cou sas GS AL 03.02.308 INEN 784 1985-05 Norina Ecuatoriana CARNE Y PRODUCTOS CARNICOS. DETERWINACION DE NITRITOS. ( OPCIONAL 2, TERMINOLOGIA 2.1 Contenido de nitritos. Es la cantidad de nitrito existente en la muestra, determinada bajo las condicio- nes del ensayo descrito en la presente norma. 3, RESUMEN, 3.1. Extracr la muestra con agua dest OC Meny POR Open a dal fil trado se le agrega sulfanilamida ¥ diclorhidrato de N-T nafiifetiten Griess); en presen- cia de nitrites se desarrolla un color rojo en el filtado, Dicha coloracién se mide en un espectrofatmetro ‘tuna longitud de onda de 538 mm. rizo 454 y Ave. 6 de Diciembre - Quito-Eeuador - Prohibids la repraduceién 4, INSTRUMENTAL 41 Picadora mecdnica de carne (molino), Tipo de laboratorio, provisto de una placa cribada con orificios «de un diimetro méximo de 4 mm w otro equipo que produzca una pasta homogénea, 4.2 Balanza analitica, sensible a | mg. 4.3. Matraz volumétrico, de 100, 200 y 1 000 em? 4.4 Pipeta volumétriea, de 5 em, 10 m® y [Link]? 4,5. Baio de agua 4.6 Espectrofotametro 0 colorimetto fotocléctricy, con cubetas 0 ¢eldas, con una fongitud Sptiea de 1 em 4,7. Vasos de precipitaciom de 250 em? Institute Ecustoriane da Normalizacis 4.8 Papel filtro Whatman No, 42 6 su equivalemte libre de nitrites, 4.9 Probeta de 10m, 100 em? y 250 em? 4.10 Embudos 9= 75 em (Continia)IWEN 784 1985.05 5. REACTIVOS 5.1. Soluciones para precipitar las proteinas. 5.1.1 Reactive A. Disolver 106 g de ferrocianuro de potasio wrihidratado (kd Fe (Cn)6. 31; 0) en agua des- tilada y diluir a 1 000m? 5.1.2 Reactive B. Disolver en agua 220 g de acetato de zine dihidratado (Zn (CH3 COO) 2,2H20) y agre: gar 30 cm? de deido acético glacial y diluir a 1 000 em? 5.1.3 Solucidn saturada de borax. Disolver 50 g de tetraboratodisidico decahiratado (Na 284071030) cen 1 000 cm? de agua tibia y enfriar hasta temperatura ambiente, 5.2. Solucién patrdn de nitrito de sodio, (Na NO3). Disolver 1,0 g de nitrito de sodio, exactamente posa- do, colocar en un matraz volumétrico de 100 em? y diluir con agua destilada, 5.2.1 Con una pipeta transferir $ om? de esta “Rott Hi yr eats olin de' 1000 en cr pap nets once OGM NI Gu oe ‘cual se tomard 5 cm*, 10 em? y 20 em? en balones aforados de 100 em* y a ‘agua basa la marca, yillevar a (Estas soluciones debien utilizarse el mismo dia de su preparacién, 5.3 Soluciones para desarrollar ef color 5.3.1. Solucién de sutfanitamida (NH2 C6H4 S02 WH2). En un matraz aforado de | 000 em? que conten- 2 800 cm? de agua, disolver 2 g de sulfanilamicla, calentar en bafio de agua, enfriar,filtrar si es necesario ¥ afadir mienteas se aga continuamente 100 em? de dcido clorhidrico concentrado (d 20°C = 1,19g/em") luego diluir a 1 000 em? con agua destilada, 5.3.2 Solucién de diclorhidrato de W-1 naftiletilendiamina (Cy yy NHCH; CHy NH. xHC1). Enunma- traz aforado de 250 cm? disolver en agua 0,25 g de dictorhidrato de N-1 naftiletilendiamina y diluir eon agua hasta la marca, [Link] Guardar esta solucién en un frasco oscuro herméticamente cerrado, en refrigeracién durante un perido no mayor de una semana, 5.3.3 Solucién de deido clorhrdrico, En un matraz aforado de 1 000 cm? diluir 45 em? de dcido clorhi- rico concentrado (d 20°C = 1,19 gfem*) a 1.000 em? con agua. 5.4 Agua destilada, O de pureza equivalente, (Continia) 1904-152INEN 784 1985.05 r- 6. PREPARACION DE LA MUESTRA, 6.1 La preparacién de la muestra se realizard de acuerdo al Anexo A, de la Norma INEN 776, 7. PROCEDIMIENTO 7.1 Preparacién dela curva de calibracién o patrén 7.1.1 Se toman con pipeta 10 em? de las soluciones patrén de concenteaciones equivalentes a 2,5 us, 50 ug ¥ 10 pg, de nitrito de sodio por centimetro etibico y transferir a los matraces Volumétricos de 100 em’, en cada uno de ellos agregar agua hasta obtener un volumen aproximado de 60 cm’; transferir aproximada fenton eon 7.12 A cada uno de Jos cuatro matraces aiiadir 10 cm? de a solucién 5.3.1 y 6 em? de la solucion $.3.3, mente 60 cm? de agua a otro matraz volumético de 100 em’, mezclary dejar la solueién en pe yrange $ mina temperatura ambiente y en un lugar oscuro. Luego agregar 2 cm? de ta solucién 5,3,2, mezclar y dejar en reposo de 3 a 10 minutos a temperatura ambiente y cen lugar oscuro, luego llevar a volumen con agua destilada 113 Doin bt li LOGUE epee aeons tmxima absorbancia (se recomienda 538 nm) 7.14 Construir la curva patrén de absorbancia en funcién de las concentraciones de ls soluciones patron de nitrito de sodio; dichas concentraciones se expresan en microgramos por em? , 7.2.1 La determinacién debe efectuarse por duplicado sobre la misma muestra preparada. 7.2.2 Posar 10 g de la muestra preparada con aproximacién al | mg y colocarlo en el matraz Erlenmeyer de 300 em* 7.2.3 Afadir $ em’ de la solucién saturada de borax y 100 em? de agua destilada cali tura minima de 70°C, te a una tempera 7.2.4 Calentar el matraz Erlenmeyer y su contenido durante 15 min, en el batio de agua hirviente, agitan- do repetidamente nbiente y afadir 2 em? del reactive A (5.1.1) y 7.2.5 Dejar enfriar el matraz Erlenmeyer a temperatura 2 em? del reactivo B (5.1.2) mezclando cuidadosamente después de cada adicién. 7.26 Transferir el contenido del matraz Erlenmeyer al matraz volumétrico aforado de 200 em®, llevar a volumen con agua destilada y mezclar. Dejar en repose durante 30 min, a temperatura ambiente Lo (Continia) 1908-152e INEN 784 1985.05 7.2.7 Decantar cuidadosamente el liquido sobrenadante, filirar a través de papel filtro plegado, hasta ob- tener un sao caro, 7.3. Medicién del color 3 4un matraz aforado de 100 cm? una alfeuota del fitrado no mayor de 25 em? 1 Transferir con pip agua hasta obtener un volumen cic aproximadamente 60 em? ate ales ga! 7.3.2 nadir 10 cnr? do la solucién 5.3.1 y 6 em® de la solucién 5.3.3, mezclar, dejar Ia solucién durante wm ast. Eymezclar y dejar en ceposo de 3 a 10 min a temperatura ambien y age 5 minutos a temperatura ambiente y 7.3.3 Adicionar 2 em? de la soluctén te, en un lugar oscuro, Llevar a volumen con agua destilada, 73.4 Se mide La absorbancia de Ia solucién utilizando el espectroforsmerro, a la longitud de onda de 538 nm (ver nota 1), 7.4 Namero de determinacio 1 ss tae wo OGL pg ste que se toman de la misma muestra glob, MENTY i 8. CALCULOS 8.1 El contenido de nitrites en carne y productos cirnicos se determina mediante la ecuacién siguiente € x 2000 NOB =x Siendo: NaNO3 = miligramos de nitrito de sodio por kilogramo, | citi, i m = masa de la muestra de ensayo, en g, NOTA 1. Sila absorbancia de la solucion coloreada obtenida a partir de ta musstra excede a la obtenida a portir de Ia solucién patron de concontracién mas alta, se repiten las operaciones para la medicién del color, tomando una alicuota del filtrado ms pequea que la tomada anteriormente en 7.3.1. (Continia)IINEN 784 9, ERRORES DE METODO por duplicado no debe exceder 9.1 La diferencia entre los resultados de dos determinaciones efectuad; del 10°/o del valor medio} en aso contrario debe repetirse la determinacién, 10, INFORME DE RESULTADOS 10.1 Como resultado final, debe reportarse la media aritmética de los resultados de la determinacién, 10.2 Enel informe de resultados, “fi “i el método usado y el resultado obtenido, Debe mencio- nase, ademas, cualquier condicién Ae norma o considerada como opeional, asf como ‘cualquier circunstancia que pueda haber id He: ve Olay 10.3 Deben incluirse todos los detalles para la completa identifica (Continia) vo0152