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Método GOD-POD para Glucosa

Este documento describe un método para determinar la glucosa en suero o plasma utilizando la enzima glucosa oxidasa (GOD) y peroxidasa (POD). La glucosa, en presencia de GOD y O2, se oxida a ácido glucónico formando peróxido de hidrógeno. El peróxido de hidrógeno, en presencia de POD, oxida el 4-aminoantipirina y el ácido p-hidroxibenzoico para formar un derivado de color rosa cuya absorbancia es proporcional a la concentración de gluc
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Método GOD-POD para Glucosa

Este documento describe un método para determinar la glucosa en suero o plasma utilizando la enzima glucosa oxidasa (GOD) y peroxidasa (POD). La glucosa, en presencia de GOD y O2, se oxida a ácido glucónico formando peróxido de hidrógeno. El peróxido de hidrógeno, en presencia de POD, oxida el 4-aminoantipirina y el ácido p-hidroxibenzoico para formar un derivado de color rosa cuya absorbancia es proporcional a la concentración de gluc
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GLUCOSA LIQUIDA GLUCOSE LIQUID

METODO GOD – POD GOD – POD METHOD


Para la determinación “in vitro” de la Glucosa en suero o plasma For “in vitro” determination of Glucose in serum or plasma

Principio Principle
GOD GOD
D- Glucosa + H2O + O2 Ac. Glucónico + H2O2 D- Glucose + H2O + O2 Gluconic acid + H2O2
POD POD
2 H2O2 + 4-Aminoantipirina + Ac. p-Hidroxibenzoico Derivado quinónico coloreado + 4 H2O 2 H2O2 + 4-Aminoantipyrine + p-Hydroxybenzoic acid Coloured quinonic derivative + 4 H2O

Precauciones
Reactivos Reagents Caution
El reactivo contiene Azida sódica al 0,09%, manipular con precaución. La eliminación de residuos debe hacerse según la normativa legal vigente. No pipetear directamente de
Kit 1 x 100 ml (Ref. 99 82 25) Contiene: TheKit 1 x 100
reagent ml (Ref.
contains 99 82
Sodium 25)atContents:
azide 0.09%. Handle with care. The disposal of the residues has to be made according to legal local regulations. Do not pipette directly from
la botella de reactivo, para evitar contaminaciones no deseadas.
A. 1 x 100 ml. Reactivo. Ref. 99 82 84 theA. 1 x100
bottle ml. Reagent.
of reagent, for avoid undesired contaminations. Ref. 99 82 84
B. 1 x 5 ml. Standard. Ref. 99 02 93 B. 1 x 5 ml. Standard. Ref. 99 02 93
Kit 3 x 100 ml (Ref. 99 82 82) Contiene: Kit 3 x 100 ml (Ref. 99 82 82) Contents:
Prestaciones. Características de funcionamiento
A. 3 x 100 ml. Reactivo. Ref. 99 82 84 A. 3 x100 ml. Reagent. Ref. 99 82 84 Performance Characteristics
B. 1 x 5 ml. Standard. Ref. 99 02 93 Linealidad: Hasta 500 mg de Glucosa/dl. Para concentraciones mayores, diluir la B. 1 x 5 ml. Standard. Ref. 99 02 93 The assay is linear up to 500 mg of Glucose/dl. For higher concentrations dilute
Kit 4 x 250 ml (Ref. 99 86 60) Contiene: muestra 1/2 con salina (NaCl 0,9%). Multiplicar el resultado por 2. Las Kit 4 x 250 ml (Ref. 99 86 60) Contents: the sample 1/2 with saline (NaCl 0.9%). Multiply the final result by 2. The
A. 4 x 250 ml. Reactivo. Ref. 99 01 68 características de funcionamiento del producto dependen tanto del reactivo como A. 4 x250 ml. Reagent. Ref. 99 01 68 analytical performance characteristics of the product depend both of the
B. 1 x 5 ml. Standard. Ref. 99 02 93 del sistema de lectura manual o automático empleados. Los siguientes datos se B. 1 x 5 ml. Standard. Ref. 99 02 93 reagent and the reading system used, manual or automatic. The following data
han obtenido de forma manual:
have been obtained manually.

Reactivo de trabajo Coeficiente de Variación en la serie: 0,79% Coeficiente de Working reagent Intraseries Variation Coefficient: 0.79%
Variación entre series: 1,33% Exactitud: 98,9 de porcentaje
El reactivo está listo para su uso. The reagent is ready-to-use. Concentrations in Interseries Variation Coefficient: 1.33%
de recuperación.
Las concentraciones en la disolución reactiva son: the reagent solution are: Phosphate buffer pH Recovery: 98.9 %.
Tampón fosfato pH 6,8 100 mM 6.8 100 mM
Ac. p-Hidroxibenzoico 39,5 mM La Hemoglobina interfiere en el ensayo a partir de concentraciones de 200 mg/dl; p-Hydroxybenzoic acid 39.5 mM Interferences:
4-Aminoantipirina 0,8 mM la Bilirrubina a partir de 20 mg/dl; el Ac. Úrico a partir de 20 mg/dl y la 4-Aminoantipyrine 0.8 mM Haemoglobin, higher than 200 mg/dl Bilirubin,
Fenol 4,5 mM Creatinina a partir de 15 mg/dl. Phenol 4.5 mM higher than 20 mg/dl;
Glucosa Oxidasa ≥ 18 kU/L No se han descrito interferencias para los anticoagulantes de uso habitual como la Glucose Oxidase ≥ 18 kU/l Uric acid, higher than 20 mg/dl
Peroxidasa ≥ 1,1 kU/L Heparina, EDTA u Oxalato. Peroxidase ≥ 1.1 kU/l Creatinine, higher than 15 mg/dl.
EstabilizantesDisolución
Estándar: no reactivosacuosa equivalente a 100 mg de glucosa/dl. (5,55 PreservativesAqueous
Standard: and stabilizers
solution equivalent to 100 mg/dl (5.55 mmol/L).
mmol/L). Listo para su uso Interferences caused by the anticoagulants of current use such as Heparin, EDTA
Control de Calidad or Oxalate have not been described.
Seriscann Normal (Ref. 99 41 48) y Seriscann Anormal (Ref. 99 46 85). Storage and stability
Conservación y estabilidad The components of the kit, stored at 2-8ºC, will remain stable until the expiration
Los componentes del kit almacenados a 2-8º C, son estables hasta la fecha de date stated on the label. Quality control
caducidad indicada en la etiqueta. Autoanalizadores Seriscann Normal (Normal Control Serum) (Ref. 99 41 48) Seriscann
Adaptaciones a distintos analizadores automáticos, disponibles bajo demanda. Abnormal (Abnormal Control Serum) (Ref. 99 46 85).
Sample
Muestra Serum, plasma or C.S.F. Serum or plasma glucose (but not whole blood glucose,
Suero, plasma o L.C.R. La glucosa en suero o plasma (no así en sangre total, a Bibliografía due to glycolytic processes) can be stored during 2 - 3 days, when refrigerated at Autoanalyzers
causa de los fenómenos glucolíticos) se conserva como máximo 2-3 días a 2-8º C. Trinder, p. (1969). Ann Clin. Chem. 6, 24 – 27 2-8ºC. Technical bulletins for differents analyzers, are available upon request.

Técnica BL PR ST References
ml ml ml Procedure BL SA ST Trinder, P. (1969). Ann. Clin. Chem. 6, 24-27.
Standard --- --- 0,01 ml ml ml
Muestra --- 0,01 --- Standard --- --- 0.01
Reactivo de trabajo 1,00 1,00 1,00 Sample --- 0.01 ---
Working reagent 1.00 1.00 1.00

Mezclar e incubar a 37ºC 5 - 10 min. o 20-25 min. a 15 – 25ºC. Mix well and incubate 5 - 10 min. at 37ºC or 20-25 min. at 15 – 25ºC.
Lectura Reading
Longitud de onda: Hg 546 nm; 505 nm. Blanco: el contenido del tubo BL. Wavelength: Hg 546 nm; 505 nm. Blank: the contents of BL.
Estabilidad del color: un mínimo de 1 hora, al abrigo de la luz solar directa. Colour stability: a minimum of 1 hour, when protected from direct sunlight.
Cálculos Calculations
Abs. PR SA Abs.
x 100 = mg glucosa / dl x 100 = mg glucose / dl
Abs. ST ST Abs.
Unidades S.I. S.I. Units
(mg/dL x 0,0555 = mmol/L. (mg/dl) x 0.0555 = mmol/L
Valores normales Normal values
Suero, plasma: 75 - 115 mg/dl. Serum, plasma: 75 – 115 mg/dl
L.C.R.: 40 - 80 mg/dl. C.S.F.: 40 – 80 mg/dl

QUIMICA CLINICA APLICADA S.A.


Empresa Certificada ISO 9001 / ISO 13485 QUIMICA CLINICA APLICADA S.A.
A 7 Km 1081 – P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN Tel. + ISO 9001 / ISO 13485 Certified Company
+ 34 (977) 70. 62. 30 Fax ++ 34 (977) 70. 30. 40 A 7 Km 1081 – P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN Tel. +
Revisión: Octubre 2011 PRO4_REG9_GLUL + 34 (977) 70. 62. 30 Fax ++ 34 (977) 70. 30. 40
Revision: October 2011 PRO4_REG9_GLUL
GLUCOSE LIQUIDE
MÉTHODE GOD-POD
Pour la détermination in vitro du glucose dans le sérum ou le plasma

Principe
GOD
D- Glucose + H2O + O2 Acide gluconique + H2O2
POD
2 H2O2 + 4-amino-antipyrine + ac. p-hydroxybenzoïque Dérivé quinonique coloré + 4 H2O

Réactifs
Précautions d’emploi
Kit 1 x 100 ml (Réf. 99 82 25) Contenu:
Le réactif contient de l’azide de sodium à 0,09 %. Manipuler avec précaution.
A. 1 x 100 ml Réactif. Réf. 99 82 84
L’élimination des déchets doit être effectuée conformément aux normes en
B. 1 x 5 ml Étalon. Réf. 99 02 93
vigueur.
Kit 3 x 100 ml Réf. 99 82 82) Contenu:
Ne pas pipeter directement dans la bouteille de réactif afin d’éviter des
A. 3 x 100 ml Réactif. Réf. 99 82 84
contaminations indésirables.
B. 1 x 5 ml Étalon. Réf. 99 02 93
Kit 4 x 250 ml (Réf. 99 86 60) Contenu:
A. 4 x 250 ml Réactif. Réf. 99 01 68
Fonctionnement et caractéristiques de performance du dispositif.
B. 1 x 5 ml Étalon. Réf. 99 02 93
Linéalité: Jusqu’à 500 mg de glucose/dl. Pour des concentrations supérieures,
diluer l’échantillon au 1/2 avec une solution saline (NaCl 0,9
Réactif de travail %). Multiplier le résultat par 2.
Le fonctionnement du produit dépend tant du réactif que du système de lecture
Le réactif est prêt à l’emploi. manuel ou automatique utilisé. Une technique manuelle a permis d’obtenir les
Les concentrations dans la solution réactive sont les suivantes: données suivantes:
Tampon phosphate pH 6,8 100 mM
Ac. p-hydroxybenzoïque 39,5 mM Coefficient de variation dans la série: 0,79 % Coefficient de
4-amino-antipyrine 0,8 mM variation entre les séries: 1,33 %
Phénol 4,5 mM Exactitude: le pourcentage de récupération est de 98,9 %.
Glucose oxydase ≥ 18 kU/l
Peroxydase ≥ 1,1 kU/l L’hémoglobine (à partir de concentrations de 200 mg/dl), la bilirubine (à partir de
Stabilisants non réactifs 20 mg/dl), l’acide urique (à partir de 20 mg/dl) et la créatinine (à partir de 15
mg/dl) interfèrent avec l’essai.
Étalon: Solution aqueuse équivalente à 100 mg de glucose/dl (5,55 mmol/l). Prêt Aucun cas d’interférence n’a été rapporté avec les anticoagulants d’usage
à l’emploi. courant, tels que l’héparine, l’EDTA ou l’oxalate.

Conservation et stabilité Contrôle de qualité


Conservés à une température comprise entre 2 et 8 ºC, les composants du kit sont Seriscann normal (Réf. 99 41 48) et Seriscann anormal (Réf. 99 46 85).
stables jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette.

Analyseurs automatiques
Échantillon
Des adaptations à différents analyseurs automatiques sont disponibles sur
Sérum, plasma ou LCR. Le glucose se conserve pendant 2 à 3 jours maximum demande.
dans le sérum ou le plasma (mais pas dans le sang total, à cause des phénomènes
glycolytiques) à une température comprise entre 2 et 8 ºC.
Bibliographie
TechniqueBLESSAIÉT. Trinder, p. (1969). Ann Clin. Chem. 6, 24 – 27
mlmlml
Étalon------0,01
Échantillon---0,01--- Réactif de travail 1,001,001,00
Mélanger et incuber soit 5 à 10 minutes à 37 ºC soit 20 à 25 minutes entre 15 et 25 ºC.
Lecture
Longueur d’onde: Hg 546 nm; 505 nm. Blanc: le contenu du tube BL.
Stabilité de la coloration: 1 heure minimum à l’abri de la lumière solaire directe.
Calculs
DO ESSAI
x 100 = mg de glucose/dl
DO ÉTALON
Unités SI
(mg/dl) x 0,0555 = mmol/l
Valeurs normales
Sérum, plasma: 75 à 115 mg/dl.
LCR: 40 à 80 mg/dl.

QUIMICA CLINICA APLICADA S.A.


Entreprise certifiée ISO 9001 / ISO 13485
A 7 Km 1081 – P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN Tel. +
+ 34 (977) 70. 62. 30 Fax ++ 34 (977) 70. 30. 40
Révision: Octobre 2011 PRO4_REG9_GLUL

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