ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

Nicole Julieth Yate 20572313477 (nyate92@[Link]) Daniela Andrea Pinedo 20572315542

(dpinedo11@[Link]) Nicolle Alexandra Mendoza 20572311334 (nmendoza22@[Link])
estudiantes Universidad Antonio Nariño Sede Neiva-Buganviles.

RESUMEN MARCO TEÓRICO

A partir de esta práctica se exploran los conceptos Según (Run, 2020)
respecto a la actividad enzimática, específicamente
la reacción de la enzima catalasa sobre ciertos Las enzimas son sustancias químicas que puede
sustratos como el utilizado en la práctica, fabricar el propio organismo a partir de las
denominado homogenizado de hígado. Así mismo proteínas o que se pueden adquirir a través de los
reconocer la función de las enzimas, sus modos de alimentos. En concreto, las enzimas son proteínas
inhibición y condiciones óptimas en su actividad que catalizan, es decir que aceleran reacciones
como catalizador biológico. De tal manera, bioquímicas que ocurren de manera natural en
determinar la actividad de la catalasa sobre el todos los organismos vivos.
sustrato anteriormente nombrado e identificar el Teniendo en cuenta a (Martínez, 2014)
efecto de la temperatura y el pH sobre la actividad
de la catalasa. Esto por medio de métodos como; El pH es el Potencial de Hidrógeno. Es una medida
aplicar un total de 3 gotas del homogenizado sobre para determinar el grado de alcalinidad o acidez de
un vidrio de reloj y agregar 3 gotas de peróxido de una disolución. Este normalmente se mide en una
hidrógeno para inicialmente establecer la actividad escala de 1 a 14. El 1 corresponde al valor más
de dicha enzima. En relación con el efecto de la ácido, mientras el 14 corresponde al valor más
temperatura se hizo uso de 4 tubos de ensayo, alcalino. Y el 7 el valor neutro.
partiendo desde 2 ml de homogenizado de hígado,
previamente enumerados y clasificados con Estos resultados se pueden interpretar pensando
temperaturas de 80°C, 37°C, temperatura ambiente que, en el pH óptimo ya que la enzima tiene la
(T. A) y refrigeración (R) para distinguirlos, esto con conformación tridimensional que le permite la
un tiempo establecido de 15 minutos para que mayor actividad catalítica. Si se modifica este pH, la
después de dicho tiempo se agregue un máximo conformación nativa se pierde y la enzima ya no
total de 10 gotas de peróxido de hidrógeno en cada puede catalizar adecuadamente.
tubo, así mismo determinar el tiempo de burbujeo
Desde el punto de vista de (Ismael, Lidia, &
producido en la reacción. Referente al efecto del
Abraham, 2015)
pH, tomamos 3 tubos de ensayo, añadimos 2 ml de
homogenizado, en el tubo 1 se añade 1 ml de (HCL Se da la respuesta al porque surge un burbujeo al
3M), en el tubo 2 se añade 1 ml de (NaOH 3M) y en aplicar las gotas de peróxido de hidrógeno y esto se
el tubo número 3 se añade agua destilada y debe al desprendimiento de oxígeno de la reacción
mezclamos bien, para la toma de el pH se aplica catalizada por la enzima catalasa.
una gota de las mezclas sobre el papel indicador de
pH y a partir de esto se deja en temperatura Como señala (Tasset, 2018)
ambiente por 5 minutos, a continuación se aplican
La catalasa es una de las enzimas involucradas en
10 gotas de peróxido de hidrógeno en cada tubo y
la destrucción del peróxido de hidrógeno generado.
finalmente se revisa la producción de burbujas.
Dando lugar a oxígeno molecular y agua.
Citando a (Khan Academy, 2016)
Los modos de inhibición pueden ser 2.
La inhibición competitiva se basa en como un
inhibidor puede unirse a una enzima y bloquear la
unión del sustrato, por ejemplo, al pegarse al sitio

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activo. Esto porque el inhibidor "compite" con el TABLA 1. Efecto de la temperatura sobre la
sustrato por la enzima. actividad de la catalasa.
En la inhibición no competitiva, el inhibidor no
TUBO T(°C) TIEMPO H2O2 TIEMPO
bloquea la unión del sustrato con el sitio activo, sino
BURBUJAS
que se pega a otro sitio y evita que la enzima haga
su función. Así mismo, el inhibidor y el sustrato 1 80°C 15min 10 11seg.
pueden estar unidos a la enzima al mismo tiempo. gotas Abundante
2 37°C 15min 10 12seg.
gotas Poco
3 T. A 15min 10 11seg.
RESULTADOS gotas Abundante
4 R 15min 10 11seg.
gotas Abundante

REGISTRO FOTOGRÁFICO TABLA 1.

Ilustración 1- vidrio de reloj

En este proceso se comprueba que se activa la

enzima al aplicar las gotas de peróxido de
hidrógeno, de tal manera se explica la reacción de
“descomposición” donde el oxígeno se escapa en
forma de burbujas como lo explican (Ismael, Lidia,
& Abraham, 2015). Tubo 1- 80°C

Ilustración 2- Reacción de catalasa a diferente temperatura y

pH

A continuación, se registra la información en

cuanto a tiempo y cantidad (abundante, poco,
nada) de formación de burbujas en cada tubo, en
Tubo 2- 37°C
las tablas 1 y 2.

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 Tabla 2. Efecto pH sobre la actividad de la
catalasa.

TUB REACTIV TIEMP H2O2 TIEMPO

O O O BURBUJA
S
1 1 ml HCl 5min 10 Nada, no
3M gota produjo
s burbujas.
2 1 ml NaOH 5min 10 12seg.
3M gota Abundante
s
3 1 ml Agua 5min 10 4seg.
destilada gota Poco
s

REGISTRO FOTOGRÁFICO TABLA 2.

PH: Tubo 1 (pH 1); Tubo 2 (pH 12); Tubo 3 (pH 4).

ESCALA:

Tubo 3- Temperatura ambiente (T. A)

pH tubo 1
Tubo 4- Refrigeración (R)

pH tubo 2

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pH tubo 3

Tubo 3- Agua destilada

DISCUSIÓN Y ANÁLISIS DE RESULTADOS

Se destacan preguntas como; ¿Qué ocurrió al

añadir el peróxido de hidrógeno a cada una de las
muestras de hígado expuestas a diferentes pH y
temperatura?

Retomando lo citado (Ismael, Lidia, & Abraham,

2015) (Tasset, 2018); quienes me explican que la
enzima catalasa es aquella que destruye el
Tubo 1- Reactivo (HCl 3M) peróxido de hidrógeno y la reacción de burbujeo
que ocurre al añadir las gotas de peróxido de
hidrógeno se originan debido al desprendimiento de
oxígeno de la reacción catalizada por dicha enzima.

¿A qué pH se ve la enzima afectada? ¿Cómo se

relaciona el pH y la actividad enzimática?

¿Qué papel desempeña el valor de pH en las

enzimas?

Como afirma (Paysandú, 2020); Las enzimas

tienen valores de pH óptimos, por lo que, si un
valor de pH está arriba o abajo del pH óptimo, se
alteran las interacciones de los grupos R, lo que
destruye la estructura terciaria y el sitio activo.
Como resultado, la enzima ya no puede unirse a un
sustrato de manera adecuada y no ocurren
reacciones, por ejemplo, lo observado en el tubo 1
de la tabla 2, donde se utilizó el reactivo HCL 3M y
Tubo 2- Reactivo (NaOH 3M) este impidió que el peróxido de hidrógeno
reaccionara con el sustrato (aunque este determino
un pH ácido).

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¿A qué temperatura se ve la enzima afectada?
¿Cómo se relaciona la temperatura y la actividad
enzimática?
Como lo afirma (Illanes, 2008)
La temperatura de un proceso enzimático es un
compromiso entre la actividad y la estabilidad
enzimática, ya que las altas temperaturas
maximizan la actividad, como se observa desde el
tubo 1 de la tabla 1 donde este se encontraba a una
temperatura de 80°C y su actividad o reacción fue
abundante, igualmente lo transcurrido en el tubo
número 2.

CONCLUSIONES
- Concluimos que las enzimas son proteínas
catalizadoras ya que estas aceleran las reacciones
bioquímicas que suceden en los organismos vivos.
-Observamos que el PH del hígado varía según la
temperatura aplicada y las gotas de reactivo.
- Las enzimas muestran la reacción de
descomposición, muestra como el oxígeno escapa
en formas de burbujas al aplicar peróxido de
hidrógeno.

RECOMENDACIONES

-Colar bien el hígado para que sea más fácil de

introducir en los tubos de muestra

- Ser organizado y dejar limpio el sitio cada vez que

se derrame algo

- Utilizar bien los EPP ya que en esta práctica se

utilizan químicos que son tóxicos para la piel y ojos

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