Resumen

La detección de drogas de abuso es una especialidad clínica de enorme importancia por su

implicación en ámbitos legales, toxicológicos, sociosanitarios y de emergencias. En el
presente reporte, con el objetivo de determinar la presencia de alcaloides, es que se
realizan determinaciones de tipo cualitativo en diferentes muestras de orina. La detección
de dichas sustancias se realizó mediante dos métodos cualitativos, el primero mediante la
técnica de inmunoensayo (prueba de orina en casete) y el segundo por medio de
reacciones químicas coloridas de la muestra de orina frente a los reactivos de Mandelin,
Bouchard, Dragendorf y Mayer. Para las muestras de los equipos 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10 se
obtuvieron resultados negativos para todas las pruebas presuntivas; a excepción de la
reacción de Madelin, donde los equipos 9 y 10 dieron positivo en los 3 extractos y en el
extracto etéreo 1 respectivamente; en el caso de los equipos 4 y 5 dieron positivo para las
reacciones de Bouchard y Dragendorf ambos en el extracto etéreo 1. Para los equipos 1, 2
y 3 los resultados fueron positivos casi para todas las pruebas difiriendo en el extracto, con
la excepción de que el equipo 1 y 2 fue negativo en la prueba de mayer y el equipo 3 fue
negativo para Dragendorf. Los equipos 1, 2 y 3 dieron positivo para Ritalin en la prueba de
inmunoensayo, el 2, 7, 8 y 10 positivo para THC y el 9 positivo para AMPC.

Palabras clave: Pruebas cualitativas, Alcaloides, Detección de drogas, Intoxicación.

Abstract
The detection of drugs of abuse is a clinical specialty of enormous importance due to its
involvement in legal, toxicological, socio-health and emergency fields. In this report, in order
to determine the presence of alkaloids, qualitative determinations are made in different urine
samples. The detection of these substances was carried out using two qualitative methods,
the first using the immunoassay technique (urine cassette test) and the second using colorful
chemical reactions of the urine sample against Mandelin, Bouchard, Dragendorf reagents.
and Mayer. For the samples of teams 4, 5, 6, 7, 8, 9 and 10, negative results were obtained
for all the presumptive tests; except for the Madelin reaction, where teams 9 and 10 tested
positive for all 3 extracts and ethereal extract 1, respectively; In the case of teams 4 and 5,
they were positive for the Bouchard and Dragendorf reactions, both in ether extract 1. For
teams 1, 2 and 3, the results were positive for almost all the tests, differing in the extract,
with the exception that team 1 and 2 were negative for Mayer's test and team 3 were
negative for Dragendorf. Teams 1, 2 and 3 were positive for Ritalin in the immunoassay test,
2, 7, 8 and 10 positive for THC and 9 positive for AMPC.

Keywords: Qualitative tests, Alkaloids, Drug detection, Intoxication

Introducción morfina (el opiáceo prototípico) y codeína;
Los alcaloides son sustancias orgánicas opioides semisintéticos, tales como
nitrogenadas con carácter básico heroína y oxicodona, y opioides
mayoritariamente de origen vegetal con completamente sintéticos, como petidina y
una estructura química compleja que metadona los opioides se relacionan
ejercen acciones farmacológicas diversas químicamente e interactúan con los
en pequeñas dosis y poseen, en general, receptores de opioides en las células
una marcada toxicidad por lo que su nerviosas del cuerpo y del cerebro, estos
rango terapéutico es muy estrecho, son seguros cuando se toman por un
ejercen efectos sobre el sistema nervioso período de tiempo corto y siguiendo las
central es su consumo como drogas de indicaciones del médico pero también se
abuso, al ser los agentes psicotrópicos usan de forma inadecuada ya que se
más conocidos. La mayoría de las produce una sensación de placer lo que
sustancias conocidas como drogas son hace que su consumo sea más frecuente.
alcaloides, entre las más populares están Los analgésicos opioides pueden llevar a
las anfetaminas y la cocaína. La situaciones de sobredosis y causar la
anfetamina y sus derivados son muerte, la sobredosis de opioides se
compuestos que actúan sobre los puede revertir con naloxona si está es
receptores adrenalínicos y tienen efectos administrada de forma inmediata. Existen
estimulantes, la cocaína es una droga diversas pruebas para la detección de los
simpaticomimética con propiedades alcaloides una de ellas es el test de 5
estimulantes y euforizantes del sistema drogas en la que se toma una muestra de
nervioso central. Las dosis altas pueden orina para la detección de COC
causar pánico, síntomas similares a la (Cocaína), THC (Marihuana), AMP
esquizofrenia, convulsiones, hipertermia, (Anfetamina), MET (Metanfetamina), OPI
hipertensión, arritmias, accidente (Opiáceo) y sus derivados estás pruebas
cerebrovascular, disección aórtica, son utilizadas comúnmente en personas
isquemia intestinal e infarto de miocardio. que buscan empleo, por organizaciones
La toxicidad se trata con medidas deportivas para propósito legales o
sintomáticas, como benzodiazepinas IV y forenses y para vigilar el consumo de los
técnicas de enfriamiento. El mismos. Una de las normas implicada en
Δ-9-Tetrahidrocannabinol, comúnmente el uso de drogas ilícitas es la:
conocido como THC es el componente ● NORMA OFICIAL MEXICANA
psicoactivo de la planta de cannabis es NOM-028-SSA2-2009, PARA LA
una sustancia muy soluble en grasa y PREVENCIÓN, TRATAMIENTO Y
llega rápidamente al cerebro, en donde se CONTROL DE LAS ADICCIONES.
acumula y del que se elimina muy El objetivo principal de la práctica fue
lentamente Inmediatamente tras el determinar cualitativamente la presencia
consumo se produce lo que se llama de alcaloides en muestras de orina por
"borrachera cannábica", con sequedad de medio de reacciones químicas coloridas y
boca, enrojecimiento ocular, taquicardia, con una placa de inmunoensayo.
descoordinación de movimientos, risa
incontrolada, somnolencia, alteración de Metodología
la memoria, de la atención y de la Tratamiento de la muestra
concentración. También los opioides son Se tomó una muestra de orina de 25 mL a
considerados como alcaloides y existen la cual se le agregó HCl hasta llegar a un
tres grandes clases de sustancias pH de 4 para extracción con un embudo
opiáceas: alcaloides del opio, tales como de separación, a la fase acuosa resultante
se modificó el pH a 9 con Hidróxido de Figura 2. Resultados de la prueba de
inmunoensayo de la muestra del equipo 3.
amonio para extracción y nuevamente a
(Negativo para todos los factores) (Fuente propia
las fases acuosas restantes se realizó el del autor, 2022)
procedimiento anterior sin modificar el pH.
Realizándose tres extracciones, por
triplicado, dos con 10 mL de éter etílico
c/u y la última con 10 mL de cloroformo.
Durante las extracciones se colectaron las
fases orgánicas en un vaso de precipitado
marcado como fase etérea 1, fase etérea
2 y fase clorofórmica.
A los tres vasos se les agregó sulfato de
sodio anhidro haciendo agitaciones
Figura 3. Prueba de inmunoensayo positivo a
constantes hasta observar que se metanfetaminas para la muestra del equipo 9.
resuspendió el sulfato de sodio. Se filtró (Fuente propia del autor, 2022)
c/u de los vasos de precipitado y se
recolectó en un vaso de precipitado limpio
y seco volviendo a identificar los distintos
extractos. Posteriormente se llevó a
evaporar la mitad del volumen recolectado
en un baño María y se realizaron las
pruebas presuntivas con c/u de las fases
previamente evaporadas
Pruebas presuntivas
- Reacción de Dragendorff: Se colocaron
2 gotas del extracto más 2 gotas del
reactivo
- Reacción de Mayer: Se colocaron 2
gotas del extracto más 2 gotas del Figura 4. Resultados positivos de referencia de las
reactivo pruebas de Dragendorf, Mayer, Bouchard y
Mandelin (Pruebas Presuntivas) (Fuente propia del
- Reacción de Bouchardart: Se colocaron
autor, 2022)
2 gotas del extracto más 2 gotas del
reactivo
- Reacción de Mandelin: se colocó unas
gotas de vanadato de amonio sobre el
Figura 5. Resultados de las pruebas presuntivas de
extracto y una gota de H2SO4 la muestra del equipo 3 (Negativos) (Fuente propia
Nota: en cada una de las pruebas del autor, 2022)
presuntivas se observaba si había un
cambio de coloración.

Resultados

Figura 1. Proceso de
separación de fases
orgánicas y acuosas en
la muestra de orina para
la detección de
alcaloides. (Fuente
propia del autor, 2022)
Tabla 1. Resultados grupales de las pruebas presuntivas e inmunoensayo para
determinación de alcaloides en las diferentes muestras de orina empleadas.

Eq Mayer Draguendorf Bouchardat Mandelin Inm

E1 E2 E3 E1 E2 E3 E1 E2 E3 E1 E2 E3

1 – – – – + – – – + +++ ++ ++ Ritalin
Positivo

2 – – – + + + + + + + + + Ritalin
Positivo

3 + – – – – – + – + + – – Ritalin
Positivo

4 – – – + – – + – – – – –

5 – – – + – – + – – – – – THC

6 – – – – – – – – – – – – Metilfen
idato
Negativ
o

7 – – – – – – – – – – – – THC

8 – – – – – – – – – – – – THC

9 – – – – – – – – – +++ +++ +++ AMPC

Amar Amar Amar
illo illo illo

10 – – – – – – – – – +++ – – THC
Café
claro
E1: Extracto etéreo 1 E2: Extracto etéreo 2 E3: Extracto clorofórmico Inm: Inmunoensayo
- Prueba negativa + Positiva poco colorida ++ Positiva colorida +++ Positiva muy colorida
Análisis de resultados cabo las pruebas presuntivas como se
Puesto que los alcaloides son puede observar en la Figura 1.
compuestos de carácter básico, su Primero se realizó una extracción ácida,
solubilidad en los diferentes solventes con la cuál se pretende eliminar las
varía en función del pH, es decir según se proteínas del medio, los alcaloides
encuentran en estado de base o de sal. quedan solubles en la fase etérea. La
En forma de base, son solubles en segunda extracción se realiza en
solventes orgánicos no polares como presencia de un pH alcalino, por lo que se
benceno, éter etílico, cloroformo, basa en el carácter básico de los
diclorometano, acetato de etilo. En forma alcaloides y en el hecho de su existencia
de sales, son solubles en solventes como sales ácidos orgánicos o como
polares, agua, soluciones ácidas e recombinaciones solubles en otras
hidroalcohólicas (Pendel, 2002). sustancias, por lo que las bases se
De una muestra de orina se realizaron encontrarán solubilizadas en el cloroformo
extracciones con diferentes solventes y y el éter etílico (Aragón, 2008).
reactivos para obtener los alcaloides de Las técnicas de reconocimiento son
manera libre y posteriormente llevar a basadas en la capacidad que tiene los
alcaloides en estado de sal (extractos ● D-Amphetamine (1,000 ng/mL)
ácidos) de combinarse con el yodo y De acuerdo al autor Salazar (2014) el
metales pesados (Aragón, 2008) metilfenidato es un derivado de la
El reactivo de Dragendorff es una mezcla piperidina, de estructura similar a la
de Yoduro de potasio y de nitrato de anfetamina (Figura 6), y con base en lo
bismuto, se detecta el alcaloide al reportado en la página Vademecum
producirse una coloración naranja-rojiza (2014) el metabolismo del metilfenidato
(Marcano, 2002). No obtuvimos una ocurre en el hígado a través de la
precipitado de estas características en los esterificación a ácido alfa-fenil-piperidina
3 extractos, lo que indica ser negativo acético (PPA), que es inactivo, es por esta
para metanfetamina en el paciente. misma razón que Baselt afirma que el
En la reacción de Mayer precipitan los metilfenidato no muestra reactividad
alcaloides (los clorhidratos) en forma de cruzada cuando se ensaya con La Prueba
sales en medio básico. El yoduro de de Detección de AMP en Casete (Orina) a
potasio y el bicloruro de mercurio junto una concentración de 100 μg / mL cabe
con el alcaloide forman un precipitado mencionar que la reactividad cruzada se
blanco que es soluble en ácido acético y produce cuando existe una reacción entre
etanol (Marcano, 2002). Para los tres un antígeno y el anticuerpo que se generó
extractos el resultado fue negativo, la contra un antígeno diferente pero similar en
prueba de Mayer se realizó para cuanto a estructura causando de esta
identificar cocaína, heroína, entre otros. manera falsos positivos o falsos negativos
El ion triyoduro presente en el reactivo de al realizar la prueba en casete. Otro factor
Bouchardat reacciona con los alcaloides determinante para la baja confiabilidad de
formando un precipitado color rojo-naranja este resultado, fue que al proporcionarnos
en medio ácido (Bell, 2004). Nuevamente el cassette para la prueba de orina, se
obtuvimos resultados negativos al no mencionó que ya había pasado su fecha
presenciar la formación de este de vencimiento, por lo que las
precipitado podemos asegurar que el características y/o condiciones del
paciente no consume alguna droga. cassette pudieron no ser las idóneas.
Al realizar la prueba de inmunoensayo en
Figura 6. Comparación de la estructura del
el caso del equipo 6 se observa que ésta
metilfenidato y la anfetamina.
no dió positivo a anfetaminas como se
esperaba lo cual se puede corroborar en
la Figura 2 de la muestra de orina con el
fármaco Metilfenidato mejor conocido
como Ritalín, esto es debido a que el
autor Baselt (2002) menciona que las
sustancias que pueden ser detectadas Por otro lado, la prueba presuntiva de
positivas en la orina por La Prueba de Mandelín dio negativa en todas las
Detección de AMP (Amphetamines) en extracciones, esto es debido a que de
Casete son: acuerdo con la información de Flanagan
● D,L-Amphetamine sulfate (200 et. al. (1995) el reactivo de mandelín es
ng/mL) capaz de detectar sustancias como
● L-Amphetamine (25,000 ng/mL) Amitriptilina (marrón-verde), Desipramina
● 3,4- Methylenedioxy (400 ng/mL) (amarillo - azul), Imipramina (azul) y
● Phentermine (800 ng/mL) Nortriptilina (marrón - verde), en otra
● Maprotiline (50,000 ng/mL) referencia se encontró que el reactivo de
● Methoxyphenamine (6,000 ng/mL)
Mandelin es una prueba importante alcaloide, debido a las interferencias
principalmente porque, a diferencia de durante la manipulación de la muestra,
Marquis y Mecke, identifica positivamente reactividad cruzada o errores en la toma
la presencia de ketamina y los de muestra así como el tiempo
adulterantes mortales PMA y PMMA. transcurrido de la misma hasta su empleo
También detecta MDxx («éxtasis / molly»), en la prueba realizada.
metanfetamina y cocaína, por lo que en
ninguno de estos casos se refiere a la Los resultados de las pruebas presuntivas
estructructura principal ni a los pueden diferir entre los extractos debido a
metabolitos del metilfenidato, por lo que la la naturaleza química de los alcaloides y
prueba realizada por el equipo 6 no se por lo tanto a su solubilidad en los
observa igual a la prueba de referencia en diferentes solventes en función del pH al
la cual se puede apreciar un precipitado que se realizó la experimentación.
(Figura 4 y 5) ya que los compuestos PMA
Y PMMA son diferentes a los que se Referencias
encuentran en la muestra de ritalin ➢ Baselt RC. Disposition of Toxic
(metilfenidato), con base a lo antes Drugs and Chemicals in Man. 6th
mencionado, nos permite observar que en Ed. Biomedical Publ., Foster City,
el caso del equipo 9 el cual de acuerdo a CA 2002.
la Tabla 1 si dió positivo a la prueba de ➢ Salazar, M. (2014). Tratado de
metanfetaminas, la reacción de Mandelín Psicofarmacología (eBook online).
en las 3 extracciones dio positivo con una Google Books.
coloración amarilla confirmando la [Link]
presencia de metanfetaminas, de igual s?id=ugBvQChj4JAC&dq=metilfe
nidato+es+derivado+de&source
manera se puede explicar el por qué de
=gbs_navlinks_s
los resultados negativos en la prueba de
➢ ‌METILFENIDATO EN
Mandelín en muestras que contenían THC VADEMECUM. (2016).
que es el compuesto Tetrahidrocannabinol [Link].
el cual no entra dentro de las sustancias [Link]
que puede detectar la prueba de arma04/[Link]#:~:text=El%20
Mandelín. metabolismo%20del%20metilfenid
ato%20ocurre,PPA)%2C%20que%
20es%20inactivo
Conclusiones
➢ ‌Reactivo mandelin - PDT -
Para concluir, es importante que al
DLForense. (2021, March 12).
realizar las pruebas presuntivas para DLForense.
alcaloides, en caso de obtener resultados [Link]
positivos o negativos, es necesario eccion-de-drogas-mandelin-pdt-caj
realizar un segundo análisis mediante a-de-10/#:~:text=El%20reactivo%2
dispositivos altamente sensibles y 0de%20Mandelin%20es,%2C%20
metanfetamina%2C%20coca%C3
específicos que permitan confirmar el
%ADna%20y%20m%C3%A1s.
resultado, o bien detectar la presencia de ➢ ‌Flanagan, R., Braithwaite, R.,
alcaloides que debido a su estructura o Brown, Widdop, De Wolff, F.,
metabolitos no se detectan visualmente Biancucci, G., González, D.,
mediante las pruebas presuntivas. Pérez, A., Ridolfi, A., & Strobl, A.
(1995). MANUAL DE
Los resultados negativos obtenidos en la PROCEDIMIENTOS ANALÍTICOS
TOXICOLÓGICOS PARA
experimentación no pueden confirmar la
LABORATORIOS DE BAJA
no exposición o exposición al compuesto
 COMPLEJIDAD Realizada por.
[Link]
ontent/uploads/2016/03/toxicologia
_libro_analitica.pdf
➢ Aragón, G. (2008). Alcaloides y
compuestos nitrogenados.
Recuperado de: universidad de
antioquia Medellín:
[Link]
[Link]
➢ Bell, S. (2004). The facts on file
dictionary of forensic
[Link] of Congress. New
York. 150 - 152 p.p.