INFORME 4: LA CÉLULA PROCARIOTA
GRUPO 4 DE LABORATORIO:
TRUJILLO ORTEGÓN MARÍA PAULA CÓDIGO: 20221140024
CAMELO ESCOBAR DIANA PAOLA CÓDIGO: 20221140026
PROFESOR: HANSEN WILBER MURCIA GUTIERREZ
BIOLOGÍA CELULAR 140-2
FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 24/05/2022 y 31/05/2022
FECHA DE ENTREGA: 06/06/2022
UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOSÉ DE CALDAS
FACULTAD DE CIENCIAS Y EDUCACIÓN
PROYECTO CURRICULAR LICENCIATURA EN BIOLOGÍA
BOGOTÁ D.C, 2022
I. OBJETIVOS
● Brindar al estudiante herramientas básicas en diseño y manejo de extendidos y
la tinción de estos de acuerdo con la observación que se desee realizar.
● Identificar las distintas tinciones además de su proceso de generación para una
correcta observación en el microscopio.
● Reconocimiento de bacterias gram positivas de dos tipos cocos y bacilos
(estreptococos y lactobacilos).
II. INTRODUCCIÓN
La tinción es el proceso por el cual las moléculas de un colorante se absorben en una
superficie. El uso de colorantes permite cambiar el color de las células de los
microorganismos y poder realizar la observación en microscopio óptico. Dado que las
bacterias son casi incoloras, no presentan contraste con el medio en el cual se
encuentran suspendidas y no pueden observarse claramente sin algún tratamiento
previo.
De acuerdo a la reacción que ocurre, existen diferentes tipos de tinción:
➢ Tinción simple:
Se describe a la coloración o tinción simple cuando una muestra extendida se tiñe con
un solo colorante. Si la preparación se tiñó con safranina, las bacterias adquieren un
color rojo, si se utiliza azul de metileno, se teñirán de azul, si por el contrario se tiñen
con cristal violeta, las bacterias aparecerán teñidas de color violeta, es decir adquirirán
el color del único colorante que se utilizó. Este proceso permite diferenciar la
morfología y la estructura interna de la célula bacteriana. Existen coloraciones
especiales que permiten poner de manifiesto estructuras bacterianas como, por
ejemplo: flagelo, cápsula, endosporas.
➢ Tinción diferencial:
Las tinciones diferenciales son aquellas tinciones que se usan para diferenciar de
manera más explícita los microorganismos. Estas tinciones utilizan los colorantes
diferenciales, que se componen de más de una sustancia tintórea. En algunas técnicas
de coloración, las tinciones diferenciales más importantes que se emplean en
bacteriología son las de Gram y la tinción ácido-resistente. Ambas tinciones se
utilizan para obtener información acerca de la composición de las capas de la pared
celular de las células bacterianas.
➢ Tinción diferencial de Gram:
Es descrita por(López,L,Durán, M,Colín,C,Ortega,S,González,G,Franco,R,2013,Las
tinciones básicas en el laboratorio de microbiología) como un procedimiento de gran
utilidad en laboratorios donde se manejan pruebas microbiológicas. Es definida como
una tinción diferencial, ya que utiliza dos colorantes y clasifica a las bacterias en dos
grupos: bacterias Gram negativas y bacterias Gram positivas. Fue desarrollada por el
científico danés Hans Christian Gram en 1884; Los principios de la tinción de Gram
están basados en las características de la pared celular de las bacterias, la cual le
confiere propiedades determinantes a cada microorganismo. La pared celular de las
bacterias Gram negativas está compuesta por una capa fina de peptidoglucano y una
membrana celular externa, mientras que las bacterias Gram positivas poseen una
pared celular gruesa constituida por peptidoglicano, pero no cuentan con membrana
celular externa; así pues, la composición química y el contenido de peptidoglicano en
la pared celular de las bacterias Gram negativas y Gram positivas explica y determina
las características tintoriales de estas.
La tinción de Gram se basa en colocar como colorante primario cristal violeta, el cual
tiene semejanza con el peptidoglicano de la pared bacteriana. Posteriormente, se
coloca Lugol, el cual funciona como mordiente e impide la salida del cristal violeta
por la formación de un complejo cristal violeta yodo el cual, satura los espacios del
peptidoglicano de la pared bacteriana. En seguida, se coloca una mezcla de alcohol-
acetona, la cual deshidrata la pared bacteriana y cierra los poros de la misma,
deshaciendo la membrana externa de las bacterias Gram negativas debido a que ésta
es soluble a la acción de solventes orgánicos, como la mezcla de alcohol acetona. Las
bacterias Gram positivas, al contener una gran cantidad de peptidoglicano, mantienen
con mayor fuerza este complejo, mientras que las Gram negativas no lo pueden
retener por tener menos cantidad de peptidoglicano.
Por último, se coloca safranina la cual funciona como un colorante secundario o de
contratinción y sirve para teñir las bacterias que no pudieron retener el complejo
cristal violeta-yodo.
Para lograr realizar los diferentes tipos de tinciones existentes, es necesario la
implementación de colorantes es estas prácticas experimentativas. Esto con el fin de
facilitar el reconocimiento de microorganismos en las muestras a analizar. Según lo
planteado por los autores (González, R, Cuevas, B, Cortez, M, Orduña, M,2020, Las
tinciones básicas en el Laboratorio de Microbiología: Un enfoque gráfico.) Los
colorantes son compuestos orgánicos y reactivos necesarios para las tinciones, que
facilitan la observación en el microscopio. Cada tipo de colorante tiene afinidad por
determinados componentes celulares que actúan generalmente, por medio de
reacciones de intercambio iónico entre el colorante y elementos celulares. Varios de
estos colorantes utilizados con frecuencia en Microbiología están cargados
positivamente (católicos) y se combinan fuertemente con constituyentes celulares
cargados negativamente (aniónicos), como los ácidos nucleicos y los polisacáridos
ácidos.
Existen varios tipos de colorantes usados en las tinciones, los cuales se pueden
clasificar de acuerdo a su origen o a su comportamiento químico.
Por su origen:
Estos pueden clasificarse en:
● Colorantes naturales: Estos son los extraídos de animales, pero sobre todo de
las plantas.
● Colorantes artificiales: Son productos de derivados químicos, obtenidos en su
mayor parte de alquitrán de hulla, son colorantes de anilina y se distinguen los
colorantes que conocemos comúnmente; los colorantes ácidos y básicos, que
pueden estar formando sales, así como colorantes neutros.
Por su comportamiento químico:
Generalmente, un colorante, dependiendo de su estructura físico-química, se unirá de
una forma más estable a la estructura que se tiñe. En general, están constituidos
fundamentalmente por un anillo bencénico al que se unen diferentes radicales, de los
cuales uno de ellos será coloreado y corresponderá al radical cromóforo, que
frecuentemente es de carácter nitroso o de tipo amino, azo, alqueno, ciano, tociano,
etc. Por otra parte, al anillo bencénico se le unirán radicales no coloreados o
auxocromos que pueden ser de tipo hidroxilo, amino, metilo, vinilo. Ya que no poseen
capacidad tintorial pero le dan estabilidad al colorante, pudiendo facilitar que se tiñan
los radicales coloreados.
Los colorantes ionizables se dividen en clases generales según la naturaleza de su
grupo cargado:
● Colorantes ácidos: También son llamados aniónicos. Poseen grupos cargados
negativamente como carboxilos (-COOH) e hidroxilos fenólicos (-OH). Los
colorantes ácidos, debido a su carga negativa, se unen a estructuras de la
célula cargadas positivamente. Se tratan de aquellos donde la carga del radical
colorante es negativa, corresponden fundamentalmente a colorantes
citoplasmáticos, debido a que los citoplasmas de las células se consideran
básicos, captando muy bien los colorantes ácidos. En este grupo de colorantes
se encuentran eosinas, auraminas, entre otras.
● Colorantes básicos: También son llamados catiónicos. Son aquellos en donde
la carga del cromóforo es positiva. Tienen grupos cargados positivamente
(normalmente alguna forma de nitrógeno pentavalente) y se comercializan
como sales de cloruro. Los colorantes básicos se unen a moléculas cargadas
negativamente como ácidos nucleicos, muchas proteínas y la superficie de
células procariotas. Estos tienen estructuras ácidas o ligeramente ácidas, en
resumen, cargadas negativamente. En este grupo de colorantes se encuentran
derivados del trifenilmetano como la fucsina básica, cristal violeta o violeta de
gencian, así como los derivados de tiacidas como azul de toluidina, azul de
metileno o las tioninas.
III. METODOLOGÍA
1. Preparación del extendido previa a la coloración.
2. Tinción simple.
3. Tinción diferencial. Método de Gram
IV. RESULTADOS
1. Se inicia la práctica de laboratorio teniendo en cuenta las normas de
bioseguridad y el buen manejo de los reactivos y los equipos de laboratorio.
Para este procedimiento se inició tomando un portaobjetos el cual debía estar
desengrasado y seco previamente, en donde se debía colocar la muestra. En
este caso se utilizó como muestra una bebida láctea YOX, la cual se
caracteriza por contener microorganismos vivos tales como algunos
probióticos. Para poder encontrar estas bacterias, se tomó una pequeña
muestra o gota del producto, la cual se colocó en el portaobjetos para
posteriormente extenderla con la laminilla en forma de capa delgada y
uniforme. Luego se procedió a fijar el extendido al vidrio del portaobjetos.
Para esto, se pasó lentamente el portaobjetos en forma horizontal sobre la
llama del mechero, teniendo en cuenta que el extendido estuviera siempre
hacia arriba y evitando la combustión de este. La fijación de la extensión de la
muestra se realizó con el fin de evitar que la muestra sea arrastrada en los
lavados que se realizaron después de aplicar los métodos habituales de tinción,
que permitieron la observación de las bacterias en el microscopio. La fijación
también posibilita que las bacterias queden inactivadas y adheridas al vidrio
del portaobjetos alterando lo menos posible la morfología bacteriana y las
posibles agrupaciones de células que pudiera haber en la muestra de la bebida
láctea YOX.
2. Para el procedimiento de tinción simple se inició colocando unas gotas de azul
de metileno sobre el extendido, dejando a el colorante actuar por unos
minutos. Luego, se eliminó el exceso de colorante lavando con agua destilada
y de forma suave, con ayuda de un frasco lavador. Después se secó el
extendido con ayuda del mechero, pasándolo por él hasta que se logró la
sequedad total. Finalmente, se pasó a observar la muestra en el microscopio.
Al observar la muestra se logró reconocer dos morfologías bacterianas
distintas que se encontraron en la bebida láctea YOX, bacterias de tipo cocos y
bacilos los cuales se reconocieron por su forma. Y dos tipos de agrupación, los
estreptococos, y diplococos. La observación de estas bacterias se ve reflejada
en la Figura 1.
Figura 1. Muestra de bebida láctea YOX con azul de metileno a 100x.
3.
Para el
procedimiento de tinción diferencial se inició realizando una coloración de las
bacterias para reconocer si en la muestra se encontraban bacterias gram
positivas. Para realizar dicha coloración, se tiñó la muestra que se fijó al
portaobjetos en el primer procedimiento, con una solución de cristal violeta al
1%, la cual se dejó actuar por un minuto. Se realizó con este colorante ya que
otros colorantes básicos no son tan efectivos. Después se lavó el exceso de
colorante con agua destilada, tal como se muestra en la Figura 2 y se secó el
portaobjetos con ayuda de una toalla absorbente para eliminar la humedad
restante.
Figura 2. Lavado del exceso de cristal violeta del portaobjetos.
Posteriormente se cubrió el portaobjetos con una solución de yodo-yoduro de
potasio. Esta se dejó actuar por dos minutos, así como se muestra en la Figura
3. El ingrediente activo de esta solución es el yodo, ya que el yoduro de
potasio solo ayuda a solubilizar el yodo en agua. Por eso, en este caso el yodo
entra en las células con el fin de formar un complejo insoluble en agua con el
cristal violeta.
Figura 3. Portaobjetos con solución yodo-yoduro de potasio.
Luego se llevó a cabo la decoloración de la muestra, para esto se utilizó una
mezcla de alcohol-acetona, sustancias en las que es soluble el complejo yodo-
cristal violeta que se formó previamente. Esta se dejó actuar durante veinte
segundos. Las células gram positivas, a causa de sus paredes celulares más
espesas, no son permeables a este disolvente, provocando que el de complejo
cristal violeta-yodo quede atrapado dentro de la pared celular. Después de la
decoloración las células gram positivas son todavía azules, pero las gram
negativas son incoloras.
Por último, con el fin de poner de manifiesto las células gram negativas se
utilizó una coloración de contraste. En este caso, se hizo uso de la solución de
Safranina, la cual se dejó actuar por dos minutos, tal como se muestra en la
Figura 4. Se lavó el exceso de colorante y se secó la humedad con una toalla
absorbente. Después de realizar la coloración de contraste, se tuvo en cuenta
que las bacterias gram negativas se muestran rojas, mientras que las gram
positivas permanecen azules.
Figura 4. Portaobjetos con solución de Safranina.
Al observar la muestra en el microscopio, se reconocen células de tipo gram
positivas en la misma muestra, ya que, al realizar la tinción, dichas células
permanecieron azules. Los tipos de bacterias identificadas fueron los cocos,
los cuales se caracterizan por tener forma esférica u ovalada, y los bacilos que
se reconocieron por su forma cilíndrica o de bastón, dicha observación se ve
reflejada en la Figura 5 y Figura 6.
Figura 5. Observación de Figura 6. Observación de coco
bacilo en la muestra de bebida en la muestra de bebida láctea
láctea YOX a 100x con YOX a 100x con inmersión.
inmersión.
Por otro lado, teniendo en cuenta la forma y las principales características
morfológicas de las bacterias, en una segunda tinción diferencial, se logró
observar y reconocer las bacterias Lactobacillus bulgaricus y Streptococcus
thermophilus en la muestra de la bebida láctea YOX. Las observaciones
anteriores se ven reflejadas en la Figura 7 y Figura 8 respectivamente.
Figura 7. Observación de Figura 8. Observación de
Streptococcus thermophilus Lactobacillus bulgaricus
en la muestra de bebida láctea en la muestra de bebida láctea
YOX a 100x con inmersión. YOX a 100x con inmersión.
4. Herramientas TIC
1. Simulación de microscopio
Se inició con el procedimiento virtual a través de la página
(https://www.ncbionetwork.org/iet/microscope/)en donde se entra a la
simulación de microscopía, la cual se muestra en la Figura 9. Luego se dio
click en explorar , en donde se procedió a determinar en la caja o el catálogo
de muestras que se quería observar , en este caso se seleccionó el
deslizamiento de bacteria , por consiguiente la simulación muestra otro menú
en donde se escoge a observar a endospore stain .continuando con el ejercicio
se acomoda la muestra en el portaobjetos es ahí en donde se va configurando
características como el enfoque grueso(macrométrico),micrométrico y luz esto
para determinar una correcta observación de la muestra. Finalmente se explora
la muestra manipulando los distintos objetivos de aumento (4x,10x,40x y
100x) esto con la finalidad de identificar características de la muestra en
cuestión. La muestra que se analizó corresponde a la bacteria Bacillus subtilis,
la cual se caracteriza por ser una bacteria Gram positiva. Dicha muestra se ve
reflejada en la Figura 10.
Figura 10. Ilustración de
Figura 9. Simulación de microscopia.
Bacillus subtilis.
Reseña del microorganismo observado:
En bacteriología los bacilos son cualquier bacteria con forma de barra o vara,
y pueden encontrarse en muchos grupos taxonómicos diferentes tipos de
bacterias. Sin embargo, el nombre Bacillus, se refiere a un género específico
de bacteria. El otro nombre Bacilli; hace referencia a una clase de bacilos que
incluyen dos órdenes, uno de los cuales contiene al género Bacillus. Los
bacilos son bacterias que se encuentran en diferentes ambientes y solo se
pueden observar con un microscopio. Los bacilos suelen dividirse en el mismo
plano y son solitarios, pero pueden combinarse para formar diplobacilos,
estreptobacilos y cocobacilos:
Diplobacilos: Dos bacilos dispuestos uno al lado del otro.
Estreptobacilos: Bacilos dispuestos en cadenas.
Cocobacilos: Ovalados y en forma de bastoncillo.
Por tipo de bacteria los bacilos pueden ser:
Bacilos Gram positivos: fijan el cristal violeta (tinción de Gram) en la pared
celular porque tienen una gruesa capa de peptidoglucano.
Bacilos Gram negativos: no fijan el cristal violeta y se tiñen con el colorante
de contraste usado en la tinción de Gram que es la safranina, debido a que
tienen una fina capa de péptidoglucano en medio de dos bicapas lipídicas en la
cual se encuentran los lipopolisacáridos o también llamados endotoxinas
(principalmente en la membrana externa).
Aunque muchos bacilos son patógenos para el ser humano, algunos no hacen
daño, pues producen algunos productos lácteos como el yogur (lactobacilos).
¿En qué consisten las tinciones de endospora y acidorresistente?
La tinción de endosporas ayuda a diferenciar las bacterias en ex años de
esporas y los años no esporas, así como determina si las esporas están
presentes en una muestra que, si está presente, podría conducir a
contaminación bacteriana tras la germinación. Por otro lado, la tinción
acidorresistente determina si una muestra de tejido, sangre u otra sustancia
corporal está infectada con las bacterias que retienen el primer tinte y son
consideradas "acidorresistentes" porque resisten el lavado ácido.
V. DISCUSIÓN
Considerando los resultados obtenidos en el procedimiento de fijación de la
muestra se tiene en cuenta que por medio de este proceso se conserva y se fija en
su posición las estructuras internas y externas de las células que componen estos
microorganismos o bacterias. Esto evidenciado en la muestra obtenida
comparando el proceso descrito por (López, L, Durán, M, Colín, C, Ortega, S,
González, G, Franco, R, 2013, Las tinciones básicas en el laboratorio de
microbiología) en donde se describe que el objetivo de la fijación es la
inmovilización de la estructura de la muestra que se quiera observar, procurando
que ésta se encuentre en un aproximado a su estado vivo la cual consiste en una
muerte rápida debido a la coagulación de albúminas protoplasmática Por lo tanto
la muestra fija manifiesta una mayor capacidad de tinción como un incremento de
su capacidad de reducción .En consecuencia si el microorganismo se encuentra
vivo no acepta los colorantes utilizados en la tinción ya que son impermeables a
estos. Sin embargo, observando los resultados generados en el ejercicio
presenciamos e identificamos características de morfología tales como en los
cocos(esférica), bacilos (barras alargadas), como tamaño y agrupación.
También se analizó el resultado que se obtiene en función de la fijación que se use
en este caso (fijación por medio de calor). La fijación por calor preserva la
morfología global pero no las estructuras intracelulares. Debido a lo anteriormente
mencionado al examinar la muestra obtenida, se nota o distingue solo su
morfología, pero no se distingue su estructura interna (ribosomas, plásmido,
nucleoide, entre otros) de acuerdo a estos microorganismos. Este proceso se
desarrolla de la siguiente manera: se pasará, varias veces, la parte inferior de la
preparación por la llama azul de un mechero Bunsen hasta que se note caliente al
colocarlo en el dorso de la mano, pero sin que queme. Es fundamental aclarar que
la fijación por medio de calor ha sido sobrevalorada en su facultad para matar
bacterias.
Teniendo en cuenta los resultados obtenidos en el procedimiento de tinción simple
se analizó en concordancia con (López, L, Durán, M, Colín, C, Ortega, S,
González, G, Franco, R, 2013, Las tinciones básicas en el laboratorio de
microbiología) en donde se explica que la en la tinción de gram, las células gram
positivas se caracterizan por contener una capa gruesa de peptidoglicano con
numerosos enlaces cruzados de ácido teicoico. En la observación que se realizó se
mencionó que se distinguió a los Streptococcus estas bacterias conforme a estos
autores son cocos gram positivos, de una dimensión pequeña aproximada de (1-
1.5 micras), anaerobios facultativos(obtienen energía en ausencia de oxígeno sin
embargo este no es tóxico)estas bacterias se encuentran en pares (diplococos)o en
cadenas (estreptococos) como pudimos comprobar en las imágenes tomadas.
Para finalizar en el procedimiento de tinción diferencial (porque se utiliza más de
un colorante) sirve para poner de manifiesto características de afinidad por ciertos
colorantes de microorganismos. Se basan en el hecho de que distintos tipos de
células tienen distinta composición química, y por lo tanto reaccionan de forma
diferente de acuerdo a esto se comprueba la efectividad del método realizado,
teniendo en cuenta que se observó:
Lactobacillus bulgaricus, son bacterias de tipo gram positivo que como se pudo
observar tienen una morfología cilíndrica o en forma de bastón , cuentan con una
dimensión de (0.5 a 20 micras ),al analizar los resultados se percibe que estos
microorganismos, por lo general no tienden a agruparse corroborando el resultado
en donde solo se encuentra un lactobacillus ,sin embargo existe un grupo de
bacilos que si se agrupa a modo de cadenas estos reciben el nombre de
Estreptobacilos, al igual que los cocos son anaerobios facultativos(obtienen
energía en ausencia de oxígeno sin embargo este no es tóxico)hace parte de los
probióticos(bacterias buenas)esto debido a que pueden ayudar al cuerpo a
descomponer los alimentos, absorber nutrientes y combatir los organismos
peligrosos que generen enfermedades ,puesto que la muestra a observar era un
yogurt.
VI. CONCLUSIONES
Para concluir la práctica se puede decir que el procedimiento de tinción es
imprescindible en el laboratorio y en el estudio de la biología siendo el primer
paso en la identificación de microorganismos, esto debido a que permite observar
bacterias de todo tipo y clasificarlas según su morfología bacteriana. De igual
manera, posibilita conocer características como agrupación, constitución,
dimensión, incluyendo la coloración de su estructura.
También es importante incluir, que tanto las bacterias Gram positivas como las
bacterias Gram negativas se presentan morfológicamente como cocos o bacilos,
sin embargo, al ejecutar tinción de Gram en estas para identificar sus
características taxonómicas, las gram positivas se tiñen de color azul mientras que
las gram negativas se tiñen de color rojo.
Finalmente, se puede decir que la implementación de colorantes en las tinciones
es indispensable para la observación de células bacterianas, ya que permite
identificar con mayor facilidad observar las estructuras básicas de la misma,
siempre y cuando se empleen concentraciones bajas, de lo contrario, una cantidad
de colorante muy concentrado puede alterar la estructura de la pared celular.
VII. CUESTIONARIO(BONO)
1. ¿Qué es una reacción ácido-base?
Una reacción ácido-base o reacción de neutralización es una reacción química
que se presenta entre un ácido y una base dando como derivados una sal y
agua. La palabra “sal” describe cualquier compuesto iónico cuyo catión
provenga de una base (Na + del NaOH) y cuyo anión provenga de un ácido
(Cl– del HCl). Las reacciones de neutralización son regularmente exotérmicas,
lo que significa que desatan energía en forma de calor. Se les suele llamar de
neutralización porque al reaccionar un ácido con una base, estos neutralizan
sus propiedades mutuamente.
Los ácidos y las bases constituyen una clase de compuestos químicos de gran
interés. El concepto de ácido y base ha evolucionado a lo largo del desarrollo
de la química. Una primera definición de estos compuestos fue dada por
Arrhenius:
➢ Definición de Arrhenius
La definición de Arrhenius de las reacciones ácido-base es un concepto ácido-
base más simplificado, desarrollado por el químico sueco Svante Arrhenius,
que siguió a su trabajo con Friedrich Wilhelm Ostwald en el que establecen la
presencia de iones en disolución acuosa en 1884, y que llevó a Arrhenius a
recibir el Premio Nobel de Química en 1903 como “reconocimiento de sus
extraordinarios servicios… prestados al avance de la química por su teoría de
la disociación electrolítica”. Tal como se definió en el momento del
descubrimiento, las reacciones ácido-base se caracterizan por los ácidos de
Arrhenius, que se disocian en disolución acuosa formando cationes hidrógeno
(H+), reconocidos posteriormente como ion hidronio (H3O+), y las bases de
Arrhenius, que forman aniones hidroxilo (OH−).
La tradicional definición acuosa de ácido-base del concepto de Arrhenius se
describe como la formación de agua a partir de iones hidrógeno e hidroxilo, o
bien como la generación de iones hidrógeno e hidroxilo procedentes de la
disociación de un ácido y una base en disolución acuosa:
H+ (aq) + OH− (aq) H2O
Esto procede a la definición de que, en las reacciones ácido-base de Arrhenius,
se forma una sal y agua a partir de la reacción entre un ácido y una base. En
otras palabras, es una reacción de neutralización.
ácido + base → sal + agua
Los iones positivos procedentes de una base forman una sal con los iones
negativos procedentes de un ácido.
➢ Definición de Bronsted-Lowry
La definición de Bronsted-Lowry, formulada independientemente por sus dos
autores Johannes Nicolaus Bronsted y Thomas Martin Lowry en 1923, se basa
en la idea de la protonación de las bases a través de la desprotonación de los
ácidos, es decir, la capacidad de los ácidos de “donar” cationes hidrógeno
(H+) a las bases, quienes, a su vez, los “aceptan”. A diferencia de la definición
de Arrhenius, la definición de Bronsted-Lowry no se refiere a la formación de
sal y agua, sino a la formación de ácidos conjugados y bases conjugadas,
producidas por la transferencia de un protón del ácido a la base.
En esta definición, un “ácido es un compuesto que puede donar un protón, y
una base es un compuesto que puede recibir un protón”. En consecuencia, una
reacción ácido-base es la eliminación de un catión hidrógeno del ácido y su
adición a la base. Esto no se refiere a la eliminación de un protón del núcleo
de un átomo, lo que requeriría niveles de energía no alcanzables a través de la
simple disociación de los ácidos, sino a la eliminación de un catión hidrógeno
(H+).
La adición de H+ al anión hidróxido (OH−), una base, produce agua (H2O), su
ácido conjugado:
H+ + OH− → H2O
Así, la definición de Brønsted-Lowry abarca la definición de Arrhenius, pero
también extiende el concepto de reacciones ácido-base a sistemas en los que
no hay agua involucrada, tales como la protonación del amoníaco, una base,
para formar el catión amonio, su ácido conjugado:
H+ + NH3 → NH4+
Esta reacción puede ocurrir en ausencia de agua, como en la reacción del
amoníaco con el ácido acético:
CH3COOH + NH3 → NH4+ + CH3COO−
Esta definición también proporciona un marco teórico para explicar la
disociación espontánea del agua en bajas concentraciones de iones hidronio e
hidróxido:
2 H2O H3O+ + OH−
El agua, al ser anfótera, puede actuar como un ácido y como una base; aquí,
una molécula de agua actúa como un ácido, donando un catión H+ y formando
la base conjugada, OH−, y una segunda molécula de agua actúa como una
base, aceptando el catión H+ y formando el ácido conjugado, H3O+.
Entonces, la fórmula general para las reacciones ácido-base, de acuerdo con la
definición de Brønsted-Lowry, es:
AH + B → BH+ + A−
donde AH representa el ácido, B representa la base, y BH + representa el ácido
conjugado de B, y A− representa la base conjugada de AH.
➢ Definición de Lewis
La definición de Lewis de las reacciones ácido-base, propuesta por Gilbert N.
Lewis en 1923 es, además, una generalización que comprende la definición de
Brønsted-Lowry y las definiciones de sistema solvente. En lugar de definir las
reacciones ácido-base en términos de protones o de otras sustancias enlazadas,
la propuesta de Lewis define una base (llamada base de Lewis) como un
compuesto que puede donar un par electrónico, y un ácido (un ácido de Lewis)
como un compuesto que puede recibir dicho par electrónico.
Por ejemplo, si consideramos la clásica reacción acuosa ácido-base:
HCl (aq) + NaOH (aq) → H2O (l) + NaCl (aq)
La definición de Lewis no considera esta reacción como la formación de una
sal y agua o la transferencia de H + del HCl al OH−. En su lugar, considera
como ácido al propio catión H +, y como base al anión OH−, que tiene un par
electrónico no compartido. En consecuencia, aquí la reacción ácido-base, de
acuerdo con la definición de Lewis, es la donación del par electrónico del
anión OH− al catión H+, formándose un enlace covalente coordinado o dativo
entre H+ y OH−, que produce agua (H2O).
En reacciones entre ácidos de Lewis y bases de Lewis, ocurre la formación de
un aducto cuando el orbital molecular ocupado más alto (HOMO) de una
molécula, tal como el NH3, con pares de electrones solitarios disponibles dona
pares de electrones libres al orbital molecular más bajo no ocupado (LUMO)
de una molécula deficiente en electrones, a través de un enlace covalente
coordinado; en tal reacción, la molécula interactuante HOMO actúa como una
base, y la molécula interactuante LUMO actúa como un ácido. En moléculas
altamente polares, como el trifluoruro de boro (BF3), el elemento más
electronegativo atrae los electrones hacia sus propios orbitales,
proporcionando una cierta carga positiva sobre el elemento menos
electronegativo y una diferencia en su estructura electrónica debido a las
posiciones de sus electrones en orbitales axiales, produciendo efectos
repulsivos de las interacciones “par solitario-par enlazante” entre los átomos
enlazados en exceso con aquellos provistos de interacciones par enlazante-par
enlazante. Los aductos que involucran iones metálicos se conocen como
compuestos de coordinación.
➢ Definición de sistema disolvente
Esta definición se basa en una generalización de la definición anterior de
Arrhenius a todos los disolventes indisociables.
En todos estos disolventes, hay una cierta concentración de especies positivas,
cationes solvonio, y especies negativas, aniones solvato, en equilibrio con las
moléculas neutras del disolvente. Por ejemplo, el agua y el amoníaco se
disocian en iones oxonio e hidróxido, y amonio y amiduro, respectivamente:
2 H2O H3O+ + OH−
2 NH3 NH4+ + NH2−
Un soluto que ocasiona un aumento en la concentración de los cationes
solvonio y una disminución en los aniones solvato es un ácido, y uno que hace
lo inverso es una base. En consecuencia, en amoníaco líquido, el KNH2 (que
suministra NH2–) es una base fuerte, y el NH4NO3 (que suministra NH4 +) es
un ácido fuerte. En dióxido de azufre líquido, los compuestos de tionilo (que
suministran SO2 +) se comportan como ácidos, y los de sulfitos (que
suministran SO32−) se comportan como bases.
Las reacciones ácido-base no acuosas en amoníaco líquido son similares a las
reacciones en agua:
2 NaNH2 (base) + Zn(NH2)2 (amida anfifílica) → Na2[Zn(NH2)4]
2 NH4I (ácido) + Zn(NH2)2 (amida anfifílica) → [Zn(NH3)4)]I2
El ácido nítrico puede ser una base en ácido sulfúrico:
HNO3 (base) + 2 H2SO4 → NO2+ + H3O+ + 2 HSO4−
Puesto que la definición de sistema disolvente depende tanto del disolvente,
como del compuesto mismo, un mismo compuesto puede cambiar su
comportamiento dependiendo en la elección del disolvente. Así, el HClO4 es
un ácido fuerte en agua, un ácido débil en ácido acético, y una base débil en
ácido fluorosulfónico.
2. ¿Cómo se neutraliza un ácido?
La reacción entre un ácido y una base se llama neutralización. Cuando en la
reacción participan un ácido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua.
Si una de las especies es de naturaleza débil y la neutralización se produce en
disolución acuosa también se obtiene su respectiva especie conjugada y agua.
Se puede decir que la neutralización es la combinación de iones hidronio y de
aniones hidróxido para formar moléculas de agua. Durante este proceso se
forma una sal. Las reacciones de neutralización son generalmente exotérmicas,
lo que significa que desprenden energía en forma de calor.
Podemos resumir el proceso así:
ácido + base → sal + agua
Los compuestos ácidos tienen un bajo pH (potencial de hidrógeno por debajo
de 7) y la neutralización consiste en subir el pH a un nivel neutro o cercano a
7. Para ello se utilizan sustancias básicas o alcalinas, que a diferencia de los
ácidos tienen un pH por encima de 7.
3. ¿Cómo se neutraliza una base?
La sal es un compuesto iónico constituido por un catión procedente de la base
y un anión procedente del ácido, de esta forma el ácido neutraliza a la base, y
la base neutraliza al ácido.
4. ¿Por qué razón no podemos consumir agua en medio de una manifestación con
gases lacrimógenos, ni aplicarnos en la piel?
Las bombas lacrimógenas tienen un componente que hace reacción y se
multiplica cuando entra en contacto con el agua. Hay que tener en cuenta que
las mucosas y demás fluidos como lágrimas, sudor e incluso el maquillaje
tienen en su composición un porcentaje de agua por ende teniendo en cuenta
lo anterior existe el peligro de sufrir más rápido el ardor, la tos, la asfixia,
incluso las náuseas y vómitos característicos que provocan estos gases.
5. ¿Qué efecto cumple el vinagre diluido en agua, frente a un gas lacrimógeno?
El compuesto químico en la mayoría de las bombas de gas lacrimógeno usadas
por la policía antidisturbios es el clorobenzilideno malononitrilo, también
conocido como CS, frente a los efectos generados por este gas, el vinagre
actúa neutralizando el gas debido a su naturaleza ácida, pues este logra bajar el
pH del gas acercándolo a 7 y permitiendo que la reacción dada sea neutra,
haciendo que los efectos nocivos para la salud se reduzcan mucho más rápido.
VIII. REFERENCIAS
Gonzales , : R. C., Cuevas, B., Cortés, M., & Orduña, M. (2020). Las
tinciones básicas en el Laboratorio de Microbiología: Un enfoque gráfico.
(1.ª ed., pp. 225–234). Recuperado
de :https://www.zaragoza.unam.mx/wp-content/Portal2015/publicaciones/
libros/cbiologicas/libros/Tinciones.pdf
Luis ,L, Melissa ,H, Claudia ,C,Silvestre ,O, Guillermo, C, Rafael ,F.
(2014),Las tinciones básicas en el laboratorio de
microbiología.Investigación en Discapacidad, volumen,3,(pp,3-
4).Recuperado de:
https://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf
Reacción ácido-base. (2017, 25 noviembre). https://dequimica.com/.
Recuperado 5 de junio de 2022, de https://dequimica.com/teoria/reaccion-
acido-base
Tinción_diferencial. (s. f.). QUIMICA.ES
https://www.quimica.es/enciclopedia/Tinci%C3%B3n_diferencial.html
colaboradores de Wikipedia. (2022, 25 abril). Bacilo. Wikipedia, la
enciclopedia libre. https://es.wikipedia.org/wiki/Bacilo
