HIALOHIFOMICOSIS
- Hifas tabicadas hialinas
- Agentes más comunes son Aspergillus y Fusarium
- Son hongos oportunistas→ afectan a inmunosuprimidos→ pacientes oncológicos→ generalmente por vía
aérea, pero también diseminada, cutánea, ótica, oftálmica, etc.
Si el médico sospecha de una infección fúngica invasiva:
1. Aspergillus
2. Fusarium
3. Scedosporium
Toma de muestra
- Suele ser Lavado bronqueoalveolar (LBA), LCR, mini LBA, aspirado traqueal, etc.
- Llegará en tubos con 10-15 ml aprox.
- Se centrifuga 5 minutos a 3500 rpm.
Examen directo
- Se realizan dos preparaciones con el sedimento con KOH 20% + tinta → una se observa ahora y la otra al día
siguiente o se observan ambas y ambas se ven al día siguiente también.
- Se observan hifas tabicadas hialinas (con ángulos de 45°, aunque no siempre es esto)
Cultivo
- Se siembran 4 tubos de agar saboraud con cloranfenicol.
- 25-27°C por 30 días
- Crecen a los 15 días aprox.
- (cicloheximida inhibe a Aspergillus y Penicillium, por eso no se siembra en Mycosel)
Galactomana
- Es un ELISA que determina la presencia del antígeno galactomanana, que se encuentra en la pared de algunos
hongos, está validado en LBA y sangre, hay puntos de corte de los indicadores, en sangre es 0,5 y en LBA es 1.
- Aparte de Aspergillus, también pueden dar positivo Fusarium y Alternaria.
- Sirve para diferenciar de agentes de mucormicosis que no tienen galactomana y producen cuadros similares.
- También sirve para hacer control de tratamiento ya que ira disminuyendo a medida que el hongo vaya
muriendo con la terapia.
- Es una prueba indispensable en los hospitales públicos.
- Que salga negativo no descarta aspergillosis ya que este saldra (-) en suero y (+) en LBA
- CAPA: Aspergilosis pulmonar asociada a covid→ se toma la muestra → puede ser aspirado traqueal o mini BAL
(mini LBA) → se hace galactomanana. Estas muestras no tienen punto de corte en el galactomanana, pero se
hace y lo interpreta el médico, los valores que dan los pacientes CAPA son de 4-5 aproximadamente.
Lateral flow
- Inmunohistoquímica. Da resultados positivo o negativo, no sirve para hacer seguimiento.
- Para Aspergillus, Fusarium, Rhizopus, Sceudosporium, Candida
Tratamiento:
- Voriconazol
- Isavuconazol, en caso de pacientes covid ya que voriconazol interfiere con los corticoesteroides.
Aspergillus sección Fumigati→ principal agente de
aspergilosis invasiva en el mundo
- Colonia verde petroleo
- conidióforo flexuoso con fialide uniseriada
columnar, conidios muy pequeños
Aspergillus sección Flavi
- La colonia es verde limón o verde claro
- Fialide biseriada radiado o uniseriada columnar
- Conidios rugosos
- El conidióforo es grueso con conidios rugosos.
Aspergillus sección Nigri
- Colonia negra
- conidios negros, conidioforo grueso, fialide biseriada
radiada
- conidios rugosos oscuros
Aspergillus sección Terrei
- Colonia color café tierra
- conidióforo flexuoso, fialide biseriada columnar (como
un abanico)
- RESISTENTE INTRINSECAMENTE A ANFOTERICINA B
➢ Un caso de Valdivia donde un tractorista producto de la tierra presentó Fusarium en la córnea→ queratitis
micotica.
➢ Muestras de córnea se siembran en agar sangre, agar chocolate y agar sabouraud. Con Giemsa o KOH se
visualizarán las hifas en un directo al fresco.
➢ El principal agente en los ojos es Fusarium, donde hay un 50% de probabilidad de perder el ojo, y en segundo
lugar está aspergillus
Pulmón Córnea Sangre
1° Aspergillus Fusarium Fusarium
2° Fusarium Aspergillus Scedosporium
3° Scedosporium Scedosporium Sarocladium
Sangre: La primera causa es Fusarium, el segundo Scedosporium y en tercer lugar todos los que tengan cabezas
mucosas y que puedan crecer en sangre (Acremonium, Sarocladium, Exophiala, etc).
**Es en hialohifomicosis, ya que el principal, por ejemplo en sangre son levaduras
** NUNCA aspergillus ni mucormicosis en sangre
Fusarium
- Es el segundo agente de IFI (infección fúngica invasiva).
- Se debe tener cuidado con los pacientes oncológicos pediátricos y sobre todo los neutropénicos, es grave
porque por lo general no viven
- Causa neumonía, sinusitis y lesiones en la piel.
- Es el número 1 en hemocultivos.
- Es el mas agresivo en infecciones oculares.
Diagnóstico
- Examen directo
- Cultivo
Fusarium complejo Solani
- La colonia es membranosa, es difícil de sacar del medio de
cultivo. (También son membranosas: Acremonium y
Sarocladium)
- Colonia membranosa de distintos colores (verde, cafe,
azul, violeta).
- Con objetivo de 40x se ven hifas tabicadas hialinas.
- Conidioforos largos con monofialides, abundantes
fragmoconidios euseptados de 3-5 septos (macroconidios)
y microconidios fusiformes.
- Acremonium es un hongo delicados y finos además se ven estructuras de fascículos (varias hifas pegadas)
como tortas de mil hojas.
- Tiene formas sexuadas con peritecios.
- In vitro es resistente a todo, sin embargo se trata con anfotericina b y voriconazol.
Fusarium dimerum
- Colonia naranja membranosa. (característico)
- Fragmoconidios como platanos y todos del mismo
tamaño. (fialide)
*A especie solo se llega por biologia molecular, se deben
secuenciar muchos genes y el 80% de las muestras corresponden
a solani.
Sarocladium kiliense.
- Conidios en cabezas mucosas.
- Produce fasciculos: hifas de unen y se entretejen (corona
de cristo)
- Es delicado, memebranoso y fino.
- Es menos virulento que Fusarium
- Afecta a pacientes oncológicos→ más del 60% de los
casos de sepsis
Scedosporium apiospermum
● Colonias vellosas y secas comienzan de color
blanco y se van haciendo grises con los dias
(raton)
● Tiene varios sinanamorfos (formas asexuadas):
Graphium y sinema.
● Una forma es conidióforo como palito de
fósforo los cuales terminan en una espora de
base plana.
● Es un hongo anelídico, ya que tiene conidios de
base plana
● Espora de base plana en tejido se puede ver, al igual que Lomentospora→ conidios en tejido.
● Sinema o grafium→ ramillete de flores
● Forma sexuada (Teleomorfo): Cleistotecio con ascos y ascosporas→ Pseudallescheria
● Le gusta en SNC
● Asociado a asfixia por inmersion, asi llegaria al SNC
● Produce ademas micetoma eumicetico
● Afecta a inmunocompetentes
**Lo peor que puede tener un paciente es Fusarium, Lomentospora o Candida auris, ya que son muy resistentes a los
antifúngicos.
Purpureocillium lilacinum
● Colonia púrpura
● Conidioforo y fialide como brocha
● Micromorfologicamente es igual a Penicillium, no
tienen vesícula.
● Principalmente produce queratitis micótica y en
segundo lugar infección fúngica diseminada.
● Se encuentra en el agua potable
● Es oportunista
Purpureocillium lilacinum Penicillium Paecilomyces
Colonias púrpura Colonias verdes Colonias amarillas arena
Paecilomyces variotii
● Colonias color amarillo arena → playa
tropical
● Afecta al ojo→ queratitis micotica
● Ha sido aislado de hemocultivo.
● Micromorfologia: igual que penicilium y
que purpurocillium.
● Solo con biologia molecular se puede
llegar a especie.
Scopulariopsis brevicaulis
- Micosis superficial→ es queratinofílico, le
gusta la queratina. Pero solo la piel y uñas,
no el cuero cabelludo (como los
dermatofitos)
- La colonia de color café granular con
surcos→ muchos conidios.
- Tiene conidios de base plana (anelídico) en
cadenas basipetas (mas joven en la base) se pueden encontrar los conidios en las hifas.
- Es un agente de hialohifomicosis.
- Puede producir conidio en tejido, igual que scedosporium.
- Produce cleistotecios
FEOHIFOMICOSIS
Al examen directo: Hifas tabicadas negras o levaduras
negras.
Alternaria spp.
● Infección fúngica invasiva
● Hifas tabicadas negras geniculadas (como rodillas)
● Cadenas con dictioconidio → con septos
transversales y horizontales (caparazon de tortuga)
● Cuando es joven puede tener fragmoconidios.
● Puede que desde pacientes se vean hifas no pigmentadas sobre todo en rinosinusitis.
● Da galactomanana +
Curvularia spp.
● Fragmoconidios curvos euseptado.
● Crecimiento simpodial
● Hifas tabicadas, geniculadas.
● Colonias grises o beige
Pleurostomophora richardsiae
● Caso en Valdivia por una astilla.
● Es parecido a Phialophora, con cabeza mucosa
● Fialidico
Lomentospora prolificans
● Se diferencia con Scedosporium porque
Lomentospora no crece en mycosel, por ser un hongo
negro
● Anélido
● Conidióforo hinchado
● Resistente a todo
Cladophialophora
● Cadenas acropetas con conidios largos sin
cicatrices
● Afecta el SNC→ es un patógeno verdadero
● muy peligroso, trabajar en cabina de seguridad
● puede producir talo muriforme o hifa tabicada
hialina
Neoscytalidium dimidiatum
● Artroconidios negros en cultivo
● Sinanamorfo : picnidio
● Examen directo: hifa tabicada hialinas o hifas
tabicadas negras
● Colonia inicialmente sera blanca y con los dias
se hará más gris por produccion de melanina
● Le encantan las uñas y la piel
Exophiala dermatitidis
● Levaduras negras.
● Se ha aislado de hemocultivos de pacientes en Valdivia.
● Se toman 2 frascos de hemocultivos por pico de fiebre.
● Si aparecen burbujas se hace tinción de gram de ese frasco,
es difícil llegar a nivel de especie.
● En cultivo se comporta como levadura y al tercer dia colonia
comienza a ser mas aterciopelada
● Produce muchos cuadros clinicos
● Tratamiento con voriconazol.
● Es sensible a todo.
Aureobasidium pullulans
● Resistente al cloro, crece en el agua potable.
● Artroconidios endógenos, están por dentro.
● Levadura negra.
● Pacientes oncológicos.
● Colonia levaduriforme
Tratamiento de feohifomicosis; ITRACONAZOL
Tincion fontana mason: para ver produccion de melanina
MUCORMICOSIS
- Se caracterizan por hifas cenocíticas
- La manifestación más frecuente es rinocerebral. Segunda más común es mucormicosis pulmonar.
- Estos hongos afectan especialmente a diabéticos ya que les encanta el azúcar, se unen a receptores de azúcar
y hierro en la nariz (inhalación de esporas).
- Suelen entrar y causar infección por ingestión y trauma: tatuajes, accidentes de motos, etc.
- Tienen la capacidad de degradar el complemento lo que le permite llegar al SNC mas rápido.
- En Chile lo más frecuente es Rhizopus y Mucor.
- Producen necrosis porque tamaño de la hifa revienta los vasos sanguíneos.
- Tratamiento es anfotercina B
Muestra → biopsia
- Se lava en solución antibiótica (suero fisiológico mas por ej. Gentamicina) y se corta suavemente, la biopsia
debe tratarse lo más delicada posible
- Podría también ser una muestra de torula con secreciones paranasales
Examen microscópico directo.
- Se observan Hifas cenocíticas (pueden tener septos pero son escasos)
- Las hifas son gruesas, anchas, en angulo de 90° generalmente, pueden estar en ángulos de 40°.
- Si llegan biopsias puedo teñir con PAS o gomori grocott.
Cultivo
- Sembrar en 4 agar Sabouraud (idealmente 4% dextrosa, 2% es lo normal) o agar papa
- Cultivar a 28°C y hongo debería crecer a los 5 dias aprox.
- Se puede comprar pan de panadería, se le saca el corazón al pan y se coloca en un tubo→ autoclave→ se
siembra el hongo.
Rhizopus
- Primer agente de mucormicosis
- Es un hongo que crece muy rápido, de 5-7 días ya se puede
observar la colonia.
- Colonia gris con puntos negros con micelio abundante.
- Esporangio oscuro→ colonia gris con puntos negros→
esporangio.
- Es un hongo termofílico. (36-46°C)
- Tiene un rizoide en la base del esporangióforo.
- En Chile afecta a los pacientes oncológicos y diabéticos
descompensados.
Mucor
- No tiene rizoide.
- La colonia no tiene puntos negros
- Tiene esporangio globoso, esporangióforo puede ser ramificado y
columela.
Lichtheimia.
- Es el tercer agente de mucormicosis.
- Tiene rizoide en cualquier lugar menos en la base.
- Esporangios ovalados y apófisis como un cono
*Siempre se debe sembrar en tubo y usar microscopio estereoscópico no en placa porque contamina.
Saksenaea.
- Tiene esporangio que se asemeja a una
corneta o un matraz.
- Es un hongo diferente a los anteriores en
cuanto a morfología.
- Se encuentra en Asia.
- Es un hongo al que le gusta el tejido
diferente al rinocerebral
Apophysomyces.
- Se han visto casos después de tornados
donde lanzan todo, piedras que pueden ir
contaminadas con caca de vaca que tienen
el hongo→ así puede llegar al ser humano.
- La columela tiene un formato que se
asemeja a un embudo.
- En Chile es raro.
Cuninghamella y apophysomyces les gustan los lípidos por eso causan manifestaciones cutáneas también.
Cunninghamella.
- Esporangióforo, vesícula y esporangiolos.
- Se encuentra en Europa.
- Cuadros clínicos pulmonares.
*Las biopsias se deben procesar lo más rápido
posible.
Syncephalastrum.
- Es un hongo contaminante en los laboratorios.
- Parecido a Aspergillus pero la colonia tiene un micelio abundante.
- Tiene esporangioforo, meroesporangio (una membrana donde están
los esporangios) y esporangiosporas.
Ultimas 4 especies tienen todas colonias blancas y algodonosas.
Microcultivo→ hongos filamentosos.
- Se utiliza un medio que no tiene muchos
nutrientes, mientras más pobre sea el
medio mejor, puede ser el TLA, extracto
de malta, avena, papa, lactrimel.
- Se cortan cuadritos y se ponen en la
superficie de la placa, se sollama un
cubreobjeto y se coloca en la superficie.
- Después de crecer 15-20 dias? se coloca
una gota de lactofenol en el portaobjeto
y se pone el cubreobjeto sobre el porta.
- Nunca hacer para Mucormicosis pq no crecera nada
*en mucor no hacer microcultivos, con aguja se
saca directo y lactofenol