UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA
LA MOLINA
FACULTAD DE CIENCIAS
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE BIOLOGÍA
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
PRÁCTICA Nº 5
IDENTIFICACIÓN DE HONGOS MEDIOAMBIENTALES Y CULTIVO EN CÁMARA
HÚMEDA
Integrantes:
Grupo (día/ hora) : A* Martes de 11am-1 pm
Fecha de la práctica : 17/09/19
Fecha de entrega del informe : 24/09/19
2019-II
1. INTRODUCCIÓN
En la naturaleza, la mayoría de los microorganismos no se encuentran aislados, sino
integrados en poblaciones mixtas. Para llevar a cabo el estudio de estos microorganismos y
de sus propiedades, es necesario separar unos de otros y trabajar con especies aisladas,
obteniendo cultivos axénicos o puros. Un cultivo axénico o puro es aquel que contiene un
sólo tipo de microorganismo y que procede generalmente de una sola célula; el crecimiento
de ésta origina, en medio sólido, una masa de células fácilmente visible que recibe el
nombre de colonia. Para obtener cultivos axénicos o puros a partir de una población
microbiana mixta, se utilizan las denominadas técnicas de aislamiento, que fueron
desarrolladas durante el siglo XIX. (Stanier, 1992)
Las esporas fúngicas son componentes normales de ambientes externos e internos. El
aire de muchos ambientes internos también contiene esporas. Actualmente, se conoce que
el aire presente en los ambientes exteriores puede ser la fuente de esporas fúngicas
contaminantes de los ambientes internos. A su vez, muchos de estos últimos pueden servir
como sitios de amplificación para el crecimiento de los hongos. Así, cuando se presenta una
alta humedad, las esporas pueden germinar y el hongo puede crecer produciendo miles de
nuevas esporas que utilizan la materia orgánica de esos sitios (Yang & Johanning, 1993).
La mayoría de los hongos presentes en los ambientes internos son saprófitos, porque
ellos obtienen lo que necesitan para su metabolismo de materiales muertos, materia
orgánica o sustratos como madera, papel, pintura, suelo, polvo, piel y alimentos. (Albright,
2001).
De esta manera, los restaurantes, bibliotecas, oficinas, salones de clases y otros, son
lugares aptos para el desarrollo y mantenimiento de estos microorganismos que pueden
causar daño sobre los distintos materiales, utensilios, insumos, entre otros con los que las
personas que tienen contacto. (Mantilla, 2016)
Nosotros hemos recopilado muestras del comedor y restaurantes de la universidad, entre
otras muestras para poder identificar los géneros de hongos presentes en el medio de
ciertos lugares de la universidad.
2. OBJETIVOS
● Determinar los géneros de hongos más frecuentes presentes en el medio ambiente.
● Mediante la observación macroscópica, establecer características típicas para poder
reconocerlas en adelante.
● Determinar las características del desarrollo vegetativo de los hongos a través de un
cultivo en cámara húmeda y mediante observaciones periódicas al microscopio
3. MATERIALES Y MÉTODOS
a. Identificación de Hongos Medioambientales
Materiales:
- Aislamientos de hongos medioambientales en placas de agar
sabouraud.
Método:
Observación Macroscópica
Observación Microscópica
b. Cultivo en Cámara Húmeda
Materiales:
- · Placas Petri con colonias de hongos aislados del medio ambiente.
- · Agua destilada estéril.
- · Dispositivo para cultivo en cámara húmeda.
- · Mechero de alcohol.
Método:
4. RESULTADOS Y DISCUSIONES
identificación de hongos ambientales:
PLACA 1
Lugar de exposición: restaurant ¨huerequeque¨
tiempo de exposición: 15 minutos
tiempo de incubación: 7 días
En esta placa petri con agar sabouraud se logró aislar hongos del medio ambiente, en este
caso, la muestra fue expuesta en el restaurant Huerequeque como se muestra en la
imagen, se formó una sola colonia que cubrió toda la placa de la cual se extrajo una
muestra para saber a qué género pertenece
observación macroscópica:
-se encuentra una gran colonia
-color blanca superficialmente y vista desde abajo color negro
con toques negros a los lados
-forma casi circular debido a que cubre toda la placa
-aspecto aterciopelado
observación microscópica:
-presencia de hifas no tabicadas
-presencia de esporangios
-presenta esporangióforos
-presenta tonalidad castaña
según las características mostradas macro y microscópicamente se puede saber la división
a la cual pertenece el hongo, en este caso, la muestra pertenece a la división zigomiceto, y
siendo del género rhizopus. Según Forbes et. al.(2009) las características que lo
demuestran, primero es la presencia hifas largas en forma de cintas que no presentan
tabiques, y la forma más específica de reconocerla es que presenta estructuras fructíferas
sacciformes(esporangios) en la parte terminal que producen esporas esféricas de color
castaño, y lo que la diferencia de otros zigomicetos como el mucor sp. es que el rhizopus no
presenta rizoides, que son estructuras similares a raíces que fijan el hongo a la superficie.
PLACA 2
Lugar de exposición: comedor universitario
tiempo de exposición: 15 minutos
tiempo de incubación: 7 días
En esta placa petri con agar sabouraud se logró aislar hongos del medio ambiente, en este
caso, la muestra fue puesta en el comedor universitario y de las cual se puede observar la
presencia de varias colonias la cuales varían en tamaño y color. de esta se extrajo una
muestra que fue diferente a la muestra anterior para así identificar a qué género pertenece
observación macroscópica:
-se encuentra una colonia de tamaño mediano
-color negro superficialmente y vista desde abajo
-forma casi circular debido a que se encuentra
en el extremo de la placa
-aspecto aterciopelado
observación microscópica:
-presencia de hifas tabicadas
-presencia de conidióforos
-presencia de conidios
-pigmentación castaño dorado
según las características mostradas macro y microscópicamente se puede saber la división
a la cual pertenece el hongo, en este caso, la muestra pertenece a la división ascomiceto,
siendo del género alternaria sp. Según Forbes et. al.(2009) las características que lo
demuestran, es la presencia de hifas tabicadas que presentan un color castaño dorado;
presenta en general conidióforos simples, aunque en algunos casos son ramificados, estos
conidióforos presentan conidios con forma de palillos de tambor con tabiques horizontales y
longitudinales. Este es un hongo que se presenta en plantas y es causantes de
enfermedades y causa putrefacción de esta, en algunos casos causa alergias en las
personas cuando sus esporas son respiradas.Méndez et. al.(2008)
CULTIVO EN CÁMARA HÚMEDA:
Cladosporium sp
Características macroscópicas
Las colonias presentaron color verde petróleo,
aterciopeladas y de forma circular, en el centro presenta
una elevación.
Características microscópicas
Conidióforos anchos y poco ramificados. Poseen
ramoconidios con septos. Los conidios tienen pared verrugosa.
Según Forbes y col. (2007) la velocidad de crecimiento de los hongos es importante para su
identificación, pero este puede variar según la cantidad de inoculo presente en la muestra, así que es
necesario utilizarla junto con otras características.
De acuerdo con estudios realizados en Norteamérica y Europa, las esporas de
Cladosporium están circulando en el ambiente todo el año. Sin embargo, la concentración o
la población es extremadamente baja durante el invierno. El crecimiento de las especies de
Cladosporium son diferentes dentro de las casas y otros edificios depende de la
concentración de los ambientes externos. La concentración también puede estar influenciada
por las fuentes interiores del crecimiento.
5. CONCLUSIONES
● Se logró demostrar que los hongos son organismos cosmopolitas ya que el
muestreo se dio en diferentes lugares a diferentes horas y las colonias
presentadas en las placas mostraban repeticiones de las mismas que al
microscopio se reconocía que pertenecían al mismo género.
● Se demostró que la clasificación de hongos se basa en la observación de
hifas, si estas son septadas o aseptadas; si presenta conidios o
esporangios, la forma y el tamaño de estos; etc. Además si presenta
esporangios, observar alguna zona que presente rizoide o no.
● Se determinó que en el crecimiento vegetativo hay ausencia de órganos
reproductivos, y al pasar los días el hongo presentará hifas vegetativas
indiferenciadas en los extremos.
6. BIBLIOGRAFÍA
- Forbes, B. et. al. 2009. Bailey & Scott; diagnostico microbiologico. 12a
edicion. Argentina. página 659-660 y 692-693
- Méndez, J. et. al. 2008. Alergia: enfermedad multisistémica: fundamentos
básicos y clínicos. México. página 89-90
- Mantilla, K., Gámez, D., Muñoz, S., y Dominguez, O. (2016). Aislamiento e
identificación de hongos ambientales presentes en áreas de almacenamiento
de material bibliográfico y oficinas en la Universidad de Santander UDES
Bucaramanga. Fac. Cienc. Salud UDES, 3(1), 39-40.
http://dx.doi.org/10.20320/rfcsudes.v3il.s1.p025
- Stainer, R; Ingraham, J; Wheelis, M; Painter, P. (1992). Microbiología.
Segunda edición. Reverté. España. 11- 13 pp.
- Albright, D. (2001). Efectos en la salud humana de la exposición a
micotoxinas en el aire en ambientes interiores contaminados con hongos.
Seguridad Profesional, 46(11), 26-28.
- Yang, C. & Johanning, E. (1997). Hongos en el aire y micotoxinas. Manual de
microbiología ambiental, (651- 660). Washington: ASM Press.