Principios de la Biología
BIO-006
Laboratorio N°5:
Mecanismos de Transporte de Membrana.
Integrantes: Consuelo Aguilar Avila
Macarena Burgos Solis
Constanza Cardenas Pacheco
Sofía Leal Peña
Docente: Francisco Marquez Torres.
Valdivia, Miércoles, 31 de Mayo de 2023
Introducción:
La membrana plasmática es parte de la célula y forma una capa lipídica,
como característica posee una gran elasticidad, es semipermeable y
frecuentemente presenta repliegues, ondulaciones e invaginaciones por lo que
facilita la adhesión de una célula a otra por lo que aumenta la superficie con
contacto intracelular y se facilitan los intercambios entre células, como modelo de la
membrana plasmática contamos en que hay una doble capa de fosfolípidos con
cabezas polares hidrofílicas (afinidad por el agua) y dos colas hidrofóbicas (repelen
el agua) compuestas por ácidos grasos saturados e insaturados.
(Cervantes, M. y Hernandez, M. 2015).
Como funciones más importantes de la membrana, delimita a la célula e
impide el escape de su contenido, por otra parte debemos considerar diversas
funciones tales como recibir y transmitir señales donde se controla el flujo de
información, esto es posible gracias a que algunas proteínas funcionan como
receptores para estímulos externos. (Cervantes, M. y Hernandez, M. 2015).
Además de delimitar compartimientos intracelulares, mantener una
permeabilidad selectiva para controlar el paso de sustancias hacia el exterior e
interior de la célula, para controlar el flujo de sustancias de la célula por medio de la
membrana plasmática se realiza a través de dos tipos de transportes los cuales son
transportes pasivo y activo. (Cervantes, M. y Hernandez, M. 2015).
El transporte pasivo va a favor del gradiente de concentración lo que quiere
decir que no hay gasto de energía, dentro de este encontramos diversos procesos
en el cual fluyen los intercambios de sustancias como por ejemplo difusión simple la
que consiste en que la sustancias se difunden de forma pasiva sin gasto de ATP, las
moléculas que que pasan por difusión simple tienen características como que son
pequeñas, apolares lo que quiere decir que son sin cargas y también son
liposolubles por lo que atraviesan directamente la membrana, en el caso del H2O,
ocurre por ósmosis lo que quiere decir que la membrana se vuelve permeable,
gracias a la proteína “acuaporina” y el agua pasaría directamente, el agua al querer
salir al medio extracelular ocurre por solución hipertónica a través de un proceso
llamado crenación en cambio al ser una solución hipotónica penetrara en la célula
de manera que esta se hinchará y podría causar su ruptura a lo que le llamamos
lisis o citolisis algo similar podemos observar a partir de células vegetales cuando
las soluciones hipertónicas, la célula se deshidrata lo que puede causar que la
membrana se separe de la pared vegetal lo cual se le llamas plasmolisis.
(Cervantes, M. y Hernandez, M. 2015).
También tenemos la difusión facilitada, para que pueda ocurrir el flujo de
sustancias se necesita canales ionizados los cuales permiten el paso de solutos de
un tamaño pequeño los que están formados por una o varias proteínas de
transmembrana y están presentes en todas las células. (Cervantes, M. y Hernandez,
M. 2015).
El otro tipo de transporte es el activo, el cual va en contra del gradiente de
concentración y por lo tanto requiere gasto de ATP, este tipo de transporte permite
el paso de solutos con ayuda de proteínas transportadoras. Para realizar el
transporte de macromoléculas se produce a través de un proceso llamado
endocitosis el cual es un sistema donde se produce una extensión de la membrana
y el citoplasma donde encierran el material que será internalizado por la célula y los
materiales logran entrar a la célula, este fenómeno comprende diversas
modalidades una es la fagocitosis la que implica la corporación de resto celulares y
microorganismos por medio de vesiculas fagociticas, una vez ya en el citoplasma el
contenido comienza a ser degradado por enzimas lisosomales, otra modalidad
dentro de la endocitosis es la pinocitosis la cual consiste en entrar nutrientes o
ingesta de líquidos mediante invaginaciones y también se encarga de introducir
sustancias de reserva a la célula.
Por otra parte tenemos la exocitosis en la cual ocurre lo contrario de la endocitosis y
la función de esta es la liberación al exterior del medio extracelular por productos
elaborados en ella utilizando como secreción las cosas que nos sirven y cómo
excreción lo que es sustancias y desechos. (Castro.M y Nelson.P. 2015).
En el efecto de la temperatura en la difusión, ambas son dependientes del
movimiento de los átomos, y por tanto, son susceptibles a los efectos antes
mencionados de temperatura. A medida que la temperatura aumenta, el proceso de
difusión ocurre más rápidamente y las moléculas más rápidas se extienden hacia
afuera o se mezclan con otras moléculas más rápidamente. (Molano, L. y Triana, A.
2013)
Objetivo General.
● El principal objetivo de este laboratorio es lograr observar los distintos tipos
de transportes que se producen a través de la ósmosis y difusión, analizar y
comparar cambios producidos en la morfología como también en difusiones a
través de temperatura y tiempo.
Objetivo Específico.
● Reconocer cambios en la morfología de células eucariotas utilizando el
microscopio óptico.
● Comprobar la difusión y ósmosis a través de una membrana semipermeable.
● Observar el transporte de líquidos a través de células vegetales.
● Observar y distinguir la plasmólisis en células vegetales.
● Distinguir y comparar la difusión de en solvente con distinta temperatura.
Materiales.
Durantes el laboratorio utilizamos los siguientes materiales:
1.- Transporte y osmosis en células vegetales.
● 1 Probeta de 500 ml.
● 1 Regla de 15 cm.
● 1 bisturí.
● 1 rama de apio.
● Colorante violeta cristal.
● Cronómetro de celular.
● Agua.
2.- Osmosis en células vegetales
● Epidermis o catáfilo de cebolla.
● Pinzas.
● Bisturí.
● 1 portaobjetos.
● 1 cubreobjetos.
● Papel absorbente.
● Solución salina al 0.9 % y al 20%.
● Agua destilada .
● Pipeta Pasteur.
● Microscopio óptico.
● Papel de seda.
3.- Efecto de la temperatura en la difusión
● 2 Vasos precipitados de 50 ml.
● 25 mL de agua a 4°C.
● 25 mL de agua a 37°C.
● 1 Gota de colorante verde malaquita.
● Cronómetro de celular.
Métodos
1.- Transporte en células vegetales:
Para comenzar este procedimiento tomamos una rama de apio haciendo un
corte transversal con el bisturí, sacando la parte baja del apio de manera que
cupiera en la probeta. Al tener el apio listo, agregamos 300 mL de agua a la probeta
y 15 gotas de violeta cristal, procedemos a homogeneizar y sumergimos el apio
durante 3 minutos, al pasar los 3 minutos retiramos el apio, realizando 5 cortes
verticales de 10 cm en el tallo del apio y seguidamente procedemos a sumergirlo
durante 3 minutos, al paso de este tiempo retiramos el primer corte para observar si
la tinción subió por el tejido del tallo, nuevamente lo sumergimos por 3 minutos más
retirando el segundo corte y volviendolo a sumergir, contamos 3 minutos, retiramos y
hacemos un tercer corte, repitiendo el mismo procedimiento por 3 minutos, volvemos
a sacar el apio de la probeta y retiramos el cuarto corte, procedemos a sumergirlo
por 3 minutos y sacamos de la probeta, retirando el quinto y último corte para
verificar si hubo transporte dentro del tallo de apio.
2.- Ósmosis en células vegetal:
En este segundo procedimiento, comenzamos retirando 3 trozos de catáfilo
de cebolla y con ayuda de pinzas, colocamos un trozo de catafilo de cebolla sobre el
portaobjeto número 1, seguidamente el mismo procedimiento lo repetimos en el
portaobjetos número 2 y 3, al tener lista esta parte del proceso esperamos de 3 a 4
minutos aproximadamente. Continuamos rotulando cada portaobjetos con cada
solución que debemos verter. Con ayuda de una pipeta pasteur, en el portaobjetos
número 1 le agregamos 3 gotas de solución salina al 0.9 % y procedimos a taparla
con el cubreobjetos, limpiando los excesos de solución con el papel absorbente.
Para continuar, en el portaobjetos número 2 le agregamos 3 gotas de solución salina
al 20% y procedimos a taparlo con el cubreobjetos, limpiando los excesos de
solución con papel absorbente. Para finalizar tenemos nuestro portaobjetos número
3 al cual le agregamos 3 gotas de agua destilada y colocamos el cubreobjetos,
limpiando los excesos de solución con el papel absorbente.
Una vez obtenidas las 3 muestras, procedemos a limpiar los lentes oculares y los
objetivos del microscopio, y observamos las muestras en la medida x40 y tomamos
fotos a través del microscopio.
3.- Efecto de la temperatura en la difusión:
En el tercer y último procedimiento utilizamos dos vasos precipitados, los
cuales comenzamos rotulando, como vaso número 1, al cual le agregamos 25 mL de
agua a 4°C y vaso número 2, al cual le agregamos 25 mL de agua a 70°C.
Inmediatamente, proseguimos a depositar una gota del líquido verde de malaquita,
al mismo tiempo en cada solución de cada vaso precipitado y a continuación,
procedimos a tomar el tiempo en que se demoró en disolver la gota verde de
malaquita en cada solución.
Resultados.
1. Transporte y ósmosis en células vegetales:
En este primer procedimiento, luego de agregar el ramo de apio con el corte
transversal a la probeta con solución de agua y violeta cristal, obtuvimos
como resultado que no hubo tinción.
Luego de sumergir la rama de apio con el primer corte de 10 cm, observamos que
no hubo tinción.
Al sumergir el ramo de apio con el segundo corte de 10 cm en la solución de agua y
violeta cristal, logramos apreciar que el tejido tuvo una tinción de 9 cm.
Al sumergir por tercera vez la rama de apio con el tercer corte, nos dio como
resultado, que en la base se tiñó de color violeta de 1 cm, en el centro no logramos
observar una tincion y en la parte superior, si existe tincion de 1 cm.
Luego de sumergir la rama de apio con el cuarto corte de 10 cm en la solución de
agua y vergenciana, observamos que se logró pigmentar violeta la mitad del tejido.
Después de sumergir la rama de apio con el quinto corte de 10 cm, nos dió como
resultado que no existe tinción.
2. Ósmosis en células vegetales:
Como resultado de observar a través del microscopio óptico la epidermis de cebolla
con agua destilada, logramos apreciar que no existe una separación de membrana.
Tras observar en el microscopio óptico la epidermis de cebolla con solución salina al
0.9% observamos la aparición de la plasmólisis, que quiere decir que se separó la
membrana plasmática de la pared celular.
Apreciamos a través del microscopio óptico que en la epidermis de cebolla con
solución salina al 20% si ocurrió la plasmólisis, donde la membrana plasmática se
separa de la pared celular.
3. Efecto de la temperatura en la difusión:
En este último procedimiento, observamos que la gota verde de malaquita, logró
difundirse más rápido en la solución número 2, que corresponde al agua hervida.
Otra observación que apreciamos es que en la solución de agua fría, el color es más
intenso que en la solución con agua hervida.
Discusión
Como grupo logramos apreciar que la membrana plasmática es una
estructura clave en las células, ya que se encarga de proteger el interior de la célula
y controlar el flujo de sustancias tanto en el exterior como interior de esta. Además,
es importante destacar que la membrana es selectiva pues permite la entrada y
salida de ciertas moléculas mientras que restringe el paso de otras, lo que es
fundamental para la supervivencia y función celular, sin embargo al momento de
realizar el experimento para observar el transporte mediante el tallo de apio
notamos que no ocurrió de la manera esperada pués en algunos tallos el agua
mezclado con tinta no subió por tejido del apio, esto quizás a que el tiempo
requerido en el experimento no fue suficiente para que ocurra la osmosis.
De igual forma, los procesos de transporte pasivo y activo realizados a través
de la membrana plasmática son esenciales para el adecuado funcionamiento
celular. El transporte pasivo se realiza a través del gradiente de concentración para
mover las sustancias y no requiere de gasto de energía, mientras que el transporte
activo necesita de energía (ATP) para mover las sustancias en contra del gradiente
de concentración, en el caso del tallo de apio ocurrió un tipo de transporte pasivo.
En cuanto a la plasmólisis es un proceso que ocurre en las células vegetales
por la selectividad permeable de la membrana citoplasmática y la permeabilidad de
la pared celular, esto frente a una solución salina. En el experimento dos, pudimos
determinar que esto sí ocurre, debido a que pusimos catafilo de cebolla con
diferentes concentraciones salinas y en estás si ocurrió la plasmólisis, es decir, se
separó la membrana plasmática de la pared celular.
Para concluir, a medida que la temperatura aumenta, el proceso de difusión
ocurre más rápidamente y las moléculas más rápidas se extienden hacia afuera o se
mezclan con otras moléculas más rápidamente. En el experimento número tres,
logramos determinar que esto sí ocurre, debido a que utilizamos agua fría y agua a
70°C y aquí ocurrió la difusión más rápido en el vaso precipitado con agua a
temperatura alta.
Conclusión.
En base a los tres experimentos que realizamos en laboratorio pudimos
observar, que el objetivo principal de este laboratorio fue observar y analizar los
diferentes tipos de transporte a través de la ósmosis y la difusión, así como
examinar los cambios morfológicos y las variaciones en la difusión causados por la
temperatura y el tiempo. A través de una serie de experimentos utilizando ramas de
apio y epidermis de cebolla, se pudo obtener información importante sobre la
difusión y la ósmosis en células vegetales. Se observaron resultados como la tinción
del tejido de apio en soluciones de agua y violeta cristal, donde la intensidad de la
tinción varió dependiendo del corte y la solución utilizada. Además, se pudo
observar la plasmólisis en las células de la epidermis de cebolla cuando se
sumergieron en soluciones salinas de diferentes concentraciones. Por último, se
realizó un experimento utilizando una gota de malaquita para evaluar la difusión en
diferentes soluciones, y se observó que la difusión fue más rápida en la solución de
agua hervida en comparación con la solución de agua fría. En resumen, estos
experimentos proporcionaron información valiosa sobre los procesos de transporte
en las células y cómo factores como la concentración y la temperatura pueden
afectarlos.
En resumen, estos experimentos ayudaron a comprender mejor los diferentes
tipos de transporte y los cambios morfológicos asociados en las células. Y que la
membrana plasmática es un organelo fundamental en la estructura y función celular,
permitiendo el intercambio de sustancias y manteniendo la integridad de la célula.
Su capacidad de realizar procesos de transporte, así como endocitosis y exocitosis,
son fundamentales para la regulación adecuada del ambiente intracelular.
