Brucellas

 Enfermedad: brucelosis o fiebre ondulante, fiebre de Malta o fiebre del Mediterráneo.

o Origen: zoonitica.
o Agente microbiano: microorganismo del género Brucella, denominada así por David Bruce, su
descubridor.
o Transmisión: exposición a animales domésticos y salvajes infectados, principalmente ganado
vacuno, ovino y caprino.
o principal zoonosis a nivel mundial.

Brucella - patógeno intracelular facultativo que causa abortos en ganado, cabras y ovejas, y es
una enfermedad febril en los seres humanos.
- Especies clínicamente importantes: mellitensis, abortus y suis. Son las únicas
causantes de enfermedad humana.

Características: enfermedad genitourinaria de los animales.

- cocobacilo gramnegativo intracelular, aerobio estricto, inmóvil y de crecimiento lento.
- temperatura optima de crecimiento es de 37 grados, en un pH de 6.6 a 7.4
- Catalasa y oxidasa positivo. En general no fermentan azúcares.
- capaz de sobrevivir en el medio ambiente, fuera del huésped, por períodos
relativamente largos.

Carece de factores de patogenicidad clásicos como los plásmidos o bacteriófagos

lisogénicos, no produce exotoxinas, su lípido A es poco endotoxico, no tiene capsula,
presenta flagelos y no tiene variación antigénica.

- Membrana externa:
 LPS o endotoxina: componente más abundante que está fuertemente asociado a
proteínas Omp del grupo III.
 Lípido A: inserto en la hoja externa de la membrana.
 Oligosacárido intermedio llamado núcleo.
 Polisacárido O ó cadena O: capaz de producir reacción cruzada con
anticuerpos.
 Proteínas y fosfolípidos, y un espacio periplasmático que contiene
peptidoglicanos.
 Membrana citoplasmática: relativamente permeable a agentes hidrófobos como
colorantes, detergentes y sales biliares. Por lo tanto, no crece en medios con
estos compuestos.

- Estructura interna: poseen proteínas citoplasmáticas especificas del genero, que forman
parte de un antígeno denominado CP, empleado en pruebas de ELISA.
- Atributos que la diferencian de Gram (-) comunes:
1. membrana externa → relativamente permeable a colorantes, detergentes y sales
biliares (No crece en medios selectivos que contienen tales compuestos, como
el MacConkey).
2. resistente a péptidos catiónicos bactericidas presentes en lisosomas y fluidos
corporales, gracias a la presencia del Lípido A.

Epidemiología:
- Brucella mellitensis: es la más patógena de todas las Brucellas, afectando tanto a los
 humanos como al ganado ovino y caprino.
- B. abortus: causa más extendida de brucelosis bovina.

En Venezuela no hay reportes de B. mellitensis, pero si hay B. abortus y suis.

Patogenia:
- puede autoperpetuarse en los rebaños y producir enfermedades graves en los humanos.
- Fuente de infección: animales infectados.
- período de incubación en los humanos → se estima que va desde los 7 días hasta los 3
meses, con una media de 2-3 semanas.
- Patógenos intracelulares facultativos, esto los protege de.
a. la acción de antibióticos
b. mecanismos efectores dependientes de anticuerpos.

Capacidad de adherencia y penetración de la conjuntiva o la piel lesionada, y multiplicarse en

células tanto fagociticas como no fagocíticas.

1. Penetración y adherencia de la bacteria.

2. los polimorfonucleares neutrófilos (PMN) y los monocitos fagocitan a la bacteria. Así
llegan a los ganglios.
3. En los ganglios pueden invadir el torrente sanguíneo, donde vuelven a ser fagocitadas
por los PMN y macrófagos circulantes, que las transportan a diversos órganos.
4. En los órganos se multiplican en las vacuolas (o en el RER de células epiteliales y
fibroblastos), evadiendo así los mecanismos de inmunidad celular y humoral del
huésped.

- ¿Cómo ingresa a la célula? → gracias a su LPS y a las proteínas de la membrana

externa que posee receptores tipo manosa; por otra parte, su supervivencia recae en la
síntesis de enzimas antioxidantes y de GMP y adenina.

consigue invadir y subsistir en el interior de la célula mediante la inhibición de los

mecanismos celulares que conducen a la muerte celular programada o apoptosis.
El LPS-S inhibe la activación de la vía alterna del complemento. El interferón α activa
a los macrófagos, induce a la liberación de radicales libres y apoptosis celular,
liberación de citosinas, expresión de moléculas presentadoras de antígenos y
diferenciación celular

Manifestaciones: puede ser leve, autolimitada o severa.

- se caracteriza por fiebre y localización de las bacterias en distintos tejidos
(articulaciones, hueso, endocardio, sistema nervioso).
- puede afectar cualquier órgano o sistema, produciendo manifestaciones focalizadas de
la enfermedad, seguida de las complicaciones genitourinarias y la afectación del SNC.
- endocarditis brucelar → es la principal causa de muerte en esta enfermedad. Tiene un
marcado efecto en el sistema musculo esquelético. Puede provocar adenopatías y
esplenomegalia.

Diagnóstico:
- Cultivo: hemocultivo o cultivo de médula ósea, y en raras ocasiones por cultivo de
LCR, etc.
- Medio: Ruiz Castañeda.
- Periodo de incubación: 2 – 4 días. ¿Qué se observa? → pequeñas gotas que se deslizan
en el agar como gotas de cera resbalando por una vela.
- Lectura: emplea aparatos de lectura automática (BATEC) que son más sensibles,
debido al lento crecimiento y baja actividad metabólica de estas bacterias.
- Examen microscópico: La tinción de Gram permite hacer el diagnostico presuntivo de
la enfermedad. Aunque no es una bacteria acido resistente, no sufre decoloración con
ácidos débiles.
- Subcultivo y aspecto colonial: El subcultivo del medio bifásico en medio agar sangre o
agar chocolate. Crece al cabo de 48 horas, observándose colonias brillantes, de color
miel claro, se colorean con Gram para observar su aspecto característico,
conjuntamente se hace la prueba de la oxidasa (positiva) y aglutinación con suero
especifico frente a Brucella.
- Reacción en cadena de la polimerasa (PCR): Detecta el DNA bacteriano, es rápida,
sensible y específica permitiendo el diagnóstico de la enfermedad en auqellos casos
donde no se pueda dar una respuesta precisa.

- Diagnostico indirecto:

1. Aglutinación: Es la prueba más utilizada debido a su rapidez y sensibilidad. El

aumento significativo del título de anticuerpos es la base diagnostica de la
enfermedad. Las técnicas de ELISA típicamente utilizan proteínas antigénicas
del citoplasma de Brucella y determinan inmunoglobulinas de clase IgA, IgM y
IgG
2. Rosa de Bengala: Utiliza como antígeno una suspensión bacteriana a la que se
le ha agregado rosa de bengala, enfrentándola al suero sin diluir del enfermo. Es
muy buena para el despistaje inicial. Sus falsos negativos se limitan a enfermos
con pocos días de evolución
3. Seroglutinación en tubo o placa con pocillos: Enfrenta diluciones crecientes del
suero problema en cantidad constante de B. abortus. Este antígeno reacciona
tanto con anticuerpos de esa especie como frente al B. mellintesis y suis
4. Prueba de Coombs: Se utiliza en pacientes con brucelosis crónica en los que la
seroglutinacion es negativa por la presencia de Ac IgG no aglutinantes.
5. Seroaglutinación tras tratamiento del suero con 2-mercaptoetanol: Utiliza
solución salina al 0.85% con 0.1M de 2-mercaptoetanol. Este compuesto
destruye las moléculas de IgM, perdiendo estas su capacidad aglutinante.
6. Enzimoinmunoanalisis: Se puede detectar la presencia de los anticuerpos
específicos que seleccionemos (IgG, IgM, IgA), con altos valores de
sensibilidad. No permite criterios para discernir entre curación y evolución de la
enfermedad.
7. Inmunofluorescencia indirecta y fijación de complemento: Presentan una mayor
complejidad técnica sin aportar nada a los métodos anteriormente descritos, por
lo que no se usa generalmente. Es muy específico