Gluconeo-

génesis SEMANA 9-10

Las moléculas de carbohidratos en cadenas muy grandes y no se dijeren a nivel

intestinal por ende deben someterse a procesos para convertirse en otras más
simples, pero si no hay un correcto funcionamiento de ello el cuerpo responde
con una alergia u otro síntoma para hacernos saber que algo está mal en la
absorción.

El primer paso es separar las grandes cadenas de moléculas a esto le llamamos

digestión ya que los anillos se separan, el segundo paso es la absorción
que es del paso de las moléculas más pequeñas al torrente sanguíneo. Y esto
puede provocar en anormalidad la denominada hiperglucemia o
hiperglicemia que es el aumento de estas moléculas (glucosa) en el torrente
sanguíneo. Inmediatamente el organismo responde por medio de la hormona
insulina, lo que permite que la glucosa ingrese a las células reduciendo los
niveles de glucosa en sangre y entren a un proceso llamado glucólisis donde
se degradan las moléculas de glucosa para obtener piruvato o lactato
dependiendo las condiciones en las que el organismo se encuentre. Cuando dicha
glucosa pasa a ser glucosa 6-fosfato decimos que comienza la degradación.

Gluconeogénesis, es formar carbohidratos nuevos con materia prima que

no es alimento o sea materia prima diferente a los carbohidratos, básicamente
se toman dos alimentos encontrados en uno es el tejido adiposo que empieza
a desintegrarse para formar glucosa, y cuando esta se termina el organismo
tiene otra fuente el músculo, el cual se desintegra, obteniendo aminoácidos
que se transformaran en glucosa partiendo del ciclo de Krebs y posteriormente
entrando a la gluconeogénesis, asimismo como producto de esa desintegración el
organismo entra en edema porque no es fácil entrar en la desintegración de
músculo.

LO CONTRARIO A LA GLUCÓLISIS ES LA GLUCONEOGÉNESIS

EN FUNCIÓN DEL TIEMPO TENEMOS DOS

Para que el organismo entre en gluconeogénesis (Formación de glucosa a
partir de no carbohidratos) tienen que haber pasado más de 8 horas, en
situaciones de emergencia o sea tiempo menor a 8 horas en las que el cuerpo
necesita emergentemente glucosa entra en un proceso a lo que se le llama
Glucogenólisis (degradar glucógeno para obtener glucosa).
La glucogénesis que es la formación de glucógeno a partir de glucosa ya que
hay un exceso de glucosa, como cuando se consumen muchos carbohidratos y en
el organismo hay un exceso de glucosa que una parte es usada en la glucólisis y
en resto es enviado a formar glucógeno. Pero si yo consumo todavía más
carbohidrato y estas dos vías ya están abasto este se convierte en grasa o
glicerol o sea tejido adiposo.
Dos vías en las que el organismo utiliza para reducir la glucosa y mantener la
glucemia en rangos normales son la glucólisis (la principal) y
glucogénesis, en estas dos vías la hormona por excelencia es la insulina,
en casos de diabetes se administra insulina que normalmente es liberada por el
páncreas.
Las hormonas que activan el hecho de que aumente los niveles de glucosa y
asimismo mantener la glucemia normal en el organismo son la adrenalina,
noradrenalina y glucagón que se turnan de acuerdo a las situaciones
específicas en las que se encuentra nuestro organismo, por ende, estas trabajan
junto al gluconeogénesis y la glucogenólisis.
  Como en el momento que una persona se le da conocer que falleció un su
pariente.
 Como cuando nos encontramos en clase y están realizando preguntas.
 Como cuando nos sometemos a peligros.
 Cuando nos sometemos a miedos.
 Cuando nos sometemos a estrés.

SON REACCIONES RÁPIDAS A LAS CUALES DEBEMOS ESTAR

PENDIENTES SIN HABER PASADO 8 HORAS. MIENTRAS QUE LAS DE
GLUCONEOGÉNESIS ES DE ACCIÓN LENTA MAYOR A 8 HORAS. POR
EJEMPLO, EN LARGOS PERIODOS DE AYUNO VOLUNTARIO.

RESUMEN 1
La glucólisis (desintegración de glucosa) y glucogénesis (formación de
glucógeno por mucha glucosa en sangre) funcionan en conjunto con la insulina Y
A su vez reducen la cantidad de glucosa en sangre, por lo tanto son muy
importantes en la (aumento de los niveles de glucosa en sangre o
sea es mayor a la glucemia).

La glucogenólisis (formación de glucosa a partir del glucógeno, en otras

palabras, desintegración de glucógeno, de acción rápida en un lapso menor a 8
horas) y gluconeogénesis (se forma glucosa cuando no se ha consumido por
un lapso mayor o igual a 8 horas y por ende de acción lenta o prolongada)
funcionan en conjunto con 3 hormonas, la adrenalina, noradrenalina y glucagón,
por lo tanto son de vital importancia en la (disminución de los
niveles de glucosa en sangre o sea es menor a la glucemia).

ASIMISMO, LA GLUCEMIA SON LOS NIVELES NORMALES DE GLUCOSA

EN SANGRE.
 GLUCONEOGÉNESIS
Ese proceso bioquímico para convertir los propulsores que no son carbohidratos
(aminoácidos glucogénicos (músculo) lactato glicerol y propionato) en glucosa o
glucógeno, cuando empezamos a consumir carbohidratos nuestro cuerpo los
convierte en glucógeno más no en glucosa ya que los niveles estás normales
debido a su formación por propulsores no glúcidos por parte de la
gluconeogénesis.

En un paciente no diabético este proceso se activa en un lapso mayor a 8 horas

mientras en un paciente diabético se pierde esto, ya que el organismo no detecta
cuando se ingieren carbohidratos y cuando no, por ende, piensa que nunca se
ingieren carbohidratos por lo tanto siempre está activa la gluconeogénesis, es la
razón por la que hay hiperglucemia. Por ello los fármacos van dedicados a
bloquear o inhibir la gluconeogénesis.

CUANDO NO HE COMIDO E INGIERO CARBOHIDRATOS MI CUERPO LOS

CONVIERTE EN GLUCÓGENO.

Si yo no consumo carbohidratos y no se da la gluconeogénesis yo puedo entrar

en coma. Por ende, es necesaria para mantener la glucemia durante el ayuno y la
inanición.

NUESTRAS NEURONAS NECESITAN DE GLUCOSA PARA HACER LA

CONEXIONES IMPORTANTES Y EVITAR COMPLICACIONES SEVERAS.

Son dos, en el citosol y la mitocondria.

En el hígado y en el riñón.

En 8 horas ciertamente.

Se convierte en la fuente de glucosa en sangre aproximadamente a las 8:00

siguientes al estado de postabsorción.
El estado postabsortivo son las 3 horas siguientes a la comida y
también define el momento de ayuno cuando nos levantamos por la mañana tras
8 horas de sueño en este estado el cambio metabólico tiene que echar mano de
sus reservas hepáticas musculares o de trabajo en la piel en forma de grasas

De acuerdo a la cantidad de alimentos se deben consumir 15% de proteínas, 30%

de grasas y un 60% de carbohidratos, pero si no consumimos glúcidos, pero
si bastantes proteínas y grasas nuestro cuerpo solo depende de la
gluconeogénesis, así son las llamadas dietas cetogénicas, donde hay 0 consumo
de glúcidos. Es muy utilizado en pacientes con convulsiones reduciendo estas
pero con control médico.

KAREN CARPENTER, es un ejemplo de las dietas cetogénicas la cual utilizo para

mantenerse esbelta, su organismo entro en crisis y muy lamentablemente
falleció.

Recuerda que
El glicerol es el precursor de TG, fosfolípidos y tejido adiposo.
La niacina (b3) cuya forma activa es el NAD, la NADH es la reducida y
la NAD+ es la oxidada.
La riboflavina (b2) cuya forma activa es el FAD, el FADH2 es la
reducida y el FAD+ es la oxidada.
Las dos partes de una reacción son una parte apo (apoenzima) y un
cofactor (activador o coenzima).
La histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina,
triptófano y valina son aminoácidos.
La fructosa 1,6-bifofosfatasa es la enzima contraria o antagónica a la
fosfofructocinasa, ya que si está trabajando la glucólisis la
gluconeogénesis no y viceversa. En los pacientes diabéticos estas dos
trabajan simultáneamente por lo tanto no son antagónicas.
Las sulfonilureas son medicamentos para diabéticos que inhiben o
suprimen la gluconeogénesis hepática.
 RESUMEN 2
¿Qué es la GLUCONEOGÉNESIS?
Es el proceso bioquímico de convertir los precursores que no son
carbohidratos (aminoácidos glucogénicos, lactato, glicerol y propionato) en
glucosa. En pocas palabras es el proceso contrario a la glucólisis, que en la
mayoría de sus reacciones utilizan las mismas enzimas, aun así, una diferencia
es que en la gluconeogénesis hay partes en las que no se utilizan enzimas pues
solo son lanzaderas.
¿Por qué es necesaria en nuestro organismo la GLUCONEOGÉNESIS?
Porque al permitir que la formación de glucosa, se hace necesaria para
mantener la glucemia durante ayuno e inanición. Ya que pasadas 8 horas sin
haber consumido alimentos, esta es la única fuente de glucosa y para ello usa
las reservas hepáticas y musculares.
¿Glucemia significa?
Son los niveles normales de glucosa en sangre.
¿Hipoglucemia significa?
Son niveles bajos respecto a la glucemia, en otras palabras, es la disminución
de las concentraciones plasmáticas de glucosa en sangre.
¿Hiperglucemia o hiperglicemia significa?
Son niveles altos respecto a la glucemia, es decir, es el aumento de las
concentraciones de glucosa en sangre.
Vía metabólica con respuesta inmediata a la hipoglicemia.
R//Glucogenólisis
Vía metabólica con respuesta más lenta a la hipoglicemia.
R//Gluconeogénesis
Hormonas que responden en la hipoglicemia.
R//Adrenalina, noradrenalina y glucagón.
¿Aproximadamente a las cuántas horas después del estado posterior
a la absorción responde la gluconeogénesis para evitar hipoglicemia
en el organismo?
R//A las 8 horas.
 Vías metabólicas con respuesta a la hiperglucemia
R//Glucólisis y glucogénesis
Hormona que responden en la hiperglicemia.
R//Insulina
¿Cuánto dura la postabsorción?
R//3 HORAS

Javier G.
INFORMACIÓN OBTENIDA DEL CURSO DE BIOQUÍMICA,
SEGUNDO AÑO 2022, CARRERA DE MÉDICO Y CIRUJANO,
FACULTAD DE MEDICINA, CUNOC, USAC.

Javier G.
Metabolismo
SEMANA 11-12

El glucógeno normalmente se agrupa en ramas pero antes de ello la glucosa se

agrupa en anillos que es una hexosa, y cuando hay exceso de ellas, esta las agrupa
ramificaciones ya que no se pueden guardar linealmente en el hígado o en el
músculo, por ello cuando se forma el glucógeno hablamos de unidad glucosilo 14,
son las que están en una misma dirección y 16 que son las que se ramifican,
por ende las unidades 14 y 16 son en unión sinónimo de glucógeno.

El órgano que quién nos apoya para mantener los niveles de glucosa constante
hablamos del hígado.
El órgano que nos apoyan cuando hacemos un ejercicio extremo y necesita
energía hablamos del músculo.

En un corte histológico el glucógeno se observa como puntos obscuros que son

las ramificaciones del glucógeno, donde cada puntito de las ramificaciones son
anillos de glucosa y para formar esta molécula de glucógeno se han agrupado gran
cantidad de glucosa.
La glucogenólisis hepático mantiene niveles de glucosa en sangre en
ayunas de 8 horas.

La glucogenólisis muscular mantiene el metabolismo energético en

episodios bruscos de actividad.

Glucogénesis es la formación del glucógeno o sea la obtención de glucógeno

a partir de glucosa este se debe en caso de que el organismo tenga hiperglucemia
y lo realiza disminuyendo la glucosa.

Glucogenólisis obtención de glucosa a partir del glucógeno se da en caso el

organismo entre en un estado de hipoglicemia y lo hace aumentando la glucosa.

Las dos vías necesarias para mantener los niveles normales de la glucosa en
sangre son la GLUCOGENÓLISISY GLUCONEOGÉNESIS. La que es de acción rápida
es la primera y su materia prima es el glucógeno, pero cuando el glucógeno se
termina el cuerpo opta por la gluconeogénesis. Cuya materia prima es el tejido
adiposo y el músculo.

La célula del cuerpo que necesita energía para llevar a cabo sus funciones vitales
y se la da la glucosa que, si no se lleva a cabo, estas se rompen y nuestro
organismo entra en un estado de anemia es el eritrocito o glóbulo
rojo.
 El órgano que necesita glucosa para llevar el control de todo el organismo
es el cerebro.
 El órgano que dona glucosa para mantener el equilibrio es el hígado.
EL GLUCÓGENO HEPÁTICO SE DEGRADA GRADUALMENTE
ENTRE COMIDAS.
Las 3 enzimas de la glucogenólisis en su primera reacción trabajan en cadena,
estas son el glucógeno fosforilasa, glucano transferasa y la enzima
desramificante, la más importante de estas es la glucógeno fosforilasa
debido a que el AMPc transporta la información de las hormonas hacia esta
enzima, las hormonas pueden ser glucagón, adrenalina, noradrenalina y
cortisol. Y POR ENDE SON LAS HORMONAS CLAVE EN LA
GLUCOGENÓLISIS (USADAS EN LA HIPOGLUCEMIA). Mientras que en la
glucólisis había 3 enzimas importantes y en la gluconeogénesis hay 4.
Entre tiempos cortos al no introducir alimentos la vía que mantiene los niveles
de glucosa es la GLUCOGENÓLISIS, si dice órgano para mantener estos niveles
decimos que es hígado, pero si hacemos un esfuerzo fuerte es el músculo.

El órgano que necesita de glucosa constante para mantener el control de todo el

organismo es el cerebro, la célula que necesita de esta glucosa constante es el
eritrocito. Al hacer un esfuerzo o ejercicio extremo es el músculo y el órgano
que mantiene glucosa constante en sangre es el hígado.

HORMONAS IMPLICADAS EN LA GLUCONEOGÉNESIS

La adrenalina también es iniciadora en caso de el estrés patológico o cuando

una persona esta agresiva y grita, en caso de los sustos y al sorprenderse.

DOS MECANISMOS NO SE PUEDEN DAR AL MISMO TIEMPO.

EJEMPLOS
EL GLUCÓGENO QUE SE ALMACENA EN EL MÚSCULO NO
ESTÁ DISPONIBLE PARA EL MANTENIMIENTO DE LA
GLUCOSA EN SANGRE.
La MATERIA PRIMA utilizada por el músculo en caso de la
utilización de la glucosa debido a un ejercicio o un esfuerzo
excesivo es el glucógeno del músculo. Y la hormona implicada
es la adrenalina.
Cuando un paciente se desangra se somete a un estrés patológico por ende es
agudo y para ello se utiliza la hormona adrenalina y asimismo la vía es la
glucogenólisis.
En caso de estrés crónico debido a la pandemia por parte de las madres que
están en constante movimiento y estrés con sus hijos, las tareas del hogar u
otros deberes, la hormona implicada es el cortisol y por ende la vía es la
glucogenólisis.

La reacción uno (enzima glucocinasa) de este proceso es común a la

glucólisis por lo tanto se puede decir que la reacción uno del metabolismo del
glucógeno coincide con la glucólisis. Ya que en esta reacción se pueden tomar dos
caminos uno hacia la glucolisis si este esta vacío y otro hacia la glucogénesis si
este no está vacío y por ende esta abasto.

La glucógeno sintasa es la enzima o reacción más importante ya que la

insulina no puede llevar la información por si sola y necesita de un segundo
mensajero llamado AMPc que le lleva la información a esta enzima.

LA HORMONA CLAVE ES LA INSULINA (USADA EN LA

HIPERGLUCEMIA).
SON ENFERMEDADES por alteración del metabolismo del glucógeno
ocasionados por la deficiencia de enzimas que participan en la síntesis
(glucogénesis) o degradación (glucogenólisis). En otras palabras, son
enfermedades que afectan el almacenamiento del glucógeno se caracterizan por
las acumulaciones de gránulos de glucógeno en los tejidos que finalmente afectan
la función titular.

ES GENÉTICO Y POR ENDE SU TRATAMIENTO ES GENÉTICO

La gluconeogénesis se activa después de 8 horas sin añadir el periodo
de absorción, y es de 12-18 horas cuando es agregado el periodo de
absorción, por ende, la glucogenólisis se activa en tiempo menor a 8
horas sin absorción y menor de 12-18 horas con absorción.

En resumen, se puede decir que la gluconeogénesis se activa en un ayuno de más

de 12 horas a 18 horas, estas horas demás es debido a que hay 8 horas siguientes
al estado posterior de la absorción esto permite que el tiempo sea mayor a 8
horas cuando incluimos el tiempo de absorción.

1. Es la célula y el órgano de nuestro cuerpo que tiene necesidad absoluta de

glucosa. ERITROCITO (célula) y CEREBRO (órgano)
2. ¿Cuál de las 2 opciones es correcta? LA A
a. Cuando aparece hipoglicemia compromete la función cerebral dando
lugar a confusión, desorientación, y a riesgo de coma a
concentración de glucosa por debajo de 45 mg/ dl.
b. Cuando aparece hiperglicemia compromete la función cerebral
dando lugar a confusión, desorientación, y a riesgo de coma a
concentración de glucosa por debajo de 45 mg/ dl.
3. Es nuestra primera línea de defensa contra la disminución de glucosa en
sangre. GLUCÓGENO
4. ¿La concentración tisular de glucógeno en dónde es mayor? HÍGADO
5. Vías metabólicas necesarias para mantener los niveles de glucosa normal
en sangre. GLUCOGENÓLISIS Y GLUCONEOGÉNESIS
6. Una persona que almorzó a las 12 del mediodía y cena a las 7 de la noche,
qué vía metabólica le apoya a mantener los niveles normales de glucosa en
sangre. GLUCOGENÓLISIS
7. Glucogenólisis significa: DEGRADAR EL GLUCÓGENO PARA OBTENER
GLUCOSA
8. Durante el sueño cuando no estamos comiendo pasamos de glucogenólisis
a la vía metabólica llamada de la siguiente manera: GLUCONEOGÉNESIS
 ARTÍCULO CIENTÍFICO
Las glucogenosis comprenden un conjunto de errores innatos en el metabolismo
del glucógeno por diversas deficiencias enzimáticas.

OCURRE UN CASO POR CADA 20,000 A 40,000 RECIÉN NACIDOS VIVOS DE

CUALQUIER GRUPO ÉTNICO.

Debido a la complejidad del abordaje y diagnóstico de estas entidades,

presentamos ocho casos de pacientes pediátricos con diagnóstico
histopatológico de glucogenosis por biopsia hepática.

INTROCUCCIÓN
Las glucogenosis corresponden a un grupo de enfermedades metabólicas
caracterizadas por el déficit hereditario de enzimas implicadas en la síntesis
o degradación del glucógeno [1].

SE HAN DESCRITO MÁS DE 14 TIPOS.

Las manifestaciones clínicas se presentan generalmente en la infancia y niñez
temprana. Las glucogenosis DEBEN SOSPECHARSE CUANDO EXISTA
RETRASO GLOBAL DEL DESARROLLO, ACIDOSIS, HIPOGLICEMIA, Y
HEPATOMEGALIA [2].

Aunque la biopsia hepática ha sido desplazada por métodos moleculares, aún

mantiene su utilidad como método alternativo para orientar el diagnóstico
clínico, debido a la diversidad de enfermedades que pueden provocar
hepatomegalia [3]. Presentamos el siguiente estudio de biopsias hepáticas
compatibles con glucogenosis en pacientes pediátricos.

INFORME DE CASOS
Se revisó la base de datos del departamento de patología del Hospital General
San Juan de Dios, en el periodo comprendido entre 2007 y 2020.

Se obtuvieron 8 casos de biopsias hepáticas con el diagnóstico

histopatológico de glucogenosis, 6 DE LOS CUALES FUERON
INTERCONSULTA DE OTROS HOSPITALES DEL PAÍS.
En la tabla no. 1 se presentan los datos de cada caso. A todas las muestras
recibidas se les realizó tinción de hematoxilina-eosina, tricrómico
de Masson, PAS y PAS-diastasa.
En los casos estudiados se observaron hepatocitos aumentados de tamaño,
algunos con núcleos pequeños desplazados a la periferia, abundante cantidad
de citoplasma claro, y reforzamiento de la membrana citoplasmática, lo que
confiere una arquitectura con patrón de mosaico (Fig.1A), que difiere de
la estructura trabecular normal del hígado, y que es resultado del deficiente
metabolismo hepático de los hidratos de carbono, lo cual explica la intensidad
de la tinción de PAS y la digestión del material citoplasmático por la diastasa
(Fig.1B y C) [1,2].

Fig. 1: Glucogenosis hepática. A: Hepatocitos con distensión glucogénica que

obliteran los sinusoides, formando un patrón de mosaico. B: Tinción de PAS.
C: Tinción de PAS con digestión por diastasa.
 DISCUSIÓN
Las enfermedades por depósito como causa de hepatomegalia en pacientes
pediátricos, constituyen un diagnóstico diferencial poco probable, y
requieren de una alta sospecha y pericia del médico tratante.

En nuestro medio no es la excepción, y esto se ve reflejado en la cantidad de

estudios publicados [4]. Aunque en la actualidad los métodos genéticos y
enzimáticos han ganado terreno en el diagnóstico de estas enfermedades,
la biopsia hepática no ha perdido su utilidad porque permite conocer el tipo
y extensión de las alteraciones histológicas, evolución de la enfermedad,
pronóstico y respuesta al tratamiento [3].

Por lo tanto, no se debe menospreciar la utilidad de la biopsia hepática dada

la gran cantidad de enfermedades con cuadros clínicos similares, porque la
identificación de ciertas características histológicas con microscopía de luz, en
conjunto con los datos clínicos, de laboratorio e imagen, establecen las bases
que permiten al clínico la toma de decisiones en el abordaje diagnóstico y
terapéutico [3]. Estos casos ponen en evidencia la importancia de una
estrecha colaboración entre patólogo y médico tratante para una adecuada
aproximación diagnóstica.

Javier G.
BIBLIOGRAFÍA
1. De-la-Rosa E, Ovalle J. Glucogenosis en biopsias hepáticas. Rev. méd.
(Col. Méd. Cir. Guatem.) [Internet]. 7 de agosto de 2021 [citado 24 de
mayo de 2022];160(2):140-3. Disponible en:
https://www.revistamedicagt.org/index.php/RevMedGuatemala/article/
view/357

INFORMACIÓN OBTENIDA DEL CURSO DE BIOQUÍMICA, SEGUNDO AÑO

2022, CARRERA DE MÉDICO Y CIRUJANO, FACULTAD DE MEDICINA,
CUNOC, USAC.
Javier G.
 SEMANA 11-12

COMPOSICIÓN
Formada por una disolución acuosa que contiene moléculas de diferentes
tamaños y diversos elementos celulares.

Algunos de los componentes sanguíneos cumplen funciones como defensa del

cuerpo ante agresiones externas y en la reparación de tejidos lesionados.

EL PLASMA
Es el ambiente natural en donde están suspendidos los elementos que forman
la sangre. Se obtiene en muestras sanguíneas tratadas con anticoagulantes
(Heparina, Citrato, EDTA)

EL SUERO
Es el sobrenadante de una muestra de sangre a la que se le permite coagularse
(no posee los factores de coagulación, el fibrinógeno está ausente).
Estos son sustancias que sirven para inhibir o retardar la coagulación de la
sangre. Como:

Heparinato de Litio: Se une a la trombina previniendo la coagulación.

EDTA: Acido Etilendiaminotetracético, fijan el Ca y Mg. Interfiriendo en el
complejo convertidor de tromboplastina a trombina que participan en la cascada
de coagulación.

Citrato: fija al Ca y al Mg.

Existen tres componentes celulares sanguíneos:

Eritrocitos
Leucocitos
Plaquetas

ERITROCITOS
 Son células maduras carentes de núcleo y organelos intracelulares.
 Son vestigios celulares que contienen proteínas específicas e iones.
 Son el producto final de la eritropoyesis en la médula ósea que está
bajo el control de la eritropoyetina producida por el riñón.

RETICULOCITOS
LA ERITROPOYESIS SE REALIZA EN LA MÉDULA ÓSEA

Su componente principal en la Hemoglobina, sintetizada en los eritroblastos y

reticulocitos (esta tanto en la médula ósea como en la sangre, o sea es una célula
casi madura que tiene vestigios nucleares y sale cuando la pérdida de sangre
mayor, SU VALOR NORMAL ES DE 0-3%) bajo un estricto control por la
concentración de hemo.
Las principales funciones son:
 El transporte de oxigeno
 La eliminación de CO2.

Su vida media es de 60-120 días antes de ser atrapados y destruidos por el

bazo.
  Células cuya principal función es proteger al organismo de las
infecciones.
 La mayoría se producen en la Médula Ósea, algunos en el Timo y otros
maduran en varios tejidos.
 Pueden controlar su propia síntesis.
 Pueden migrar fuera del torrente sanguíneo.

Existen tres grupos de Leucocitos:

GRUPO DE LEUCOCITOS SUB-GRUPO FUNCIÓN

(Valor de 45-55% de los

granulocitos, tiene gránulos Destruir pequeños organismos.
finos rosados y en infecciones
bacterianas están aumentado)

 Segregar Histamina,
(sus puntos son azules a
 Mediar la respuesta
Granulocitos morados, gránulos, los Inflamatoria
(Presentan gránulos, su porcentaje es encontramos en mayor cantidad  Segregar factores de
de 45-55% de los leucocitos) en las intoxicaciones, su valor activación de plaquetas
normal es del 0-3%)

 Destruir parásitos
 Participar en las
(valor normal de 0-5%, tiene
reacciones alérgicas.
gránulos naranjas o rojos)
 Están presentes en
infecciones parasitarias.
 Linfocitos
(Valor normal de 35-45% de los Sintetizar anticuerpos
leucocitos, cuando está aumentados
quiere decir que hay infección viral, a
la cual no se administra antibiótico ya
que es para bacterias, puesto que si se
le administra hay gasto monetario y Participar en la respuesta
vuelve resistente a las bacterias en el inmunitaria específica.
cuerpo.)

 Destruir organismos
invasores.
 Están aumentados en la
Monocitos mononucleosis infecciosa
(Rango normal de 0-5%)
cuando hay muchos
invasores a los cuales
destruir.

VALOR NORMAL DE 5,000 A 10,000 POR CM3, SI HAY MENOS DE 5,000 ES

LEUCOPENIA Y SI HAY MÁS DE 10,000 ES LEUCOCITOSIS Y POR LO
TANTO HAY UN PROCESO INFECCIOSO.
 MACRÓFAGO LINFOCITOS

EL FROTE SANGUÍNEO O PERIFÉRICO es para visualizar o calcular la calidad de

la sangre o las células en este caso los leucocitos.

EL HEMATOLOGIA COMPLETA PARA SABER EL NÚMERO MIENTRAS QUE

EL FROTE SIRVE PARA VER LA CALIDAD.

 No son células, sino fragmentos unidos de membrana, derivados de los

megacariocitos que se encuentran en la médula ósea.
 Intervienen en la Coagulación.
 Valores Normales: 150,000 a 400,000/cc
 Trombocitopenia: valores menores de 150,000
 Trombosis: valores mayores de 400,000, FORMA UN COAGULO.

LOS PUNTOS MORADOS

SON TROMBOCITOS
 1. TROMBOCITOS
2. ERITROCITOS
3. EOSINÓFILOS
4. NEUTRÓFILOS
5. LINFOCITOS

Pueden clasificarse en dos grupos:

1. Las que incluyen la ALBúMINA (que son sintetizadas en el Hígado)

2. Las Inmunoglobulinas (producidas por las células
plasmáticas de la médula ósea como parte de la respuesta inmune).

Algunas pueden fijarse a diferentes ligandos de una forma específica, actuando

como reservorios y transportadores; en algunas ocasiones su fijación puede
volver una sustancia tóxica menos nociva.

Es la proteína plasmática más predominante, constituye el 50% de proteínas

en el plasma humano, su concentración normal es de 3.5-4.5 g/ dl, con un
peso molecular de 66 kDa., altamente polar, es un anión con 20 cargas
negativas por moléculas.

 La síntesis de albúmina (de 14-15 g/día) depende del estado nutricional.

 La vida media es de 20 días y la degradación es por pinocitosis en
todos los tejidos.
Es la Principal Proteína plasmática del transporte de ácidos grasos
hidrófobos, bilirrubinas y fármacos.
Afinidad alta en la unión con la bilirrubina no conjugada haciéndola
hidrosoluble y no tóxica en su almacenamiento en el hígado.

Capacidad de unión con diferentes fármacos como salicilatos, barbitúricos,

sulfonamidas, penicilina, warfarina.

La capacidad de las proteínas de unirse y transportar iones metálicos es de suma

importancia para el humano.

El hierro es importante para procesos metabólicos y es parte

fundamental de las proteínas como el hemo, hemoglobina y citocromos. En
el citoplasma se transporta unido a la transferrina como ion férrico
Fe+3.

FERRITINA
Es la principal proteína de almacenamiento del hierro en el hígado y la médula
ósea. Su concentración es proporcional a la concentración de hierro.

HEMOSIDERINA
Es un derivado de la ferritina que se encuentra en el hígado, bazo y médula.
Forma agregados de hierro que lo liberan lentamente cuando hay una
deficiencia.
CERULOPLASMINA
es la principal proteína transportadora del cobre: ayuda a transportarlo del
hígado a los tejidos, esencial las reacciones de oxidación, transporte y
utilización del hierro.

Hay desequilibrios como en el caso de la ENFERMEDAD DE WILSON donde

el cobre no se elimina por completo, sino que se acumula y puede llegar a niveles
mortales. Los síntomas generalmente comienzan entre los doce y los veintitrés
años de edad.

Son proteínas producidas en respuesta a sustancias extrañas en el cuerpo

llamadas Antígenos.

El sistema inmune puede actuar de dos formas:

1. Linfocitos T: derivados del timo que supervisan la

inmunoregulación.
2. Linfocitos B: Segregadores de anticuerpos (inmunoglobulinas).

ANTICUERPOS
Son proteínas producidas por el sistema inmune que tienen espeficidad
definida para partículas extrañas (inmunógenos) que estimula su
síntesis. Poseen la capacidad de reconocer un amplio intervalo de estructuras
antigénicas específicas (epítopos).
Los anticuerpos son inmunoglobulinas que poseen estructura en forma de Y
que contienen dos unidades idénticas llamadas cadenas pesadas (H) y dos
cadenas livianas (L).

La naturaleza de la cadena H determina la clase de inmunoglobulina: IgG

(gamma), IgA (alfa), IgM (muj), IgD (delta), IgE (épsilon).

La cadena L es solamente de tipo Kappa y lambda.

El dominio de N-Terminal de ambas cadenas tienen una región variable (V),

que determinan la espeficidad antigénica.
La región C (constante o Fc región) es responsable de las funciones de
la Ig.

Es la más frecuente, tiene un peso molecular de 160kDa, circula en altas

concentraciones en el plasma representando el 75% de las inmunoglobulinas
presentes en el humano. Tiene una vida media de 22 días.

A las 18-20 semanas puede atravesar la barrera placentaria brindando

inmunidad al feto y al neonato antes de la maduración del sistema inmune.

SI SALE NEGATIVO QUIERE DECIR QUE NUNCA LE HA DADO EL VIRUS

PREDISPUESTO POR ENDE NO ES INMUNE.

 Para cualquier enfermedad que sale positivo quiere decir que esta
presente la enfermedad,
 Circula normalmente como un pentámero, con un peso molecular de 971
kDa.
 Representa del 5-10% de las inmunoglobulinas plasmáticas, con una vida
media de 5 días.
 Es el primer Ac. que se sintetiza tras un ataque antigénico.

LA IGG E IGM NO PUEDEN DAR POSITIVO AL MISMO

TIEMPO, PERO EN CIERTAS OCASIONES SI. LA IGG ES DE
ACCIÓN LARGA Y LA IGM ES TEMPRANA.
 Es un dímero que se encuentra unido a un componente denominado
secretor (polipéptido glucosilado) secretado por las mucosas que protege
a la IgA de las digestiones proteolíticas.
 Se encuentra presente en un 7-15%, con una vida media de 6 días. Se
localiza en secreciones de la parótida, bronquios, e intestino.
 Es componente principal del calostro.

 Es una inmunoglobulina menor

 Difiere de las otras Ig por su alto contenido de hidratos de carbono. Sus
cadenas poseen un solo enlace disulfuro.
 Representa menos del 0.5% de las Ig plasmáticas.
 Su función es poco conocida.

 Presenta afinidad por los lugares de fijación en los mastocitos y

basófilos.
 Su activación produce la liberación de aminas vasoconstrictoras.
 Participa en los procesos de alergias e interviene en la inmunidad
antiparasitaria.
 Su peso molecular es de 200 kDa
 RESPUESTA DE FASE AGUDA Y PCR
La respuesta a la fase aguda es una respuesta inespecífica a la infección o
lesión hística que afecta a varios tejidos y órganos.

Durante la respuesta a la fase aguda, existe un aumento de la síntesis de

ciertas proteínas (inhibidores de la proteinasa, proteínas de la coagulación, del
complemento y PCR) y una disminución de otras (albúmina, prealbúmina y
transferrina).

La PCR es un componente principal de la respuesta a la fase aguda y un

marcador de infección bacteriana.

Se sintetiza en el hígado y está formada por 5 unidades polipeptídicas, con

un peso molecular de 130kDa, presente en mínimas cantidades (menor de 1
mg/l).

Es esencial para el diagnóstico y monitorización de infección y sepsis.

 1. Paciente presenta dolor en un costado, náuseas, algunos vómitos.

Hematología reporta:

 Leucocitos: 18,600 mm3

o Granulocitos: 88%
o Neutrófilos: 93%
o Basófilos: 2%
o Eosinófilos: 5%
 Linfocitos: 10%
 Monocitos: 2%

DIAGNÓSTICO: Infección gastrointestinal o Gastroenteritis Bacteriana

CONTEXTO:

Analizando el caso tenemos lo siguiente:

En primer lugar, los Neutrófilos en sangre están muy elevados a 93% y estos
se activan en las reacciones inmunitarias como primera línea de defensa
frente a las infecciones, principalmente de tipo bacterianas que atacan
nuestro cuerpo.

En Segundo lugar, Por la elevación de los neutrófilos ocurre la disminución de los

linfocitos, en este caso hasta 10%, lo cual supone una Infección de Tipo
bacteriana.

Ahora bien, todo esto sumado a los síntomas del paciente, las náuseas, los
vómitos y el dolor que tiene a un costado del abdomen llegamos a la conclusión
de que el paciente presenta una enfermedad tipo Infecciosa Gastrointestinal o
Gastroenteritis Bacteriana.

La gastroenteritis bacteriana, es una afección que se presenta cuando hay una

infección provocada por diversos tipos de bacterias en el estómago e intestinos.

La infección se da generalmente por el consumo de alimentos como carne de res

o de ave que contienen este tipo de bacterias, también se puede contraer con el
consumo de agua contaminada.

Las principales Bacterias que provocan esta infección son las

siguientes:
 Campylobacter jejuni
 E coli
 Salmonela
 Shigella
 Estafilococo
 Yersinia

2. Paciente infantil (8 años). Su madre reporta que es segunda vez que se

pone de color amarillo y que ya ha padecido de hepatitis.
Las pruebas de laboratorio reportan para Hepatitis A:
IgG: - (NEGATIVA); IgM: + (POSITIVA)

DIAGNÓSTICO: Hepatitis Aguda

CONTEXTO: Analizando el caso tenemos lo siguiente:

El resultado de IgM positivo nos indica una Infección Viral Aguda muy
reciente, en este caso Hepatitis Aguda. La madre refiere que el niño
padece por segunda vez de Ictericia (Color amarillento de piel) y que ya
ha padecido hepatitis, lo cual también nos indica la probabilidad de que el
niño no haya sido vacunado contra la Hepatitis A.
La hepatitis A es causada por un virus que infecta las células hepáticas y
produce inflamación. La inflamación puede afectar el funcionamiento del
hígado y ocasionar signos y síntomas de hepatitis A, la ictericia es la más
característica.
El virus normalmente se propaga mediante la ingesta de comidas o
bebidas contaminadas con materia fecal, incluso en cantidades muy
pequeñas. No se transmite al estornudar ni al toser. Generalmente, la
mayoría de los niños no saben normas de higiene y el descuido de los
padres puede ocasionar que le niño se contamine las manos y seguidamente
manipule e ingiera alimentos que ya han sido contaminados.
 3. Paciente presenta fiebre de 42 grados, sudoraciones, deshidratación,
cefaleas.

La hematología reporta:

 Recuento leucocitario de 12,640 mm3

 Granulocitos: 26%
o Neutrófilos: 93%
o Basófilos: 0%
o Eosinófilos: 1%
 Linfocitos: 73%
 Monocitos: 1%

DIAGNÓSTICO: Proceso de Origen Viral (Gripe, resfriado común)

CONTEXTO: Analizando el caso tenemos lo siguiente:

Observamos en la hematología completa un Aumento en el nivel de Neutrófilos

93%, el causante de su elevación es la elevación de Linfocitos 73% lo cual
significa una infección de origen Viral, y por ende los neutrófilos al ser nuestra
primera línea de defensa frente a las infecciones aumentan de valor. Al ser una
infección de tipo Viral, no se le puede administrar Antibiótico para disminuir sus
síntomas, caso contrario provocaría una resistencia a las bacterias. Hay
medicamentos antivirales para tratar algunos de ellos. Las vacunas pueden
ayudar a evitar que se contraiga muchas enfermedades virales. El paciente
presenta síntomas comunes de una Gripe o un Resfriado común, lo que se debe
hacer es Hidratar al paciente con Agua, y dejar que el proceso Viral evolucione,
aproximadamente a los 5 días.

Javier G.
INFORMACIÓN OBTENIDA DEL CURSO DE LABORATORIO DE
BIOQUÍMICA, SEGUNDO AÑO 2022, CARRERA DE MÉDICO Y CIRUJANO,
FACULTAD DE MEDICINA, CUNOC, USAC.

Javier G.
Introducción
Los eritrocitos y el cerebro tienen una necesidad absoluta de glucosa
sanguínea para el metabolismo energético. Estas células consumen
aproximadamente el 80% de los 200 g de glucosa que consume el
organismo cada día. En el plasma y en el volumen de líquido
extracelular solo hay unos 10 g de glucosa, lo que equivale
aproximadamente al 5% de las necesidades diarias, de manera que el
contenido de glucosa sanguínea debe rellenarse constantemente. De lo
contrario, aparece hipoglucemia, que compromete a la función
cerebral dando lugar a confusión, desorientación y, posiblemente, a
un estado de coma de riesgo vital a concentraciones de glucosa por
debajo de 2,5 mmol/l (45 mg/dl). Absorbemos glucosa de nuestro
intestino solo durante las 2-3 h siguientes a una comida que contenga
hidratos de carbono, así que debe haber un mecanismo para mantener
la glucosa en sangre entre las comidas.
El glucógeno, un polisacárido de almacenamiento de la glucosa, es
nuestra primera línea de defensa contra la disminución de la
concentración de glucosa en sangre. Durante e inmediatamente
después de una comida, la glucosa se convierte en glucógeno tanto en
el hígado como en el músculo, un proceso conocido como
glucogénesis. La concentración tisular de glucógeno es mayor en el
hígado que en el músculo, pero debido a las masas relativas del
músculo y del hígado, la mayoría del glucógeno del organismo se
almacena en el músculo (tabla 12.1).

Tabla 12.1
Distribución tisular de las reservas de energía de
hidratos de carbono (adulto de 70 kg)
La glucogenólisis y la gluconeogénesis hepática son
necesarias para el mantenimiento de la concentración
normal de glucosa en sangre
El glucógeno hepático se degrada gradualmente entre las comidas por
la vía de la glucogenólisis, liberando glucosa para mantener su
concentración en sangre. Sin embargo, las reservas totales
de glucógeno en el hígado apenas son suficientes para mantener una
concentración de glucosa en sangre en un ayuno de 12 h.
Durante el sueño, cuando no estamos comiendo, hay un
desplazamiento gradual de la glucogenólisis a una síntesis de novo de
la glucosa, también a través de una vía hepática conocida como
gluconeogénesis (fig. 12.1). La gluconeogénesis es esencial para la
supervivencia en el ayuno o la inanición, cuando las reservas de
glucógeno son mínimas. El hígado utiliza los aminoácidos de las
proteínas musculares como precursores primarios de la glucosa, pero
también utiliza lactato de la glucólisis y el glicerol del catabolismo de
la grasa. Los ácidos grasos, movilizados desde las reservas de
triglicéridos del tejido adiposo, proporcionan la energía para la
gluconeogénesis.
 FIG. 12.1 Fuentes de glucosa sanguínea durante un día normal.
Entre las comidas, la glucosa sanguínea procede principalmente del
glucógeno hepático. Según la frecuencia de los tentempiés, la
glucogenólisis y la gluconeogénesis pueden ser más o menos activas
durante el día. Las últimas horas de la noche o por la mañana
temprano, tras el agotamiento de una fracción importante del
glucógeno hepático, la gluconeogénesis es la principal fuente de la
glucosa sanguínea.

El glucógeno se almacena en el músculo para usarse en

el metabolismo energético
El glucógeno del músculo no está disponible para el mantenimiento
de la glucosa en sangre. La glucosa obtenida de la sangre y del
glucógeno se usa solo para el metabolismo energético en el músculo,
especialmente durante los episodios bruscos de actividad física.
Aunque el músculo cardíaco y los músculos esqueléticos dependen
sobre todo de las grasas como fuente de energía, un cierto
metabolismo de glucosa es esencial para un metabolismo eficaz de las
grasas en estos tejidos (v. cap. 37).
Este capítulo describe las vías de la glucogénesis y la glucogenólisis
en el hígado y en el músculo, y la vía de la gluconeogénesis en el
hígado.
Estructura del glucógeno
El glucógeno, un glucano sumamente ramificado,
constituye la forma de almacenamiento de la glucosa en
los tejidos
El glucógeno es un polisacárido ramificado de glucosa. Contiene solo
dos tipos de enlaces glucosídicos, cadenas de residuos de glucosa con
enlaces α1→4 con ramificaciones α1→6 espaciadas cada 4-6 residuos,
aproximadamente, a lo largo de la cadena α1→4 (fig. 12.2). El
glucógeno está estrechamente relacionado con el almidón, el
polisacárido de almacenamiento de las plantas, pero el almidón consta
de una mezcla de amilosa y amilopectina. El componente amilosa
contiene solo cadenas α1→4 lineales; el componente amilopectina es
una estructura más parecida al glucógeno, pero con menos
ramificaciones α1→6, aproximadamente 1 por cada 12 residuos de
glucosa con enlaces α1→4. La estructura macroscópica del glucógeno
es de naturaleza dendrítica, expandiéndose desde una secuencia
nuclear ligada a un residuo de tirosina en la proteína glucogenina y
desarrollándose hasta una estructura final que se asemeja a una
coliflor. Las enzimas del metabolismo del glucógeno están ligadas a la
superficie de la partícula de glucógeno; numerosas moléculas
terminales de glucosa en la superficie de la molécula proporcionan un
acceso fácil para la liberación rápida de la glucosa a partir del
polímero de glucógeno.
 FIG. 12.2 Esquema de la estructura del glucógeno.
La figura muestra las cadenas α1→4 y un punto de ramificación α1→6.
El glucógeno se almacena como gránulos en el citoplasma del hígado
y del músculo.
Glucogénesis hepática a partir de la
glucosa sanguínea
La glucogénesis se activa en el hígado y en el músculo
después de una comida
El hígado es rico en el transportador de glucosa GLUT-2 de alta
capacidad y baja afinidad (Km >10 mmol/l), haciéndolo libremente
permeable a la glucosa suministrada en concentración elevada por la
sangre de la vena porta durante y después de una comida (v.
tabla 4.2). Asimismo, el hígado es abundante en glucocinasa, una
enzima específica para la glucosa que la convierte en glucosa 6-fosfato
(Glc-6-P). La glucocinasa (GK) es inducible por el consumo
continuado de una dieta rica en hidratos de carbono. Tiene una Km
elevada de aproximadamente 5-7 mmol/l, de forma que su actividad
está destinada a aumentar a medida que la glucosa portal se eleva por
encima de los 5 mmol/l (100 mg/dl) de la glucemia normal. A
diferencia de la hexocinasa, la GK no es inhibida por la Glc-6-P, de
manera que la concentración de Glc-6-P aumenta rápidamente en el
hígado tras una comida rica en hidratos de carbono, forzando a la
glucosa a entrar en todas las vías importantes del metabolismo de la
misma: la glucólisis, la vía de las pentosas fosfato y la glucogénesis (v.
fig. 9.2). La glucosa se canaliza a glucógeno, proporcionando una
reserva de hidratos de carbono para mantener la glucemia durante el
estado posterior a la absorción. El exceso de Glc-6-P en el hígado, por
encima de lo necesario para rellenar las reservas de glucógeno, se
deriva entonces a la glucólisis, en parte para la producción de energía,
pero principalmente para la conversión en ácidos grasos y
triglicéridos, que se exportan desde el hígado para su almacenamiento
en el tejido adiposo. La glucosa que atraviesa el hígado causa un
aumento en la concentración de glucosa en la sangre periférica tras
comidas ricas en hidratos de carbono. Esta glucosa se utiliza en el
músculo para la síntesis y almacenamiento del glucógeno y en el
tejido adiposo como fuente de glicerol para la biosíntesis de
triglicéridos.
La vía de la glucogénesis a partir de la glucosa (fig. 12.3A) consta de
cuatro pasos:

▪ Conversión de Glc-6-P en glucosa-1-fosfato (Glc-1-P) por la

fosfoglucomutasa.
▪ Activación de la Glc-1-P para formar el azúcar nucleotídico,
uridina difosfato (UDP)-glucosa mediante la enzima UDP-
glucosa pirofosforilasa.
▪ Transferencia de glucosa desde la UDP-Glc al glucógeno en un
enlace α1→4 mediante la glucógeno sintasa, un miembro de
la clase de enzimas conocida como glucosil transferasas.
▪ Cuando la longitud de la cadena α1→4 es mayor de 8 residuos,
la enzima ramificante del glucógeno, una transglucosilasa,
transfiere parte de los azúcares de los enlaces α1→4 a una
rama α1→6, estableciendo el estadio para el alargamiento
continuo de ambas cadenas en α1→4 hasta que, a su vez, se
hacen lo suficientemente largas para la transferencia por la
enzima ramificante.
 FIG. 12.3 Vías de la glucogénesis (A) y de la glucogenólisis (B).

La glucógeno sintasa es la enzima reguladora de la glucogénesis, en

lugar de la UDP-glucosa pirofosforilasa, porque la UDP-glucosa
también se utiliza en la síntesis de otros azúcares, y como donante de
glucosil para la síntesis de glucoproteínas, glucolípidos y
proteoglucanos (caps. 17-19). El pirofosfato (PPi), el otro producto de
la reacción de la pirofosforilasa, se hidroliza rápidamente a fosfato
inorgánico mediante la pirofosfatasa; esta reacción aporta el empuje
termodinámico para la biosíntesis de glucógeno.
Vía de la glucogenólisis hepática
La glucógeno fosforilasa hepática permite una liberación
rápida de glucosa a la sangre durante la fase posterior a
la absorción
Lo mismo que ocurre con la mayoría de las vías metabólicas, se
requieren enzimas distintas, a veces en compartimentos subcelulares
separados, para las vías directas e inversas. La vía de la glucogenólisis
(v. fig. 12.3B) comienza con la eliminación de los abundantes residuos
externos de glucosa unidos mediante enlaces α1→4 en el glucógeno.
Esto se realiza, no mediante una hidrolasa, sino por la glucógeno
fosforilasa, una enzima que utiliza el fosfato citosólico y libera
glucosa del glucógeno en forma de Glc-1-P. La Glc-1-P se isomeriza
por la fosfoglucomutasa a Glc-6-P, situándola al inicio de la vía
glucolítica; la reacción de la fosforilasa tiene como efecto evitar la
necesidad de ATP en las reacciones de la hexocinasa o de la
glucocinasa. En el hígado, la glucosa se libera a partir de la Glc-6-P
por la glucosa-6-fosfatasa (Glc-6-Pasa) y la glucosa se incorpora a la
sangre mediante el transportador GLUT-2. El paso limitante y
regulador en la glucogenólisis está catalizado por la fosforilasa, la
primera enzima de la vía.
La fosforilasa es específica para los enlaces glucosídicos α1→4; no
puede escindir los enlaces α1→6. Además, esta gran enzima no puede
aproximarse eficazmente a los residuos ramificados de glucosa. Así,
como se muestra en la figura 12.3B, la fosforilasa escinde los residuos
externos de glucosa hasta que las ramas tienen una longitud de 3 o
4 residuos, y a continuación, la enzima desramificante, que tiene
actividad transglucosilasa y también glucosidasa, mueve un segmento
corto de residuos de glucosa unidos a la rama α1→6 al extremo de
una cadena adyacente α1→4, dejando un único residuo de glucosa en
el punto de ramificación. A continuación, esta glucosa es eliminada
por la actividad exo-1,6-glucosidasa de la enzima desramificante
permitiendo a la glucógeno fosforilasa proceder con la degradación de
la cadena α1→4 extendida hasta que se aproxima a otro punto de
ramificación, estableciendo el estadio de repetición de las reacciones
transglucosilasa y glucosidasa. Aproximadamente el 90% de la
glucosa se libera del glucógeno como Glc-1-P y, el resto, derivado de
los residuos ramificados α1→6, se libera como glucosa libre.

Conceptos clínicos
Enfermedad de von Gierke: glucogenosis por déficit
de Glc-6-Pasa
Un bebé de sexo femenino se encontraba siempre de mal humor,
irritable, sudorosa y letárgica, y pedía alimento con frecuencia. La
exploración física indicaba abdomen voluminoso secundario a
hepatomegalia. La glucosa sanguínea, medida 1 hora después de la
alimentación, era de 3,5 mmol/l (70 mg/dl); valor normal <5 mmol/l
(100 mg/dl). Después de 4 h, cuando la niña estaba irritable
y sudorosa, la frecuencia cardíaca había aumentado (pulso = 110) y la
glucosa sanguínea había disminuido a 2 mmol/l (40 mg/dl). Estos
síntomas se corrigieron al alimentarla. Una biopsia hepática mostraba
un depósito masivo de partículas de glucógeno en el citosol hepático.
Comentario
Esta niña no puede movilizar el glucógeno. Dada la gravedad de la
hipoglucemia, lo más probable es que la mutación sea en la Glc-6-
Pasa hepática, necesaria para la producción de glucosa mediante la
glucogenólisis y la gluconeogénesis. El tratamiento consiste en
alimentación frecuente con hidratos de carbono de digestión lenta
(p. ej., almidón sin cocer) y alimentación por goteo nasogástrico
durante la noche.
Regulación hormonal de la
glucogenólisis hepática
La glucogenólisis y la glucogénesis son
contrarreguladas por tres hormonas, insulina, glucagón
y cortisol
La glucogenólisis se activa en el hígado en respuesta a una demanda
de glucosa en sangre, ya sea por su utilización durante el estadio
posterior a la absorción o en la preparación para un incremento de la
utilización de glucosa como respuesta al estrés. Existen tres
activadores hormonales importantes de la glucogenólisis: el glucagón,
la adrenalina y el cortisol (tabla 12.2).

Tabla 12.2
Hormonas implicadas en el control de la glucogenólisis

El glucagón es una hormona peptídica (3.500 Da) segregada por las

células α del páncreas endocrino. Su función principal es activar la
glucogenólisis hepática para mantener una glucemia normal
(normoglucemia). El glucagón tiene una vida media corta en el
plasma, aproximadamente de 5 minutos, como resultado de la unión
al receptor, la filtración renal y la inactivación proteolítica en el
hígado. Por tanto, la concentración plasmática de glucagón cambia
rápidamente como respuesta a la necesidad de glucosa sanguínea. El
glucagón en sangre aumenta entre comidas, disminuye durante la
ingesta y está crónicamente elevado durante el ayuno y con una dieta
baja en hidratos de carbono (v. cap. 31).
La glucogenólisis hepática también se activa como respuesta al
estrés agudo y crónico. El estrés puede ser de varios tipos:

▪ Fisiológico (p. ej., como respuesta al aumento de la utilización

de la glucosa en sangre durante el ejercicio físico).
▪ Patológico (p. ej., como resultado de la pérdida de sangre
[shock]).
▪ Psicológico (p. ej., como respuesta a amenazas agudas o
crónicas).

Independientemente de su origen, el estrés agudo desencadena una

activación de la glucogenólisis a través de la acción de la adrenalina,
una hormona catecolamínica, liberada desde la médula suprarrenal.
Durante el ejercicio prolongado o estresante, tanto el glucagón como
la adrenalina contribuyen a la estimulación de la glucogenólisis y al
mantenimiento de la concentración de glucosa sanguínea.
El aumento de las concentraciones sanguíneas de cortisol, una
hormona esteroidea corticosuprarrenal, también induce
glucogenólisis. Las concentraciones del glucocorticoide cortisol
varían en el plasma a lo largo del día, pero pueden estar crónicamente
elevadas en situaciones continuas de estrés, incluido el estrés
psicológico y ambiental (p. ej., frío).
El glucagón sirve como modelo general para el mecanismo de
acción de las hormonas que actúan mediante receptores de superficie
celular. El cortisol, que actúa a nivel de la expresión génica, se
comenta en los capítulos 23 y 25.
Mecanismo de acción del glucagón
El glucagón activa la glucogenólisis durante el período
posterior a la absorción
El glucagón se une a un receptor de la membrana plasmática del
hepatocito e inicia una cascada de reacciones que conducen a la
movilización del glucógeno hepático (fig. 12.4) durante el estado
posterior a la absorción. En el lado interno de la membrana plasmática
hay una clase de proteínas de transducción de señal conocidas como
proteínas G que fijan guanosina trifosfato (GTP) y guanosina
difosfato (GDP), nucleótidos análogos a ATP y ADP. El GDP está
unido en situación de reposo. La unión del glucagón al receptor de la
membrana plasmática estimula el intercambio de GDP por GTP en la
proteína G y, a continuación, la proteína G sufre un cambio
conformacional que da lugar a la disociación de su subunidad α, que
después se une y activa la enzima de membrana plasmática, adenilato
ciclasa. Esta enzima convierte el ATP citoplasmático en 3’,5’-AMP
cíclico (AMPc), un mensajero soluble que se describe como el
«segundo mensajero» de la acción del glucagón (y de otras
hormonas). El AMP cíclico se une a la enzima citoplasmática proteína
cinasa A (PKA) provocando la disociación de las subunidades
inhibidoras (reguladoras) de las subunidades catalíticas de la enzima
heterodimérica, liberando la inhibición de la PKA, que a continuación
fosforila residuos de serina y treonina en proteínas diana y enzimas.
FIG. 12.4 Sistema de cascada de amplificación.
 Movilización del glucógeno hepático por el glucagón. Una cascada de
reacciones amplifica la respuesta hepática a la fijación del glucagón a
su receptor de membrana plasmática. El AMPc se conoce como el
segundo mensajero de la acción del glucagón. La proteína cinasa A
activa indirectamente la fosforilasa a través de la fosforilasa cinasa e
inactiva directamente la glucógeno sintasa. C, subunidades catalíticas;
R, subunidades reguladoras (inhibidoras).

Conceptos clínicos
Enfermedad de McArdle: una glucogenosis que reduce la
capacidad para el ejercicio
Un hombre de 30 años consultó a su médico por mialgias crónicas en
brazos y piernas, y calambres durante el ejercicio. El paciente refería
que siempre había tenido debilidad muscular y, por esta razón, nunca
participó en deportes en la escuela, pero el problema no se agravó
hasta que recientemente se inscribió en un programa de ejercicio para
mejorar su salud. Asimismo, notó que el dolor generalmente
desaparecía tras 15-30 minutos, y a continuación podía continuar su
ejercicio sin molestias. Su concentración de glucosa sanguínea era
normal durante el ejercicio, pero la creatina cinasa sérica (isoforma
MM del músculo esquelético) estaba elevada, sugiriendo una lesión
muscular. La glucosa en sangre disminuyó ligeramente durante 15
minutos de ejercicio, pero de forma inesperada también disminuyó el
lactato sanguíneo, en vez de aumentar, incluso cuando estaba
teniendo calambres musculares. Una biopsia indicó un nivel
inusualmente elevado de glucógeno en el músculo, sugiriendo una
glucogenosis (enfermedad por almacenamiento de glucógeno).
Comentario
Este paciente tiene la enfermedad de McArdle, una deficiencia
infrecuente de la actividad fosforilasa en el músculo. La deficiencia
enzimática real debe confirmarse mediante un análisis enzimático, ya
que otras mutaciones también pueden afectar al metabolismo del
glucógeno en el músculo. En los períodos iniciales de ejercicio
intenso, el músculo obtiene la mayor parte de la energía mediante el
metabolismo de la glucosa, procedente del glucógeno. Durante los
calambres, que normalmente tienen lugar durante la deficiencia de
oxígeno, gran parte del piruvato producido por la glucólisis se
excreta a la sangre como lactato, lo que lleva a un aumento de la
concentración de lactato sanguíneo. Sin embargo, en este caso el
paciente padecía calambres y no excretaba lactato, lo que sugiere
insuficiencia para movilizar el glucógeno muscular para producir
glucosa. Su recuperación tras 15-30 minutos es resultado de la
activación de la glucogenólisis hepática mediada por la adrenalina,
que suministra glucosa a la sangre, superando la deficiencia de
glucogenólisis muscular. El tratamiento de la enfermedad de
McArdle habitualmente supone evitar el ejercicio o, cuando es
necesario, consumir hidratos de carbono antes del mismo. Por otra
parte, la enfermedad cursa sin incidentes.

Conceptos avanzados
Proteínas G
Las proteínas G son proteínas de la membrana plasmática que fijan
nucleótidos de guanosina y que están implicadas en la transducción
de señales de una amplia variedad de hormonas (fig. 12.4; v. también
cap. 25). En algunos casos estimulan (Gs); en otros casos, inhiben (Gi)
las proteína cinasas y la fosforilación de proteínas. Las proteínas G
están estrechamente asociadas con los receptores hormonales en las
membranas plasmáticas y constan de subunidades α, β y γ. La
subunidad Gα fija GDP en reposo. Tras la unión con la hormona
(fijación), el receptor recluta las proteínas G, estimulando el
intercambio de GDP por GTP en la subunidad Gα. La unión de GTP
da lugar a la liberación de las subunidades β y γ. A continuación, la
subunidad α queda libre para unirse a la adenilato ciclasa y activarla.
La respuesta hormonal se amplifica tras la unión con el receptor,
porque un único receptor puede activar numerosas subunidades α.
La respuesta hormonal también se extingue en los receptores y las
proteínas G mediante dos mecanismos:
 • La subunidad Gα tiene una actividad lenta guanosina trifosfatasa
(GTPasa) que hidroliza el GTP, con una vida media estimada de
minutos, de forma que se disocia gradualmente de la adenilato
ciclasa y, por tanto, deja de activarla.
• La fosforilación del receptor hormonal por la proteína cinasa A
disminuye su afinidad para la hormona, un proceso descrito
como desensibilización o resistencia hormonal.

Conceptos avanzados
La proteína cinasa A es muy sensible a pequeños cambios
en la concentración de AMP cíclico
Como se ilustra en la figura 12.4, la PKA dependiente de AMPc es
una enzima tetramérica con dos tipos diferentes de
subunidades (R2C2): la subunidad catalítica C tiene actividad proteína
cinasa y la subunidad R reguladora inhibe la actividad proteína
cinasa. La subunidad R tiene una secuencia de aminoácidos que sería
reconocida y fosforilada normalmente por la subunidad C, si no fuera
porque esta secuencia en R contiene un residuo de alanina, en vez de
un residuo serina o treonina. La unión de dos moléculas de AMPc a
cada subunidad R induce cambios conformacionales que conducen a
la disociación de un dímero (AMPc2-R2) de las subunidades C. A
continuación, las subunidades C monoméricas activas proceden a
fosforilar los residuos serina y treonina en las enzimas diana. La PKA
no es una enzima alostérica típica, en cuanto a que la unión del
efector alostérico (AMPc) causa la disociación de las subunidades;
pero la activación completa de la PKA conlleva la unión cooperativa
de cuatro moléculas de AMPc a dos subunidades R. La PKA se activa
completamente a concentraciones submicromolares de AMPc, de
forma que es exquisitamente sensible a los pequeños cambios en la
actividad de la adenilato ciclasa en respuesta al glucagón.

La vía para la activación de la glucógeno fosforilasa (v. fig. 12.4)

conlleva la fosforilación de numerosas moléculas de la fosforilasa
cinasa por la PKA, que después fosforila y activa muchas moléculas
de la glucógeno fosforilasa. El efecto neto de estos pasos secuenciales,
que se inician con la activación de muchas moléculas de adenilato
ciclasa por proteínas G, es un sistema de «cascada de amplificación»,
similar a una serie de amplificadores de un equipo de radio o de
estéreo, dando lugar a un aumento enorme en la potencia de la señal
segundos después de la unión del glucagón a la membrana plasmática
del hepatocito. La fosforilasa b (la forma inactiva y no fosforilada de la
fosforilasa) normalmente es inhibida por el ATP y la glucosa en el
hígado, pero al fosforilarse se convierte en su forma activa, la
fosforilasa a (fig. 12.4), que activa la glucogenólisis y produce Glc y
Glc-1-P, que son convertidas en Glc-6-P e hidrolizadas a glucosa que
se exporta a la sangre.

La glucogenólisis y la glucogénesis están

contrarreguladas por la proteína cinasa A, que activa la
fosforilasa e inhibe la glucógeno sintasa
La glucogenólisis y la glucogénesis son vías opuestas. Teóricamente,
la Glc-1-P producida por la fosforilasa podría activarse rápidamente a
UDP-glucosa y reincorporarse al glucógeno. Para evitar este ciclo
desaprovechado o fútil, la PKA también fosforila la glucógeno
sintasa, inactivando la enzima en este caso. Así, la PKA activa la
fosforilasa (glucogenólisis) e inactiva la glucógeno sintasa
(glucogénesis) de una manera coordinada. Otras vías biosintéticas
hepáticas (como la síntesis de proteínas, colesterol, ácidos grasos y
triglicéridos, así como la glucólisis) también están reguladas por la
fosforilación de enzimas reguladoras cruciales, limitando por lo
general las reacciones de biosíntesis y dirigiendo el metabolismo del
hígado en respuesta al glucagón hacia el suministro de glucosa a la
sangre para mantener las funciones corporales vitales (v. cap. 31).
Para equilibrar la cascada de fenómenos que amplifican la respuesta
glucogenolítica al glucagón, existen varios mecanismos redundantes
para asegurar un final rápido de la respuesta hormonal (tabla 12.3).
Además de la lenta actividad GTPasa de la subunidad Gα, también
existe una fosfodiesterasa en la célula que hidroliza el AMPc a AMP,
permitiendo la reasociación de las subunidades inhibidoras y las
catalíticas de la PKA, disminuyendo su actividad proteína cinasa.
También hay fosfatasas de fosfoproteínas que eliminan los grupos
fosfato de las formas activas fosforiladas de la fosforilasa cinasa y de
la fosforilasa. Otro objetivo de la PKA es el inhibidor-1, una proteína
inhibidora de la fosfatasa de fosfoproteínas, que se activa mediante
fosforilación. El inhibidor-1 fosforilado inhibe las fosfatasas de
fosfoproteínas citoplásmicas, que de lo contrario revertirían la
fosforilación de las enzimas y desactivarían la respuesta al glucagón
(v. fig. 12.4). La disminución de la concentración de AMPc y de la
actividad de la PKA también da lugar a una disminución de la
fosforilación del inhibidor-1, permitiendo un aumento de actividad de
las fosfatasas de fosfoproteínas. Así, numerosos mecanismos actúan
concertadamente para asegurar que la glucogenólisis hepática
disminuya con rapidez como respuesta al aumento de glucosa
sanguínea y a la disminución de la concentración sanguínea de
glucagón después de una comida.

Tabla 12.3

Varios mecanismos están implicados en la finalización de la respuesta hormonal

al glucagón

1. Hidrólisis del GTP en la subunidad Gα

2. Hidrólisis del AMPc por la fosfodiesterasa
3. Actividad proteína fosfatasa

Existen varias enfermedades genéticas autosómicas recesivas que

afectan al metabolismo del glucógeno (tabla 12.4). Estas
enfermedades, conocidas como glucogenosis (enfermedades que
afectan al almacenamiento del glucógeno), se caracterizan por la
acumulación de gránulos de glucógeno en los tejidos que, finalmente,
afectan a la función tisular. De forma predecible, las glucogenosis que
afectan al metabolismo hepático se caracterizan por hipoglucemia en
ayunas y pueden poner en peligro la vida, mientras que los defectos
en el metabolismo del glucógeno muscular se caracterizan por una
fatiga muscular rápida durante el ejercicio.
Tabla 12.4
Clases principales de glucogenosis
Movilización del glucógeno hepático
por la adrenalina
La adrenalina activa la glucogenólisis durante el estrés,
aumentando la concentración de glucosa en sangre
La catecolamina adrenalina (epinefrina) actúa a través de varios
receptores distintos en diferentes células. De estos, los mejor
estudiados son los receptores α- y β-adrenérgicos, que reconocen
diferentes características de la molécula de adrenalina, unen la
adrenalina con distintas afinidades, actúan mediante mecanismos
distintos y se inhiben por diferentes clases de fármacos. Durante la
hipoglucemia grave, el glucagón y la adrenalina actúan
conjuntamente para amplificar la respuesta glucogenolítica en el
hígado. Sin embargo, incluso cuando la glucosa en sangre es normal,
se libera adrenalina como respuesta a amenazas reales o percibidas,
causando un aumento en la glucemia para apoyar la respuesta de
lucha o huida. La cafeína del café y la teofilina del té son inhibidores
de la fosfodiesterasa y originan un aumento del AMPc hepático y de
la glucosa sanguínea. Lo mismo que la adrenalina, la cafeína de unas
pocas tazas de café fuerte también puede hacer que estemos alerta,
reactivos y agresivos.
La respuesta de la adrenalina aumenta el efecto del glucagón en el
hígado durante la hipoglucemia grave (estrés metabólico) y también
explica en parte el ritmo cardíaco rápido, la sudoración, los temblores
y la ansiedad asociados con la hipoglucemia. La acción de la
adrenalina sobre la glucogenólisis hepática se realiza a través de dos
vías: mediante el receptor β-adrenérgico de la adrenalina, que es
similar al del glucagón, e implica a un receptor específico de
adrenalina en la membrana plasmática, a las proteínas G y al AMPc; y
a través de un receptor α-adrenérgico, que actúa mediante un
mecanismo diferente. La unión con los receptores α también implica a
las proteínas G (elementos comunes en la transducción de señal de las
hormonas), pero en este caso la proteína G es específica para la
activación de una isoenzima de membrana de la fosfolipasa C (PLC),
que es específica para la escisión de un fosfolípido de membrana, el
fosfatidilinositol bisfosfato (PIP2) (fig. 12.5). Ambos productos de la
acción de la PLC, el diacilglicerol (DAG) y el inositol trisfosfato
(IP3), actúan como segundos mensajeros de la acción de la adrenalina.
El DAG activa la proteína cinasa C (PKC) que, como la PKA, inicia la
fosforilación de residuos de serina y treonina en proteínas diana. Al
mismo tiempo, el IP3 promueve el transporte de Ca2+ en el citosol. A
continuación, el Ca2+ se une a la proteína calmodulina del citoplasma,
que se fija a la fosforilasa cinasa y la activa directamente, provocando
la fosforilación, independiente del AMPc, y la activación de la
fosforilasa. Una proteína cinasa dependiente de Ca2+-calmodulina y
otras enzimas también se activan, ya sea por fosforilación o por la
asociación con el complejo Ca2+-calmodulina (fig. 12.5). Así, el estrés
activa una compleja red de vías metabólicas, que se centra en las
implicadas en la movilización de las reservas de energía.
 FIG. 12.5 Mecanismo de activación de la fosforilación de
proteínas (y, por tanto, de la glucogenólisis) en el hígado a través
del receptor α-adrenérgico.
El diacilglicerol (DAG) y el inositol trisfosfato (IP3) son segundos
mensajeros que median la respuesta α-adrenérgica. PIP2,
fosfatidilinositol bisfosfato (v. también cap. 24).
Glucogenólisis muscular
El músculo carece de receptor para el glucagón y de
glucosa-6-fosfatasa; no es una fuente
de azúcar sanguíneo durante la hipoglucemia
La localización tisular de los receptores de una hormona es lo que
confiere especificidad para la acción de esta. Solo los tejidos con
receptores para el glucagón responden a este. El músculo puede ser
rico en glucógeno, incluso durante la hipoglucemia, pero carece del
receptor para el glucagón y también de Glc-6-Pasa. Por tanto, el
glucógeno del músculo no puede movilizarse para reponer la glucosa
en sangre. La glucogenólisis del músculo se activa como respuesta a la
adrenalina por medio del receptor β-adrenérgico dependiente de
AMPc, pero la glucosa se metaboliza mediante glucólisis para
producir energía. Esto ocurre, no solamente durante las situaciones de
lucha o huida, sino también en respuesta a las demandas metabólicas
durante el ejercicio prolongado. Además de esta regulación hormonal
durante el estrés, también existen dos mecanismos importantes
independientes de hormonas para la activación de la glucogenólisis en
el músculo (fig. 12.6). En primer lugar, la entrada de Ca2+ al
citoplasma del músculo en respuesta a la estimulación nerviosa activa
la forma basal no fosforilada de la fosforilasa cinasa mediante la
acción del complejo Ca2+-calmodulina. Esta activación de la fosforilasa
independiente de hormonas proporciona la activación rápida de la
glucogenólisis durante los episodios breves de ejercicio, incluso en
ausencia de la acción de la adrenalina. Un segundo mecanismo de
activación de la glucogenólisis muscular conlleva la activación
alostérica directa de la fosforilasa por el AMP. El aumento del uso del
ATP durante una activación rápida y explosiva del músculo da lugar a
la acumulación rápida de ADP, que se convierte parcialmente en AMP
mediante la acción de la enzima miocinasa (adenilato cinasa), que
cataliza la reacción:
 FIG. 12.6 Regulación de la proteína cinasa A (PKA) en el
músculo.
Activación de la glucogenólisis y la glucólisis en el músculo durante el
ejercicio. PFK-1, fosfofructocinasa-1 (comparar con fig. 8.4).

Conceptos avanzados
La inhibición máxima de la glucógeno sintasa se consigue
solo a través de la acción secuencial de varias cinasas
Cuando el glucagón y la adrenalina actúan sobre el hígado, la
activación de la glucogenólisis y la inhibición de la glucogénesis están
mediadas al menos por tres cinasas: la proteína cinasa A, la proteína
cinasa C y la proteína cinasa activada por Ca2+- calmodulina. Estas
tres proteínas cinasas fosforilan los residuos clave de serina y
treonina en las enzimas reguladoras. Estas y otras proteínas cinasas
actúan coordinadamente en un proceso conocido como fosforilación
secuencial o jerárquica, dando lugar a la fosforilación de hasta 9
residuos de aminoácidos de la glucógeno sintasa. La inhibición
máxima de la glucógeno sintasa se consigue solo mediante la
actividad secuencial de varias cinasas. En algunos casos, ciertos
residuos de serina o treonina deben fosforilarse en una secuencia
específica por la acción cooperativa de diferentes cinasas, es decir, la
fosforilación de un sitio por una enzima requiere la fosforilación
previa de otro sitio por una enzima distinta.

El AMP activa las formas basal y fosforilada de la fosforilasa,

aumentando la glucogenólisis en ausencia o en presencia de estímulo
hormonal. El AMP también libera la inhibición de la fosfofructocinasa-
1 (PFK-1) por el ATP (v. cap. 9), estimulando la utilización de glucosa
mediante la glucólisis para la producción de energía. Los efectos
estimuladores del Ca2+ y del AMP aseguran que el músculo pueda
responder a sus necesidades de energía, incluso en ausencia de una
señal hormonal.
Regulación de la glucogénesis
La insulina se opone a la acción del glucagón y estimula
la gluconeogénesis
La glucogénesis, y en general el almacenamiento de energía, tiene
lugar durante y justo después de las comidas. La glucosa y otros
hidratos de carbono, que penetran rápidamente en el hígado desde el
intestino a través de la circulación portal, son captados de forma eficaz
para fabricar glucógeno. El exceso de glucosa prosigue a la circulación
periférica, donde es captada en el músculo y el tejido adiposo para las
reservas de energía o su almacenamiento. Normalmente comemos
sentados y en reposo, no durante el ejercicio, de manera que las vías
opuestas de utilización y almacenamiento frente a la movilización y
utilización de la energía son funciones temporalmente
compartimentadas en nuestras vidas.
El almacenamiento de energía está bajo el control de la hormona
polipeptídica insulina, que se sintetiza y almacena en las células β de
los islotes pancreáticos de Langerhans (v. cap. 30). La insulina se
segrega como respuesta a un aumento de la glucosa presente en la
sangre tras una comida, como respuesta a la concentración de glucosa
en sangre. Sus funciones principales en el metabolismo de los hidratos
de carbono son dos: primero, la insulina revierte las acciones del
glucagón en la fosforilación de las proteínas, desconectando la
glucógeno fosforilasa y activando la glucógeno sintasa, promoviendo
el almacenamiento de glucosa; en segundo lugar, estimula la
captación de la glucosa por los tejidos periféricos (músculo y tejido
adiposo) a través del transportador GLUT-4, facilitando la síntesis y el
almacenamiento del glucógeno y los triglicéridos. La insulina también
actúa en la expresión génica estimulando la síntesis de enzimas
implicadas en el metabolismo de los hidratos de carbono y en el
almacenamiento y conversión de la glucosa en triglicéridos. También
actúa mediante mecanismos más complejos como hormona de
crecimiento, estimulando la síntesis y el recambio proteico en
situaciones en que hay gran cantidad de energía.
La fosforilación de la tirosina en las proteínas, más que la
fosforilación de la serina y la treonina, es un rasgo característico de la
transducción de señales mediante la insulina y el factor de
crecimiento. Al unirse a su receptor transmembrana (fig. 12.7), la
insulina estimula la dimerización de los receptores, estimulando la
actividad de la tirosina cinasa en el dominio intracelular del receptor.
El receptor de insulina autofosforila sus residuos de tirosina,
aumentando su actividad tirosina cinasa y fosforilando los residuos de
tirosina en otras proteínas efectoras intracelulares que, a su vez,
activan otras vías secundarias. Entre estas se encuentran las cinasas
que fosforilan los residuos serina y treonina en las proteínas en
localizaciones diferentes y sobre proteínas distintas de las fosforiladas
por la PKA y la PKC. La activación dependiente de insulina de la
GTPasa, la fosfodiesterasa y las fosfatasas de fosfoproteínas también
controla la acción del glucagón, que habitualmente está presente en
altas concentraciones en la sangre a la hora de comer, es decir, horas
después de la última comida.
 FIG. 12.7 Mecanismos de acción de la insulina.
Efectos reguladores de la insulina sobre el metabolismo de los hidratos
de carbono en el hígado y en el músculo (v. también cap. 30).

El hígado también parece responder directamente a la

concentración de glucosa en la sangre. El aumento de la glucogénesis
hepática empieza más rápidamente que el aumento de la
concentración de insulina en sangre después de una comida. La
perfusión del hígado con soluciones de glucosa in vitro, en ausencia de
insulina, también da lugar a la inhibición de la glucogenólisis y a la
activación de la glucogénesis. Esto parece que ocurre mediante la
inhibición alostérica directa de la fosforilasa b por la glucosa y por la
estimulación secundaria de la actividad proteína fosfatasa.
La mayoría de las células del cuerpo, si no todas, responden a la
insulina de alguna manera, pero los lugares principales de la acción
de la insulina, en cuanto a su cantidad, son los tejidos muscular y
adiposo. Normalmente estos tejidos tienen concentraciones bajas de
transportadores de glucosa en la superficie celular, restringiendo la
entrada de glucosa, ya que dependen sobre todo de los lípidos para el
metabolismo energético. En los tejidos muscular y adiposo, el receptor
de insulina con actividad tirosina cinasa induce la movilización del
transportador de glucosa GLUT-4 (v. tabla 4.2) desde las vacuolas
intracelulares a la superficie de la célula, aumentando el transporte de
glucosa hacia el interior de la célula. A continuación se utiliza la
glucosa en el músculo para la síntesis de glucógeno, y en el tejido
adiposo para producir gliceraldehído-3-fosfato, que se convierte a
glicerol-3-fosfato para la síntesis de triglicéridos (v. cap. 13). La
captación de glucosa por el músculo y por el tejido adiposo,
estimulada por la insulina y mediada por el GLUT-4, es el principal
mecanismo que limita el aumento de glucosa sanguínea después de
una comida.

Conceptos clínicos
Niño grande nacido de una madre diabética
Un bebé de sexo masculino nacido de una madre diabética mal
controlada y crónicamente hiperglucémica era grande y regordete
(macrosómico) al nacer (5 kg), aunque por lo demás parecía sano. Sin
embargo, su estado se deterioró rápidamente, y 1 hora después
mostraba todos los síntomas de hipoglucemia, similares al caso del
bebé de sexo femenino nacido de una madre desnutrida (se comenta
más adelante en este mismo capítulo). En este caso, la diferencia es
que el niño estaba, obviamente, en el extremo del sobrepeso, en vez
de delgado y desnutrido.
Comentario
Este niño ha vivido en un ambiente hiperglucémico crónico durante
el desarrollo uterino. Se ha adaptado al mismo con una producción
endógena creciente de insulina, que tiene una actividad parecida a la
de la hormona del crecimiento, lo que le ha causado una macrosomía.
Al nacer, cuando cesa el aporte de glucosa a través de la placenta,
presenta una concentración normal de glucosa en sangre y un aporte
sustancial a partir del glucógeno hepático. Sin embargo, la
hiperinsulinemia crónica previa al nacimiento probablemente ha
reprimido las enzimas gluconeogénicas y esta concentración elevada
de insulina en sangre al nacer favorece la captación de glucosa por el
músculo y por el tejido adiposo. En ausencia de la fuente materna de
glucosa, la hipoglucemia inducida por la insulina origina una
respuesta de estrés, que se corrige mediante la infusión de glucosa.
Después de 1-2 días, su masa corporal proporcionaría buenas
reservas para la síntesis de glucosa sanguínea a partir de las proteínas
musculares.
Gluconeogénesis
La gluconeogénesis es necesaria para mantener la
glucemia durante el ayuno y la inanición
A diferencia de la glucogenólisis, que puede responder rápidamente
al estímulo hormonal, la gluconeogénesis es una respuesta más lenta
que depende de cambios en la expresión génica y que alcanza una
actividad máxima en un período de horas (v. fig. 12.1); se convierte en
la fuente principal de nuestra concentración de glucosa en sangre
aproximadamente a las 8 h siguientes al estado posterior a la
absorción (v. cap. 31). La gluconeogénesis requiere una fuente de
energía para la biosíntesis y una fuente de carbonos para la formación
del esqueleto de la molécula de glucosa. La energía es proporcionada
por el metabolismo de los ácidos grasos liberados por el tejido
adiposo. La estructura carbonada es suministrada por tres fuentes
principales:

▪ El lactato producido en tejidos como los hematíes y el músculo.

▪ Los aminoácidos derivados de las proteínas musculares.
▪ El glicerol liberado a partir de los triglicéridos durante la
lipólisis en el tejido adiposo.

Entre estos, la proteína muscular es el precursor más importante

de la glucosa sanguínea durante el ayuno y la inanición; la velocidad
de la gluconeogénesis está limitada a menudo por la disponibilidad
del sustrato, incluida la tasa de proteólisis en el músculo o, en algunos
casos, la masa muscular. Durante el ayuno prolongado, la
malnutrición o la inanición, perdemos masa adiposa y muscular. La
grasa se utiliza para cubrir las necesidades generales de energía del
organismo y como apoyo a la gluconeogénesis, mientras que la mayor
parte de los aminoácidos de las proteínas se convierten en glucosa.
También aumenta la excreción de nitrógeno en orina (urea).
Gluconeogénesis a partir del lactato
La gluconeogénesis usa lactato, aminoácidos y glicerol
como sustratos para la síntesis de glucosa; los ácidos
grasos proporcionan la energía
Conceptualmente, la gluconeogénesis es lo opuesto a la glucólisis
anaerobia, pero se lleva a cabo mediante una vía ligeramente
diferente, en la que intervienen enzimas mitocondriales y citosólicas
(fig. 12.8) Durante la gluconeogénesis hepática, el lactato se vuelve a
convertir en glucosa, utilizando en parte las mismas enzimas
glucolíticas implicadas en la conversión de la glucosa a lactato. El ciclo
del lactato en el que participan el hígado, los hematíes y el músculo,
conocido como ciclo de Cori, se trata con detalle en el capítulo 31. En
este punto nos centramos en la vía metabólica para la conversión de
lactato a glucosa.
 FIG. 12.8 Vía de la gluconeogénesis.
La gluconeogénesis es lo contrario de la glucólisis. Enzimas singulares
 superan las reacciones cinasa irreversibles de la glucólisis.
Compartimentos: c, citoplasmático; m, mitocondrial; mmi, membrana
mitocondrial interna. Enzimas: CS, citrato sintasa; Fru-1,6-BPasa,
fructosa-1,6-bisfosfatasa; GAPDH, gliceraldehído-3-fosfato
deshidrogenasa; GK, glucocinasa; Glc-6-Pasa, glucosa-6-fosfatasa;
MDH, malato deshidrogenasa; PC, piruvato carboxilasa; PDH, piruvato
deshidrogenasa; PGK, fosfoglicerato cinasa. Sustratos: 2,3-BPG,
bisfosfoglicerato; DHAP, dihidroxiacetona fosfato; Fru-1,6-BP, fructosa-
1,6-bisfosfato; Glic-3-P, gliceraldehído-3-fosfato; MAL, malato; OAA,
oxalacetato; PEP, fosfoenolpiruvato; PEPCK, PEP carboxicinasa; Pir,
piruvato; 3-PG, 3-fosfoglicerato. Líneas continuas: activa durante la
gluconeogénesis. Líneas discontinuas: inactiva durante la
gluconeogénesis.

Un problema muy importante en la reversión de la glucólisis es la

superación de la irreversibilidad de las tres reacciones cinasa: la
glucocinasa (GK), la fosfofructocinasa-1 (PFK-1) y la piruvato cinasa
(PK). La cuarta cinasa en la glucólisis, la fosfoglicerato cinasa, cataliza
una reacción de equilibrio, fácilmente reversible, en la que una
reacción de fosforilación en el sustrato transfiere un acil fosfato de alta
energía del 1,3-bisfosfoglicerato a un enlace pirofosfato de energía
similar en el ATP. Para solventar estas tres reacciones irreversibles,
el hígado utiliza 4 enzimas únicas: la piruvato carboxilasa (PC) en la
mitocondria y la fosfoenolpiruvato carboxicinasa (PEPCK) en el
citoplasma para evitar la PK, la fructosa-1,6-bisfosfatasa (Fru-1,6-
BPasa) para no utilizar la PFK-1, y la Glc-6-Pasa para evitar la GK (v.
fig. 12.8).
La gluconeogénesis a partir del lactato implica su conversión a
fosfoenolpiruvato (PEP), un proceso que requiere la inversión de dos
equivalentes de ATP para formar el enlace de alta energía enol-fosfato
en el PEP. En primer lugar, el lactato se convierte a piruvato mediante
la lactato deshidrogenasa (LDH) y, a continuación, penetra en la
mitocondria, donde se convierte en oxalacetato por la PC, utilizando
biotina y ATP. El oxalacetato se reduce a malato por la malato
deshidrogenasa del ciclo de los ácidos tricarboxílicos (ATC), sale de la
mitocondria y después se vuelve a oxidar a oxalacetato por la malato
deshidrogenasa del citosol. A continuación, el oxalacetato citosólico se
descarboxila por la PEPCK, utilizando GTP como cosustrato y
produciendo PEP. La energía para la síntesis del PEP desde el
oxalacetato procede del GTP y de la descarboxilación del oxalacetato.
La glucólisis puede ahora retroceder desde PEP hasta que alcanza la
siguiente reacción irreversible, la PFK-1. Esta enzima se evita por una
simple reacción de hidrólisis, catalizada por la Fru-1,6-BPasa sin
producción de ATP, revirtiendo la reacción de la PFK-1 y produciendo
Fru-6-P. De forma similar, la reacción catalizada por la GK se evita
mediante la hidrólisis de la Glc-6-P por la Glc-6-Pasa, sin producción
de ATP. A continuación se libera la glucosa libre del hígado a la
sangre.
La gluconeogénesis es bastante eficaz, de modo que el hígado
puede fabricar un kilo de glucosa al día mediante la
gluconeogénesis, y realmente lo hace en pacientes diabéticos
hiperglucémicos mal controlados. La producción normal de glucosa
en ausencia de hidratos de carbono de la dieta es de unos 200 g/día,
casi un cuarto de kilo de glucosa. La gluconeogénesis a partir del
piruvato es moderadamente cara, requiriendo un consumo neto del
equivalente de 4 moles de ATP por cada mol de piruvato convertido a
glucosa (es decir, 2 moles de ATP en la reacción de la PC y 2 moles de
GTP en la reacción de la PEPCK). El ATP y el GTP son suministrados
por la oxidación de los ácidos grasos (v. cap. 11).

Gluconeogénesis a partir de los aminoácidos

y del glicerol
La mayoría de los aminoácidos son glucogénicos (v. cap. 15), es decir,
tras la desaminación su esqueleto carbonado puede convertirse en
glucosa. La alanina y la glutamina son los aminoácidos más
importantes exportados desde el músculo para la gluconeogénesis.
Sus concentraciones relativas en la sangre venosa del músculo
exceden a sus concentraciones relativas en las proteínas musculares,
indicando una reorganización considerable de los aminoácidos
musculares para proporcionar los sustratos gluconeogénicos. Como se
comenta con detalle en el capítulo 15, la alanina se convierte
directamente en piruvato mediante la alanina aminotransferasa
(alanina transaminasa [ALT]) y después la gluconeogénesis sigue
como se ha descrito para el lactato. Otros aminoácidos son
convertidos en intermediarios del ciclo de los ATC y después a malato
para la gluconeogénesis. Por ejemplo, el aspartato se convierte en
oxalacetato mediante la aspartato aminotransferasa (aspartato
transaminasa [AST]) y el glutamato en α-cetoglutarato por la
glutamato deshidrogenasa. Algunos aminoácidos glucogénicos se
convierten mediante vías menos directas en alanina o intermediarios
del ciclo de los ATC para la gluconeogénesis. Los grupos amino de
estos aminoácidos se convierten en urea, mediante el ciclo de la urea
en los hepatocitos, y la urea se excreta en la orina (v. cap. 15).
El glicerol entra en la gluconeogénesis a la altura de las triosas
fosfato (v. fig. 12.8). Después de la liberación del glicerol y de los
ácidos grasos desde el tejido adiposo al plasma, el glicerol es captado
por el hígado y fosforilado por la glicerol cinasa. Después de la acción
de la glicerol-3-fosfato deshidrogenasa (v. fig. 8.7), el glicerol entra en
la vía gluconeogénica como dihidroxiacetona fosfato. Solo el
componente glicerol de las grasas puede convertirse en glucosa. Como
la PC y la PEPCK no son necesarias, la incorporación del glicerol a la
glucosa necesita solo 2 moles de ATP por cada mol de glucosa
producido.

La glucosa no puede sintetizarse a partir de los ácidos

grasos
Como se comenta en el capítulo 11, el metabolismo de los ácidos
grasos supone su conversión en pasos de oxidación que generan la
molécula de 2 carbonos acetil-CoA, que después se metaboliza en el
ciclo de los ATC tras su condensación con el oxalacetato para formar
citrato. Aunque los carbonos del acetato están teóricamente
disponibles para la gluconeogénesis por la conversión a malato,
durante la vía desde el citrato al malato se eliminan dos moléculas de
CO2 en las reacciones de la isocitrato deshidrogenasa y la α-
cetoglutarato deshidrogenasa. Así, aunque en el ciclo de los ATC se
produce energía, los 2 carbonos empleados en la gluconeogénesis a
partir del acetil-CoA se pierden como CO2. Por esta razón, el acetil-
CoA (y, por tanto, las cadenas pares de ácidos grasos) no puede servir
como sustrato para la gluconeogénesis neta. Sin embargo, los ácidos
grasos de cadena impar y de cadena ramificada, que forman
propionil-CoA, pueden servir como precursores minoritarios de la
gluconeogénesis. El propionil-CoA primero se carboxila a
metilmalonil-CoA, que sufre reacciones catalizadas por una racemasa
y una mutasa para formar succinil-CoA, un intermediario del ciclo de
los ATC (v. cap. 11). El succinil-CoA se convierte en malato, sale de la
mitocondria y se oxida a oxalacetato. Tras la descarboxilación por la
PEPCK, los 3 carbonos del propionato se conservan en el PEP y
glucosa.

Conceptos clínicos
El niño nacido de una madre desnutrida puede tener
hipoglucemia
Una niña nació a las 39 semanas de embarazo de una madre joven y
desnutrida. La niña también estaba delgada y débil al nacer y, 1 hora
después del nacimiento, mostraba signos de distrés, con frecuencias
cardíaca y respiratoria rápidas. La glucosa sanguínea era de 3,5
mmol/l (63 mg/dl) al nacer, que disminuyó rápidamente a 1,5 mmol/l
(27 mg/dl) al cabo de 1 hora, momento en el que empezó a no
responder y a entrar en coma. Su situación mejoró de forma
considerable con la inyección de una solución de glucosa seguida de
una dieta rica en hidratos de carbono. Durante las siguientes 2
semanas mejoró gradualmente, antes de ser dada de alta.
Comentario
Durante el desarrollo intrauterino, el feto obtiene la glucosa de forma
exógena, a partir de la circulación placentaria. Sin embargo, tras el
nacimiento, el bebé depende al principio de la movilización del
glucógeno hepático y, después, de la gluconeogénesis para mantener
la glucosa sanguínea. Dado el estado de malnutrición de la madre,
esta niña nació con reservas de glucógeno hepático muy escasas. Así,
fue incapaz de mantener la homeostasis posparto de la glucemia y
enseguida entró en hipoglucemia, iniciando una respuesta de estrés.
Tras sobrevivir a la hipoglucemia transitoria, probablemente todavía
carecía de la suficiente masa muscular para proporcionar un
suministro adecuado de aminoácidos para la gluconeogénesis. La
inyección de glucosa, seguida de una dieta rica en hidratos de
carbono, pudo corregir estos defectos, pero podría no corregir el daño
más grave por la malnutrición prolongada durante el desarrollo fetal.

Regulación de la gluconeogénesis
La fructosa 2,6-bisfosfato contrarregula alostéricamente
la glucólisis y la gluconeogénesis
Lo mismo que el metabolismo del glucógeno en el hígado, la
gluconeogénesis está regulada principalmente por mecanismos
hormonales. En este caso, el proceso regulador supone la
contrarregulación de la glucólisis y la gluconeogénesis, en gran parte
por la fosforilación-desfosforilación de las enzimas, bajo el control del
glucagón y la insulina. Los puntos de control principales
corresponden a las enzimas reguladoras PFK-1 y Fru-1,6-BPasa que,
en el hígado, son extremadamente sensibles al efector alostérico
fructosa 2,6-bisfosfato (Fru-2,6-BP). La Fru-2,6-BP es un activador de
la PFK-1 y un inhibidor de la Fru-1,6-BPasa, contrarregulando las dos
vías opuestas. Como se muestra en la figura 12.9, la Fru-2,6-BP se
sintetiza por una enzima bifuncional inusual, la fosfofructocinasa-
2/fructosa-2,6-bisfosfatasa (PFK-2/Fru-2,6-BPasa), que posee ambas
actividades cinasa y fosfatasa. En el estado fosforilado, bajo la
influencia del glucagón a través de la proteína cinasa A, esta enzima
muestra actividad Fru-2,6-BPasa, que disminuye la concentración de
Fru-2,6-BP. El descenso simultáneo de Fru-2,6-BP disminuye la
estimulación de la glucólisis en la PFK-1 y libera la inhibición de la
gluconeogénesis en la Fru-1,6-BPasa. De esta manera, la fosforilación,
mediada por el glucagón, de PFK-2/Fru-2,6-BP, pone al hepatocito en
modo gluconeogénico. El aumento coordinado mediado
alostéricamente de la Fru-1,6-BPasa y el descenso de la actividad PFK-
1 asegura que la glucosa sintetizada por la gluconeogénesis no se
consuma por la glucólisis en un ciclo fútil, sino que se libere a la
sangre mediante la Glc-6-Pasa. De forma similar, cualquier flujo de
glucosa a partir de glucogenólisis, inducido también por el glucagón,
es derivado a la sangre, y no a la glucólisis, por la inhibición de la
PFK-1. La PK también se inhibe mediante la fosforilación por la
proteína cinasa A (PKA), proporcionando un lugar adicional para la
inhibición de la glucólisis (fig. 12.9).

FIG. 12.9 Regulación de la gluconeogénesis.

 La gluconeogénesis está regulada por las concentraciones hepáticas
de Fru-2,6-BP y acetil-CoA. La parte superior del diagrama está
centrada en la regulación recíproca de la Fru-1,6-BPasa y la
fosfofructocinasa-1 (PFK-1) por la Fru-2,6-BP, y la parte inferior sobre
la regulación recíproca de la piruvato deshidrogenasa (PDH) y la
piruvato carboxilasa (PC) por el acetil-CoA. OAA, oxalacetato.

Cuando la glucosa entra en el hígado después de una comida, la

insulina media la desfosforilación de la PFK-2/Fru-2,6-BPasa,
poniendo en marcha su actividad PFK-2. El aumento resultante en la
Fru-2,6-BP activa la PFK-1 e inhibe la actividad Fru-1,6-BPasa. La
gluconeogénesis se inhibe y la glucosa que penetra en el hígado se
incorpora, a continuación, al glucógeno o es encaminada hacia la
glucólisis para la lipogénesis. Así, el metabolismo del hígado después
de una comida está enfocado a la síntesis y almacenamiento de las
reservas energéticas de hidratos de carbono y lípidos, que más tarde
se utilizarán (en el estado posterior a la absorción) para el
mantenimiento de la homeostasis de la glucosa sanguínea y de los
ácidos grasos.
La gluconeogénesis también se regula en la mitocondria por el
acetil-CoA. El aumento de ácidos grasos plasmáticos procedentes del
tejido adiposo, estimulado por el glucagón para apoyar la
gluconeogénesis (v. cap. 11), da lugar a un aumento del acetil-CoA
hepático, que es un inhibidor de la piruvato deshidrogenasa (PDH) y
un activador alostérico esencial de la PC (v. fig. 12.8). De esta manera,
el metabolismo de las grasas inhibe la oxidación del piruvato y
favorece su uso para la gluconeogénesis en el hígado. En el músculo,
durante el ayuno, la utilización de glucosa en el metabolismo
energético está limitada por la baja concentración de GLUT-4 en las
membranas plasmáticas (dada la concentración baja de insulina en el
plasma) o por la inhibición de la PDH por el acetil-CoA. El
metabolismo activo de las grasas y las concentraciones elevadas de
acetil-CoA en el músculo favorecen la excreción de una fracción
significativa de piruvato en forma de lactato, incluso en reposo. El
esqueleto carbonado de la glucosa vuelve al hígado mediante el ciclo
de Cori (v. cap. 31) y el reciclaje de piruvato a glucosa, en efecto,
conserva la proteína muscular.
Conversión de la fructosa y la galactosa en
glucosa
Como se comenta con detalle en el capítulo 17, la fructosa se
metaboliza casi exclusivamente en el hígado mediante la enzima
fructocinasa. La fructosa entra en la glucólisis a la altura de las triosas
fosfato, sin utilizar la enzima reguladora PFK-1. Después de consumir
zumos de frutas, bebidas isotónicas o alimentos con gran contenido de
fructosa, como el sirope de maíz, pueden forzarse grandes cantidades
de piruvato al interior de la mitocondria para utilizarlas en el
metabolismo energético o para la biosíntesis de las grasas. Durante el
estado gluconeogénico, esta fructosa puede dirigirse también hacia
Glc-6-P, suministrando una fuente adecuada de glucosa sanguínea. La
gluconeogénesis a partir de la galactosa es igualmente eficaz, ya que la
Glc-1-P derivada de la galactosa-1-fosfato (v. cap. 17) se isomeriza
fácilmente a Glc-6-P por la fosfoglucomutasa. La fructosa y la
galactosa son buenas fuentes de glucosa, independientemente de la
glucogenólisis y la gluconeogénesis.

Aprendizaje activo

1. La inactivación de la glucogénesis en respuesta a la adrenalina

ocurre en un paso único por la acción de la PKA sobre la
glucógeno sintasa, mientras que la activación de la
glucogenólisis implica una enzima intermedia, la fosforilato
cinasa, que fosforila la fosforilasa. Discutir las ventajas e
inconvenientes metabólicos de la activación en dos pasos de la
glucogenólisis.
2. Investigar el uso de inhibidores de la gluconeogénesis en el
tratamiento de la diabetes tipo 2.
3. La glucosa-6-fosfatasa es esencial para la producción de glucosa
en el hígado, pero no es una enzima citosólica. Describir la
actividad y localización subcelular de esta enzima y los
estadios finales en la vía de producción de la glucosa hepática.
4. Comentar los fundamentos de los mecanismos (tanto
Introducción
Las lipoproteínas son partículas del plasma compuestas por proteínas
y diversas clases de lípidos. Su estructura permite el transporte de los
lípidos hidrofóbicos en el medio acuoso del plasma. Las lipoproteínas
distribuyen el colesterol y los triacilgliceroles entre el intestino, el
hígado y los tejidos periféricos. El transporte de los triacilgliceroles
está relacionado con el metabolismo de los combustibles corporales,
mientras que el colesterol transportado forma una reserva extracelular
disponible para las células. Las alteraciones del metabolismo de las
lipoproteínas son el factor fundamental en el desarrollo de la
aterosclerosis, un proceso que apuntala la enfermedad
cardiovascular aterosclerótica (ECVA), en la que se incluyen la
cardiopatía coronaria, el ictus y la vasculopatía periférica.

Las lipoproteínas distribuyen los triacilgliceroles entre el

intestino y el hígado, por una parte, y los tejidos
periféricos, por la otra
El colesterol es transportado también desde las células periféricas de
vuelta al hígado.
Los ácidos grasos de cadena larga pueden esterificarse y
almacenarse en forma de triacilgliceroles en el tejido adiposo (v.
cap. 13). Los triacilgliceroles presentes en los alimentos son digeridos
y absorbidos en el tracto gastrointestinal y posteriormente se vuelven
a ensamblar en los enterocitos para su distribución hística.
Los triacilgliceroles son transportados en el plasma en el interior de
partículas lipoproteicas, mientras que los ácidos grasos de cadena
corta e intermedia son transportados unidos a la albúmina. Los
triacilgliceroles también pueden ser sintetizados de forma endógena,
principalmente en el hígado.
El colesterol también es transportado desde la periferia de vuelta al
hígado. Esto se conoce como transporte inverso del colesterol. Las
lipoproteínas también transportan vitaminas liposolubles, como las
vitaminas A y E.
 Aplicaciones clínicas
Triacilgliceroles: terminología
Los triacilgliceroles son ésteres del glicerol y ácidos grasos. Se
conocen también como triglicéridos. Si bien numerosos textos de
bioquímica emplea el término «triacilgliceroles», en la bibliografía
clínica se usa «triglicéridos». En nuestro caso utilizaremos el término
triacilgliceroles, pero cuando describamos contextos clínicos
usaremos en ocasiones el término triglicéridos para familiarizar a los
lectores con ambos términos.
Naturaleza de las lipoproteínas
Las lipoproteínas son agrupaciones de moléculas
hidrófilas, hidrófobas y anfipáticas
Las partículas de lipoproteínas contienen triacilgliceroles, colesterol,
fosfolípidos y proteínas (conocidas como apolipoproteínas). Los
ésteres de colesterol hidrófobos y los triacilgliceroles residen en el
centro de estas partículas, mientras que los fosfolípidos anfipáticos y
el colesterol libre, junto con las apolipoproteínas, forman su capa
externa (fig. 33.1). Algunas apolipoproteínas, como la apolipoproteína
B (apoB), están incrustadas en la superficie de la partícula, mientras
que otras, como la apoC, solo están unidas de forma laxa y se pueden
intercambiar fácilmente con diferentes clases de lipoproteínas.

FIG. 33.1 Partícula de lipoproteína.

Una partícula de lipoproteína tiene una superficie hidrófila externa y un
interior hidrófobo. La capa superficial contiene colesterol libre,
 fosfolípidos y apolipoproteínas. Los ésteres de colesterol y los
triacilgliceroles se localizan en el centro hidrófobo de la partícula.

Las lipoproteínas difieren en el tamaño y la densidad

Las lipoproteínas se clasifican según su densidad o su contenido de
apolipoproteína. Las lipoproteínas presentes en el plasma forman un
continuo de tamaño y densidad (tabla 33.1). Se clasifican en
quilomicrones, lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL),
lipoproteínas de densidad intermedia (IDL), que son prácticamente
idénticas a las denominadas partículas remanentes, lipoproteínas de
baja densidad (LDL) y lipoproteínas de alta densidad (HDL). Las
VLDL y las IDL son ricas en triacilgliceroles, mientras que las LDL son
pobres en triacilgliceroles y ricas en colesterol. La densidad de las
partículas aumenta, y el tamaño disminuye, a medida que disminuye
el contenido en triacilglicerol. Así pues, la densidad aumenta desde
los quilomicrones, pasando por las VLDL, las IDL y las LDL hasta las
HDL.

Tabla 33.1
Clases de lipoproteínas

HDL, lipoproteínas de alta densidad; IDL, lipoproteínas de densidad intermedia; TG,

triacilglicerol (triglicérido); VLDL, lipoproteínas de muy baja densidad. Cuando se separan
mediante electroforesis, las VLDL se denominan pre-β-lipoproteínas, las LDL se denominan
β-lipoproteínas y las HDL se designan α-lipoproteínas.
*Las apoproteínas más abundantes presentes en una partícula de lipoproteína determinada
están indicadas primero, y las que se intercambian con otras partículas están entre
paréntesis.
 Conceptos avanzados
Separación de las lipoproteínas mediante
ultracentrifugación
Los laboratorios clínicos utilizan de rutina centrifugadoras para
separar los hematíes del suero o el plasma. Estas máquinas
desarrollan una fuerza centrífuga moderada, de 2.000-3.000 g. Sin
embargo, en la bioquímica especializada de lípidos, proteínas y
ácidos nucleicos se aplican al plasma fuerzas centrífugas mucho
mayores (40.000-100.000g) para separar partículas y moléculas. Esta
técnica se denomina ultracentrifugación. Cuando se aplica una fuerza
centrífuga a una disolución, las partículas más pesadas que el
disolvente que las rodea sedimentan, y las que son más ligeras flotan
en la superficie a una velocidad proporcional a la fuerza centrífuga
aplicada y al tamaño y la densidad de la partícula.
En una técnica conocida en la bioquímica lipídica como flotación
por ultracentrifugación, el plasma se recubre por una capa con una
solución de densidad definida (p. ej., 1.063 kg/l, la densidad de las
VLDL). Después de varias horas de centrifugación a una velocidad
del rotor de alrededor de 40.000 rpm, las VLDL flotan en la superficie,
donde pueden recogerse. Se pueden utilizar soluciones con otra
densidad para separar otras lipoproteínas. Las modificaciones de esta
técnica, como la centrifugación con gradiente de densidad, permiten
separar el plasma en varias «bandas» que contengan diferentes
fracciones de lipoproteína.

Apolipoproteínas
Las apolipoproteínas son proteínas presentes en las
partículas de lipoproteínas; desempeñan funciones
estructurales y metabólicas
Las diferentes apolipoproteínas se designan por letras fijadas de
antemano por la abreviatura «apo» (p. ej., apoA, apoB, etc.). Las
apolipoproteínas que se encuentran incrustadas en la superficie de las
partículas de lipoproteínas determinan sus interacciones con
receptores celulares. Otras regulan la actividad de las enzimas y de
otras proteínas que participan en el transporte y la distribución de los
lípidos. Cada clase de lipoproteínas contiene una serie característica
de apolipoproteínas. En la tabla 33.2 se enumeran las principales
apolipoproteínas.

Tabla 33.2
Estructura y función de las apolipoproteínas
AA, aminoácidos; CETP, proteína de transferencia de ésteres de colesterol; CHO, hidratos de
carbono; HTGL, triglicérido lipasa hepática; LCAT, lecitina:colesterol aciltransferasa; LPL,
lipoproteína lipasa; LRP, proteína relacionada con el receptor de LDL; RCT, transporte
inverso de colesterol.
Véanse las referencias en el texto.

Reproducida con autorización de Dominiczak MH, Caslake MJ.

Apolipoproteins: metabolic role and clinical biochemistry
applications. Ann Clin Biochem 2011; 48: 498-515.

Las apolipoproteínas A (apoAI y apoAII) están presentes en las

partículas de las HDL. La apoAI es una proteína pequeña de 243
aminoácidos que se sintetiza en el hígado y el intestino. El gen APOA1
forma parte del complejo APOA1/C3/A4/A5. La apoAI activa a una
enzima que esterifica al colesterol, la lecitina:colesterol aciltransferasa
(LCAT). La apoAI se une al receptor BI depurador (scavenger). Es un
marcador de la concentración de las HDL en el plasma.
La apoAII también está presente en las HDL. Es una proteína de 77
aminoácidos que se sintetiza sobre todo en el hígado. Inhibe la
lipoproteína lipasa (LPL) y sirve como cofactor para la LCAT y para la
proteína de transferencia de ésteres de colesterol (CETP).
La apolipoproteína B tiene dos variantes frecuentes, la apoB100 y la
apoB48. La apoB100 es una proteína grande, con una masa molecular
de 513.000 kDa, formada por 4.509 aminoácidos. Se sintetiza en el
hígado. La apoB100 está presente en las VLDL, las IDL y las LDL.
Controla el metabolismo de las LDL. Como solo hay una molécula de
apoB100 por cada partícula de lipoproteína, la determinación de la
apoB en el plasma refleja la suma de las VLDL, las IDL y las LDL. La
apoB100 se une al receptor LDL (apoB/E). La mutación en su residuo
aminoácido 3.500 disminuye su unión al receptor y es la causa de una
afección conocida como apoB defectuosa familiar (FDB, familial
defective apoB).
La apoB48 está presente en los quilomicrones. Es una forma
truncada de apoB100 sintetizada a partir del mismo gen. Durante la
edición del ARNm de la apoB100 se introduce un codón de parada (la
designación «B48» significa que abarca al 48% de la secuencia
aminoterminal de la apoB). Se sintetiza en los enterocitos. Obsérvese
que la apoB48 no se une al receptor LDL. Su concentración plasmática
refleja la suma de los quilomicrones y de las partículas remanentes de
los quilomicrones.
La apolipoproteína E está presente en todas las clases de
lipoproteínas. Tiene una masa molecular de 34.200 Da y consta de 299
aminoácidos. Se une al receptor LDL con mayor afinidad que la
apoB100. También se une a la proteína relacionada con el receptor de
LDL (LRP). La apoE estimula a la LPL, la triglicérido lipasa hepática
(HTGL) y la LCAT. Su síntesis está controlada por tres alelos
principales, ɛ2, ɛ3 y ɛ4, y existe en tres isoformas, E2, E3 y E4. La
isoforma E2 resulta de la sustitución de cisteína por arginina en la
posición 158 en la isoforma E3 y tiene menor afinidad por los
receptores. En los individuos homocigóticos E2/E2 está deteriorada la
captación de las partículas remanentes y da lugar a la dislipidemia
familiar (conocida también como hiperlipidemia de tipo III).
En las HDL, la apoE contribuye a la eliminación de colesterol de las
células. La apoE también se sintetiza en el cerebro por los astrocitos y
las células de la microglía: afecta al crecimiento y a la reparación de
las células del sistema nervioso central (SNC). Se ha observado que los
individuos con fenotipo E4 muestran mayor riesgo de la variante
esporádica de la enfermedad de Alzheimer. La apoE ejerce también
funciones antiinflamatoria y antioxidante. Para diagnosticar la
dislipidemia familiar se determinan el fenotipo y el cariotipo de las
isoformas de apoE.
Las apolipoproteínas C (apoCI, apoCII y apoCIII) son activadoras e
inhibidoras enzimáticas y se intercambian ampliamente entre
diferentes clases de lipoproteínas.
La apolipoproteína (a) o apo(a), posee un dominio proteasa y una
serie de secuencias de repetición de aproximadamente 80- 90
aminoácidos de largo, estabilizada mediante puentes disulfuro en una
estructura de triple lazo. Estas estructuras se denominan kringles (el
nombre de un pastel danés que tiene una forma parecida). Uno de los
kringles, el kringle 4, se repite 35 veces dentro de la secuencia apo(a);
por lo general, el número de repeticiones determina el tamaño de las
isoformas de lipoproteína(a). La apo(a) se sintetiza en el hígado y se
une al receptor LDL. Desde el punto de vista estructural, está
relacionada con el plasminógeno.
La apo(a) es un componente de la lipoproteína(a), lp(a). La lp(a) es
una partícula parecida a las LDL en la que la apo(a) está unida
covalentemente a la apoB100. La lp(a) es sumamente polimórfica; su
masa molecular varía entre 187.000 y 800.000 Da. Su concentración en
el plasma está casi enteramente determinada genéticamente y está
poco influida por factores del estilo de vida. La Lp(a) se asocia de
forma modesta al riesgo cardiovascular.

Aplicaciones clínicas
Las concentraciones de apolipoproteínas predicen el riesgo
cardiovascular
Las determinaciones de las apolipoproteínas en el plasma parece que
predicen el riesgo de enfermedad cardiovascular mejor que las
concentraciones del colesterol total y el colesterol LDL. Sin embargo,
como la mayoría de los estudios epidemiológicos y los algoritmos
terapéuticos están referidos a las determinaciones lipídicas, la
mayoría de los laboratorios todavía sigue midiendo los lípidos para
valorar el riesgo cardiovascular.
Receptores de lipoproteína
El receptor de LDL está regulado por la concentración
intracelular de colesterol
La captación celular de lipoproteínas está mediada por receptores de
membrana. El receptor clave de las lipoproteínas es el de LDL,
conocido también como receptor apoB/E. Como indica su nombre,
puede unirse a la apoB100 o a la apoE. Fue descubierto por Joseph
Goldstein y Michael Brown, que recibieron conjuntamente el premio
Nobel por su trabajo en 1985. La proteína del receptor maduro
contiene 839 aminoácidos y atraviesa la membrana celular. El gen del
receptor se localiza en el cromosoma 19 y su expresión está regulada
por la concentración intracelular de colesterol libre.

Los receptores «depuradores» son inespecíficos y no

están regulados
Los receptores depuradores (scavenger) están presentes en células
fagocíticas como los macrófagos. Se designan como clase A, clase B y
CD36. Pueden unirse a numerosas moléculas diferentes. No se unen a
las LDL intactas, pero se unen con facilidad a las LDL que han sido
oxidadas o acetiladas. El receptor de la clase B se une a partículas de
HDL en el hígado. Un hecho importante es que los receptores
depuradores no están sujetos a la regulación por retroalimentación y,
por tanto, pueden sobrecargar la célula con su ligando.
Enzimas y proteínas de transferencia
lipídica
Dos hidrolasas, la lipoproteína lipasa (LPL) y la triglicérido lipasa
hepática (HTGL) eliminan los triacilgliceroles de las partículas de
lipoproteínas. La LPL está unida a proteoglucanos de heparán sulfato
en la superficie de las células endoteliales de los vasos sanguíneos y la
HTGL está asociada a las membranas plasmáticas en el hígado.
La lecitina:colesterol aciltransferasa (LCAT) se asocia a las HDL y
esterifica el colesterol adquirido por las HDL a partir de las células.
Sin embargo, dentro de las células, el colesterol es esterificado por una
enzima diferente, la acilCoA:colesterol aciltransferasa (ACAT). Existen
dos isoformas de la ACAT: ACAT1, presente en los macrófagos, y
ACAT2, presente en el intestino y en el hígado.
La proteína de transferencia del éster de colesterol (CETP) facilita el
intercambio de ésteres de colesterol por triacilgliceroles entre las HDL
y otras lipoproteínas.
Vías del metabolismo de las
lipoproteínas
Las lipoproteínas cumplen una doble función:
distribución de los triacilgliceroles y suministro de
colesterol a las células
Las lipoproteínas distribuyen los triacilgliceroles y el colesterol entre
el intestino y el hígado, por una parte, y los tejidos periféricos, por
otra.
Los triacilgliceroles son transportados hacia la periferia para su
almacenamiento a largo plazo en el tejido adiposo. Por el contrario, el
colesterol se mueve en ambas direcciones (su transporte desde los
tejidos periféricos de vuelta al hígado se conoce como «transporte
inverso»). El colesterol presente en las lipoproteínas constituye una
reserva extracelular a disposición de las células a través del receptor
LDL. El colesterol que ha sido transportado al hígado puede
excretarse por la bilis.

Metabolismo de las lipoproteínas: etapa de

distribución del combustible
En el estado de alimentación, los triglicéridos son
distribuidos desde el intestino a la periferia por los
quilomicrones; los remanentes de los quilomicrones se
forman después de que se eliminan los triacilgliceroles
Después de una comida con grasas, los triacilgliceroles presentes en el
alimento se ven sometidos a la acción de las lipasas pancreáticas y se
absorben en el intestino como monoacilgliceroles, ácidos grasos libres
y glicerol libre (v. cap. 30). A continuación, los triacilgliceroles
sintetizados en el enterocito, junto con los fosfolípidos y el colesterol,
se ensamblan en la «plantilla» de la apoB48, para formar partículas de
quilomicrones. Estas se segregan a la linfa y alcanzan el plasma a
través del conducto torácico. También adquieren apoA, C y E. Los
quilomicrones le dan al plasma un aspecto lechoso y su semivida es
menor de 1 hora.
Los triacilgliceroles son hidrolizados por la LPL en los tejidos
periféricos y los ácidos grasos entran en las células. Lo que queda de
los quilomicrones son partículas más pequeñas denominadas
remanentes de quilomicrones.

Los triglicéridos sintetizados en el hígado son

transportados a la periferia por las VLDL; esto sucede
tanto tras haber comido como en ayunas
Las VLDL se ensamblan en el hígado sobre moléculas de apoB100 en
un proceso facilitado por la proteína microsomal de transferencia de
triglicéridos (MTP). Después de ser secretadas al plasma, las VLDL
adquieren ésteres de colesterol y apoproteínas (apoC y apoE) a partir
de las HDL. Sus apoB100 y apoE permanecen en conformaciones que
no permiten la unión con el receptor LDL. En los tejidos periféricos, de
manera análoga a los quilomicrones, los triacilgliceroles VLDL son
hidrolizados por la LPL. Las VLDL libres de triglicéridos se convierten
en remanentes de VLDL (conocidas también como IDL). En la
figura 33.2 se muestra la distribución del combustible del metabolismo
de las lipoproteínas.

Aplicaciones clínicas
Concentraciones de colesterol, triglicéridos y glucosa:
unidades convencionales y del sistema internacional
Estos son los valores equivalentes aproximados para el colesterol:
Unidades del SI mmol/l Unidades convencionales mg/dl
4 150
5 190
6 230
7 270
8 310
Los factores de conversión usados para obtener valores exactos
son:
Colesterol: multiplicar por 38,6 para convertir mmol/l en mg/dl.
Triglicéridos: multiplicar por 88,5 para convertir mmol/l
en mg/dl.
Glucosa: multiplicar por 18 para convertir mmol/l en mg/dl.

FIG. 33.2 Metabolismo de las lipoproteínas: etapa de distribución

del combustible.
La etapa de distribución del combustible está relacionada con el
metabolismo de los ácidos grasos y con el ciclo ayuno-alimentación.
En el estado de alimentación, los quilomicrones transportan
triglicéridos a la periferia, donde la lipoproteína lipasa los hidroliza,
liberando ácidos grasos al interior de las células. Los remanentes de
los quilomicrones son metabolizados en el hígado, después de unirse
mediante la apoE al receptor LDL, y también a la LRP. Las partículas
de VLDL transportan combustible desde el hígado hasta los tejidos
periféricos. La vía de VLDL:remanentes de las VLDL está activa tanto
en el estado de alimentación como en el de ayuno. Las VLDL se
ensamblan en el hígado y, de manera análoga a los quilomicrones,
viajan por el plasma hacia la periferia. El rebosamiento de
triacilgliceroles por la LPL genera remanentes de las VLDL, las cuales
regresan al hígado. Aproximadamente el 65% es captado después de
unirse al receptor LDL y los restantes son hidrolizados por la HTGL,
dando lugar a partículas LDL. Se indican las apolipoproteínas que
impulsan el metabolismo de las diferentes partículas. Las que
 participan en la activación enzimática se han omitido para mejorar la
claridad. Obsérvese que los ácidos grasos que contribuyen a la
síntesis de triacilgliceroles hepáticos proceden de la síntesis de novo
de los ácidos grasos libres aportados directamente al hígado, unidos a
proteínas, o de partículas remanentes interiorizadas. Una
disponibilidad excesiva de triacilgliceroles en el hígado puede dar lugar
al depósito ectópico de lípidos (hígado graso no alcohólico). La
concentración plasmática de triacilgliceroles (triglicéridos) es el
marcador de la actividad de la etapa de distribución del combustible.

Obsérvese que los laboratorios clínicos miden el contenido de

colesterol de las partículas de lipoproteínas como un marcador de su
concentración. De este modo, inferimos la concentración de LDL a
partir de las mediciones del colesterol-LDL (LDL-C). Del mismo
modo, medimos el colesterol-VLDL (VLDL-C), el colesterol-IDL (IDL-
C) (o remanentes del colesterol) y el colesterol-HDL (HDL-C).

Metabolismo de las lipoproteínas: etapa de

aporte de colesterol
El colesterol presente en las partículas remanentes y en
las LDL es transportado al hígado
Los quilomicrones y los remanentes de las VLDL son más pequeños
y más densos que sus precursores. Las partículas remanentes son
relativamente ricas en colesterol. En los remanentes de los
quilomicrones, el cambio en el tamaño de la partícula VLDL descubre
la apoE, de manera que puede unirse al LRP y al receptor LDL.
Del mismo modo, en los remanentes de las VLDL, la apoE y la apoB
adoptan conformaciones que permiten la unión al receptor LDL. Los
remanentes de las VLDL son captados por el hígado o son eliminados
de los remanentes de los triacilgliceroles por la HTGL, y en lugar de
ser captados, se transforman en LDL. Las LDL son liberadas al plasma
y a la larga son interiorizadas por las células tras unirse al receptor
LDL. Aproximadamente el 80% de las LDL son captadas por el
hígado; el resto es captado por los tejidos periféricos.
 Conceptos avanzados
Las VLDL enriquecidas con ésteres de colesterol dan lugar
a partículas pequeñas y densas de LDL
Las VLDL pueden enriquecerse ellas mismas en ésteres de colesterol
obtenidos a partir de las HDL al intercambiarse por triglicéridos. Este
proceso se ve facilitado por la CETP. Cuando la HTGL actúa sobre
estas partículas enriquecidas, dan lugar a LDL pequeñas y densas
(sd-LDL, small-dense LDL) sumamente aterogénicas. Dado que
solamente una molécula de apoB100 está presente en cada partícula
de LDL, la presencia de sd-LDL puede manifestarse en forma de
hiperapobetalipoproteinemia, un aumento de la concentración
plasmática de apoB100 con un colesterol relativamente normal. Este
cuadro se asocia a un aumento del riesgo de ECV. Las sd-LDL
podrían ser responsables del aumento en el riesgo de ECV en algunos
pacientes con concentraciones plasmáticas aparentemente «normales»
de lípidos, tal y como sucede en la diabetes.

Después de la internalización, el complejo LDL-receptor es digerido

por enzimas lisosomales. El colesterol libre liberado es esterificado
dentro de la célula y la proteína del receptor se recicla de nuevo a la
membrana. Las etapas de distribución del colesterol en el
metabolismo de las lipoproteínas se ilustran en la figura 33.3.
FIG. 33.3 Metabolismo de las lipoproteínas: etapa de distribución
del colesterol.
Las LDL son generadas después de que los remanentes de las VLDL
hayan sido vaciados de triacilgliceroles por la HTGL. Las LDL se unen
al receptor de las LDL y son captadas por las células en respuesta a la
disminución de la concentración intracelular de colesterol libre. Tras la
interiorización del complejo LDL-R, el colesterol libre es liberado y se
esterifica por la ACAT. El receptor se recicla a la membrana, un
proceso que está inhibido por la PCSK9. La concentración de
colesterol intracelular regula la actividad de la HMG-CoA reductasa, la
enzima limitante de la velocidad en la síntesis del colesterol mediante
una retroalimentación negativa. También controla la expresión del
LDL-R. El colesterol total en plasma y el colesterol LDL son
marcadores de la reserva extracelular de colesterol. Obsérvese que las
LDL (y las partículas remanentes) pueden depositarse en la íntima
arterial en las áreas con lesiones propensas a dañarse. Esto depende
de la función endotelial y de la concentración de LDL. ACAT, acil-
CoA:colesterol aciltransferasa; LPL, lipoproteína lipasa; LRP, proteína
relacionada con el receptor de LDL; HTGL, triglicérido lipasa hepática;
CE, ésteres de colesterol; LDL-R, receptor de LDL; PCSK9,
proproteína convertasa subtilisina/kexina de tipo 9 (comentada con
 más detalle más adelante).

El colesterol de las lipoproteínas plasmáticas constituye

una reserva extracelular a disposición de las células
La mayoría de las células sintetizan el colesterol para sus propias
necesidades. La concentración de colesterol libre en las membranas
celulares regula la manera en la que la célula adquiere el colesterol. El
colesterol libre ejerce una retroalimentación negativa sobre la síntesis
del colesterol celular. Esto está mediado por una familia de factores de
transcripción conocidos como proteínas de unión del elemento
regulador de esteroles (SREBP, sterol regulatory element-binding
proteins). Las SREBP regulan la transcripción de genes que codifican
enzimas responsables de la síntesis de colesterol: la 3-hidroxi-3-
metilglutaril coenzima A sintasa y la HMG-CoA reductasa, así como
también del gen que codifica el receptor LDL.
El agotamiento celular de colesterol libre aumenta la concentración
de SREBP y, en consecuencia, aumenta tanto la síntesis como la
expresión del receptor LDL. Por el contrario, cuando la célula se
rellena de colesterol, se inhibe la vía de las SREBP, disminuyendo la
síntesis de colesterol y la expresión del receptor (v. fig. 33.3). Esto se
comenta con más detalle en el capítulo 14. De este modo, el colesterol
contenido en las lipoproteínas plasmáticas está vinculado a su
contenido celular mediante un sistema de regulación preciso.

Conceptos clínicos
La dislipidemia es frecuente en la diabetes mellitus
El Sr. B tiene 67 años, sobrepeso (IMC: 28 kg/m2) y diabetes de tipo 2
e hipertensión leve. Cuando acudió a la clínica ambulatoria, su
concentración de colesterol era de 6,9 mmol/l (265 mg/dl), la de
triglicéridos de 1,9 mmol/l (173 mg/dl) y la de colesterol HDL de
0,9 mmol/l (35 mg/dl). La glucemia en ayunas era de 8,5 mmol/l
(153 mg/dl) y la hemoglobina glucosilada (HbA1c) del 7,3%
(56 mmol/mol) (valor deseable menor del 6,7% [48 mmol/mol]).
Estaba en tratamiento con dieta y metformina, que mejora la
sensibilidad a la insulina. Al paciente se le receta una estatina aparte
de la metformina. La hipertensión arterial se trató con un inhibidor de
la enzima convertidora de la angiotensina (v. cap. 37).
Comentario
La presencia de diabetes mellitus comporta un aumento de 2-3 veces
el riesgo de cardiopatía coronaria. La diabetes de este paciente estaba
bastante bien controlada (valorada por la concentración levemente
elevada de HbA1c), pero su colesterol permanecía elevado, así que
necesitaba tratamiento con fármacos hipolipemiantes. La
concentración baja de colesterol HDL es relativamente frecuente en la
diabetes tipo 2.
Un patrón lipídico frecuente en la diabetes es el incremento en la
concentración plasmática de triglicéridos combinado con una
disminución del colesterol HDL. El metabolismo de las LDL se
mantiene prácticamente invariable: los pacientes afectados suelen
tener una concentración de colesterol LDL normal. Sin embargo,
como los pacientes diabéticos generan LDL pequeña y densa, las LDL
diabéticas, aunque no están aumentadas, pueden ser más
aterogénicas que las partículas no diabéticas. La combinación del
aumento de la concentración de partículas remanentes (con la
consiguiente hipertrigliceridemia), el aumento de las sd-LDL y una
concentración baja de HDL se conoce a veces como «tríada
aterogénica».

Transporte inverso de colesterol

Las partículas de HDL eliminan el colesterol de las
células
Las partículas de HDL se ensamblan en el hígado y en el intestino. Sus
apolipoproteínas principales son la apoAI y la apoAII, pero también
contienen apoC y apoE. Las HDL adquieren el colesterol a partir de
las células periféricas y lo transportan por una ruta directa hasta el
hígado o lo transfieren indirectamente a partículas ricas en
triglicéridos, los quilomicrones, las VLDL o las LDL, donde siguen la
ruta de las remanentes/LDL (v. la descripción siguiente).

Las HDL sacan el colesterol de las células

Las HDL están formadas por partículas discoidales pobres en lípidos
(pre-β-HDL) que contienen principalmente apoAI. Están formadas
parcialmente a partir del exceso de fosfolípidos vertidos desde las
VLDL durante su hidrólisis por la LPL. Aceptan colesterol procedente
de las células a través de la acción de un trasportador A1 cassette de
unión al ATP de membrana (ABCA1) (v. cap. 4). El ABCA1 utiliza
ATP como fuente de energía y controla la velocidad de salida de
colesterol libre a la apoAI.

La transferencia de colesterol desde las HDL a

partículas ricas en triglicéridos es la ruta principal del
transporte de colesterol en los seres humanos
El colesterol libre adquirido por las HDL nacientes es esterificado por
la LCAT. Los ésteres de colesterol se mueven hacia el interior de la
partícula, que aumenta de tamaño y adopta una forma esférica; en ese
momento se designa como HDL-3. A continuación, ayudada por la
CETP, transfiere algunos ésteres de colesterol a los quilomicrones, las
VLDL y las partículas remanentes, intercambiándolo con triglicéridos.
La adquisición de triglicéridos hace que la partícula de HDL se vuelva
todavía más grande; ahora se denomina HDL-2. Esta ruta de
intercambio parece ser la vía principal para el transporte inverso del
colesterol en los seres humanos.
En la figura 33.4 se resume el transporte inverso del colesterol.
 FIG. 33.4 Transporte inverso de colesterol.
Las HDL se ensamblan en el hígado y el intestino como partículas
discoidales. Adquieren el colesterol a partir de las membranas
celulares mediante el transportador ABCA1. La LCAT asociada con las
HDL esterifica el colesterol adquirido. Los ésteres de colesterol (CE) se
mueven al interior de la partícula, haciéndola esférica (HDL-2). La
CETP facilita el intercambio de apolipoproteínas y CE entre las HDL y
las lipoproteínas ricas en triglicéridos: de este modo, las partículas de
HDL-2 incrementan su tamaño, convirtiéndose en HDL-3. Este
intercambio inserta CE en el sistema de distribución del combustible y
constituye la ruta principal para el transporte inverso del colesterol en
los seres humanos. Las partículas de HDL-3 se unen al receptor
depurador (scavenger) B1 en la membrana del hepatocito y transfieren
CE al hígado. Cuando la transferencia se ha completado, el tamaño de
la partícula de HDL disminuye de nuevo. Parte del material de
superficie redundante se libera, formando pre-β-HDL rica en apoAI y
pobre en lípidos, que vuelve a entrar en el ciclo de eliminación del
colesterol. Así pues, obsérvense las dos rutas de aporte de colesterol
al hígado: la ruta HDL3 > HDL2 > VLDL > receptor de LDL y la ruta
HDL3 > HDL2 > HDL3 > receptor depurador BI. CE, ésteres del
colesterol; LCAT, lecitina:colesterol aciltransferasa; CETP, proteína de
transferencia de ésteres del colesterol; HTGL, triglicérido lipasa
hepática.
 Conceptos clínicos
Pancreatitis recurrente e hiperlipidemia mixta grave: déficit
de lipoproteína lipasa
Un varón de 46 años fue remitido a la Unidad de Lípidos con una
historia de pancreatitis recurrente y una hiperlipidemia mixta grave
con elevación del colesterol total de 25,8 mmol/l (996 mg/dl) y
triglicéridos >100 mmol/l (8.850 mg/dl). Padecía diabetes tipo 2
secundaria a la pancreatitis crónica.
Comentario
Se realizaron pruebas genéticas para descartar causas de la
hiperlipidemia y el informe reveló una mutación heterocigota en el
gen de la lipoproteína lipasa (LPL) compatible con un diagnóstico de
déficit familiar de lipoproteína lipasa (LPLD). El LPLD es un cuadro
hereditario sumamente infrecuente que altera la degradación normal
de las grasas en el cuerpo. La elevación de los triglicéridos a menudo
está presente desde la infancia, aunque es posible que el trastorno no
se identifique hasta la edad adulta. Los síntomas consisten en crisis
recurrentes de pancreatitis aguda y manchas llenas de lípidos
conocidas como «xantomas eruptivos». La concentración
extremadamente elevada de colesterol en este paciente guarda
relación con la gran cantidad de quilomicrones presente, más que con
las LDL.
Concepto de riesgo cardiovascular
El riesgo cardiovascular es la probabilidad de que se
produzca un evento de ECVA
El riesgo cardiovascular es la probabilidad de que una persona sufra
una ECVA clínica en un período definido en el futuro. En la tabla 33.3
se citan los principales factores de riesgo cardiovascular. El riesgo
cardiovascular guarda una relación estrecha con las concentraciones
plasmáticas de colesterol total y de colesterol LDL, mientras que la
relación es inversa con la concentración de colesterol HDL.

Tabla 33.3

Factores de riesgo cardiovascular principales y emergentes

Factor de riesgo Comentario
Sexo masculino El riesgo cardiovascular entre los sexos se iguala en las mujeres
posmenopáusicas
Edad En los ancianos, la edad y el sexo pueden determinar por
separado un riesgo alto
Tabaquismo
Hipertensión
Colesterol plasmático total alto
Colesterol LDL plasmático alto
Colesterol HDL plasmático bajo
Diabetes mellitus La ECV es la causa principal de muerte en la diabetes
Deterioro de la función renal
Antecedentes familiares Los antecedentes familiares positivos de ECV prematuro
de ECVA prematura aumentan el riesgo calculado por 1,7-2
ApoB en plasma alta
ApoA en plasma baja Los últimos estudios demuestran que la predicción del riesgo
basada en las apolipoproteínas es mejor que la basada en la
concentración de colesterol
Lp(a) alta Refina la valoración del riesgo
hsCRP/fibrinógeno alta Refina la valoración del riesgo
Adiponectina baja Importante en la obesidad y la diabetes
Obesidad central
Estilo de vida sedentario
Aumento del grosor de la íntima-
media de la carótida
Deprivación social
Trastornos inflamatorios
 autoinmunitarios (artritis
reumatoide, LES, psoriasis)
Los factores de riesgo sombreados se utilizan en la mayoría de los algoritmos de riesgo de
ECV.

Conceptos clínicos
Las concentraciones plasmáticas de lípidos son un
componente esencial en la valoración del riesgo
cardiovascular
Según el US National Cholesterol Education Program Adult
Treatment Panel III (ATP III), el valor deseable de colesterol total está
por debajo de 5,2 mmol/l (200 mg/dl) y la cifra óptima de colesterol
LDL está por debajo de 2,6 mmol/l (100 mg/dl). El riesgo aumenta de
forma brusca cuando la concentración plasmática total de colesterol
aumenta por encima de 5,2 mmol/l (200 mg/dl). Más recientemente se
ha usado un valor aún menor de colesterol LDL de 1,8 (70 mg/dl)
como punto de corte para el tratamiento en personas con un riesgo
elevado de ECVA (v. Lecturas recomendadas).
Parece que no hay un umbral inferior de la concentración de
colesterol a la cual el riesgo se estabilice (en otras palabras, mejor
cuanto más bajo sea el colesterol).
La concentración de colesterol HDL por debajo de 1 mmol/l
(40 g/dl) en hombres o de 1,2 mmol/l (47 mg/dl) en mujeres se
considera baja. Por el contrario, una concentración superior a
1,6 mmol/l (60 mg/dl) proporciona cierta protección frente a la
enfermedad coronaria. Los principios en que se basa la determinación
de los lípidos se resumen en la figura 33.5.
En la sección «Lecturas recomendadas» pueden consultarse las
recomendaciones actuales sobre el tratamiento con estatinas.
Obsérvese que los puntos de corte diagnósticos y los tratamientos
recomendados son cambiantes y se actualizan periódicamente por
parte de organizaciones profesionales relevantes. Consulte las
recomendaciones vigentes en las páginas web de las organizaciones
enumeradas en la sección «Páginas web de interés».
 Los estudios experimentales recientes han dejado claro que la
concentración plasmática de triglicéridos también contribuye a este
riesgo. Actualmente hay suficientes pruebas de que la lipidemia
posprandial puede tener algún papel en la aterogénesis. La
concentración plasmática de triglicéridos sin ayuno (que refleja un
aumento en los remanentes de lipoproteínas aterogénicas) se ha
vinculado con el riesgo de ECVA. La elevación posprandial de
triglicéridos plasmáticos es particularmente importante en las
personas con diabetes mellitus y resistencia a la insulina.
Mientras que una disminución en la concentración de colesterol
HDL se asocia a un aumento del riesgo de enfermedad cardiovascular
(ECV), parece que una concentración plasmática elevada de colesterol
HDL ejerce un efecto protector. En la figura 33.5 se resumen los
fundamentos de las pruebas lipídicas en la práctica clínica.
 FIG. 33.5 Diagnóstico de laboratorio de las dislipidemias.
(A) Determinación de la concentración de lípidos y apolipoproteínas en
plasma. (B) Cálculo de la concentración plasmática de colesterol LDL.
Apo, apolipoproteína.

El riesgo global de ECV se calcula usando calculadores

de riesgo
Los factores lipídicos contribuyen de forma significativa al riesgo
global de enfermedad cardiovascular aterosclerótica (ECVA), si bien
no son los únicos factores de riesgo. Lo que más le interesa al médico
es el riesgo global, para poder diseñar las medidas preventivas y los
tratamientos adecuados. Para calcular el riesgo global se han
elaborado algoritmos de riesgo basándose en datos de estudios
epidemiológicos a gran escala y a largo plazo. El algoritmo que se
aplica con más frecuencia procede del estudio Framingham en
Estados Unidos, y se basa en la edad, la presencia de diabetes, el
tabaquismo, la presión arterial sistólica y la concentración de
colesterol total y de colesterol HDL. Se refiere a una población de 34 a
74 años de edad sin ECVA de base. Este algoritmo no tiene en cuenta
los antecedentes familiares de ECV precoz.
En Europa se utiliza la evaluación del riesgo coronario sistemático
(SCORE), así como el algoritmo proveniente del estudio
cardiovascular prospectivo de Münster (PROCAM).
Aterosclerosis
La ECVA es en la actualidad la causa de muerte más frecuente en el
mundo; en conjunto, la cardiopatía isquémica y la enfermedad
cerebrovascular son responsables del 23,6% del total de muertes en
todo el mundo (OMS, 2011).
La aterogénesis es un proceso que da lugar al estrechamiento o a la
oclusión completa y súbita de la luz arterial, desencadenando como
resultado una ECVA. La oclusión completa puede ocasionar infarto
de miocardio (si el bloqueo se produce en una arteria coronaria), ictus
o accidente cerebrovascular (si el bloqueo es de una arteria que irriga
el cerebro) o vasculopatía periférica (estrechamiento de las arterias de
las piernas que causa un dolor característico al caminar, que se alivia
rápidamente cuando la persona se detiene, conocido como
claudicación intermitente). La aterogénesis implica el depósito de
lípidos en la capa subendotelial de la pared arterial (íntima). Esto
sucede en un trasfondo de un daño endotelial e inicia una reacción
inflamatoria (v. caps. 42 y 43). Al final se produce una remodelación
de la pared arterial como resultado de la migración y la proliferación
de células del músculo liso vascular (CMLV) y la formación de vasos
nuevos (angiogénesis). La trombosis (v. cap. 41) contribuye a la
maduración y la desestabilización de la placa. El término
aterotrombosis se usa en ocasiones para recalcar este aspecto. En la
figura 33.6 se esquematizan los procesos implicados en la
aterogénesis.
 FIG. 33.6 Aterogénesis.
La aterogénesis supone disfunción endotelial, depósito de lípidos en la
íntima arterial, migración y activación de células inflamatorias; reacción
inflamatoria continua de bajo grado, migración y activación (cambio
fenotípico) de CMLV; activación de los sistemas inmunitarios innato y
adaptativo; y trombosis. Obsérvese el papel de los lípidos oxidados en
la formación de células cargadas de lípidos (espumosas). La
aterogénesis está impulsada por señales mediadas por citocinas,
quimiocinas y factores de crecimiento y moléculas de adhesión
generados por células endoteliales, macrófagos, linfocitos T y células
del músculo liso vascular (CMLV). Obsérvense las múltiples rutas de
activación que perpetúan la respuesta inflamatoria. Véanse los detalles
en el texto. bFGF, factor de crecimiento básico de fibroblastos; CD36,
grupo (cluster) de diferenciación 36; DAMP, patrón molecular asociado
al daño; EGF, factor de crecimiento epidérmico; IFNγ, interferón-γ;
IGF-1, factor de crecimiento similar a la insulina-1; ICAM, molécula de
 adhesión intercelular-1; IL-1β, interleucina 1β; oxLDL, LDL oxidadas;
MCP-1, proteína de quimioatracción de monocitos-1; NO, óxido nítrico;
PDGF, factor de crecimiento derivado de plaquetas; TNF-β, factor β de
necrosis tumoral; TNF-α, factor α de necrosis tumoral; TGF-β, factor de
crecimiento transformante-β; VCAM-1, molécula de adhesión celular
vascular-1.

Aterogénesis: papel del endotelio vascular

El endotelio normal tiene propiedades anticoagulantes y
antiadhesivas
La luz de una arteria sana está recubierta por una capa confluente de
células endoteliales. La superficie endotelial normal tiene una
actividad antitrombótica y antiadhesiva potente: repele las células que
flotan en el plasma. La pared arterial consta de tres capas: la capa
subendotelial (la íntima), la capa intermedia (la media, que contiene
células musculares lisas vasculares [CMLV]) y la capa exterior (la
adventicia, compuesta por tejido conjuntivo más laxo y que contiene
nervios relevantes). Las partículas con un diámetro mayor de
aproximadamente 60-80 nm penetran en el endotelio a través de las
uniones entre las células endoteliales o atravesando las propias células
y quedan alojadas en la íntima.

El endotelio controla la vasodilatación secretando óxido

nítrico
El endotelio también controla la vasodilatación y la vasoconstricción,
y de este modo regula el flujo sanguíneo. La sustancia vasodilatadora
más importante es el óxido nítrico, conocido también como factor de
relajación derivado del endotelio (EDRF). El NO se sintetiza a partir
de L-arginina por la NO sintasa endotelial (eNOS). La actividad de la
eNOS está controlada por la concentración intracelular de calcio. La
eNOS se expresa de forma constitutiva (constante) en el endotelio,
mientras que otra isoenzima, la NOS inducible (iNOS), se encuentra
en las CMLV y en los macrófagos. El óxido nítrico señaliza a través de
la vía de la guanilato ciclasa y el GMP cíclico. La disminución de la
producción de NO contribuye a la aparición de hipertensión arterial.
El trinitrato de glicerilo, un fármaco que se utiliza para aliviar el
dolor torácico causado por un aporte inadecuado de oxígeno al
músculo cardíaco (angina de pecho), dilata las arterias coronarias
mediante la estimulación de la liberación de NO.

La aterogénesis se inicia con el daño del endotelio

El endotelio puede verse dañado funcionalmente con el paso del
tiempo por la presencia de factores de riesgo para ECV, como
hipercolesterolemia, hipertensión, componentes del humo de los
cigarrillos y una dieta rica en grasas muy saturadas, así como por la
diabetes mellitus y la obesidad (v. fig. 33.6). El efecto es
particularmente notorio en las denominadas áreas propensas a
lesionarse, que suelen localizarse en los puntos de ramificación o en
las secciones curvadas de las arterias. La dinámica del flujo sanguíneo
en estas zonas daña las células endoteliales.
La disfunción endotelial precede a la formación de lesiones
ateroscleróticas. Inicialmente, el daño es funcional más que
estructural. El endotelio pierde su capacidad de repeler las células y se
vuelve más permeable a las lipoproteínas, que se depositan
posteriormente en la íntima. También admite células inflamatorias en
la pared vascular. Normalmente existe un equilibrio entre los
programas de síntesis controlados por dos series de factores de
transcripción que actúan a modo de integradores de la transcripción.
Los factores de tipo Kruppel (KLF2, KLF4) controlan el programa
antiaterogénico/antiinflamatorio, mientras que el NFκB controla el
programa proinflamatorio. En el endotelio disfuncional, los factores
KLF se suprimen y predomina el NFκB.
El endotelio disfuncional aumenta la expresión de las moléculas de
adhesión celular (CAMS), entre las que se incluyen glucoproteínas
conocidas como selectinas y la molécula de adhesión celular vascular-
1 (VCAM-1), que favorece la adhesión de los monocitos y de los
linfocitos T al endotelio. Este proceso se intensifica aún más por una
disminución en la producción de NO, lo cual promueve la
vasoconstricción.
Aterogénesis: contribución de las
lipoproteínas retenidas
El endotelio disfuncional facilita la entrada y la retención
de lipoproteínas en la íntima
La retención de lipoproteínas en la íntima es el hecho central de la
aterogénesis. La aterogenicidad de las partículas de lipoproteínas
depende de su tamaño. Las partículas pequeñas, es decir, los
remanentes y las LDL, entran en la pared vascular cuando se daña el
endotelio. En el plasma, las partículas de LDL están protegidas de la
oxidación por antioxidantes como la vitamina C y el β-caroteno. Una
vez alojadas en la íntima, se pierde dicha protección. Los ácidos grasos
y los fosfolípidos en las LDL están sujetos a la oxidación por
macrófagos que expresan una serie de enzimas oxidantes, como las
lipoxigenasas, la mieloperoxidasa y las NADPH oxidasas. Las LDL
oxidadas estimulan aún más la expresión de VCAM-1 y MCP-1 en el
endotelio, manteniendo la entrada de las células en la íntima; son
además mitogénicas para los macrófagos. La oxidación de las LDL
también genera patrones moleculares asociados al daño (DAMP),
moléculas proteicas pequeñas que perpetúan la inflamación.

Base celular de la aterogénesis

Las células entran en la capa vascular íntima
La adhesión de los monocitos se ve estimulada por la proteína de
quimioatracción de monocitos-1 (MCP-1) para atravesar el endotelio y
alojarse en la íntima. Los monocitos también segregan
metaloproteinasa 9 de la matriz (MMP-9), que facilita aún más su
migración.
La generación de citocinas inflamatorias y de moléculas de
adhesión también estimula la salida de leucocitos y de neutrófilos del
plasma y su activación en la íntima. Normalmente, la migración de
células inflamatorias a los tejidos se inicia por un antígeno o por un
traumatismo. Curiosamente, hasta la fecha no se ha identificado
ningún antígeno específico capaz de iniciar la aterogénesis. Podría
existir una similitud molecular entre este(os) posible(s) antígeno(s) y
los patógenos exógenos (v. cap. 43). El(los) posible(s) antígeno(s)
podría(n) ser agentes infecciosos o moléculas modificadas generadas
en el transcurso de la oxidación, o DAMP generados durante la
necrosis celular. Por ejemplo, el grupo fosforilcolina que se encuentra
en las LDL oxidadas también es un componente del polisacárido
capsular de las bacterias. Las LDL oxidadas siguen siendo un antígeno
candidato que podría ser responsable de la estimulación de la reacción
inflamatoria en la aterogénesis.

Los monocitos se transforman en macrófagos

residentes
Los monocitos se transforman en macrófagos gracias a la influencia de
citocinas inflamatorias, como el factor de necrosis tumoral α (TNF-α),
el factor estimulante de las colonias de granulocitos-macrófagos y el
factor 1 estimulante de las colonias de monocitos (MCSF-1), secretado
por las células endoteliales y la CMLV, y por el interferón γ secretado
por los linfocitos T colaboradores. Los macrófagos producen citocinas
proinflamatorias, interleucina 1β (IL-1β), IL-6 y TNF-α, así como una
serie de citocinas de quimiotaxis (quimiocinas).

Las lipoproteínas oxidadas son captadas por los

macrófagos
Los macrófagos activados responden a las citocinas segregadas por el
endotelio y las CMLV. Expresan varios receptores, como los
receptores depuradores, el CD36 y los receptores de tipo toll
(reconocimiento de patrón). La apoB100 oxidada se une a receptores
depuradores en lugar de hacerlo al receptor LDL. El reconocimiento
de moléculas por los receptores depuradores forma parte de la
respuesta inmunitaria innata (v. cap. 43). Además, las DAMP y la
apoB oxidada son captadas por las células que presentan los
antígenos, como las células dendríticas, y activan a los linfocitos T
colaboradores presentes en las lesiones ateroscleróticas, iniciando la
respuesta inmunitaria adaptativa. Los linfocitos B también participan:
se han identificado en el plasma anticuerpos circulantes de tipo IgG e
IgM contra las LDL oxidadas.
La unión de estas moléculas a los receptores de macrófagos activa la
vía del NFκB y, de este modo, se regula al alza la respuesta de las
citocinas, las quimiocinas y de las moléculas de adhesión, potenciando
y perpetuando la inflamación. Como los receptores depuradores no
tienen retroalimentación regulada por la concentración de colesterol
intracelular, los macrófagos se inundan de lípidos oxidados y
adquieren la apariencia de células espumosas. Los conglomerados de
dichas células forman estrías grasas. Las células espumosas siguen
secretando citocinas proinflamatorias.

La migración de las células musculares lisas vasculares

cambia la estructura de la pared vascular
Las citocinas y los factores de crecimiento segregados por las células
endoteliales y los macrófagos activados (el factor de crecimiento
derivado de las plaquetas [PDGF], el factor de crecimiento epidérmico
[EGF], el factor de crecimiento similar a la insulina-1 [IGF-1] y el TGF-
β) activan a las CMLV en la capa media arterial. Las CMLV migran
hacia la íntima y sufren un cambio fenotípico, transformándose en
células parecidas a los miofibroblastos. Las CMLV transformadas
perpetúan aún más la respuesta inflamatoria al segregar IL-1, TNF-α y
moléculas de adhesión. También sintetizan colágeno extracelular,
depositándolo en la placa en crecimiento, lo cual forma la caperuza
fibrosa. Todo esto altera la estructura normalmente organizada de la
pared arterial. Las placas recién formadas pueden sobresalir hacia la
luz arterial, obstruyendo el flujo sanguíneo.
Finalmente, hay una formación de vasos nuevos. La interrelación
entre las células participantes en la aterogénesis y sus productos de
secreción se resume en la figura 33.6.

Conceptos avanzados
Un incremento diminuto en la concentración plasmática de
proteína C reactiva refleja una inflamación crónica de bajo
grado asociada a la aterogénesis
La proteína C reactiva (CRP) se sintetiza en el hígado y también en las
CMLV y las células endoteliales en respuesta a la estimulación por
citocinas proinflamatorias. El nombre hace referencia a su unión al
polisacárido capsular (C) de bacterias como Streptococcus pneumoniae,
a través del cual se realiza su aclaramiento.
Se pueden detectar incrementos diminutos en la concentración
plasmática de la CRP mediante métodos analíticos de alta
sensibilidad capaces de medir concentraciones por debajo de 10
mg/dl. Pueden reflejar una inflamación crónica de bajo grado en la
pared vascular. Como el incremento en la CRP de alta sensibilidad es
independiente de la concentración plasmática de colesterol LDL, esta
medición mejora la valoración del riesgo cardiovascular. Se ha
sugerido que una CRP <1 mg/dl significa que el riesgo de ECV es
bajo, mientras que una CRP >3 mg/dl se asocia a un riesgo alto de
arteriopatía coronaria. También se ha relacionado a la cardiopatía
coronaria con el aumento de las concentraciones plasmáticas de otras
moléculas proinflamatorias, como la IL-6 y el amiloide sérico A.

La actividad inflamatoria desestabiliza la placa,

aumentando su propensión a la ruptura
Las células espumosas agonizantes pueden eliminarse mediante
eferocitosis (una eliminación fagocítica) o pueden sufrir necrosis y
liberar sus lípidos, lo que aumenta las reservas de lípidos dentro de la
íntima. En la placa madura (fig. 33.7), el depósito de lípidos está
rodeado de células espumosas, linfocitos y CMLV que han migrado
hacia el interior de la íntima. Los macrófagos continúan segregando
citocinas, factores de crecimiento, moléculas de adhesión y MMP. Esto
atrae a los linfocitos T y facilita su activación a células efectoras. La
«caperuza» de la placa contiene una matriz de colágeno sintetizada
por las CMLV. Las lesiones avanzadas pueden calcificarse.
 FIG. 33.7 Placa aterosclerótica. Placa aterosclerótica madura.
El centro lipídico y la caperuza fibrosa son las partes principales de
una placa aterosclerótica madura que emerge de la pared vascular
remodelada estructuralmente. La placa, rica en colágeno y pobre en
células, es relativamente estable, y crece despacio a lo largo de varios
años. Por otro lado, una placa rica en células y pobre en colágeno se
vuelve inestable y puede romperse con facilidad. El proceso
fundamental que da lugar a la rotura de la placa es la digestión de la
matriz de colágeno de la caperuza de la placa. La caperuza fibrosa
sintetizada proporciona cierto grado de protección del contenido de la
placa ante la trombosis. La rotura de la caperuza estimula la formación
de trombos. La figura ilustra las áreas vulnerables a la rotura y muestra
el trombo obstructivo que se forma en el sitio de rotura. Mientras que
las placas fibrosas estables ocasionan una angina lentamente
progresiva, la desorganización de una placa inestable rica en células
da lugar a accidentes clínicos agudos, como el infarto de miocardio.
CMLV, células del músculo liso vascular.

Una placa inestable tiene menos CMLV y contiene un mayor

número de macrófagos que residen, de forma preferente, en los
bordes de la caperuza de la placa. Los macrófagos degradan la matriz
de la caperuza de la placa. Además, las proteasas lisosomales
(catepsinas) ayudan a degradar el colágeno y la elastina. Los linfocitos
T activados segregan IFNγ y citocinas proinflamatorias que inducen
aún más a los macrófagos para que liberen MMP e inhiban la síntesis
de colágeno de las CMLV, debilitando más la caperuza de la placa.
Las CMLV presentes en las regiones más vulnerables del borde de la
placa también pueden sufrir apoptosis.

Aterogénesis: el papel de la trombosis

Las plaquetas estimulan los fenómenos trombóticos en
las placas
La adhesión inicial de las plaquetas se produce a través de los
receptores de glucoproteínas plaquetarios para el factor von
Willebrand y el fibrinógeno. La adhesión también se ve facilitada por
β3-integrinas, proteínas transmembrana que unen ligandos, como el
colágeno. Las plaquetas se unen también a las células circulantes
dando lugar a la activación de leucocitos.
El factor tisular, un receptor de citocina transmembrana y el
activador fisiológico principal de la cascada de la coagulación (v.
cap. 41), puede expresarse en las CMLV y los macrófagos de la placa.
El factor tisular forma complejos con el factor VII (FVII) de la
coagulación y esto induce la señalización celular a través del receptor
2 activado por la proteasa (PAR2), estimulando una serie de
acontecimientos, como la quimiotaxis de monocitos, la migración y la
proliferación de CMLV, la angiogénesis y la apoptosis. La trombina
sigue generándose en las placas. Activa a los monocitos, los
macrófagos, las células endoteliales y a las plaquetas para segregar
mediadores inflamatorios como el ligando CD40 (CD40L), un
miembro de la familia TNF que, tras unirse a las células que presentan
a los antígenos, amplifica aún más la secreción de MMP, citocinas y
moléculas de adhesión. La formación de trombos pequeños
contribuye a la inestabilidad de la placa y acelera su crecimiento. El
crecimiento de la placa se acelera por ciclos de minirrupturas y
trombosis de la placa. Los vasos nuevos formados facilitan la
aparición de hemorragias en el interior de las placas formadas.
Después de una rotura importante, un trombo formado sobre la
superficie de la placa puede obstruir por completo la luz de la arteria
afectada, cortando el aporte de oxígeno y causando necrosis tisular.
Esto precipita acontecimientos clínicos bruscos, y a veces catastróficos.

Conceptos avanzados
Genética de la aterosclerosis
Los genes que codifican los receptores de LDL, las apolipoproteínas y
LRP6, son actualmente los únicos que se han relacionado de forma
directa con los trastornos ateroscleróticos. La secuenciación en
profundidad (secuenciación del genoma muchas veces para
minimizar la tasa de error) en pacientes de ascendencia africana
identificó dos variantes del gen de la proteína convertasa
subtilisina/kexina de tipo 9 (PCSK9, un gen que codifica a una serina
proteasa) como responsables de los valores de lípidos bajos y del
descenso del riesgo de infarto de miocardio.
La mayoría de las enfermedades cardiovasculares son poligénicas.
La hipótesis de trabajo actual es que las variantes comunes, que
aparecen con una frecuencia menor del 5%, son importantes en la
fisiopatología de las enfermedades poligénicas. Los estudios de
asociación de genoma completo (GWAS, genome-wide association
studies) comprueban asociaciones entre una enfermedad y las
variantes comunes a lo largo de todo el genoma.
Dislipidemias
Los defectos en el metabolismo de las lipoproteínas dan lugar a
trastornos conocidos como dislipidemias, también conocidas con el
término menos preciso hiperlipidemias. Su clasificación original en
tipos I a V, hoy en día actualizada, se basaba en el comportamiento
electroforético de las lipoproteínas (tabla 33.4). Actualmente se emplea
la clasificación genética (tabla 33.5). Otra clasificación usada a menudo
es la fenotípica, que divide las dislipidemias en hipercolesterolemia,
hipertrigliceridemia y dislipidemia mixta.

Tabla 33.4

Clasificación fenotípica de las dislipidemias

Tipo de dislipidemia Fracción electroforética aumentada Aumento del Aumento de los
(Fredrickson) (tipo de lipoproteína) colesterol triglicéridos
I Quilomicrones Sí Sí
IIa Beta (LDL) Sí No
IIb Pre-beta y beta (VLDL, LDL) Sí Sí
III Banda «beta ancha» (IDL) Sí Sí
IV Pre-beta (VLDL) No Sí
V Pre-beta (VLDL) más quilomicrones Sí Sí
En la electroforesis, las α-lipoproteínas (HDL) son las que migran más lejos hacia el ánodo
(electrodo +), seguidas de las pre-β-lipoproteínas (VLDL) y las β-lipoproteínas (LDL). Los
quilomicrones permanecen en el extremo catódico, en el origen de la tira electroforética.
Esta es una clasificación desarrollada por Fredrickson y adoptada por la OMS; se basa en la
separación electroforética de las lipoproteínas séricas. Ha sido reemplazada en gran parte
por la clasificación genética. Las dislipidemias se clasifican simplemente como
hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia y dislipidemia mixta.

Tabla 33.5

Dislipidemias determinadas genéticamente más importantes

Aumento del
Patrón lipídico riesgo
Dislipidemia Frecuencia/herencia Defecto plasmático cardiovascular
Hipercolesterolemia 1:500 Deficiencia Hipercolesterolemia o Sí
familiar Autosómica o alteración hiperlipidemia mixta
 dominante funcional (IIa o IIb)
del receptor
de LDL
Hiperlipidemia 1:50 Exceso de Hipercolesterolemia Sí
familiar combinada Autosómica producción o hiperlipidemia
dominante de apoB100 mixta (IIa o IIb)
Patrones
característicamente
variables en
diferentes
miembros de la
familia
Disbetalipoproteinemia 1:5.000 Presencia Hiperlipidemia mixta Sí
familiar Autosómica de genotipo
(hiperlipidemia de tipo recesiva APO E2/E2.
III) Remanente
defectuoso
que se une
al receptor
de LDL
Hiperlipidemia mixta: aumento de la concentración plasmática de colesterol y de triglicéridos.

En los países industrializados, aproximadamente el 30% de las

personas presentan concentraciones plasmáticas de colesterol
indeseablemente elevadas. La dislipidemia más frecuente (conocida
como hipercolesterolemia común) es poligénica y resulta del efecto
combinado de factores genéticos y ambientales.
La obesidad y la diabetes conducen a una dislipidemia causada por
el incremento en la producción de VLDL. Esto puede ser la
consecuencia de un abuso de consumo de alcohol; sin embargo, a
diferencia de la diabetes, el alcohol eleva las VLDL, pero también la
concentración de HDL. Es importante señalar que al perder peso
disminuye la secreción de VLDL.
Una ingesta dietética alta de grasas saturadas afecta a la
concentración de LDL.
La hipercolesterolemia familiar es un trastorno monogénico
causado por una mutación en el gen que codifica al receptor LDL. La
captación celular de partículas remanentes y de las LDL está alterada
(HF heterocigota) o completamente inhibida (HF homocigota, muy
rara). Otras mutaciones desorganizan el reciclado del receptor LDL a
la membrana plasmática. Los pacientes con HF presentan
concentraciones plasmáticas muy altas de colesterol y de colesterol
LDL. El modo de herencia de la HF es autosómico dominante, de
modo que suele haber antecedentes familiares notorios de una ECVA
precoz (es decir, los síntomas aparecen en un varón menor de 55 años
o en una mujer menor de 65 años). Algunos pacientes desarrollan
depósitos de lípidos en los tendones de las manos y las rodillas y en
particular en el tendón de Aquiles: se conocen como xantomas y son
diagnósticos del trastorno. La HF conlleva un riesgo elevado de
enfermedad cardiovascular precoz.

Conceptos clínicos
La hipercolesterolemia familiar es una causa de infartos de
miocardio precoces
Un varón 32 años, fumador empedernido, desarrolló un dolor
torácico opresivo repentino. Ingresó en el departamento de urgencias.
Se confirmó un infarto de miocardio mediante cambios en el ECG y
por una concentración elevada de troponina cardíaca. En la
exploración física del paciente destacaban xantomas tendinosos en las
manos y los tendones de Aquiles. Tenía antecedentes familiares
sólidos de enfermedad coronaria (su padre fue sometido a una
operación de derivación coronaria a los 40 años y su abuelo paterno
murió de infarto de miocardio a los 50 y pocos años). Su colesterol era
de 10,0 mmol/l (390 mg/dl), los triglicéridos de 2 mmol/l (182 mg/dl) y
el colesterol-HDL de 1,0 mmol/l (38 mg/dl).
Comentario
Este paciente padece hipercolesterolemia familiar (HF), un trastorno
autosómico dominante caracterizado por la disminución del número
de receptores de LDL. La HF comporta un riesgo muy elevado de
enfermedad coronaria prematura y los individuos heterocigotos
pueden sufrir crisis cardíacas ya en la tercera o cuarta décadas de la
vida. La frecuencia de homocigotos para la HF en las poblaciones
occidentales es aproximadamente de 1:500. Este paciente se trató de
inmediato con trombolíticos intravenosos. A continuación se le
practicó una derivación coronaria y después fue tratado con fármacos
hipolipidemiantes. Más tarde, la concentración de colesterol
disminuyó a 4,8 mmol/l (185 mg/dl) y la de triglicéridos a 1,7 mmol/l,
con un aumento de colesterol-HDL hasta 1,1 mmol/l (42 mg/dl).

Conceptos clínicos
Diagnóstico de hipercolesterolemia familiar
Los criterios de Simon Broome para el diagnóstico de
hipercolesterolemia familiar en Reino Unido son los siguientes:

• Colesterol total en plasma >7,5 mmol/l (290 mg/dl) o colesterol

LDL >4,9 mmol/l (189 mg/dl) en un adulto.
• Colesterol total >6,7 mmol/l o 4,0 mmol/l (154 mg/dl) en niños
menores de 16 años.
Más:
• Xantomas tendinosos en un paciente o en un pariente de primer
grado (progenitor, hermanos, hijos) o de segundo grado (abuelos,
tíos, tías).
O:
• Prueba de ADN de una mutación del receptor de LDL, un defecto
familiar de apoB100.

Comentario
En la actualidad, el cribado genético para respaldar el diagnóstico de
HF supone la búsqueda de mutaciones del gen del receptor de LDL:
una es la secuencia 1637G > A, que da lugar a la sustitución de glicina
por ácido aspártico (Gly546Asp). Provoca una disminución de la
actividad del receptor de LDL. Otra mutación del gen APOB,
Arg3527Gln, se ha observado en el 5-7% de los pacientes con HF, así
como una mutación menos frecuente del gen PCSK9, Asp374Tyr.

La apolipoproteinemia B defectuosa familiar se debe a una

mutación de la molécula de la apoB100 que altera su unión al receptor.
Estos pacientes presentan también un colesterol plasmático alto.
Parece que los xantomas son más inusuales que en los pacientes con
HF.
La hiperlipidemia combinada familiar se caracteriza por una
sobreproducción de apoB100 más que por la afección del receptor.
Existe un incremento de la producción de VLDL y, en consecuencia,
un aumento de producción de LDL. Esta dislipidemia presenta
patrones variables de lípidos plasmáticos (ya sea hipercolesterolemia
sola o con hipertrigliceridemia). La hiperlipidemia familiar combinada
es una causa relativamente frecuente de infartos de miocardio
precoces.
La disbetalipoproteinemia familiar, conocida previamente como
hiperlipidemia de tipo III, está causada por una mutación en el gen de
la apoE, dando lugar a una isoforma de apoE con baja afinidad por el
receptor LDL. En esta enfermedad se acumulan los remanentes y hay
un incremento de la concentración plasmática tanto de colesterol
como de triglicéridos. Están presentes los xantomas palmares
característicos. La dislipidemia familiar se asocia con cardiopatía
coronaria precoz.
La deficiencia de lipoproteína lipasa es muy infrecuente. Da lugar
a valores extremadamente altos de VLDL, quilomicrones y
triglicéridos en plasma. Estos últimos pueden superar los 100 mmol/l
(8.850 mg/dl). Los signos clínicos incluyen xantomas cutáneos
característicos parecidos a un exantema. La deficiencia de LPL se
asocia al riesgo de pancreatitis (v. cap. 30) precipitada por las
concentraciones muy elevadas de triglicéridos. Los pacientes
afectados suelen padecer episodios repetidos de pancreatitis.
Las mutaciones en el gen que codifica la apoB pueden dar lugar
también a valores bajos de VLDL y, consecuentemente, a
concentraciones bajas de LDL. La abetalipoproteinemia es una
dislipidemia muy infrecuente derivada de una mutación del gen que
codifica la proteína de transferencia microsomal (MTP), implicada en
el ensamblaje celular de las VLDL.

Cuadros asociados a una concentración baja

de HDL
Una concentración baja de colesterol HDL puede ser consecuencia de
mutaciones en genes que codifican la apoA1, el transportador ABCA1
y la LCAT. Los pacientes con déficit de apoAI presentan una
concentración plasmática baja de colesterol HDL acompañada de
xantelasmas, opacidad corneal y aterosclerosis. La tasa de
heterocigotos en la población es del 1%. También desarrollan
amiloidosis.
Aquellos con mutaciones en ABCA1, además de tener una
concentración plasmática de colesterol HDL baja, tienen amígdalas
grandes de color anaranjado, hepatoesplenomegalia, neuropatía
periférica y trombocitopenia, lo que se conoce como enfermedad de
Tangier.
El déficit de LCAT se conoce como enfermedad de ojos de pez. Se
caracteriza por déficit de HDL y también por opacidad corneal,
nefropatía y anemia hemolítica.

Cuadros asociados a una concentración

plasmática alta de HDL
El déficit de CETP da lugar a una concentración de HDL alta.
La figura 33.8 muestra cómo diferentes anomalías influyen en el
metabolismo de las lipoproteínas.
 FIG. 33.8 Visión general de las anomalías del metabolismo de las
lipoproteínas. Situaciones que afectan fundamentalmente a la
etapa de distribución del combustible.
El transporte del combustible se ve afectado por una ingesta diaria
excesiva de grasas, por la obesidad y por la diabetes. El déficit de LPL
provoca una elevación extrema de los quilomicrones y las VLDL. La
disbetalipoproteinemia familiar conduce a un aumento de la
concentración de remanentes debido al deterioro de la captación
provocado por una mutación en la apoE. Situaciones que afectan
fundamentalmente a la etapa de distribución del colesterol. La
concentración plasmática de LDL puede aumentar debido al aumento
en la generación (por la digestión de los remanentes de las VLDL
mediada por la HTGL) o debido a una alteración en la captación celular
o en la unión al receptor. La más importante es la hipercolesterolemia
familiar (HF), donde la alteración de la captación se debe a mutaciones
en el gen del receptor de las LDL. Esto conduce a una elevación
notoria de las concentraciones plasmáticas de LDL. También está
alterada la captación de los remanentes. Situaciones que afectan a
ambas etapas del metabolismo de las lipoproteínas. La
hiperlipidemia combinada familiar se debe al aumento de la apoB100 y
por lo tanto, al aumento en la producción de VLDL. El exceso de VLDL
provoca un incremento importante en la generación de LDL. Una dieta
rica en grasas afecta a ambas etapas del metabolismo de las
lipoproteínas.

Conceptos clínicos
El cambio del estilo de vida mejora el perfil lipídico
plasmático
Un hombre de 57 años fue derivado a la clínica de lípidos por su
hipertrigliceridemia. Era obeso, bebía 30 unidades de alcohol a la
semana y llevaba una vida sedentaria.
La concentración de triglicéridos era de 6 mmol/l (545 mg/dl), la de
colesterol de 5 mmol/l (192 mg/dl) y la de colesterol HDL de 1 mmol/l
(39 mg/dl).
Tras algunas dificultades iniciales, finalmente consiguió perder
7 kg de peso a lo largo de los 6 meses siguientes, reducir la ingestión
de alcohol a menos de 20 unidades por semana y comenzó a hacer
ejercicio de forma regular. Doce meses después, la concentración de
triglicéridos era de 2,5 mmol/l (227 mg/dl), la de colesterol de
4,8 mmol/l (186 mg/dl) y la de colesterol HDL de 1,2 mmol/l
(46 mg/dl).
Comentario
El cambio en el estilo de vida puede conllevar una mejoría apreciable
en el perfil lipídico. Para conseguirlo, los individuos tienen que
comprometerse a cambiar su estilo de vida y mantener el cambio
durante un período prolongado.
Nota: 1 unidad de alcohol equivale a una medida de licor (60 ml),
un vaso de vino (170 ml) o media pinta de cerveza (284 ml).

Conceptos clínicos
La presencia de xantelasma no indica necesariamente
dislipidemia
Una mujer de 28 años de edad presentaba marcas amarillas
antiestéticas alrededor de ambos ojos (xantelasma). Estaba
asintomática y mostraba una buena tolerancia al ejercicio. Su
colesterol era de 5,0 mmol/l (192 mg/dl), los triglicéridos de
0,7 mmol/l (64 mg/dl) y la concentración de colesterol HDL de
1,4 mmol/l (53 mg/dl). No tenía antecedentes familiares de
enfermedad coronaria precoz.
Comentario
El xantelasma puede presentarse en individuos con concentraciones
de lípidos completamente normales. Por otra parte, los depósitos de
lípidos en los tendones (xantomas tendinosos) siempre son
diagnósticos de un trastorno lipídico familiar. Se tranquilizó a la
paciente y se la derivó a cirugía estética.
Principios del tratamiento de las
dislipidemias
El tratamiento de las dislipidemias combina medidas del
estilo de vida con un tratamiento farmacológico
La prevención cardiovascular eficaz necesita un protocolo que
combine modificaciones del estilo de vida (deshabituación del
tabaquismo, dieta y ejercicio regular) con el tratamiento farmacológico
de la dislipidemia, la hipertensión y la diabetes. La concentración
plasmática de LDL puede disminuir un 15% cuando una persona
sigue una dieta baja en colesterol. Cuando fracasan las medidas de
cambios del estilo de vida para corregir dichas anomalías debe
acudirse al tratamiento farmacológico. Actualmente se acepta que la
concentración de colesterol que debería alcanzarse con tratamiento
debería ser la más baja posible en las personas que tienen un riesgo
muy elevado de accidentes cardiovasculares, como aquellos con
varios factores de riesgo o los que ya presentan una ECVA, diabetes o
nefropatía. Existen distintas clases de fármacos que reducen la
concentración plasmática de colesterol.

Las estatinas inhiben la HMG-CoA reductasa

Las estatinas, como simvastatina, pravastatina, atorvastatina y
rosuvastatina son inhibidores competitivos de la HMG-CoA
reductasa, la enzima limitante de la velocidad de síntesis de colesterol.
Principalmente reducen la concentración plasmática de colesterol
LDL. La inhibición de esta enzima da lugar a una disminución de la
concentración intracelular de colesterol. Esta disminución (v. cap. 14)
aumenta la expresión de los receptores de LDL en la membrana
celular, lo que conduce a su vez a un incremento de la captación
celular de LDL y, en consecuencia, a una disminución de la
concentración plasmática de colesterol. El tratamiento con estatinas
disminuye la concentración de colesterol en un 30-60% y disminuye el
riesgo de episodios cardiovasculares futuros en un 20-30%. También
parece que las estatinas disminuyen los fenómenos inflamatorios en la
pared arterial.

Los fibratos actúan a través del factor de transcripción

PPARα
Los derivados del ácido fíbrico (fibratos) son agonistas del factor de
transcripción PPARα. Estimulan la actividad de la LPL, disminuyen
las concentraciones plasmáticas de triglicéridos y aumentan la
concentración de colesterol HDL. Su efecto sobre las concentraciones
de LDL y de colesterol total es menos notorio que el de las estatinas.

Conceptos avanzados
Los receptores activados por proliferadores de peroxisomas
controlan el metabolismo de hidratos de carbono y lípidos
Los receptores activados por proliferadores de peroxisomas (PPAR)
pertenecen a la superfamilia de los receptores nucleares que actúan
como factores de transcripción. Regulan los genes que controlan la
homeostasia de los hidratos de carbono y los lípidos. Los PPAR
forman dímeros con el receptor retinoide X (RXR), y este dímero se
une después a elementos de respuesta en las regiones promotoras de
los genes diana.
Los PPARα estimulan el catabolismo de los ácidos grasos, la
cetogénesis y la gluconeogénesis. También están implicados en el
ensamblaje de las lipoproteínas y en el metabolismo del colesterol.
Además, aumentan la expresión de la apoAI y apoAII y reducen la
expresión del gen de la apoCIII.
El PPARβ/δ está implicado en el control de la proliferación y la
diferenciación celular, y también en el catabolismo de los ácidos
grasos. El PPARγ influye en la homeostasia energética y en la
diferenciación del tejido adiposo y mejora la sensibilidad a la
insulina. Tanto el PPARα como el PPARγ tienen acciones
antiinflamatorias.
 Los PPAR son dianas importantes de determinados fármacos. Los
hipolipidemiantes de uso común, derivados del ácido fíbrico
(fibratos), activan al PPARα. Las tiazolidinedionas, antidiabéticos
orales, activan al PPARγ. (V. también cap. 31.)

Los inhibidores de la absorción intestinal se unen a los

ácidos biliares e inhiben el transportador de colesterol
Los inhibidores de la absorción intestinal de colesterol constan de
fármacos más antiguos, las denominadas resinas de unión a ácidos
biliares, que actualmente casi nunca se utilizan. Disminuyen la
concentración plasmática de colesterol a través de la interrupción de la
recirculación del colesterol desde el intestino y el aumento de su
excreción. El fármaco más reciente (ezetimiba) inhibe el transportador
intestinal de colesterol, la proteína de Niemann-Pick similar a la C1
(NPC1L1) en el borde en cepillo intestinal y disminuye el colesterol
total alrededor del 20%.

Los ácidos grasos omega-3 disminuyen la

concentración plasmática de triglicéridos
Se puede conseguir una disminución importante de la concentración
plasmática de triglicéridos mediante el tratamiento con ácidos grasos
omega-3, presentes en el aceite de pescado. Es interesante señalar que
los preparados de aceite de pescado también son antiarrítmicos, sobre
todo en pacientes que han sufrido previamente un infarto de
miocardio.

Los inhibidores de la PCSK9 son la clase más novedosa

de fármacos para disminuir el colesterol
La PCSK9 es una serina proteasa que se une al receptor LDL. Cuando
las LDL se unen a su receptor, la PCSK9 canaliza al complejo del
receptor LDL:LDL hacia la degradación, en lugar del reciclado.
Los inhibidores de la PCSK9 son anticuerpos monoclonales contra
la proproteína convertasa subtilisina/kexina de tipo 9. Aumentan la
biodisponibilidad del receptor LDL y pueden disminuir el colesterol
Introducción
El plasma es una «ventana» importante del metabolismo
La sangre distribuye nutrientes esenciales para los tejidos y elimina
productos de desecho. También sirve de ruta de comunicación y para
señales de rango largo, transportando, por ejemplo, hormonas desde
sus lugares de secreción hacia sus tejidos diana. La sangre es una
suspensión de elementos celulares en una solución que contiene una
amplia gama de moléculas, desde metabolitos de peso molecular
pequeño hasta proteínas grandes con múltiples subunidades. Existen
varias clases de elementos celulares. Los componentes de la sangre
participan en la defensa del cuerpo contra agresiones externas, en la
cicatrización de heridas y en la reparación de tejidos lesionados.
Además, la sangre puede analizarse fácilmente y es, con mucho, el
material más frecuente para la realización de pruebas bioquímicas. La
mayoría de las pruebas diagnósticas de laboratorio de bioquímica,
hematología e inmunología se realizan en muestras de sangre, plasma
o suero.

Para las determinaciones químicas se necesita suero o

plasma
Los elementos formes de la sangre están suspendidos en una
disolución acuosa que se denomina plasma. El plasma es el
sobrenadante obtenido tras la centrifugación de una muestra de
sangre que se ha recogido en un tubo que contiene un anticoagulante.
En la práctica de laboratorio se utilizan varios anticoagulantes, siendo
los más frecuentes el heparinato de litio y el ácido
etilendiaminotetraacético (EDTA). El heparinato evita la coagulación
uniéndose a la trombina. El EDTA y el citrato fijan Ca2+ y Mg2+,
bloqueando de este modo la acción de las enzimas dependientes del
calcio y el magnesio que participan en la cascada de la coagulación (v.
cap. 41). El citrato se utiliza como anticoagulante para las pruebas de
coagulación y también cuando se obtiene sangre para una transfusión.
El fluoruro potásico inhibe la glucólisis y se utiliza en muestras
obtenidas para medir la glucosa en plasma.
El suero es el sobrenadante obtenido si a una muestra de sangre se
le permite coagular espontáneamente. Durante la coagulación, el
fibrinógeno se convierte en fibrina. Por tanto, una diferencia
importante entre el plasma y el suero es la ausencia de fibrinógeno en
el suero.
A lo largo de todo este libro, cuando describimos los mecanismos
fisiológicos o patológicos hacemos mención al plasma; por ejemplo,
diremos que «la albúmina se une a muchos fármacos presentes en el
plasma». Podemos hacer mención al suero cuando nos referimos
específicamente a los resultados de pruebas de laboratorio efectuadas
en el suero; por ejemplo, podemos decir que «la albúmina sérica de un
paciente era de 40 mg/dl».

Los laboratorios clínicos realizan una gran cantidad de

análisis bioquímicos en líquidos corporales para
responder a cuestiones clínicas concretas
La mayoría de las muestras recibidas por el laboratorio son muestras
de sangre y orina. Algunas determinaciones se efectúan en sangre
total, pero los análisis séricos y plasmáticos son los preferidos para la
mayoría de los análisis de metabolitos e iones. El proceso, desde la
solicitud de un análisis hasta la recepción del resultado, supone
numerosos pasos. A lo largo de todo el proceso se realizan
comprobaciones constantes y se garantiza la calidad para asegurarse
de que los resultados son válidos, tanto desde el punto de vista
analítico como clínico.

Los laboratorios hospitalarios cuentan con instrumentos

automatizados, tecnologías robóticas y de información
Un laboratorio en un hospital grande puede realizar fácilmente varios
millones de pruebas cada año.
La aplicación de estas tecnologías permite que los laboratorios
clínicos realicen una gran cantidad de análisis, individualizando o
modificando los perfiles de las pruebas solicitadas, así como
priorizando las pruebas solicitadas de forma urgente (v. Apéndice 1).
Elementos formes de la sangre
Hematopoyesis
La fase inicial de la hematopoyesis (hemopoyesis primitiva) durante el
desarrollo embrionario comienza en el saco vitelino. Más tarde, la
hemopoyesis definitiva tiene lugar en una localización periaórtica
conocida como aorta-gónada-mesonefros, posteriormente en la
placenta, el hígado fetal y, tras el alumbramiento, fundamentalmente
en la médula ósea. Todos los elementos formes de la sangre tienen un
precursor común: la célula madre hematopoyética. Estas células
migran hacia las localizaciones de la hemopoyesis y residen en nichos
en la médula ósea, que son microentornos que regulan a estas células.
Los nichos de células madre en la médula ósea suelen localizarse en la
zona de hueso trabecular en el endostio (es decir, una interfase entre
la médula ósea y el hueso; v. cap. 38). Además de las células madre
hematopoyéticas y otros tipos de células progenitoras, el nicho
contiene células del estroma mesenquimales, macrófagos, células
nerviosas simpáticas y células endoteliales. Los osteoblastos están en
la vecindad. También están próximos los sinusoides de la médula
ósea. El nicho proporciona un entorno complejo de citocinas y factores
de crecimiento que regulan a las células madre. También tienen lugar
interacciones con los osteoblastos y parece que estos últimos influyen
en el desarrollo de los denominados progenitores restringidos, que
son células que desarrollan su descendencia a partir de la célula
madre. En la figura 40.1 se muestran las vías principales para la
hematopoyesis, desde las células madre pluripotenciales a través de
las células progenitoras comunes y hacia los linajes encaminados hacia
tipos celulares concretos. Hay tres componentes celulares principales
circulando en el torrente sanguíneo: glóbulos rojos (eritrocitos),
glóbulos blancos (leucocitos) y plaquetas (trombocitos).
 FIG. 40.1 Visión general de la hematopoyesis.
La figura muestra las principales vías de la hematopoyesis, desde la
célula madre pluripotencial, a través de las células progenitoras
comunes, hasta los linajes encaminados a diferentes tipos de células.
A largo plazo, la célula madre hematopoyética posee la capacidad de
autorrenovación, proporcionando una población de estas células
indiferenciadas. Por motivos de claridad hemos omitido las células
precursoras corriente abajo encaminadas hacia la formación de
progenitores eritroides/megacariocitos, progenitores de
granulocitos/macrófagos y células progenitoras linfoides comunes.
Remitimos al lector a los libros de texto de hematología para más
detalles. Basado en Orkin et al. (v. Lecturas recomendadas).

Los eritrocitos no poseen núcleo ni orgánulos

intracelulares
Los eritrocitos son remanentes celulares que contienen proteínas
específicas e iones, que pueden estar presentes en grandes
concentraciones. Son el producto final de la eritropoyesis en la médula
ósea, que está bajo el control de la eritropoyetina producida por el
riñón (fig. 40.2). La hemoglobina se sintetiza en las células precursoras
de los eritrocitos (eritroblastos y reticulocitos) bajo un estricto control
dictado por la concentración de hemo (v. cap. 34). Las funciones
principales de los eritrocitos son el transporte de oxígeno y la
eliminación de dióxido de carbono e iones hidrógeno (v. caps. 5 y 25).
Los eritrocitos no son capaces de sintetizar ni reparar proteínas; en
consecuencia, tienen una vida útil finita de aproximadamente 120 días
antes de ser atrapados y destruidos en el bazo.

FIG. 40.2 Esquema simplificado de la formación de los

eritrocitos.
En un día normal se forman 1011 eritrocitos. La hemoglobina se
sintetiza en el eritrocito y el reticulocito antes de la pérdida de los
ribosomas y las mitocondrias. La presencia de un aumento en el
número de reticulocitos en la sangre indica normalmente una
estimulación de la hematopoyesis.

Los leucocitos protegen al organismo de las infecciones

La mayoría de leucocitos se producen en la médula ósea; algunos se
producen en el timo y otros maduran en varios tejidos diferentes
(fig. 40.3; v. cap. 43). Los leucocitos controlan su propio desarrollo
segregando señales peptídicas que, posteriormente, actúan sobre las
células madre de la médula ósea. Los leucocitos tienen la capacidad de
migrar fuera del torrente sanguíneo hacia los tejidos circundantes.
 FIG. 40.3 Leucocitos.
Clasificación y funciones de los leucocitos. Los linfocitos B maduros se
conocen como células plasmáticas. Véase también capítulo 43 y
tabla 43.1.

Los trombocitos son fragmentos derivados de los

megacariocitos
Los megacariocitos residen en la médula ósea. Dan origen a las
plaquetas y son esenciales en el proceso de coagulación de la sangre
(v. cap. 41).
Proteínas plasmáticas
Las proteínas plasmáticas pueden clasificarse ampliamente en dos
grupos: la albúmina y globulinas heterogéneas. El componente más
importante de estas últimas son las inmunoglobulinas producidas
por las células plasmáticas de la médula ósea.

La albúmina actúa como regulador osmótico y es una de

las principales proteínas de transporte
La albúmina constituye aproximadamente el 50% de las proteínas que
se encuentran en el plasma humano. Carece de actividad enzimática u
hormonal conocida. Su peso molecular es de unos 66 kDa y tiene una
naturaleza sumamente polar. A un pH de 7,4 es un anión con 20
cargas negativas por molécula; esto le proporciona una amplia
capacidad de unión no selectiva a numerosos ligandos. También
desempeña un papel fundamental en el mantenimiento de la presión
osmótica coloidal del plasma. Su concentración normal es de 35-45 g/l,
y su semivida es de unos 20 días.
La tasa de síntesis de albúmina (14-15 g/día) depende del estado
nutricional y su velocidad de síntesis es vulnerable a un aporte
inadecuado de aminoácidos. Aunque su concentración no refleja el
estado nutricional a largo plazo, en los pacientes hospitalizados los
cambios a corto plazo en su concentración suelen deberse sobre todo a
cambios en la hidratación (v. cap. 35).
La albúmina no es esencial para la supervivencia humana y se ha
descrito un defecto congénito raro en el que está completamente
ausente (analbuminemia).

La albúmina transporta ácidos grasos, bilirrubina y

fármacos
La albúmina se une (y por tanto solubiliza) a una amplia gama de
moléculas hidrofóbicas, como los ácidos grasos de cadena larga,
esteroles y varios componentes extraños (xenobióticos), entre los que
se incluyen fármacos y sus metabolitos. La molécula de albúmina
posee numerosos lugares de fijación de ácidos grasos con afinidades
variables.
Se une a la bilirrubina no conjugada (v. cap. 34) y a muchos
fármacos, como salicilatos, barbitúricos, sulfamidas, penicilina y
warfarina. Estas interacciones son débiles y, por lo tanto, las
moléculas unidas (ligandos) pueden verse desplazadas por otras
sustancias que compiten por el lugar de unión común.

Proteínas que transportan iones metálicos

Una serie de proteínas plasmáticas diferentes de la albúmina tienen la
capacidad de unirse a otras moléculas con gran afinidad y
especificidad. Esto ayuda a controlar la distribución de moléculas
como hormonas esteroideas y su disponibilidad para los tejidos. La
unión a proteínas también puede dar lugar a una sustancia tóxica
menos nociva. En la tabla 40.1 se muestran las proteínas de unión más
importantes y sus ligandos.

Tabla 40.1

Proteínas de transporte y sus ligandos

Proteínas Ligandos

Unión a cationes
Albúmina Cationes divalentes y trivalentes (p. ej., Cu2+,
Fe3+)
Ceruloplasmina Cu2+
Transferrina Fe3+

Unión a hormonas
Globulina de unión a hormonas tiroideas (TBG) Tiroxina (T4), triyodotironina (T3)
Globulina de unión al cortisol (CBG) Cortisol
Globulina de unión a hormonas sexuales Andrógenos (testosterona), estrógenos (estradiol)
(SHBG)
Unión a hemoglobina/protoporfirina
Albúmina Hemo, bilirrubina, biliverdina
Haptoglobina Dímeros de hemoglobina
Unión a ácidos grasos
Albúmina Ácidos grasos no esterificados, esteroides

La transferrina transporta hierro

La unión de los iones férricos (Fe3+) a la transferrina protege contra los
efectos tóxicos de estos iones. Durante una reacción inflamatoria, el
complejo hierro-transferrina es degradado por el sistema
reticuloendotelial sin un incremento correspondiente en la síntesis de
cualquiera de sus componentes; esto da lugar a bajas concentraciones
plasmáticas de transferrina y hierro (v. cap. 7).

La ferritina es la principal proteína de almacenamiento

de hierro que se encuentra en la mayoría de células del
organismo
La ferritina actúa como la reserva de hierro en el hígado y en la
médula ósea. La concentración de ferritina en plasma es proporcional
a la cantidad de hierro almacenado. La medición de ferritina en
plasma es uno de los mejores marcadores de una deficiencia de hierro.

La ceruloplasmina es la principal proteína de transporte

para el cobre
La ceruloplasmina transporta cobre desde el hígado a los tejidos
periféricos y es esencial para la regulación de las reacciones de
oxidorreducción, para el transporte y la utilización del hierro
(fig. 40.4; v. también cap. 7).
 FIG. 40.4 Actividad ferroxidasa plasmática de la ceruloplasmina.
La oxidación del Fe2+ por la ceruloplasmina permite la unión y el
transporte del hierro por la transferrina plasmática. El ion cúprico
(Cu2+) unido a la ceruloplasmina se regenera por reacción con el
oxígeno o con grupos tiol oxidados.

Conceptos avanzados
Hemólisis y hemoglobina libre
Cuando los hematíes son hemolizados liberan hemoglobina al
plasma; esta se disocia y forma dímeros que se fijan a la
haptoglobina. En las células del hígado y del sistema
reticuloendotelial, el complejo hemoglobina-haptoglobina es
metabolizado más rápidamente que la haptoglobina sola. Si se
produce una hemólisis excesiva, puede disminuir mucho la
concentración plasmática de haptoglobina. De este modo, sirve de
marcador de hemólisis. Si la hemoglobina se descompone en grupo
hemo y globina, el grupo hemo libre es fijado por la hemopexina. A
diferencia de la haptoglobina, que es una proteína de fase aguda, la
hemopexina no se ve afectada por la respuesta de fase aguda. El
complejo hemo-hemopexina es captado por las células hepáticas, en
las que el hierro se fija a la ferritina. Entre el grupo hemo oxidado y la
albúmina puede formarse un tercer complejo, la metahemalbúmina.
Estos mecanismos han evolucionado para permitir al organismo no
solo evitar pérdidas importantes de hierro, sino también para formar
complejos con el grupo hemo libre, que es tóxico para muchos tejidos.

Inmunoglobulinas
Las inmunoglobulinas son proteínas producidas en
respuesta a sustancias extrañas (antígenos)
Las inmunoglobulinas (anticuerpos) son secretadas por los linfocitos B
(v. cap. 43). Tienen una especificidad definida para partículas extrañas
que estimulan su síntesis. Sin embargo, no todas las sustancias
extrañas que entran en el organismo pueden provocar esta respuesta,
solo los llamados inmunógenos, mientras que cualquier sustancia que
puede unirse a un anticuerpo se denomina antígeno. Las
inmunoglobulinas forman un grupo excepcionalmente diverso de
moléculas que reaccionan y reconocen a una amplia gama de
estructuras antigénicas específicas (epítopos) y que dan lugar a una
serie de efectos, cuyo resultado final es la eliminación del antígeno
presentado. Algunas inmunoglobulinas tienen funciones efectoras
adicionales; por ejemplo, la IgG interviene en la activación del
complemento.

Conceptos clínicos
Joven de 14 años con dolor abdominal y hepatomegalia:
enfermedad de Wilson
Una joven de 14 años ingresó en urgencias. Estaba ictérica, con dolor
abdominal y hepatomegalia dolorosa. También presentaba
somnolencia y asterixis (temblor aleteante) debido a una insuficiencia
hepática aguda. La anamnesis reveló alteraciones de conducta,
dificultad de movimientos en el pasado reciente y absentismo escolar.
Su concentración de ceruloplasmina era de 0,05 g/l (intervalo normal,
0,16-0,47 g/l; 16-47 mg/dl), el cobre en suero era de 8 µmol/l (intervalo
normal, 10-22 µmol/l [65-144 µg/dl]) y la excreción urinaria de cobre
era de 4,2 µmol/24 h (intervalo normal, 2-3,9 µmol/24 h [13-25 µg/dl]).
La biopsia hepática estableció el diagnóstico de enfermedad de
Wilson.
Comentario
En la enfermedad de Wilson, una deficiencia de ceruloplasmina da
lugar a una concentración baja de cobre en plasma. El defecto
metabólico está en la excreción de cobre en la bilis y en su reabsorción
en el riñón; el cobre se deposita entonces en el hígado, el cerebro y el
riñón. Los síntomas hepáticos se presentan en pacientes jóvenes, y la
cirrosis y los problemas neuropsiquiátricos se manifiestan a una edad
más avanzada. La detección de bajas concentraciones plasmáticas de
ceruloplasmina y cobre, el incremento en la excreción urinaria de
cobre y las concentraciones notablemente aumentadas de cobre en el
hígado confirman el diagnóstico.

Las inmunoglobulinas tienen una estructura común en

forma de Y de dos cadenas pesadas y dos ligeras
La inmunoglobulina es una molécula en forma de Y que contiene dos
unidades idénticas denominadas cadenas pesadas (H) y dos unidades
idénticas más pequeñas denominadas cadenas ligeras (L). Existen
varias cadenas H y la naturaleza de la cadena H determina la clase de
inmunoglobulina: IgG, IgA, IgM, IgD e IgE están caracterizadas por
cadenas pesadas γ, α, µ, δ y ɛ, respectivamente. Las cadenas L son
solamente de dos tipos, κ y λ. Cada cadena polipeptídica de la
inmunoglobulina se caracteriza por una serie de regiones globulares
que tienen una considerable homología de secuencia y que, en
términos de evolución, probablemente derivan de una duplicación de
protogenes.
Los dominios N-terminal, tanto de las cadenas H como L, contienen
una región de una secuencia de aminoácidos variable (la región V);
juntas, estas regiones determinan la especificidad antigénica. Tanto las
cadenas H como las L son necesarias para una actividad anticuerpo
completa, ya que las regiones V se hallan físicamente yuxtapuestas en
las cadenas L y H formando un bolsillo funcional en el que el epítopo
encaja perfectamente; esta es la denominada región de reconocimiento
del anticuerpo (Fab’2). El dominio inmediatamente adyacente a la
región V es mucho menos variable, tanto en las cadenas H como en las
L. El resto de la cadena H consiste en una región constante adicional
(región Fc), formada por una región bisagra y dos dominios
adicionales. Esta región constante es responsable de funciones de la
inmunoglobulina diferentes del reconocimiento del epítopo, como la
activación del complemento (v. cap. 43). Esta estructura básica de las
inmunoglobulinas se muestra en la figura 40.5. Cuando el antígeno se
une a la inmunoglobulina se transmiten cambios conformacionales a
través de la zona bisagra del anticuerpo a la región Fc, de la que
entonces se dice que se activa.
 FIG. 40.5 Estructura de las inmunoglobulinas.
Diagrama de la estructura básica de una inmunoglobulina monomérica
y de una inmunoglobulina pentamérica (IgM). C, región constante;
cadena J, cadena de unión; F(ab′)2, fragmento generado por la
escisión de la molécula por pepsina; Fc, Fd, fragmentos generados por
la proteólisis con papaína; H, cadena pesada; L, cadena ligera; V,
región variable.

Principales clases de inmunoglobulinas

La IgG es la inmunoglobulina más abundante, protege

los espacios hísticos y cruza libremente la placenta
La IgG, con un peso molecular total de 160 kDa, consta de una
subunidad de inmunoglobulina básica de 2H2L unida por un número
variable de puentes disulfuro. Las cadenas H γ tienen varias
diferencias antigénicas y estructurales, lo que permite la clasificación
de las IgG en un número de subclases de acuerdo al tipo de cadena H
presente; sin embargo, las diferencias funcionales entre las subclases
son menores.
La IgG circula a concentraciones altas en el plasma; representa el
75% de las inmunoglobulinas presentes en los adultos y tiene una
semivida de 22 días. Está presente en todos los líquidos extracelulares
y parece eliminar pequeñas proteínas antigénicas solubles mediante
agregación y aumento de fagocitosis por el sistema reticuloendotelial.
Desde las 18-20 semanas de gestación, la IgG es transportada
activamente a través de la placenta y proporciona inmunidad humoral
al feto y al neonato antes de la maduración del sistema inmunitario.

La IgA se encuentra en las secreciones y constituye una

barrera antiséptica que protege las superficies mucosas
La IgA tiene una cadena H similar a la cadena γ de la IgG, y las
cadenas α poseen 18 aminoácidos más en el extremo C-terminal. Esta
secuencia peptídica extra permite la unión de una «junta» o cadena J.
Este glucopéptido ácido corto (de 129 residuos) sintetizado por las
células plasmáticas permite la dimerización de la IgA secretora. La
IgA se encuentra con frecuencia asociada de forma no covalente con
un componente denominado secretor, un polipéptido muy
glucosilado de 71 kDa sintetizado por células mucosas y capaz de
proteger a la IgA contra la degradación proteolítica.
La IgA representa el 7-15% de las inmunoglobulinas del plasma y
tiene una semivida de 6 días. Se encuentra, especialmente en forma
dimerizada, en secreciones de la parótida, los bronquios y el
intestino. Es un componente principal del calostro (la primera leche
de las glándulas mamarias maternas después del parto). La IgA
parece funcionar como la primera barrera inmunitaria contra la
invasión patógena de las mucosas. Promueve la fagocitosis, provoca
desgranulación eosinofílica y activa al complemento a través de la
denominada vía alternativa.

La IgM está confinada al espacio intravascular y ayuda a

eliminar los antígenos y microorganismos circulantes
Las inmunoglobulinas pertenecientes a la clase IgM son polivalentes,
con un peso molecular alto. La IgM tiene una forma básica similar a la
de la IgA, con el dominio extra en la cadena H, que permite la unión
por la cadena J, y así es capaz de polimerización. La IgM circula
normalmente como un pentámero, con un peso molecular de 971 kDa,
unido por puentes disulfuro y la cadena J (v. fig. 40.5).
La IgM representa el 5-10% de las inmunoglobulinas plasmáticas y
tiene una semivida de 5 días. Con su naturaleza polimérica y su alto
peso molecular, la mayoría de la IgM se encuentra confinada en el
espacio intravascular, aunque pueden encontrarse cantidades
menores en secreciones, normalmente asociadas con el componente
secretor. Es el primer anticuerpo que se sintetiza tras un ataque
antigénico.

Clases de inmunoglobulinas menores

La IgD es el receptor de superficie de los linfocitos B

La IgD se descubrió en 1965 y difiere de la estructura estándar de las
inmunoglobulinas principalmente por su elevado contenido en
hidratos de carbono de numerosas unidades de oligosacáridos, lo que
determina un peso molecular alto (190 kDa). Sus cadenas δ se
caracterizan por tener solo un enlace disulfuro, así como una larga
región bisagra especialmente susceptible a la proteólisis.
Sirve como receptor de antígenos en los linfocitos B periféricos y
también está presente en una forma secretora. Está presente en los
linfocitos B en las vías respiratorias altas y probablemente contribuya
a la protección contra antígenos transmitidos por el aire. La IgD
representa menos del 0,5% de las inmunoglobulinas plasmáticas
circulantes.

La IgE se fija a antígenos y favorece la liberación de

aminas vasoactivas desde los mastocitos
La IgE tiene una estructura unitaria similar a la de la IgM. Posee
cadenas pesadas ɛ, aunque no se asocia a la cadena J ni presenta
polimerización. La cadena H ampliada explica el elevado peso
molecular de la IgE, de unos 200 kDa. Está presente en cantidades
ínfimas en el plasma.
La IgE presenta una alta afinidad por lugares de fijación en los
mastocitos y los basófilos. La fijación del antígeno en la región Fab2
determina el entrecruzamiento del receptor de alta afinidad, la
granulación de la célula y la liberación de aminas vasoactivas.
Mediante este mecanismo, la IgE participa en gran medida en los
procesos de alergia y atopia e interviene en la inmunidad
antiparasitaria.

Las síntesis de las inmunoglobulinas monoclonales es

el resultado de transformaciones benignas o malignas
de los linfocitos B
Las inmunoglobulinas monoclonales son el resultado de la
proliferación de un clon único de linfocitos B. En la electroforesis en
gel, la inmunoglobulina monoclonal forma una banda única y densa
en la región γ (la banda paraproteica; fig. 40.6). Las inmunoglobulinas
monoclonales están asociadas con diversas neoplasias, como el
mieloma y la macroglobulinemia de Waldenström, y también con
transformaciones más benignas que normalmente se denominan
gammapatías monoclonales de significado incierto (MGUS).
 FIG. 40.6 Comparación del gel electroforético de un suero
normal y otro con inmunoglobulinas monoclonales.
El patrón de barrido de los picos (línea continua) representa la
concentración relativa de las distintas proteínas separadas. (A) Suero
normal. (B) Gammapatía monoclonal: se presenta una banda
fuertemente teñida en la región γ-globulina en la electroforesis, y existe
una disminución asociada de la tinción en la región γ-restante
(inmunoparesia).
Respuesta de fase aguda
La respuesta de fase aguda es una respuesta
inespecífica a la lesión hística o la infección
La reacción de fase aguda es una respuesta sistémica a diferentes tipos
de estrés, como infecciones, traumatismos, cirugías, cáncer o
trastornos inmunológicos. Puede desencadenarse, por ejemplo, por
toxinas bacterianas que estimulan la secreción de citocinas
proinflamatorias como TNF-α, IL-1 e IL-6. Estas citocinas
desencadenan a su vez una serie de respuestas, entre las que destacan
la estimulación del eje hipotalámico-hipofisario-suprarrenal, con
elevación de la concentración de cortisol y también con la
estimulación de la secreción de catecolaminas y de óxido nítrico.
También hay activación del complemento y del sistema de la
coagulación. La secreción de factores de crecimiento conduce a la
activación de neutrófilos, monocitos y fibroblastos. Uno de los
aspectos cruciales de la respuesta de fase aguda es un cambio
importante en el patrón de la síntesis de proteínas en el hígado.
Disminuye la síntesis de una serie de proteínas, como la albúmina, la
transtiretina (prealbúmina) y la transferrina (conocidas como
reactantes negativos de fase aguda; fig. 40.7), mientras que la síntesis
de otras está aumentada. Entre las proteínas que aumentan de
concentración (reactantes positivos de fase aguda) están la proteína C
reactiva, la haptoglobina (globulina de unión a la hemoglobina libre),
la ceruloplasmina (globulina de unión al cobre), el fibrinógeno,
globulinas α1, como la α1-antitripsina (inhibidora de proteinasa) y la
α2-macroglobulina, que se une a enzimas proteolíticas (v. también
cap. 34).
 FIG. 40.7 Respuesta de fase aguda. Desarrollo y cambio
resultante en el patrón de la síntesis proteica en el hígado.
Obsérvese el papel inicial de las citocinas proinflamatorias en el
desencadenamiento de la respuesta de fase aguda.

Conceptos clínicos
Varón con dolor lumbar de comienzo súbito: mieloma
múltiple
Un hombre de 65 años acudió a consulta con dolor lumbar de inicio
súbito. La radiografía reveló una fractura con aplastamiento de la
segunda vértebra lumbar y lesiones «en sacabocados» en el cráneo. La
electroforesis sérica demostró la presencia de inmunoglobulina
monoclonal. Se demostró que era una IgG y en la electroforesis se
observó un exceso de cadenas κ (proteína de Bence-Jones) libres en la
orina del paciente.
Comentario
El mieloma múltiple afecta por igual a varones y mujeres, y
mayoritariamente aparece después de los 50 años. Las
manifestaciones clínicas se deben a la proliferación maligna de células
plasmáticas monoclonales y a la síntesis y secreción de anticuerpos
por estas células. Las lesiones óseas afectan al cráneo, las vertebras,
las costillas y la pelvis. Puede haber osteoporosis generalizada o
fracturas patológicas. Hasta en el 20% de los casos no se detecta la
proteína en plasma, aunque la proteína de Bence-Jones está presente
en la orina. Estos casos se asocian con frecuencia con la supresión de
la producción de otras inmunoglobulinas (inmunoparesia). La
presencia de un exceso de cadenas ligeras puede causar insuficiencia
renal como resultado del depósito de la proteína de Bence-Jones en
los túbulos renales, o amiloidosis. Otros hallazgos frecuentes son
anemia e hipercalcemia.

Para la síntesis de estas proteínas se necesitan aminoácidos que se

obtienen fundamentalmente del aumento del catabolismo muscular.
Así pues, la reacción de fase aguda contribuye a un equilibrio
negativo de nitrógeno (v. cap. 32).
La albúmina es un reactante negativo de fase aguda. Por lo tanto,
obsérvese que una disminución de la concentración plasmática de
albúmina que se observa de forma aguda en un paciente puede ser
consecuencia de una infección, en lugar de ser un marcador del estado
nutricional.

La proteína C reactiva es un componente fundamental

de la respuesta de fase aguda y un marcador de
infección bacteriana
La proteína C reactiva se sintetiza en el hígado y está formada por 5
subunidades polipeptídicas. Tiene un peso molecular de alrededor de
130 kDa. Está presente solo en cantidades mínimas (<1 mg/l en el
suero normal). Promueve la fagocitosis, participa en la opsonización y
facilita la activación de la vía clásica del complemento (v. cap. 43). La
determinación de la proteína C reactiva en el plasma es una prueba
esencial para el diagnóstico y la monitorización de la infección y la
sepsis (fig. 40.8).
 FIG. 40.8 Proteína C reactiva (CRP) y reacción postoperatoria de
fase aguda.
La concentración de CRP aumenta como parte de la respuesta de fase
aguda a un traumatismo quirúrgico y puede observarse un nuevo
aumento si la recuperación se complica por una infección.

El análisis de alta sensibilidad de la proteína C reactiva

se usa para valorar el riesgo cardiovascular
Un análisis de la proteína C reactiva, que es aproximadamente 100
veces más sensible que el método de medición convencional, permite
detectar fluctuaciones mínimas en la concentración de esta proteína.
Los aumentos muy pequeños en la concentración de la proteína C
reactiva (en individuos sin infección) parecen reflejar un estado de
inflamación crónica de bajo grado que se asocia, por ejemplo, con un
aumento del riesgo de enfermedad cardiovascular (v. cap. 33). Otras
patologías inflamatorias, como la enfermedad inflamatoria intestinal,
la diabetes tipo 2 y el síndrome metabólico, se han asociado con estos
mínimos aumentos en la concentración de proteína C reactiva en
suero.
 Conceptos clínicos
Mujer de 44 años con edema: síndrome nefrótico
Una mujer de 44 años ingresó en el hospital a causa de debilidad,
anorexia, infecciones recurrentes, edema bilateral en las extremidades
inferiores y dificultad respiratoria. Su concentración de albúmina
plasmática era de 19 g/l (intervalo normal, 36-52 g/l) y su excreción
urinaria de proteínas era de 10 g/24 h (valor normal, ≤0,15 g/24 h).
Presentaba hematuria microscópica. La biopsia renal confirmó el
diagnóstico de glomerulonefritis membranoproliferativa.
Comentario
Esta mujer presentaba la clásica tríada del síndrome nefrótico:
hipoalbuminemia, proteinuria y edema. La nefritis había dado lugar a
una lesión de la membrana basal glomerular, con la consiguiente
pérdida de albúmina. En el síndrome nefrótico, las pérdidas
continuas de albúmina superan la capacidad de síntesis del hígado y
dan lugar a hipoalbuminemia; en consecuencia, la presión osmótica
capilar se reduce significativamente. Esto conduce a edema periférico
(piernas) y a edema pulmonar (dificultad respiratoria). Con el
aumento de la lesión glomerular se pierden por la orina proteínas de
alto peso molecular, como las inmunoglobulinas y el complemento.

Conceptos clínicos
Mujer ingresada después de un accidente de tráfico:
respuesta de fase aguda
Una mujer de 45 años sufrió lesiones graves en las extremidades
inferiores en un accidente de tráfico. Después de su ingreso en el
hospital, el perfil bioquímico mostraba concentraciones ligeramente
reducidas de proteínas totales en suero (58 g/l; normal, 60-80 g/l) y
albúmina sérica (38 g/l; normal, 36-52 g/l). La electroforesis sérica
reveló un aumento en las fracciones proteicas α1 y α2. Cuatro días
después de la cirugía, el estado de la paciente se deterioró y presentó
fiebre, sudoración y confusión. Se diagnosticó una infección aguda y
se inició tratamiento con antibióticos. Las concentraciones de proteína
C reactiva alcanzaron su valor máximo 5 días después de la
intervención.
Comentario
El aumento de la concentración de las proteínas α1 y α2 (que incluyen
α1-antitripsina, α1-glucoproteína ácida y haptoglobina), junto con una
disminución en la concentración de la albúmina sérica, sugiere una
respuesta de fase aguda. Esta respuesta está asociada también con un
aumento de la proteína C reactiva, la velocidad de sedimentación
globular (VSG) y la viscosidad plasmática. La respuesta de la paciente
al tratamiento de la infección puede valorarse por una disminución
de la concentración de proteína C reactiva en plasma.
Biomarcadores
Un biomarcador es una sustancia o una característica
que se mide como indicador de un proceso normal o
patológico
Los biomarcadores, una vez establecidos, pueden usarse para estudios
de cribado y de valoración del riesgo, para el diagnóstico y la
monitorización de tratamientos o sus efectos secundarios. El proceso
de descubrimiento de nuevos biomarcadores está impulsado
actualmente por la aplicación de las tecnologías ómicas: genómica,
transcriptómica, proteómica y metabolómica (v. cap. 24).

La metabolómica explora patrones de moléculas

pequeñas
La metabolómica es el estudio de todos los metabolitos generados en
el organismo, como los metabolitos de los fármacos, los compuestos
derivados de los alimentos y las sustancias generadas por la flora
microbiana. La base de datos del metaboloma humano (Human
Metabolome Database, versión 3.6) contiene 43.000 entradas de
metabolitos y abarca 5.701 secuencias proteicas (v. sección Páginas
web relevantes). Una base de datos adicional, la Small Molecule
Pathway Database (SMPDB), contiene compuestos individuales y
descripciones extensas de vías metabólicas.
La exploración de los metabolitos es un proceso localizado
«corriente abajo» desde la genómica y la transcriptómica, o estudio de
los genes y su transcripción, respectivamente (v. cap. 24). Las
metodologías metabolómicas permiten explorar vías enteras,
generando patrones de concentraciones de metabolitos. De este
modo, pueden proporcionar un cuadro dinámico del patrón de
metabolitos global en cualquier proceso. El inconveniente de este
cuadro complejo es que puede confundirse con compuestos derivados
de alimentos ingeridos o por metabolitos de fármacos y otras
sustancias extrañas (xenobióticos). Por lo tanto, el proceso crucial es la
comparación de dichos patrones de metabolitos entre poblaciones de
referencia y afectadas mediante técnicas como la espectrometría de
masas ligada a cromatografía de gases (GCMS) o cromatografía
líquida (LC-MS). A continuación pueden identificarse metabolitos
individuales mediante resonancia magnética (RM).
La validación de los biomarcadores obliga a realizar estudios en
cohortes a gran escala. El tamaño exigible para estas poblaciones suele
exceder las capacidades de un estudio único. Por dicho motivo suelen
utilizarse ampliamente los metaanálisis (comparaciones de estudios
diferentes). Un metaanálisis puede consistir en una simple
comparación de varios estudios publicados, o puede implicar un
análisis combinado de grupos de datos de estudios diferentes, o (lo
que resulta más laborioso, pero más fiable) puede suponer el análisis
de datos de participantes individuales procedentes de estudios
distintos combinados en un «nuevo» grupo de gran tamaño.

Aprendizaje activo

1. Comparar y contrastar el plasma y el suero y comentar los

diferentes tipos de muestras de sangre obtenidas para las
pruebas de laboratorio.
2. Explicar el papel de transportador de la albúmina sérica.
3. Describir la estructura central de las inmunoglobulinas y sus
diferentes cometidos en la inmunidad debida a las diferentes
clases de inmunoglobulinas.
4. ¿Cómo afecta la reacción de fase aguda a los resultados de las
pruebas sanguíneas?
5. ¿Cuáles son las características de la enfermedad de Wilson?
6. ¿Qué le ocurre a la hemoglobina cuando los eritrocitos se
rompen?
Universidad de San Carlos de Guatemala Laboratorio de Bioquímica
Centro Universitario de Occidente Lic. Antony Cifuentes
División de Ciencias de la Salud Año 2022
Segundo Año

DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS Y COLESTEROL TOTAL

QUÍMICA DE LÍPIDOS

Los lípidos, a los que suele conocérseles como grasas, tienen una función dual. Primero,
debido a que están compuestos sobre todo de enlaces carbono-hidrógeno (C-H), son una rica
fuente de energía y una forma eficiente para que el cuerpo almacene exceso de calorías. Como
resultado de sus propiedades físicas únicas, los lípidos son también una parte integral de las
membranas celulares y, por tanto, desempeñan también una función estructural en las células.
Los lípidos transportados por las lipoproteínas; a saber, ácidos grasos, fosfolípidos,
colesterol y ésteres de colesterilo, son los lípidos principales hallados en las células. (Bishop)

TRIGLICÉRIDOS
Como se puede inferir del nombre, los triglicéridos contienen tres moléculas de ácidos
grasos unidas a una molécula de glicerol por enlaces de éster.

La medición de triglicéridos séricos junto con el colesterol es útil para detectar ciertos
trastornos genéticos y otros tipos de trastornos metabólicos, así como para caracterizar el
riesgo de desarrollar enfermedad coronaria. El valor de triglicérido se emplea también por lo
común en la estimación de colesterol LDL mediante la ecuación de Friedewald.
Varias secuencias de reacción enzimáticas están disponibles para medición de
triglicéridos. En todas se emplean lipasas para separar los ácidos grasos del glicerol.
El glicerol liberado participa en cualquiera de las distintas secuencias enzimáticas. En
una de las primeras reacciones más comunes, que finaliza en un producto medido en la región
ultravioleta (UV), se emplean cinasas de glicerol y de piruvato, y termina en la conversión de
NADH a NAD+ con una disminución correspondiente de absorbancia. Esta reacción es
susceptible a interferencia y reacciones secundarias. (Bishop)

Las secuencias enzimáticas de reacción de triglicéridos también reaccionan con glicerol

libre endógeno, que está universalmente presente en el suero y constituye una fuente
importante de interferencia. En casi todas las muestras, el glicerol libre endógeno contribuye
con una sobrestimación de triglicéridos de 10 a 20 mg/dl. Cerca de 20% de las muestras
tendrán alto contenido de glicerol, con concentraciones incrementadas en ciertas condiciones
como diabetes y hepatopatía o por medicaciones basadas en glicerol. La mayor parte de los
laboratorios de investigación incorporan una corrección para glicerol libre endógeno, pero esta
práctica es poco común en los laboratorios clínicos.
La corrección más común, designada “blanco de cubeta doble”, se lleva a cabo con una
segunda medición paralela por medio de un reactivo de triglicérido sin la enzima lipasa para
cuantificar sólo el blanco de glicerol libre. La medición del blanco de glicerol se resta de la
medición de glicerol total obtenida con el reactivo completo para determinar un resultado de
triglicérido corregido por blanco. (Bishop)
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Segundo Año

MATERIALES Y REACTIVOS
1. Solución patrón de Triglicéridos y Colesterol Total de concentración 200 mg/dL
2. Reactivo para la determinación de Triglicéridos y Colesterol Total.
3. Tubos de ensayo
4. Gradillas
5. Pipetas semiautomáticas para la medición de volúmenes de 5 µl y 1000 µl
6. Espectrofotómetro
7. Sueros problema (De los estudiantes de laboratorio de bioquímica)

PROCEDIMIENTO PRÁCTICO PARA TRIGLICÉRIDOS

Muestra
Blanco (B) Estándar (St)
(Mx)
Reactivo de Triglicéridos 500 500
500 microlitros
microlitros microlitros
Solución Estándar 5 microlitros
Suero del Paciente 5 microlitros

a. Mezclar suavemente.
b. Incubar los tubos por 5 minutos a 37°C, o 10 minutos a temperatura ambiente. (La
estabilidad de la prueba es de 60 minutos)
c. Leer a 500 nanómetros, poniendo en cero el aparato con blanco.
d. Leer la absorbancia del estándar y anotar el resultado.
e. Leer la absorbancia de la muestra y anotar el resultado.
f. Celular la concentración de triglicéridos en el paciente utilizando la fórmula de Beer-Lambert.

Triglicéridos séricos (mg/dl) = Amx (absorbancia de la muestra) X concentración del

Ast (absorbancia del estándar) estándar (200 mg/dl)
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Segundo Año
DETERMINACIÓN DE COLESTEROL TOTAL

Blanco (B) Estándar (St) Muestra (Mx)

Reactivo de Colesterol 500 500
500 microlitros
microlitros microlitros
Solución Estándar 5 microlitros
Suero del Paciente 5
Microlitros

a. Mezclar e incubar todos los tubos a 37 grados durante 5 minutos o 10 minutos a temperatura
ambiente. (La estabilidad de la prueba es de 60 minutos)
b. Leer en el espectrofotómetro a una longitud de onda de 500 nanómetros poniendo el aparato
en cero con el blanco.
c. Calcular la concentración de Colesterol Total del paciente, utilizando la fórmula de Beer-
Lambert.

Col. Total= Absorbancia de la Muestra (Amx) X 200 mg/dl

Absorbancia del Estándar (Ast)

VALORES DE REFERENCIA

COLESTEROL COLESTEROL COLESTEROL LDL

TRIACILGLICEROLES TOTAL HDL
< 150 mg/dL < 200 mg/dL < 40 mg/dL < 100 mg/dL
Concentración deseable Concentración Niveles bajos Niveles óptimos
deseable Alto riesgo de E CV
150–200 mg/dL 200–240 mg/dl
Bajo riesgo de E CV 100–160 mg/dL
Niveles ligeramente 40-60 mg/dL Niveles ligeramente
Riesgo promedio de ECV Levados Riesgo promedio de elevados
(requiere tratamiento) Riesgo de ECV ECV Riesgo promedio de
ECV
> 200 mg/dL > 60mg/dL
Niveles elevados > 240 mg/dL Riesgo bajo > 160 mg/dL
Niveles elevados Factor Protector contra Niveles altos
> 875 mg/dL ECV Elevado riesgo de
riesgo de Alto riesgo de E CV ECV
pancreatitis
Bibliografía
Bishop, M. (s.f.). Química Clínica. Durham, Nort Carolina: Mc Grill. Recuperado el 2018

Henry, J. (2010). Laboratorio en el Diagnóstico Clínico. Madrid: marbán.

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Segundo Año

Determinación de Colesterol Total y Colesterol HDL

Las lipoproteínas constituyen la “industria del petróleo” del cuerpo. Como los grandes
buques tanque que recorren los océanos del mundo transportando petróleo para necesidades
de combustible, los grandes quilomicrones llevan triglicéridos dietéticos por el sistema
circulatorio a las células, y por fin llegan al hígado a depositar los quilomicrones restantes.
(Bishop)

Las lipoproteínas plasmáticas transportan esencialmente todo el colesterol y lípidos

esterificados de la sangre. Las cuatro clases principales de lipoproteínas son: quilomicrones,
lipoproteínas de muy baja densidad (LVLDL), lipoproteínas de baja densidad (LDL),
lipoproteínas de alta densidad (HDL). (Henry, pág. 224)

Las lipoproteínas y sus lípidos, esencialmente el colesterol, predicen el riesgo de

enfermedad cardiovascular

Quilomicrones
Son partículas producidas por el intestino, muy ricas en triglicéridos (del 85% al 95%)
de origen exógeno (dieta), pobres en colesterol libre y fosfolípidos, que contienen de un 1% a
un 2% (por peso) de proteínas. Un alto contenido de quilomicrones origina un plasma
“lechoso”, en el cual los quilomicrones se acumulan como una capa cremosa flotante cuando
se deja en reposo durante varias horas. (Henry, pág. 224)

Lipoproteínas de muy baja densidad

Las partículas de VLDL son mas pequeñas que lo quilomicrones y también ricas en
triglicéridos, aunque en menor grado. Tienen una proporción lípido/proteína mas baja, flotando
a una densidad algo más alta. (Henry, pág. 225)

Lipoproteínas de baja densidad

Las LDL constituyen alrededor del 50% de la masa total de lipoproteínas plasmáticas
en humanos. Las partículas son mucho más pequeñas que las lipoproteínas ricas en
triglicéridos.

Lipoproteínas de alta densidad

La HDL es una pequeña partícula que consta de un 50% de proteína, el 20% de
colesterol, un 30% de fosfolípidos y solo indicios de triglicéridos.
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Segundo Año
DETERMINACIÓN DE COLESTEROL

El método enzimático para el colesterol fue introducido en 1973 por Flegg y Richmond,
utilizando colesterol oxidasa de origen bacteriano seguida de saponificación química de los
ésteres del colesterol.

La enzima colesterol estereasa (CE) hidroliza a los ésteres del colesterol para dar
colesterol libre y ácidos grasos. El colesterol libre así producido más el colesterol preformado
se oxidan en presencia de la enzima colesterol oxidasa (COx) para dar colesten-4-3-cetona y
peróxido de hidrógeno. Un cromógeno quinonaimina, con absorción máxima a 500 nm, se
produce cuando el fenol se acopla oxidativa mente con 4-aminofenazona en presencia de
peroxidasa con peróxido de hidrógeno. La intensidad final del color rojo es proporcional a la
concentración total del colesterol.

MATERIALES Y REACTIVOS
1. Solución patrón de Colesterol Total de concentración 200 mg/dL
2. Reactivo para la determinación de Colesterol Total y Colesterol HDL
3. Tubos de ensayo
4. Gradillas
5. Pipetas semiautomáticas para la medición de volúmenes de 10 µl y 100 µl
6. Espectrofotómetro
7. Sueros problema

PROCEDIMIENTO PRÁCTICO PARA COLESTEROL

1. PRECIPITACIÓN DEL COLESTEROL HDL

a. En un tubo agregar 200 microlitros de suero del paciente y 500 microlitros de reactivo
precipitante de colesterol HDL.

b. Mezclar suavemente y dejar reposar por 10 minutos a temperatura ambiente.

c. Centrifugar por 2 minutos.

d. Una vez centrifugado, NO mezclar de nuevo.

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Segundo Año
2. DETERMINACIÓN DE COLESTEROL TOTAL Y COLESTEROL HDL
a. Colesterol Colesterol
Blanco Estándar
Total HDl
Reactivo de Colesterol 1000 1000 1000 1000
microlitros microlitros microlitros microlitros
Solución Estándar 100
10 microlitros
microlitros
Suero del Paciente
10 microlitros
Sobrenadante del
precipitado de colesterol 100
HDL microlitros

b. Mezclar e incubar todos los tubos a 37 grados durante 5 minutos.

c. Leer en el espectrofotómetro a una longitud de onda de 500 nanómetros.
d. Calcular el Colesterol Total, Colesterol HDL, Colesterol VLDL y Colesterol LDL

Col. Total/ Col. HDL= Absorbancia de la Muestra X 200 mg/dl

Absorbancia del Estándar

Colesterol VLDL= Triglicéridos

5

Colesterol LDL= Colesterol Total – (Colesterol HDL + Colesterol VLDL)

COLESTEROL COLESTEROL HDL COLESTEROL LDL

TRIACILGLICEROLES
TOTAL
< 150 mg/dL < 200 mg/dL < 40 mg/dL
Concentración deseable Concentración deseable Niveles bajos < 100 mg/dL
Bajo riesgo de E C V Alto riesgo de E C V Niveles óptimos
150–200 mg/dL 200–240 mg/dl 40-60 mg/dL 100–160 mg/dL
Niveles ligeramente Niveles ligeramente
Riesgo promedio de ECV Levados Riesgo promedio de ECV elevados
(requiere tratamiento) Riesgo de ECV Riesgo promedio de
ECV
> 200 mg/dL > 60mg/dL > 160 mg/dL
Niveles elevados > 240 mg/dL Riesgo bajo Niveles altos
Niveles elevados Factor Protector contra ECV Elevado riesgo de
> 875 mg/dL ECV
riesgo de pancreatitis Alto riesgo de E C V
Bibliografía
Bishop, M. (s.f.). Química Clínica. Durham, Nort Carolina: Mc Grill. Recuperado el 2018
Henry, J. (2010). Laboratorio en el Diagnóstico Clínico. Madrid: marbán.
Hormonas implicadas en el control de la glucogenólisis
Hormona fuente iniciador Efecto sobre la
Glucogenólisis
Glucagón Células a(alfa) Hipoglucemia Activación rápida
pancreáticas
Adrenalina Médula Estrés agudo, Activación rápida
suprarrenal hipoglucemia
Cortisol Corteza Estrés crónico Activación rápida
suprarrenal
Insulina Células B(beta) Hiperglucemia Inhibición
pancreáticas
Clases principales de glucogenosis (enfermedades)
tipo Nombre de la Deficiencia Consecuencias
patología enzimática estructurales o
clínicas
I Von gierke Glc-6-pasa Hipoglucemia
grave posterior a
la absorción,
acidosis láctica,
hiperlipidemia
II Pompe a-glucosidasa Gránulos de
lisosomal glucógeno en los
lisosomas
III Cori Enzima Estructura de
desramificante glucógeno
alterada,
hipoglucemia
IV Andersen Enzima Estructura de
ramificante glucógeno
alterada
V Mcardle Fosforilasa del Exceso de
musculo depósito de
glucógeno en el
musculo,
calambres y fatiga
inducidos por el
ejercicio
VI hers Fosforilasa del Hipoglucemia no
hígado tan grave como en
el tipo 1
 Reacciones de la Glucogenólisis (enzima más importante Fosforilasa) y la
reacción 1 es propia de la Glucogenólisis.
N sustrato enzima producto Tipo de Cofactor
O reacción o
coenzim
a
1 Glucógeno(unidades  Glucógeno Glucosa Irreversible NA
1-4 1-6 glucosilo)+pi Fosforilasa libre+ Fosforilacion
 Glucano glucosa 1-
transferasa fosfato
 Enzima
desramificant
e
2 Glucosa 1-fosfato fosfoglucomutasa Glucosa 6- Reversible Cofactor
fosfato activador
Mg+2
3 Glucosa 6- Glucosa 6- Glucosa+pi
Hidratación NA
fosfato+H20 fosfatasa Irreversible
Desfosforilació
n
Reacciones de la glucogénesis (enzima más importante de la glucogénesis es
glucógeno sintasa )
No sustrato enzima producto Tipo de Cofactor
reacción o
coenzima
1 ATP + Glucocinasa ADP + Irreversible Cofactor
glucosa glucosa 6- Desfosforilación activador
fosfato Mg+2
2 Glucosa Fosfoglucomutasa Glucosa 1- reversible Cofactor
6-fosfato fosfato activador
Mg+2
3 Glucosa UDPGlc 2pi + Irreversible NA
1-fosfato+ pirofosforilasa UDPGlc Desfosforilación
UTP
4 UDPGlc + Glucógeno UDP+ Irreversible NA
glucógeno sintasa unidades
primordial 1-4
glucosilo
5 Unidades Enzima Glucógeno Irreversible NA
1-4 ramificadora (unidades
glucosilo 1-4 y 1-6
glucosilo)
 SEMANA 15-16

Formados por:
 Un Fosfato
 Un azúcar de 5 Carbonos (desoxirribosa
ADN)
 Una Base Nitrogenada (la más importante
de los 3 ya que el nucleótido toma el
nombre de esta y es la única que varía en
todos los nucleótidos)
 Se forma de millones de nucleótidos.

Al formar cadenas se unen entre ellas por el azúcar a partir del fosfato
presente.

BASES NITROGENADAS PURINAS Y PIRIMIDINAS

 1. BASES COMPLEMENTARIAS
Se forma de dos cadenas con un azúcar, fosfato y la base, las bases siempre van
en pares ya establecidos, la citosina con guanina, adenina con timina, y están
emparejados debido a que la cadena mide de ancho dos nanómetros y no mide ni
más ni menos y la segunda razón son los puentes de hidrógeno.

PUENTES DE HIDRÓGENO
Cada par de base nitrogenada tiene un número de enlaces de hidrogeno, la timina
y adenina tienen dos puentes y la guanina y citosina tiene 3 puentes, esta es la
segunda razón antes mencionada.
 2. CADENAS ANTIPARALELAS
Las dos cadenas tienen dirección diferente, una de 5’ a 3’ y otra de 3’ a 5’. Las
cadenas tienen sentidos opuestos.

3. FORMA DE HÉLICE
Los fosfatos y azucares forman las paredes y los eslabones lo forman las bases
nitrogenadas.
 4. DISTANCIA ENTRE HÉLICES
Entre eslabones hay 0.34 nm, una vuelta completa de ADN incluye 10 eslabones,
mide 3.4 nm por ende. De ancho mide 2 nm.

La secuencia de los nucleótidos nos da la información genética.

Rosalin franklin, que logró captar la estructura del ADN por radios x, años más
tarde Watson y Crick, a partir de la información de Rosalin dieron la estructura
del ADN.
El ADN se duplica en la interfase que se divide en G1(duplica los organelos), la S
(se duplica el ADN), y la G2 (se duplican proteínas). La duplicación se hace a
partir de una cadena ya existente, cada cadena formada lleva una cadena antigua
y otra nueva por ello es semiconservativa, porque conserva la mitad de la cadena
antigua.

 La replicación por lo tanto es semi–conservativa.

 Las cadenas antiguas sirven de molde para formar cadenas nuevas.
 La cadena con dirección de 5-3 es llamada cadena original o
adelantada y la cadena con dirección de 3-5 cadena rezagada.
 Al inicio de la replicación se forma la burbuja de la replicación (espacio
entre las cadenas) que van creciendo conforme se da la replicación.
 Los extremos de éste espacio que no se han separado son llamados
horquillas de la replicación.
 Se forman varias burbujas al mismo tiempo y van creciendo a medida que
la replicación se extiende a lo largo de la cadena de ADN.
 La cadena que todavía no ha formado la burbuja de la replicación se le
llama origen de la replicación.

NO SE DUPLICA LA INFORMACIÓN SE COMPLEMENTA.

TOPOISOMERASA: Evita que la cadena que no se ha separado gire sobre ella
misma.

HELICASA: Rompe los puentes de hidrógeno que al separarse ya no se pueden

volver a unir entre ellos, al menos que se unan con otras.

PROTEINAS DE UNION A LA CADENA SIMPLE: Evita que las cadenas separadas

giren sobre sí mismas.
CADENA ADELANTADA
 Cadena en dirección de 5-3
 Complementa de una sola vez.
 Necesita de una enzima llamada ADN POLIMERASA (tiene dos funciones
una de COMPLEMENTAR LAS BASES, puede complementar hasta 5,000
nucleótidos por segundo y otra de EXONUCLEASA que es la función de
chequeo y corrección) y un cebador proteína cuya función es indicar a la
polimerasa en donde complementar. Cuando la polimerasa no puede
corregir se da una mutación, por la cual es una mutación puntual.

CADENA REZAGADA
Necesita de:

 ADN POLIMERASA (complementa de 6 a 8 nucleótidos en bloques mas

no por unidad)
 CEBADOR
 ADN PRIMASA (le indica a la polimerasa donde colocar los fragmentos
de OKASAKI pero a veces van algunos de ARN por lo cual debe
cambiarlo y por ello es rezagada)
 ADN LIGASA (une los bloques de nucleótidos)
 FRAGMENTOS DE OKAZAKI

Dependiendo la cantidad de burbujas de replicación así va ser la cantidad de

polimerasas, cebadores, fragmentos de OKASAKI y así con todo.

TUNEKO OKASAKI DESCUBRIÓ LOS FRAGMENTOS DE OKASAKI EN 1933.

 ARN: FORMACIÓN, TRANSCRIPCIÓN Y TRADUCCIÓN

Formado por Ribonucleótidos:

 Un grupo fosfato
 Un azúcar de 5 Carbonos (ribosa)
 Una Base Nitrogenada

DIFERENCIAS ENTRE ADN Y ARN

 CLASES DE ARN
El ARN puede ser de tres clases:

1) ARN-mensajero --- ARN-m

2) ARN traductor - ARN-t
3) ARN ribosomal - ARN- r

ARN- MENSAJERO
 Se forma directamente de la Cadena complementaria (de 3 a 5) de ADN.

 Su origen es dentro del núcleo, pero tiene que salir de él y ser procesado
en el citoplasma.
 Necesita de una ARN polimerasa (complementa y corrige) y un promotor
(misma función que el cebador indicando a la polimerasa en donde
complementar) para poder formarse.

TRANSCRIPCIÓN
 ARN- TRADUCTOR
Al unirse al mensajero solo traduce la información de este. sirve como vínculo (o
adaptador) entre la molécula de ARN mensajero (ARNm) y la cadena creciente
de aminoácidos que forman una proteína.

ARN- RIBOSOMAL
 Es el más abundante de los 3 tipos.
 Se localiza en el citoplasma
 En él se lee la información del mensajero.
 Forma los ribosomas
 Formado por una sub-unidad grande y una pequeña.
Cuando del ADN se forma otro ADN se le llama replicación, cuando se forma
ARN se llama transcripción, cuando de ARN pasa al lenguaje de aminoácidos se
llama traducción.

TRADUCCIÓN
El mensajero formado de la cadena de ADN, se agrupa en tripletes (3
ribonucleótidos), los cuales son traducidos por el ARN- traductor.

El mensajero se dirige a buscar un ribosoma que lo pueda leer y formar proteínas.

 La combinación de los ribonucleótidos (64) nos brinda información de 20

aminoácidos por lo que el código genético recibe el nombre de degenerado.
 De las 64 combinaciones, 61 son para aminoácidos y 3 son de terminación.
 Existe una tabla en la que podemos obtener dicha información.
 El código genético se le llama degenerado porque hay muchos tripletes
para un solo aminoácido.
SOLO SE DA INFORMACIÓN PARA 20 AMINOÁCIDOS Y HAY 64
TRIPLETES. ESTE CÓDIGO ES UNIVERSAL SE UTILIZA PARA
CUALQUIER SER VIVO.
 FORMACIÓN DE PROTEÍNAS
viene del mensajero. Pasar del lenguaje de ribonucleótidos al de aminoácidos.

TRADUCCIÓN
El proceso de formación de proteínas es llamado traducción ya que es la
transferencia de información del lenguaje de los nucleótidos al de los
aminoácidos.

Ocurre en tres etapas:

Iniciación, Elongación y Terminación.

Comienza cuando la sub unidad pequeña del ribosoma se une al extremo de Shine
y Dalgarno del mensajero.

Luego el mensajero pasa del sitio A donde es leído hacia el sitio P en donde se
une el traductor y la sub unidad grande del ribosoma.

El aminoácido metionina es el primero en formarse.

La combinación dela sub unidad pequeña, el m-ARN, t-ARN se conoce como
Complejo de Iniciación, la formación de éste complejo requiere de proteínas
adicionales llamadas Factores de Iniciación.

La subunidad pequeña está relacionada a la subunidad grande pero nunca unidas

a menos de que estén traduciendo. El pequeño tiene dos partes Aminoacil (sitio
A) (se lee el triplete) seguidamente pasa al peptidil (sitio P) donde se une el
traductor del aminoácido y de allí se une la subunidad grande que solo inicia si se
presenta metionina, a este complejo se le llama compleja iniciación (RIBOSOMA,
ARNT Y ARNM)

Durante esta etapa el sitio A del ribosoma será ocupado transitoriamente por
codones del m-ARN que serán leídos y traducidos por el t-ARN.

Para ello se requiere de una proteína que se llama Factor de Elongación.

El traductor unirá el anticodón al codón y llevará al aminoácido correspondiente.

Los aminoácidos se unirán por medio de la Peptidil Transferasa (forma un enlace

peptídico)
Hacia el final de la secuencia del m-ARN se localiza un codón llamado Señal de
Terminación o Codones de Terminación (UGA, UUA, UAG), que al aparecer da
por terminado la traducción

Para complementarse con ellos existen proteínas que se presentan cuando no

aparece el codón de terminación, llamadas Factores de Liberación que se unen
en el sitio A del ribosoma, produciendo la separación de la subunidad pequeña de
la grande, liberando al m-ARN, y por ende no sigue traduciendo.
REALIZADO POR:

Javier G.
INFORMACIÓN OBTENIDA DEL CURSO DE LABORATORIO DE
BIOQUÍMICA, SEGUDNO AÑO 2022, CARRERA DE MÉDICO Y CIRUJANO,
FACULTAD DE MEDICINA, CUNOC, USAC.

Javier G.
Universidad de San Carlos de Guatemala
Centro Universitario de Occidente
Faculta de Ciencias de La Salud
Laboratorio de Bioquímica.

Laboratorio B.
Sangre y Componentes Celulares.

Los componentes celulares de la sangre son los glóbulos rojos, los glóbulos blancos y las
plaquetas, que se encuentran suspendidos en el plasma.

Los glóbulos rojos (eritrocitos) son los más numerosos de los tres componentes celulares y
normalmente componen casi la mitad del volumen sanguíneo. Estas células están llenas de
hemoglobina, lo que les permite transportar oxígeno desde los pulmones hasta los tejidos
de todo el cuerpo. Así, las células consumen el oxígeno que les proporciona energía y
liberan el anhídrido carbónico como un producto de desecho que los glóbulos rojos retiran
de los tejidos y llevan hasta los pulmones.

La cantidad de glóbulos blancos (leucocitos) es menor, con una proporción de

aproximadamente un glóbulo blanco por cada 660 glóbulos rojos. Existen cinco tipos
principales de glóbulos blancos que funcionan de forma conjunta, constituyendo los
principales mecanismos de defensa del organismo contra las infecciones, incluida la
producción de anticuerpos. Los neutrófilos, también llamados granulocitos porque
contienen gránulos con enzimas, forman el tipo de glóbulos blancos más numeroso.
Ayudan a proteger al cuerpo de las infecciones bacterianas y fúngicas y fagocitan partículas
extrañas. Los Basófilos, que se encuentran en menor cantidad liberando histamina y por
último los Eosinófilos que se encuentran presentes en las alergias e infecciones parasitarias.
Los linfocitos se dividen en dos grupos principales: los linfocitos T, que permiten al
organismo defenderse contra las infecciones víricas, pero que también pueden detectar y
destruir algunas células cancerosas, y los linfocitos B, que se transforman en células
plasmáticas que producen anticuerpos.

Los monocitos ingieren las células muertas o dañadas y eliminan agentes infecciosos,
proporcionando así las defensas inmunológicas necesarias al organismo.

Las plaquetas (trombocitos), partículas parecidas a las células (no son realmente células),
son más pequeñas que los glóbulos rojos o blancos y forman parte de los mecanismos
necesarios para detener una hemorragia a nivel de un punto sangrante donde se acumulan y
se activan.

Los glóbulos blancos no circulan libremente en el flujo sanguíneo, como los glóbulos rojos.
Muchos de ellos se adhieren a las paredes de los vasos sanguíneos o incluso las atraviesan
para entrar en otros tejidos. Cuando los glóbulos blancos alcanzan el sitio de una infección,
por ejemplo, liberan sustancias que atraen más glóbulos blancos. Las células blancas
funcionan como un ejército; están dispersas en todo el organismo pero preparadas para la
orden inmediata de agruparse y expulsar cualquier organismo invasor.

Formación de las células de la sangre

Los glóbulos rojos, los glóbulos blancos y las plaquetas se originan en la médula ósea. Pero
aun siendo glóbulos blancos, los linfocitos se producen también en los ganglios linfáticos,
en el bazo y en el timo, pequeña glándula que se encuentra cerca del corazón que funciona
solamente en niños y adultos jóvenes y donde se originan y maduran los llamados linfocitos
T.

Dentro de la médula ósea, todas las células sanguíneas se originan a partir de un solo tipo
de célula llamada célula madre. Esta célula madre se divide en células inmaduras que van
dividiéndose a su vez y van madurando hasta llegar a los tres tipos presentes en la sangre.

La velocidad de la producción de las células sanguíneas es controlada según las

necesidades del cuerpo. Cuando el volumen de oxígeno de los tejidos corporales o el
número de glóbulos rojos disminuye, los riñones producen y liberan la eritropoyetina, una
hormona que estimula a la médula ósea para producir más glóbulos rojos. En caso de
infecciones, la médula ósea produce y libera más glóbulos blancos mientras que, ante una
hemorragia, produce más plaquetas.

Realización de Frotis Sanguíneo.

Es la extensión de sangre como una fina película de sangre extendida sobre un

portaobjetos, de modo que las células sanguíneas estén dispuestas en una capa. La finalidad
de la extensión sanguínea es la observación al microscopio óptico de las células presentes
en la muestra.
Las extensiones sanguíneas se pueden realizar de forma manual o de forma automática. En
esta práctica se utiliza la técnica manual del portaobjetos, también llamada técnica de los
dos portaobjetos. No debe cubrir toda la superficie del portaobjetos.

Características importantes del Frote Sanguíneo:

1. Su espesor debe ir disminuyendo desde el inicio hasta el final.

2. La sangre debe ir dispuesta en una sola capa de tal modo que no queden huecos a lo
largo de la extensión sanguínea.
3. Las bandas laterales deben ser lisas.
4. Los bordes laterales de la extensión deben estar separados de los bordes del porta
objeto 1-2 mm.
5. Las extensiones deben ser delgadas, bien extendidas y bien coloreadas.
 Partes del Frote Sanguíneo

Además, una buena extensión sanguínea presenta tres zonas claramente diferenciadas:

 Cabeza: Es la zona inicial de la extensión. Si atendemos a las características que

debe presentar un frotis sanguíneo ideal, la cabeza será la zona con mayor grosor.
De hecho, los hematíes pueden estar formando más de una capa.

 Cuerpo: Es la zona intermedia de la extensión sanguínea y la más adecuada para el

estudio de las células. Existe una adecuada proporción de leucocitos en esta zona.

 Cola: Es la zona final del frotis. En ella los hematíes se disponen en forma de
mosaico, deformados, y homogéneamente coloreados. Los leucocitos dispuestos en
esta zona suelen ser los más grandes (monocitos y granulocitos).

El inicio y el final de la extensión sanguínea deben estar a un centímetro de los extremos

del portaobjetos. Los bordes laterales deben estar a uno o dos milímetros de los bordes del
frotis.

Pueden darse extensiones defectuosas debido a la utilización de una gota demasiado

grande, al uso de portaobjetos mellados o con grasa, a la variación del ángulo y la velocidad
de la técnica, o al levantar antes de tiempo el portaobjetos esmerilado.
Importancia del Frote Sanguíneo

Los resultados indican si las células de la sangre tienen un aspecto normal o no. Los resultados de los
glóbulos rojos, los glóbulos blancos y las plaquetas se informan por separado.

Si los resultados de los glóbulos rojos no son normales, esto podría indicar:
Anemia
Anemia Falciforme: Los glóbulos rojos pierden su forma original,
Anemia hemolítica: Tipo de anemia en el que los glóbulos rojos son destruidos antes de
poder reemplazarse. Esto hace que el cuerpo se quede sin suficientes glóbulos rojos sanos
Enfermedades de la médula ósea

Si los resultados de los glóbulos blancos no son normales, esto podría indicar:
Infección
Alergias
Leucemia

Si los resultados de las plaquetas no son normales, esto podría indicar trombocitopenia, un
problema médico en el que la sangre tiene un número anormalmente bajo de plaquetas.

Este preparado entrega valiosa información en casos como las leucemias, deficiencias de
hierro, trastornos genéticos de la forma de los eritrocitos, posibles deficiencias de vitamina
B12.

La importancia de un buen extendido y su correcta tinción son fundamentales a la hora de

la observación al microscopio, ya que un frotis mal hecho entrega muy poca información
acerca de la morfología celular, y en algunos casos es esta observación la que entrega al
médico la información que requiere para realizar su diagnóstico.

Insumos Requeridos
Portaobjetos
Toalla de papel (mayordomo)
Guantes (alumno)
Tubos para sangre de 3 ml con EDTA, tapón morado. (uno por mesa. Alumno)
Jeringa de 3 ml (2 por mesa. alumno)
Alcohol ( frasco de 120 ml. alumno)
Algodón (alumno)
Ligadura (2 por mesa. alumno)

Procedimiento:

1. Obtener 3 ml de sangre por punción venosa.

2. Colocar la muestra en el tubo de ensayo con EDTA.
3. Mover inmediatamente con movimientos manuales en forma de ocho el tubo con la
muestra
4. Depositar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos limpio (libre de
pelusa y grasa).
5. Con otro portaobjetos (tomarlo lateralmente entre las yemas de los dedos) deslizarlo
sobre toda la superficie del porta de manera que se pueda obtener una fina película de
sangre.
El inicio del frotis se denomina cabeza y la parte final del frotis se denomina cola. (observe
la imagen)
6. Esperar a que se seque la lámina, dejarla sobre una rejilla o toalla de papel, con la zona
donde está la muestra mirando hacia arriba.
7. Cada estudiante debe presentar 5 frotes bien realizados.
Cuestionario:
1) ¿Cuál es el objetivo del frote sanguíneo?
2) Describa los métodos para determinar el número de células sanguíneas.
3) ¿Cuándo es prudente realizar una muestra de extracción de medula ósea y cuáles
son las partes corporales indicadas para ello?
4) Describa la diferencia clínica de un frote periférico y un frote sanguíneo.
 SEMANA 15-16
De ácidos

El organismo obtiene las grasas por medio de dos fuentes, una de ellas es por
alimentos denominada obtención de grasa exógena.

Las grasas pueden clasificarse de acuerdo a lo siguiente:

Las grasas saturadas poseen enlaces simples, las insaturadas

poseen múltiples enlaces dobles que la hacen muy beneficiosa para el organismo
como la que se encuentra en aguacates y aceitunas, las hidrogenadas que
poseen muchos hidrógenos cuya consistencia cambia de un estado líquido a uno
solido o pastoso cremoso, el organismo no lo acepta de la mejor manera, aunque
de vez en cuando no hace mayor daño a menos de que se ingieran con regularidad.

Estas son todos los tipos de grasas que podemos introducir al organismo, cuando
introducimos estas grasas el organismo lo detecta y por ende hay baja síntesis
de grasas, cuando se realizan dietas altas en carbohidratos, pero bajas en grasas
el organismo encuentra una necesidad para empezar a sintetizar la grasa, esta
es la denominada obtención de grasa endógena o interna, con ello se obtiene
que el organismo puede obtener grasa ya sea endógeno u exógena.

Por ello se dice obtención a partir de alimentos (exógena) y a partir de la

biosíntesis del Novo (endógena).

La biosíntesis de Novo se refiere a la síntesis de moléculas complejas a

partir de moléculas simples como azúcares o aminoácidos, en contraposición al
reciclaje después de una degradación parcial.

El organismo es la fábrica que elabora la grasa, el exceso de carbohidratos es la

materia prima para que el cuerpo sintetice y de lugar a la formación de grasas
(ácidos grasos).

TRIGLICÉRIDOS
Se obtiene del perfil lipídico que el paciente realiza, su esqueleto madre es a
partir de 3 carbonos a los cuales se le unen 3 grupos acilos de allí su nombre de
triglicéridos o triacilgliceroles.

El valor normal de triglicéridos es no mayor a 150 mg/dL, ya que en exceso

se forman en las paredes de los vasos sanguíneos placas que evitan el correcto
transporte de la sangre.

Todos los alimentos de origen animal propician que en el organismo siempre hayan
triglicéridos.

El organismo puede tener los ácidos de fuente interna o externa que los sintetiza
y los almacena en forma de triglicéridos.
 LIPOGÉNESIS (BIOSÍNTESIS DE ÁCIDOS GRASOS) Y
OXIDACIÓN DE LAS GRASAS
En la oxidación de las grasas se utiliza el NAD además de que no se utiliza ni
hidrógeno ni fosfato en cambio en la lipogénesis si se necesitan de estos dos,
además de que hay presencia de un proceso redox ya que utiliza el NADPH y se
destaca la presencia de ATP, por ende son reacciones de mucha energía, se tiene
un grupo de diferentes enzimas (multienzimático) que es de mucha importancia,
que posee 14 enzimas, 7 en la cadena de arriba y 7 en la de abajo que nunca se
separan, que forman el complejo multienzimático, esta situación nunca se realiza
en la oxidación de las grasas.

La oxidación de las grasas se realiza en la mitocondria, o sea a nivel de

membranas mitocondriales (organelo celular), mientras que la
lipogénesis se realiza en el citosol (espacio celular), donde las
moléculas salen de la mitocondria y llegan a este.

La lipogénesis en cuanto a órganos o tejidos se realiza en el riñón, en las glándulas

mamarias, cerebro, hígado, tejido adiposo, y cabe destacar que este proceso
está activo cuando se tiene algún tipo de cáncer.

El hígado trabaja en casi trabaja en todos los procesos metabólicos, por ello hay
que cuidarlo, ya que es una fábrica que realiza de todo, sintetiza glucosa,
degrada glucosa, degrada grasa, forma grasa u otras funciones.

ESTRUCTURA DE UN ÁCIDO GRASO

Cuando se verifica que el organismo ya sintetizo
el ácido graso se va ubicar una cadena de 16
carbonos que corresponde al palmitato, sin
embargo, esto se refleja en el ejercicio en
cuanto al tejido adiposo, ya que se debe realizar
por lo menos 45 minutos de ejercicio para que la
grasa sea utilizada por el organismo y no se
pierda solamente agua.
El organismo necesita para realizar y dar inicio al proceso de biosíntesis de
ácidos grasos es un exceso de carbohidratos, cuando ingresan los carbohidratos
seguidamente inicia la glucólisis, sigue al ciclo de Krebs y en este se genera acetil
CoA, el exceso de carbohidrato antes mencionado dará origen a un exceso de
acetil CoA, por ende una parte del Acetil CoA seguirá el ciclo de Krebs y otra
parte saldrá de la mitocondria e ira al citosol para realizar el proceso de
lipogénesis para formar así los ácidos grasos.

En muchas literaturas se refieren a que la materia prima de la lipogénesis es una

fuente de dos carbonos, y el Acetil CoA los posee, pero aun así se tiene que
visualizar la diferencia entre este y el Acil CoA, con las siguientes estructuras.

Las dos poseen la misma estructura lo único que los diferencia es el grupo R, el
acil puede tener varios grupos R, de dos metilos en adelante en cambio el acetil
solo posee un metil nada más. (Está en círculo rojo)

¿EN QUÉ CONDICIONES METABÓLICAS SE SINTETIZAN LOS

ÁCIDOS GRASOS?
SON LOS SIGUIENTE PASOS
 Carbohidratos se digieren y son absorbidos, se refiere a que, al ingresar
los alimentos ricos en carbohidratos, estos entran en cadenas largas por
lo tanto es imposible que ingresen a torrente sanguíneo, y por medio de la
digestión ya se pueden absorber.
 Aumenta la glucosa en sangre
 Aumenta la insulina (hormona que trabaja en el aumento de glucosa en
sangre y asimismo activa la glucólisis, pero cuando ya hay mucha de esta
hay otra vía que apoya la glucogénesis para formar y almacenar
glucógeno. Pero si estas dos vías ya están abasto opta por la biosíntesis
de ácidos grasos o del Novo para formar los ácidos grasos
manteniendo así los niveles de glucosa en sangre)
  Aumenta la captación de glucosa por las células
 La glucosa ingresa a las vías metabólicas oxidativas (glucólisis, ciclo de
Krebs, Cadena Respiratoria), estimuladas por la presencia de insulina con
objetivo de generar ATP. Pero en un momento las concentraciones de
acetil CoA son altas y opta por la síntesis de Novo.
 Se generan concentraciones altas de Acetil CoA en la mitocondria y
es transformado en el citosol (en este lugar el Acetil CoA se encuentra
con una barrera en la mitocondria la cual debe atravesar para ello
existe la lanzadera de malato, que consiste en que algo sale y otra
cosa ingresa, en este caso malato y piruvato).

LANZADERA DE MALATO
MITOCONDRIA CITOSOL

Acetil CoA
Acetil CoA
Citrato Citrato

CITRATO LIASA
Oxalacetato
Se descarboxila

Oxalacetato

Malato

Piruvato Piruvato

Proviene de la
glucólisis

Sirve para llevar el acetil CoA al citosol, pero es complicado el traslado para ello
necesita de unas reacciones, a lo que se llama lanzadera de malato.

Tenemos lo siguiente:
El Acetil CoA reacciona con el Oxalacetato descarboxilándose para formar
citrato, este saldrá de la mitocondria y al mismo tiempo ingresará piruvato de
forma rítmica y constante, ya afuera el citrato, en el citosol, se detecta que no
es este el que se necesita así que por medio de la enzima CITRATO LIASA se
obtienen dos productos el acetil CoA y Oxalacetato, ahora el acetil CoA iniciara
el ciclo de Novo, en el citosol. Ahora bien, el Oxalacetato sigue reaccionando
para formar piruvato y continuar con la lanzadera. Es un proceso cíclico.

LA LANZADERA PERMITE EL RECLUTAMIENTO DE UNIDADES DE 2

CARBONOS DESDE LA MITOCONDRIA AL CITOPLASMA.

RECORDAR QUE EL ACETIL COA SOLO PUEDE REALIZAR LA BIOSÍNTESIS

DE ÁCIDOS GRASOS EN EL CITOSOL, SI SE ENCUENTRA EN LA
MITOCONDRIA REALIZARÁ OTROS COMO EL CICLO DE KREBS, CADENA
RESPIRATORIA Y FOSFORILACIÓN OXIDATIVA.

SÍNTESIS DE ÁCIDOS GRASOS

El principio clave es que se encuentre Acetil CoA, ya que a partir de el se dan las
siguientes dos etapas:

 Formación del precursor clave MALONIL COA (el cual regula el proceso
de síntesis de AG, esta corresponde a la primera fase de formación.)
 Elongación de la cadena (el organismo se centra en crecer la cadena hasta
llegar a 16 carbonos, y cuando llega a completar la cadena, a este
compuesto se le llama palmitato que posteriormente se almacenará
en forma de triglicéridos)

Se debe tomar en cuenta que, si se dice, la fase en la cual se regula el proceso

de síntesis de los ácidos grasos, la respuesta es la fase 1, en cambio sí
preguntan el precursor o molécula clave en la regulación del proceso de síntesis
de AG es el MALONIL COA.

RECUERDA; EL PROCESO SE INICIA CON MALONIL COA Y TERMINA EN

PALMITATO POR MEDIO DE DOS FASES.
 ENZIMA ACETIL COA CARBOXILASA
Esta enzima está involucrada en este proceso, esta necesita activarse, que
normalmente en el organismo se encuentra en unidades de 4 separadas por lo
tanto está inactiva pero cuando aparece el citrato o isocitrato, la cual
une a los polímeros de la enzima en forma de cadena ACTIVANDO LA ENZIMA.

Cabe destacar que la desfosforilación del citrato inhibe la actividad de la

enzima acetil coa carboxilasa mientras que su fosforilación la
activa.

FORMACIÓN DEL PRECURSOR CLAVE MALONIL COA

(ETAPA 1)
Se necesita la presencia de la vitamina
biotina, esta busca la enzima acetil
CoA carboxilasa denominándose como un
cofactor coenzima de la enzima, esta se
obtiene del salmón, huevos, almendras,
hígado, queso y coliflor, aunque hay otras
fuentes, se debe destacar la presencia de
bicarbonato cuya función es
proporcionar CO2 a la enzima y asimismo
la presencia de ATP porque son
reacciones de mucha energía.

DE ESTA REACCIÓN SE
OBTIENE EL MALONIL COA.
SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO
Acetil CoA +
Bicarbonato Acetil CoA Malonil CoA
carboxilasa +ADP + Pi
(HCO3-) + ATP
 ELONGACIÓN DE LA CADENA (ETAPA 2)
EL ACETIL COA ES EL SUSTRATO INMEDIATO Y EL PALMITATO LIBRE EL
PRODUCTO FINAL.
A B

D
C

e f

h
g

i  Las letras en morado corresponden a las dos unidades

polipeptídicas.
 Las flechas rojas son las partes que cambian con cada reacción.
Tomar en
cuenta
 Este proceso se realiza 7 veces en total contando la primera en donde se
forman 4 carbonos, para formar el palmitato compuesto por 16 carbonos.

RECUERDA LA LIPOGÉNESIS ESTA ACTIVA EN LA INGESTA EXCESIVA DE

ENERGÍA.

Tipo de
No. Sustrato Enzima Producto
reacción
Ácido grasa
1
Acetil
sintasa(Unidades A) + Unidades B Irreversible
transacilasa
Acetil CoA

2
Unidades B + Unidades Malonil
Unidades C Irreversible
H (CoA) + Malonil CoA transacilasa
Complejo 3-cetoacil-
3
Cetoacil Irreversible y
Unidades C enzima (Unidades D) +
Sintasa Descarboxilación
CO2
Complejo 3-cetoacil-

4
Cetoacil Irreversible y
enzima (Unidades D) + Unidades E + NADP+
reductasa redox
NADPH + H+

5
Irreversible y
Unidades E Hidratasa Unidades F + H2O
deshidratación
Complejo acil-saturado-
Unidades F + NADPH +
6
Irreversible y
+ Enoil reductasa enzima (Unidades G) +
H + redox
NADP

7
Complejo acil-saturado- Acetil
Unidades H Irreversible
enzima (Unidades G) Transacilasa
Unidades I (y al juntar
8 Unidades H Tioesterasa 16 Carbonos, es
palmitato)
Irreversible

Las unidades A, B, C, D, F, G, H, I, son solo denominaciones a las unidades

polipeptídicas 1 y 2 para resumir de mejor manera ya que de esas solo 3 tienen
nombre propio las otras no.
 COMPLEJO MULTIENZIMÁTICO

Las dos cadenas polipeptídicas que aparecen en la

reacción 1 de la elongación de la cadena
corresponden a este complejo multienzimático para
sintetizar ácidos grasos. Tiene la siguiente
estructura:

 Contiene 7 actividades enzimáticas.

 El ACP es una proteína portadora de grupos acilo, por lo tanto, no cuenta
como una enzima. Y por ello no entra en la clasificación de las 7 enzimas.
 Está colocada de cabeza a cola o de cola a cabeza.
 Este grupo siempre está unido y nunca se separa, no importa qué lado se
tome siempre se obtendrán 7 enzimas. Esta cadena tiene dos monómeros
cada monómero tiene 7 enzimas con un total de 14 enzimas o es un dímero
que consiste en 2 subunidades grandes.
 CARBOXILO SULFIDRILO METIL

SIEMPRE QUE hay procesos hipercalóricos con muchos carbohidratos y poca

grasa la síntesis de AG está activo, pero cuando las dietas o procesos no son
hipercalóricos la síntesis es baja, por ello se dice que es baja en el ayuno y la
inanición, ya que la prioridad es estos casos es formar glucosa, el cerebro lo
necesita primordialmente para llevar a cabo el control de todo, por ello el
organismo no está en condiciones para formar grasa.

El tejido adiposo tiene una reserva de hormonas que en lugar de estar inactivas
están realizando sus diferentes funciones, una de ellas, es que trabajan y
facilitan los procesos inflamatorios por ello es necesario que estas estén en
bajos niveles, o limitadas en cuanto a cantidad. Algunas de ellas son la leptina,
adiponeptina y resistina.

EN RESUMEN:
El tejido adiposo lejos de ser una reserva inerte de almacenamiento, es
hormonalmente activo, los adipocitos producen hormona como la leptina,
adiponeptina y resistina denominadas también adipocinas que desencadenan
procesos inflamatorios.
 LA OBESIDAD CLÍNICA
 La ingesta de energía excede en cuanto al gasto, con el tiempo el peso
aumentará
 La obesidad clínica se define en términos de peso y talla IMC.

El carbohidrato pasa a acetil COA y este a su vez sale de la mitocondria quiere

decir que hay exceso de carbohidratos y si no salen quiere decir que está a
niveles normales.

En la dieta se debe ingerir un 30% de grasas, un 15% de proteínas y de un 55%

a 60% de carbohidratos.

El exceso de ácidos grasos genera diabetes, síndrome metabólico,

coronariopatías, hipertensión (está comprobado que al bajar de peso disminuye
la presión arterial), trombosis, artritis y enfermedad biliar.

LA INGESTA ENERGÉTICA NO DEBE EXCEDER A SU GASTO.

EL TEJIDO ADIPOSO ES HORMONALMENTE ACTIVO Y PRODUCE

HORMONAS COMO CITOSINAS QUE SON PROINFLMATORIAS.
 EN ESTAS DOS ETAPAS
SE LOCALIZAN EN EL
CITOSOL.

Aquí se ubica la fase 2 de

la biosíntesis de ácidos
grasos, la elongación de la
cadena y se forma palmitato
Aquí se ubica la fase
1 de la biosíntesis de
ácidos grasos.
Formación del malonil
CoA

Aquí se ubica la
lanzadera de la
biosíntesis de ácidos
grasos. El acetil CoA
sale como citrato

La lanzadera es de vital importancia ya que sin ella no se podría realizar

correctamente, cumple la función de transportar el Acetil CoA hacia el citosol y si no
se realizara este proceso de síntesis no daría inicio.

En resumen, de importancia; transporte del Acetil CoA de la mitocondria al citosol.

 SINTESIS DE TRIGLICÉRIDOS
El ORGANISMO TIENE que tener alguna cantidad de triglicéridos porque es su
forma de producir fosfolípidos, ya que forma un tenso activo que les
permite a los alveolos no colapsarse y pueda llevar a cabo correspondientemente
la respiración, esta grasa permite que estos no se queden adheridos.
 DESDE EL HÍGADO

TIPO DE
No. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO
REACCIÓN
Glicerol-3-fosfato + Irreversible y
1 Glicerol + ATP Glicerol cinasa
ADP desfosforilación
Glicerol-3-fosfato +
2 ------- Ácido fosfatídico Irreversible
2 Acil CoA
Irreversible y
3 Ácido fosfatídico ------- Diacilglicerol + Pi
desfosforilación
Diacilglicerol + Acil Triacilglicerol
4 ------- Irreversible
CoA (triglicérido)
POSTERIORMENTE PUEDE SER SECRETADO VLDL POR EL HÍGADO.

DESDE EL TEJIDO ADIPOSO

TIPO DE
No. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO
REACCIÓN
Enzimas de la Dihidroxiacetona
0 Glucosa -------
glucólisis fosfato
P-glicerol-3- Irreversible y
Dihidroxiacetona Glicerol-3-fosfato +
fosfato Redox, COFACTOR
1 fosfato + NADH + H+ NAD+
deshidrogenasa COENZIMA NAD+
Glicerol-3-fosfato +
2 ------- Ácido fosfatídico Irreversible
2 Acil CoA
Irreversible y
3 Ácido fosfatídico ------- Diacilglicerol + Pi
desfosforilación
Diacilglicerol + Acil Triacilglicerol
4 ------- Irreversible
CoA (triglicérido)
POSTERIORMENTE PUEDE SER SECRETADO VLDL POR EL HÍGADO.
 BIOTINA (VITAMINA B7, B8, H)
La biotina es una vitamina hidrosoluble del complejo B muy presente en la
naturaleza. El cuerpo solo puede absorber de forma parcial la biotina que
produce.

La biotina, también conocida como vitamina B, o vitamina H, es una vitamina

hidrosoluble del complejo B.

Juega un papel muy importante en varias reacciones metabólicas enzimáticas,

así como en los núcleos celulares para la regulación de la función genética.

La mayoría de las bacterias y muchas especies de hongos y vegetales pueden

sintetizar biotina. Como consecuencia, la vitamina está muy presente en la
naturaleza. La biotina se encuentra en muchos alimentos, pero en
concentraciones muy bajas.

Las principales fuentes son los cereales integrales, las legumbres y algunas
verduras y frutas como las semillas de soja (60ug/100 g), los copos de avena
(20) los guisantes (19), las espinacas (9,5), la harina integre! (8,3), los plátanos
(5.5) y las endivias (4.8).

Almacenamiento y pérdidas durante la cocción:

Mientras que la biotina presenta una elevada estabilidad frente al oxígeno y el
calor, es sensible a la luz ultravioleta.

Absorción y metabolismo:
No se sabe mucho sobre el metabolismo. La biotina de los alimentos aparece en
forma libre o unida a proteínas formando la biocitina. Después de la división por
la enzima biotinidasa, el cuerpo absorbe la biotina libre en el intestino delgado
superior. En el organismo humano, las bacterias del colon son capaces de
sintetizar la biotina. No se conoce ni la magnitud de la síntesis endógena enteral
ni su importancia en el metabolismo de la biotina. Dado que la parte superior del
intestino delgado absorbe la mayor parte de la vitamina, el cuerpo no puede
asimilar la biotina producida microbianamente y gran parte se pierde en las
heces.

Debido a la unión a una matriz de proteína, la biodisponibilidad de biotina a partir

de diferentes fuentes es muy diferente. Se sabe, par ejemplo, que solo un 5 %
del total de la biotina presente en el trigo está disponible para el cuerpo y en el
caso de las semillas de remolacha, un 62 %. El porcentaje de absorción medio a
partir de los alimentos es de un 50 % aproximadamente.

Almacenamiento, consumo y pérdidas:

Un sistema de reciclaje endógeno puede volver a fabricar biotina de las enzimas.
Se excreta por la orina en forma libre o como un metabolito hasta ahora
desconocido. Tanto la biotina como la biocitina terminan en la orina. Además, la
cadena lateral de la biotina puede sufrir beta oxidación.

Los productos de descomposición formados de este modo no son biológicamente

activos y los riñones los eliminan a través de la orina. Debido a la biosíntesis
microbiana de la biotina en el intestino grueso, la cantidad de biotina eliminada
mediante la orina y las heces es superior a la cantidad que aporta la comida.

Cantidad diaria necesaria a largo plazo:

La Sociedad Alemana de Nutrición recomienda una ingesta estimada de entre 30
y 60 ug al día en adultos sanos. Durante el embarazo y la lactancia se recomienda
la misma cantidad y en lactantes entre 5 y 10 ug al día.

Las necesidades diarias concretas se desconocen, puesto que no existen

suficientes estudios significativos. La cantidad estimada para bebés está basada
en el contenido de biotina promedio de la leche materna y la ingesta diaria de
líquidos.

Síntomas de deficiencia y causas:

Está demostrado que una falta de biotina puede provocar dermatitis en forma
de erupciones en la piel o caída del cabello. Los niños que tienen una deficiencia
congénita de biotinidasa no pueden asimilar la biotina que aportan los alimentos
en forma de biotina compuesta.
Consumo excesivo:
No se conoce una ingesta excesiva.

Funciones:
La acción bioquímica de la biotina se debe a su función como coenzima de
carboxilasas (enlace en alemán). Para ello la biotina se une con un resto de lisina
de la enzima.

 La piruvato carboxilasa, una enzima esencial de la gluconeogénesis, que

convierte el piruvato en un metabolito del ciclo de Krebs
 La Acetil-coa carboxilasa, que aporta el malonil-coa para la etapa inicial
de la biosíntesis de los policétidos y los ácidos grasos;
 La propionil-coa carboxilasa, que es necesaria para la degradación de los
aminoácidos valina, isoleucina, metionina y treonina, y de los ácidos grasos
de cadena impar y ramificados;
 La metilcrotonil-coa carboxilasa, fundamental para la degradación del
aminoácido leucina.

La biotina también cumple funciones en el núcleo celular, donde puede

modificar la histona.

Estructuras:

Está compuesta de un anillo ureido (imidazolínico) fusionado con un anillo

tetrahidrotiofeno. Un ácido valérico sustituto se une a uno de los átomos de
carbono del anillo tetrahidrotiofeno. Hay tres formas de biotina: biotina libre,
biocitina (e-biotina-L-Lisina) y dos sulfóxidos L y D de la biotina. Sin embargo,
la D-biotina natural es la única que tiene actividad biológica completa.

ORGANIZADO POR:
Javier G.
INFORMACIÓN OBTENIDA DEL CURSO DE BIOQUIMICA POR LICDA.
MÓNICA ARANGO, SEGUNDO AÑO 2022, CARRERA DE MÉDICO Y
CIRUJANO, FACULTAD DE MEDICINA, CUNOC, USAC,

BIBLIOGRAFÍA
1. Baynes jw, Dominiczak Mh. Bioquímica Médica. 5ª. Ed. Barcelona:
Elsevier;2015
2. Base de datos de nutrientes de la Universidad de Hohenheim.
3. Elmadfa |. y Meyer A. Ernáhrungslehre (editorial Eugen Ulmer, Stuttgart,
3a edición, 2015).
4. Elmadfía |. y Leitzmann C. Ernáhrung des Menschen (editorial Eugen
Ulmer, Stuttgart, 5a edición, 2015).
5. Biesalski H.K. y Grimm P. Taschenatlas der Ernahrung (editorial Georg
Thieme, Stuttgart y Nueva York, 6a edición, 2015).
6. Kasper H. y Burghardt W. Ermnáhrungsmedizin und Diátetik (editorial
Urban 8 Fischer, Múnich, 11? edición, 2009).
7. Zimmermann M, Schurgast H. y Burgerstein U.P. Burgersteins Handbuch
Náhrstoffe (editorial Karl F. Haug, Heidelberg, 9 a edición, 2000).
8. Wikipedia: biotina (estructuras)

Javier G.
 SEMANA 13-14

Cuando nuestro organismo detecta que los aminoácidos están en exceso, el

organismo tiende a utilizar un proceso, que se conoce como el catabolismo
y se realiza a nivel de hígado y eliminado a nivel renal.

Los aminoácidos se encuentran principalmente en la dieta es importante

resaltar que nuestro organismo es animal por lo tanto no tiene la misma
afinidad para absorber proteínas vegetales que las proteínas animales.

En pacientes que son vegetarianos, se tiene que cuidar que no solo consuman
aminoácidos de origen vegetal sino también varias vitaminas que van a apoyar
al proceso de aprovechamiento de estas moléculas proteicas de origen
vegetal.

Algunos alimentos de origen animal que contienen aminoácidos son el queso,

leche, carne, mariscos y huevos en estos vamos a encontrar aminoácidos como
metionina, triptófano, treonina, lisina, fenilalanina, valina e isoleucina que son
los que forman los tejidos, están unidos en péptidos y luego dipéptidos y
polipéptidos.

Si el consumo es adecuado, el organismo lo utiliza en el recambio diario, que

quiere decir que los aminoácidos ya utilizados en el organismo son
reemplazados con los nuevos que acaban de ser ingeridos. Cuando hay un
exceso significa que el organismo se centrara un poco más en el proceso
catabólico y tiene que eliminar esos aminoácidos que ya no se están utilizando,
y por ende entra al ciclo de la urea, en algunos casos noes que se tenga un
exceso, ya que el organismo está en constante recambio por ende siempre se
elimina una cantidad de aminoácidos.
El OH terminal del lado izquierdo es siempre constante, siempre se
encuentra en todos los aminoácidos, sin
embargo, en algunas estructuras este solo
se identifica con una línea, seguidamente
hay un carbono unido a un oxígeno que
corresponde al carbón o carboncillo,
este también es constante, es el mismo en
todos los aminoácidos, eso no varía.

El siguiente carbono, es denominado como

carbono Alfa, la importancia de este
carbono es que a él se le une el nitrógeno
(la molécula que está en el extremo
izquierdo), que forma el grupo amino,
luego también a ese carbono se unen unas estructuras que se conocen como
el grupo R (VARIA EN TODOS LOS AMINOACIDOS).

CHO: carbohidratos
CHON: proteínas
La diferencia entre el carbohidrato y la proteína es que el primero no tiene
nitrógeno, en la proteína si hay nitrógeno.
Las dos estructuras secundarias de los aminoácidos, es lámina plegada beta y
hélice alfa.

Los aminoácidos dentro de nuestro

organismo cumplen con diversas
funciones como en sustancias además
de procesos catabólicos. Y con ello una
funcionalidad estructural en péptidos
y proteínas.

El organismo tiene que invertir energía

para cambiar el grupo R a cada grupo
nitro.

Las proteínas sirven también para

formar los neurotransmisores y asimismo tienen una función importante al
formar hormonas y enzimas.

Las estructuras cuadradas lilas identifican

los diferentes grupos R y dependiendo del
grupo R va ser el tipo de aminoácido.

El círculo rojo en donde circula el oxígeno,

que corresponde al carbono carboxilo
también de los diferentes aminoácidos, el
grupo Nitro en color Rosado salmón, en
donde se encuentran los diferentes grupos
nitros de los diferentes aminoácidos.
Cuando nuestro organismo ya no tiene glucosa y han pasado más de 12 horas,
el músculo, en donde hay aminoácidos. se desintegran.

PARA QUE EL CUERPO ENTRE EN LA GLUCONEOGÉNESIS.

Los aminoácidos que salieron del músculo van entrar a nivel del ciclo de
Krebs.

Los cuadros de color Salmon están identificando los aminoácidos por grupo y
en qué punto del ciclo de Krebs ingresan. Son pocos los aminoácidos que
pueden entrar en dos puertas o puntos diferentes del ciclo de Krebs uno de
ellos es la fenilalanina.

Cuando la glucosa esta baja, el principal objetivo del cuerpo es que los
aminoácidos ingresen al ciclo de Krebs y nos formen la glucosa, que entra en
la glucólisis y nos forma la energía (ATP).

A diferencias de CHO y lípidos, las proteínas NO TIENEN FORMA

DEDICADA AL ALMACENAMIENTO COMO EL GLUCÓGENO O LA GRASA,
cuando se metabolizan en exceso estás deben excretarse. El organismo no
tiene un mecanismo para poder almacenarlos.

De algunos aminoácidos prosiguen 3 cuerpos cetónicos que son:

 El acetoacetato es el primero que se origina durante el metabolismo

de las grasas.
 El beta-hidroxibutirato se crea a partir del acetoacetato.
 La acetona es un producto que se forma espontáneamente a partir
del acetoacetato.

Este tipo de aminoácidos se conocen como aminoácidos cetogénicos,

pero cuando forman glucosa decimos aminoácidos glicogénicos o
gluconeogénicos.
Los aminoácidos pueden ser glucogénicos, cetogénicos o ambos. Los
glucogénicos son los que generan piruvato o intermediarios del ciclo de
Krebs como α-cetoglutarato o oxaloacetato, mientras que los cetogénicos
generan sólo acetil-CoA o acetoacetil-CoA. y sulfato como productos finales.

De los 20 aminoácidos, sólo dos, la leucina y la lisina, son exclusivamente

cetogénicos. Varios aminoácidos son tanto cetogénicos como glucogénicos;
dos ejemplos, son la fenilalanina y el triptofano.

La Fenilalanina y tirosina son glucogénicos y cetogénicos, pues su catabolismo

produce acetoacetato y fumarato.
El triptofano es también glucogénico y cetogénico, pues su catabolismo da
alanina, aminoácido glucogénico, y acetoacetato.

En resumen…
Un aminoácido cetogénico es un aminoácido que puede degradarse
directamente en acetil-CoA , que es el precursor de los cuerpos cetónicos y
la mielina , particularmente durante la primera infancia, cuando el cerebro en
desarrollo requiere altas tasas de síntesis de mielina. Esto contrasta con los
aminoácidos glucogénicos, que se convierten en glucosa. Los
aminoácidos cetogénicos no pueden convertirse en glucosa, ya que ambos
átomos de carbono en el cuerpo cetónico se degradan finalmente a dióxido de
carbono en el ciclo del ácido cítrico.

 Cinco más son cetogénicos y glucogénicos: fenilalanina, isoleucina,

treonina, triptófano y tirosina.
 Los trece restantes son exclusivamente glucogénicos.

Los aminoácidos cetogénicos cumplen funciones importantes en el cuerpo

humano, lo que lleva al estudio de dietas ricas en aminoácidos cetogénicos
(KAAR) como posible tratamiento para la enfermedad del hígado graso no
alcohólico (NAFLD) y la diabetes.

Para el proceso catabólico los aminoácidos pueden entrar de

dos fuentes: la primera los alimentos y luego por la
degradación de los tejidos a nivel de la gluconeogénesis.
Nuestro organismo tiene un mecanismo para guardar los carbohidratos que
detectan en exceso de carbohidratos, pero no tiene un mecanismo para poder
guardar aminoácidos. Sino los usamos el organismo los elimina y es aquí donde
involucramos a este proceso, el ciclo de la urea.

QUÉ ES EL CICLO DE LA UREA.

Cuando el grupo Nitro se desprende de los aminoácidos y sale en forma de
amonio o de amoníaco, esta molécula es sumamente tóxica para nuestro
organismo y lo que ocurre es que en nuestro cerebro, está la barrera
hematoencefálica y este amonio, si tiene la facilidad de atravesar esa barrera
hematoencefálica, entonces va a generar procesos de intoxicación a nivel del
cerebro y es donde se complica completamente el buen funcionamiento de
nuestro organismo, para evitar eso nuestro organismo captura el amonio y lo
manda al ciclo de la urea.

Cuando ya está como urea lo eliminamos por los riñones, derivado a que el
organismo no tiene un mecanismo para almacenar los aminoácidos en exceso.

Ahora bien, el organismo siempre eliminara EL GRUPO NITRO DE los

aminoácidos como en el caso de la serina cuyo grupo R es CH2 OH, el organismo
para quitar el grupo nitro a la serina, realiza tres procesos importantes antes
de entrar al ciclo de la urea. Estos son:

 la transaminación: la transferencia del grupo amino a otra molécula.

 desaminación oxidativa: eliminar el grupo amino por medio de un
proceso redox, obteniendo el grupo nitro.
 eliminación de las moléculas de agua por las deshidratasas.

TRANSAMINACIÓN
 SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO
Alfa-aminoácido Alfa-cetoácido
(depende del (depende del tipo de
Transaminasa (depende del
aminoácido) + alfa- aminoácido) +
aminoácido)
cetoglutarato glutamato

EJEMPLOS
Alanina+ alfa- Piruvato + glutamato
Alanina aminotransferasa
cetoglutarato
Aspartato + alfa- Oxaloacetato +
Aspartato aminotransferasa
cetoglutarato glutamato
Tirosina (o fenil- Ácido p-hidroxi-fenil-
alanina) + alfa- Tirosina transaminasa pirúvico (ác. Fenil
cetoglutarato pirúvico) + glutamato

DESAMINACIÓN
 La enzima que trabaja en esta reacción se conoce como glutamato
deshidrogenasa, que tiene cofactor coenzima que es la vitamina B3 en su
forma inactiva, el amonio (NH4) reacciona con el agua y se convierte en
amoniaco (NH3), esta es una molécula sumamente tóxica para nuestro
cerebro y por eso inmediatamente el hígado lo capta y empieza el ciclo de la
urea.

Pero si el hígado tiene problemas en el hígado está inflamado, el hígado está

dañado, entonces este amoníaco se va a la Barrera hematoencefálica Y
entonces empiezas a complicar el cerebro.

SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO

Alfa-cetoglutarato
Glutamato + H2O + Glutamato
+ NADH + H +
NAD+ deshidrogenasa
AMONIO (NH4)
 El órgano en el que se realiza el ciclo de la urea es en el HIGADO.

En las células hepáticas el ciclo de la urea se realiza en la mitocondria y

en el citosol.
Los dos espacios de la célula hepática: mitocondria y citosol tienen
específicamente distribuidas las reacciones de la siguiente manera:

La 1ra reacción se da en la mitocondria.

la 2da comienza en la mitocondria, pero termina en el citosol.
La reacción 3 y 4 se dan solo en el citosol.

la reacción 5 comienza en el citosol, pero por una molécula entra

nuevamente a la mitocondria.

COFACTOR
TIPO DE
NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO O
REACCIÓN
COENZIMA
Carbamoil Irreversible Cofactor
CO2 + NH4 + H2O Carbamoil
1 + 2 ATP fosfato sintasa I
fosfato + Pi + 2 Desfosforilación activador :
ADP Hidratación Mg+2
Carbamoil Ornitina
2 fosfato + carbamoil Citrulina Irreversible NA
L-Ornitina transferasa
L-Citrulina + Cofactor
Argininosuccinato Argininosuccinato Irreversible
3 L-aspartato +
sintetasa + AMP + PPi (2Pi) Desfosforilación
activador:
ATP Mg+2
Argininosuccinato Arginina +
4 Argininosuccinato
liasa Fumarato
Irreversible NA

Irreversible
5 L-Arginina + H2O Arginasa Urea + L-Ornitina
Hidratación
NA

cuando el amonio(NH4) reacciona con el agua se convierte

en amoníaco (NH3), es la razón por la que nos indica que entra el amonio a la
mitocondria y se une a la molécula de agua y al reaccionar se va a convertir
en amoníaco.

En la reacción 4 el fumarato como producto se dirige a la vía metabólica del

ciclo de Krebs en el sitio celular u organelo celular denominada
mitocondria.
En la reacción 5 la urea que se va al riñón para ser eliminada y genera
L-ornitina que entra a la mitocondria para esperar otro producto de la
reacción 1.

Al finalizar las reacciones podemos sacar las muestras a nivel del plasma y
podemos identificar en el tubo de ensayo la UREA.

Si el organismo no trabaja en todo lo anterior y hay una enzima que está

deficiente o algo que se bloqueó, yo no voy a llegar a tener suficiente urea,
no va a reaccionar correctamente en el laboratorio Y entonces los valores
pueden ser bajos. Es necesario saber cuáles son los valores normales.
 ¿QUÉ PASA CUANDO HAY DEFICIENCIA DE ALGUNAS
ENZIMAS?
Cuando Hay deficiencia de estas enzimas o lo que tiende a suceder en el
organismo es que el amonio o el amoníaco se eleva.

Es importante destacar no solo si el amonio o amoniaco esta elevado, sino

también los sustratos o los productos se encuentran elevados.

El nitrógeno entra al cuerpo con los alimentos de tipo proteína como la

leche, carne y huevos, y sale por medio de las heces fecales como también
la orina y una prueba más que es la transpiración (que se expone por
medio del sudor lo cual podemos probar de manera sencilla al oler la ropa
sucia).

El balance de nitrógeno en equilibrio, ocurre especialmente en los adultos

que la misma cantidad que ingresamos es la misma cantidad que eliminamos
porque el organismo ya no lo utiliza para formar otros tejidos adicionales
como en el caso del embarazo que si se necesita formar tejido.

El balance es positivo cuando

cantidad especialmente en mujeres embarazadas que

formar los nuevos tejidos del bebe. Y el balance es negativo

que se da por el proceso de recambios, en pocas palabras

introducimos poca cantidad o casi nada de nitrógeno o aminoácidos y sale una
cantidad normal o grande.
 ENFERMEDAD DE PARKINSON

Se relaciona principalmente con fenil-alanina un compuesto que al actuar con

la enzima fenil-alanina-hidroxilasa se convierte en tirosina, está tirosina se
hidroxila para forma L-dopa y seguidamente se puede descarboxilar para
formar dopamina, si esta tirosina no se necesita sigue el ciclo y se transamina
en Acido p-hidroxifenil pirúvico, si esta enzima fenil-alanina-hidroxilasa no
se presenta puede dar origen a una transaminación por parte del fenil-alanina,
en presencia de la enzima denominada tirosina transaminasa, obteniendo
glutamato y Ácido fenil pirúvico.

En otras palabras, La fenilalanina se encuentra en la mayoría de alimentos y

es considerado uno de los aminoácidos “esenciales” para el hombre porque
debe estar presente en su dieta ya que no puede ser elaborada a partir de
otros compuestos. Es necesaria para la síntesis de neurotransmisores,
tirosina y otras sustancias.

La fenil-alanina contenida en nuestros alimentos, es convertida en tirosina

por acción de la “fenil-alanina-hidroxilasa” una enzima que introduce un –OH
en posición “para”. Luego, la “tirosina-transaminasa” (otra enzima) convierte
su grupo –NH2 en C=O (“transaminación”) transformándola en el ácido p-
hidroxi-fenil-pirúvico, que continúa el metabolismo.

En las personas con Parkinson, normalmente se le administran L-Dopa para

propiciar la producción de dopamina, que como se sabe está en disminución
por la muerte de sus células productoras, los monoaminooxidasas están
presentes y se encargan de la desaminación oxidativa y degradación de la
dopamina, por ello según las reacciones se puede deducir que estas
monoaminooxidasas degradan el glutamato en tirosina, y como no hay fuentes
de dopamina por parte de las células productoras, cada vez hay más tirosina
que dopamina y el cuerpo lo transaminará por la acción de la tirosina
transaminasa del cual se obtiene ácido p-hidroxifenil pirúvico y glutamato, en
donde el glutamato ingresa a la desaminación para obtener el amonio, y las
monaminooxidasas lo incrementan, ingresando grandes cantidades de este en
el cerebro, que como se sabe es muy tóxico para este, lo cual progresa y las
cantidades de dopamina decaen.

HIPERAMONIEMIA HEREDITARIA

En el caso se presenta aumento de los niveles de amoniaco (reacción de amonio

y agua) en sangre que por si es muy tóxico al igual que el aumento de las
concentraciones del glutamina y asimismo disminución de las cantidades de
citrulina además de ello se presenta en la orina el orotato un precursor del
nucleótido pirimidina. Posterior a ello se indica que la actividad de la ornitina
transcarboilasa o ornitina carbamoil transferasa, esta disminuida.

La hiperamoniemia hereditaria se basa principalmente en dos efectos;

1. Aumento en la producción de amonio, ya sea por;

a) Hemorragia digestiva
b) Uso de corticosteroides
c) Trauma
d) Nutrición parenteral total
e) Infecciones por microorganismos degradadores de ureasa
f) Mieloma múltiple

2. Disminución en la eliminación de amonio, ya sea por;

a) Insuficiencia hepática fulminante

b) Cortocircuitos porto-sistémicos
c) Fármacos: dentro de los que destacan salicilatos, glicina, valproato,
carbamacepina, ribavirina y pirimetamina
d) Errores innatos del metabolismo: dentro de las que se encuentran
deficiencia de ornitin transcarbamilasa, deficiencia de la síntesis de
carbamil, acidurias orgánicas, alteraciones de la oxidación de ácidos
grasos.

Con ello se obtiene que lo siguiente;

Las neuronas metabolizan la glutamina a glutamato, neurotransmisor que

activa los receptores N-metil D-aspartato. Posterior a su liberación sináptica,
el glutamato es reciclado por los astrocitos a glutamina por la acción de la
glutamina sistetasa.

Cuando los niveles de amonio se elevan de forma aguda en el cerebro, la

conducción de los astrocitos y de las neuronas se afecta. Los astrocitos
metabolizan el amonio a glutamina (lo que explica el aumento de glutamina
correspondiente al aumento de amonio) para poder regular las cantidades de
amonio que por si son tóxicos y asimismo regular la cantidad de glutamato que
en concentraciones aumentadas provocan la muerte neuronal por
neurotoxicidad, como consecuencia se presenta elevación de la osmolaridad
intracelular que causa edema y pérdida de los astrocitos liberando citocinas
inflamatorias como factor de necrosis tumoral alfa. En los astrocitos
remanentes se presenta inhibición de la deshidrogenasa alfa cetoglutarato,
mediada por amonio y depleción del ácido carboxílico necesarios para la
síntesis de la glutamina causando por consiguiente parálisis del ciclo de Krebs.
Asimismo, se tiene que la actividad de la ornitina carbamoil transferasa está
en el 10% de su actividad normal, reduciendo así la actividad, disminuyendo
las cantidades de citrulina por la reacción entre ornitina y carbamoil fosfato.
Debido a ello, las concentraciones de amonio y glutamina hacen al cuerpo optar
por otras vías, así entra en vigencia la biosíntesis del orotato, para que este
sea excretado a partir de la orina, por medio de la reacción de glutamina,
dióxido de carbono y agua que en la reacción siguiente se presenta como
bicarbonato (H2O + CO2 HCO3-) con la acción de la enzima Carbamoil
Fosfato Sintetasa Tipo II .

En cualquier caso, la síntesis excesiva de pirimidinas a partir de carbamoil

fosfato mitocondrial es abortiva ya que resulta en la acumulación de orotato,
que escapa a la orina, donde aparece a elevada concentración en estos déficits
congénitos de ornitina transcarbamilasa.

BIOSÍNTESIS DEL ANILLO DE OROTATO

Reacción 1. El Dióxido de Carbono es convertido a Carbamoil Fosfato por

la incorporación de un grupo amino proveniente de una Glutamina, en una
reacción que requiere dos moléculas de ATP y es catalizada por la
enzima Carbamoil Fosfato Sintetasa Tipo II, cabe mencionar que la
formación de Carbamoil Fosfato es parecida a la que se forma en la
mitocondría durante el Ciclo de la Urea y ambas enzimas son similares, solo
que la Carbamoil Fosfato Sintetasa Tipo II utiliza Glutamina como donador
del grupo amino mientras que la enzima del Ciclo de la Urea (Carbamoil
Fosfato Sintetasa Tipo I) usa amonio (NH4+). Otra diferencia importante
entre ambas enzimas es que la Tipo I se encuentra en mitocondria mientras
que la Tipo II es citoplasmática.
Reacción 2. El Carbamoil Fosfato reacciona con el aminoácido aspartato
para formar Carbamoil Aspartato. Esta reacción es catalizada por la
enzima Aspartato Transcarbamoilasa.

Reacción 3. El Carbamoil Aspartato pierde una molécula de agua y se

favorece su ciclización. La reacción es catalizada por la enzima Dihidro-
Orotasa y se forma Ácido Dihidro-Orótico. Este ácido se ionizará en solución
a Dihidro-orotato.

Reacción 4. Este compuesto es oxidado por la enzima Orotato

Reductasa para original al Orotato, y este es secretado en la orina.

El paciente es tratado con arginina, fenilacetato y benzoato para que realicen

lo siguiente;

El fenilacetato se conjuga con glutamina en hígado y riñón, para formar

fenilacetilglutamina, que se excreta en la orina. La fenilacetilglutamina es una
molécula que contiene 2 moles de nitrógeno por mol de base y por tanto
constituye un vehículo alternativo para la excreción de nitrógeno.

El benzoato se conjuga con glicina para formar ácido hipúrico, el cual es

excretado por el riñón. La fenilglutamina y el ácido hipúrico son vehículos que
reducen los niveles de nitrógeno en pacientes con deficiencias de enzimas del
ciclo de la urea y atenúan el riesgo de neurotoxicidad inducida por amonio y
glutamina.

Se preside el tratamiento con arginina para promover la producción de la urea

para que sea excretada y asimismo se obtenga cantidades mayores de
ornitina, y asi reaccione con el carbamoil fosfato, y se reduzcan las
cantidades de amonio y aumenten las cantidades de citrulina y, asimismo las
cantidades excretadas orotato se reduzcan, ya que el ciclo de la urea esta en
correcto funcionamiento.

La urea puede eliminarse en la orina donde ayuda a regular la osmolaridad.

Arginina se vuelve esencial durante el crecimiento.

El amoníaco se hace especialmente tóxico para el cerebro por diferentes

motivos:

 Bloqueo del ciclo de Krebs. El amonio, en presencia de alfa-

acetoglutarato, produce glutamato (GLU), retira dicho intermediario
del ciclo de Krebs y, en consecuencia, origina una grave interferencia
metabólica
 El amonio, en presencia del glutamato (generado por el mismo ion
amonio), produce glutamina y su acumulo puede causar edema cerebral.
 La glutamina, que ha aumentado por el amonio, a través de
determinadas transaminasas, origina alfa-cetoglutamico, un compuesto
toxico para el cerebro.

HISTAMINA, ANTIHISTAMINICOS Y ALERGIA

La histamina es una molécula de señalización, que envía señales entre

células. Le dice al estómago que produzca ácido estomacal. También ayuda a
su cerebro a mantenerse despierto. La histamina también funciona con
nuestro sistema inmunitario.
Nos ayuda a protegernos de invasores. Cuando el sistema inmunitario
descubre un invasor, unas células llamadas células B producen anticuerpos
IgE. Los IgE son como señales de “BUSCADO” que se extienden a través del
cuerpo, advirtiéndoles a otras células del sistema inmunitario a qué invasores
buscar.

Las acciones de la histamina son geniales para protegernos contra parásitos.

Pero en la alergia, el sistema inmunitario reacciona de manera exagerada a

sustancias inofensivas, no parásitos. Es ahora cuando la histamina se
convierte en nuestro enemigo. Alérgenos comunes incluyen maní, polen y caspa
de animal.

Los vasos sanguíneos permeables causan lagrimeo, congestión nasal e

hinchazón… en todos lados. La histamina funciona con los nervios que producen
picazón. En el caso de la alergia a los alimentos, produce vómitos y diarrea.
También hace que los músculos en los pulmones se contraigan, dificultando la
respiración.

Lo más preocupante es cuando la histamina causa anafilaxis, una reacción

grave que puede ser fatal. Las vías respiratorias hinchadas pueden dificultar
la respiración y una caída rápida de la presión arterial puede impedir que la
sangre llegue a los órganos.

"La histamina es una sustancia presente en todo el organismo y que interviene

en los procesos de hipersensibilidad, en la forma en la que el organismo
reacciona ante una amenaza y desencadena una respuesta".

En el caso de la alergia, se trata de un mecanismo inmune que se activa frente

a agentes dañinos: manifestaciones que varían en intensidad con síntomas que
van desde leves hasta el choque anafiláctico. Uno de los mecanismos que
desencadena esta alerta es la descarga de sustancias, como la histamina, que
ayuda a prevenir el daño que pueden ocasionar esos alérgenos. Los
antihistamínicos son fármacos que actúan sobre la desgranulación de los
mastocitos e impiden la liberación de histamina o impiden que la histamina
actúe sobre sus receptores en el sistema nervioso central.

Existen cuatro tipos de receptores de histamina, H1, H2, H3 y H4, aunque

formalmente se reconoce como antihistamínico al antagonista de los
receptores H1 (relacionados con la rinitis y con la dermatitis alérgica) y H2
(que actúa sobre la secreción de ácido clorhídrico). Los antihistamínicos
suelen dirigirse al receptor tipo 1 (H1) que está asociado al efecto
vasodilatador y con la somnolencia, de ahí que algunos antihistamínicos se
empleen como inductores del sueño.

Los antagonistas del receptor H2 se utilizan en la clínica para reducir la

secreción de ácido gástrico en el tratamiento del paciente con enfermedad
ácido péptica. Hasta el momento no existen antagonistas del receptor H3 y
H4 para uso clínico

CUANDO UN ANTIHISTAMÍNICO ESTÁ DIRIGIDO A BLOQUEAR LA

PRODUCCIÓN DE HISTAMINA SUSCEDE LO SIGUIENTE.

Como se sabe la Histamina se obtiene de la descarboxilación de la histidina

por medio de la enzima histidina descarboxilasa. Por ende, se deduce que
algunos antihistamínicos en lugar de bloquear los receptores, inhiben la acción
de esta reacción por medio de la enzima histidina descarboxilasa, y asimismo
la histamina ingresa a la transaminación junto con el alfa-cetoglutarato para
formar glutamato y asimismo ingresar a la desaminación e ingresar al ciclo de
la urea.
 REALIZADO POR:
Dani. G. y Javier G.

BIBLIOGRAFÍA
1. Agenda Química Virtual, Perfil VT mi. PERIPECIAS DE LA
FENILALANINA [Internet]. Blogspot.com. [citado el 25 de junio de
2022]. Disponible en:
http://agendaquimica.blogspot.com/2012/09/peripecias-de-la-
fenilalanina.html
2. uDocz. Ciclo de la urea. uDocz [Internet]. 2021 [citado el 25 de junio
de 2022]; Disponible en:
https://www.udocz.com/apuntes/219048/ciclo-de-la-urea
3. Fenilacetato sódico y benzoato sódico [Internet]. Aeped.es. [citado el
25 de junio de 2022]. Disponible en: https://www.aeped.es/comite-
medicamentos/pediamecum/fenilacetato-sodico-y-benzoato-sodico
4. De Revisión A, Carrillo Esper R, Fernanda M, Iriondo N, Sánchez García
R, Resumen R. Amonio e hiperamonemia. Su significado clínico
[Internet]. Medigraphic.com. [citado el 25 de junio de
2022]. Disponible en:
https://www.medigraphic.com/pdfs/medsur/ms-2008/ms083f.pdf

INFORMACIÓN OBTENIDA DEL CURSO DE BIOQUÍMICA, DE LICDA.

MÓNICA ARANGO, SEGUNDO AÑO 2022, CARRERA DE MÉDICO Y
CIRUJANO, FACULTAD DE MEDICINA, CUNOC, USAC.

Javier G y Dani G.
Universidad de San Carlos de Guatemala
Centro Universitario de Occidente Lic. Antony Cifuentes
División de Ciencias de la Salud Laboratorio de Bioquímica
Carrera de Médico y Cirujano 2022
Segundo Año

DETERMINIACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO Y NITROGENO DE UREA

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO

En el catabolismo de los ácidos nucleicos, las bases purínicas liberadas por hidrólisis de sus
nucleótidos son parcialmente reutilizadas en el proceso de síntesis metabólica, pero sufren en parte
un proceso de oxidación a ácido úrico pasando por la formación de xantina (2,6-dioxipurina). En la
mayoría de los mamíferos el ácido úrico (sustancia muy poco hidrosoluble) prosigue su degradación
catabólica dando lugar a la alantoína, compuesto de excelente solubilidad que es rápidamente
excretado por vía renal. En el hombre y en los antropoides falta la enzima necesaria para este último
paso catabólico, la uricasa, y en consecuencia se elimina el ácido úrico como producto final del
metabolismo de las purinas.
La solubilidad máxima del ácido úrico en plasma sería de unos 8.5 a 8.8 mg/dl, y a un pH de
7.4 aproximadamente el 98% del ácido úrico total se encuentra bajo su forma de sal monoalcalina.
También se encuentra presente en los hematíes, y en condiciones de equilibrio su concentración
eritrocitaria es aproximadamente la mitad de la plasmática.

Debido a su muy mala solubilidad en los líquidos orgánicos, el ácido úrico es un catabolito
potencialmente peligroso capaz de conducir a la constitución de formaciones cristalinas. El adulto
medio tiene un contenido total aproximado de 1.2 g de ácido úrico en el cuerpo, lo cual puede
considerarse una reserva miscible con un recambio alto. El ácido úrico de esta reserva procede de
tres orígenes: 1) catabolismo de purinas endógenas, 2) catabolismo de purinas exógenas y 3)
excreción renal/intestinal.

La mayor parte de la formación de ácido úrico tiene lugar en el hígado, por su gran actividad de
xantino oxidasa; el adulto medio excreto aproximadamente de 0.4 a 0.8 g de ácido úrico en orina cada
24 horas. Los valores de referencia varían con el método, edad, factores raciales, sexo, factores
sociales y factores geográficos.
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División de Ciencias de la Salud Laboratorio de Bioquímica
Carrera de Médico y Cirujano 2022
Segundo Año
Como un metabolito del metabolismo de las purinas, ácidos nucleicos y nucleoproteínas, los niveles
anormales de ácido sérico pueden indicar un desorden en el metabolismo de estas sustancias.
La metodología para la determinación de la concentración de ácido úrico se basa en la reacción de
Trinder, un método enzimático colorimétrico que involucra dos reacciones acopladas. En la primera, la
enzima uricasa cataliza la oxidación del ácido úrico a alantoína, con la producción de peróxido de
hidrógeno (H2O2):
Ácido Úrico + O2 + H2O Alantoina + CO2 + H2O2

En la segunda reacción, la enzima peroxidasa cataliza la reacción del peróxido de hidrógeno

con el 3,5- dicloro-2-hidroxibencilsulfonato (DHBS) y 4-amino antipirina (4-AAP) para formar un
compuesto coloreado (Quinoneimina) que absorbe luz a 505 nm.
2H2O2 + DHBS + 4-AAP Quinoneimina + 4H2O
La cantidad de luz absorbida es directamente proporcional a la cantidad de colorante formado
y, por lo tanto, a la concentración de ácido úrico en la muestra.

DETERMINACION DE NITROGENO DE UREA

La urea es un residuo de la descomposición de las proteínas y por lo tanto está directamente

relacionada con la cantidad de proteínas que comemos. Normalmente, los riñones filtran la urea de
la sangre, pero cuando los riñones no funcionan bien, la cantidad de urea filtrada es menor y aumenta
en la sangre.

El aumento de urea puede producir malestar digestivo (náuseas y vómitos) y cuando los niveles
son muy altos, alteraciones en el nivel de conciencia (uremia).

La urea se forma en el hígado, es filtrada y absorbida por los riñones. Constituye la fracción de
nitrógeno no proteico más importante en la mayoría de los líquidos biológicos.

En el hombre, es el principal producto final del metabolismo proteico. Representa el 85% del
nitrógeno urinario, por lo que no resulta sorprendente el papel fundamental que juega el riñón en la
regulación sistémica de los niveles de urea. Un aumento de la concentración sérica de urea se
interpreta como una posible disfunción renal.
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Centro Universitario de Occidente Lic. Antony Cifuentes
División de Ciencias de la Salud Laboratorio de Bioquímica
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Segundo Año
La reabsorción renal de urea es mayor cuando el flujo es lento y menor cuando aumenta
la diuresis. Los niveles séricos de urea están relacionados con la dieta y el metabolismo proteico.

Su utilidad clínica se basa en su importancia en la evaluación de la función renal. Entre las

variables preanalíticas que incrementan su valor sérico están el sexo –es mayor en hombres que en
mujeres-, la edad, alcalosis, amonio, bilirrubina, creatina, creatinina, hemoglobina, ácido úrico,
plomo y la hemólisis. Mientras que entre los que lo disminuyen están el embarazo, la ingesta
inadecuada de proteínas, la ingesta de agua y el tabaco.

Enfermedades como nefroesclerosis, tuberculosis renal, necrosis cortical, gota crónica,

malignidad, hiperparatiroidismo y el síndrome de Reye aumentan sus niveles séricos; mientras
que la acromegalia, fibrosis quística, cirrosis hepática, falla hepática, hepatitis tóxica, preeclampsia,
eclampsia, síndrome nefrótico y enfermedad celíaca los disminuyen.

Entre las drogas que aumentan su concentración sérica están alopurinol, aminoácidos, aspirina,
cisplatino, ciclosporina, furosemida, gentamicina, neomicina, tetraciclina, hidroclorotiazida,
interleucina 2, pentamidina, tertratolol, ketoprofeno, anfotericina B, captopril, carbamacepina,
cimetidina, etc.; y entre las que la disminuyen están la hormona del crecimiento, prednisona, ácido
ascórbico, heparina, amikacina, iodo acetato, parametasona, fenotiazinas, etc.

Actualmente es más común expresar las concentraciones de urea en términos de nitrógeno de

urea (BUN).

MATERIALES
Suero para las determinaciones químicas
Reactivo enzimático colorimétrico para la determinación de urea y ácido úrico
Soluciones estándar de:
o Ácido Úrico
o Urea
Cubetas
Micropipetas
Puntas para micropipetas
Fotómetro
Reloj
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1. PROCEDIMIENTO ACIDO URICO

1) Marcar tres tubos de ensayo como B (Blanco), St (Standard) y M (Muestra –escribir el
número de muestra).
2) Proseguir de acuerdo con el siguiente esquema:

TUBOS
Pipetear en los tubos marcados B St M
Solución estándar de ácido úrico ---- 20 µl ----
Suero del paciente ---- ---- 20 µl
Reactivo de ácido úrico 1000 µl 1000 1000 µl
3) Incubar por 5 minutos a 37°C.
4) Leer las absorbancias del estándar (ASt) y la muestra (AM), poniendo el aparato en cero con el
blanco de reactivos (B), a una longitud de onda de 505 nm
5)
6) Determinar la concentración de ácido úrico utilizando la ecuación de Beer-Lambert

NOTAS:
1) LA CONCENTRACIÓN DEL ESTÁNDAR TIENE UNA VALOR DE 10 mg/dl

2) LOS VALORES DE REFERENCIA

SON:

Mujeres: 2.6 – 6.0 mg/dl

Hombres: 3.5 – 7.2 mg/dl

2. PROCEDIMIENTO NITROGENO DE UREA

a) Tomar dos tubos limpios

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b) Identificar los dos tubos de la siguiente forma: uno como St (de estándar) y uno como M (de
muestra)

c) Colocar en los dos tubos 1000 µl de reactivo para la determinación de Nitrógeno de Urea

d) Programar el espectrofotómetro a 340 nm y ponerlo en cero con blanco de agua estilada

e) Agregar al tubo St 10 µl (microlitros) de solución estándar de BUN, activar

inmediatamente el cronómetro y transferir a la cubeta de lectura

f) Introducir la cubeta al espectrofotómetro y a los 30 segundos leer la primera absorbancia

del estándar y anotarla como Ast1

g) Leer la segunda absorbancia del estándar 60 segundos después de la primera y anotarla como
ASt2

h) Sacar la cubeta del fotómetro, descartar su contenido y golpearla sobre papel absorbente
para eliminar el exceso de líquido remanente

i) Repetir los pasos E, F Y G utilizando el suero del paciente en vez del estándar, anotando
las absorbancias correspondientes como AM1 (a los 30 segundos) y AM2 (60 segundos
después de la primera lectura)

j) Calcular las diferencias de absorbancia del estándar (ΔSt) y de la muestra (ΔM) con la fórmula
de Beer-Lamberth.

Los valores de referencia son: 4.7 -23.4 mg/dl

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Contenido: 1. Determinación de Proteínas Totales y Albúmina

2. Determinación de Creatinina

1. DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES Y

ALBÚMINA

INTRODUCCIÓN
Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, ampliamente distribuidos en el organismo y
esenciales para la vida. Actúan como elementos estructurales y de transporte y aparecen bajo la forma de
enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulación, etc.

La proteína más abundante en plasma es la albúmina. Una de sus funciones más importantes es la de
permitir el transporte de ácidos grasos, hormonas esteroides, bilirrubina, catecolaminas, que en forma libre
son insolubles en medio acuoso.

La concentración de albúmina en plasma influye notablemente en el mantenimiento de la presión

coloidosmótica, lo que estaría relacionado con su relativamente bajo peso molecular y su gran carga neta.

En condiciones patológicas como pérdidas renales, desnutrición, infecciones prolongadas, etc., suelen
presentarse hipoproteinemias, mientras que, en otras como mieloma múltiple, endocarditis bacteriana y
hemoconcentraciones de diversos orígenes, se observan hiperproteinemias.

En general, ambas situaciones se ven acompañadas también por hipoalbuminemias. Los aumentos
anormales de albúmina son ocasionales y se relacionan casi siempre con deshidratación que produce el
consecuente aumento en el contenido proteico del plasma.

La albúmina es la proteína más abundante del plasma. Se sintetiza en el hígado y se destaca por su
capacidad de sufrir cambios conformacionales, lo que le permite poder transportar muchas sustancias, tales
como bilirrubinas, ácidos grasos, ácido úrico, diversos medicamentos y antibióticos. Además, funciona
como un regulador de la presión osmótica. Clínicamente, los niveles plasmáticos aumentados de
albúmina se asocian con la deshidratación severa, mientras que los niveles disminuidos se asocian a
desnutrición, enfermedad péptica, trastornos renales, y otras enfermedades.

REACCIÓN DE BIURET

Para la determinación de proteínas totales se utiliza el método de Biuret; cuyo nombre se debe al biuret,
una molécula formada a partir de dos moléculas de urea (H2N-CO-NH-CO-NH2), que es la más sencilla que
da positiva a esta reacción. El reactivo de Biuret contiene CuSO4 en solución acuosa alcalina (de NaOH o
KOH). La reacción se basa en la formación de un compuesto de color violeta, debido a la formación de un
complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que
forma parte de los enlaces peptídicos, presentando un máximo de absorción a 540 nm.

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de proteínas totales presentes en la

muestra.

Por su lado, para la determinación de albúmina se utilizan varios compuestos cromógenos, entre los cuales
los más empleados está el verde de bromocresol –BCG- (3,3’, 5,5’-tetrabromo cresolsulfon ftaleína). La
albúmina reacciona con el BCG produciendo un compuesto coloreado de color verde, cuya máxima
absorbancia es a 625 nm. La intensidad del color formado es proporcional a la cantidad de albúmina presente
en la muestra.
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Materiales
Suero para las determinaciones químicas
Reactivos:
o Biuret para la determinación de proteínas totales
o Verde de bromocresol (BCG) para la determinación de albúmina
Soluciones estándar de:
o Proteínas totales
o Albúmina
Tubos de ensayo con gel para obtención de suero (tapón amarillo)
Cubetas
Micropipetas
Puntas para micropipetas
Fotómetro
Reloj

Procedimientos
a) Proteínas totales
a. Marcar tres tubos de ensayo como B (Blanco), S (Standard) y M (Muestra –escribir el número de
muestra)
b. Proseguir de acuerdo con el siguiente esquema:

B St M
Solución estándar 10 µl
Suero 10 µl
Reactivo de Biuret 1000 µl 1000 µl 1000 µl

c. Mezclar e Incubar por 5 minutos a 37°C.

d. Leer las absorbancias del estándar (AS) y la muestra (AM), poniendo el aparato en cero con el blanco
de reactivo (B), a una longitud de onda de 546 nm.
e. Determinar la concentración de proteínas totales utilizando la ecuación de Beer-Lambert

NOTA: LA LINEALIDAD DE LA PRUEBA ES HASTA 12.0 g/dl Y LOS VALORES DE REFERENCIA DE

6.6 a 8.7 g/dl EN DULTOS Y DE 4.6 A 7.0 g/dl EN BEBES NACIDOS NORMALES.

b) Albúmina
a. Marcar tres tubos de ensayo como B (Blanco), S (Standard) y M (Muestra)
b. Proseguir de acuerdo al siguiente esquema:

B St M
Solución estándar 5 µl
Suero 5 µl
Reactivo de BCG 1000 µl 1000 µl 1000 µl

c. Incubar por 5 minutos a 37°C.

d. Leer las absorbancias del estándar (AS) y la muestra (AM), poniendo el aparato en cero con el blanco
de reactivos (B), a una longitud de 625 nm
e. Determinar la concentración de proteínas totales utilizando la ecuación de Beer-Lambert

NOTA: LA LINEALIDAD DE LA PRUEBA ES DE 0.2 a 6.0 g/dl Y LOS VALORES DE REFERENCIA DE

3.5 a 4.8 g/dl en adultos y de 2.8 a 4.4 g/dl en recién nacidos de 0-4 días.
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c) Relación albúmina/globulina (Relación A/G)

Con las metodologías arriba descritas se están determinando las proteínas totales y albúmina,
respectivamente. Puesto que la albúmina es el único tipo de proteína sérica no globulina, la diferencia
entre las proteínas totales y la albúmina corresponde a la cantidad de globulina presente en la muestra.

Al dividir el valor de globulina entre el valor de albúmina se obtiene la relación existente entre ambos
tipos de proteínas, denominada relación A/G, la que es utilizada clínicamente para estimar el tipo y
grado de desorden observado en relación con el metabolismo de las proteínas.

El cálculo de la relación A/G es como sigue:

Relación Albúmina/Globulina= Albúmina__________

Proteínas Totales - Albúmina

Nota: El resultado obtenido es adimensional y los valores de referencia van de 1.2 a 2.2

2. DETERMINACIÓN DE CREATININA

La creatinina es una molécula de desecho que se genera a partir del metabolismo muscular. La creatinina
proviene de la creatina, una molécula muy importante para la producción de energía muscular.
Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se convierte en creatinina cada día. La creatinina se
transporta desde los músculos por medio de la sangre hacia el riñón. Los riñones filtran la mayoría de la
creatinina y la eliminan en la orina.

Aunque es una sustancia de desecho, la creatinina es una prueba diagnóstica esencial, ya que se
ha observado que su concentración en sangre indica con bastante fiabilidad el estado de la función renal. Si los
riñones no funcionan bien, no eliminan bien la creatinina y por lo tanto ésta se acumula en la sangre. Por esto
la creatinina puede avisar de una posible disfunción o insuficiencia renal, incluso antes de que se presenten
síntomas. Por eso la creatinina suele figurar en los análisis de sangre que se realizan comúnmente.

La determinación de creatinina es un indicador útil para evaluar la función glomerular renal,

teniendo en cuenta el prerrequisito que la producción de creatinina y su excreción sean iguales. Esto se
cumple en individuos sanos con dieta normal.

Las variaciones intraindividuales en estas condiciones son mínimas mientras que las interindividuales son
muy fluctuantes debido a:

Diferencia en la masa muscular y por tanto de producción de creatinina en distintos individuos.

Diferencia en la ingesta de carne. Un Kg de carne contiene de 2 a 5 g de creatina que se convierte

en creatinina en el proceso de cocción. Del 15 al 30% de la creatinina excretada diariamente es de origen
alimentario.
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La creatinina en suero no es un buen indicador de la tasa de filtración glomerular (FGR)
ya que su valor se encuentra aumentado solamente cuando ésta ha disminuido a valores de 60-40 mL/min/1.73
m2.

La utilidad clínica de la determinación de creatinina es el diagnóstico y pronóstico de las nefropatías,

obstrucciones urinarias por afección de próstata, vejiga y uréteres. También anurias transitorias por litiasis.
Su medición está sujeta a diversas variables preanalíticas; así, por ejemplo, se ve aumentada en casos de
lipemia, hemólisis y ejercicio físico excesivo, y disminuye por hiperbilirrubinemia y el embarazo. También algunas
enfermedades pueden alterar su concentración sérica, entre ellas, la diabetes, cualquier enfermedad que
comprometa la función renal, ya sea aguda o crónica, así las hemorragias, hipotensión, rabdomiolisis,
acromegalia y gigantismo, en los que se aumenta su concentración. Mientras que la caquexia por reducción
de la masa muscular la reduce.

Su excreción en orina está disminuida por insuficiencia renal, miopatías, leucemias anemias.
Algunas drogas también aumentan su concentración sanguínea: gentamicina, meticilina, cimetadina,
trimetoprima, espirinolactona, amilorida, ácido salicílico, ácido ascórbico, metildopa, levodopa, fructosa, drogas
nefrotóxicas, etc.

MATERIALES
Suero para las determinaciones químicas
Reactivo para la determinación de Creatinina
Solucione estándar de Creatinina
Cubetas
Micropipetas
Puntas para micropipetas
Fotómetro
Reloj

PROCEDIMIENTOS

1. Creatinina
a) Tomar dos tubos limpios
b) Identificar los dos tubos de la siguiente forma: uno como St (de estándar) y uno como M (de muestra)
c) Colocar en los dos tubos 500 µl de reactivo de Jaffe y pre incubar por dos minutos a 37°C
d) Programar el espectrofotómetro a 510 nm y ponerlo en cero con blanco de agua destilada
e) Agregar al tubo St 25 µl (microlitros) de solución estándar de creatinina, activar inmediatamente el cronómetro
y transferir a la cubeta de lectura
f) Introducir la cubeta al espectrofotómetro y a los 20 segundos leer la primera absorbancia del estándar y anotarla
como Ast1
g) Leer la segunda absorbancia del estándar 60 segundos después de la primera y anotarla como ASt2
h) Sacar la cubeta del fotómetro, descartar su contenido y golpearla sobre papel absorbente para eliminar el
exceso de líquido remanente
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i) Repetir los pasos 5, 6 y 7 utilizando el suero del paciente en vez del estándar, anotando las absorbancias
correspondientes como AM1 (a los 20 segundos) y AM2 (60 segundos después de la primera lectura)
j) Calcular las diferencias de absorbancia del estándar (ΔSt) y de la muestra (ΔM):
ΔASt = ASt1 – Ast2
ΔAM = AM1 –AM2
k) Determinar la concentración de creatinina utilizando ΔASt y ΔAM en la ecuación de Beer-Lambert

Concentración de Creatinina en la muestra = (ΔAM /ΔASt) × Concentración del estándar

(5 mg/dl)
l) Los valores de referencia de creatinina son:
Hombres: 0.9 – 1.5 mg/dl
Mujeres: 0.7 – 1.4 mg/dl
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Pruebas Hepáticas
TGO, TGP y Fosfatasa Alcalina

Introducción
Aunque el término "pruebas de función hepática es de uso general, es impreciso, ya que muchos
de los ensayos que reflejan la salud del hígado no son medidas directas de su función. Además, las
pruebas de función hepática de uso general pueden ser anormales incluso en pacientes con un hígado
sano.

Desde un punto de vista práctico, los exámenes de laboratorio que generalmente se emplean en
la evaluación de las enfermedades hepáticas y se pueden dividir en:

a) Exámenes relacionados con la función EXCRETORA del hígado (bilirrubina sérica, que mide la
capacidad del hígado para detoxificar los metabolitos y de transporte aniones orgánicos en la bilis y
las enzimas canaliculares fosfatasa alcalina y gamma glutamil transpeptidasa)

b) Exámenes relacionados con la función SINTÉTICA del hígado (principalmente la concentración de

albúmina sérica y el tiempo de protrombina).

c) Concentraciones séricas de enzimas intracelulares relacionadas a la INTEGRIDAD de los hepatocitos

(especialmente las aminotransferasas séricas).

Pruebas de laboratorio relacionadas con la integridad de los hepatocitos

La medición de la actividad sérica de ciertas enzimas intracelulares es de considerable utilidad

para estimar la integridad de los hepatocitos ya que su necrosis se asocia a una liberación significativa
de las mencionadas enzimas a la circulación. En las llamadas “pruebas hepáticas” se incluyen a las
enzimas transaminasas.

Hay dos tipos de aminotransferasas: alanina aminotransferasa (ALT, antes conocida como
SGPT) y aspartato aminotransferasa (AST, antes conocida como SGOT).

1. Aspartato aminotransferasa (AST, previamente denominada SGOT [serum

Glutamic-oxalacetic transaminase] o TGO [transaminasa glutámica oxaloacética])
Esta enzima está presente en las células parenquimatosas del corazón, músculo e hígado. Su
ubicación subcelular corresponde al citoplasma y la mitocondria. La elevación de la actividad sérica de la
AST generalmente se acompaña de otras alteraciones de los exámenes de laboratorio hepático y refleja
necrosis hepatocelular.
Los niveles de alteración son variables pudiendo alcanzar hasta 20 o 30 veces el valor normal o
valores aún superiores. El grado de alteración puede ser orientador desde el punto de vista diagnóstico.
Los niveles de AST pueden alterarse en patologías extrahepáticas (Infarto al miocardio,
enfermedades musculares particularmente las miopatías inflamatorias o la rabdomiólisis). En estas
circunstancias la elevación de los niveles de AST es aislada.
En el caso de las patologías hepáticas la elevación de AST traduce un fenómeno de necrosis de los
hepatocitos el cual puede ser secundario a un fenómeno de daño celular agudo (ej: hepatitis virales,
hepatitis por drogas o tóxicos, isquemia hepatocelular) o a un proceso inflamatorio crónico de
variadas etiologías (ej: hepatitis crónica viral o autoinmune).

2. Alanino aminotransferasa (ALT, previamente denominada SGPT [serum Glutamic-piruvic

transaminase] o TGP [transaminasa glutámico-pirúvica])
Esta enzima es una enzima citosólica que se encuentra mayormente en los hepatocitos lo que le
otorga una mayor especificidad que la AST. Su significado es básicamente el mismo que esta última es
decir se eleva marcadamente en fenómenos de necrosis celular aguda y en menor grado cuando existe
un proceso crónico destructivo de los hepatocitos.
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Niveles moderadamente elevados de aminotransferasas (3-15 veces el valor normal) sugieren

procesos inflamatorios crónicos asociados a virus o al consumo de alcohol. Las alteraciones pueden ser
fluctuantes en el tiempo, lo que a veces puede inducir a confusión. Ocasionalmente, la obstrucción biliar
aguda puede asociarse a una elevación significativa de los niveles de AST y ALT.
Característicamente, estos niveles declinan rápidamente (24-48 horas) permitiendo hacer el
diagnóstico diferencial con otros cuadros.

3. Fosfatasa Alcalina:
Los niveles de Fosfatasa Alcalina en suero son de interés en el diagnóstico de desordenes
Hepatobiliares y enfermedades Oseas asociadas con el incremento de la actividad osteoblástica.
Solamente ocurren elevaciones de Fosfatasa Alcalina de poca a moderadas en osteomalacia,
raquitismo y síndrome Fanconi´s. la actividad de las enzimas de suero, puede alcanzar de 10 a 12
veces el limite superior en la obstrucción hepática y regresar a la normalidad después de removerlo por
medio de cirugía. El suero de niños en crecimiento y de mujeres en el primer trimestre de su embarazo,
también muestran elevados niveles de actividad de Fosfatasa Alcalina.

Objetivos
1. Adquirir conocimiento sobre los diferentes desórdenes hepáticos existentes.
2. Familiar al estudiante con algunas de las pruebas de laboratorio útiles para la evaluación
del funcionamiento hepático y el diagnóstico de hepatopatías
3. Adquirir conocimiento sobre las pruebas que son útiles en el diagnóstico diferencial de las
hepatopatías.

Materiales
Suero para las determinaciones químicas
Reactivos para la determinación de:
1. AST/TGO
2. ALT/TGP
3. Fosfatasa Alcalina
Cubetas de lectura
Micropipetas
Puntas para micropipetas
Fotómetro
Reloj

Procedimientos
1) ALAT/TGP
a. Utilizar una longitud de onda de 340 nm y poner en cero el aparato con agua destilada.
b. Pre incubar 500 microlitros de reactivo 2 minutos.
c. Agregar 50 microlitros del suero del paciente e inmediatamente activar el cronómetro.
d. Esperar 90 segundos y leer la absorbancia inicial (A1).
e. Luego leer al minuto de haber leído la segunda (A2), a los 2 minutos (A3) y a los 3 minutos (A4).
f. Determinar la diferencia de Absorbancia restando cada absorbancia de la anterior y sacando el
promedio.
g. Caluro de los resultados: Absorbancia promedio (Ap)* 1,746
h. Valores de Referencia:
a. Mujeres Hasta 31 U/l
b. Hombres Hasta 41 U/l

2. AST/TGO
NOTA: Realice el mismo procedimiento que con ALT/TGP.

Valores de Referencia:
Hombres: Hasta 38 U/l
Mujeres: Hasta 31U/l
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3. Fosfatasa Alcalina:
a. Utilizar una longitud de onda de 405 nm y poner en cero el aparato con agua destilada.
b. Agregar a un tubo 500 microlitros de reactivo y pre incubar 3 minutos a 37°.
c. Agregar 10 microlitros de suero del paciente y activar inmediatamente el cronometro.
d. Mezclar suavemente y leer la absorbancia al minuto, luego a los dos minutos y por último a los tres
minutos.
e. Determinar el promedio de las absorbancias y multiplicar por 2,764
f. Valores de referencia:
a. En adultos de 34 – 114 U/l
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DETERMINACIÓN DE BILIRRUBINAS

La bilirrubina, compuesto de degradación de la hemoglobina, es captada por el hígado para su conjugación y

excreción en la bilis. Las alteraciones hepatocelulares u obstrucciones biliares pueden provocar hiperbilirrubinemias.
La eritroblastosis fetal o anemia hemolítica del recién nacido es una patología provocada por incompatibilidad
materno fetal en la que se produce una destrucción excesiva de glóbulos rojos. Esto resulta en un severo aumento de
la bilirrubina sérica con el consecuente riesgo de difusión del pigmento al sistema nervioso
central, por lo que la determinación de la bilirrubina en estos niños recién nacidos resulta sumamente importante.
FUNDAMENTOS DEL METODO:
La bilirrubina reacciona específicamente con el ácido sulfanílico diazotado produciendo un pigmento color rojo-
violáceo (azobilirrubina) que se mide fotocolorimétricamente a 530 nm. Si bien la bilirrubina conjugada (directa)
reacciona directamente con el diazorreactivo, la bilirrubina no conjugada (indirecta) requiere la presencia de un
desarrollador acuoso (Reactivo A) que posibilite su reacción. De forma tal que, para que reaccione la bilirrubina total
(conjugada y no conjugada) presente en la muestra, debe agregarse benzoato de cafeína al medio de reacción.
Hasta principios de los 80, el pensamiento general era que la bilirrubina directa equivalía a la bilirrubina
conjugada. La introducción de la tecnología de química seca, que utiliza la espectrometría diferencial para medir
separadamente la bilirrubina conjugada y no conjugada, permitió observar que la suma de ambos tipos de bilirrubina
no equivalía a la bilirrubina total y a caracterizar la -bilirrubina. En el ensayo directo se miden aproximadamente el
70% a 80% de la bilirrubina conjugada y la -bilirrubina y un pequeño porcentaje de la bilirrubina no conjugada. A pesar
de los buenos resultados que apoyan a la medida de la bilirrubina conjugada en vez de su estima a partir de la bilirrubina
total, la prueba de la bilirrubina directa es aun ampliamente utilizada.
Los valores de referencia para la bilirrubina total dependen tanto de la edad como el sexo. Los valores de la
bilirrubina normalmente alcanzan un pico entre los 14 y 18 años, descendiendo hasta los valores normales del adulto
alrededor en mujeres a todas las edades. El ejercicio intenso provoca un aumento significativo en los valores de
bilirrubina cuando se comparan con los observados en individuos sedentarios en los que practican ejercicio
regularmente.

MATERIALES Y EQUIPO
1. Fotómetro con selección de longitud de onda de 530 nm
2. Pipetas automáticas de 5-50 µL, 50-250 µL y 200-1000 µL
3. Puntas para pipeta color amarillo y azul
4. Tubos de ensayo
5. Gradillas
6. Reactivo para la determinación de bilirrubinas
7. Sueros de pacientes
8. Guantes de látex
9. Papel absorbente
10. Recipientes para la disposición de material contaminado
11. Recipiente para colección segura de desechos
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PROCEDIMIENTO
En tres tubos marcados B (Blanco), D (Directa) y T (Total) colocar:

B (blanco) Bilirrubina Directa Bilirrubina Total

Agua destilada 1 ml 1 ml
Reactivo A 1 ml
Reactivo B 80 microlitros
Diazorreactivo (D) 80 microlitros 80 microlitros
Muestra 80 microlitros 80 microlitros 80 microlitros

Mezclar de inmediato cada tubo por inversión. Luego de 5 minutos, leer en espectrofotómetro a 530 nm,
llevando el aparato a cero con agua destilada. Las lecturas pueden efectuarse entre 4 y 15 minutos, excepto para la
bilirrubina directa que debe leerse a los 5 minutos exactos. Si se lee antes, habrá subvaloración de los resultados por
reacción incompleta. Si se lee después, habrá sobrevaloración porque comienza a reaccionar la bilirrubina libre.

CALCULO DE LOS RESULTADOS

Bilirrubina total (mg/l) = (T - B) x factor
Bilirrubina directa (mg/l) = (D - B) x factor
Bilirrubina libre (indirecta) = BRB total - BRB directa

VALORES DE REFERENCIA
Bilirrubina en suero o plasma
- Adultos:
Directa: hasta 0.2 mg/dl
Indirecta: hasta 0.8 mg/dl
Total: hasta 1.0 mg/dl
- Recién nacidos:
Nacidos a término Prematuros
Sangre de cordón 2.5 mg/dl
Hasta las 24 hrs 6.0 mg/dl 8.0 mg/dl
Hasta las 48 hrs 7.5 mg/dl 12.0 mg/dl
Del 3º al 5º día 12.0 mg/dl 24.0 mg/dl

Los valores comienzan luego a disminuir para alcanzar el nivel promedio del adulto al mes del nacimiento. En
los prematuros, los niveles de bilirrubina tardan más en alcanzar la normalidad, dependiendo del grado de inmadurez
hepática.
Linealidad de la prueba: Hasta 15 mg/dl
BIBLIOGRAFIA:
Clinical diagnosis and management by laboratory methods, 20th ed. John Bernard Henry
Principios, procedimientos y correlaciones, Química Clínica 5ta. Ed. Michael L. Bishop
 EXTRACCION DE ADN.
El ADN es un dímero anti paralelo de hebras de ácido nucleico. Está formado por
nucleótidos que contienen el azúcar desoxirribosa. La desoxirribosa no presenta
grupo hidroxilo en la posición 2’.
Las cadenas de ADN están polimerizadas mediante enlaces fosfodiéster entre el
grupo hidroxilo 3’ de una subunidad y el grupo hidroxilo 5’ de la siguiente. Por tanto,
el ADN es una cadena lineal de desoxirribosa 3’, 5’-fosfato con bases de Purinas y
Pirimidinas unidas al carbono 1’ de la subunidad de desoxirribosa.
Utilizando fotografías de difracción de rayos X del ADN tomado por Rosalin
Franklin en 1953, James Watson y Francis Crick, propusieron un modelo de
estructura para el ADN. Según este modelo, el ADN estaba formado por dos hebras
entrelazadas, complementarias y unidas mediante enlaces de hidrógeno. La
simplicidad básica de ésta estructura hizo que fuera aceptada rápidamente. Aunque
algunos de los detalles del modelo se han modificado, sus elementos esenciales no
han variado de los propuestos originalmente.

Tal como le presentan originalmente Watson y Crick, el ADN está formado por dos
hebras, enrolladas una con la otra formando una estructura helicoidal diestra, con
los pares de bases en el centro y las cadenas de desoxirribosil fosfato en la parte
externa.
La orientación de las hebras de ADN es anti paralela, es decir, las hebras discurren
en direcciones opuestas. Las bases de nucleótidos de una hebra interactúan con
las bases de nucleótidos de la otra, formando pares de bases. Los pares de bases
son planos y están orientados casi perpendicularmente al eje de la hélice.
Cada par de bases está formado por enlaces de hidrógeno entre una purina y una
pirimidina. La Guanina forma tres enlaces de H con la Citosina, y la Adenina
forma dos con la Timina. A causa de la especificidad de esta interacción entre
Purinas y Pirimidinas en las hebras opuestas del ADN, se dicen que estas tienen
unas estructuras complementarias.
La alta estabilidad de la doble hélice del ADN se debe a la fuerza combinada de los
numerosos enlaces de hidrógeno formado entre las bases de las hebras opuestas
y de las interacciones hidrofóbicas entre las bases. Aunque los enlaces de
hidrógeno entre las hebras están afectados por temperatura y la fuerza iónica, a
temperatura ambiente ya pueden formarse unas estructuras complementarias
estables con tan solo 6-8 nucleótidos.
Se llama extracción, al método por el cual se obtiene ADN a partir de material
biológico (EJ. cepillado bucal, saliva, sangre, vegetales o frutas) utilizando técnicas
físicas y químicas. La extracción consiste en la separación y purificación de ADN
con el fin de estudiarlo, analizarlo o manipularlo. En la investigación Biomédica el
ADN se utiliza para analizar y diagnosticar a pacientes con enfermedades
neurodegenerativas, cáncer, infecciones, etc.

PROCEDIMIENTO DE CÉLULAS Y NÚCLEOS.

1. En un vaso agregar una pizca de sal, 2 cucharadas de detergente líquido. 15
ml de agua. Mezclar ( Buffer de extracción)
2. Colocar las fresas dentro de una bolsa plástica. Utilice su puño para triturar
suavemente las fresas durante tres minutos. Esto comenzará el rompimiento
de las células (maceración).
3. Agregar aproximadamente 10 ml de buffer de extracción a la bolsa con
fresas. Presione la bolsa para remover el aire dentro de ella y ciérrela.
Continúe triturando suavemente las fresas durante un minuto (trate de no
generar espuma).
4. Coloque el papel filtro o gasa sobre el vaso plástico y sujételo con el hule.
Corte la esquina de la bolsa plástica y vierta la mezcla de fresas despacio
sobre el vaso, dirigiendo el líquido con la varilla de madera.
5. Una vez que en la base tenga suficiente líquido (un dedo de altura es
suficiente, no más de ¼ de su capacidad) pare la filtración. Recuerde cerrar
su bolsa antes de dejarla
PRECIPITACIÓN Y AISLAMIENTO DE ADN

Agregar suavemente el etanol frio por las paredes del vaso al extracto celular. La
capa de etanol debe quedar por arriba del extracto. Usted verá que se forman dos
capas. Verá que se comienza a formar un material fibroso blanco en la Interfase de
las capas.
Inserte la varilla de madera hasta llegar a la Interfase entre el etanol y el extracto,
gire la varilla para que la molécula de ADN comience a enrollarse sobre ella. De
esta manera el ADN empezará a parecerse a algodón blanco.
Remueva el agregado blanco y vuelva hacer el procedimiento anterior, seguirá
extrayendo ADN.
Lávese las manos y limpie su lugar de trabajo, poniendo todos los materiales en la
bolsa negra de basura. Asegúrese que la bolsa de extracto esté bien cerrada.
 Hemostasia y Trombosis

La circulación sanguínea es esencial para el transporte de gases, nutrientes,

minerales, hormonas y productos metabólicos.
Es importante que la sangre no se escape de los vasos sanguíneos cuando estos
sufren lesiones.
La evolución animal desarrolló una eficaz serie de mecanismos celulares y
bioquímicos que limitan la pérdida de sangre formando tapones de plaquetas-fibrina
en los lugares se la lesión (hemostasis).
Es esencial que los mecanismos hemostáticos sean controlados adecuadamente
por mecanismos inhibidores para la oclusión local en un vaso sanguíneo en su lugar
de origen ( trombosis) o fuera de el y evitar bloquear un vaso más adelante (
embolismo ).
Hemostasia
Hemostasis = Detención del sangrado.
Después de la lesión de un vaso sanguíneo, tiene lugar una serie de reacciones
entre la pared del vaso y la sangre circulante, dando lugar al cese de la pérdida
sanguínea.
La hemostasis es el resultado del sellado de los vasos rotos por un coagulo de
plaquetas y fibrina.
Tres mecanismo reducen la pérdida de sangre
1. Vasoconstricción

Todos los vasos sanguíneos poseen una capa de células endoteliales que cumplen
una función importante en el intercambio de intercambio entre las células y los
tejidos corporales.
En los vasos capilares (intima), venas (media), y vasos grandes (adventicia)
permiten una vasoconstricción potente después de una lesión.
La vasoconstricción producida después de la lesión está mediada por los productos
de activación derivados de las plaquetas : Serotonina y Tromboxano A2.
La síntesis de TXA2 determina un aumento del calcio, contribuyendo así a la
agregación plaquetaria, por medio de su activación.
Además, la lesión vascular es expuesta al colágeno subendotelial que activa la vía
intrínseca de la coagulación, mientras que la sangre es expuesta al factor hístico
endotelial que activa la vía extrínseca de coagulación.
2. Plaquetas
Forman el tapón hemostático en los vasos sanguíneos y el trombo inicial en las
arterias y venas.
Son fragmentos de megacariocitos sin núcleo y de un diámetro aproximado de 2-3
um, con una vida media de 10 días y concentración sanguínea de 150,000-400,000/
mm3.
La disminución en el número es conocido como Trombocitopenia y su aumento
como Trombosis.
Las plaquetas pueden ser activadas por ADP, Adrenalina, Colágeno, Trombina,
PAF.
La estimulación de los receptores de membrana de las plaquetas liberan Acido
Araquidónico que es un potente mediador de la activación de plaquetas y de
la vasoconstricción.
Las plaquetas comienzan a aglutinarse, se vuelven pegajosas, y se unen al
colágeno expuesto y al revestimiento endotelial. Este proceso es asistido por una
glicoproteína en el plasma sanguíneo llamada factor von Willebrand, que ayuda a
estabilizar el tapón plaquetario en crecimiento

3. Coagulación
Está activada por factores ( proteínas) que interactúan para
formar el tapón hemostático secundario, rico en fibrina.
Los factores de coagulación se identifican mediante números
romanos.
El esquema de coagulación se ha dividido en tres partes:
1) Vía Intrínseca: Mediada por factores dentro de la sangre al
entrar en contacto con el área dañada.
2) Vía Extrínseca: Mediada por factores externos a la sangre
liberados durante la lesión.
3) Vía Final o común
Vía Intrínseca
No se añaden a la sangre factores no extrínsecos como el
factor hístico o la trombina.
El intervalo de análisis normal es de 30-40 seg, las
prolongaciones se observan en deficiencias de factores XII, XI,
IX ( cofactor VIII), X (cofactor V).
La prueba se denomina TPT y se utiliza para excluir hemofilias
y uso adecuado de Heparina
Vía Extrínseca
El término extrínseco indica el efecto del factor Hístico, el cual
junto con el factor VII, acelera la coagulación activando el factor
X.
La prueba clínica de esta vía es el TP, con un valor normal de
10-15 seg. Las prolongaciones se observan en deficiencias de
los factores VII,X,V,II .
Los trastornos hemorrágicos adquiridos por deficiencia de
Vitamina K, Anticoagulantes orales, enfermedad hepática.
Vía Final Común
Las deficiencias se observan en la deficiencia de fibrinógeno.
Su estudio se realiza en un tiempo de trombina (TT). El
intervalo normal es de 10-15 seg.
La trombina convierte el fibrinógeno circulante en fibrina y
activa el factor XIII, el cual entrecruza la fibrina formando el
coágulo
Los leucocitos pueden integrarse al coágulo en el sitio de la
lesión uniéndose al fibrinógeno/fibrina.
Los leucocitos (principalmente monocitos /macrófagos) unidos
al fibrinógeno activan vías intracelulares pro inflamatorias, lo
cual resulta en la producción de citocinas inflamatorias con
capacidad de amplificar el proceso inflamatorio.
El fibrinógeno y la fibrina además, cuando ocurre una infección
pueden físicamente atrapar y limitar a las bacterias, evitando
su crecimiento y diseminación, por eso, las bacterias que
liberan enzimas fibrinolíticas (como el estreptococo, que
genera estreptoquinasa) son más virulentas.

Inhibidores de la Coagulación
Son esenciales para prevenir la formación excesiva de
trombina y trombosis.
Se han identificado tres sistemas:
1) Antitrombina: Proteína sintetizada en el hígado, inhibe los
factores XIIa, XIa, IX y X. es catalizada por la heparina y por
glucosaminoglucanos.
2) Proteína C y su Cofactor Proteína S: Dependientes de
vitamina K, producidas por el hígado. Degradan los factores V
y VIII.
3) Inhibidor de la vía del Factor Histico o Tisular: Inhibe el
complejo hístico y por lo tanto también los factores VII y IX.
4)Heparina: Aumenta la actividad de la Antitrombina y del TFPI
5)Trombomodulina: Modula la trombina y activa la Proteína C
que junto con la Proteína S inhiben los factores Va y VIIIa

Fibrinólisis:
El sistema de coagulación forma fibrina, el
sistema fibrinolítico actúa para limitar el
exceso de formación de fibrina, mediada por
la plasmina.
La concentración aumentada de plasmina
disminuye la concentración de fibrina.
El factor XII sirve como conexión de los
factores de coagulación con los fibrinolíticos.
Anticoagulantes
Son derivados de la CUMARINA, actúan
como antagonistas de la vitamina K.
Los mas comunes son la Warfarina y
Heparina
La Warfarina: impide la formación en el
hígado de los factores activos II, VII,IX y X
mediados por la vitamina K. No tiene efecto
trombo lítico directo, aunque puede limitar la
extensión de los trombos existentes.
La heparina: Evita la formación de trombina,
inhibiendo el factor Xa. Se controla con la
medición de TPT
Aspirina: es un antiagregante plaquetario.
EDTA y Citrato: Elimina o Precipitan al Ca+2
Biosíntesis DEL COLESTEROL
Los niveles normales de colesterol total la concentración normal de colesterol
es menor a 200 mg/dl si es mayor puede generar un riesgo cardiovascular. Y la
cantidad de tubos de ensayo son 3, en uno se agrega la muestra, en otro el
estándar y el blanco, cuando ya se tienen estos tres se envía a un
espectrofotómetro.

El colesterol se puede obtener de dos vías, una por alimentos de origen animal y
la otra vía es de manera endógena, en donde el organismo realiza distintos
procesos para obtenerlo.

El colesterol es esencial para las estructuras celulares, forma hormonas y

vitaminas y asimismo tiene función celular, por ello se deben mantener este en
condiciones normales,

En cantidades mayores puede provocar distintos problemas por ejemplo las

placas ateroescleróticas.

El colesterol se relaciona mucho con las lipoproteínas a las cuales se ensambla

para moverse y entrar en el organismo, y de esas lipoproteínas, la que se forma
a partir de las grasas de los alimentos es el quilomicrón del cual derivan otras
lipoproteínas.

LAS ESTATINAS SIRVEN PARA DISMINUIR EL COLESTEROL.

HÍGADO

El colesterol toma muchas vías, ya sea por su eliminación, distribución por los
tejidos y síntesis de esteroides lo cual da origen a la vitamina D. por ello la
vitamina D se puede obtener del colesterol o por un medio directo en este caso
por los fármacos, su función radica en fortalecer el sistema óseo, los músculos
y proteger los vasos sanguíneos.

VITAMINA D
La vitamina D es una hormona que, además de participar en la homeostasis del
calcio, influye sobre genes implicados en la proliferación, diferenciación y
apoptosis celular.

Modula el crecimiento, participa en la función inmunitaria y es antiinflamatoria.

El déficit de vitamina D causa raquitismo en los niños y osteomalacia en los
adultos. La vitamina D en exceso es tóxica.
CASO CLÍNICO
A pesar del control dietético estricto, un hombre de 50 años con antecedentes
familiares de enfermedad cardiovascular precoz presenta una concentración
sérica de colesterol de 309 mg/di siendo la concentración deseable <155 mg/dl.

Entró en un programa de deshabituación del tabaco y se le recetó una

ESTATINA.

Tomándolas de forma correcta de la siguiente manera para que el organismo lo

aproveche de la mejor manera, por ello en 3 meses bajo a 212 mg/dl, 3 meses
después bajo a 158, por ello el tratamiento con estatina funciono.

ORIGEN DEL COLESTEROL.

Se puede obtener de manera exógena, una ingesta excesiva pues generar
trastornos de transporte de oxígeno en cuanto a los vasos sanguíneos
(ateroesclerosis) y asimismo se puede obtener de manera endógena a partir del
hígado (es el órgano principal de síntesis de colesterol), pero de igual manera en
el ingresa el colesterol obtenido de manera exógena

La estructura del colesterol es la siguiente, y el hígado trata de ensamblarlo.

Esta molécula tiene 27 átomos de carbono, para que inicie el proceso se necesita
el Acetil CoA, pero se necesitan 2 Acetil CoA para dar inicio el proceso de
síntesis.
SE DEBE RECORDAR:
 Se utilizan 2 Acetil CoA como fuente de átomos de Carbono.
 El hígado es el lugar principal de síntesis.
 El NADPH es el poder reductor proveniente de la vía pentosa fosfato.
 La energía procede del ATP.
 Las fuentes de Acetil CoA son varias, pero una de ellas es por medio de la
B-oxidación de ácidos de cadena larga, la deshidrogenación del piruvato y
la oxidación de aminoácidos cetógénicos.
 EL PROCESO SE DA A NIVEL DE CITOSOL.

SÍNTESIS DEL COLESTEROL

HAY 4 ETAPAS DE SÍNTESIS.

PRIMERA ETAPA SÍNTESIS DEL MEVALONATO

 TIPO DE COFACTOR O
SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO
REACCIÓN COENZIMA
Cofactor
Acetoacetil CoA Sulfidril CoA y
2 Acetil CoA Reversible coenzima: Ácido
tiolasa Acetoacetil CoA
Pantoténico
Sulfidril CoA + 3-
Cofactor
Acetoacetil CoA + hidroxi-3- Irreversible
HMG CoA sintasa coenzima: Ácido
Acetil CoA + H2O metilglutaril CoA Hidratación
Pantoténico
(HMG CoA)
3-hidroxi-3-
Mevalonato +
metilglutaril CoA HMG CoA Irreversible Cofactor
2NADP+ + sulfidril
(HMG CoA) + 2 reductasa Redox coenzima: NAD
CoA
NADPH + 2H+

EL ÁCIDO PANTOTÉNICO
Se encuentra ampliamente distribuido en animales y vegetales, forma parte de la molécula de la
coenzima A (CoA).

En la primera etapa de la síntesis de colesterol, se utilizan 3 acetil CoA con un

total de 6 carbonos, ahora el primer sustrato que vamos a utilizar son 2 acetil
CoA.

LA PRIMERA ETAPA ES LA FORMACIÓN DEL MEVALONATO.

LA ENZIMA IMPORTANTE O CLAVE ES EL HMG CoA REDUCTASA. Por ello

en las empresas farmacéuticas se crearon medicamentos para inhibir esta
enzima, esas son las Estatinas.

ESTATINAS MECANISMO DE ACCIÓN

Los inhibidores de la HMG COA reductasa bloquean la síntesis de colesterol en
el hígado, desencadenando en consecuencia reacciones compensadoras que llevan
a la reducción de las LDL plasmáticas. Pero puede variar según el paciente en
cuanto al tiempo e intensidad. El hígado en presencia de eso, se empieza a
inflamar si no se regula bien el uso de Estatinas, estas son efectos adversos.

En alrededor del 2% de los pacientes se observan elevaciones asintomáticas de

la concentración sérica de las transaminasas hepáticas, si bien una ictericia
franca es muy poco común, se recomienda vigilar a los pacientes cada cuatro a 6
semanas durante los primeros 15 meses de tratamiento y luego en forma
periódica, en presencia de una actividad de transaminasas persistentemente
elevada o creciente debe suspenderse el fármaco, lo cual es seguido por el
retorno lento de esos valores a la normalidad, un pequeño porcentaje de
pacientes menor al 10% desarrolla diversos síntomas gastrointestinales, cefalea
o erupciones cutáneas que rara vez obligan a suspender la terapia, aunque hasta
el momento este compuesto es bien tolerado y no se ha registrado toxicidad
inesperada.

ESTATINAS
 Las Estatinas deben tomarse por la noche ya que la enzima HMG CoA
reductasa está muy activa, ya que si se administra en el día no se
encontrará la misma cantidad de esta enzima.
 La actividad máxima del HMG CoA reductasa es de 6 horas después de la
obscuridad, o sea después del que el sol a caído.
 La actividad mínima de esta enzima es de 6 horas después de la claridad
o sea después de que salga el sol.

ALGUNAS ESTATINAS SON; Lovastatina, mevastatina, simvastatina,

Pravastatina y Rosuvastatina.
 SEGUNDA ETAPA CONVERSIÓN

Fase 2
Fase 3
Fase 1

TIPO DE COFACTOR O
SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO
REACCIÓN COENZIMA
Mevalonato + Mevalonato-5- Irreversible Cofactor
Mevalonato cinasa
ATP fosfato + ADP Fosforilación activador: Mg+2
Mevalonato-5-
Mevalonato-5- Irreversible Cofactor
----- pirofosfato +
fosfato + ATP Fosforilación activador: Mg+2
ADP
Mevalonato-5- 2 isopentenil Irreversible
Pirofosfomevalonato Cofactor
pirofosfato + pirofosfato + Fosforilación
descarboxilasa activador: Mg+2
ATP ADP + CO2 Descarboxilación
En la tercera reacción el organismo puede seguir para formar fernesil
pirofosfato ya sea en UNA FASE la cual es la siguiente.

SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO

Farnesil pirofosfato +
2 isopentenil
Cis-prenil transferasa PPi (pirofosfato
pirofosfato
inorgánico)

POR DOS FASES:

SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO

Geranil pirofosfato +
2 isopentenil
Cis-prenil transferasa PPi (pirofosfato
pirofosfato
inorgánico)

Geranil
------ Farnesil pirofosfato
pirofosfato

O POR TRES FASES:

SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO

2 isopentenil Isopentenil pirofosfato 3,3-dimetilalil
pirofosfato isomerasa pirofosfato

Geranil pirofosfato +
3,3-dimetilalil
Cis-prenil transferasa PPi (pirofosfato
pirofosfato
inorgánico)

Geranil
------ Farnesil pirofosfato
pirofosfato

A esta etapa se llama conversión debido a las reacciones que condensan en si

para formar UNIDADES ISOPRENOIDES, que son las estructuras en forma de
volcán como en el farnesil pirofosfato.

Lo último a formar es el farnesil pirofosfato, que es una unidad isoprenoide de

15 carbonos con 3 enlaces dobles. Pero aun así sigue debido a que el colesterol
tiene 27 carbonos.
 TERCERA ETAPA FORMACIÓN DEL ESCUALENO

En esta etapa se forman dos farnesiles para condensarse o unirse, para formar
el escualeno, una unidad de 30 carbonos que contiene 6 enlaces dobles, que
contiene una reacción redox, con la siguiente reacción se detalla:

TIPO DE COFACTOR O
SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO
REACCIÓN COENZIMA
Escualeno + 2 PPi
2 farnesil Irreversible Cofactor
(pirofosfato
pirofosfato + Escualeno sintasa Redox activador: Mg+2
inorgánico) +
NADPH + H+ Desfosforilación Y Mn+2
NADP+

SE DESTACA QUE SE CONDENSAN DOS MOLECULAS Y DA ORIGEN A UNA

CADENA DE 30 CARBONOS DE 6 ENLACES DOBLES.
 CUARTA ETAPA CICLIZACIÓN DE ESCUALENO –
COLESTEROL

Son 6 reacciones, depende del NADPH pero en varias circunstancias este puede
comienza OXIDADO y termina REDUCIDO, aun así en la mayoría de reacciones
es viceversa.

Hay isomerización, descarboxilación y reducción, que provoca la eliminación de

tres metilos de igual manera, con ello se obtiene el colesterol, una molécula de
27 carbonos, de este la molécula madre que es un conjunto de varios anillos, 3
de 6 lados y uno de 5 lados se conoce como ciclopentanoperhidrofenantreno,
esta es la que da origen a diversas hormonas esteroideas, o sea tienen en común
esta molécula madre, de esta sale también la vitamina D.
 TIPO DE COFACTOR O
SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO
REACCIÓN COENZIMA
Irreversible
Óxido de
Escualeno + O2 + Escualeno Redox Cofactor
escualeno + H2O
NADPH + H+ monooxigenasa Oxidación coenzima: NAD
+ NADP+
Deshidratación

Óxido de 2,2-oxidoescualeno;
Lanosterol Irreversible --------
escualeno lanosterol ciclasa

14-desmetil Irreversible
Lanosterol + O2 lanosterol + H2O Redox Cofactor
--------
+ NADPH + H+ + NADP+ + Oxidación coenzima: NAD
HCOOH Deshidratación
Irreversible
14-desmetil Zimosterol +
Redox
lanosterol + NADP+ + CO2 + Cofactor
-------- Oxidación
NADPH + H+ + NADH + H+ + coenzima: NAD
Deshidratación
NAD+ + O2 H2O
Descarboxilación
Irreversible
Zimosterol + Desmosterol + Redox Cofactor
Isomerasa
NADPH + H+ +O2 H2O Oxidación coenzima: NAD
Deshidratación

Desmosterol + Colesterol + Irreversible Cofactor

--------
NADPH + H+ NADP+ Redox coenzima: NAD
PRIMERA ETAPA SEGUNDA
SINTESIS DEL ETAPA
MEVALONATO CONVERSIÓN

TERCERA ETAPA FORMACIÓN

DEL ESCUALENO

CUARTA ETAPA
CICLIZACIÓN DE
ESCUALENO –
COLESTEROL
 TRANSPORTE DEL COLESTEROL
Se transporta por medio de las lipoproteínas, las LDL, IDL, HDL, VLDL y
quilomicrones.

EL COLESTEROL BONDADOSO ES EL HDL

ELIMINACIÓN DEL COLESTEROL

CUANDO EL COLESTEROL CUMPLE SUS FUNCIONES ESTA SE DEGRADA
A OTRAS MOLECULAS, COMO LO SON LAS SALES O ÁCIDOS BILIARES.

Los ácidos biliares formados pueden ser primarios y secundarios, los primeros
son aquellos que se sintetizan en el hígado a partir de colesterol, se trata del
ácido cólico (que se encuentra en la mayor cantidad) y el ácido
quenodesoxicólico. En cambio, los secundarios provienen de los ácidos biliares
primarios ya que a la hora que se metabolizan más en el intestino mediante la
actividad de las bacterias intestinales. Así, ocurren desconjugación y 7α-
deshidroxilación, lo que produce los ácidos biliares secundarios, ácido
desoxicólico y ácido litocólico.
 PRIMARIOS

SECUNDARIOS
 HORMONAS ESTEROIDEAS
ASIMISMO, EL COLESTEROL PUEDEN SINTETIZAR HORMONAS
SEXUALES, PARA ELLO SE NECESITA NIVELES ADECUADOS DE ESTE.

El colesterol es el precursor de todas las hormonas esteroideas Los mamíferos

producen muchas hormonas esteroideas, algunas de la cuales difieren solo por
un doble enlace o por la orientación de un grupo hidroxilo. En consecuencia, ha
sido necesaria una nomenclatura sistemática para detallar las estructuras
exactas.

Existen tres grupos de hormonas esteroideas. Los corticosteroides (también

llamados corticoides) tienen 21 átomos de carbono en la estructura de anillo
básico del pregnano. La pérdida de los dos átomos de carbono de la cadena lateral
del colesterol da lugar al anillo androstano y al grupo de hormonas denominadas
ANDRÓGENOS. Finalmente, la pérdida del grupo metilo en el átomo de carbono
19 como parte de la aromatización del anillo A, da como resultado la estructura
de estrano que se encuentra en los ESTRÓGENOS. La presencia y posición de
los dobles enlaces y la posición y orientación de los grupos funcionales en el
núcleo básico son características de cada una de las hormonas.

LA SÍNTESIS DE HORMONAS ESTEROIDEAS TIENE LUGAR EN TRES

ÓRGANOS: LA CORTEZA SUPRARRENAL, LOS TESTÍCULOS Y LOS
OVARIOS.
 EN RESUMEN, DE LA BIOSÍNTESIS DEL
COLESTEROL
EL COLESTEROL SE SINTETIZA A PARTIR DEL ACETIL-COENZIMA A.

El hígado es el lugar principal para su síntesis, mientras que, en el intestino,

la corteza suprarrenal y las gónadas se sintetizan cantidades menores. CASI
TODAS LAS CÉLULAS HUMANAS TIENEN LA CAPACIDAD DE
SINTETIZAR COLESTEROL.

Se requiere una fuente de átomos de carbono, una fuente de poder reductor

y cantidades significativas de energía procedente del ATP. El acetil-coenzima
A (acetil-CoA) proporciona un punto de partida de alta energía. Puede proceder
de diferentes fuentes, incluida la B-oxidación de ácidos grasos de cadena
larga, la deshidrogenación del piruvato y la oxidación de aminoácidos
cetogénicos como leucina e isoleucina. El poder reductor lo proporciona la
nicotinamida adenina dinucleótido fosfato reducida (NADPH), que se genera
en la viade las pentosas fosfato.

En general, la producción de 1 mol de colesterol requiere 18 moles de acetil-CoA

(2 Acetil CoA), 36 moles de ATP y 16 moles de NADPH. Todas las reacciones
biosintéticas tienen lugar en el citoplasma. aunque algunas requieren enzimas que
se encuentran unidas a las membranas del retículo endoplásmico.
 Síntesis
DEL GRUPO HEMO
LAS PORFIRIAS.

En 1985, el bioquímico, el Dr. David Dolphin relaciono el vampirismo con las

porfirias, como en el caso de Drácula, que no se podía exponer a la luz, debido a
ello.

Es el componente de la hemoglobina, mioglobina y citocromos.

Este grupo se sintetiza principalmente en el hígado, por ello se dice que es su

principal fuente no eritrocitaria de su síntesis y en la mayoría de las células de
nuestro organismo también se sintetizan.

El grupo hemo es un porfirina, un compuesto cíclico con 4 anillos pirrólicos, que

permite que el hierro se una a ello, el hierro está en estado +2, y al unirse este
hierro ya se le llama grupo hemo, cuando el hemo se une a una proteína se llama
hemoproteína.

EN PATOLOGÍAS NO NOS REFERIMOS A PORFIRINAS SINO A

PORFIRIAS.

METABOLISMO DEL GRUPO HEMO

LOS REQUERIMIENTOS DE PIRIDOXINA (B6) AUMENTAN
CUANTO MAYOR SEA LA INGESTA DE PROTEÍNAS
El fosfato de piridoxal y la piridoxamina están implicados en más de 100
reacciones del metabolismo de los hidratos de carbono (incluida la reacción de
fosforilación del glucógeno) y de los lípidos, en la síntesis, catabolismo e
interconversión de los aminoácidos y en el metabolismo de las unidades
monocarbonadas.
Se necesita piridoxina para el metabolismo de neurotransmisores como
serotonina y noradrenalina, de la esfingosina, un componente de la esfingomielina
y los esfingolípidos y del grupo hemo. Influye en la función inmunitaria. Debido
a su papel central en el metabolismo de los aminoácidos, los requerimientos de
vitamina B aumentan con la ingestión proteica.

PARA LA SÍNTESIS DEL GRUPO HEMO SE NECESITA LA VITAMINA B6.

PRIMERA REACCIÓN (1A Y 1B)

TIPO DE
SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS
REACCIÓN

α-Amino-β-
Glicina + succinil Irreversible
Ala sintasa cetoadipato + CoA +
CoA
SH
α-Amino-β- δ-Aminolevulinato Irreversible
Ala sintasa
cetoadipato (ALA) + CO2 descarboxilación

ESTE PROCESO SE REALIZA EN LA MITOCONDRIA

 SEGUNDA REACCIÓN

TIPO DE
SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS
REACCIÓN

Porfobilinógeno
Dos moléculas de Ala deshidratasa o Irreversible
(primer precursor
δ-aminolevulinato porfobilinógeno sintasa deshidratación
pirrol) + 2H2O

ESTA REACCIÓN SUCEDE EN EL CITOSOL, CABE DESTACAR QUE LO PUEDE

INHIBIR EL PLOMO.
REACCIONES DE LA 3 A LA 8
No. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO
3 Uroporfirinógeno I
Porfobilinógeno Hidroximetilbilano
sintasa
4 Uroporfirinógeno III
Hidroximetilbilano Uroporfirinógeno III
sintasa
5 Uroporfirinógeno
Uroporfirinógeno III Coproporfirinógeno III
descarboxilasa
6 Coproporfirinógeno
Coproporfirinógeno III Protoporfirinógeno III
oxidasa
7 Protoporfirinógeno
Protoporfirinógeno III Protoporfirina III
oxidasa
8 Protoporfirina III + Fe+2 Ferroquelatasa Hem
9 Hem + Proteínas ----------- Hemoproteínas

SE NECESITA LA ENZIMA FERROQUELATASA PARA DEJAR ENTRAR EL

HIERRO EN ESTADO +2 PARA FORMAR EL GRUPO HEMO.

ALGUNAS HEMOPROTEÍNAS IMPORTANTES

DEFECTOS EN LA SÍNTESIS DEL GRUPO HEMO
 Las porfirias son un grupo de trastornos provocados por deficiencia de
las enzimas implicadas en la síntesis del hem.
 Hay excesiva acumulación y secreción de porfirinas y sus precursores
 Las porfirinas son compuestos químicos que juegan un rol fundamental en
los sistemas vivientes por sus propiedades físicas químicas y biológicas.
 Puede deberse a la falta de coproporfirinógeno oxidasa en la copro-
porfiria hereditaria.
 LA PIA (Porfiria intermitente aguda), es debida a la falta de
hidroximetilbilano sintasa.
 La coproporfiria hereditaria, es debida a la falta de la enzima que
convierte el coproporfirinógeno III en protoporfirinógeno III, la cual es
el coproporfirinógeno oxidasa.
 La Porfiria variegata, es cutánea tarda con fotosensibilidad.
 SÍNTESIS DE LA BILIRRUBINA
La bilirrubina conjugada o indirecta es hidrosoluble, la directa o no conjugada es
no hidrosoluble.

EL GRUPO HEMO SE DEFRADA A BILIRRUBINA.

La ictericia se presenta en valores de MAYORES DE 50 micromoles por litro

o 3 mg/dl

La bilirrubina normal es INFERIOR de 21 micromoles por litro o 1.2 mg/dl.

En el cuerpo se producen diario de 250 a 350 mg diarios.

SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS

Grupo hemo + O2 + Biliverdina + Fe+5 + NADP+ +

HEMO OXIGENASA
NADPH + H H2O + CO2
Biliverdina BILIVERDINA REDUCTASA Bilirrubina
Seguidamente la bilirruvina sigue un proceso de esterificación convirtiéndose en
una sustancia conjugada o directa, SIN ESTA no se puede volver soluble, y lo
hace mezclándose con el ácido glucurónico. Formando así diglucurónico de
bilirrubina o bilirrubina conjugada.

Hay un incremento de la fracción conjugada y hay bilirrubina en sangre y orina.

Hay un exceso de la fracción no conjugada, hay aumento de la concentración

plasmática de bilirrubina total y asimismo se incrementa la bilirrubina en orina.

Aumento de bilirrubina plasmática, debido a un incremento en la fracción

conjugada, el urobilinógeno en orina está aumentada.

PAPEL DEL HÍGADO EN EL METABOLISMO

El hígado tiene un papel central en el metabolismo debido a su situación
anatómica y a sus múltiples funciones bioquímicas. Recibe sangre venosa del
intestino, por lo que todos los productos de la digestión, incluyendo los
fármacos ingeridos y otros xenobióticos tomados por vía oral, llegan al hígado
y pueden metabolizarse antes de entrar en la circulación sistémica. Las
células del parénquima hepático, los hepatocitos, desempeñan una amplia gama
de funciones sintéticas y catabólicas.
El hígado desempeña una función importante en el metabolismo de los hidratos
de carbono, los lípidos y los aminoácidos; en la síntesis y la degradación de
las proteínas plasmáticas, y en el almacenamiento de vitaminas y metales.
También tiene la capacidad de metabolizar y, por tanto, de detoxificar, una
diversidad inmensamente amplia de xenobióticos. El hígado también tiene una
función excretora, por la que los productos de desecho metabólico son
segregados a un sistema ramificado de conductos conocido como árbol biliar,
que a su vez drena en el duodeno; los constituyentes dela bilis se excretan
posteriormente en las heces.

EL HÍGADO ES EL ÓRGANO MÁS GRANDE DEL CUERPO Y POSEE UNA

SUSTANCIAL CAPACIDAD METABÓLICA DE RESERVA.

Una hepatopatía leve puede no causar síntomas, y solamente se manifiesta

si se detectan cambios bioquímicos derivados de dicha enfermedad cuando se
analiza una muestra de sangre en el laboratorio clínico.

Sin embargo, el paciente con una enfermedad hepática lo suficientemente grave

para alterar su metabolismo normal puede presentar una situación clínica crítica.
Las secuelas características de las hepatopatías graves son una pigmentación
amarilla de la piel (ictericia); hematomas con facilidad y sangrado profuso,
con frecuencia por varicosidades de la vasculatura esofágica secundarias a un
aumento de la presión en la circulación portal; distensión abdominal debida a la
acumulación de líquido (ascitis); y alteración del nivel de consciencia.

ESTRUCTURA DEL HÍGADO

LA ESTRUCTURA DEL HÍGADO FAVORECE EL INTERCAMBIO DE
METABOLITOS ENTRE LOS HEPATOCITOS Y EL PLASMA

El hígado es el órgano sólido más grande del organismo: en los adultos pesa
aproximadamente 1.500 g. Aproximadamente el 75% de su flujo sanguíneo lo
proporciona la vena porta, que drena la sangre procedente del intestino.

La circulación arterial sistémica aporta el resto de su sangre a través de la

arteria hepática. La sangre que sale del hígado entra en el sistema venoso
sistémico a través de la vena hepática. El componente biliar del hígado consta
de la vesícula biliar y los conductos biliares.

Los sinusoides sanguíneas proceden de las ramas terminales de la vena porta y

se interconectan y se entrecruzan entre los hepatocitos antes de unirse a la
vena lobulillar central, que a su vez desemboca finalmente en la vena hepática.
LOS SINUSOIDES ESTÁN RECUBIERTOS POR DOS TIPOS DE CÉLULAS.

Las primeras son células endoteliales vasculares, que están conectadas entre
sí de manera holgada, dejando numerosos espacios. No existe membrana basal
entre las células endoteliales y los hepatocitos. El segundo tipo de células
sinusoidales, denominadas células de Kupffer, son fagocitos mononucleares;
se encuentran generalmente en los espacios entre las células endoteliales
adyacentes. Estas disposiciones anatómicas facilitan el intercambio de
metabolitos entre el hepatocito y el plasma, y permiten que los hepatocitos
reciban irrigación arterial y que los productos excretados procedentes del
metabolismo hepático destinados a la excreción biliar entren en los conductos
biliares.

HÍGADO Y METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO

EL HÍGADO DESEMPEÑA UNA FUNCIÓN FUNDAMENTAL EN EL
METABOLISMO DE LA GLUCOSA, ESPECIALMENTE EN EL
MANTENIMIENTO DE LA CONCENTRACIÓN CIRCULANTE DE GLUCOSA

La función del hígado en el metabolismo de la glucosa depende de su capacidad

para almacenar una fuente de glucosa en una forma polimerizada, como el
glucógeno, y sintetizar glucosa de novo a partir de fuentes diferentes a los
carbohidratos, fundamentalmente aminoácidos derivados del catabolismo de las
proteínas del cuerpo, a través de gluconeogénesis.

En ayunas, cuando se agotan los depósitos hepáticos de glucógeno, la

gluconeogénesis hepática es crucial para mantener concentraciones
adecuadas de glucosa en la sangre como combustible para aquellos órganos,
y en particular el cerebro, que dependen obligatoriamente de la glucosa como
fuente energética.

SEGÚN LAS CONDICIONES METABÓLICAS, EL HÍGADO PUEDE CAPTAR

O PRODUCIR GLUCOSA

El hígado posee glucosa-6-fosfatasa, que permite la liberación de glucosa

libre a la sangre. Aunque los músculos almacenan más glucógeno que el
hígado, no poseen glucosa-6-fosfatasa y, por tanto, no pueden contribuir
directamente a aportar glucosa a la sangre.
El riñón, por otro lado, posee la capacidad de sintetizar glucosa-6 fosfato
de novo mediante la gluconeogénesis y posee actividad glucosa-6- fosfatasa,
pero cuantitativamente contribuye mucho menos que el hígado. Además, el
riñón no almacena glucógeno.

El hígado del adulto en estado de ayuno libera alrededor de 9 g de glucosa por

hora a la sangre para mantener la concentración de glucosa en sangre.

Los sustratos para la gluconeogénesis proceden del lactato liberado por

glucólisis en los tejidos periféricos y de la desaminación hepática de los
aminoácidos (fundamentalmente alanina) generados por la proteólisis del músculo
esquelético.

HÍGADO Y METABOLISMO DE LAS PROTEÍNAS

LA MAYORÍA DE LAS PROTEÍNAS PLASMÁTICAS SE SINTETIZAN EN
EL HÍGADO

La enfermedad hepatocelular puede alterar la síntesis de proteínas, tanto

cuantitativa como cualitativamente.

LA ALBÚMINA ES LA PROTEÍNA MÁS ABUNDANTE EN LA SANGRE Y SE

SINTETIZA EXCLUSIVAMENTE EN EL HÍGADO

En la enfermedad hepática es frecuente que existan concentraciones bajas de

albúmina. Sin embargo, no es un buen índice de la función de síntesis hepática
porque en la enfermedad sistémica (que acompaña a menudo a las hepatopatías)
está aumentada la permeabilidad endotelial vascular, lo cual permite la salida de
albúmina hacia el espacio intersticial.

UN ÍNDICE MÁS PRECISO DE LA FUNCIÓN DE SÍNTESIS DEL

HEPATOCITO ES LA PRODUCCIÓN DE LOS FACTORES DE LA
COAGULACIÓN II, VII, IX Y X

Todos los factores de la coagulación experimentan una gamma-carboxilación

postraduccional de residuos glutamil específicos, lo que les permite unirse al
calcio. Como grupo, su concentración funcional puede valorarse fácilmente en el
laboratorio mediante la determinación del tiempo de protrombina (TP).

El hígado también sintetiza la mayor parte de las globulinas α y β

plasmáticas. Sus concentraciones plasmáticas cambian en la enfermedad
hepática y en la enfermedad sistémica; en el último caso, estos cambios forman
parte de la respuesta de fase aguda.
La respuesta a una agresión aguda se asocia con amplios cambios en la síntesis
hepática de proteínas. El hígado sintetiza una serie de «proteínas de fase
aguda», que se han definido como aquellas cuyas concentraciones plasmáticas
varían en más de un 25% en la semana posterior al inicio de un proceso
inflamatorio o infeccioso. La producción de estas proteínas es estimulada por
citocinas proinflamatorias liberadas por los macrófagos y, de ellas, la
interleucina-1 (IL-1), la IL-6 y el factor de necrosis tumoral (TNF) tienen
un papel fundamental.

Las proteínas de fase aguda tienen distintas funciones. Las proteínas de unión,
opsoninas, como la proteína C reactiva, se unen a macromoléculas liberadas por
el tejido dañado o por microorganismos infecciosos y favorecen su fagocitosis.

Los factores del complemento facilitan la fagocitosis de las moléculas extrañas.

Los inhibidores de proteasas, como la α1-antitripsina y la α1-
antiquimiotripsina, inhiben las enzimas proteolíticas. Estas dos últimas también
favorecen el crecimiento de los fibroblastos y la producción del tejido
conjuntivo necesario para reparar y curar la lesión.

Se necesita un aporte importante de aminoácidos como sustratos para este

incremento de la síntesis de proteínas hepáticas y estos aminoácidos proceden
de la proteólisis del músculo esquelético. El TNF y la IL-1 de nuevo están
implicados al estimular la degradación de proteínas intracelulares específicas
por el sistema ubiquitinaproteasoma.

Degradación proteica por el sistema ubiquitina-

proteasoma
LA UBIQUITINA MARCA A PROTEÍNAS INTRACELULARES PARA LA
DEGRADACIÓN PROTEASOMAL

El recambio de las proteínas hepáticas está muy regulado, lo que permite que la
actividad de las vías metabólicas se adapte a circunstancias fisiológicas
cambiantes. Las células de los mamíferos poseen varios sistemas proteolíticos.
Las proteínas plasmáticas y los receptores de membrana sufren un proceso
de endocitosis, para luego ser hidrolizados por proteasas ácidas dentro de
los lisosomas. Las proteínas intracelulares, por otro Lado, son degradadas
dentro de estructuras conocidas como proteasomas por el llamado sistema
ubiquitina-proteasoma (UPS).
 ELIMINACIÓN DEL NITRÓGENO
EL CICLO DE LA UREA ES ESENCIAL PARA LA ELIMINACIÓN DE
NITRÓGENO GENERADO POR EL METABOLISMO DE LOS AMINOÁCIDOS

El catabolismo de los aminoácidos genera amoníaco (NH3 ) e iones amonio

(NH4 + ).

El amoníaco es tóxico, especialmente para el sistema nervioso central (SNC). La

mayor parte del amoníaco es detoxificado en su lugar de formación, por
amidación de glutamato a glutamina, que deriva principalmente del músculo y es
empleada como fuente de energía por los enterocitos. El nitrógeno restante
entra en la vena porta como amoníaco o como alanina, y ambos son utilizados
por el hígado para la síntesis de urea.

LA ALTERACIÓN DE LA ELIMINACIÓN DE AMONÍACO CAUSA LESIÓN

CEREBRAL

El ciclo de la urea es la principal vía por la que se excreta el nitrógeno de

desecho. En los recién nacidos, los defectos hereditarios de cualquiera de las
enzimas del ciclo de la urea dan lugar a hiperamoniemia, que afecta a la
función cerebral causando encefalopatía. Estos problemas aparecen en las
primeras 48 horas de vida e inevitablemente empeoran por alimentos ricos en
proteínas como la leche.

SÍNTESIS DEL GRUPO HEMO

EL GRUPO HEMO ES UN COMPONENTE DE LA HEMOGLOBINA, LA
MIOGLOBINA Y LOS CITOCROMOS

 El grupo hemo se sintetiza en la mayoría de las células del organismo.

 El hígado es la principal fuente no eritrocitaria de su síntesis.
 El grupo hemo es una porfirina, un compuesto cíclico que contiene 4 anillos
pirrólicos unidos entre sí por puentes metenilo.

Se sintetiza a partir de glicina y succinil-coenzima A, que se condensan para

formar 5- aminolevulinato (5-ALA). Esta reacción está catalizada por la 5-ALA
sintasa, localizada en las mitocondrias, y es la etapa limitante en la síntesis del
grupo hemo. Posteriormente, en el citosol, dos moléculas de 5-ALA se condensan
para formar una molécula que contiene un anillo pirrólico, el porfobilinógeno
(PBG). Luego, cuatro moléculas de PBG se combinan para formar un compuesto
tetrapirrólico lineal que posteriormente se cicla y da lugar a uroporfirinógeno
III y después a coproporfirinógeno III.

Las etapas finales de la vía suceden de nuevo en las mitocondrias, donde una
serie de descarboxilaciones y oxidaciones de las cadenas laterales de
uroporfirinógeno III dan lugar a protoporfirina IX. En la fase final, el hierro
(Fe 2+ ) es añadido por la ferroquelatasa a la protoporfirina IX para formar el
grupo hemo. El grupo hemo controla la velocidad de su propia síntesis
inhibiendo retroactivamente a la 5-ALA sintasa.

PORFIRIAS
Los defectos en la vía de la síntesis del grupo hemo dan lugar a
enfermedades infrecuentes que se denominan porfirias. Hay diversas
porfirias causadas por deficiencias de diversas enzimas en la vía biosintética,
empezando por la 5-ALA sintetasa y acabando por la ferroquelatasa.

Las porfirias se clasifican como hepáticas o eritropoyéticas, según el principal

órgano afectado. Hay tres porfirias que se conocen como porfirias agudas y
que pueden ser causa de ingreso hospitalario de urgencia por dolor abdominal.

 Además, provocan síntomas neuropsiquiátricos. La porfiria

intermitente aguda (PIA) está causada por una deficiencia de
hidroximetilbilano sintasa, una enzima que convierte el PBG en un
tetrapirrol lineal: en esta enfermedad, las concentraciones de 5-ALA y de
PBG aumentan en el plasma y en la orina.
 La coproporfiria hereditaria se debe a un defecto en la conversión
de coproporfirinógeno III a protoporfirinógeno III (coprooxidasa).
 La tercera forma de porfiria aguda es la porfiria variegata, cuyas
manifestaciones clínicas son muy similares a las de la PIA.

Otras porfirias, como la porfiria cutánea tarda, se manifiestan

clínicamente como una sensibilidad de la piel a la luz (fotosensibilidad) que
puede causar desfiguración y cicatrices.

ADEMÁS, LA VÍA ES INHIBIDA POR EL PLOMO EN LA ETAPA DE LA

PORFOBILINÓGENO SINTASA.
 METABOLISMO DE LA BILIRRUBINA
EL EXCESO DE BILIRRUBINA CAUSA ICTERICIA

La bilirrubina es el producto catabólico del grupo hemo.

Aproximadamente el 75% de toda la bilirrubina deriva de la degradación de

la hemoglobina de los hematíes viejos, que son fagocitados por células
mononucleares del bazo, la médula ósea y el hígado (células del sistema
reticuloendotelial).

 En los adultos normales, esto da lugar a una carga diaria de 250-350 mg

de bilirrubina.
 La concentración plasmática normal de bilirrubina es inferior a 21 µmol/l
(1,2 mg/dl).
 Las concentraciones elevadas (más de 50 µmol/l o 3 mg/dl) son fáciles de
reconocer clínicamente, porque a esa concentración la bilirrubina
proporciona un color amarillo a la piel y las conjuntivas, lo que se conoce
como ictericia.
 La ictericia es un signo clínico importante de enfermedad hepática
significativa.

LA BILIRRUBINA ES METABOLIZADA POR LOS HEPATOCITOS Y

EXCRETADA EN LA BILIS

Mientras que la biliverdina es hidrosoluble, la bilirrubina, paradójicamente, no lo

es y, por tanto, debe seguir metabolizándose antes de su excreción.

La bilirrubina producida por el catabolismo del grupo hemo en las células

reticuloendoteliales es transportada en el plasma ligada a la albúmina.

La captación hepática de bilirrubina está mediada por un transportador de

membrana, que puede ser inhibido de forma competitiva por otros aniones
orgánicos.

La hidrofilia de la bilirrubina aumenta por esterificación, conocida

normalmente como conjugación, de uno o ambos de sus ácidos carboxílicos de
las cadenas laterales con ácido glucurónico, xilosa o ribosa.

El diéster glucurónido es el principal conjugado y su formación es catalizada por

la uridina difosfato (UDP)-glucuronil transferasa.

La bilirrubina conjugada es hidrosoluble y puede ser segregada después por

el hepatocito a los canalículos biliares.
Si se deteriora este proceso excretor, y el paciente desarrolla ictericia, parte
de la bilirrubina conjugada puede excretarse en la orina, dándole un color
característicamente oscuro.

LA BILIRRUBINA CONJUGADA EN EL INTESTINO ES CATABOLIZADA

POR LAS BACTERIAS PARA FORMAR ESTERCOBILINÓGENO, también
conocido como urobilinógeno fecal, que es un compuesto incoloro.

El estercobilinógeno se oxida a estercobilina (también conocida como urobilina

fecal), que tiene color; LA ESTERCOBILINA es el principal responsable del color
de las heces.

Una pequeña parte de la estercobilina puede ser reabsorbida del intestino y

puede ser excretada después de nuevo por el hígado o los riñones.

Cuando se altera la excreción biliar de la bilirrubina conjugada por una patología

que obstruya el flujo de la bilis hacia el intestino (ictericia obstructiva), no se
forma estercobilinógeno/estercobilina, y las deposiciones tienen un color pálido.

Metabolismo de los ácidos biliares y del

colesterol
Los ácidos biliares son elementos clave en el metabolismo de las grasas.

Los ácidos biliares se sintetizan en los hepatocitos y tienen un efecto similar a

un detergente en la luz intestinal al solubilizar los lípidos biliares y emulsionar
la grasa de la dieta en el intestino para facilitar su digestión.

LA EXCRECIÓN BILIAR TAMBIÉN ES LA ÚNICA RUTA POR LA QUE

PUEDE ELIMINARSE EL COLESTEROL DEL CUERPO.
Señales
CELULARES
LAS SEÑALES CELULARES SON PROCESADAS POR:

 Receptores específicos (ya que no cualquier receptor impuesto por las

células responde a un estímulo)
 Elementos efectores (permiten identificar las señales)
 Proteínas reguladoras (su función es importante a nivel celular)

LAS CÉLULAS:

 Reconocen (tiene la capacidad de reconocer que tipo de señal es)

 Responden
 Integran
 Pueden recibir múltiples señales diferentes procedentes de su entorno.
 Todo el proceso lo realiza a una gran rapidez.

ESTAS SEÑALES PUEDEN SER:

Involucran hormonas que son producidas en cualquier localización, a una cierta

distancia de sus lugares de acción.

Como involucran hormonas, estas viajan por la sangre o por el torrente

sanguíneo hasta llegar a una célula diana que está lejos del lugar de donde
se produjo la hormona.
Señales generadas localmente cerca de la célula diana, las células no están
unidas, pero están cerca.

Las señales son generadas por la célula diana propiamente dicha, o sea, la señal
es producida por la célula para ella misma.

Las señales procedentes de células en contacto físico con la célula diana, o sea,
para comunicarse las células entran en un contacto muy cercano con la célula que
va responder al estímulo.
Son señales apolares, o sea, son indiferentes al agua u también afines a la grasa,
estas señales junto con las moléculas pequeñas pueden atravesar la membrana
plasmática y ejercer efectos a través de receptores en el interior de la célula,
y ejercen esos efectos por medio de receptores dentro de la célula.

Son señales polares, amigas al agua e indiferentes a la grasa, estas señales no

son capaces de atravesar la membrana lipídica de las células, para ello necesitan
receptores en la superficie de la membrana celular específicos.

EN CUALQUIER CASO, SEA HIDROFÓBICA O HIDROFÍLICA,

CADA SEÑAL ES PERCIBIDA Y PROCESADA POR LA CÉLULA.
Cada señal es percibida y procesada por medio de unidades funcionales de
transducción de señales celulares, que constan de receptores específicos para:

 Detectar
 Amplificar
 Integrar

Y así dar una respuesta, de una manera inmediata, esto también puede alterar
procesos celulares o metabólicos.

RECEPTORES
Los receptores de superficie celular perciben y trasmiten señales específicas,
mediante un acoplamiento transmembrana a sistemas enzimáticas efectores,
incluyendo a generación de segundos mensajeros.

Uno de estos segundos mensajeros es el AMPc así de igual manera el ácido

araquidónico, este último regula enzimas como las fosfolipasas y las proteínas
cinasas.
AINES (ANTIINFLAMATORIOS)
EL ÁCIDO ARAQUIDÓNICO ES UN SEGUNDO MENSAJERO QUE REGULA
FOSFOLIPASAS Y PROTEÍNA CINASAS

El ácido araquidónico es un ácido graso poliinsaturado de 20 carbonos que

contiene cuatro enlaces dobles. Se ha demostrado que un aumento en la síntesis
de ácido araquidónico regula varias enzimas de señalización, como la PLC y las
isoformas convencionales de la PKC. Además, el ácido araquidónico es un
intermediario fundamental de la inflamación. El ácido araquidónico es sintetizado
por varias enzimas PLA2, como la PLA2 citosólica, que está regulada por calcio y
por fosforilación de proteínas cinasas y la PLA2 secretada, que es la responsable
principal de las acciones inflamatorias del ácido araquidónico.

EL ÁCIDO ARAQUIDÓNICO ES EL PRECURSOR DE LOS ICOSANOIDES

Como mediador clave de la inflamación, el ácido araquidónico es el precursor

principal del grupo de moléculas denominadas icosanoides, que comprenden las
prostaglandinas, las prostaciclinas, los tromboxanos y los leucotrienos. Los
icosanoides utilizan GPCR en sus procesos de señalización y poseen una amplia
gama de actividades biológicas, como la modulación de la contracción del músculo
liso vascular, la agregación plaquetaria, la secreción de ácido gástrico y el
equilibrio hidroelectrolítico, además de actuar como mediadores en el dolor y en
las respuestas inflamatorias.

Las prostaglandinas, las prostaciclinas y los tromboxanos se sintetizan en las

membranas a partir del ácido araquidónico por la acción sucesiva de varias
enzimas, empezando por la ciclooxigenasa.

LOS AINES, SON UNA FAMILIA DE MEDICAMENTOS, ESTAS SIGLAS

SIGNIFICAN:

 Analgésicos (PARA EL DOLOR)

 Antipiréticos (PARA LA FIEBRE)
 Antiinflamatorios (PARA LA INFLAMACIÓN)

SON NO ESTEROIDEOS
Entre estos medicamentos encontramos el ácido acetil salicílico
(ASA o aspirina), Ibuproben, naproxeno y diclofenaco.
Otros al igual, como el acetaminofén (paracetamol) el cual es más
antipirético, ibuprofen y naproxeno son más indicados para la
inflamación, o sea son más antiinflamatorios. Ahora bien, la aspirina
tiene l función de deshacer trombos sanguíneos.
COMO SABEMOS EL ÁCIDO ARAQUIDÓNICO ES PROCURSOR DE LAS
PROSTAGLANDINAS Y TROMBOXANO, A PARTIR DE LA ENZIMA
CICLOOXIGENASA DE ÁCIDOS GRASOS.

Y el efecto de los AINES es inhibir la síntesis de estas prostaglandinas y

tromboxano a través de la inhibición de la enzima ciclooxigenasa (COX),
propiciando la disminución de prostaglandinas y tromboxanos a partir del ácido
araquidónico.

Tienen propiedades antiinflamatorias, analgésicas y antipiréticas como lo

antes mencionado.

EL ACETAMINOFEN ES ANTIINFLAMATORIO, ANTIPIRÉTICO Y

ANALGÉSICO, PERO ES MÁS ANTIPIRÉTICO.

El proceso inflamatorio se lleva a partir de las prostaglandinas (también ayudan

en la fertilidad sexual y asimismo se encuentran en el tubo digestivo para evitar
la irritación por medio de la mucosa gástrica) y las tromboxanos forman trombos.

LOS EFECTOS ADVERSOS DE LOS AINES SON PROBLEMAS GÁSTRICOS,

DEBIDO A LA DISMINUCIÓN DE PROSTAGLANDINAS.

EL ÁCIDO ARAQUIDÓNICO ES UN SEGUNDO MENSAJERO QUE

REGULA LA FOSFOLIPASA Y PROTEÍNA CINASA
 PREGUNTAS SOBRE EL ÁCIDO ARAQUIDÓNICO
1. El ácido araquidónico es una molécula que posee 20 átomos de carbono. En la
estructura que describe el ácido araquidónico, enumere los 20 carbonos.

9 8 6 5 3

1
7 4 2
10
0
13 16 18 20
11 12 14 15 17 19

2. En la estructura del ácido araquidónico señale los 4 enlaces dobles.

Los enlaces dobles están encerrados en un círculo rojo

3. Se ha demostrado que un aumento en la síntesis de ácido araquidónico regula

varias enzimas de señalización. ¿cuáles son?

La PLC (Fosfolipasa C) y las isoformas convencionales de la PKC (proteína

cinasa C)

4. ¿El ácido araquidónico es un intermediario fundamental en qué proceso?

En el proceso de inflamación.

5. Mencione 2 enzimas que sintetizan el ácido araquidónico.

La PLA2 citosólica y la PLA2 secretada.

6. ¿De qué substancias es precursor el ácido araquidónico?

De los icosanoides.

7. ¿Qué moléculas comprenden los eicosanoides?

Las prostaglandinas, las prostaciclinas, los tromboxanos y los leucotrienos.

8. ¿Los eicosanoides qué actividades biológicas poseen?

La modulación de la contracción del músculo liso vascular, la agregación

plaquetaria, la secreción de ácido gástrico y el equilibrio hidroelectrolítico,
además de actuar como mediadores en el dolor y en las respuestas
inflamatorias.

9. ¿Las prostaglandinas, prostaciclinas, tromboxanos y leucotrienos se sintetizan

en las membranas a partir de qué substancias?

Del ácido araquidónico por la acción sucesiva de varias enzimas, empezando

por la ciclooxigenasa.

10. Indique el nombre de las enzimas que participan en el sistema de eicosanoides.

Ciclooxigenasa, peroxidasa, TXA2 sintasa, PGL2 sintasa y Prostaglandina

endoperoxidasa E isomerasa

11. Elabore las estructuras químicas de Prostaglandinas, Prostaciclinas,

Tromboxanos y Leucotrienos.

PROSTAGLANDINA

PROSTACICLINA
TROMBOXANO

LEUCOTRIENO
 Bioseguridad
DIRECTRICES EN MATERIA DE
BIOSEGURIDAD
Evaluación del riesgo microbiológico
El pilar de la práctica de la bioseguridad es la evaluación del riesgo.
Aunque existen muchas herramientas para ayudar a evaluar el riesgo que
comporta un procedimiento o un experimento determinado, el componente más
importante es el juicio profesional.

Las evaluaciones del riesgo deben ser efectuadas por las personas que mejor
conozcan las características peculiares de los organismos con los que se va
a trabajar, el equipo y los procedimientos que van a emplearse, los modelos
animales que pueden utilizarse y el equipo y los medios de contención disponibles.

El director o investigador principal del laboratorio es el responsable de

asegurar que se realicen de modo oportuno las evaluaciones del riesgo más
apropiadas y de colaborar estrechamente con el comité de seguridad y el
personal de bioseguridad de la institución con el fin de velar por que se disponga
del equipo y los medios apropiados para el trabajo que está previsto llevar a
cabo.

Una vez terminadas, las evaluaciones del riesgo deben ser consultadas
periódicamente y revisadas cada vez que sea preciso, teniendo en cuenta la
obtención de nuevos datos que tengan alguna influencia en el grado de riesgo y
toda nueva información pertinente que aparezca en las publicaciones científicas.

Una de las herramientas más útiles de que se dispone para llevar a cabo una
evaluación del riesgo microbiológico es la asignación de los agentes
microbiológicos a uno de los grupos de riesgo. Sin embargo, la mera consulta
del grupo de riesgo a que pertenece cierto agente no basta para realizar una
evaluación del riesgo.

Otros factores que hay que tener en cuenta, según proceda, son los siguientes:

1. La patogenicidad del agente y la dosis infectiva.

2. El resultado potencial de la exposición.
3. La vía natural de infección.
4. Otras vías de infección, derivadas de manipulaciones en el laboratorio
(parenteral, aérea, por ingestión).
5. La estabilidad del agente en el ambiente.
6. La concentración del agente y el volumen del material concentrado que
va a manipularse.
7. La presencia de un huésped apropiado (personas o animales).
8. La información disponible procedente de estudios en animales y de
notificaciones de infecciones adquiridas en el laboratorio o de informes
clínicos.
9. La actividad prevista en el laboratorio (tratamiento con ultrasonidos,
producción de aerosoles, centrifugación, entre otras).
10. Toda manipulación genética del microorganismo que pueda ampliar su
gama de huéspedes o su sensibilidad a los regímenes terapéuticos
eficaces conocidos.
11. Disponibilidad local de intervenciones profilácticas o terapéuticas
eficaces.

Sobre la base de la información obtenida durante la evaluación de riesgos, se

podrá asignar un nivel de bioseguridad al trabajo previsto, seleccionar el
equipo de protección apropiado para el personal, y elaborar procedimientos
normalizados de trabajo que incorporen otras intervenciones de seguridad con
el fin de velar por la máxima seguridad en la realización del trabajo.

Muestras para las que se dispone de información

limitada
El procedimiento de evaluación del riesgo descrito anteriormente funciona bien
cuando se dispone de información suficiente. Sin embargo, en algunas situaciones
no hay información suficiente para llevar a cabo una evaluación apropiada de los
riesgos, como ocurre con las muestras clínicas o epidemiológicas recogidas sobre
el terreno. En esos casos, conviene que la manipulación de las muestras se realice
con prudencia.
 1. Deben adoptarse precauciones normalizadas y emplearse protecciones
de barrera (guantes, batas, protección ocular) cada vez que se obtengan
muestras de pacientes.
2. Las prácticas y los procedimientos básicos de contención del nivel de
bioseguridad 2 deben ser el requisito mínimo para la manipulación de
muestras.
3. El transporte de muestras debe respetar las normas y reglamentos
nacionales o internacionales.

Quizá se disponga de alguna información que ayude a determinar el riesgo que

entraña manipular esas muestras:

1. Datos médicos sobre el paciente.

2. Datos epidemiológicos (datos de morbilidad y mortalidad, presunta vía de
transmisión, otros datos de la investigación de brotes).
3. Información sobre el origen geográfico de la muestra.

Si se producen brotes de enfermedad de etiología desconocida, las

autoridades nacionales competentes o la OMS pueden elaborar directrices
particulares apropiadas que publicarán en la Web (como se hizo en 2003 en el
caso del síndrome respiratorio agudo severo) para indicar cómo deben
prepararse las muestras para el transporte y en qué nivel de bioseguridad deben
analizarse.

Laboratorios básicos niveles de

bioseguridad 1 y 2
Aunque algunas precauciones pueden parecer innecesarias para algunos
organismos del grupo de riesgo 1, son convenientes con fines de
capacitación, para fomentar el uso de técnicas microbiológicas apropiadas
(es decir, seguras).

Todos los laboratorios de diagnóstico y de atención de salud (de salud pública,

clínicos o de hospital) deben estar diseñados para cumplir, como mínimo, los
requisitos del nivel de bioseguridad 2.

Dado que ningún laboratorio puede ejercer un control absoluto sobre las
muestras que recibe, el personal puede verse expuesto a organismos de grupos
de riesgo más altos de lo previsto.
Esa posibilidad debe tenerse presente en la elaboración de los planes y las
políticas de seguridad.

En algunos países se exige que los laboratorios clínicos estén acreditados. En

general, siempre deben adoptarse y aplicarse las precauciones normalizadas.

CÓDIGO DE PRÁCTICAS
Este código es una enumeración de las prácticas y los procedimientos de
laboratorio esenciales que constituyen la base de las técnicas microbiológicas
apropiadas.

En muchos laboratorios y programas nacionales, este código puede utilizarse

para elaborar una guía escrita de prácticas y procedimientos para el trabajo
de laboratorio en condiciones de seguridad.

Cada laboratorio debe adoptar un manual de seguridad o de trabajo en el que se

identifiquen los riesgos conocidos y potenciales y se especifiquen las prácticas
y los procedimientos encaminados a eliminar o reducir al mínimo esos riesgos.
Las técnicas microbiológicas apropiadas son fundamentales para la seguridad
en el laboratorio y no pueden sustituirse por equipo de laboratorio
especializado, que no pasa de ser un complemento.

A CONTINUACIÓN, SE EXPONEN LOS CONCEPTOS MÁS

IMPORTANTES.

Acceso
1. El símbolo y signo internacional de peligro biológico, deberá colocarse
en las puertas de los locales donde se manipulen microorganismos del
grupo de riesgo 2 o superior.
2. Sólo podrá entrar en las zonas de trabajo del laboratorio el personal
autorizado.
3. Las puertas del laboratorio se mantendrán cerradas.
4. No se autorizará ni permitirá la entrada de niños en las zonas de
trabajo del laboratorio.
5. El acceso a los locales que alberguen animales habrá de autorizarse
especialmente.
6. No se permitirá el acceso al laboratorio de animales que no sean objeto
del trabajo del laboratorio.}
Protección personal
1. Se usarán en todo momento monos, batas o uniformes especiales para
el trabajo en el laboratorio.
2. Se usarán guantes protectores apropiados para todos los
procedimientos que puedan entrañar contacto directo o accidental con
sangre, líquidos corporales y otros materiales potencialmente infecciosos
o animales infectados. Una vez utilizados, los guantes se retirarán de
forma aséptica y a continuación se lavarán las manos.
3. El personal deberá lavarse las manos después de manipular materiales y
animales infecciosos, así como antes de abandonar las zonas de trabajo
del laboratorio.
4. Se usarán gafas de seguridad, viseras u otros dispositivos de protección
cuando sea necesario proteger los ojos y el rostro de salpicaduras,
impactos y fuentes de radiación ultravioleta artificial.
5. Estará prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio,
por ejemplo, en cantinas, cafeterías, oficinas, bibliotecas, salas para el
personal y baños.
6. No se usará calzado sin puntera.
7. En las zonas de trabajo estará prohibido comer, beber, fumar, aplicar
cosméticos o manipular lentes de contacto.
8. Estará prohibido almacenar alimentos o bebidas para consumo humano
en las zonas de trabajo del laboratorio.
9. La ropa protectora de laboratorio no se guardará en los mismos
armarios o taquillas que la ropa de calle.

Procedimientos
1. Estará estrictamente prohibido pipetear con la boca.
2. No se colocará ningún material en la boca ni se pasará la lengua por las
etiquetas.
3. Todos los procedimientos técnicos se practicarán de manera que se
reduzca al mínimo la formación de aerosoles y gotículas.
4. Se limitará el uso de jeringuillas y agujas hipodérmicas, que no se
utilizarán en lugar de dispositivos de pipeteo ni con ningún fin distinto de
las inyecciones por vía parenteral o la aspiración de líquidos de los
animales de laboratorio.
 5. Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a
materiales infecciosos se comunicarán al supervisor del laboratorio. Se
mantendrá un registro escrito de esos accidentes e incidentes.
6. Se elaborará y seguirá un procedimiento escrito para la limpieza de
todos los derrames.
7. Los líquidos contaminados deberán descontaminarse (por medios
químicos o físicos) antes de eliminarlos por el colector de saneamiento.
Puede ser necesario un sistema de tratamiento de efluentes, según lo que
indique la evaluación de riesgos del agente con el que se esté trabajando.
8. Los documentos escritos que hayan de salir del laboratorio se
protegerán de la contaminación mientras se encuentren en éste.

Zonas de trabajo del laboratorio

1. El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no
relacionados con el trabajo.
2. Las superficies de trabajo se descontaminarán después de todo
derrame de material potencialmente peligroso y al final de cada jornada
de trabajo.
3. Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados deberán ser
descontaminados antes de eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a
utilizar.
4. El embalaje y el transporte de material deberán seguir la
reglamentación nacional o internacional aplicable.
5. Las ventanas que puedan abrirse estarán equipadas con rejillas que
impidan el paso de artrópodos.

Gestión de la bioseguridad
1. Incumbirá al director del laboratorio (la persona que tiene
responsabilidad inmediata respecto del laboratorio) garantizar la
elaboración y la adopción de un plan de gestión de la bioseguridad y de
un manual de seguridad o de operación.
2. El supervisor del laboratorio (que dependerá del director) velará por
que se proporcione capacitación periódica en materia de seguridad en el
laboratorio.
3. Se informará al personal de los riesgos especiales y se le exigirá que
lea el manual de seguridad o de trabajo y siga las prácticas y los
 procedimientos normalizados. El supervisor del laboratorio se asegurará
de que todo el personal los comprenda debidamente. En el laboratorio
estará disponible una copia del manual de seguridad o de trabajo.
4. Habrá un programa de lucha contra los artrópodos y los roedores.
5. Se ofrecerá a todo el personal en caso de necesidad un servicio
apropiado de evaluación, vigilancia y tratamiento médico, y se mantendrán
los debidos registros médicos.

Diseño e instalaciones del laboratorio

Al diseñar el laboratorio y asignarle determinados tipos de trabajo, se prestará
especial atención a aquellas condiciones que se sepa que plantean problemas de
seguridad. Entre ellas figuran:

1. La formación de aerosoles.
2. El trabajo con grandes cantidades o altas concentraciones de
microorganismos.
3. El exceso de personal o de material.
4. La infestación por roedores y artrópodos.
5. La entrada de personas no autorizadas.
6. El circuito de trabajo: utilización de muestras y reactivos concretos.

Características de diseño
1. Se dispondrá de espacio suficiente para realizar el trabajo de
laboratorio en condiciones de seguridad y para la limpieza y el
mantenimiento.
2. Las paredes, los techos y los suelos serán lisos, fáciles de limpiar,
impermeables a los líquidos y resistentes a los productos químicos y
desinfectantes normalmente utilizados en el laboratorio. Los suelos serán
antideslizantes.
3. Las superficies de trabajo serán impermeables y resistentes a
desinfectantes, ácidos, álcalis, disolventes orgánicos y calor moderado.
4. La iluminación será adecuada para todas las actividades. Se evitarán los
reflejos y brillos molestos.
5. El mobiliario debe ser robusto y debe quedar espacio entre mesas,
armarios y otros muebles, así como debajo de los mismos, a fin de facilitar
la limpieza.
6. Habrá espacio suficiente para guardar los artículos de uso inmediato,
evitando así su acumulación desordenada sobre las mesas de trabajo y en
los pasillos. También debe preverse espacio para el almacenamiento a
largo plazo, convenientemente situado fuera de las zonas de trabajo.
7. Se preverán espacio e instalaciones para la manipulación y el
almacenamiento seguros de disolventes, material radiactivo y gases
comprimidos y licuados.
8. Los locales para guardar la ropa de calle y los objetos personales se
encontrarán fuera de las zonas de trabajo del laboratorio.
9. Los locales para comer y beber y para descansar se dispondrán fuera
de las zonas de trabajo del laboratorio.
10. En cada sala del laboratorio habrá lavabos, a ser posible con agua
corriente, instalados de preferencia cerca de la salida.
11. Las puertas irán provistas de mirillas y estarán debidamente protegidas
contra el fuego; de preferencia se cerrarán automáticamente.
12. En el nivel de bioseguridad 2 se dispondrá de una autoclave u otro
medio de descontaminación debidamente próximo al laboratorio.
13. Los sistemas de seguridad deben comprender medios de protección
contra incendios y emergencias eléctricas, así como duchas para casos
de urgencia y medios para el lavado de los ojos.
14. Hay que prever locales o salas de primeros auxilios, convenientemente
equipados y fácilmente accesibles.
15. Cuando se planifique una nueva instalación, habrá que prever un sistema
mecánico de ventilación que introduzca aire del exterior sin recirculación.
Cuando no se disponga de ventilación mecánica, las ventanas deberán
poder abrirse y, a ser posible, estarán provistas de mosquiteras.
16. Es indispensable contar con un suministro regular de agua de buena
calidad. No debe haber ninguna conexión entre las conducciones de agua
destinada al laboratorio y las del agua de bebida. El sistema de
abastecimiento público de agua estará protegido contra el reflujo por un
dispositivo adecuado.
17. Debe disponerse de un suministro de electricidad seguro y de
suficiente capacidad, así como de un sistema de iluminación de
emergencia que permita salir del laboratorio en condiciones de seguridad.
Conviene contar con un grupo electrógeno de reserva para alimentar el
equipo esencial (estufas, CSB, congeladores, entre otros), así como para
la ventilación de las jaulas de los animales.
18. Es esencial un suministro fiable y adecuado de gas. La instalación debe
ser objeto del debido mantenimiento.
19. Tanto los laboratorios como los locales destinados a los animales son
a veces objeto de actos de vandalismo. Hay que prever sistemas de
protección física y contra incendios. Cabe mejorar la seguridad
reforzando las puertas, protegiendo las ventanas y limitando el número de
llaves en circulación. Se podrán estudiar y aplicar otras medidas, según
proceda, para incrementar la seguridad.

Material de laboratorio
Junto con los procedimientos y prácticas correctos, el uso de material de
seguridad ayudará a reducir los riesgos cuando se trabaje con agentes
biológicos que entrañen peligro.

En la presente sección se exponen los principios fundamentales relacionados

con el material apropiado para los laboratorios de todos los niveles de
bioseguridad. Los requisitos en relación con el material de laboratorio
correspondiente a niveles de bioseguridad más altos se detallan en los
capítulos pertinentes.

Tras consultar con el funcionario de bioseguridad y el comité de seguridad

(en caso de que se haya designado), el director del laboratorio debe velar por
que el material sea apropiado y se utilice debidamente. Para elegir el material
de laboratorio habrá que cerciorarse de que responda a los siguientes
principios generales:

1. Que su diseño permita limitar o evitar los contactos entre el trabajador

y el material infeccioso.
2. Que esté construido con materiales impermeables a los líquidos,
resistentes a la corrosión y acordes con las normas de resistencia
estructural.
3. Que carezca de rebabas, bordes cortantes y partes móviles sin
proteger.
4. Que esté diseñado, construido e instalado con miras a simplificar su
manejo y conservación, así como a facilitar la limpieza, la
descontaminación y las pruebas de certificación; siempre que se pueda, se
evitará el material de vidrio y otro material rompible.
Material de bioseguridad indispensable
1. Dispositivos de pipeteo para evitar que se pipetee con la boca. Existen
muchos modelos diferentes.
2. CSB, que se utilizarán en los siguientes casos:
 Siempre que se manipule material infeccioso; ese material puede
ser centrifugado en el laboratorio ordinario si se utilizan vasos de
centrifugadora con tapas herméticas de seguridad y si éstos se
cargan y descargan en una CSB;
 Cuando haya un alto riesgo de infección transmitida por vía aérea.
 Cuando se utilicen procedimientos con grandes posibilidades de
producir aerosoles, como la centrifugación, trituración,
homogeneización, agitaciones o mezcla vigorosa, desintegración
ultrasónica, apertura de envases de mate riales infecciosos cuya
presión interna pueda diferir de la presión ambiental, inoculación
intranasal a animales y recolección de tejidos infecciosos de animales
y huevos.
3. Asas de siembra de plástico desechables. También pueden utilizarse
incineradores eléctricos de asas dentro de la CSB para reducir la
formación de aerosoles.
4. Frascos y tubos con tapón de rosca.
5. Autoclaves u otros medios apropiados para esterilizar el material
contaminado.
6. Pipetas de Pasteur de plástico desechables, cuando estén disponibles,
en sustitución del vidrio.
7. Los aparatos como las autoclaves y las CSB deben ser validados con
métodos apropiados antes de usarlos. A intervalos periódicos deben ser
nuevamente certificados, de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

Vigilancia médica y sanitaria

La entidad que emplea al personal del laboratorio tiene la obligación de
cerciorarse, por medio del director de éste, de que la salud de dicho personal
esté sometida a la debida vigilancia.

EL OBJETIVO DE ESA VIGILANCIA ES DETECTAR POSIBLES

ENFERMEDADES CONTRAÍDAS DURANTE EL TRABAJO.
Entre las actividades apropiadas para alcanzar ese objetivo figuran las
siguientes:

1. Proporcionar inmunización activa o pasiva cuando esté indicada.

2. Facilitar la detección temprana de infecciones adquiridas en el
laboratorio.
3. Excluir a las personas muy susceptibles (por ejemplo, embarazadas o
personas inmunodeficientes) de las tareas de laboratorio que entrañen
mucho riesgo.
4. Proporcionar material y procedimientos eficaces de protección personal.

NORMAS PARA LA VIGILANCIA DE LOS TRABAJADORES QUE

MANIPULAN MICROORGANISMOS EN EL NIVEL DE BIOSEGURIDAD 1

La experiencia indica que estos microorganismos tienen pocas probabilidades de

provocar enfermedades humanas o enfermedades animales de importancia
veterinaria.

No obstante, lo ideal es someter a todo el personal a un reconocimiento médico

previo a la contratación en el que se anoten los antecedentes médicos de cada
persona. Conviene que se notifiquen rápidamente las enfermedades o accidentes
de laboratorio y que todos los miembros del personal comprendan la importancia
de aplicar técnicas microbiológicas apropiadas.

NORMAS PARA LA VIGILANCIA DE LOS TRABAJADORES QUE

MANIPULAN MICROORGANISMOS EN EL NIVEL DE BIOSEGURIDAD 2

1. El reconocimiento médico previo al empleo o a la asignación de un

puesto es indispensable. Debe registrarse el historial médico de la
persona y realizar una evaluación de la salud ocupacional para los fines del
laboratorio.
2. El director del laboratorio debe mantener un registro de
enfermedades y bajas laborales.
3. Las mujeres en edad fecunda deberán ser informadas de los riesgos
que supone para el feto la exposición profesional a ciertos
microorganismos, como el virus de la rubéola. Las medidas concretas que
se adopten para proteger al feto dependerán de los microorganismos a los
que pueda estar expuesta la mujer.
CAPACITACIÓN
Los errores humanos y las técnicas incorrectas pueden poner en peligro incluso
las mejores medidas destinadas a proteger al personal de laboratorio.

Por esta razón, el elemento clave para prevenir las infecciones adquiridas, los
incidentes y los accidentes en el laboratorio es un personal preocupado por
la seguridad y bien informado sobre la manera de reconocer y combatir los
peligros que entraña su trabajo en ese entorno.

En consecuencia, la formación continua en el servicio acerca de las medidas

de seguridad es primordial. El proceso empieza por el personal directivo, que
debe velar por que los procedimientos y prácticas de seguridad en el laboratorio
formen parte de la capacitación básica de los empleados.

La formación en medidas de seguridad siempre debe estar integrada en la

capacitación inicial de los nuevos empleados. Deben ponerse a disposición del
personal el código de prácticas y las directrices locales, incluido el manual
de seguridad o de operaciones. Se adoptarán medidas para garantizar que los
empleados hayan leído y comprendido las directrices, como pueden ser las
páginas de firmas.

Los supervisores del laboratorio deben desempeñar el papel principal en

la formación de sus subordinados inmediatos acerca de las técnicas correctas
de laboratorio.

EL FUNCIONARIO ENCARGADO DE LA BIOSEGURIDAD PUEDE

COLABORAR EN ESA FORMACIÓN Y CONTRIBUIR A LA ELABORACIÓN
DE MATERIALES Y DOCUMENTOS DE CAPACITACIÓN.

La capacitación del personal debe comprender siempre la enseñanza de métodos

seguros para utilizar procedimientos peligrosos que habitualmente afectan a
todo el personal de laboratorio y que entrañan los siguientes riesgos:

1. Riesgo de inhalación (es decir, formación de aerosoles): uso de asas,

siembra de placas de agar, pipeteo, preparación de frotis, apertura de
recipientes de cultivo, toma de muestras de sangre/suero, centrifugación,
entre otros.
2. Riesgo de ingestión al manipular muestras, frotis y cultivos.
3. Riesgo de inoculación cutánea al emplear jeringuillas y agujas.
4. Riesgo de mordeduras y arañazos en la manipulación de animales.
 5. Manipulación de sangre y otros materiales patológicos potencialmente
peligrosos.
6. Descontaminación y eliminación de material infeccioso.

Manipulación de desechos
SE CONSIDERA DESECHO TODO AQUELLO QUE DEBE DESCARTARSE.

En los laboratorios, la descontaminación y la eliminación de desechos son

operaciones estrechamente relacionadas. En el trabajo cotidiano, son pocos los
materiales contaminados que es preciso retirar del laboratorio o destruir.

La mayor parte de la cristalería, los instrumentos y la ropa del laboratorio vuelve

a utilizarse o se recicla. El principio básico es que todo el material infeccioso
ha de ser descontaminado, esterilizado en autoclave o incinerado en el
laboratorio. Las principales preguntas que hay que hacerse antes de eliminar
cualquier objeto o material de un laboratorio que trabaja con microorganismos
o tejidos animales potencialmente infecciosos son las siguientes:

1. ¿Se han descontaminado o desinfectado realmente los objetos o el

material por un procedimiento aprobado?
2. De lo contrario, ¿se han embalado con un método aprobado para ser
incinerados inmediatamente in situ o transferidos a otro laboratorio que
tenga capacidad para incinerar?
3. ¿Entraña la eliminación de los objetos o materiales descontaminados algún
otro peligro, biológico o de otra clase, para quienes realizan las
operaciones de eliminación inmediata o para quienes puedan entrar en
contacto con los objetos o materiales desechados fuera del recinto del
laboratorio?

Descontaminación
El tratamiento en autoclave de vapor constituye el método de elección para
todos los procesos de descontaminación.

El material destinado a la descontaminación y eliminación debe introducirse en

recipientes (por ejemplo, en bolsas de plástico resistentes al tratamiento en
autoclave) que tengan un código de color para indicar si el contenido ha de pasar
a la autoclave o a la incineración.
Sólo se recurrirá a otros métodos si éstos eliminan o destruyen los
microorganismos.

Procedimientos de manipulación y eliminación

de material y desechos contaminados
Deberá adoptarse un sistema de identificación y separación del material
infeccioso y sus recipientes. Se seguirán las normas nacionales e internacionales
y se tendrán en cuenta las siguientes categorías:

1. Desechos no contaminados (no infecciosos) que puedan reutilizarse o

reciclarse o eliminarse como si fueran «basura» en general.
2. Objetos cortantes y punzantes contaminados (infecciosos): agujas
hipodérmicas, bisturís, cuchillas, vidrio roto; se recogerán siempre en
recipientes a prueba de perforación dotados de tapaderas y serán
tratados como material infeccioso.
3. Material contaminado destinado al tratamiento en autoclave que
después pueda lavarse y volverse a utilizar o reciclarse.
4. Material contaminado destinado al tratamiento en autoclave y a la
eliminación.
5. Material contaminado destinado a la incineración directa.

OBJETOS CORTANTES Y PUNZANTES

Las agujas hipodérmicas no se deben volver a tapar, cortar ni retirar de las
jeringuillas desechables después de utilizarlas. El conjunto completo debe
colocarse en un recipiente de eliminación específico.

Las jeringuillas desechables, utilizadas con o sin aguja, se introducirán en

recipientes de eliminación apropiados y se incinerarán, esterilizándolas
previamente en autoclave si fuera necesario.

Los recipientes de eliminación de objetos cortantes y punzantes serán

resistentes a la perforación y no se llenarán por completo.

Cuando estén llenos en sus tres cuartas partes se colocarán en un recipiente

de «desechos infecciosos» y se incinerarán, esterilizándolos primero en
autoclave si la práctica del laboratorio lo exige. Los recipientes de eliminación
de objetos cortantes y punzantes no se desecharán en vertederos.
MATERIAL CONTAMINADO (POTENCIALMENTE INFECCIOSO)
PARA SER TRATADO EN AUTOCLAVE Y REUTILIZADO
No se efectuará limpieza alguna de ningún material contaminado
(potencialmente infeccioso) que vaya a ser tratado en autoclave y reutilizado.
Cualquier limpieza o reparación que se revele necesaria se realizará siempre
después del paso por la autoclave o la desinfección.

MATERIAL CONTAMINADO (POTENCIALMENTE INFECCIOSO)

PARA SER ELIMINADO
Aparte de los objetos cortantes y punzantes mencionados más arriba, todo el
material contaminado (potencialmente infeccioso) debe ser introducido en
recipientes impermeables (por ejemplo, en bolsas de plástico que resistan el
tratamiento en autoclave marcadas con un código de color) y tratado en
autoclave antes de proceder a su eliminación.

Después de pasar por la autoclave, el material puede colocarse en recipientes

apropiados para ser transportado al incinerador. Si es posible, el material
procedente de actividades relacionadas con la atención sanitaria no debe
desecharse en vertederos, ni siquiera después de haber sido descontaminado.

Si se dispone de un incinerador en el laboratorio, no es necesario el tratamiento

en autoclave: el material contaminado se coloca en recipientes especialmente
marcados (por ejemplo, bolsas con un código de color) y se transporta
directamente al incinerador.

Los recipientes de transporte reutilizables deben ser impermeables y tener

tapas que ajusten debidamente. Se desinfectarán y limpiarán antes de
devolverlos al laboratorio para un uso ulterior. En cada puesto de trabajo
deben colocarse recipientes, tarros o cubetas para desechos, de preferencia
irrompibles (por ejemplo, de plástico).

Cuando se utilicen desinfectantes, los materiales de desecho deben permanecer

en contacto íntimo con éstos (es decir, sin estar protegidos por burbujas de
aire) durante el tiempo apropiado, según el desinfectante que se utilice.

Los recipientes para desechos habrán de ser descontaminados y lavados

antes de su reutilización. La incineración de desechos contaminados deberá
contar con la aprobación de las autoridades encargadas de la salud pública y la
contaminación del aire, así como la del funcionario de bioseguridad del
laboratorio.

SEGURIDAD QUÍMICA, ELÉCTRICA Y RADIOLÓGICA, PROTECCIÓN

CONTRA INCENDIOS Y MATERIAL DE SEGURIDAD
Los incendios o los accidentes de origen químico, eléctrico o radiológico
pueden tener como consecuencia indirecta un fallo de las medidas de
contención de organismos patógenos. Así pues, en cualquier laboratorio de
microbiología es indispensable mantener un nivel elevado de seguridad en esos
aspectos. La promulgación de normas y reglamentos sobre cada una de estas
formas de protección incumbe normalmente a las autoridades nacionales y
locales competentes, cuya ayuda debe recabarse siempre que sea necesario.

EL LABORATORIO DE CONTENCIÓN
NIVEL DE BIOSEGURIDAD 3
El laboratorio de contención – nivel de bioseguridad 3 está concebido e
instalado para trabajar con microorganismos del grupo de riesgo 3, así como
con grandes volúmenes o concentraciones de microorganismos del grupo de
riesgo 2, por entrañar un mayor riesgo de difusión de aerosoles.

Este nivel de contención exige fortalecer los programas de trabajo y de

seguridad correspondientes a los laboratorios básicos – niveles de bioseguridad
1 y 2. Las directrices que se ofrecen en este capítulo se presentan en forma de
adiciones a las enunciadas para los laboratorios básicos – niveles de bioseguridad
1 y 2, que por ello deberán aplicarse antes de las destinadas específicamente al
laboratorio de contención – nivel de bioseguridad 3.

Las principales adiciones y modificaciones se refieren a los siguientes

aspectos:

1. Código de prácticas.
2. Diseño e instalaciones del laboratorio.
3. Vigilancia médica y sanitaria.

Los laboratorios de esta categoría deben figurar en un registro o una lista que
establecerán las autoridades sanitarias nacionales u otra autoridad competente.
Código de prácticas
El código de prácticas de los laboratorios básicos – niveles de bioseguridad 1 y
2 también se aplica en este caso, con las siguientes modificaciones:

1. El símbolo y signo internacional de advertencia de peligro biológico,

expuesto en las puertas de acceso al laboratorio debe especificar el
nivel de bioseguridad y el nombre del supervisor del laboratorio que
controla el acceso a éste, así como indicar cualquier condición especial de
entrada en la zona, como puede ser la inmunización.
2. En el laboratorio se debe llevar ropa protectora apropiada (batas sin
abertura delantera o envolventes, trajes de dos piezas de tipo pijama,
monos, gorros y, si corresponde, protección para el calzado o calzado
especial). No son apropiadas las batas de laboratorio abotonadas por
delante, ni las mangas que no cubran por completo los antebrazos. La ropa
de laboratorio no debe usarse fuera de éste y debe descontaminarse
antes de enviarla a la lavandería. En ciertos casos, como cuando se trabaja
con agentes agrícolas o zoonóticos, está justificado quitarse la ropa de
calle y utilizar ropa de laboratorio especial.
3. Toda manipulación abierta de material potencialmente infeccioso debe
realizarse dentro de una CSB u otro dispositivo de contención primaria.
4. Puede ser necesario utilizar equipo de protección respiratoria para
ciertos procedimientos de laboratorio o para el trabajo con animales que
estén infectados con ciertos agentes patógenos.

Diseño e instalaciones del laboratorio

Las directrices sobre diseño e instalaciones del laboratorio correspondientes a
los laboratorios básicos – niveles de bioseguridad 1 y 2 se aplican también en
este caso, con las siguientes modificaciones:

1. El laboratorio debe estar separado de las zonas del edificio por las
que se puede circular sin restricciones. Puede conseguirse una
separación suplementaria habilitando el laboratorio al fondo de un pasillo
o instalando un tabique con puerta o un sistema de acceso que delimite un
pequeño vestíbulo (por ejemplo, entrada de doble puerta o laboratorio
básico – nivel de bioseguridad 2) destinado a mantener la diferencia de
presiones entre el laboratorio y el espacio adyacente. El vestíbulo debe
 contar con una zona para separar la ropa limpia de la sucia, y también
puede ser necesaria una ducha.
2. Las dobles puertas de acceso al laboratorio deben ser de cierre
automático y disponer de un mecanismo de interbloqueo, de modo que sólo
una de ellas esté abierta al mismo tiempo. Para uso en caso de emergencia
es posible colocar una mampara que se pueda romper.
3. Las superficies de las paredes, suelos y techos deben ser
impermeables y fáciles de limpiar. Todas las aberturas existentes en
esas superficies (por ejemplo, para tuberías de servicio) deben estar
obturadas para facilitar la descontaminación de los locales.
4. La sala del laboratorio debe poderse precintar para proceder a su
descontaminación. Los sistemas de conducción de aire han de estar
construidos de modo que sea factible la descontaminación con gases.
5. Las ventanas deben estar cerradas herméticamente y llevar cristales
resistentes a la rotura.
6. En las inmediaciones de todas las puertas de salida del laboratorio
habrá un lavabo que no necesite ser accionado con la mano.
7. Debe haber un sistema de ventilación que establezca un flujo
direccional hacia el laboratorio. Se instalará un dispositivo de vigilancia
visual, con o sin alarma, para que el personal pueda comprobar en todo
momento que la corriente de aire circula en el sentido deseado.
8. El sistema de ventilación del edificio debe estar construido de modo
que el aire del laboratorio de contención – nivel de bioseguridad 3 no se
dirija a otras zonas del edificio. El aire puede ser filtrado por un sistema
HEPA, reacondicionado y recirculado dentro del laboratorio. Cuando el
aire del laboratorio (no de las CSB) se expulsa directamente al exterior
del edificio, debe dispersarse lejos de los edificios ocupados y de las
tomas de aire. Según los agentes con los que se esté trabajando, ese aire
puede evacuarse a través de filtros HEPA. Puede instalarse un sistema de
control de la calefacción, la ventilación y el aire acondicionado para
impedir una presión positiva sostenida en el laboratorio. Cabe estudiar la
posibilidad de instalar alarmas audibles o claramente visibles para alertar
al personal de posibles fallos del sistema de calefacción, ventilación y aire
acondicionado.
9. Todos los filtros HEPA deberán estar instalados de modo que permitan
la descontaminación con gases y la realización de pruebas.
10. Las CSB deben estar alejadas de las zonas de paso y de los lugares de
cruce de corrientes procedentes de puertas y sistemas de ventilación.
 11. El aire que sale de las CSB de las clases I o II, y que habrá pasado
por filtros HEPA, deberá expulsarse de manera que no se perturbe el
equilibrio del aire en la cámara ni en el sistema de evacuación del edificio.
12. Dentro del laboratorio de contención debe haber una autoclave para
descontaminar el material de desecho infectado. Si hay que sacar ese
material de desecho del laboratorio de contención para su
descontaminación y eliminación, habrá que transportarlo en recipientes
herméticos, irrompibles e impermeables de acuerdo con las normas
nacionales o internacionales, según proceda.
13. El sistema de abastecimiento de agua debe estar dotado de
dispositivos contra el reflujo. Los tubos de vacío deben estar protegidos
con sifones con desinfectante líquido y filtros HEPA o su equivalente. Las
bombas de vacío alternativas también deben estar debidamente
protegidas con sifones y filtros.
14. El diseño de las instalaciones y los procedimientos de trabajo del
laboratorio de contención – nivel de bioseguridad 3 deben estar
documentados.

Material de laboratorio
Los principios aplicables a la selección del material, incluidas las CSB son los
mismos que se enunciaron para el laboratorio básico – nivel de bioseguridad
2, con la excepción de que todas las actividades de manipulación de todo el
material potencialmente infeccioso deben realizarse dentro de una CSB u otro
dispositivo de contención física primaria.

Debe tenerse en cuenta que, si se utilizan aparatos como centrifugadoras, éstas

necesitarán accesorios de contención suplementarios como cubetas de seguridad
o rotores de contención. Algunas centrifugadoras y otro material, como los
separadores de células, destinados al trabajo con células infectadas pueden
necesitar sistemas suplementarios de ventilación y evacuación local con filtros
HEPA para una contención eficiente.

Vigilancia médica y sanitaria

Los objetivos de los programas de vigilancia médica y sanitaria enunciados para
los laboratorios básicos – niveles de bioseguridad 1 y 2 se aplican también a los
labora torios de contención – nivel de bioseguridad 3, con las siguientes
modificaciones:
 1. El reconocimiento médico de todo el personal que trabaja en el
laboratorio de contención – nivel de bioseguridad 3 es obligatorio y
debe comprender una historia clínica detallada y un reconocimiento físico
orientado a la actividad laboral.
2. Una vez pasado el reconocimiento médico con un informe favorable,
se entregará a la persona examinada una tarjeta de contacto médico
en la que se declare que trabaja en un centro que tiene un laboratorio
de contención – nivel de bioseguridad 3. Esa ficha tendrá el tamaño de
un billetero, llevará la fotografía del titular y éste la llevará siempre
consigo. Quienes figurarán como «contacto» en la tarjeta es algo que
tendrá que acordarse en el plano local, pero entre esas personas deben
estar el director del laboratorio, el asesor médico o el funcionario
responsable de la bioseguridad.

EL LABORATORIO DE CONTENCIÓN MÁXIMA

NIVEL DE BIOSEGURIDAD 4
El laboratorio de contención máxima – nivel de bioseguridad 4 está concebido
para trabajar con microorganismos del grupo de riesgo 4.

Antes de construir y poner en funcionamiento un laboratorio de contención

máxima se requiere una labor intensiva de consulta con instituciones que tengan
experiencia en la utilización de instalaciones de este tipo. Los laboratorios de
contención máxima – nivel de bioseguridad 4 en funcionamiento deben estar
sometidos al control de las autoridades sanitarias nacionales, u otras
apropiadas.

La información que sigue tiene como propósito servir solamente como material
de presentación. Las entidades que tengan intención de poner en funcionamiento
un laboratorio de este nivel debe ponerse en contacto con el programa de
Bioseguridad de la OMS para obtener más información.

Código de prácticas
El código de prácticas correspondiente al nivel de bioseguridad 3 se aplica
también a este nivel con las siguientes modificaciones:

1. Hay que aplicar la regla del trabajo realizado por dos personas, en
virtud de la cual ninguna persona debe trabajar sola en el interior del
 laboratorio. Esto es particularmente importante si el trabajo se realiza
con ropa especial del nivel de bioseguridad 4.
2. Al entrar y al salir del laboratorio es imprescindible un cambio
completo de ropa y calzado.
3. El personal debe recibir capacitación en procedimientos de evacuación
de emergencia en caso de que un miembro del personal sufra lesiones o
caiga enfermo.
4. Debe establecerse un método de comunicación entre el personal que
trabaja dentro del laboratorio del nivel de bioseguridad 4 y el personal
de apoyo que se encuentra fuera del laboratorio para la comunicación
ordinaria y de emergencia.

Diseño e instalaciones del laboratorio

Los requisitos del laboratorio de contención – nivel de bioseguridad 3 se aplican
también a los laboratorios de contención máxima – nivel de bioseguridad 4, con
la adición de los siguientes:

1. CONTENCIÓN PRIMARIA.
Debe existir un sistema eficiente de contención primaria que comprenda uno o
más de los siguientes elementos:

 Laboratorio con CSB de clase III. Se exige el paso a través de un

mínimo de dos puertas antes de acceder a la sala que contiene la CSB
de clase III (sala de la cámara). En este diseño de laboratorio la CSB
de clase III proporciona la contención primaria. Es necesaria una ducha
personal con vestuarios interior y exterior. Los utensilios y materiales que
no ingresan en la sala de la cámara a través de la zona de vestuario se
introducen por una autoclave o una cámara de fumigación de doble puerta.
Una vez debidamente cerrada la puerta exterior, el personal que se
encuentra dentro del laboratorio puede abrir la puerta interior para
recoger los materiales. Las puertas de la autoclave o la cámara de
fumigación están diseñadas de tal modo que la puerta exterior no pueda
abrirse a menos que la autoclave haya completado un ciclo de
esterilización o la cámara de fumigación haya sido descontaminada.
 Laboratorio diseñado para trabajar con trajes especiales. El diseño y
las instalaciones de un laboratorio destinado al trabajo con trajes
protectores con respirador autónomo difiere considerablemente de un
 laboratorio de nivel de bioseguridad 4 con CSB de clase III. Las salas
de este tipo de laboratorio están dispuestas de tal manera que se dirige
al personal a través de las zonas de vestuario y descontaminación antes
de entrar en las zonas donde se manipula el material infeccioso. Debe
existir una ducha de descontaminación de trajes, que será utilizada por el
personal antes de abandonar la zona de contención del laboratorio. Habrá
otra ducha personal con vestuarios interior y exterior. El traje especial
será de una pieza, dotado de presión positiva y con suministro de aire
filtrado por HEPA. El aire del traje será suministrado por un sistema que
tenga una capacidad redundante del 100% con una fuente de aire
independiente, para utilizarla en caso de emergencia. La entrada en la
zona del laboratorio destinada al trabajo con trajes especiales se
realizará por una cámara dotada de puertas de cierre hermético. Estos
laboratorios dispondrán de un sistema apropiado de alarma que el personal
pueda utilizar en caso de fallo del sistema mecánico o de aire.
2. ACCESO CONTROLADO.
El laboratorio de contención máxima – nivel de bioseguridad 4 debe estar situado
en un edificio independiente o en una zona claramente delimitada en el interior
de un edificio protegido. La entrada y la salida del personal y de los
suministros se harán a través de cámaras de cierre hermético o sistemas
de caja de paso. Al entrar, el personal se mudará por completo de ropa y al salir
se duchará antes de volver a ponerse la ropa de calle.

3. SISTEMA DE VENTILACIÓN CONTROLADA.

Debe mantenerse la presión negativa dentro de las instalaciones. Tanto el aire
de entrada como el de salida debe pasar por filtros HEPA. Existen diferencias
considerables entre los sistemas de ventilación de los laboratorios con CSB de
clase III y los laboratorios donde hay que trabajar con trajes especiales:

 Laboratorio con cámara biológica de clase III. El aire suministrado a

las CSB de clase III puede proceder del interior de la sala y atravesar un
filtro HEPA montado en la cámara o directamente del sistema de entrada
de aire. El aire evacuado de la CSB de clase III debe atravesar dos filtros
HEPA antes de salir al exterior del edificio. La cámara debe funcionar en
todo momento a presión negativa respecto del laboratorio circundante. Se
 requiere un sistema de ventilación exclusivo que no haga recircular el aire
para el laboratorio.
 Laboratorio diseñado para trabajar con trajes especiales. Se requieren
sistemas exclusivos de suministro y evacuación del aire de la sala. Los
componentes de suministro y evacuación del sistema de ventilación
estarán equilibrados de tal forma que el flujo de aire dentro de la zona
de trabajo con traje protector vaya desde las zonas de menos peligro a
las de mayor peligro. Se necesitan ventiladores extractores redundantes
para garantizar que las instalaciones se mantienen en todo momento a
presión negativa. Deben vigilarse las diferencias de presión dentro del
laboratorio y entre el laboratorio y las zonas adyacentes, así como el flujo
del aire en los componentes de suministro y evacuación del sistema de
ventilación, y debe utilizarse un sistema de control apropiado para impedir
la presurización del laboratorio. El aire suministrado a la zona de trabajo
con trajes especiales y a la ducha y a las cámaras de descontaminación
con cierre hermético debe pasar por filtros HEPA. El aire evacuado del
laboratorio debe atravesar dos filtros HEPA antes de salir al exterior.
Otra posibilidad es que, tras una doble filtración por HEPA, el aire se
recircule, pero sólo dentro del laboratorio; en ninguna circunstancia el
aire evacuado del laboratorio de nivel de bioseguridad 4 diseñado para
trabajar con trajes especiales se reciclará a otras zonas. Debe obrarse
con la máxima precaución si se elige el sistema de recirculación de aire
dentro del laboratorio. Deben tenerse en cuenta los tipos de investigación
que se realicen, el equipo, las sustancias químicas y otros materiales
utilizados, así como las especies de animales que puedan intervenir en la
investigación.

Todos los filtros HEPA serán probados y certificados una vez al año. Los filtros
HEPA estarán instalados de tal modo que permitan su descontaminación in situ
antes de retirarlos. Otra posibilidad es retirar el filtro y colocarlo en un
recipiente primario cerrado y hermético para su ulterior descontaminación y/o
destrucción por incineración.

4. DESCONTAMINACIÓN DE EFLUENTES. Todos los efluentes de la zona de trabajo

con trajes especiales, la cámara y la ducha de descontaminación o la CSB de
clase III serán descontaminados antes de su eliminación definitiva. El método
de elección es el tratamiento térmico. Será necesario corregir el pH de algunos
efluentes antes de evacuarlos. El agua de la ducha personal y los retretes se
puede verter directa mente al alcantarillado sin tratamiento previo.
5. ESTERILIZACIÓN DE LOS DESECHOS Y MATERIALES. La zona del laboratorio
debe contar con una autoclave de doble puerta. Debe disponerse de otros
métodos de descontaminación para aquellos elementos del equipo que no
soporten la esterilización por vapor.
6. ACCESOS CON ENTRADA DE CIERRE HERMÉTICO para muestras, materiales y
animales.
7. DEBEN EXISTIR LÍNEAS DE SUMINISTRO ELÉCTRICO exclusivas y de
emergencia.
8. SE INSTALARÁN SUMIDEROS DE CONTENCIÓN.
Dada la gran complejidad de las características técnicas, el diseño y la
construcción de las instalaciones del nivel de bioseguridad 4, tanto en la
modalidad de CSB como en la de trajes especiales, no se han incluido
representaciones esquemáticas de esas instalaciones. Del mismo modo, la gran
complejidad del trabajo que se lleva a cabo en los laboratorios del nivel de
bioseguridad 4 hace necesario elaborar un manual de trabajo detallado y aparte
que se ensayará en los ejercicios de capacitación. Además, se elaborará un
programa de emergencia.

En la preparación de este programa habrá que contar con la colaboración

activa de las autoridades sanitarias nacionales y locales, y la participación
de otros servicios de emergencia (por ejemplo, bomberos, policía y servicios
hospitalarios)

BIOPROTECCIÓN EN EL LABORATORIO
Conceptos de bioprotección en el laboratorio
En ediciones anteriores, el Manual de bioseguridad en el laboratorio se ha
centrado en las orientaciones tradicionales en materia de seguridad biológica
para los laboratorios. En ellas se hacía hincapié en el uso de prácticas
microbiológicas correctas, el equipo de contención apropiado, el diseño, la
operación y el mantenimiento de las instalaciones, y los aspectos administrativos
para reducir al mínimo el riesgo de lesiones o enfermedades entre el personal.
Con la aplicación de esas recomendaciones, el riesgo para el medio ambiente y
para la comunidad circundante también se reduce al mínimo.
Sin embargo, los acontecimientos mundiales recientes han puesto de relieve la
necesidad de proteger los laboratorios y los materiales que contienen de
acciones que puedan perjudicar a las personas, el ganado, la agricultura o el
medio ambiente.

Antes de definir las necesidades de un laboratorio o un programa en materia de

bioprotección, es preciso definir claramente la distinción entre «seguridad
biológica» y «protección biológica».

«Seguridad biológica» (o «bioseguridad») es el término utilizado para

referirse a los principios, técnicas y prácticas aplicadas con el fin de evitar
la exposición no intencional a patógenos y toxinas, o su liberación accidental.

En cambio, la «protección biológica» (o «bioprotección») se refiere a

las medidas de protección de la institución y del personal destinadas a
reducir el riesgo de pérdida, robo, uso incorrecto, desviaciones o liberación
intencional de patógenos o toxinas.

UN PROGRAMA DE BIOPROTECCIÓN DEBE APOYARSE EN UN PROGRAMA

SÓLIDO DE SEGURIDAD BIOLÓGICA.

Mediante las evaluaciones del riesgo realizadas como parte integral del
programa de bioseguridad de la institución, se acopia información sobre el tipo
de organismos utilizados, su localización, el personal que necesita tener acceso
a ellos y las personas responsables de ellos.

Esa información puede utilizarse para determinar si la institución posee

materiales biológicos de interés para quienes puedan querer usarlos
incorrectamente. Deben elaborarse normas nacionales que reconozcan y definan
la responsabilidad que tienen los países y las instituciones de proteger las
muestras, patógenos y toxinas para que no sean utilizados de forma incorrecta.

Debe prepararse y aplicarse un programa de bioprotección específico para cada

centro, teniendo en cuenta los requisitos del centro, el tipo de trabajo de
laboratorio que se realiza y las condiciones locales.

En consecuencia, las actividades de bioprotección en el laboratorio deben

ser representativas de las diferentes necesidades de la institución y tener
en cuenta la información proporcionada por los directores científicos, los
investigadores principales, los funcionarios de bioseguridad, el personal
científico del laboratorio, el personal de mantenimiento, los administradores, el
personal de tecnología de la información y, cuando proceda, de los organismos
responsables del cumplimiento de la ley y del personal de seguridad.
Las medidas de protección biológica del laboratorio deben basarse en un
programa integral de rendición de cuentas sobre los patógenos y las toxinas
que incluya un inventario actualizado donde figure el lugar de almacenamiento,
la identificación del personal que dispone de acceso, la descripción del uso, la
documentación de las transferencias internas o externas, dentro de un mismo
centro y entre diferentes centros, y cualquier inactivación y/o eliminación de los
materiales.

Del mismo modo, debe instaurarse un protocolo institucional de bioprotección en

el laboratorio, destinado a identificar, notificar, investigar y corregir los
incumplimientos de las normas de bioprotección del laboratorio, incluidas las
discrepancias en los resultados de los inventarios.

La participación y los papeles y responsabilidades de las autoridades de salud

pública y de seguridad en caso de infracción de las normas de protección
deben estar claramente definidas.

Se proporcionará capacitación específica en materia de bioprotección, además

de la relativa a la seguridad biológica, a todo el personal. Esa capacitación
ayudará al personal a comprender la necesidad de proteger esos materiales
y los fundamentos de las medidas concretas de bioprotección, y deberá incluir
un examen de las normas nacionales y de los procedimientos específicos de la
institución que sean pertinentes.

Durante la capacitación también se deben presentar procedimientos que

describan los papeles y las responsabilidades del personal en lo relativo a la
protección, en caso de infracción de las normas. La idoneidad profesional y
ética para trabajar con patógenos peligrosos por parte de todo el personal
que disponga de autorización de acceso regular a materiales sensibles es otro
componente fundamental de las actividades eficaces de bioprotección en el
laboratorio.

En resumen, las precauciones relacionadas con la protección deben formar

parte de la rutina de trabajo en el laboratorio, exactamente igual que las
técnicas asépticas y otras prácticas microbiológicas seguras. Las medidas de
bioprotección no deben dificultar el intercambio eficiente de materiales de
referencia, de muestras clínicas y epidemiológicas ni de la información conexa
necesaria para las investigaciones clínicas o de salud pública. Una gestión
competente de la protección no tiene por qué interferir indebidamente con
las actividades cotidianas del personal científico ni ser un impedimento para
la actividad investigadora.
SE DEBE PROTEGER EL ACCESO LEGÍTIMO A MATERIALES CLÍNICOS Y
DE INVESTIGACIÓN IMPORTANTES.

La evaluación de la idoneidad del personal, la formación específica en temas de

protección y el cumplimiento riguroso de los procedimientos de protección de los
patógenos constituyen formas razonables de incrementar la bioprotección en el
laboratorio. Todas estas medidas deben ser establecidas y mantenidas mediante
evaluaciones periódicas de los riesgos y las amenazas y mediante una revisión y
actualización periódica de los procedimientos.

Las comprobaciones del cumplimiento de estos procedimientos, con

instrucciones claras sobre los papeles, las responsabilidades y las medidas
correctoras, deben formar parte integral de los programas de bioprotección del
laboratorio y de las normas nacionales sobre la bioprotección en el laboratorio.

TÉCNICAS MICROBIOLÓGICAS
APROPIADAS
Técnicas de laboratorio
Los errores humanos, las técnicas de laboratorio incorrectas y el mal uso del
equipo son la causa de la mayoría de los accidentes de laboratorio y las
infecciones conexas.

MANIPULACIÓN SEGURA DE MUESTRAS EN EL LABORATORIO

La recogida, transporte y manipulación de muestras en el laboratorio entrañan

un riesgo de infección para el personal.

RECIPIENTES PARA MUESTRAS

Los recipientes para muestras pueden ser de vidrio o, preferiblemente, de

plástico. Deben ser fuertes y no permitir fugas cuando la tapa o el tapón estén
correctamente colocados. En el exterior del recipiente no debe quedar ningún
material. Los recipientes han de estar correctamente rotulados para facilitar su
identificación. Los formularios de petición de examen de la muestra no se
colocarán alrededor de los recipientes, sino por separado, preferiblemente en
sobres impermeables.
TRANSPORTE DE MUESTRAS DENTRO DE LA INSTALACIÓN

Para evitar fugas o derrames accidentales, deben utilizarse envases/embalajes

secundarios (por ejemplo, cajas) equipados con gradillas, de modo que los
recipientes que contienen las muestras se mantengan en posición vertical. Los
envases/embalajes secundarios pueden ser de metal o de plástico, pero deben
poderse tratar en autoclave o ser resistentes a la acción de los desinfectantes
químicos; de preferencia, el cierre debe tener una junta que garantice la
estanqueidad. Deberán descontaminarse periódicamente.

RECEPCIÓN DE LAS MUESTRAS

Los laboratorios que reciban un elevado número de muestras deben destinar un

local o zona especial con este propósito.

APERTURA DE LOS ENVASES/EMBALAJES

El personal que recibe y desempaqueta las muestras debe conocer los riesgos
para la salud que entraña su actividad y debe estar capacitado para adoptar
precauciones normalizadas, particularmente cuando manipule recipientes rotos
o con fugas. Los recipientes primarios de las muestras deben abrirse en una CSB.
Se dispondrá de desinfectantes.

Uso de pipetas y dispositivos de pipeteo

1. Debe utilizarse siempre un dispositivo de pipeteo. El pipeteo con la boca
estará prohibido.
2. Todas las pipetas tendrán tapones de algodón para reducir la
contaminación de los dispositivos de pipeteo.
3. Nunca se insuflará aire en un líquido que contenga agentes infecciosos.
4. No debe mezclarse el material infeccioso aspirando y soplando
alternativamente a través de una pipeta.
5. No se expulsarán a la fuerza los líquidos de una pipeta.
6. Son preferibles las pipetas aforadas con una muesca superior y otra
inferior, ya que no exigen la expulsión de la última gota.
7. Las pipetas contaminadas deben sumergirse completamente en un
desinfectante adecuado contenido en un recipiente irrompible y
permanecer en él durante un tiempo suficiente antes de tirarlas.
8. Debe colocarse un recipiente para las pipetas usadas dentro (no fuera) de
la CSB.
 9. No deben utilizarse para pipetear jeringuillas provistas de aguja
hipodérmica.
10. En vez de agujas, existen dispositivos para abrir los frascos tapados con
un diafragma que permiten usar pipetas y evitar el uso de agujas y
jeringuillas hipodérmicas.
11. Para evitar la dispersión del material infeccioso que caiga
accidentalmente de una pipeta, se recubrirá la superficie de trabajo con
material absorbente, que se desechará como residuo infeccioso una vez
utilizado.

Técnicas para evitar la dispersión de

material infeccioso
1. A fin de evitar que su carga caiga prematuramente, las asas
microbiológicas deben tener un diámetro de 2–3 mm y terminar en un
anillo completamente cerrado. Los mangos no deben tener más de 6 cm de
longitud para reducir la vibración al mínimo.
2. Para evitar el riesgo de que se produzcan salpicaduras de material
infeccioso al flamear las asas en el mechero de Bunsen, se utilizará un
microincinerador eléctrico cerrado para esterilizar las asas. Es preferible
utilizar asas desechables que no necesitan volver a ser esterilizadas.
3. Al secar muestras de esputo debe procederse con cuidado para evitar la
creación de aerosoles.
4. Las muestras y los cultivos desechados destinados a la autoclave o a la
eliminación se colocarán en recipientes impermeables, como las bolsas de
desechos de labora torio. La parte superior se cerrará (por ejemplo, con
cinta de autoclave) antes de tirarlas a los recipientes para desechos.
5. Las zonas de trabajo se descontaminarán con un desinfectante apropiado
después de cada periodo de trabajo.

Uso de las cámaras de seguridad biológica

1. Habrá que explicar a todos los posibles usuarios el modo de empleo y las
limitaciones de estas cámaras, tomando como referencia las normas
nacionales y las publicaciones pertinentes. El personal recibirá protocolos
escritos o manuales de seguridad o de operación. En particular, ha de
quedar claro que la cámara no protege al trabajador de derrames, roturas
o técnicas incorrectas.
 2. La cámara no debe utilizarse si no funciona correctamente.
3. La ventana de vidrio transparente no debe abrirse mientras se está
utilizando la cámara.
4. Los aparatos y materiales introducidos en la cámara deben reducirse al
mínimo y no deben bloquear la circulación del aire en la cámara de
distribución trasera.
5. No deben utilizarse mecheros de Bunsen en el interior de la cámara, ya
que el calor producido perturbará el flujo de aire y puede dañar los filtros.
Puede permitirse el uso de un microincinerador, aunque es preferible
utilizar asas estériles desechables.
6. Todo el trabajo debe hacerse en la zona media o posterior de la superficie
de trabajo y ser visible a través de la ventana.
7. El paso de personas por detrás del trabajador debe reducirse al mínimo.
8. El trabajador no debe alterar el flujo de aire al sacar y volver a introducir
repetidas veces los brazos.
9. Las rejillas de aire no deben estar bloqueadas con papeles, pipetas u otros
materiales, pues con ello se perturba el flujo de aire y puede provocarse
la contaminación del material y la exposición del trabajador.
10. La superficie de la CSB deberá limpiarse con un paño empapado con un
desinfectante apropiado una vez terminado el trabajo y al final del día.
11. El ventilador de la cámara se encenderá al menos 5 minutos antes de
empezar el trabajo y debe seguir funcionando al menos durante 5 minutos
después de concluido el trabajo.
12. Nunca se introducirán papeles en las CSB.

Técnicas para evitar la ingestión de material

infeccioso y su contacto con la piel y los ojos
1. Las partículas y gotículas de mayor tamaño (>5mm) que se desprenden
durante las manipulaciones microbiológicas se depositan rápidamente en
la superficie delas mesas y en las manos del trabajador. éste llevará
guantes desechables. Los trabajadores del laboratorio evitarán tocarse
la boca, los ojos y el rostro.
2. En el laboratorio no se deben conservar ni consumir alimentos o bebidas.
3. En el laboratorio no se colocarán objetos en la boca (lápices, goma de
mascar).
4. En el laboratorio no se aplicarán cosméticos.
 5. La cara, los ojos y la boca deben estar protegidos con una pantalla o de
algún otro modo durante cualquier operación que pueda provocar
salpicaduras de material potencialmente infeccioso.

Técnicas para evitar la inyección de material

infeccioso
1. La inoculación accidental debida a heridas por objetos de vidrio rotos o
astillados puede evitarse mediante prácticas y procedimientos
cuidadosos. El material de vidrio debe ser reemplazado por material de
plástico siempre que sea posible.
2. La inoculación accidental puede producirse como consecuencia de heridas
con agujas hipodérmicas, pipetas de Pasteur de vidrio o vidrios rotos.
3. El número de accidentes causados por agujas hipodérmicas puede
reducirse restringiendo al mínimo el uso de jeringuillas y agujas (por
ejemplo, existen dispositivos sencillos para abrir los frascos con tapón de
diafragma de modo que puedan usarse pipetas en lugar de jeringuillas y
agujas), o utilizando dispositivos especiales de seguridad para objetos
cortantes y punzantes cuando se hace imprescindible utilizar jeringuillas
y agujas.
4. Nunca deben volver a cubrirse las agujas. Los artículos desechables
deberán colocarse en recipientes resistentes a la perforación que tengan
tapa.
5. Las pipetas de Pasteur de vidrio deben sustituirse por otras de plástico.

Separación de suero
1. Sólo realizará este trabajo personal de laboratorio debidamente
capacitado.
2. El personal llevará guantes y equipo protector de ojos y mucosas.
3. Sólo una buena técnica permite evitar o reducir al mínimo las salpicaduras
y los aerosoles. La sangre y el suero se deben pipetear con cuidado en
lugar de verterlos. El pipeteo con la boca estará prohibido.
4. Una vez usadas, las pipetas se sumergirán por completo en un
desinfectante apropiado y permanecerán en él durante un tiempo
suficiente, hasta que se eliminen o se laven y esterilicen para volverlas a
utilizar.
 5. Los tubos de ensayo que se desea eliminar y que contienen coágulos de
sangre u otros materiales se colocarán, nuevamente con sus tapas, en
recipientes impermeables apropiados que se tratarán y esterilizarán en la
autoclave o se incinerarán.
6. Habrá que disponer de desinfectantes apropiados para limpiar las
salpicaduras y los derrames de material.

Uso de las centrifugadoras

1. El funcionamiento mecánico satisfactorio es un requisito de la seguridad
microbiológica del empleo de centrifugadoras en el laboratorio.
2. Las centrifugadoras se utilizarán según las instrucciones del fabricante.
3. Las centrifugadoras deben colocarse a una altura tal que los trabajadores
puedan ver la cubeta para colocar correctamente los soportes y los
cestillos.
4. Los tubos de la centrifugadora y los recipientes de muestras destinados
al uso en la centrifugadora deben estar fabricados de vidrio grueso o,
preferiblemente, de plástico, y deben inspeccionarse para detectar
defectos antes de usarlos.
5. Los tubos y los recipientes para muestras deben estar siempre bien
cerrados (con tapón de rosca si es posible) para la centrifugación.
6. Los cestillos deben cargarse, equilibrarse, cerrarse y abrirse en una CSB.
7. Los cestillos y los soportes se deben emparejar por el peso y equilibrar
correcta mente con los tubos en su sitio.
8. El espacio que debe dejarse entre el nivel del líquido y el borde de cada
tubo de centrifugación debe ser especificado en las instrucciones del
fabricante.
9. Para equilibrar los cestillos vacíos se empleará agua destilada o alcohol
(propanol al 70%). No se empleará suero salino ni solución de hipoclorito
porque ambos productos corroen los metales.
10. Para los microorganismos de los grupos de riesgo 3 y 4 se utilizarán
cestillos de centrifugadora de cierre hermético (cestillos de seguridad).
11. Cuando se utilicen rotores de cabeza angular, debe velarse por que el tubo
no esté excesivamente cargado, ya que puede haber fugas del líquido.
12. El interior de la cubeta de la centrifugadora se inspeccionará a diario para
observar si existen manchas o suciedad en el rotor. Si éstas son
manifiestas, se deben examinar de nuevo los protocolos de centrifugación.
13. Los rotores y los cestillos de la centrifugadora deben observarse
diariamente para detectar signos de corrosión y grietas.
14. Los cestillos, los rotores y la cubeta de la centrifugadora deben
descontaminarse después de cada uso.
15. Después del uso, los cestillos se depositarán en posición invertida a fin de
vaciar el líquido utilizado para equilibrar.
16. Al utilizar centrifugadoras pueden expulsarse partículas infecciosas
transportadas por el aire. Esas partículas salen despedidas a una
velocidad demasiado alta para que las retenga el flujo de aire de la cámara
si la centrifugadora está funcionando en una CSB tradicional con abertura
frontal de las clases I y II. Si se colocan las centrifugadoras en CSB de
clase III se evita que los aerosoles emitidos se dispersen ampliamente.
No obstante, el empleo de una buena técnica de centrifugación y de tubos
tapados correctamente ofrece protección suficiente contra los aerosoles
infecciosos y la dispersión de partículas.
 ENDOCRINOLOGÍA BIOQUÍMICA

Hormonas
 Sustancias químicas producidas por glándulas o grupos de células
concretas que dan lugar a respuestas específicas en órganos distantes.
 Son los mensajeros químicos del cuerpo, Surten su efecto lentamente y,
con el tiempo, afectan muchos procesos distintos, incluyendo: Crecimiento
y desarrollo.
 Pueden circular por la sangre (endócrinas), actúan alrededor de la célula
de origen (paracrinas), o incluso en la misma célula que las ha producido
(autocrinas)
 Existen diferentes tipos de hormonas; las más elementales son
aminoácidos modificados (adrenalina), polipéptidos (tirotropina),
proteínas(LH), prehormonas, prohormonas.
 Son segregadas por glándulas como tiroides, suprarrenales y la hipófisis.
 Son tan potentes que solo necesitan concentraciones plasmáticas
pequeñas para ejercer efecto significativo.

DEBEN TENER CIERTAS PROPIEDADES:

a) Transmitir al cuerpo importantes avisos ambientales, calibración
metabólica, relacionada con la homeostasis, una magnitud adecuada del
estímulo para la cantidad de hormona liberada.
b) Control neuronal determinado por estímulos simpáticos.
c) La respuesta hormonal puede tener características de retroalimentación
negativa para prevenir inestabilidad a corto plazo o retroalimentación
positiva que se caracteriza por la estimulación a la liberación de la
hormona en un aumento rápido y exponencial en el nivel de la señal.
d) las hormonas actúan uniéndose a receptores específicos:
1. en la superficie celular (acoplados a proteínas G)
2. dentro de la célula diana
3. receptores nucleares
e) Las concentraciones hormonales son útiles solo si existe una manera
eficaz de desactivarlas o eliminarlas (insulina, esteroides y tiroxina).

f) Hormonas pequeñas o hidrofóbicas se transportan ligadas a proteínas

transportadoras, estas a su vez extienden la vida media y aumentan su
concentración.
g) Conversión a una hormona potente si se libera cerca de su receptor
afín.
Cada sistema endócrino puede tener mal funcionamiento como consecuencia de
un daño o enfermedad de un órgano.

Existen tipos de patologías a las que las células endócrinas son muy susceptibles:
A) Destrucción autoinmunitaria con anticuerpos específicos.
B) Neoplasia benigna o maligna

La glándula hipofisaria es un órgano oval del tamaño de un guisante, que se

encuentra por debajo del cerebro, se comunica con el hipotálamo a través del
tallo pituitario.

Se divide en dos lóbulos: posterior y anterior.

 La posterior o neurohipófisis consta de neuronas que poseen cuerpos

celulares en donde se sintetizan y empaquetan hormonas antes de su
transporte a lo largo de los axones de la hipófisis.
 El anterior (adenohipófisis), representa el 80% de la glándula.
Tanto la hipófisis posterior como la anterior son controladas por el hipotálamo
que es un centro receptor de estímulos simpáticos. Funciona como un centro
integrador que dirige un gran número de procesos endócrinos.

Los sistemas endócrinos implicados por el hipotálamo, la hipófisis y los

órganos subsecuentes son denominados EJES.
 HORMONAS DE LA GLÁNDULA HIPOFISARIA
POSTERIOR
Segrega dos hormonas al torrente circulatorio:

OXITOCINA
Pequeña hormona peptídica que estimula el músculo liso del útero y mama.

Ejerce funciones como neuromodulador en el sistema nervioso central modulando

comportamientos sociales, sentimentales, patrones sexuales y la conducta
parental.

VASOPRESINA (VP)
También conocida como hormona antidiurética (had), es un péptido de 9
aminoácidos relacionado con el control hídrico.

Hormona que sirve para la contracción de los vasos sanguíneos y ayuda a que los
riñones controlen la cantidad de agua y sal en el cuerpo. De esta manera regula
la presión arterial y la cantidad de orina que se produce.

HORMONAS DEL SISTEMA HIPOTÁLAMO

HIPOFISARIO ANTERIOR
EXISTEN 5 EJES:

 Tres son del sistema endócrino de 3 niveles en donde la TSH, FSH y LH

pueden considerarse como hormonas tróficas (Las hormonas tróficas
estimulan a otras glándulas para que segreguen sus respectivas
hormonas).
 El cuarto eje es un híbrido, es trófica, pero tiene sus acciones propias
(GH).
 El quinto eje no es hormona trófica y media la secreción de prolactina.
  La hormona liberadora de Tirotropina (TRH) se transporta a la
hipófisis donde estimula la secreción de TSH mediante la unión a
receptores acoplados a la proteína G situados en las células hipofisarias
que están ligados a la fosfolipasa C.
 La Tirotropina o TSH (estimula la formación de T3 y T4) es una
pequeña glicoproteína formada por dos sub unidades (alfa y beta)
formadas por un 15% de hidratos de carbono.
 La vida media de la TSH es de aprox. 65 minutos

TSH
La TSH actúa sobre la glándula Tiroides para la biosíntesis y secreción de la
hormona tiroidea, incluido el transporte de yodo, la formación de
yodotironina, y la desyodisación de la tiroxina.

La retroalimentación negativa de las hormonas tiroideas tiene lugar tanto el

hipotálamo como en la hipófisis. En la hipófisis tanto la T4 (tiroxina) como la
T3 (triyodotironina) inhiben la secreción de la TSH.
T3 y T4
Son tironinas (es el núcleo de tiroxina desprovisto de sus cuatro átomos de
yodo). La concentración de T4 es mayor de la T3 que es la forma activa
biológicamente.

El 80% de hormona segregada por la tiroides es T4, la T3 se produce por las

desyodisación de T4. Este proceso puede ocurrir en la glándula tiroidea, en los
tejidos periféricos y lo lleva a cabo la desyodasa de yodotironina 1 (OBTIENE
LA T3 activa) y 2 (forma la T3 inactiva) (DI1, DI2)

ACCIONES BIOQUÍMICAS DE LAS HORMONAS TIROIDEAS

La T3 aumenta el metabolismo basal del organismo, la utilización de ATP que
tiene como resultado el aumento de la ATPasa dependiente de Na/K, el
metabolismo oxidativo mitocondrial, estimula la lipólisis en el tejido adiposos,
incrementa la glucogenólisis y la glucogénesis para equilibrar la termogénesis.

TRASTORNOS CLÍNICOS DE LA FUNCIÓN TIROIDEA

 La enfermedad tiroidea afecta el 3% de la población siendo las mujeres
9 veces mayor en la incidencia.
 Más del 95% de la enfermedad se origina en la glándula y una gran parte
es de origen autoinmunitario.
Autoanticuerpos tiroideos pueden unirse al receptor de TSH sin la estimulación
de la glándula, la concentración de la hormona descenderá (T3 y T4 bajos, TSH
elevada) y se obtendrá hipotiroidismo, si los auto anticuerpos se unen y estimula
la secreción hormonal se producirá un hipertiroidismo (T3 y T4 altos y TSH
baja).
La hormona liberadora de corticotropina (CRH) es un péptido de 41
aminoácidos que actúa acoplado a la proteína G en las células
hipofisarias para estimular la síntesis y secreción de ACTH
(hormona adrenocorticotropa). La Vasopresina (VP) potencia
la respuesta de la hipófisis a CRH aumentado la expresión.

LA RETROALIMENTACIÓN NEGATIVA INHIBE

LA CRH Y VP.

HORMONA ADRENOCORTICOTROPA (ACTH)

La ACTH está formada por 39 aminoácidos, su secreción se ve relacionado con
el estrés, se trasporta en el plasma sin unirse a proteínas, con una vida media de
10 min.

Estimula la síntesis y liberación de hormona glucocorticoide mediante

receptores en la superficie acoplados a proteínas G situados en la corteza
suprarrenal, produciendo cortisol en 3 min.

BIOSÍNTESIS DE CORTISOL
La hormona ACTH estimula la secreción de cortisol y es por tanto necesaria
para que las glándulas suprarrenales funcionen.

La secreción de ACTH está regulada por la CRH, se ve estimulada por

situaciones de estrés.
En condiciones normales la secreción de ACTH se produce de forma oscilante
o rítmica que se encuentra sincronizada con el ritmo sueño-vigilia, de modo
que es máxima por la mañana y mínima a medianoche. A esta variación se le conoce
como ritmo circadiano.

Cuando el nivel de cortisol de la sangre aumenta, la secreción de ACTH disminuye

para así ayudar a recobrar la actividad normal.

Si, por el contrario, la concentración de cortisol disminuye la producción de

ACTH aumenta para estimular la fabricación de cortisol por las glándulas
suprarrenales.

TRASTORNOS CLÍNICOS DE SECRECIÓN CORTICAL

La deficiencia de CRH y ACTH produce la enfermedad de Addison
(Disminución de hormonas glucocorticoides, mineralocorticoides y hormonas
sexuales) una enfermedad de insuficiencia suprarrenal.

Bioquímicamente se caracteriza por una hiponatremia, potasemia, acidosis.

La hipersecreción de cortisol puede causar el síndrome de Cushing.

(remodelación del tejido adiposo, pérdida de grasa en extremidades y depósitos
en cara y cuello, adelgazamiento de la piel y lenta cicatrización).

La ausencia de cortisol y aldosterona lleva a la pérdida de retroalimentación

negativa del cortisol, aumentado la ACTH y puede masculinizar los genitales
femeninos externos antes del nacimiento.

La hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) es esencial para la

secreción de FSH (folículo estimulante) y LH (luteinizante).

La GnRH es un decapéptido sintetizado en el hipotálamo, su liberación está

sujeta a una retroalimentación negativa por progesterona, prolactina y
estrógenos.
FSH y LH
 Son glucoproteínas que se segregan tanto en hombres como en mujeres
bajo la influencia de la GnRH.
 La vida media de la FSH es de 4 horas mientras que la LH es de 50
min.
 La LH en hombres ejerce influencia en la formación de testosterona
en las células de Leydig en los testículos, que contribuyen con la FSH
para facilitar la espermatogénesis es los túbulos espermáticos.
 En las mujeres la FSH induce la maduración folicular, mientras que la
LH induce al rompimiento del folículo y la liberación del ovocito.

ACCIÓN DE LAS HORMONAS ESTEROIDEAS

La concentración de progesterona de más de 20 mmol/ l es sinónimo de
ovulación.
La progesterona es responsable de la temperatura corporal basal
durante la fase lútea del ciclo menstrual. Su descenso contribuye al
cambio de estado de ánimo en la fase premenstrual.
El estradiol es responsable del crecimiento mamario y de la
maduración del aparato urogenital, y responsable de la densidad ósea.
Los excesos de secreción de esteroides conducen a la pubertad precoz.

La progesterona, estradiol
y testosterona actúan con
retroalimentación negativa

La GHRH es la hormona liberadora de la hormona de crecimiento formada

por 44 aminoácidos que se sintetiza como una prohormona de 108
aminoácidos, estimula la secreción de GH (hormona de crecimiento) desde la
hipófisis anterior.
  Su retroalimentación negativa determina el descenso de esta como la
producción de somatostatina.
 La somatostatina se localiza en el cerebro y en los intestinos e inhibe la
secreción de GH.
 La somatostatina y GH son liberadas separadamente para proporcional
un control fino del crecimiento.

HORMONA DE CRECIMIENTO (GH)

Es una proteína de aproximadamente 22 kDa.
Se libera en estallidos aproximados de 3-4 hrs. Y la mayor actividad
secretora tiene lugar durante el sueño, en niños y adultos jóvenes.
Actúa directamente sobre el metabolismo lipídico, hidratos de
carbono y proteínas. Induce la resistencia a la insulina, promueve la
síntesis de cartílagos, masa muscular y distribución de grasa corporal.

Es la única hormona que se encuentra bajo el control del hipotálamo,

controlada por la dopamina (controla el comportamiento, actividad motora,
regulación de la producción de leche, el sueño, el humor, aspectos de la
atención y el aprendizaje, es por eso que se le relaciona con las adicciones, pues
drogas como la cocaína, el opio, la heroína, el tabaco y el alcohol liberan esta
hormona).

La prolactina es una proteína de 23kDa, estimula la producción de varias

proteínas lácteas, posee efectos gonadotrópicos, inmunitarios, bloquea la acción
de la FSH y aumenta la progesterona.

ALTERACIONES CLÍNICAS DE LA SECRECIÓN DE PROLACTINA

La hiperprolactinemia se debe a un tumor hipofisario secretor de
prolactina, a un suministro deficiente de dopamina o al uso de fármacos.

En mujeres incluye irregularidad menstrual y galactorrea (flujo de

leche espontáneo).
En los hombres puede causar impotencia e hiperplasia protática.
TRASTORNOS CLÍNICOS ASOCIADOS CON ALTERACIONES
DE LAS HORMONAS HIPOFISARIAS

HORMONA DEFICIENCIA EXCESO

TSH Hipertiroidismo Hipotiroidismo

ACTH Hipoadrenalismo, Adison Enfermedad de Cushing

FSH/LH Hipogonadismo Pubertad precoz

GH Estatura corta Gigantismo/Acromegalia

Prolactina Ninguna Galactorrea/Infertilidad

 Síntesis
DEL GRUPO HEMO
LAS PORFIRIAS.

En 1985, el bioquímico, el Dr. David Dolphin relaciono el vampirismo con las

porfirias, como en el caso de Drácula, que no se podía exponer a la luz, debido a
ello.

Es el componente de la hemoglobina, mioglobina y citocromos.

Este grupo se sintetiza principalmente en el hígado, por ello se dice que es su

principal fuente no eritrocitaria de su síntesis y en la mayoría de las células de
nuestro organismo también se sintetizan.

El grupo hemo es un porfirina, un compuesto cíclico con 4 anillos pirrólicos, que

permite que el hierro se una a ello, el hierro está en estado +2, y al unirse este
hierro ya se le llama grupo hemo, cuando el hemo se une a una proteína se llama
hemoproteína.

EN PATOLOGÍAS NO NOS REFERIMOS A PORFIRINAS SINO A

PORFIRIAS.

METABOLISMO DEL GRUPO HEMO

LOS REQUERIMIENTOS DE PIRIDOXINA (B6) AUMENTAN
CUANTO MAYOR SEA LA INGESTA DE PROTEÍNAS
El fosfato de piridoxal y la piridoxamina están implicados en más de 100
reacciones del metabolismo de los hidratos de carbono (incluida la reacción de
fosforilación del glucógeno) y de los lípidos, en la síntesis, catabolismo e
interconversión de los aminoácidos y en el metabolismo de las unidades
monocarbonadas.
Se necesita piridoxina para el metabolismo de neurotransmisores como
serotonina y noradrenalina, de la esfingosina, un componente de la esfingomielina
y los esfingolípidos y del grupo hemo. Influye en la función inmunitaria. Debido
a su papel central en el metabolismo de los aminoácidos, los requerimientos de
vitamina B aumentan con la ingestión proteica.

PARA LA SÍNTESIS DEL GRUPO HEMO SE NECESITA LA VITAMINA B6.

PRIMERA REACCIÓN (1A Y 1B)

TIPO DE
SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS
REACCIÓN

α-Amino-β-
Glicina + succinil Irreversible
Ala sintasa cetoadipato + CoA +
CoA
SH
α-Amino-β- δ-Aminolevulinato Irreversible
Ala sintasa
cetoadipato (ALA) + CO2 descarboxilación

ESTE PROCESO SE REALIZA EN LA MITOCONDRIA

 SEGUNDA REACCIÓN

TIPO DE
SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS
REACCIÓN

Porfobilinógeno
Dos moléculas de Ala deshidratasa o Irreversible
(primer precursor
δ-aminolevulinato porfobilinógeno sintasa deshidratación
pirrol) + 2H2O

ESTA REACCIÓN SUCEDE EN EL CITOSOL, CABE DESTACAR QUE LO PUEDE

INHIBIR EL PLOMO.
REACCIONES DE LA 3 A LA 8
No. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO
3 Uroporfirinógeno I
Porfobilinógeno Hidroximetilbilano
sintasa
4 Uroporfirinógeno III
Hidroximetilbilano Uroporfirinógeno III
sintasa
5 Uroporfirinógeno
Uroporfirinógeno III Coproporfirinógeno III
descarboxilasa
6 Coproporfirinógeno
Coproporfirinógeno III Protoporfirinógeno III
oxidasa
7 Protoporfirinógeno
Protoporfirinógeno III Protoporfirina III
oxidasa
8 Protoporfirina III + Fe+2 Ferroquelatasa Hem
9 Hem + Proteínas ----------- Hemoproteínas

SE NECESITA LA ENZIMA FERROQUELATASA PARA DEJAR ENTRAR EL

HIERRO EN ESTADO +2 PARA FORMAR EL GRUPO HEMO.

ALGUNAS HEMOPROTEÍNAS IMPORTANTES

DEFECTOS EN LA SÍNTESIS DEL GRUPO HEMO
 Las porfirias son un grupo de trastornos provocados por deficiencia de
las enzimas implicadas en la síntesis del hem.
 Hay excesiva acumulación y secreción de porfirinas y sus precursores
 Las porfirinas son compuestos químicos que juegan un rol fundamental en
los sistemas vivientes por sus propiedades físicas químicas y biológicas.
 Puede deberse a la falta de coproporfirinógeno oxidasa en la copro-
porfiria hereditaria.
 LA PIA (Porfiria intermitente aguda), es debida a la falta de
hidroximetilbilano sintasa.
 La coproporfiria hereditaria, es debida a la falta de la enzima que
convierte el coproporfirinógeno III en protoporfirinógeno III, la cual es
el coproporfirinógeno oxidasa.
 La Porfiria variegata, es cutánea tarda con fotosensibilidad.
 SÍNTESIS DE LA BILIRRUBINA
La bilirrubina conjugada o indirecta es hidrosoluble, la directa o no conjugada es
no hidrosoluble.

EL GRUPO HEMO SE DEFRADA A BILIRRUBINA.

La ictericia se presenta en valores de MAYORES DE 50 micromoles por litro

o 3 mg/dl

La bilirrubina normal es INFERIOR de 21 micromoles por litro o 1.2 mg/dl.

En el cuerpo se producen diario de 250 a 350 mg diarios.

SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS

Grupo hemo + O2 + Biliverdina + Fe+5 + NADP+ +

HEMO OXIGENASA
NADPH + H H2O + CO2
Biliverdina BILIVERDINA REDUCTASA Bilirrubina
Seguidamente la bilirruvina sigue un proceso de esterificación convirtiéndose en
una sustancia conjugada o directa, SIN ESTA no se puede volver soluble, y lo
hace mezclándose con el ácido glucurónico. Formando así diglucurónico de
bilirrubina o bilirrubina conjugada.

Hay un incremento de la fracción conjugada y hay bilirrubina en sangre y orina.

Hay un exceso de la fracción no conjugada, hay aumento de la concentración

plasmática de bilirrubina total y asimismo se incrementa la bilirrubina en orina.

Aumento de bilirrubina plasmática, debido a un incremento en la fracción

conjugada, el urobilinógeno en orina está aumentada.

SÍNTESIS DEL GRUPO HEMO

EL GRUPO HEMO ES UN COMPONENTE DE LA HEMOGLOBINA, LA
MIOGLOBINA Y LOS CITOCROMOS

 El grupo hemo se sintetiza en la mayoría de las células del organismo.

 El hígado es la principal fuente no eritrocitaria de su síntesis.
 El grupo hemo es una porfirina, un compuesto cíclico que contiene 4 anillos
pirrólicos unidos entre sí por puentes metenilo.

Se sintetiza a partir de glicina y succinil-coenzima A, que se condensan para

formar 5- aminolevulinato (5-ALA). Esta reacción está catalizada por la 5-ALA
sintasa, localizada en las mitocondrias, y es la etapa limitante en la síntesis del
grupo hemo. Posteriormente, en el citosol, dos moléculas de 5-ALA se condensan
para formar una molécula que contiene un anillo pirrólico, el porfobilinógeno
(PBG). Luego, cuatro moléculas de PBG se combinan para formar un compuesto
tetrapirrólico lineal que posteriormente se cicla y da lugar a uroporfirinógeno
III y después a coproporfirinógeno III.

Las etapas finales de la vía suceden de nuevo en las mitocondrias, donde una
serie de descarboxilaciones y oxidaciones de las cadenas laterales de
uroporfirinógeno III dan lugar a protoporfirina IX. En la fase final, el hierro
(Fe 2+ ) es añadido por la ferroquelatasa a la protoporfirina IX para formar el
grupo hemo. El grupo hemo controla la velocidad de su propia síntesis
inhibiendo retroactivamente a la 5-ALA sintasa.

PORFIRIAS
Los defectos en la vía de la síntesis del grupo hemo dan lugar a
enfermedades infrecuentes que se denominan porfirias. Hay diversas
porfirias causadas por deficiencias de diversas enzimas en la vía biosintética,
empezando por la 5-ALA sintetasa y acabando por la ferroquelatasa.

Las porfirias se clasifican como hepáticas o eritropoyéticas, según el principal

órgano afectado. Hay tres porfirias que se conocen como porfirias agudas y
que pueden ser causa de ingreso hospitalario de urgencia por dolor abdominal.

 Además, provocan síntomas neuropsiquiátricos. La porfiria

intermitente aguda (PIA) está causada por una deficiencia de
hidroximetilbilano sintasa, una enzima que convierte el PBG en un
tetrapirrol lineal: en esta enfermedad, las concentraciones de 5-ALA y de
PBG aumentan en el plasma y en la orina.
 La coproporfiria hereditaria se debe a un defecto en la conversión
de coproporfirinógeno III a protoporfirinógeno III (coprooxidasa).
 La tercera forma de porfiria aguda es la porfiria variegata, cuyas
manifestaciones clínicas son muy similares a las de la PIA.

Otras porfirias, como la porfiria cutánea tarda, se manifiestan

clínicamente como una sensibilidad de la piel a la luz (fotosensibilidad) que
puede causar desfiguración y cicatrices.

ADEMÁS, LA VÍA ES INHIBIDA POR EL PLOMO EN LA ETAPA DE LA

PORFOBILINÓGENO SINTASA.
 METABOLISMO DE LA BILIRRUBINA
EL EXCESO DE BILIRRUBINA CAUSA ICTERICIA

La bilirrubina es el producto catabólico del grupo hemo.

Aproximadamente el 75% de toda la bilirrubina deriva de la degradación de

la hemoglobina de los hematíes viejos, que son fagocitados por células
mononucleares del bazo, la médula ósea y el hígado (células del sistema
reticuloendotelial).

 En los adultos normales, esto da lugar a una carga diaria de 250-350 mg

de bilirrubina.
 La concentración plasmática normal de bilirrubina es inferior a 21 µmol/l
(1,2 mg/dl).
 Las concentraciones elevadas (más de 50 µmol/l o 3 mg/dl) son fáciles de
reconocer clínicamente, porque a esa concentración la bilirrubina
proporciona un color amarillo a la piel y las conjuntivas, lo que se conoce
como ictericia.
 La ictericia es un signo clínico importante de enfermedad hepática
significativa.

LA BILIRRUBINA ES METABOLIZADA POR LOS HEPATOCITOS Y

EXCRETADA EN LA BILIS

Mientras que la biliverdina es hidrosoluble, la bilirrubina, paradójicamente, no lo

es y, por tanto, debe seguir metabolizándose antes de su excreción.

La bilirrubina producida por el catabolismo del grupo hemo en las células

reticuloendoteliales es transportada en el plasma ligada a la albúmina.

La captación hepática de bilirrubina está mediada por un transportador de

membrana, que puede ser inhibido de forma competitiva por otros aniones
orgánicos.

La hidrofilia de la bilirrubina aumenta por esterificación, conocida

normalmente como conjugación, de uno o ambos de sus ácidos carboxílicos de
las cadenas laterales con ácido glucurónico, xilosa o ribosa.

El diéster glucurónido es el principal conjugado y su formación es catalizada por

la uridina difosfato (UDP)-glucuronil transferasa.

La bilirrubina conjugada es hidrosoluble y puede ser segregada después por

el hepatocito a los canalículos biliares.
Si se deteriora este proceso excretor, y el paciente desarrolla ictericia, parte
de la bilirrubina conjugada puede excretarse en la orina, dándole un color
característicamente oscuro.

LA BILIRRUBINA CONJUGADA EN EL INTESTINO ES CATABOLIZADA

POR LAS BACTERIAS PARA FORMAR ESTERCOBILINÓGENO, también
conocido como urobilinógeno fecal, que es un compuesto incoloro.

El estercobilinógeno se oxida a estercobilina (también conocida como urobilina

fecal), que tiene color; LA ESTERCOBILINA es el principal responsable del color
de las heces.

Una pequeña parte de la estercobilina puede ser reabsorbida del intestino y

puede ser excretada después de nuevo por el hígado o los riñones.

Cuando se altera la excreción biliar de la bilirrubina conjugada por una patología

que obstruya el flujo de la bilis hacia el intestino (ictericia obstructiva), no se
forma estercobilinógeno/estercobilina, y las deposiciones tienen un color pálido.

Metabolismo de los ácidos biliares y del

colesterol
Los ácidos biliares son elementos clave en el metabolismo de las grasas.

Los ácidos biliares se sintetizan en los hepatocitos y tienen un efecto similar a

un detergente en la luz intestinal al solubilizar los lípidos biliares y emulsionar
la grasa de la dieta en el intestino para facilitar su digestión.

LA EXCRECIÓN BILIAR TAMBIÉN ES LA ÚNICA RUTA POR LA QUE

PUEDE ELIMINARSE EL COLESTEROL DEL CUERPO.
 GRUPO
Sanguíneo
A finales del siglo XIX y a principio del siglo XX, más concretamente en el año
1900, el médico austriaco Karl Landsteiner observó que cuando juntamos
muestras de sangre de personas diferentes dos resultados podrían ocurrir:

a) Las sangres se mezclaban sin ningún problema.

b) Las sangres no se mezclaban, habiendo una intensa reacción que llevaba a
la destrucción de hematíes (glóbulos rojos) y la amplia formación de
coágulos.

Fue a través de este experimento que surgió el concepto de sangre

compatible y sangre incompatible.

SISTEMA ABO
Basado en sus experimentos, Landsteiner describió 3 grupos de sangre, que
fueron llamados grupo A, grupo B y grupo O, dando lugar a la famosa
clasificación ABO de los grupos sanguíneos. ESTE DESCUBRIMIENTO LE
VALIÓ EL PREMIO NOBEL DE MEDICINA EN 1930.

Dos años más tarde, se identificó un cuarto grupo sanguíneo: el grupo AB,
formando así los cuatro grupos sanguíneos actualmente utilizados en el sistema
ABO.

FACTOR RH
La superficie de los glóbulos rojos además contiene marcadores que el sistema
inmunitario puede reconocer. Uno de estos marcadores es el factor Rh
(antígeno Rh [D]).

Una persona cuya sangre contiene el factor Rh es Rh positivo (D). Una persona
cuya sangre no contiene el factor Rh es Rh negativo (d).
GRUPO SANGUÍNEO
El grupo sanguíneo contiene información sobre la presencia (+) o la ausencia (–)
del factor Rh.

Al grupo sanguíneo se lo indica con una letra (A, B u O) y un símbolo (+ o –). Por
ejemplo, si una persona tiene el tipo de sangre B negativo (B–), esa persona es
Rh negativo. Una persona con un tipo de sangre B positivo (B+) es Rh positivo.

En la actualidad, las transfusiones de sangre usan las clasificaciones ABO y Rh

para evitar que la sangre incompatible sea administrada a un paciente que
necesite de una transfusión. POR LO TANTO, SON 8 LOS
GRUPOS SANGUÍNEOS:

 A+ (grupo sanguíneo A con factor Rh positivo).

 B+ (grupo sanguíneo B con factor Rh positivo).
 AB+ (grupo sanguíneo AB con factor Rh positivo).
 O+ (grupo sanguíneo O con factor Rh positivo).
 A- (grupo sanguíneo A con factor Rh negativo).
 B- (grupo sanguíneo B con factor Rh negativo).
 AB- (grupo sanguíneo AB con factor Rh negativo).
 O- (grupo sanguíneo O con factor Rh negativo).

La frecuencia de los grupos ABO cambia según el origen étnico de la persona.

Actualmente, la distribución mundial es, aproximadamente, la siguiente:

Blancos → 44% son O, 43% son A, 9% son B y 4% son AB.

Negros → 49% son O, 27% son A, 20% son B y 4% son AB.
Asiáticos → 43% son O, 27% son A, 25% son B y 5% son AB.

SISTEMA ABO
Nuestra sangre está compuesta por una porción líquida llamada plasma y una
parte sólida que contiene células sanguíneas, nombradas hematíes, leucocitos y
plaquetas. En promedio, el 55% de la sangre es líquida y el 45% está formado
por células.

Los glóbulos rojos contienen unas proteínas en su superficie de su membrana

celular que se llama antígenos o aglutinógenos.

Son los antígenos que recibieron los nombres A, B, AB y O.

La substancia proteica dentro del plasma se llama los ANTICUERPOS.
Los ANTICUERPOS son una parte de la defensa natural, dependiendo del grupo
sanguíneo, el sistema inmunitario fabricara anticuerpos que reaccionarán contra
otros grupos sanguíneos.

 Si un individuo tiene los antígenos A en la superficie de sus glóbulos rojos,

su sangre se clasifica como grupo A.
 Si un individuo tiene los antígenos B en la superficie de sus glóbulos rojos,
su sangre se clasifica como grupo B.
 Si un individuo tiene antígenos A y antígenos B en la superficie de sus
glóbulos rojos, su sangre se clasifica como grupo AB.
 Si un individuo no tiene ni el antígeno A y ni el antígeno B en la superficie
de sus glóbulos rojos, la sangre se clasifica como grupo O (o grupo cero).

SISTEMA RH (D)
En 1940, el mismo Karl Landsteiner descubrió la existencia del llamado factor
Rh, que era responsable de la incompatibilidad de algunos grupos de sangre,
inclusive cuando el sistema ABO era respetado.

A partir de este descubrimiento, los individuos fueron clasificados como Rh

positivo o Rh negativo, según la existencia o no del factor Rh en sus sangres.
La reacción del Rh es provocada por una madre Rh– que concibe un hijo Rh+. Los
anticuerpos de la sangre materna destruyen los Rh+ del bebé.

Si la madre piensa tener un segundo hijo debe aplicarse una vacuna que elimina
los anti-Rh, llamada la gamma inmunoglobulina.

Ésta debe ser aplicada dentro de las 72 horas después del primer parto, ya que
si se tiene un segundo bebé con Rh+ la madre producirá anti-Rh en exceso que
destruirá la sangre del hijo, produciendo una enfermedad llamada
Eritroblastosis fetal (ANEMIA SEVERA), si es que el hijo nace, ya que la
producción en exceso de los anti-Rh puede causar la muerte del hijo
intrauterinamente.

Los grupos sanguíneos Rh tienen un interés clínico similar a los grupos ABO dada
su relación con la enfermedad hemolítica del recién nacido (EHRN) y su
importancia en la transfusión.

COMPATIBILIDAD
Los donantes de sangre y los receptores deben tener grupos compatibles.

 El grupo O- es compatible con todos, por lo que se dice que es un donante

universal.
 Por otro lado, una persona cuyo grupo sea AB+, podrá recibir sangre de
cualquier grupo, y se dice que es un receptor universal.
Cabe mencionar que, al recibirse la sangre de un donante, ésta se separa en
distintos hemocomponentes y ahí se determina la compatibilidad con los debidos
grupos sanguíneos.

TRANSFUSIÓN DE SANGRE INCOMPATIBLE

Las transfusiones de sangre con incompatibilidad ABO suelen causar un cuadro
de reacción transfusional hemolítica aguda, que ocurre porque los anticuerpos
Anti-A o Anti-B destruyen casi de inmediato los glóbulos rojos transfundidos.

Esta reacción a la transfusión es una emergencia médica, que puede evolucionar

para coagulación diseminada intravascular (coagulación de la sangre dentro de
los vasos sanguíneos por todo el cuerpo), shock circulatorio, insuficiencia renal
aguda y muerte.

Los síntomas de esta forma de reacción a la transfusión generalmente comienzan

durante la transfusión. Fiebre y escalofríos son los primeros síntomas. También
puede ocurrir dolor lumbar y orina marrón.

Las transfusiones de sangre con incompatibilidad Rh son generalmente más

leves. La hemólisis (destrucción de glóbulos rojos) solamente se presenta de 3
a 30 días después y no suele ser tan grave como en la incompatibilidad ABO.

ELEVACIÓN SANGUÍNEA DE LA BILIRRUBINA INDIRECTA ES OTRA

SEÑAL TÍPICA.

El tratamiento de la reacción transfusional hemolítica aguda se hace con la

interrupción inmediata de la transfusión y la administración masiva de solución
salina intravenosa para evitar que los hematíes hemolizados obstruyan los
túbulos renales.

Pacientes que presentan hipotensión o insuficiencia respiratoria deben ser

transferidos inmediatamente a una unidad de cuidados intensivos.

PUEDE RECIBIR SANGRE DE:

TIPO DE O-** O+ B- B+ A- A+ AB- AB+
SANGRE

AB+ SI SI SI SI SI SI SI SI

AB- SI SI SI SI

A+ SI SI SI SI

A- SI SI

B+ SI SI SI SI

B- SI SI

O+ SI SI

O- SI

Actualmente ya casi no se realizan transfusiones de sangre entera, si así fuera

no debemos utilizar el término "donante o receptor universal" ya que debemos
tener en cuenta que la sangre entera está compuesta principalmente por glóbulos
rojos (con sus antígenos) y por plasma (con sus anticuerpos).

De ese modo, si se transfundiera a una persona de grupo A la sangre de un

supuesto dador universal de grupo O, estaría ingresando anticuerpos anti A (del
donante que es grupo O), que como se mencionó, tiene anticuerpos anti-A y anti-
B a la persona a transfundir provocando una incompatibilidad ABO pudiendo
provocar incluso la muerte.
 PRUEBA EN LABORATORIO
1. Se toma la muestra por punción capilar
2. Se colocarán tres gotas de sangre en los portaobjetos
3. Se agrega una gota de reactivo anti A, Anti B y Anti Rh (D)
4. Se mezclan las gotas de muestra y reactivo y se agitan por tres minutos
5. Se interpretan las aglutinaciones
Universidad de San Carlos de Guatemala
Centro Universitario de Occidente
División de Ciencias de la Salud Laboratorio de Bioquímica
Carrera de Médico y Cirujano 2022
Segundo Año Lic. Antony Cifuentes

Laboratorio
Determinación de Gonadotropina Coriónica Humana

La hormona gonadotrofina coriónica humana, coriogonadotropina o gonadotropina coriónica

humana (hCG) es una proteína sintetizada principalmente por los tejidos embrionarios; está constituida
por 2 cadenas de aminoácidos denominadas alfa (α) y beta (β), unidas no covalentemente por un
puente sulfidrilo, que si se separan pierden su actividad biológica; es decir, que ninguna tiene actividad
por sí misma, pero la recuperan cuando se recombinan. La subunidad α es común a otras hormonas
como la hormona luteinizante (LH), la hormona folículo estimulante (FSH), la hormona estimulante de
la tiroides (TSH); mientras que la β es diferente a cada otra hormona y es quien le confiere la
especificidad.

La hCG es considerada como una glucoproteína extraña, en la que aproximadamente el 65 %

de su peso molecular corresponde a las proteínas o los aminoácidos; a veces la comparan con un
polisacárido, como lo es el colágeno, por su gran componente de carbohidratos con 4 cadenas
laterales de azúcares unidos a la asparagina y 7 a 14 de ellos adheridos a la hCG, 2 en la subunidad
α y 2 en la β. Tiene además 4 cadenas laterales de azúcares unidos a la serina con 3 a 6 residuos
glucídicos, todos en la subunidad β. La combinación de las 2 subunidades y las 8 cadenas de
carbohidratos resultan en una mayor variabilidad de la estructura de la hCG

Determinación de HCG

La determinación del hCG en orina y plasma ha sido de gran utilidad clínica en el diagnóstico
del embarazo normal y de sus patologías. Se ha utilizado en el diagnóstico de embarazo ectópico,
embarazo amenazado, aborto, huevo anembrionado y muerte del producto de la concepción. Es útil
en el tamizaje de trisomías, fundamental en el estudio y conducción de las enfermedades
gestacionales del trofoblasto, tumores ováricos y testiculares benignos y malignos, como diagnóstico
y pruebas de funcionalismo gonadales, infertilidad masculina y femenina, inducción médica de la
ovulación, control de la fertilidad y se han ensayado para reducción de peso.
Universidad de San Carlos de Guatemala
Centro Universitario de Occidente
División de Ciencias de la Salud Laboratorio de Bioquímica
Carrera de Médico y Cirujano 2022
Segundo Año Lic. Antony Cifuentes

La hCG puede ser localizada, con técnicas de radioinmunoensayos muy sensibles, en el plasma
casi inmediatamente después de la concepción, ya a los 9 días del pico ovulatorio de LH y 1 día
después de la implantación. Existen pruebas que detectan su presencia en suero tan temprano como
1 semana después de la concepción, con umbral tan bajo como 2-4 mIU/mL El embrión de 8 células
la produce y entra al torrente circulatorio al otro día de la implantación del blastocisto, alcanzando
niveles de 100 mUI/mL a las 4 semanas después del primer día del último período menstrual; aumenta
rápidamente en el plasma, casi duplicándose sus concentraciones cada 31 horas, encontrándose un
pico de 100 000 mUI/mL a las 10 semanas de gestación.

Otros han señalado que la duplicación es cada 2 días y que a los 40 días hay 6 500 mUI/mL,
100 000mUI/mL a las 9 semanas, para luego descender y mantenerse durante el resto del embarazo
entre 10 000-15 000 mUI/mL. Se han encontrado valores altos en embarazos múltiples, enfermedad
gestacional del trofoblasto, en la isoinmunización a Rh y en el síndrome de Down y están bajas en
abortos y embarazo ectópico. Un estudio reciente demuestra que mientras más baja son las
concentraciones sanguíneas de hCG, más rápido es su aclaramiento de la sangre, con un promedio
de 26 días desde el momento de la evacuación uterina.

MATERIALES

1. Pruebas rápidas de embarazo.

2. Gotero (Incluido en la prueba rápida)

3. Suero de la paciente.

PROCEDIMIENTO:

1. Saque el dispositivo de prueba de la bolsa y colóquelo en una superficie plana y seca.

2. Con el gotero, obtener suero del paciente.

3. Sostenga el gotero sobre el casete de la prueba y coloque 3-4 gotas de suero

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Carrera de Médico y Cirujano 2022
Segundo Año Lic. Antony Cifuentes

4. Observará cómo el suero recorre la membrana de la prueba.

5. Interprete los resultados de la prueba en 5 minutos.

Precaución: El tiempo de interpretación está basado en una lectura de los resultados de la prueba a
temperatura ambiente de 15-30°C. Si su temperatura ambiente es significativamente más baja de
15°C, el tiempo de interpretación debería aumentarse apropiadamente.

Interpretación de los resultados

Resultado Negativo: Sólo se observa la línea control © no así la línea Test (T) esto
indica que la prueba no detecto la hormona Gonadotropina Coriónica Humana.

Resultado positivo: Se observa la línea control © y la línea Test (T) esto indica que la
prueba detecto la hormona Gonadotropina Coriónica Humana. La paciente
probablemente esté embarazada.

Resultado Inválido: No se observa la línea control por lo tanto la prueba es inválida, el

control nos sirve para determinar si la prueba no tiene ningún problema entonces,
aunque la línea del test se observe, el resultado será inválido. La prueba deberá
repetirse.

© no así la línea Test (T) esto indica que la prueba no detecto la hormona
Gonadotropina Coriónica Humana.
Bibliografía:
Rev Obstet Ginecol Venez 2014;74(2):122-133, Dr. Nelson Velásquez, Ginecología y Obstetricia, Universidad del Zulia,
Maracaibo, Venezuela.

El laboratorio en el diagnóstico clínico, John Bernard Henry.

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Segundo Año

Tiempos de coagulación
Tiempo de Protrombina
La protrombina es una proteína estable del tipo de globulinas alfa que contiene unos 18
aminoácidos. Su concentración normal en la sangre es de aproximadamente 20 mg/100ml. Es
producida por el hígado bajo la influencia de la vitamina liposoluble. La protrombina está
relacionada con el factor VII también producida por el hígado. La protrombina se transforma en
trombina en la etapa segunda de la coagulación.
Objetivos
Que el estudiante:
- Conozca las pruebas de coagulación y cuál es su importancia.
- Se familiarice con el método utilizado para la determinación del tiempo de protrombina.
Materiales
• Tubos de hemolisis (tubos de ensayo)
• Pipetas automáticas
• Gradillas para tubos de ensayo
• Jeringas
• Algodón
• Alcohol
• Ligadura
• Tubos para pruebas de coagulación.
• Cronometro
• Baño maría
• Centrifuga
• Reactivo para la determinación de tiempos de coagulación.

Procedimiento
1. Centrifugar la muestra del paciente por 15 minutos a 1500 rpm, para separar el plasma del
paquete celular.
2. En un tubo de ensayo colocar 200 microlitros de reactivo de protrombina y pre incubar por 2
minuto.
3. Finalizado el tiempo de incubación, agregar 100 microlitros del plasma del paciente e
inmediatamente activar el cronómetro.
4. A los 8 segundos con un palillo, mezclar cuidadosamente y observar la formación de fibrina
(coagulo de fibrina).
5. Cuando observe la formación de la fibrina, detenga el cronometro y apunte los segundos en
los que se formó la fibrina.

Valores de Referencia
11.0 – 13.0 segundos (Ciesla, 2022)
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Tiempo de Parcial de Tromboplastina

Siempre que se rompe un vaso sanguíneo, los tejidos lesionados que lo rodean, o los bordes
desgarrados del propio vaso, liberan un material lipoprotéico denominado tromboplastina. Este, a
su vez, reacciona con los iones de calcio y con varios factores proteicos del plasma sanguíneo,
para producir activadores de protrombina.

Objetivos

Que el estudiante:
- Conozca las pruebas de coagulación y cuál es su importancia.
- Se familiarice con el método utilizado para la determinación del tiempo parcial de
tromboplastina.
Materiales
• Tubos de hemolisis (tubos de ensayo)
• Pipetas automáticas
• Gradillas para tubos de ensayo
• Jeringas
• Algodón
• Alcohol
• Ligadura
• Tubos para pruebas de coagulación.
• Cronometro
• Baño maría
• Centrifuga
• Reactivo para la determinación de tiempos de coagulación.
Procedimiento
1. Centrifugar la muestra del paciente por 15 minutos a 1500 rpm, para separar el plasma del
paquete celular.
2. En un tubo de ensayo agregar 200 microlitros de Cloruro de calcio e incubar por 3 minutos
a 37°C.
3. En otro tubo de ensayo, agregar 150 microlitros de reactivo para TPT, e incubar 2 minutos a
37°C.
4. A un tubo de ensayo identificado como M, agregar 100 microlitros de plasma del paciente y
100 microlitros de reactivo de TPT previamente incubado, mezclar y e incubar por 2 minutos
a 37°C.
5. Finalizado los 2 minutos de incubación, agregar 100 microlitros de cloruro de calcio
previamente incubado e inmediatamente activar el cronómetro.
6. A los 20 segundos mezclar cuidadosamente con un palillo y observar la formación de
fibrina.
7. Cuando se forme la fibrina, detener el cronómetro y reportar los segundos en que se formó
la fibrina.
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Segundo Año

Valores de referencia
25.0 – 35.0 segundos (Ciesla, 2022)

Bibliografía
Ciesla, B. (2022). Hematología en la Práctica. Stevenson, Maryland: Almoca.
Henry, J. B. (2022). Laboratorio en el Diagnostico Clinico. Madrid: Marbán.
Pedret, S. V. (2022). Principios de Preanalítica en Atención Primaria. Panyella.
Rodak, F. B. (2022). Hematología: fundamentos y aplicaciones clínicas. Buenos Aires: Médica
Panamericana.

Tiempo de Sangría y Coagulación

Tiempo de Sangría

Mide el tiempo que tarda en dejar de sangrar una herida cutánea. Los dos métodos más empleados son
el de Duke y el de Ivy.

MATERIALES:
- Lanceta descartable estéril.
- Papel filtro.
- Torundas de algodón humedecidas con alcohol.
- Guantes descartables.
EQUIPO:
- Cronómetro.

PROCEDIMIENTO:
- Lavar y secar las manos y colocarse los guantes.
- Explicar al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.
- Realizar un masaje en el lóbulo de la oreja durante un minuto.
- Desinfectar cuidadosamente el área de punción.
- Puncionar el lóbulo de la oreja y activar el cronómetro en cuanto empiece a sangrar.
- Secar con el papel filtro, sin ejercer presión para no romper el tapón de la coagulación, este secado debe
realizarse cada medio minuto hasta que cese el sangramiento.
- Realizar el secado en forma descendente o circular sin tocar la piel.
- Cuando deje de sangrar, detener el tiempo y anotar.

VALOR DE REFERENCIA
1 – 4 minutos.
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Tiempo de coagulación por el método de Lee y White.

MATERIALES:
- Jeringas descartables.
- Tubos 12x75mm.
- Torundas de algodón.
- Gradillas para tubos.
- Alcohol etílico al 70%.
- Torniquete.
- Guantes descartables.

EQUIPO:
- Baño de María a 37°C.
- Reloj marcador.
- Termómetro.

PROCEDIMIENTOS:
- Lavar y secar las manos y colocarse los guantes.
- Identificar el tubo de acuerdo a la solicitud.
- Explicar al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.
- Desinfectar cuidadosamente el área de punción.
- Obtener sangre venosa con una jeringa descartable y estéril.
- Poner en marcha el cronómetro en el momento en que la sangre ingrese a la jeringa.
- Verter cuidadosamente 1 CC de sangre en 3 tubos, (1cc en cada tubo) mantenerlos a 37ºC.
- Invertir cada medio minuto (sin agitar) los 3 tubos hasta que cada uno pueda invertirse sin
que se vierta su contenido.
- Tomar el tiempo de coagulación de cada uno de los tubos y anotar el tiempo.
- Sume el tiempo de los 3 tubos luego divida dentro de 3 para sacar el promedio.

VALORES DE REFERENCIA
5- 10 MINUTOS.
Metabolismo
DE LOS FÁRMACOS
Parte II
Un xenobiótico es una sustancia que no existe de forma natural pero que
interfiere en el metabolismo de cualquier organismo.

 Metabolismo; son procesos físicos y químicos que sufren las moléculas.

 Hidrofilia; proceso de solubilidad en agua, o sea es una sustancia que
tiene afinidad por el agua.
 P450; es una enorme y diversa superfamilia de hemoproteínas
encontradas en bacterias, archaea y eucariotas. Las proteínas del
citocromo P450 usan un amplio rango de compuestos exógenos y
endógenos como sustratos de sus reacciones enzimáticas.
 La especificidad es debido a que las enzimas tienen cierta capacidad para
saber sobre que sustancias actuar. En otras palabras, es la capacidad de
cada enzima para diferenciar sustancias que tienen características
semejantes (especificidad de sustrato) o para realizar una
transformación concreta (especificidad de acción).
 En si la baja especificidad por parte de los P450 le permite una amplia
capacidad del metabolismo de fármacos, debido a que no identifican bien
sobre que sustancia actuar.

LOS XENOBIÓTICOS SE METABOLIZAN EN EL HÍGADO.

Cuando se ingresan xenobióticos o fármacos el organismo lo primero que hace es

realizar la hidrofilia ya que la mayoría de los medicamentos no son hidrosolubles,
para que estos medicamentes después de actuar puedan secretarse por la bilis
o por medio de la orina en cuanto al riñón, este paso es el primero de dos pasos
del metabolismo de fármacos.

RECORDAR: EL ORGANISMO VUELVE SOLUBLES LOS FÁRMACOS PARA

PODER ELIMINARLOS.

Algunos medicamentos que si son hidrosolubles pasan de una vez al segundo paso.
FARMACOCINÉTICA
Son todos los procesos que realiza el organismo al ingresar un fármaco.
El organismo realiza lo siguiente:
 Absorción
 Distribución
 Biotransformación (metabolismo)
 Excreción

El piroxicam, pertenece a los AINES, se absorbe por completo después de la

administración oral; se alcanzan concentraciones plasmáticas máximas en 2 a 4
horas. Ni lo alimentos ni los antiácidos alteran la velocidad o el grado de
absorción. Se produce una circulación enterohepática del piroxicam y las
estimaciones de la vida media plasmática han sido variables, el valor medio
parece ser de alrededor de 50 horas.

Después de la absorción, se une en forma extensa (99%) a las proteinas

plasmáticas. En estado de equilibrio las concentraciones de piroxicam en el
plasma y en el líquido sinovial son casi iguales. Menos del 5% de la droga se
excreta sin modificar por la orina. La hidroxilación del anillo piridilo es la
transformación metabólica más importantes en el hombre y este metabolito
inactivo y su conjugado glucurónido constituyen cerca del 60% de la droga
excretad por la orina y las heces.

BIOTRANSFORMACIÓN (METABOLISMO DE
XENOBIÓTICOS)
 La mayoría de los fármacos se metabolizan en el hígado.
 Aumentando la hidrofilia de los medicamentos.
 Facilitando su capacidad de ser excretados.

PASOS
1. Ingresa el fármaco
2. Actúan metabolitos más polares
3. Incrementa la excreción
4. Reduce la carga de sustancias extrañas
5. Elimina constituyentes naturales de alimentos (flavonas, alcaloides y
esteroides)
 LOCALIZACIÓN DE LOS SISTEMAS ENZIMÁTICOS DE
BIOTRANSFORMACIÓN

 El órgano por excelencia es el hígado específicamente en el retículo

endoplásmico liso en la fracción microsomal.
 Riñón
 Pulmón, en los fármacos inhalados.
 Epitelio gastrointestinal
 Plasma

PROFÁRMACOS
Son los medicamentos que, al entrar al organismo están inactivos desde un inicio,
y son activados dentro de este, generalmente en el hígado, para que realice sus
efectos terapéuticos.

FASES DEL METABOLISMO DE XENOBIÓTICOS

El objetivo de las 2 fases del metabolismo de fármacos es convertir
moléculas insolubles en solubles (hidrosolubilidad y polaridad) para que estos
puedan ser secretados.

FASE I (ADICION DEL GRUPOL POLAR)

Se lleva a cabo la hidroxilación con la agregación de OH, a esta reacción se le
puede conocer también como OXIDACIÓN, REDUCCIÓN O HIDRÓLISIS,
aparte de hidroxilación.

Este proceso lo realizan las enzimas citocromo oxidasas (P450)

Una pequeña proporción de acetaminofeno sufre N-hidroxilación mediada por el

citocromo p450, para formar N-acetil-benzoquinoneimina, un intermediario de
alta reactividad. En forma normal este metabolito reacciona con el grupo
sulfhidrilo en el glutatión.

Sin embargo, después de grandes dosis de acetaminofeno el metabolito se forma

en cantidades suficientes como para agotar el glutatión hepático, en estas
circunstancias, aumenta la reacción con los grupos sulfhidrilos en las proteínas
hepáticas pudiendo producirse necrosis hepática.

LAS REACCIONES DE ESTA FASE SE IDENTIFICA DEBIDO A LA

HIDROXILACIÓN Y A LA ENZIMA P450.
INHIBICIÓN DE P450

Hay sustancias que al entrar al organismo inhibe estas enzimas, algunas de estas
son el etanol y la cimetidina.

METABOLITO RESULTANTE

Puede ser:

 Farmacológicamente inactivo como en el caso de un compuesto original

profármaco, como el enalapril.
 Activo
 Más activo que la molécula inicial

FASE II (PREPARACION PARA LA EXCRECION)

De primero ingresa a la conjugación o síntesis, convirtiendo la estructura
molecular en una más polar, por medio de un sustrato endógeno (solo se
encuentra dentro del organismo), solo busca un sustrato dependiendo las
características del fármaco.

Puede unirse:

 Al ácido glucurónico glucuronidación

 Al sulfato sulfatación
 Conjugación con glutatión
 Al acetilo  acetilación
 Al metilo metilación

GLUCURONIDACIÓN
Es la más frecuente, hace más soluble la molécula al unirla a un ácido glucurónico
como en el caso de la bilirrubina al transformar la bilirrubina no conjugada en
conjugada.

Algunos de los que se unen al ácido glucurónico son el fenol, algunos esteroides
y el meprobamato.

CONJUGACIÓN CON GLUTATIÓN

Se realiza por medio de la GLUTATIÓN S TRANFERASA, en el citosol hepático
en cantidades elevadas.
CITOCROMO P450
HAY 18 FAMILIAS DE GENES DE P450, DE ESTAS SOLO 3 COMPARTEN
LA RESPONSABILIDAD DE METABOLIZAR FÁRMACOS. (CYP1, CYP2 Y
CYP3)

 El citocromo P450 son proteínas que contienen el grupo HEMO

(hemoproteína)
 Presentan la misma localización del NAD.

FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

 Edad
 Sexo

POLIMORFISMO GÉNICO DE P450

Son aspectos genéticos en cuanto a la variación alélica que afecta la actividad
catalítica de P450, afectando la actividad del metabolismo de los fármacos,

Un ejemplo es la lentitud al hidroxilar debrisoquina

CLOPIDOGREL
Es un antiagregante plaquetario, se administra con ASA (aspirina) en pacientes
con arteriopatías coronarias.

Es un profármaco al cual lo trasforma el CITOCROMO P450 CYP2C19 en su

metabolito activo.

INTERACCIÓN FARMACOLÓGICA
Cuando se toman en combinación los medicamentos, ya sea a la misma hora o
combinados, es una administración en forma de coctel, donde pueden interactuar
los dos medicamentos afectar su metabolismo, ya que los dos medicamentos
compiten para la actividad del P450. En si comparten un destino metabólico CYP
común.

UNA INDUCCIÓN A LA INHIBICIÓN DEL P450 es la combinación de

ketoconazol con Equoral, reduciendo su efectividad al 75%, ya que solo el 25%
lo utiliza el organismo.
HEPATOTOXICIDAD FARMACOLÓGICA
La LHIF, son lesiones hepáticas inducidas por fármacos, cuando se consumen
medicamentes sin una dosis medida, decimos que se produce la idiosincrasia,
cuando el organismo produce estos efectos tóxicos en fármacos con dosis y
concentraciones normales terapéuticas, se dice que su causa es genética o
inmunitaria.

FARMACOGENÓMICA
Estudia los efectos de la heterogeneidad genética, para ello se realizan pruebas
de función hepática como:

 Bilirrubina
 Albúmina
 Transaminasas
 Fosfatasa alcalina
 Gamma-glutamil transferasa

PRUEBAS BIOQUÍMICAS DE FUNCIÓN HEPÁTICA

Los laboratorios clínicos ofrecen una serie de determinaciones bioquímicas en
muestras de suero o plasma.

Este grupo de pruebas se denomina habitualmente, aunque de forma incorrecta,

pruebas «funcionales» hepáticas. Aunque las actividades plasmáticas de las
enzimas hepáticas son marcadores de hepatopatía, no reflejan con exactitud la
función del hígado. La síntesis de protrombina, valorada mediante el tiempo de
protrombina (TP), constituye un mejor indicador de la función hepática de
síntesis.

En general, las pruebas incluyen las siguientes determinaciones:

 Bilirrubina.
 Albúmina.
 Aspartato aminotransferasa (AST) y alanina aminotransferasa (ALT).
 Fosfatasa alcalina (ALP).
 γ-glutamil transferasa (γGT).
TRANSAMINASAS
Las transaminasas, aspartato aminotransferasa (AST) y alanina
aminotransferasa (ALT), están implicadas en la interconversión de aminoácidos
y cetoácidos y, por tanto, se requieren para el metabolismo del nitrógeno y de
los hidratos de carbono. Ambas transaminasas están localizadas en las
mitocondrias; la ALT se encuentra también en el citoplasma. La actividad sérica
de ALT y AST aumenta en la enfermedad hepática (la ALT es la determinación
más sensible debido a su localización citoplásmica).

TIEMPO DE PROTROMBINA
En las hepatopatías probablemente se vean afectadas las funciones de síntesis
de los hepatocitos, de manera que sería de esperar que el paciente mostrase una
prolongación del tiempo de protrombina y una concentración sérica de albúmina
baja.

FOSFATASA ALCALINA (ALP)

La ALP se sintetiza en el tracto biliar y en el hueso, y en la placenta durante el
embarazo, pero estos tejidos contienen isoenzimas diferentes de ALP. El origen
de la ALP se puede determinar a partir del patrón de isoenzimas. De forma
alternativa, se puede determinar la actividad plasmática de otra enzima, como la
γ-glutamil transpeptidasa (GGT), que también se origina en el tracto biliar, y
usarla para confirmar el origen hepático de la elevación de la actividad de la ALP
sérica.
 CASOS CLÍNICOS
PRIMER CASO
MUJER DE 22 AÑOS CON SOBREDOSIS DE PARACETAMOL

Una mujer de 22 años de edad fue ingresada en el hospital en estado de

semiinconsciencia. La habían encontrado junto con una nota de suicidio y envases
vacíos de paracetamol. Los análisis revelaron lo siguiente: aspartato
aminotransferasa (AST), 5.500 U/l; fosfatasa alcalina, 125 U/l; bilirrubina, 70
µmol/l (4,1 mg/dl); tiempo de protrombina, 120 s (intervalo de referencia, 10-15
s); creatinina, 350 µmol/l (4,0 mg/dl) (intervalo de referencia, 44-80 µmol/l
[0,50-0,90 mg/dl]); glucemia, 2,6 mmol/l (47 mg/dl) (intervalo de referencia,
4,0- 6,0 mmol/l [72-109 mg/dl]), y pH sanguíneo, 7,1 (intervalo de referencia
7,35-7,45; esto es igual a 80 nmol/l H+ con intervalo de referencia de 35-45
nmol/l). No se encontró paracetamol en el plasma.

COMENTARIO

La paciente tenía una insuficiencia hepática aguda, causada muy probablemente

por una intoxicación por paracetamol. El paracetamol en la sangre puede ser
indetectable si la paciente recibe atención médica por primera vez transcurridas
más de 24 horas después de una sobredosis. El daño hepatocelular empeora
durante las primeras 72 horas, pero puede mejorar espontáneamente a partir
de entonces debido a la regeneración de los hepatocitos. Sin embargo, en
pacientes con acidosis metabólica (pH 45 nmol/l, después de la fluidoterapia de
reanimación), aumento notorio del tiempo de protrombina (>100 segundos) o
creatinina sérica >300 µmol/l (3,4 mg/dl), la mortalidad oscila en torno al 90% y
puede ser necesario un trasplante hepático.
SEGUNDO CASO
VARÓN DE 45 AÑOS APARENTEMENTE SANO CON TRANSAMINASAS
ANORMALES

Un empresario de 45 años se sometió a una revisión médica de control y se

observó que su hígado estaba ligeramente aumentado de tamaño. Las pruebas
revelaron lo siguiente: bilirrubina, 15 µmol/l (0,9 mg/dl); AST, 434 U/l; ALT, 198
U/l; fosfatasa alcalina, 300 U/l; gamma-glutamil transpeptidasa (GGT) 950 U/l,
y albúmina, 40 g/l (4 g/dl). Parecía encontrarse perfectamente bien.

COMENTARIO

El paciente padece una hepatopatía asintomática. Las pruebas bioquímicas

muestran indicios de daño hepatocelular, que puede deberse a una ingesta
excesiva de alcohol, en cuyo caso puede haber un aumento del tamaño de los
hematíes (macrocitosis) y un incremento de la concentración sérica de ácido
úrico. Puede que los pacientes nieguen el consumo de alcohol. No obstante, la
hepatopatía grasa no alcohólica (HGNA) se considera cada vez más una causa de
anomalías aisladas en las concentraciones séricas de transaminasas. La HGNA
ocurre en el 40% de los pacientes con el denominado síndrome metabólico, en el
cual el sobrepeso central se debe a la acumulación de grasa visceral, que conduce
a un aumento de la resistencia a la insulina, hipertensión, dislipidemia y
esteatosis hepática. Esta última, al igual que la hepatopatía inducida por alcohol,
puede acabar en cirrosis. Se puede calcular el riesgo de fibrosis a partir de una
amplia gama de parámetros de laboratorio, y los de riesgo más alto puede
someterse a una prueba de barrido hepático especializada (fibroscan) con el
objetivo de identificar cambios fibróticos de manera no invasiva. No obstante,
puede ser necesario realizar una biopsia con aguja del hígado para establecer el
diagnóstico. Otras causas, como una infección vírica crónica del hígado o una
hepatitis crónica activa autoinmunitaria, se pueden detectar mediante análisis
de sangre.
Metabolismo
DE LOS FÁRMACOS
El metabolismo de los fármacos son los cambios físicos y químicos en los
fármacos, también se le puede denominar metabolismo de los xenobióticos,
que son aquellos que no conforman de los 3 grandes grupos, que son las proteínas,
carbohidratos y lípidos.

Las formas farmacéuticas o formas de dosificación son las maneras en que se

pueden administrar fármacos a partir de preparados que se obtienen de
principios activos para ser administrados al organismo.

 Los medicamentos deben ser administrados para que sean absorbidos.

 Los fármacos son metabolizados en el hígado.

Estos fármacos pueden ingresar por las siguientes vías de administración:

 Parenteral
Intravenosa
Subcutánea
Intramuscular
Intraarterial
 Oral
 Sublingual
 Rectal
 Tópica
SÓLIDOS
Cápsulas
 Polvo; normalmente son de este tipo
 Gránulos; la liberación es programada o prolongada.
 Líquidos o semisólidos; media vez abiertos no se pueden utilizar por ende
están selladas, se dice que contienen gelatina blanda, al contrario, las de
gelatina dura, traen sólidos, y se pueden abrir.
Píldoras
Son esféricas y sólidas
Caplet
Se parecen a las cápsulas, pero no se puede separar la cola de la cabeza, son a
base de polvo en compresión, y son muy duras.

Según colores pueden responder al tipo de medicamento

 Los analgésicos son blancos

 Estimulantes son rojos
 Relajantes son verdes

FORMAS FARMACÉUTICAS
Sólidos
 POLVOS: compuesta por una o varias sustancias mezcladas, finamente
molidas para aplicación externa o interna.
 GRÁNULOS: mezcla de polvos medicamentosos y azúcar, repartida en
pequeños granos.
 CÁPSULAS: cubiertas de gelatina que se llenan con sustancia sólidas o
líquidas y se administran por deglución para evitar el sabor y el olor de los
medicamentos. Hay tres tipos de cápsulas: duras, cápsulas elásticas y
perlas.
  TABLETAS O COMPRIMIDOS: sólidos, generalmente discoidea, obtenida
por compresión; es la forma farmacéutica más utilizada.
 CAPLET: liberan la droga activa lentamente en el tubo digestivo, de acción
sostenida, se administra a intervalos menos frecuentes que con las
cápsulas o tabletas comunes.
 PÍLDORAS: forma farmacéutica sólida esférica y constituida por una masa
elástica no adherente.

Semisólidos
 PASTAS: son pomadas que contienen una fuerte preparación de polvos
insolubles en la base para aplicación cutánea.
 CREMAS: emulsiones de aceite en agua o agua en aceite, de consistencia
semisólida no untuosa o líquida muy espesa
 UNGÜENTOS: Preparación de consistencia blanca que contiene el o los
fármacos y excipientes incorporados a una base que le da consistencia. La
base puede ser liposoluble o hidrosoluble, generalmente es anhidra o con
un máximo de 20% de agua. Se aplica en la piel y mucosas.

Líquidos
 JARABE: consiste en una solución acuosa con alta concentración de
azúcares tales como sacarosa, sorbitol, dextrosa, etc.; de consistencia
viscosa, en la que se encuentra disuelto el principio activo.
 SUSPENSIÓN: es un preparado líquido, de aspecto turbio o lechoso,
constituido por la dispersión de un sólido en un vehículo acuoso. Si es muy
densa se denomina magma o leche (leche de magnesia); si las partículas
son muy pequeñas y están hidratadas es un gel (gel de hidróxido de
aluminio)
 INYECCIÓN: es un preparado líquido, solución, suspensión o raramente
emulsión, constituido por drogas en vehículo acuoso o aceitoso, estéril, y
se emplea por vía parenteral.
 COLIRIO O SOLUCIÓN OFTÁLMICA: preparado líquido constituido por una
solución acuosa destinada a ser aplicada en el ojo.
 SOLUCIONES; es un preparado líquido que contiene una o más sustancias
químicas solubles disueltas en agua o el solvente empleado. Las soluciones
se usan por el efecto del soluto por vía interna o externa.
  EMULSIONES; son sistemas dispersos heterogéneos constituidos por dos
fases líquidas inmiscibles. Generalmente, una de las fases queda dividida
en partículas aisladas en el seno de la otra, constituyendo la fase interna
o fase dispersa. En otras palabras, es un tipo de coloide que se forma al
combinar dos líquidos que normalmente no se mezclan. En una emulsión, un
líquido contiene una dispersión del otro líquido. El proceso de mezclar
líquidos para formar una emulsión se llama emulsificación.

FORMAS DE ADMINISTRACIÓN
Oral
El medicamento se ingiere y se absorbe a través del tracto gastrointestinal. Es
la vía más utilizada y el fármaco puede tomar forma de gotas, jarabes, elixires,
comprimidos, cápsulas, pastillas, etc.

Tópica
El fármaco se administra directamente sobre la piel o las mucosas (incluyendo
genitales y ojos). Los más comunes son medicamentos dermatológicos e
instilaciones oftálmicas.

Dérmica
Es aquella que se absorbe localmente a través de la piel.

Instalaciones o irrigaciones:
 ÓTICA: Se administran en el oído fármacos utilizados para tratar la
inflamación y la infección del oído se pueden aplicar directamente en el
oído afectado.
 NASAL: La administración de medicamentos por vía nasal es una técnica
muy empleada, dado que es fácil de manejar y ofrece muchas ventajas
respecto a otras vías de administración.
 OCULAR: son preparaciones estériles liquidas, semisólidas o sólidas
destinadas a ser administradas en el globo ocular o en la conjuntiva, o bien
a su inserción en el saco conjuntival.
 RECTAL: el fármaco se introduce en el recto. Se utiliza cuando existen
dificultades para la administración por otras vías.
  VAGINAL: el medicamento se introduce en la vagina, a veces mediante un
aplicador. Administración de fármacos en forma de solución, comprimido,
crema, gel, supositorio o anillo.
 INHALATORIA: el medicamento se administra a través de las vías
respiratorias altas en pequeñas dosis.

PARENTERAL
El fármaco se introduce atravesando la piel o las membranas mediante una aguja
hueca en su interior (inyección o catéter).

 INTRADÉRMICA: Es la introducción de un volumen o solución menor a un

centímetro en la dermis. Se caracteriza por formar una pápula en el sitio
de la inyección. Prueba de sensibilidad a alérgenos: alergia a una sustancia
animal o vegetal. Prueba de sensibilidad a fármacos: penicilina,
tuberculina.
 SUBCUTÁNEA: la administración del fármaco se realiza a través del tejido
subcutáneo de la piel. El fármaco se inyecta en pequeñas cantidades,
habitualmente menos de 2,0 ml. La absorción del fármaco es lenta pero el
efecto dura más que con otras vías parenterales.
 INTRAMUSCULAR: este método de administración requiere el uso de
grandes agujas para poder penetrar el tejido subcutáneo de la piel. El
fármaco viene depositado entre los tejidos de la masa muscular. La
administración por vía intramuscular es ideal para administrar soluciones.
 INTRAVENOSA: la administración de fármacos por vía intravenosa está
recomendada cuando se requiera una reacción inmediata o cuando la
absorción no sea posible. Este método permite al fármaco llegar al
torrente sanguíneo directamente.
LA BAJA ESPECIFICIDAD DE SUSTRATO DE ALGUNAS ENZIMAS
HEPÁTICAS ORIGINA UNA AMPLIA CAPACIDAD DE METABOLISMO DE
LOS FÁRMACOS

La mayoría de los fármacos se metabolizan en el hígado.

Entre otros efectos, este metabolismo hepático suele aumentar la hidrofilia de

los fármacos y, por tanto, su capacidad de ser excretados por los riñones o la
bilis. Generalmente, los metabolitos que se producen son menos activos
farmacológicamente que el fármaco original; sin embargo, algunos fármacos
son inactivos cuando se administran, pero se convierten en sus formas activas
como resultado de su procesamiento en el hígado (PROFÁRMACOS).

Los sistemas hepáticos metabolizadores deben ser capaces de gestionar una

gama infinita de moléculas que pueden encontrarse tras la ingestión o la
administración; esto se consigue porque las enzimas responsables tienen una baja
especificidad de sustrato.

EL METABOLISMO DE LOS FÁRMACOS TIENE LUGAR EN DOS FASES

 LA FASE I es la ADICIÓN DE UN GRUPO POLAR: la polaridad del

fármaco aumenta por su OXIDACIÓN O HIDROXILACIÓN catalizada por
una familia de enzimas microsomales conocidas en conjunto como
citocromo P-450 oxidasas.
 LA FASE II es la CONJUGACIÓN: las enzimas citoplasmáticas
conjugan los grupos funcionales introducidos en las reacciones de la
primera fase, generalmente mediante GLUCURONIDACIÓN O
SULFATACIÓN, pero también mediante acetilación y metilación.

TRES DE LAS 18 FAMILIAS DE GENES DEL CITOCROMO P-450

COMPARTEN LA RESPONSABILIDAD DEL METABOLISMO DE LOS
FÁRMACOS

La superfamilia del citocromo P-450 (CYP) humano consta de 18 familias y

43 subfamilias que contienen 57 genes y 59 seudogenes.

Las enzimas del citocromo P-450 son proteínas que contienen el grupo hemo y
que presentan la misma localización que la NADPH: citocromo P-450 reductasa.
se encuentran en el retículo endoplásmico.

La mayor parte de las actividades metabólicas asociadas con la superfamilia del

citocromo P-450 tiene lugar en el hígado, pero estas enzimas también están
presentes en el epitelio del intestino delgado.
Existen 18 familias génicas de citocromo P-450, de las cuales tres, denominadas
CYP1, CYP2 y CYP3, son las responsables de la mayor parte de la fase I del
metabolismo de los fármacos. De estas, CYP1A2, CYP3A4, CYP2B6, CYP2C9,
CYP2C19, CYP2D6 y CYP2E1, son las responsables de aproximadamente el 90%
del metabolismo de los fármacos. De estas, CYP3A4 es responsable de la
mayoría de las transformaciones metabólicas, si bien cada vez hay más pruebas
que demuestran que CYP2B6 desempeña un papel mucho mayor en el
metabolismo humano de los fármacos que lo que se pensaba antiguamente.

LA INDUCCIÓN Y LA INHIBICIÓN COMPETITIVA DE LAS ENZIMAS DEL

CITOCROMO P-450 APUNTALAN LOS MECANISMOS DE INTERACCIÓN
DE LOS FÁRMACOS

La síntesis hepática de los citocromos P-450 está inducida por determinados

fármacos y otros xenobióticos que aumentan la velocidad de reacciones de la
fase I.
Por otra parte, los fármacos que forman un complejo relativamente estable con
un citocromo P-450 determinado inhiben el metabolismo de otros fármacos que
normalmente son sustratos de este citocromo.

Por ejemplo, el CYP1A2 metaboliza, entre otros, la cafeína y la teofilina.

Puede inhibirse por el zumo de pomelo, que contiene una sustancia conocida
como naringina, o por el antibiótico ciprofloxacino. Cuando una persona toma
alguna de las sustancias inhibidoras, los sustratos normales para el CYP1A2 se
metabolizan más lentamente y aumentan sus concentraciones plasmáticas. La
dosis del inmunosupresor ciclosporina puede tener que reducirse hasta un 75%
si el paciente también está tomando el antimicótico ketoconazol para evitar la
aparición de reacciones clínicas adversas.

Los fármacos que inducen la inducción o represión de enzimas CYP3A a menudo

actúan a través del mecanismo del receptor nuclear.

POLIMORFISMOS GÉNICOS DEL CITOCROMO P-450 DETERMINAN LA

RESPUESTA A MUCHOS FÁRMACOS

La variación alélica que afecta a la actividad catalítica de un citocromo P-450

afectará también a la actividad farmacológica de los fármacos. El ejemplo mejor
descrito de este polimorfismo es el del citocromo P-450 CYP2D6, que se
identificó inicialmente en el 5-10% de los individuos normales en los que se
apreció lentitud para hidroxilar la debrisoquina, un fármaco hipotensor que
actualmente se emplea poco.
Sin embargo, el CYP2D6 también metaboliza un número importante de otros
fármacos de uso frecuente, por lo que el «polimorfismo para la debrisoquina»
sigue siendo importante clínicamente.

El antiagregante plaquetario clopidogrel se administra junto al ácido

acetilsalicílico en los pacientes con arteriopatía coronaria sometidos a un
procedimiento de revascularización.

Sin embargo, cerca del 25% de los pacientes experimentan una respuesta
antiplaquetaria subterapéutica al clopidogrel.

EL CLOPIDOGREL es un profármaco que sufre biotransformación hepática por

el CYP2C19 en su metabolito activo. En varios estudios se ha mencionado que
los portadores de la variante alélica CYP2C19 muestran una capacidad
significativamente menor para transformar el clopidogrel en su metabolito
activo y, por tanto, tienen un riesgo significativamente mayor de complicaciones
cardiovasculares.

El genotipado de los citocromos P-450 para identificar polimorfismos génicos

relevantes podría convertirse en una práctica corriente para tratar de
personalizar la respuesta de un individuo a un determinado fármaco.

HEPATOTOXICIDAD FARMACOLÓGICA
LOS FÁRMACOS QUE EJERCEN SUS EFECTOS TÓXICOS SOBRE EL
HÍGADO PUEDEN HACERLO A TRAVÉS DE LA PRODUCCIÓN HEPÁTICA
DE UN METABOLITO TÓXICO

La lesión hepática inducida por fármacos (LHIF) puede producirse en todos los
individuos expuestos a una concentración suficiente de un determinado
fármaco. Sin embargo, un fármaco puede ser tóxico en algunos individuos, incluso
a concentraciones que normalmente son toleradas por la mayoría de los
pacientes. Este fenómeno se conoce como toxicidad farmacológica
idiosincrásica y puede tener una causa genética o inmunitaria. Por lo tanto, el
potencial de LHIF responsable de la disfunción hepática en un individuo puede
que no sea obvio si no se detectan los efectos tóxicos del fármaco, y las pruebas
funcionales hepáticas bioquímicas de rutina resultan inútiles.

EL PARACETAMOL, UN FÁRMACO QUE SE PRESCRIBE CON FRECUENCIA,

ES HEPATOTÓXICO A DOSIS EXCESIVAS

El paracetamol se utiliza como analgésico con mucha frecuencia y puede

obtenerse sin receta.
Si se toma a las dosis terapéuticas habituales, se elimina mediante conjugación
con ácido glucurónico o sulfato, que luego es excretado por los riñones.

En caso de sobredosis, sin embargo, la capacidad de estas vías de conjugación

normales se sobrepasa, por lo que el paracetamol es oxidado por un citocromo
P 450 hepático (CYP3A4) y se convierte en N-acetil benzoquinoneimina
(NABQI), que puede causar una peroxidación mediada por radicales libres de los
lípidos de membrana y, por tanto, lesión hepatocelular, la cual puede ser lo
suficientemente grave como para producir una insuficiencia hepática
fulminante y la muerte del paciente.

FARMACOGENÓMICA
LA RESPUESTA A UN FÁRMACO DETERMINADO ESTÁ INFLUENCIADA
POR LAS PROPIEDADES CINÉTICAS DEL FÁRMACO (FARMACOCINÉTICA)
Y POR SUS EFECTOS (FARMACODINAMIA)

La respuesta individual al fármaco puede estar influenciada por genes que

codifican las enzimas que metabolizan los fármacos, los receptores y los
transportadores.

Cualquier variabilidad en estos genes puede ocasionar diferencias

interindividuales en la respuesta al fármaco. La eficacia y la seguridad de la
terapia farmacológica, en particular en pacientes de edad avanzada o con
patologías renales o hepáticas, y en pacientes cuya capacidad metabólica está
reducida, son un gran problema en la actualidad.

LA FARMACOGENÓMICA ESTUDIA LOS EFECTOS DE LA

HETEROGENEIDAD GENÉTICA SOBRE LA RESPUESTA A LOS FÁRMACOS

Ya que el hígado desempeña un papel fundamental en el metabolismo de los

fármacos, la farmacogenómica de algunas enzimas hepáticas que metabolizan
fármacos, especialmente las citocromo P-450 oxidasas, es sumamente relevante
desde el punto de vista clínico. El CYP2D6 es responsable del metabolismo de
más de 100 fármacos, y un polimorfismo de esta enzima es responsable de la
variación bien establecida en el metabolismo de la debrisoquina, mencionada
anteriormente.
 NEUROTRANSMISORES
LOS NEUROTRANSMISORES SON MOLÉCULAS QUE ACTÚAN A MODO
DE SEÑALES QUÍMICAS ENTRE LAS CÉLULAS NERVIOSAS

Las células nerviosas se comunican entre sí y con los tejidos diana secretando
una serie de mensajeros químicos denominados neurotransmisores.

Para que una molécula pueda definirse como neurotransmisor debe cumplir
una serie de criterios:

 La síntesis de la molécula tiene lugar en el interior de la neurona (es decir,

que todas las enzimas biosintéticas, sustratos, cofactores, etc., deben
estar presentes para la síntesis de novo).
 La molécula se almacena en la terminación nerviosa antes de su liberación
(p. ej., en las vesículas sinápticas).
 La liberación de la molécula desde el terminal presináptico tiene lugar
como respuesta a un estímulo apropiado, como un potencial de acción.
 Existe unión y reconocimiento de la presunta molécula neurotransmisora
sobre la célula diana postsináptica.
 Existen mecanismos para la inactivación y finalización de la actividad
biológica del neurotransmisor.

El cumplimiento riguroso de estos criterios significa que algunas moléculas que

intervienen en la comunicación entre neuronas no se clasifican como
neurotransmisores en un sentido estricto. Así, el óxido nítrico (NO), la
adenosina, los neuroesteroides y las poliaminas, entre otros, se denominan a
menudo neuromoduladores en lugar de neurotransmisores.

Hay una clasificación de los neurotransmisores basada en su composición

química.
Numerosos neurotransmisores derivan de componentes sencillos, como los
aminoácidos, aunque ahora se reconoce que los péptidos también son sumamente
importantes.

Numerosos neurotransmisores son compuestos sencillos y de bajo peso,

derivados a menudo de aminoácidos comunes.

LOS PRINCIPALES NEUROTRANSMISORES DEL SISTEMA NERVIOSO

PERIFÉRICO SON LA NORADRENALINA Y LA ACETILCOLINA (ACH).

TRANSMISORES DEL SISTEMA NERVIOSO AUTÓNOMO.

Las catecolaminas y la acetilcolina (ACh) son los transmisores del sistema
nervioso simpático y parasimpático. Todos los nervios preganglionares liberan
ACh, que se une a los receptores nicotínicos (N).

 La mayoría de los nervios simpáticos posganglionares liberan

noradrenalina (NA).
 los nervios parasimpáticos posganglionares liberan ACh, que actúa en los
receptores muscarínicos (M).
 Las glándulas suprarrenales liberan adrenalina (A).
 Las motoneuronas liberan ACh, que actúa en receptores nicotínicos.
EN UN MISMO NERVIO SE PUEDEN ENCONTRAR VARIOS
NEUROTRANSMISORES

Un antiguo dogma de la función nerviosa afirmaba que cada nervio contenía

un transmisor. Actualmente este concepto se considera excesivamente
simplista, puesto que se ha comprobado que lo normal es la combinación de
transmisores.

El patrón que siguen los transmisores celulares puede caracterizar un papel

funcional particular, pero los detalles de este no se han conseguido determinar
todavía. Es frecuente la presencia mayoritaria de un transmisor de bajo peso
molecular, como una amina, junto con varios péptidos, un aminoácido y una purina.

En ocasiones puede existir más de un posible neurotransmisor en una vesícula

en concreto, como parece ser el caso del adenosina trifosfato (ATP) y de
la noradrenalina en los nervios simpáticos. A veces, la intensidad de la
estimulación puede controlar la liberación del transmisor, como ocurre con los
péptidos, que a menudo requieren niveles de estimulación muy altos.

Además, diferentes transmisores pueden tener escalas de tiempo de acción

diferentes. Un buen ejemplo de ello son los nervios simpáticos: se cree que
el ATP produce su excitación rápida, mientras que la noradrenalina y el
neuropéptido neuromodulador Y (NPY) dan lugar a una fase de acción más
lenta. En algunos tejidos, el NPY es capaz por sí mismo de producir una
excitación muy lenta.

NEUROTRANSMISIÓN
LOS POTENCIALES DE ACCIÓN SE DEBEN A CAMBIOS DE FLUJOS
IÓNICOS A TRAVÉS DE LAS MEMBRANAS CELULARES

La señal transmitida por una célula nerviosa refleja un cambio brusco en la

diferencia de potencial eléctrico de la membrana celular. La diferencia de
potencial de reposo normal es de unos pocos milivoltios, con el interior de la
célula cargado negativamente, y se debe a un desequilibrio de los iones a
través de la membrana plasmática:

La concentración de iones K+ es mucho mayor en el interior celular que en

el exterior de la célula, mientras que con los iones de Na + ocurre lo
contrario.
ESTA DIFERENCIA ESTÁ MANTENIDA POR LA ACCIÓN DE LA
NA + /K+ -ATPasa.
Solamente los iones para los cuales es permeable la membrana celular pueden
afectar al potencial, ya que pueden alcanzar un equilibrio electroquímico
dinámico bajo las influencias combinadas de las diferencias de concentración y
de voltaje.

La membrana de todas las células en reposo es comparativamente permeable

al K+, debido a la presencia de unos canales de K+ independientes del voltaje
(de pérdida), por lo cual este ion controla en gran medida el potencial de
reposo.

CAMBIOS DE VOLTAJE
El cambio de voltaje que lleva al potencial de reposo desde el voltaje negativo
normal hacia el cero se conoce como despolarización, mientras que el proceso
que incrementa el potencial negativo se conoce como hiperpolarización.

Hasta el momento, este es el esquema para todas las células. Sin embargo, las
células nerviosas poseen canales de sodio dependientes del voltaje que se abren
con mucha rapidez cuando se aplica un cambio de voltaje despolarizante.

Cuando se abren, permiten el paso al interior de una gran cantidad de iones Na+
procedentes del medio extracelular. que cambian el potencial de reposo y llevan
el potencial de membrana a valores positivos. Esta inversión del voltaje es el
potencial de acción. Casi inmediatamente después, los canales de sodio se
cierran y entonces se abren los llamados canales de potasio tardíos. De esta
manera se restaura el equilibrio normal en reposo de los iones a través de la
membrana celular y, transcurrido un período refractario breve, la célula puede
conducir otro potencial de acción. Mientras tanto, el potencial de acción se ha
transmitido mediante conductancia eléctrica al segmento siguiente de la
membrana del nervio, y comienza un nuevo ciclo completo.

LOS NEUROTRANSMISORES MODIFICAN LA ACTIVIDAD DE VARIOS

CANALES IÓNICOS PARA PROVOCAR CAMBIOS EN EL POTENCIAL DE
MEMBRANA

Los neurotransmisores excitadores causan un cambio despolarizante del

voltaje, en cuyo caso es más probable que tenga lugar un potencial de acción. Por
el contrario, los transmisores inhibidores hiperpolarizan la membrana, lo que
disminuye la probabilidad de que se produzca el potencial de acción.
LOS NEUROTRANSMISORES ACTÚAN EN LAS SINAPSIS

Los neurotransmisores se liberan en el espacio que existe entre las células en un

área especializada conocida como sinapsis. En el caso más sencillo, desde la
membrana presináptica difunden al espacio o hendidura sináptica y se unen a
receptores de la membrana postsináptica.

Sin embargo, muchas neuronas, especialmente las que contienen aminas, poseen
unas varicosidades a lo largo del axón que contienen transmisor. Puede suceder
que estas varicosidades no tengan cerca ninguna célula vecina y de esta manera
el neurotransmisor que liberan puede afectar a muchas neuronas. Los nervios
que inervan la musculatura lisa suelen ser de esta clase.

LA CÉLULA RECEPTORA SE ESTIMULARÁ SOLAMENTE SI LA SUMA

ALGEBRAICA TOTAL DE TODOS LOS ESTÍMULOS, POSITIVOS Y
NEGATIVOS, EXCEDE SU UMBRAL.

RECEPTORES
LOS NEUROTRANSMISORES ACTÚAN MEDIANTE LA UNIÓN A
RECEPTORES ESPECÍFICOS Y ABRIENDO O CERRANDO CANALES
IÓNICOS

Existen varios mecanismos a través de los cuales los receptores de

neurotransmisores excitadores pueden provocar la propagación de un potencial
de acción en la neurona postsináptica. Directa o indirectamente provocan
cambios en el flujo de iones que atraviesan la membrana, hasta que el potencial
alcanza el punto crítico, o umbral, para que se inicie un potencial de acción. Los
receptores que controlan directamente la abertura de un canal de iones se
llaman ionotrópicos, mientras que los receptores metabotrópicos causan
cambios en los sistemas de segundos mensajeros que, a su vez, alteran la función
de canales que están separados del receptor.

RECEPTORES IONOTRÓPICOS (CANALES IÓNICOS)

Los receptores ionotrópicos contienen un canal iónico en su estructura. Como
ejemplos tenemos el receptor nicotínico de la ACh y algunos receptores del
glutamato y del ácido γ-aminobutírico (GABA).

Se trata de proteínas transmembrana con varias subunidades, normalmente

cinco, que rodean un poro que atraviesa la membrana.
Cada subunidad tiene cuatro regiones transmembrana. Cuando se une el ligando,
tiene lugar un cambio en la estructura tridimensional del complejo que permite
el flujo de iones a su través.

El efecto sobre el potencial de membrana depende de qué iones concretos

pasen por este canal:

 El receptor nicotínico de ACh es comparativamente inespecífico para el

sodio y el potasio, y causa despolarización.
 Mientras que el receptor GABA es un canal de cloruro y causa
hiperpolarización.

RECEPTORES METABOTRÓPICOS
TODOS LOS RECEPTORES METABOTRÓPICOS CONOCIDOS ESTÁN
ACOPLADOS A PROTEÍNAS G

Los receptores metabotrópicos están acoplados a las vías de segundos

mensajeros y actúan más lentamente que los receptores ionotrópicos. Todos
los receptores metabotrópicos conocidos están acoplados a proteínas G, y, al
igual que los receptores de hormonas, tienen siete regiones transmembrana.

En general se acoplan con la adenilil ciclasa, alterando la producción de

adenosina monofosfato cíclico (AMPc), o con la vía del fosfatidilinositol, que
altera el flujo de calcio.

Los canales iónicos, que son entidades moleculares distintas del receptor, quedan
entonces normalmente modificados por fosforilación. Por ejemplo, el receptor
β-adrenérgico, que responde a la adrenalina y a la noradrenalina, provoca un
aumento del AMPc, el cual estimula una cinasa que fosforila y activa un canal de
calcio. Algunas clases de receptores muscarínicos de ACh tienen efectos
semejantes sobre los canales de K+.

REGULACIÓN DE LOS NEUROTRANSMISORES

LA ACCIÓN DE LOS TRANSMISORES DEBE DETENERSE
ELIMINÁNDOLOS DE LA HENDIDURA SINÁPTICA

Cuando los transmisores han cumplido su función, deben ser eliminados del
espacio sináptico. Probablemente, la difusión simple es el principal mecanismo de
eliminación de los neuropéptidos. Enzimas, como la acetilcolinesterasa, que
escinde la ACh, se encargan de destruir cualquier resto de este transmisor.
Los transmisores sobrantes también pueden ser recaptados hacia la neurona
presináptica para reutilizarlos, siendo esta la principal vía de eliminación de
catecolaminas y aminoácidos. Interferencias en los mecanismos de recaptación
aumentan la concentración del transmisor en el espacio sináptico y, en ocasiones,
esto tiene consecuencias terapéuticas útiles.

LAS CONCENTRACIONES DE LOS NEUROTRANSMISORES SE PUEDEN

MANIPULAR

Los efectos de los neurotransmisores pueden alterarse variando sus

concentraciones efectivas o el número de receptores. Las concentraciones
pueden variarse:

 Cambiando la velocidad de síntesis;

 Alterando la velocidad de liberación en la sinapsis;
 Bloqueando la recaptación.
 Bloqueando la degradación.

Los cambios en el número de receptores pueden estar implicados en las

adaptaciones a largo plazo que tienen lugar en respuesta a la administración de
fármacos.

AMINOÁCIDOS
Ha resultado especialmente difícil demostrar que los aminoácidos son
verdaderos neurotransmisores; por sus variadas funciones metabólicas están
presentes en concentraciones altas y, por consiguiente, la simple medición de sus
concentraciones no suponía una prueba concluyente. Estudios farmacológicos de
respuestas a diferentes análogos de aminoácidos, así como la clonación de
sus receptores específicos, proporcionaron la prueba concluyente.

GLUTAMATO
EL GLUTAMATO ES EL TRANSMISOR EXCITADOR MÁS IMPORTANTE
EN EL SNC

Actúa sobre receptores ionotrópicos y metabotrópicos. Desde un punto de

vista clínico, el receptor caracterizado in vitro mediante la unión de N-metil-D-
aspartato (NMDA) es especialmente importante. El hipocampo es un área del
sistema límbico cerebral que interviene en las emociones y la memoria.

Algunas vías sinápticas se vuelven más activas cuando se estimulan crónicamente,

fenómeno conocido como potenciación a largo plazo. Esto podría representar
un modelo de la forma en que se establece la memoria, y para ello se requiere la
activación del receptor NMDA con la consiguiente entrada de calcio.

El glutamato se recicla mediante transportadores de alta afinidad que lo

captan hacia el interior de neuronas y células gliales. Las células gliales lo
convierten en glutamina, que difunde a su vez de vuelta hacia las neuronas. La
glutaminasa mitocondrial en las neuronas regenera el glutamato para su
reutilización.

GLUTAMATO Y EXCITOTOXICIDAD
La concentración extracelular de glutamato aumenta después de los
traumatismos y los ictus, durante las convulsiones intensas y en algunas
enfermedades orgánicas del cerebro, como LA COREA DE HUNTINGTON,
la demencia relacionada con el SIDA y la enfermedad de Parkinson. Esto se
debe a la liberación de glutamato desde las células dañadas y a las
perturbaciones de las vías de captación del glutamato.

EL EXCESO DE GLUTAMATO ES TÓXICO PARA LAS CÉLULAS

NERVIOSAS

La activación del receptor NMDA permite que el calcio entre en la célula.

Esto activa varias proteasas que, a su vez, inician la vía de la muerte celular
programada o apoptosis. De igual manera pueden existir cambios en otros
receptores ionotrópicos de glutamato que provoquen también una entrada
aberrante de calcio. La captación de iones sodio también está implicada y es
la causa del edema celular.

Igualmente, la activación de los receptores NMDA aumenta la producción de

óxido nítrico, que a su vez puede ser tóxico. La muerte celular en algunos modelos
experimentales de excitotoxicidad puede evitarse mediante inhibidores de la
producción de óxido nítrico, aunque el mecanismo de la toxicidad no está claro.
 ÁCIDO GAMMA-AMINOBUTÍRICO (GABA)
EL ÁCIDO GAMMA-AMINOBUTÍRICO (GABA) ES SINTETIZADO A
PARTIR DEL GLUTAMATO POR LA GLUTAMATO DESCARBOXILASA

El GABA es el transmisor inhibidor más importante del cerebro, Se conocen dos

receptores de GABA: el receptor GABAA es ionotrópico y el receptor GABAB
es metabotrópico.

EL RECEPTOR GABAA
consta de cinco subunidades que provienen de varias familias de genes, dando
una cantidad enorme de receptores potenciales con diferentes afinidades por el
ligando. Este receptor es la diana de varios fármacos útiles.

Las benzodiazepinas se unen a él y potencian la respuesta al GABA

endógeno; estos fármacos reducen la ansiedad y provocan también relajación
muscular.

Los barbitúricos también se unen al receptor y lo estimulan directamente

en ausencia de GABA; debido a esta independencia de un ligando endógeno, su
sobredosificación es más probable que genere efectos secundarios tóxicos.

GLICINA
La glicina se encuentra principalmente en las interneuronas inhibidoras de la
médula espinal, donde bloquea los impulsos descendentes hacia las
motoneuronas que estimulan el músculo esquelético.

El receptor de glicina de las motoneuronas es ionotrópico y se bloquea por

estricnina; en este caso, los impulsos motores pueden pasar sin control
negativo, lo que explica la rigidez y las convulsiones provocadas por esta toxina.

Encefalopatía por glicina

La glicina actúa como un neurotransmisor inhibidor en la médula espinal y en
el tronco encefálico, pero también ejerce efectos excitadores sobre la
corteza.
Las concentraciones de glicina son reguladas por un sistema de escisión de
glicina (GCS), un complejo de cuatro proteínas que degradan la glicina a
amoníaco y dióxido de carbono.

El GCS está presente en valores altos en el hígado, el cerebro y el tejido

placentario. Los defectos en este sistema desencadenan un aumento de las
concentraciones de glicina en el plasma y el líquido cefalorraquídeo (LCR) y
provocan la denominada encefalopatía por glicina, conocida también como
hiperglicinemia no cetósica (NKH).

En esta encefalopatía, las concentraciones de glicina en el LCR están

desproporcionadamente elevadas en relación con las del plasma y parece que
su fisiopatología se debe fundamentalmente a los efectos de la
hiperglicinemia en el cerebro. La encefalopatía por glicina se manifiesta
normalmente con síntomas neurológicos consistentes en hipotonía, crisis
comiciales, retraso mental y malformaciones cerebrales. Suele ser una
enfermedad grave de inicio precoz de mal pronóstico, si bien existen fenotipos
de comienzo más tardío y más leves en función de la mutación concreta.
Actualmente no existe ninguna medicación eficaz.

CATECOLAMINAS
La adrenalina, la noradrenalina y la dopamina, conocidas como catecolaminas,
derivan del aminoácido tirosina. Junto con otros compuestos que contienen
grupos amino, como la serotonina, también se las denomina aminas biogénicas.
Los nervios que liberan catecolaminas tienen varicosidades a lo largo del axón en
vez de una única área de liberación en su extremo.

El transmisor se libera por las varicosidades y difunde por el espacio

extracelular hasta que encuentra un receptor, consiguiendo de esta manera
abarcar una extensa zona de tejido. Se cree que estos compuestos tienen un
efecto modulador general sobre algunas funciones globales del cerebro, como
los estados de ánimo y la alerta.
NORADRENALINA Y ADRENALINA
LA NORADRENALINA (CONOCIDA TAMBIÉN COMO NOREPINEFRINA)
ES UNO DE LOS TRANSMISORES PRINCIPALES DEL SISTEMA
NERVIOSO SIMPÁTICO

Los nervios simpáticos se originan en la médula espinal y se dirigen a los

ganglios situados junto a ella, desde donde los nervios posganglionares se
dirigen hacia sus tejidos diana. La noradrenalina es el transmisor de estos
nervios posganglionares, mientras que el transmisor en los ganglios
intermedios es la ACh.

La estimulación de estos nervios es la responsable de algunas características

de la respuesta de «lucha o huida», como la estimulación de la frecuencia
cardíaca, la sudoración, la vasoconstricción cutánea y la broncodilatación.
En el SNC también existen neuronas que contienen noradrenalina, sobre todo en
el tronco encefálico. Sus axones se extienden en un entramado amplio por
toda la corteza y modifican el estado global de atención y vigilia. Los
efectos estimuladores de las anfetaminas se deben a su gran semejanza
química con las catecolaminas.

LA ADRENALINA (CONOCIDA TAMBIÉN COMO EPINEFRINA) SE

PRODUCE EN LA MÉDULA SUPRARRENAL BAJO LA INFLUENCIA DE
NERVIOS QUE CONTIENEN ACH, ANÁLOGOS A LOS NERVIOS
PREGANGLIONARES SIMPÁTICOS

La adrenalina es más activa que la noradrenalina en el pulmón y el corazón,

reconduce la sangre desde la piel al músculo esquelético y posee efectos
estimuladores importantes sobre el metabolismo del glucógeno en el hígado.

En respuesta a la adrenalina se libera súbitamente una cantidad extra de

glucosa para el músculo, y el corazón y los pulmones funcionan a mayor
rendimiento para bombear oxígeno a la circulación, quedando el cuerpo
preparado para correr o para defenderse.

No obstante, la adrenalina no es esencial para la vida, ya que es posible resecar

la médula suprarrenal sin consecuencias graves.
LOS RECEPTORES PARA NORADRENALINA Y ADRENALINA SE
DENOMINAN ADRENORRECEPTORES.

Se dividen en clases y subclases de receptores α y β según su farmacología. La

adrenalina actúa sobre todas las clases de receptores, mientras que la
noradrenalina es más específica para los receptores α.

LOS β-BLOQUEANTES, como el atenolol, se utilizan para tratar la

hipertensión y el dolor torácico (angina) en la cardiopatía isquémica, ya que
antagonizan los efectos estimuladores de las catecolaminas sobre el corazón.

LOS α-BLOQUEANTES inespecíficos tienen aplicaciones limitadas, aunque los

α1-bloqueantes más específicos, como la prazosina, y los α2-bloqueantes,
como la clonidina, pueden usarse para tratar la hipertensión.

Ciertas subclases de receptores β pueden encontrarse en tejidos concretos; por

ejemplo, el receptor β2 está presente en el pulmón y las vías respiratorias
y los AGONISTAS DE LOS RECEPTORES β2, como el salbutamol, pueden
utilizarse para dilatar los bronquios en casos de asma sin estimular los
receptores β1 del corazón.

La noradrenalina es captada por las células mediante un transportador de

alta afinidad y se cataboliza por la monoaminooxidasa (MAO). La
concentración de este, es especialmente elevada en los pacientes con un tumor
de la médula suprarrenal conocido como feocromocitoma. Este tumor
provoca hipertensión por la acción vasoconstrictora de las catecolaminas que
produce.

Depresión como enfermedad de neurotransmisores

aminérgicos: antidepresivos
Los inhibidores de la monoaminooxidasa (IMAO) impiden el catabolismo
de las catecolaminas y de la serotonina. Por tanto, aumentan las
concentraciones de estos compuestos en las sinapsis y potencian su acción
neurotransmisora.

LOS COMPUESTOS CON ESTAS PROPIEDADES SON ANTIDEPRESIVOS.

La reserpina, un antihipertensivo que agota las reservas de catecolaminas,

ocasionaba depresión y por ello se ha dejado de usar. Estos hallazgos
suscitaron la «TEORÍA AMINÉRGICA DE LA DEPRESIÓN»: en ella se
considera que la depresión se debe a una deficiencia relativa de
neurotransmisores de tipo amina en las sinapsis del SNC, y predice que los
fármacos que aumentan las concentraciones de aminas deberían mejorar los
síntomas de esta patología.

Como respaldo de esta teoría, los antidepresivos tricíclicos inhiben la

recaptación de noradrenalina y serotonina por las neuronas, aumentando de este
modo su concentración en la hendidura sináptica.

LOS INHIBIDORES SELECTIVOS DE LA RECAPTACIÓN DE SEROTONINA

(ISRS), como la fluoxetina, también son antidepresivos sumamente
eficaces. Sin embargo, como los síntomas de la depresión no se resuelven
hasta haber transcurrido varios días desde la instauración del tratamiento,
probablemente las adaptaciones a largo plazo de las concentraciones de los
transmisores y de sus receptores sean, al menos, tan importantes como los
cambios agudos en las concentraciones de aminas en la hendidura sináptica.
Este papel de las monoaminas en la depresión es sin duda alguna una
simplificación excesiva. Así, la cocaína también es un inhibidor selectivo de
la recaptación, pero no es antidepresiva, y las anfetaminas bloquean la
recaptación y liberan catecolaminas desde las terminaciones nerviosas, pero
ocasionan manía en lugar de aliviar la depresión.

DOPAMINA
LA DOPAMINA ES UN INTERMEDIARIO EN LA SÍNTESIS DE
NORADRENALINA Y UN NEUROTRANSMISOR

Es un transmisor fundamental en los nervios que interconectan los núcleos

de los ganglios basales del cerebro y controlan el movimiento voluntario. El
deterioro de estos nervios provoca la enfermedad de Parkinson,
caracterizada por temblor y dificultad en la iniciación y el control de los
movimientos.

La dopamina se encuentra igualmente en las vías que afectan al sistema

límbico, implicadas en respuestas emocionales y la memoria. Los defectos en
los sistemas dopaminérgicos se relacionan con la esquizofrenia, ya que se
ha comprobado que muchos fármacos antipsicóticos empleados en el tratamiento
de esta enfermedad se unen a los receptores de dopamina.

En la periferia, la dopamina causa vasodilatación y, por ello, se emplea en la

clínica para estimular el flujo sanguíneo renal, siendo un fármaco importante
para el tratamiento de la insuficiencia renal. El catabolismo de la dopamina
es comparable al de la noradrenalina. Sin embargo, el metabolito principal
formado es el ácido homovanílico (HVA).

LA CONCENTRACIÓN SÉRICA DE HORMONAS PUEDE APUNTAR HACIA

UNA DEFICIENCIA CENTRAL DE NEUROTRANSMISORES: PROLACTINA
Y DOPAMINA

La dopamina hipotalámica es un inhibidor de la liberación de prolactina

desde la hipófisis. En consecuencia, un déficit grave de dopamina central puede
dar lugar a elevaciones en la concentración sérica de prolactina.

Sin embargo, uno de los aspectos cruciales para usar este biomarcador
periférico es la adopción de intervalos de referencia adecuados asociados a la
edad, ya que, por ejemplo, la concentración sérica de prolactina disminuye
notoriamente durante el primer año de vida.

Aunque es posible que la concentración sérica de prolactina no esté elevada en

todos los casos de déficit de dopamina central, se han observado elevaciones
en trastornos hereditarios del metabolismo de la tetrahidrobiopterina, así
como en estados de deficiencia de tirosina hidroxilasa y de descarboxilasa de
aminoácidos aromáticos.

Además, la corrección del déficit de dopamina central puede acompañarse de

una disminución de la concentración sérica de prolactina, permitiendo
monitorizar la eficacia del tratamiento.

SEROTONINA (5-HIDROXITRIPTAMINA)
LA SEROTONINA, DENOMINADA TAMBIÉN 5-HIDROXITRIPTAMINA
(5-HT), DERIVA DEL TRIPTÓFANO

La biosíntesis de serotonina tiene ciertas similitudes químicas con la síntesis

de dopamina. La triptófano hidroxilasa, al igual que la tirosina hidroxilasa,
requiere como cofactor a la tetrahidrobiopterina (BH4). Además, el 5-
hidroxitriptófano se convierte en serotonina por la dopa descarboxilasa
(conocida también como descarboxilasa de aminoácidos aromáticos (AADC))

Las neuronas serotoninérgicas están concentradas en los núcleos del rafe

del tronco encefálico superior, pero se proyectan por arriba hacia el córtex
cerebral y por abajo hacia la médula espinal. Son más activas cuando el sujeto
está despierto que cuando duerme y la serotonina puede controlar la
capacidad de respuesta de las motoneuronas de la médula espinal. Además,
interviene en los llamados comportamientos vegetativos, como la
alimentación, la conducta sexual y el control de la temperatura.

Tiroxina hidrolasa y descarboxilasa de aminoácidos

aromáticos
DEFICIENCIA DE TIROXINA HIDROXILASA Y DE DESCARBOXILASA DE
AMINOÁCIDOS AROMÁTICOS (AADC): CAUSAS CONGÉNITAS DEL
METABOLISMO DEFECTIVO DE AMINAS BIÓGENAS

LA TIROSINA HIDROXILASA cataliza el primer paso en la biosíntesis de

dopamina y los trastornos congénitos que afectan su actividad dan lugar a
deficiencia de dopamina en el cerebro. Se han descrito diversos fenotipos
clínicos, entre los que se incluyen un trastorno progresivo de la marcha y el
parkinsonismo infantil.

El tratamiento del déficit de tirosina hidroxilasa consiste en la

administración de L-dopa. Para evitar la descarboxilación de la L-dopa a
dopamina en la sangre (por la AADC periférica), junto con ella se administra un
inhibidor (que no afecta a la actividad de la AADC cerebral).

Dicha inhibición optimiza el transporte de L-dopa a través de la barrera

hematoencefálica. En el interior del cerebro, la AADC puede convertir entonces
la L-dopa en dopamina. La AADC cataliza la conversión de la L-dopa a
dopamina y del 5- hidroxitriptófano a serotonina. Consecuentemente, un error
innato del metabolismo que afecte a la actividad de esta enzima provocará una
deficiencia cerebral de dopamina y de serotonina. Los pacientes con deficiencia
de AADC presentan un cuadro clínico caracterizado por trastornos del
movimiento, movimientos oculares anormales y deterioro neurológico. EL
TRATAMIENTO DE LA DEFICIENCIA DE AADC consiste en evitar la
degradación de cualquier cantidad de dopamina y serotonina que pudiera
producirse por una actividad residual de la AADC (es decir, mediante la
administración de inhibidores de la monoaminooxidasa). Asimismo, se utilizan
agonistas dopaminérgicos, como pergolida y bromocriptina, para «simular»
los efectos de la dopamina.
 RECEPTORES DE DOPAMINA Y SEROTONINA
SE HAN IDENTIFICADO NUMEROSOS TIPOS DE RECEPTORES DE
DOPAMINA Y DE SEROTONINA.

En algunos casos, las manipulaciones específicas sobre determinados receptores

se pueden aprovechar terapéuticamente. Se conocen cinco receptores de
dopamina que se distribuyen en dos grupos principales (tipo D1 : D1 y D5 ; y
tipo D2 : D2 , D3 y D4 ), que difieren en las vías de señalización.

LOS RECEPTORES D1 AUMENTAN LA PRODUCCIÓN DE AMPC, MIENTRAS

QUE LOS D2 LA INHIBEN.

Los fármacos antipsicóticos, como las fenotiazinas y el haloperidol,

tienden a inhibir los receptores de tipo D2, lo que sugiere que la actividad
excesiva de la dopamina puede ser una causa importante de los síntomas de
esquizofrenia.

El receptor D2 es un receptor importante en los nervios que interconectan

los ganglios basales. Se sabe que la destrucción de estos nervios provoca la
enfermedad de Parkinson, por lo que no sorprende que los fármacos
antipsicóticos que inhiben el receptor D2 presenten como efectos secundarios
la aparición de movimientos anormales.

Los fármacos, como la CLOZAPINA, que se unen preferentemente al receptor

D4, no parecen poseer estos efectos secundarios, aunque este fármaco en
particular se une también a otros receptores.

Mediante técnicas de biología molecular se han identificado más de una docena

de receptores de serotonina (5-HT), que se dividen en clases y subclases
atendiendo a sus propiedades farmacológicas y estructurales. La mayoría son
metabotrópicos, aunque el receptor 5-HT3 es ionotrópico y media una
señalización rápida en el sistema nervioso entérico.

El receptor 5-HT1A se encuentra en muchas neuronas presinápticas, donde

actúa como un autorreceptor que inhibe la liberación de 5-HT. En general, el
aumento de concentración de 5-HT en el cerebro parece incrementar la
ansiedad, mientras que la disminución de su concentración tiene un efecto
beneficioso para este trastorno.

EL ANTIDEPRESIVO BUSPIRONA actúa como un agonista de los receptores 5-

HT1A y probablemente disminuye la producción de 5-HT. Además de sus
efectos sobre el receptor de dopamina D4, la clozapina se une fuertemente al
receptor 5-HT2A, y puede ser que la combinación de un alto grado de
antagonismo sobre la 5-HT2A y una baja fijación a los D2 sea un perfil deseable
para los fármacos útiles en el tratamiento de la esquizofrenia con mínimos
efectos secundarios.

El antagonista de los receptores 5-HT3, ONDANSETRÓN es un antiemético

profusamente empleado para la prevención del vómito durante la
quimioterapia.

La migraña se puede tratar con SUMATRIPTÁN, un agonista 5-HT1D. El

protagonismo central de la 5-HT en el control de la función cerebral y la enorme
cantidad de receptores asociados sugieren que es posible desarrollar numerosos
fármacos para el tratamiento de trastornos específicos y que la manipulación
farmacológica de las funciones del sistema nervioso se encuentra probablemente
en su infancia.

FACTORES SECUNDARIOS QUE SIMULAN TRASTORNOS DE

NEUROTRANSMISORES
Conforme se van caracterizando más mutaciones genéticas en trastornos
neurometabólicos/neurodegenerativos, va haciéndose evidente que pueden
tener consecuencias negativas secundarias sobre la neurotransmisión.

Entre los ejemplos, cabe destacar el deterioro mitocondrial con la pérdida

consiguiente de disponibilidad de ATP cerebral. A su vez, esto puede limitar
el empaquetamiento de neurotransmisores, como la dopamina, en el interior
de las vesículas, acelerando el metabolismo.

LA PÉRDIDA DE FUNCIÓN LISOSOMAL también parece deteriorar el

metabolismo de los neurotransmisores monoaminérgicos, aunque aún no se
conoce su mecanismo exacto. Sin embargo, el reciclado mitocondrial neuronal
(mitofagia) depende de la función lisosomal. En consecuencia, la función
mitocondrial puede verse de nuevo comprometida, aumentando el catabolismo de
los neurotransmisores. Cabe destacar que las mutaciones que afectan al
metabolismo mitocondrial o lisosomal se asocian a parkinsonismo, que es un
estado de deficiencia de dopamina.
 ACETILCOLINA
LA ACETILCOLINA (ACH) ES EL TRANSMISOR DEL SISTEMA NERVIOSO
AUTÓNOMO PARASIMPÁTICO Y DE LOS GANGLIOS SIMPÁTICOS.

La estimulación del sistema parasimpático causa efectos totalmente opuestos

a los del sistema simpático, como enlentecimiento del ritmo cardíaco,
broncoconstricción y estimulación del músculo liso intestinal.

La ACh también actúa en las uniones neuromusculares, donde los nervios

motores entran en contacto con las células de los músculos esqueléticos para
que se contraigan. Aparte de estas funciones, la ACh puede intervenir en el
aprendizaje y la memoria, ya que neuronas que contienen este transmisor
también están presentes en el cerebro,

La ACh se sintetiza a partir de colina por la colina acetiltransferasa.

Después de secretarse a la hendidura sináptica, la mayor parte se degrada
por la acetilcolinesterasa.

La colina resultante se recapta hacia la célula nerviosa por transportadores

semejantes a los de las aminas.

Existen dos clases de receptores principales de la ACh: nicotínicos y

muscarínicos.
Ambos responden a la ACh, pero se distinguen por sus agonistas y antagonistas
asociados; son bastante diferentes desde el punto de vista estructural y
difieren en sus mecanismos de acción.

 Los receptores nicotínicos son ionotrópicos. Se unen a la nicotina y se

localizan en los ganglios y en la unión neuromuscular. Cuando se unen a la
ACh o a la nicotina, se abre un poro que permite el paso de Na + y K+ .
Como la acción del ligando en el canal es directa, el efecto es rápido.
 Los receptores muscarínicos son metabotrópicos y se pueden activar
por muscarina, una toxina fúngica. Su expresión en el cerebro es más
amplia que la de los receptores nicotínicos y son los receptores principales
en la musculatura lisa y en las glándulas inervadas por los nervios
parasimpáticos. La atropina inhibe selectivamente estos receptores.
Existen varios receptores muscarínicos que difieren en su distribución
hística y en sus vías de señalización.
Desde el punto de vista clínico, los agonistas de la ACh, al igual que los
inhibidores de la acetilcolinesterasa, se usan para tratar el glaucoma, una
afección ocular caracterizada por hipertensión intraocular por hipertonía de
la musculatura de acomodación del ojo. También se usan para estimular la
función intestinal después de la cirugía.

Por otra parte, cuando la acetilcolinesterasa es inhibida por insecticidas

organofosforados o gases nerviosos, aparece un síndrome tóxico causado por el
exceso resultante de ACh. Puede manifestarse por diarrea, aumento de la
actividad secretora de varias glándulas y broncoconstricción. Este síndrome
puede antagonizarse con atropina, aunque el tratamiento a largo plazo supone
la administración de fármacos que puedan eliminar el insecticida de la
enzima, como la PRALIDOXIMA.

ÓXIDO NÍTRICO
EL ÓXIDO NÍTRICO (NO) SE GENERA EN LOS NERVIOS AUTÓNOMOS
Y ENTÉRICOS A PARTIR DE ARGININA POR ÓXIDO NÍTRICO SINTASAS
DEPENDIENTES DE TETRAHIDROBIOPTERINA

Al NO se le atribuyen varias funciones fisiológicas, como la relajación de la

musculatura lisa intestinal y vascular y la posible regulación de la producción
de energía mitocondrial. Además, en el cerebro, el NO puede desempeñar un
papel importante en la formación de la memoria. La formación excesiva de
NO se ha relacionado con procesos neurodegenerativos asociados a las
enfermedades de Parkinson y de Alzheimer. Se desconoce el mecanismo
exacto por el cual EL EXCESO DE NO PROVOCA LA MUERTE CELULAR, pero
va ganando peso la sospecha de que, en gran parte, se debería al daño
irreversible de la cadena de transporte de electrones mitocondrial.

EL ÓXIDO NÍTRICO NO SE ALMACENA EN VESÍCULAS, SINO QUE SE

LIBERA DIRECTAMENTE HACIA EL ESPACIO EXTRACELULAR

En consecuencia, no cumple en un sentido estricto todos los criterios aceptados

para ser considerado un neurotransmisor.

Comparativamente, el NO difunde con más facilidad entre las células y se une

directamente con los grupos hemo de la enzima guanilato ciclasa, estimulando
la producción de guanosina monofosfato cíclico.
 PÉPTIDOS
NUMEROSOS PÉPTIDOS ACTÚAN COMO NEUROTRANSMISORES

Sigue sin respuesta la pregunta de si todos los péptidos que se han descrito son
realmente verdaderos neurotransmisores. No obstante, se ha comprobado que
existen más de 50 pequeños péptidos que influyen en la función neural. Todos
los receptores conocidos de péptidos son metabotrópicos y se acoplan a
proteínas G, actuando de forma comparativamente lenta.

No existen vías específicas de captación ni enzimas degradativas, y la principal

vía de eliminación es la difusión simple seguida de la acción de peptidasas en el
líquido extracelular. De esta manera, un péptido puede afectar a varias neuronas
antes de su degradación final.

El péptido intestinal vasoactivo (VIP)

Es uno de los numerosos péptidos que afectan a la función intestinal a través
del sistema nervioso entérico. Originalmente se describió como una hormona
intestinal que afectaba al flujo sanguíneo y a la secreción de líquidos, pero
actualmente se sabe que constituye un neuropéptido entérico importante que
inhibe la contracción del músculo liso. También da lugar a vasodilatación en
varias glándulas secretoras y potencia la estimulación por ACh.

NUMEROSOS NEUROPÉPTIDOS PERTENECEN A FAMILIAS

MULTIGÉNICAS

Los péptidos opiáceos proporcionan un buen ejemplo de familia multigénica.

Son los ligandos endógenos de receptores diana de analgésicos opiáceos, como
morfina y codeína.
El control del dolor es complejo y los péptidos opiáceos y sus receptores
están tanto en la médula espinal como en el cerebro. Existen al menos tres
genes que codifican estos péptidos y cada uno contiene las secuencias para varias
moléculas activas:

 LA PROOPIOMELANOCORTINA contiene β-endorfina, que se une a los

receptores µ de opiáceos, así como hormona adrenocorticotropa
(ACTH) y hormona estimulante de melanocitos o melanotropina (MSH),
que son hormonas hipofisarias.
  LA PROENCEFALINA A contiene las secuencias de las Met- y Leu-
encefalinas, que se unen a los receptores δ de opiáceos e intervienen en
la regulación del dolor a nivel local en el cerebro y en la médula espinal.
 LA PRODINORFINA contiene secuencias de la dinorfina y otros péptidos,
que se unen a los receptores κ de opiáceos.

Los opiáceos afectan a las vías del placer del cerebro, lo cual explica sus
efectos euforizantes, pero tienen efectos secundarios, como depresión
respiratoria, que limitan su empleo.

En exceso causan contracción de los músculos del ojo, lo cual conduce a las
pupilas «puntiformes». Según se ha comprobado, las endorfinas se liberan
después de un ejercicio intenso, dando el llamado «subidón del corredor».

Es de esperar que, al aumentar el conocimiento sobre los distintos receptores

de opiáceos y de las vías neurales que regulan, se lleguen a obtener analgésicos
con menos efectos secundarios y menos posibilidades de adicción.

LA SUSTANCIA P
Es otro ejemplo de un miembro de una familia multigénica conocida como
familia de las TAQUICININAS. Está presente en las fibras aferentes de los
nervios sensitivos y transmite señales en respuesta al dolor. También interviene
en la denominada inflamación neurógena estimulada por los impulsos nerviosos
y es un neurotransmisor importante en el intestino.
 Los neuropéptidos pueden actuar como
neuromoduladores
Algunos péptidos actúan como verdaderos neurotransmisores, pero además
ejercen otras muchas acciones. Acostumbran a alterar la acción de otros
transmisores, actuando como NEUROMODULADORES, pero sin tener acción
por sí solos.

Por ejemplo, el VIP potencia el efecto de la ACh sobre la secreción de las

glándulas salivales submandibulares del gato (glándulas localizadas bajo la
mandíbula) al provocar vasodilatación y potenciar el componente colinérgico.
El NPY, que por sí mismo tiene una acción débil, inhibe la liberación de
noradrenalina en las terminaciones nerviosas autónomas, actuando a través de
autorreceptores presinápticos, y en cambio potencia la acción de la
noradrenalina en ciertas arterias.

LOS PÉPTIDOS OPIÁCEOS TAMBIÉN SON CAPACES DE MODULAR LA

LIBERACIÓN DE NEUROTRANSMISORES.
 PREGUNTAS
1. ¿Qué son los neurotransmisores?
Son moléculas que actúan a modo de señales químicas entre las células nerviosas.
2. ¿Qué criterios debe cumplir una molécula para que pueda definirse como
neurotransmisor?
 La síntesis de la molécula tiene lugar en el interior de la neurona.
 La molécula se almacena en la terminación nerviosa antes de su liberación.
 La liberación de la molécula desde el terminal presináptico tiene lugar
como respuesta a un estímulo apropiado, como un potencial de acción.
 Existe unión y reconocimiento de la presunta molécula neurotransmisora
sobre la célula diana postsináptica.
 Existen mecanismos para la inactivación y finalización de la actividad
biológica del neurotransmisor.
3. Mencione una clasificación de neurotransmisores basados en su composición
química.

4. ¿A qué se deben los potenciales de acción

Se deben a cambios de flujos iónicos a través de las membranas celulares

5. Explique el mecanismo mediante el cual los neurotransmisores actúan

mediante la unión a receptor específico y abriendo o cerrando canales
iónicos.

Existen varios mecanismos a través de los cuales los receptores de

neurotransmisores excitadores pueden provocar la propagación de un potencial
de acción en la neurona postsináptica. Directa o indirectamente provocan
cambios en el flujo de iones que atraviesan la membrana, hasta que el potencial
alcanza el punto crítico, o umbral, para que se inicie un potencial de acción. Los
receptores que controlan directamente la abertura de un canal de iones se
llaman ionotrópicos, mientras que los receptores metabotrópicos causan
cambios en los sistemas de segundos mensajeros que, a su vez, alteran la función
de canales que están separados del receptor.
6. Indique las clases de neurotransmisores que existen.
a) Aminoácidos
b) Glutamato
c) GABA
d) Glicina
e) Catecolaminas
f) Noradrenalina
g) Adrenalina
h) Dopamina
i) serotonina
j) Acetilcolina
k) Óxido nítrico
l) Péptidos

1. Indique las funciones de los siguientes neurotransmisores.

 Aminoácidos; Ha resultado especialmente difícil demostrar que los
aminoácidos son verdaderos neurotransmisores; por sus variadas
funciones metabólicas están presentes en concentraciones altas y, por
consiguiente, la simple medición de sus concentraciones no suponía una
prueba concluyente.
 Glutamato; es el transmisor excitador más importante en el SNC Actúa
sobre receptores ionotrópicos y metabotrópicos.
 GABA; es sintetizado a partir del glutamato por el glutamato
descarboxilasa. El GABA es el transmisor inhibidor más importante del
cerebro.
 Glicina; se encuentra principalmente en las interneuronas inhibidoras de
la médula espinal, donde bloquea los impulsos descendentes hacia las
motoneuronas que estimulan el músculo esquelético.
 Catecolaminas; La adrenalina, la noradrenalina y la dopamina, conocidas
como catecolaminas, derivan del aminoácido tirosina, se cree que estos
compuestos tienen un efecto modulador general sobre algunas funciones
globales del cerebro, como los estados de ánimo y la alerta.
 Noradrenalina; conocida también como norepinefrina, es uno de los
transmisores principales del sistema nervioso simpático.
 Adrenalina; conocida también como epinefrina, se produce en la médula
suprarrenal bajo la influencia de nervios que contienen ACh, análogos a los
nervios preganglionares simpáticos. Es más activa que la noradrenalina en
el pulmón y el corazón.
 Dopamina; es un intermediario en la síntesis de noradrenalina y un
neurotransmisor Es un transmisor fundamental en los nervios que
interconectan los núcleos de los ganglios basales del cerebro y controlan
el movimiento voluntario.
 Serotonina; La serotonina, denominada también 5-hidroxitriptamina (5-
HT), deriva del triptófano, interviene en los llamados comportamientos
vegetativos, como la alimentación, la conducta sexual y el control de la
temperatura.
 Acetilcolina; es el transmisor del sistema nervioso autónomo
parasimpático y de los ganglios simpáticos, la estimulación del sistema
parasimpático causa efectos totalmente opuestos a los del sistema
simpático, como enlentecimiento del ritmo cardíaco, broncoconstricción y
estimulación del músculo liso intestinal.
 Óxido nítrico; se genera en los nervios autónomos y entéricos a partir
de arginina por óxido nítrico sintasas dependientes de
tetrahidrobiopterina, se le atribuyen varias funciones fisiológicas, como
la relajación de la musculatura lisa intestinal y vascular y la posible
regulación de la producción de energía mitocondrial.
 Péptidos; existen más de 50 pequeños péptidos que influyen en la
función neural. Todos los receptores conocidos de péptidos son
metabotrópicos y se acoplan a proteínas G, actuando de forma
comparativamente lenta.
 Semana 5 Dra. Mónica

MolEcula
de
glucosa

Estas moléculas de glucosa nuestro organismo las obtiene cuando introducimos nutrientes
tipo carbohidratos, como: Las pastas, el pan, la papa, frutas ricas en fructuosa que nuestro
organismo la transforma en glucosa.
En general, los carbohidratos son la fuente de glucosa con la que la glucolisis necesita
trabajar.

La glucólisis es la vía central del metabolismo de la glucosa.

La glucolisis se divide en dos formas: Anaerobia (Ausencia de oxígeno) y Aerobia (Hay
oxigeno)
Anaerobia: Es cuando hay ausencia de oxígeno, y en este caso el proceso se queda
únicamente como Piruvato, Lactato y Ácido láctico.
Aerobia: Es cuando la glucolisis se da en presencia de oxígeno, y acá hay
oportunidad para que la molécula que se obtiene pueda pasar a ciclo de Krebs,
cadena respiratoria y al final se pueda obtener de los carbohidratos el famoso ATP,
que es nuestra fuente de energía.
 Semana 5 Dra. Mónica
La glucolisis necesita de una cantidad
El consumo normal de
enzimática a nivel de citoplasma o citosol, y
carbohidratos va de 55% a
en este sitio es donde se realizara la
60%, y es la materia prima
glucolisis.
para que se dé la glucolisis.

La glucolisis necesita de una cantidad Pero cuando se consume

enzimática a nivel de citoplasma o citosol, y carbohidratos en exceso, el
en este sitio es donde se realizara la organismo también adquiere
glucolisis. la capacidad de sintetizar el
exceso de carbohidratos en
grasa.

La glucolisis es la vía central del metabolismo de la glucosa en todas las células.

En el caso de los eritrocitos, depende por completo de la glucosa.

• Gluco = Hidrato de carbono

• Lisis = Degradación
Glucolisis = Degradación de carbohidratos

Insulina
La insulina es una hormona y nos va a apoyar a controlar la disponibilidad de glucosa
para que pueda ocurrir normalmente el proceso de la glucolisis.
 Semana 5 Dra. Mónica

Reacci0nes quimicas de la glucosa

 Semana 5 Dra. Mónica

1. Hexocinasa
NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O
REACCION INHIBIDOR

1
Glucosa + Hexocinasa Glucosa-6- Fosforilación Activador: Mg+2
ATP fosfato + ADP Transferencia Inhibidor: NA
Glucocinasa Co-Coenzima: NA

En esta etapa, se produce la

fosforilación de la glucosa
mediante la enzima hexoquinasa
que transfiere un grupo fosfato de
una molécula de ATP a la molécula
de glucosa, convirtiendo la glucosa
en la molécula glucosa-6-fosfato o
G6P.

De este modo, tenemos una molécula

de glucosa activada, mucho más activa para participar en el resto de reacciones e
incapaz de atravesar la membrana celular, de este modo, se asegura que toda la reacción
de glucólisis se produce dentro de la célula.

2. Fosfoglucosa isomerasa (Glucosa-6 P isomerasa)

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O

REACCION INHIBIDOR
Glucosa-6- Fosfohexosa Fructosa-6- Reversible Activador: Mg+2
2 fosfato Isomerasa fosfato Inhibidor: NA

En esta etapa, la molécula de G6P se

isomeriza en una molécula de fructosa-
6-fosfato mediante la enzima glucosa-
6-fosfato isomerasa (G6P isomerasa).

En esta etapa no se produce consumo

ni generación de ATP o NADH.
 Semana 5 Dra. Mónica

3.fosfofructoquinasa
-1

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O

REACCION INHIBIDOR

3
Fructosa-6- Fosfofructo- Fructosa 1,6- Fosfoliracion Activador: Mg+2
fosfato cinasa bifosfato + Transferencia Inhibidor: NA
Regula ADP
velocidad De
glucolisis

En esta fase, la fructosa-6-fosfato se convierte

en fructosa 1.6-bifosfato, por medio de la
acción de la fosfofructoquinasa y magnesio. Se
trata de una fase irreversible, lo que genera
que la glucólisis comience a estabilizarse.

4.Aldolasa
NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O
REACCION INHIBIDOR

4
Fructosa Aldolasa o 1.Dihidroxiacetona Reversible Apoenzima
1,6 Aldosa fosfato
bifosfato 2.gliceraldehido-3-
fosfato (G3P)

En esta fase, la molécula de fructosa-

1,6-bifosfato se parte en dos
moléculas de tres carbonos cada una
de ellas: dihidroxiacetona fosfato y
gliceraldehido-3-fosfato (G3P)
mediante la enzima aldolasa.
Esta es una reacción reversible que
depende de la concentración de
sustratos en el interior de la célula.
 Semana 5 Dra. Mónica

5.Trifosfato isomerasa

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O

REACCION INHIBIDOR

5
Fosfato de Fosfotriosa Gliceraldehido- Reversible Apoenzima
Dihidroxiacetona Isomerasa 3-fosfato (G3P) Inhibidor: NA

La dihidroxiacetona-fosfato no puede
seguir la ruta de la glucólisis por tanto, es
necesario que se isomerice a otra molécula
de gliceraldehído-3-fosfato a través de la
triosa fosfato isomerasa.
De este modo, el rendimiento de esta
primera etapa de gasto energético da
lugar a dos moléculas de G3P que serán las
que posibiliten la generación de 4
moléculas de ATP y dos de piruvato (por la
duplicidad de las reacciones posteriores).

6. Gliceraldeh do-3-fosfato deshidrogenasa

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O
REACCION INHIBIDOR

6
Gliceraldehido- Gliceraldehido- 1,3- Reversible Coenzima: NAD
3-fosfato, NAD, 3-fosfato Bifosfoglicerato Redox Inhibidor:
Pirofosfato (pi) Deshidrogenasa NADH + H Fosforilación Iodoacetato

En este paso, el gliceraldehído-3-fosfato se

convierte en 1,3-bifosfoglicerato ya que la
enzima gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa
(GAPDH o GAP deshidrogenasa) añade un ión
fosfato al carbono 1 del gliceraldehiído-3-fosfato
mediante la reducción de un grupo NAD+ que
genera una molécula de NADH y un ión
hidrógeno.
Este paso aumenta la energía del G3P.
 Semana 5 Dra. Mónica

7. Fosfoglicerato quinasa

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR

REACCION O
INHIBIDOR
1,3- Fosfoglicerato 3 Reversible Activador:
7 Bifosfoglicerato
+ ADP
Quinasa Fosfoglicerato
+ ATP
Desfosforilación
Fosforilación
Mg+2
Inhibidor: NA

En este punto se genera la primera

molécula de ATP (que en el balance
total de la glucólisis son dos porque
estas reacciones se producen en cada
una de las dos moléculas generadas al
final del paso 5).
La enzima fosfoglicerato quinasa
transforma una molécula de ADP en
una de ATP pasando el grupo fosfato
del primer carbono del 1,3-
bifosfoglicerato y transformándolo en 3-
fosfoglicerato (3PH).

8. Fosfoglicerato mutasa

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O

REACCION INHIBIDOR

8
3-Fosfoglicerato Fosfoglicerato 2- Reversible Activador: Mg+2
mutasa Fosfoglicerato Inhibidor: NA

En este paso, sólo se produce una

isomerización donde el fosfato del
carbono 3 pasa al carbono 2 dando
lugar a 2-fosfoglicerato a través de la
enzima fosfoglicerato mutasa.
 Semana 5 Dra. Mónica

9. Enolasa

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O

REACCION INHIBIDOR

9
2-Fosfoglicerato Enolasa Fosfoenol- Reversible Activador:
piruvato Deshidratación Mg+2
Inhibidor: NA

Nos acercamos al final de la glucólisis.

En este paso se forma un doble enlace
en el carbono 2 donde se encontraba
el grupo fosfato, se elimina una
molécula de agua por el hidrógeno del
carbono 2 y el grupo OH- que estaba
en el carbono 3 del 2-fosfoglicerato.

10. Piruvato quinasa

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O

REACCION INHIBIDOR

10
Fosfoenolpiruvato Piruvato Piruvato + ATP Espontanea Activador:
+ ADP Cinasa Mg+2
Inhibidor: NA

El último paso de la glucólisis

consiste en la defosforilación de
fosfoenolpiruvato en piruvato
utilizando una molécula de ADP
y generando otra de ATP,
mediante la enzima piruvato
quinasa.
 Semana 5 Dra. Mónica

11.(sOlo en la glucOlisis anaerobia) lactato deshidrogenasa

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR

REACCION O
INHIBIDOR

10A
Piruvato Lactato Lactato + Reversible Coenzima:
NADH + H+ Deshidrogenasa NAD+ NADH
Inhibidor: NA

En este paso, se produce la

reducción del piruvato a
lactato que oxida el NADH
producido en el paso 6 de
oxidación del gliceraldehído-3-
fosfato mediante la lactato
deshidrogenasa (LDH). De este
modo, se obtiene NAD+ que es
necesario para las primeras
etapas de la glucólisis. El
lactato es expulsado fuera de
la célula y ya no participa en
ninguna ruta metabólica
posterior para la obtención de
energía.

Las reacciones mas

importantes son: 1, 3 y 10.
Ya que estas son
irreversibles.
 Semana 6 Licda. Mónica – Docs. Hechos por Nestor R.

El descubrimiento que resolvió este rompecabezas y unifico el metabolismo fue hecho en

1937 por Sir Hans Krebs y W.A. Johnson: ellos mostraron que el citrato es derivado del
piruvato y del oxalacetato completando lo que se conoce como el Ciclo del Ácido
Cítrico.

Encrucijada metabOlica

El piruvato resultante de la glucolisis ahora se

encuentra en una encrucijada de 4 caminos.
Un camino nos va a llevar a Lactato por medio
de la enzima lactato deshidrogenasa.
Otro camino convierte al piruvato en Alanina
por medio de la enzima Alanina transaminasa.
Hay otro camino que por medio de la enzima
Piruvato carboxilasa le permite al piruvato
convertirse en Oxalacetato y de esta manera
podría ingresar ya al Ciclo de Krebs.
Pero, el cuarto camino le permite al piruvato
convertirse en AcetilCoA por medio de la
enzima Piruvato Deshidrogenasa.
Estos son las 4 formas en que puede
transformarse el piruvato.
El camino 4 es por el cual el piruvato se
transforma en AcetilCoA y le permite entrar al
Ciclo de Krebs.

Para llegar a AcetilCoA es necesaria que el proceso sea Aerobio (Presencia de aire).
Para que el piruvato pase a lactato es necesario que el proceso sea Anaerobio
(Ausencia de aire).
El AcetilCoA es un producto que se obtiene del catabolismo de tres elementos o
alimentos importantes: CHO (Carbohidratos), CHON (Proteínas) y Lípidos.
 Semana 6 Licda. Mónica – Docs. Hechos por Nestor R.
¿QUE SUCEDERIA SI ALGUNAS DE LAS ENZIMAS DEL ATC,
NO ESTA ENSAMBLADA CORRECTAMENTE?

Pueden aparecer tumores uterinos o a nivel cutáneo.

TUMORES UTERINOS TUMORES cutaneos

Un ejemplo de una enzima es la Fumarasa, que cuando ella no esta ensamblada

correctamente o por genética (Lo que se conoce como estirpe germinal o mutación
hereditaria) no se va a ensamblar correctamente.
Tiene consecuencias a nivel de proceso de cáncer.
La fumarasa también se conoce como Fumarato Hidratasa, hidratasa porque va a
permitir la entrada de moléculas de agua en esta reacción.
La deficiencia de esta enzima provoca como consecuencia que el fumarato (sustrato
que necesita de esta enzima para convertirse en producto) comience a elevarse y esto
genera un desequilibrio en nuestro organismo.
Se conoce también como Síndrome hereditario de leiomiomatosis y Carcinoma de
células renales.
 Semana 6 Licda. Mónica – Docs. Hechos por Nestor R.

¿Que ES EL CICLO DE KREBS?

También denominado Ciclo de los

Ácidos Tricarboxilicos (ACT) o Ciclo del
Ácido Cítrico es la vía común del
metabolismo de todos los combustibles
localizada en la Mitocondria

Función del ciclo de Krebs

Aportar coenzimas reducidas (Vitaminas en su forma activa reducidas) que aportan
energía para la síntesis de ATP, por el sistema de transporte de electrones o cadena
respiratoria.
 Semana 6 Licda. Mónica – Docs. Hechos por Nestor R.
En el ciclo de Krebs encontramos 3 NADH, por cada 1 NAD+ tendremos 3 equivalentes
reductores (9 por cada ciclo).
También tenemos al FADH, que es la riboflavina en su forma activa.
Por cada 1 FADH tenemos 2 equivalentes reductores. (2 por cada ciclo).
Y tenemos 1 ATP
En total tenemos 12 Equivalentes reductores y además se genera un ATP.
1 ATP
3 NADH (9 ATP)
1 FADH (2 ATP)
= 12 ATP

cv
Cofactores
Coenzimas: Activadores:

• B1 (Difosfato de Tiamina) • Mg+2

• B3 (NAD) • Mn+2
• B2 (FAD) • Fe+2
• Acido pantoténico (Como parte de
la coenzima A)

Lo cofactores podemos ubicarlos como Cofactores Coenzimas y Cofactores Activadores.

Cuando hablamos de cofactores coenzimas hablamos de Vitaminas hidrosolubles, pero
reuniendo una característica, que es que ellas deben encontrase en su forma activa.
Nuestros cofactores activadores son: Mg, Mn y Fe, todos estos en su estado +2
 Semana 6 Licda. Mónica – Docs. Hechos por Nestor R.

Reacciones del CICLO DE KREBS

1.condensaciOn del oxalacetato con el acetil CoA

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O

REACCION INHIBIDOR

1
AcetilCoA + Citrato Coenzima A Irreversible Cofactor: Conezima CoA
Oxalacetato Sintasa + Citrato Hidratación (Acido pantoténico)
+ Cofactor: NA
H2O Inhibidor: NA

La enzima citrato sintasa condensa a la

acetil-CoA (2C) con el oxalacetato
(4C) para dar una molécula de citrato
(6C). Como consecuencia de esta
condensación se libera la coenzima A
(HSCoA). La reacción es fuertemente
exergónica: es irreversible.

2A. Aconitasa (De citrato a Cis-aconitato)

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O

REACCION INHIBIDOR

2A
Citrato Aconitasa Cis-Aconitato Reversible Activador: Fe+2
Deshidratación Inhibidor: Fluoroacetato

De la reacción anterior obtenemos citrato.

Con la ayuda de la enzima Aconitasa el
Citrato de convierte en Cis-Aconitato.
En la reacción ubicamos una molécula de
agua H2O la cual sale, es decir, la reacción
es de deshidratación. Es también una
reacción reversible.
 Semana 6 Licda. Mónica – Docs. Hechos por Nestor R.
2b. Aconitasa (De citrato a isocitrato)

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O

REACCION INHIBIDOR

2B
Cis-Acomitato Aconitasa Isocitrato + Reversible Activador: Fe+2
H2O Hidratación Inhibidor: NA

La molécula de citrato de seis

carbonos se convierte en isómero
isocitrato, primero retirando una
molécula de agua para, en el paso
siguiente, incorporarla nuevamente.
Libera molécula de agua.
Produce isómero isocitrato y H2O

3. Isocitrato deshidrogenasa (De isocitrato a oxoglutarato)

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O

REACCION INHIBIDOR

3
Isocitrato + Isocitrato Oxalosuccinato Reversible COFACTOR:
NAD Deshidrogenasa + NADH + H Redox Coenzima: NAD
Activador: NA
INHIBIDOR: NA
3 eq. reductores

De la reacción anterior obtenemos Isocitrato y

NAD. Por la acción de la enzima Isocitrato
Deshidrogenasa, el Sustrato se convierte en
Oxalosuccinato y además otorga NADH y H.
Es una reacción reversible y Redox.
Nuestro cofactor coenzima es el NAD
Cofactor Activador no aplica
Es la primera reacción donde obtenemos 3
equivalentes reductores de los 12.
 Semana 6 Licda. Mónica – Docs. Hechos por Nestor R.
4. Isocitrato deshidrogenasa (de oxalosuccinato a Alfa-cetoglutarato

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR

REACCION O
INHIBIDOR

4
Oxalosuccinato Isocitrato Alfa- Reversible COFACTOR:
Deshidrogenasa Cetoglutarato Descarboxilación Activador:
+ CO2 Mn+2
Inhibidor: NA
Este paso implica la oxidación-reducción y la
descarboxilación. La reacción catalizada por el
isocitrato deshidrogenasa es compleja:
1. El isocitrato se oxida a oxalo-succinato por
NAD +, liberando 2 átomos de hidrógeno.
2. Un hidrógeno y dos electrones se
transfieren a NAD + para formar NADH; el
ion de hidrógeno restante se libera.
3. El oxalo-succinato permanece unido a la
enzima y se somete a la descarboxilación,
que produce la especie 5-carbono α-
cetoglutarato.
4. Este paso produce las primeras moléculas
de CO2 y NADH en el ciclo.

5. OxidaciOn de α-cetoglutarato y FormaciOn de CO2

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR

REACCION O
INHIBIDOR

5
a-cetoglutarato Complejo Succinil Irreversible COFACTOR:
+ CoA-SH + α-cetoglutarato CoA + CO2 Redox Coenzima:
NAD deshidrogenasa Descarboxilación NAD,
pirofosfato
de tiamina
Inhibidor:
Arsenito
3 eq.
reductores
 Semana 6 Licda. Mónica – Docs. Hechos por Nestor R.
Esta reacción redox del ciclo implica
una molécula de NAD +, CoA-SH y α-
cetoglutarato. El catalizador es un
agregado de tres enzimas llamado el
complejo α-cetoglutarato
deshidrogenasa. Tanto la reacción
redox como la descarboxilación
ocurren. Tres productos: CO2, NADH y
la especie de 4 carbonos succinil CoA.
Este paso produce la segunda
molécula de CO2 y NADH en el ciclo.

6. Succinil-CoA sintetasa (De Succinil-CoA a succinato)

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O

REACCION INHIBIDOR

6
Succinil-CoA Succinil- Succinato + Reversible COFACTOR:
+ GDP + Pi CoA Sintasa GTP + CoA-SH Fosforilación Coenzima: Pirofosfato
(Succinato Activador: Mg+2
Tiocinasa) Inhibidor: NA

Dos moléculas reaccionan

con succinil CoA – una
molécula de GDP (similar a
ADP) y un grupo de fosfato
libre (Pi). La enzima succinil
CoA sintetasa elimina la
coenzima A mediante la
escisión del enlace tioéster. La
energía liberada se usa para
combinar GDP y Pi para dar
GTP.
Succinyl CoA se ha convertido
en succinato.
 Semana 6 Licda. Mónica – Docs. Hechos por Nestor R.
7. OxidaciOn de Succinato

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O INHIBIDOR

REACCION

7
Succinato Succinato Fumarato + Reversible COFACTOR:
Deshidrogenasa FADH Coenzima: FAD
Inhibidor: Malonato
2 eq. reductores

El succinato es deshidrogenado por FAD

catalizado por succinato
deshidrogenasa para producir
fumarato, una especie de 4 carbonos
con doble enlace trans. El FAD se
reduce a FADH2.
El complejo enzimático del succinato
deshidrogenasa es el único del ciclo
que está asociado a la membrana
mitocondrial de eucariotas, y en la
membrana plasmática de procariotas.

8. el fumarato se hidrata y genera malato

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTOS TIPO DE COFACTOR O

REACCION INHIBIDOR

8
Fumarato + H2O Fumarasa L-Malato Reversible Apoenzima
Hidratación Inhibidor: NA

La fumarasa cataliza la adición

de agua, es decir la
hidratación del fumarato. El
producto de la reacción es el
malato.
 Semana 6 Licda. Mónica – Docs. Hechos por Nestor R.
9. OxidaciOn de L-malato Para Regenerar Oxaloacetato

NO. SUSTRATO ENZIMA PRODUCTO TIPO DE COFACTOR O

REACCION INHIBIDOR

9
L-Malato + Malato Oxalacetato Reversible COFACTOR:
NAD Deshidrogenasa + NADH + H Redox Coenzima: NAD
3 eq. Reductores

Una molécula de NAD +

reacciona con malato,
recogiendo dos átomos de
hidrógeno (oxidación) con la
energía asociada para formar
NADH + H +. Esta reacción es
catalizada por malato
deshidrogenasa. El producto de
esta reacción es oxaloacetato
que se puede combinar con otra
molécula de Acetil CoA, y el
ciclo puede comenzar de nuevo.
Determinación
SEMANA 7-8

La diabetes mellitus es una enfermedad crónica, que comprende un conjunto de

desórdenes del metabolismo de los hidratos de carbono que cursan con una
manifestación común: la hiperglicemia.

El control glicémico periódico permite prevenir los trastornos agudos y reducir

el riesgo de las complicaciones tardías de la enfermedad (retinopatía,
nefropatía, neuropatía y enfermedades cardiovasculares).

También llamadas hemoglobinas glicosiladas o glicadas, fueron descritas por

primera vez en 1968 por Rahbar "hemoglobinas diabéticas".

Su producción depende de la
concentración de glucosa y ocurre a través de
un proceso no enzimático post-traduccional
llamado glicación, donde el azúcar es unido a
los de como grupos amino las moléculas
de hemoglobina (Hb).

La glicación de los aminoácidos N-terminales

de las cadenas a y B como así también los grupos e-
amino de los residuos de lisina en la molécula de hemoglobina, resultan en una
variedad de hemoglobinas glicadas, incluyendo HbA1c, que es la
especieglicosilada en la valina N-terminal de lacadena B.
Los niveles de HBA1C (HB: hemoglobina) son proporcionales a la concentración
de glucosa en sangre durante los últimas 2-3 meses. Así, la determinación de
HBA1C provee un parámetro integral para el control glicémico a largo plazo en
el paciente diabético.

 Control del paciente diabético.

 Evaluación del tratamiento.
 Evaluar la concentración de glucosa en el paciente.

El primer paso para obtener la hemoglobina glicosilada es el hemolizado (la

hemolisis) para eliminar el eritrocito y así obtenerla.

Se mezcla 500 ml de lisante + 100ml del estándar el lisante eliminara los

eritrocitos, seguidamente se le inserta un filtro este posee resina que atrapara
hemoglobinas y el líquido pasa a través del filtro y lo que queda es lo que se
someterá a prueba.
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑔𝑙𝑖𝑐𝑜ℎ𝑒𝑚𝑜𝑔𝑙𝑜𝑏𝑖𝑛𝑎
El radio de la muestra=𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 ℎ𝑒𝑚𝑜𝑔𝑙𝑜𝑏𝑖𝑛𝑎 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙

Glicohemoglobina (%)=
𝑅𝑎𝑑𝑖𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝑥 𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑒𝑠𝑡á𝑛𝑑𝑎𝑟
𝑟𝑎𝑑𝑖𝑜 𝑒𝑠𝑡á𝑛𝑑𝑎𝑟
  Pacientes con hemoglobinopatía o anemia hemolítica,
por haber destrucción de eritrocitos.
 Problemas de cálculo u de medición

Hecho por:

Javier G.
INFORMACIÓN OBTENIDA DE USAC, FACULTAD DE MEDICINA,
CARRERA DE MÉDICO Y CIRUJANO, SEGUNDO AÑO 2022,
CURSO DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA.

Javier G.