UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA
INFORME N°3
Tema: IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLÉCULAS
ORGÁNICAS:
CARBOHIDRATOS Y LÍPIDOS
Curso: Biología General
Docente: Jeison David Cabos Sanchez
Alumno(a): Sayuri Celeste Ventura Armas
Leoncio prado-Huánuco
I. INTRODUCCIÓN
Las cuatro clases principales de moléculas biológicas orgánicas son los
carbohidratos, los lípidos, las proteínas y los ácidos nucleicos, y están compuestas por
bloques de armado denominados monómeros, a excepción de los lípidos que son un
grupo muy heterogéneo. Los monómeros de los carbohidratos son los azúcares
simples, de las proteínas son los aminoácidos, y de los ácidos nucleicos los
nucleótidos. Algunos lípidos están compuestos por una molécula pequeña, el glicerol,
unida covalentemente a ácidos grasos. Muchas de estas biomoléculas pueden alcanzar
gran tamaño a escala molecular, por los que se las denomina macromoléculas.
Los carbohidratos son compuestos muy abundantes en la naturaleza, están
constituidos por unidades básicas denominadas monosacáridos. El principal
monosacárido es la glucosa, que es el combustible principal para la mayoría de los
organismos. Los oligosacáridos están formados por dos a diez unidades de
monosacáridos unidas covalentemente. Los polisacáridos contienen gran número de
unidades de monosacáridos unidos covalentemente, los cuales pueden alcanzar
grandes pesos moleculares. Los polisacáridos desempeñan dos funciones biológicas
principales: almacenar energía metabólica (almidón, glucógeno) y aportar elementos
estructurales a la célula (celulosa). La glucosa actúa en el organismo como
combustible energético de uso inmediato, mientras los polisacáridos son de reserva
que deben ser catabolizados antes de su aprovechamiento como fuentes de energía.
Los lípidos son grupos heterogéneos de compuestos que poseen una
consistencia grasosa o aceitosa, siendo más o menos insolubles en agua y saludables
en disolventes orgánicos (como, por ejemplo: éter, cloroformo, benceno, etc.). Entre
los lípidos de importancia biológicas se encuentran los triacilgliceroles, fosfolípidos,
esteroides, etc. Estas moléculas son combustibles biológicos importantes, sirven de
componentes estructurales de las membranas celulares y algunas son importantes. Los
más abundantes en los seres vivos son los triacilgliceroles (grasas neutras). Ellos
producen más del doble de energía por gramo, que los carbohidratos por lo que son
una forma económica de almacenar reservas alimenticias Es posible detectar por
medio de pruebas bioquímicas colorimétricas, la presencia de estas moléculas ya sea
en muestras obtenidas de tejidos animales o vegetales.
II. MATERIAL
Biológico y no biológico Laboratorio Reactivos y soluciones
1 aceite 125 ml Pipetas de 2,5 y 10 ml Soluc. Glucosa al 1%
1 papa Tubos de ensayo de 10 ml Soluc. De sacarosa al 1%
(10)
Jugo de fruta Vaso precipitado de 500 Suspens. De almidón al
ml (2) 1%
Orina de diabético Mechero Reactivo de Fehling
1 caja de fósforo Pinzas Solución de Lugol
1 plumón indeleble Gradilla Hidróxido de sodio al
10%
III. INSTRUCCIONES
Reconocimiento de carbohidratos Para saber si una muestra contiene azúcares
y de que tipo son se pueden utilizar diferentes métodos de determinación.
Método Detecta Resultados
Reacción de Benedict Glúcidos Positivo: precipitado rojo ladrillo.
Negativo: solución azul
Reacción de Fehling Glúcidos Positivo: precipitado rojo ladrillo.
Negativo: solución azul
Reacción de Lugol Polisacáridos Positivo: solución violeta. Negativo:
solución amarilla
Test para la detección de azúcares simples (monosacáridos) Una de las
propiedades más destacadas de los monosacáridos en general (glucosa, fructosa, etc.)
y de algunos disacáridos (sacarosa, lactosa, etc.) es el poder reductor que les confiere
el grupo funcional aldehído o cetona de sus moléculas. Esta propiedad de los azúcares
se pone de manifiesto frente a sales de cobre II (Cu++). El reactivo de Fehling es
utilizado para detectar la presencia de azúcares con capacidad reductora, tiene un
color azul intenso. El resultado positivo de la presencia de un azúcar reductor es la
formación de un precipitado rojo ladrillo de óxido de cobre (Cu2O). La reacción que
ocurre es de tipo óxido-reducción, en la cual el grupo funcional aldehído o cetona del
azúcar reductor se oxida a ácido y el Cu++ se reduce a Cu+.
El color de la mezcla sirve como guía para determinar la cantidad de azúcar
presente en la muestra. Reporta la concentración de azúcar según lo siguiente:
Test para la detección de polisacárido-almidón El almidón es un polisacárido
de reserva característico de los vegetales. En las células vegetales el almidón se
encuentra como una mezcla de amilopectina (80-90 %) y amilosa (10-20%). Esta
última se colorea de azul violeta en presencia de una solución de iodo llamado
reactivo de Lugol, debido a una reacción física (no química) de adsorción. La
molécula de iodo (I2), se introduce en la estructura helicoidal de la molécula de
almidón dando como resultado el color violáceo.
En el cuadro siguiente se describen las actividades a desarrollar para la
determinación en muestras biológicas de hidratos de carbono.
IV. RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS
Los lípidos se definen como compuestos orgánicos insolubles en agua o
ligeramente solubles, que se encuentran en los sistemas biológicos. Los lípidos son
hidrofóbicos (no polares) y/o anfipáticos.
Protocolo para la determinación de lípidos
V. RESULTADOS
Determinación de azúcares simples
• Solución de glucosa + reactivo de Fehling
Si integramos el reactivo de Fehling en la solución de glucosa, este se torna d
e un color azul que, al someter a calor, forma un precipitado rojo ladrillo.
• Solución de sacarosa + reactivo de Fehling
Al integrar el reactivo de Fehling en la solución de sacarosa, se da una
coloración azul que al llevar a ebullición, este no cambia de color, ni
precipitación alguna.
• Solución de almidón + reactivo de Fehling
Al integrar el reactivo de Fehling en la solución de Fehling, la coloración del
líquido se torna de color azul, que al llevar a ebullición, este no cambia ni se
torna de otro color.
• Orina de diabético + reactivo de Fehling
Al momento de integrar el reactivo de Fehling sobre la prueba de orina de
diabético se da un cambio de coloración aun tono azulado, pero si lo
sometemos a ebullición, esta forma un precipitado de color rojo ladrillo.
• Orina normal + reactivo de Fehling
Si integramos en reactivo de Fehling, este cambia de color a un tono azulado
que, al llevar a ebullición, este no cambia ni forma precipitación alguna. No
se detectan cambios.
Detección de hidratos de carbono
• Solución de almidón + Lugol
La solución de almidón al entrar en contacto con el Lugol, se da una reacción
en la que este cambia de color, en este caso, pasa de ser un color
transparentoso a ser un color violeta.
• Papa + Lugol
Al integrar el Lugol sobre una raja de papa, podemos observar la
decoloración sobre la zona en la que aplicamos la solución casi de manera
inmediata.
• Queso + Lugol
Al integrar el Lugol sobre el queso, podemos observar que este no cambia de
color, el queso mantiene su color blanco y el Lugol, su color amarillento.
Reconocimiento de lípidos
• Agua + aceite
Al momento de agitar parece disolverse, que después de un segundo se da la
formación de una gran cantidad de pequeñas micelas que si dejamos reposar
por unos minutos, estos se separan, quedando el aceite en la parte superior y
el agua en la parte inferior.
• Benceno + aceite
Al momento de agregar el benceno, al tubo de ensayo junto a la muestra de
aceite, este parece disolverse, quedando en una sola solución o estado.
• Acetona + aceite
Al momento de integrar la acetona junto al aceite, se da la formación de
ciertas micelas dispersas en toda la muestra que, transcurridos unos minutos,
este aún no se separa.
• Cloroformo + aceite
Al integrar el cloroformo con la muestra de aceite, podemos observar una
disolución inmediata de la muestra, quedando en un solo estado.
VI. DISCUSIONES
Determinación de azúcares simples
• Solución de glucosa + reactivo de Fehling. Al integrarse ambos compuestos y
someterlos a ebullición se da un precipitado rojo, dando positivo a la
presencia de azúcares reductores, en este caso a la presencia de glucosa. Se
basa en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehído que pasa a ácido
reduciendo la sal cúprica de cobre (II), en medio alcalino, a óxido de cobre
(I). Éste forma un precipitado de color rojo.
• Solución de sacarosa + reactivo de Fehling. Al integrar el reactivo de
Fehling, la coloración cambia a un tono azulado por lo que da negativo a la
presencia de azúcares reductores y esto es debido a que la sacarosa no es un
azúcar simple; sino más bien se trata de un disacárido que no posee carbonos
anoméricos por lo que no posee de un poder reductor. Presencia de reacción
oxidativa por el azúcar reductor que reduce al reactivo de Fehling.
• Solución de almidón + reactivo de Fehling. Al integrar el reactivo de Fehling,
la coloración cambia a un tono azulado por lo que da negativo por su poca
presencia de OH hemiacetálicos en una molécula que puede llegar a contener
más de cien mil unidades de glucosa.
• Jugo de fruta + reactivo de Fehling. Al integrar el reactivo de Fehling,
presenta una coloración azulada que, al llevar a ebullición, este no cambia ni
da reacción alguna, por lo que no es un azúcar reductor. En otros casos, la
fructosa que contiene un grupo cetona, puede enolizarse a la forma aldehido
dando lugar a un falso positivo.
• Orina de diabético + reactivo de Fehling. Al integrar el reactivo de Fehling en
la orina de diabético, podemos apreciar la coloración azulada, que al llevar a
ebullición, se da un precipitado de color rojo ladrillo, debido a la presencia de
glucosa que es considerado un azúcar reductor que al entrar en contacto con
el reactivo de Fehling, lo reduce, formando el óxido de cobre.
• Orina normal + reactivo de Fehling. Al integrar el reactivo de Fehling sobre
la orina normal, este se torna de una coloración azulada que, al llevar a
ebullición, este no presentan cambio alguno, dando negativo a la presencia de
azucares reductores debido a que en la orina normal está compuesto por agua
y residuos como urea, creatina, amoníaco y ácido úrico.
Detección de hidratos de carbono
• Papa + Lugol. Se una coloración violácea oscura sobre la superficie de la
cortadura o raja de papa. El Lugol reacciona en la papa debido a la presencia
de la amilosa, que se encuentra dentro del almidón, debido a que esta
sustancia absorbe el yodo produciendo una coloración azul intensa.
• Queso + Lugol. Al aplicar el Lugol sobre el queso no se da ninguna reacción,
debido a que no hay presencia alguna de almidón, ya que en este caso no se
trata de un queso adulterado, y la composición del queso de forma general
que es netamente de proteínas y grasas.
Reconocimiento de lípidos
• Agua + aceite. Podemos observar que ambas soluciones no se integran,
debido a que el agua es un compuesto polar, que tiene cargas en distintas
partes de sus moléculas, mientras que el aceite es apolar y no presenta dichas
cargas, haciendo que estos sean completamente insolubles entre sí. El motivo
por el cual el aceite termina en la parte superior es debido a que la densidad
del aceite es de 700 kg/m3 a 950 kg/ m3y la del agua es de 1000 kg/m3, por lo
que, al ser el aceite de menor densidad, este siempre quedará en la parte
superior.
• Aceite + benceno. Al integrar el benceno en el aceite, podemos observar una
disolución inmediata y esto es debido a que es muy soluble en disolventes
orgánicos, en este caso aceites como el que usamos en el proceso
experimental, otra de ellas que no vimos es con la acetona.
• Aceite + acetona. Podemos observar que ambos compuestos no llegan a
disolverse por completo, y esto es debido a que la acetona que se utilizó para
el proceso de experimentación es una comercial, la cual está compuesto por
un 99,5% de acetona y 0,5% de agua. De por sí, ambos deberían de quedar
completamente disueltos y en un solo estado, debido a que la propanona, es
decir, la acetona es más sencilla que la serie grasa, asiéndola soluble en casi
todos los disolventes, como en este caso, la del aceite.
• Aceite + cloroformo. Al momento de integrar el cloroformo en el aceite, se
da una mezcla homogénea, dando una solución completamente disuelta,
debido a que el cloroformo es completamente apolar, de igual manera el
aceite, haciendo que ambos puedan integrarse por completo.
VII. CONCLUSIONES
El reactivo de Fehling solo reacciona ante la presencia de azúcares simples, los cuales
al entrar en contacto y ser pasados a ebullición, el azúcar reduce al reactivo,
formando un precipitado de color rojo ladrillo de que sería la oxidación de cobre.
El Lugol se presenta como un reactivo que ante la presencia de almidón, cambia a
una coloración violácea que fue fácil de identificar, en algunos casos se presenta una
coloración más fuerte que en otras y esto es según la cantidad de almidón haya o
exista en el componente y esto es debido a que esta sustancia adsorbe el yodo
produciendo una coloración azul intensa, coloración que desaparece al calentar,
porque se rompe la estructura que se ha producido, pero vuelve a aparecer al enfriar,
eso quiere decir que si hervimos la papa que empleamos en el experimento, este pasa
a su coloración normal.
En la detección de lípidos, podemos identificar a simple vista que el benceno y el
cloroformo, resulta disolverse con normalidad, formando una mezcla homogénea; en
el caso de la acetona sucedería lo mismo, pero en este caso, se trata de un
componente que tiene cierta cantidad de agua, por lo que no logra disolverse por
completo. En esto también influye la polaridad de los elementos, en el caso del agua
es un disolvente no polar, por lo que, al entrar en contacto con el aceite, este no se
disuelve que al agitar, llega a formar pequeñas micelas que finalmente transcurridos
unos minutos, ambos se separan, quedando el aceite en la parte superior por su menor
densidad a comparación que la del gua.
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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20a%20aparecer%20al%20enfriar.
