan H, Nayman A: Importance of imaging and recent
developments in diagnosis of nonalcoholic fatty liver disease. World
journal of hepatology 2015, 7(5):769-776.
161. Ozcan HN, Oguz B, Haliloglu M, Orhan D, Karcaaltincaba M: Imaging patterns
of fatty liver in pediatric patients. Diagn Interv Radiol 2015, 21(4):355-360.
162. Zand KA, Shah A, Heba E, Wolfson T, Hamilton G, Lam J, Chen J, Hooker JC,
Gamst AC, Middleton MS et al: Accuracy of multiecho magnitude-based MRI
(M-MRI) for estimation of hepatic proton density fat fraction (PDFF) in
children. Journal of magnetic resonance imaging : JMRI 2015, 42(5):1223-
1232.
163. Goldschmidt I, Streckenbach C, Dingemann C, Pfister ED, di Nanni A, Zapf A,
Baumann U: Application and limitations of transient liver elastography in
children. Journal of pediatric gastroenterology and nutrition 2013, 57(1):109-
113.
164. Pico Aliaga SD, Muro Velilla D, Garcia-Marti G, Sanguesa Nebot C, Marti-
Bonmati L: [Acoustic radiation force impulse imaging elastography is
efficacious in detecting hepatic fibrosis in children]. Radiologia 2015,
57(4):314-320.
165. Mansoor S, Collyer E, Alkhouri N: A comprehensive review of noninvasive
liver fibrosis tests in pediatric nonalcoholic Fatty liver disease. Current
gastroenterology reports 2015, 17(6):23.

117
 BIBLIOGRAFIA

166. Verdon CP, Burton BA, Prior RL: Sample pretreatment with nitrate
reductase and glucose-6-phosphate dehydrogenase quantitatively
reduces nitrate while avoiding interference by NADP+ when the Griess
reaction is used to assay for nitrite. Analytical biochemistry 1995,
224(2):502-508.
167. Hissin PJ, Hilf R: A fluorometric method for determination of oxidized and
reduced glutathione in tissues. Analytical biochemistry 1976, 74(1):214-226.

118