EXUDADO FARÍNGEO
A MANERA DE INTRODUCCIÓN
El exudado faríngeo esta indicado para la detección del
microorganismo involucrado en el proceso infeccioso de la
faringe superior.
Se debe tener en cuenta, que es una región altamente
colonizada por microorganismos que forman parte de la
biota normal de la faringe y amígdalas
El principal agente bacteriano a diagnosticar y/o descartar es
Streptococcus pyogenes
A CONSIDERAR
En cuadros clínicos que involucran la faringe:
a) 80% virus (herpes simple 1 y 2, Epstein-Barr, influenza A y B,
citomegalovirus) principalmente
b) 15% Streptococcus pyogenes
c) 5% Candida albicans, Staphylococcus aureus, y otras bacterias
OTROS ORGANISMOS INVOLUCRADOS
Haemophilus influenzae.
Corynebacterium diphtheriae.
Neisseria gonorrhoeae
Bordetella pertussis.
Streptococcus pneumoniae*.
Staphylococcus aureus*.
Neisseria sp.*
Moraxella catarrhalis.*
Veillonella sp.*
Corynebacterium xerosis.*
Haemophilus haemolyticus.*
Faringoamigdalitis por Estreptococo
Faringoamigdalitis de agente etiológico indeterminado
EXUDADO
FARINGEO
METODOLOGÍA
•Colectar la muestra en ayuno.
•Sin previo aseo de la boca.
•Remitirlo para la detección
principalmente de Streptococcus
pyogenes.
•Esta contraindicado cuando ya hay
antibioticoterapia, en caso de existir,
hacer esta observación al
laboratorio en la solicitud de estudio
Toma de muestra .
• MARCAR “LA ZONA DE DESCARGA” EN LAS CAJAS PETRI
• Pedir al paciente que abra la boca.
• Descender suavemente la lengua con el abatelenguas.
• Introducir el hisopo estéril hacia la faringe posterior.
• Pasar suave y rápidamente el hisopo arriba y abajo, por
detrás de la úvula y entre los pilares tonsilares. Sin tocar
otras regiones
• Rotando el hisopo varias veces sobre su eje.
• Una vez retirado el hisopo del paciente, trabajar alrededor
del mechero
Entregar las muestras al laboratorio
lo más rápido posible
En caso de no poder procesar la
muestra, colocar el hisopo en un
tubo con solución salina isotónica
estéril, o medio de transporte
adecuado
NUNCA CONGELAR
PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA
Habitualmente se trabaja con dos hisopos
Uno de ellos se va a frotis y tinción de Gram
El otro se usa en los medios de cultivo (en este caso se hará con
un mismo hisópo)
-agar sangre
-agar sal y manitol
-agar biggy
-agar chocolate (Neisseria)
Procesamiento final de la muestra .
• Hacer frotis para Gram
Procesamiento final de la muestra .
• Sellar las cajas petri
• Rotular adecuadamente
• Incubar a 37 ºC durante 24 h
• Interpretar resultados
• Reportar resultados al médico solicitante
RESULTADOS (ESPERADOS)
HEMÓLISIS EN AGAR SANGRE
• Alfa: Aclaramiento parcial de la sangre alrededor de las
colonias, con coloración verde del medio.
• Beta: Zona de aclaramiento completa de la sangre alrededor de
las colonias debido a la lisis de los eritrocitos.
• Gamma: No hay cambio en el medio que rodea a las colonias, no
hay lisis de eritrocitos.
Agar sangre
RESULTADOS (ESPERADOS)
Colonias
aisladas
Agar sangre
TIPOS DE HEMOLISIS
TIPOS DE HEMOLISIS
Agar Sal Manitol (rojo de fenol)
• Medio selectivo para la demostración de Estafilococos
• La concentración alta de sales permite solamente el
crecimiento de microorganismos como Staphylococcus
sp.
• El empleo del manitol y la producción de ácido, sirven
como indicadores de identificación de S. aureus
Agar Sal Manitol (rojo de fenol)
Agar chocolate.
• Su empleo permite el aislamientos adecuado de
Haemophilus influenzae y neiserias.
Agar BIGGY
Bismuth Glucose Glycine
Yeast
BISMUTO GLUCOSA
GLICINA Y LEVADURA
Permite el
reconocimiento de
Candida sp, mostrando
colonias de color café
Interpretación de resultados
Staphylococcus sp.
Género Staphylococcus 27 especies
6 especies de interés médico
S. aureus COAGULASA POSITIVA
S. epidermidis
S. haemolyticus
S. saprophyticus
S. lugdunensis
S. schleiferi
Cocos Gram +
Agrupación tipo “racimo de uvas”
Colonias convexas, semejan gotas redondas de pintura blanca
2-3 mm
Borde regular
en agar sal manitol crecen bien, solo S. aureus cambia el color a
amarillo
Coagulasa en plasma
Para diferenciar especies de
Staphylococcus
Solo S. aureus positivo
Enzima que confiere protección a la
bacteria, al crear redes de fibrina para
evitar la acción del mecanismo inmune
Estafilococos también pueden llegar a producir hemólisis en agar sangre
(aunque a veces no es tan evidente)
Al ser ambos cocos Gram+
Al ser capaces de producir hemólisis
Como diferenciarlas??
Con prueba de catalasa (enzima que rompe el peróxido de hidrógeno en
agua y oxígeno)
Se coloca una asada de la colonia
sospechosa en un portaobjetos, y se
agrega 1-2 gotas de H2O2 y se espera el
resultado
negativo positivo
Staphylococcus catalasa +
Streptococcus catalasa -
ESTREPTOCOCOS
El genero mas importante que se puede aislar en exudado faríngeo y en
agar sangre es Streptococcus
S. pyogenes
S. agalactiae
S. pneumoniae
Cocos en cadena
Gram +
Colonias 1.5 mm, translucidas,
tonalidad grisácea
S. pneumoniae (neumococo)
Se aprecia en forma de
diplococos
Se busca antes que cualquier organismo, la presencia y el tipo de
hemólisis
Pared celular dividida en tres capas,
la intermedia se denomina carbohidrato “C”, y su composición química es
específica de grupo
CLASIFICACIÓN DE LANCEFIELD
Sistema de clasificación basado en la serología del carbohidrato “C”
Existen grupos desde A hasta W (no existe I y J)
Clasificación de Brown (hemòlisis)
Se basa en la existencia y convivencia (o no) de dos estreptolisinas
Estreptolisina ”S” (aerobia)
Estreptolisina “O” (anaerobia)
Hemolisis beta
Estreptolisina “S” se activa con O2 efectuando
hemolisis en la superficie de la placa. Al fondo la
estreptolisina “O” se activa por ausencia de
oxígeno (anaerobiosis) y degrada todos los
eritrocitos del fondo, dando como resultado
hemolisis total
Hemolisis alfa, solo presenta estreptolisina “S”,
por lo que degrada solo los eritrocitos de la
superficie, se presenta coloración verde en la
superficie
Coloquialmente se suele referir a los alfa
hemolíticos como pertenecientes al grupo
“VIRIDANS”
RELACION ENTRE ESPECIE, GRUPO DE LANCEFIELD Y TIPO DE HEMÓLISIS
S. pneumoniae (neumococo)
Se aprecia en forma de diplococos,
No se clasifica dentro de los grupos de Lancefield y
Brown
Produce un fenómeno similar a la alfa hemólisis, pero es
por acción de una “neumolisina” y aunque produce
coloración verde, no se considera del grupo “VIRIDANS”
Pruebas de identificación (diferenciación) de estreptococos
Sensibilidad a bacitracina (0.02-0.04
mg/ml)
El grupo A de Lancefield es sensible
a bacitracina a esta concentración, y
no crece. Permite diferenciar EBHA
de otros EBH
S. pyogenes no crece S. agalactiae si
+ no crece
- Si crece
Pruebas de identificación (diferenciación) de estreptococos
Prueba CAMP (Christie,
Atkins, Munch-Petersen)
EBHB produce un péptido
que agudiza la hemólisis de
S. aureus haciéndola mas
evidente en la cercania de
ambas colonias, en forma de
“punta de flecha”
Prueba de identificación de Streptococcus pneumoniae
A pesar de parecer a hemolítico, no se clasifica como tal, por lo que
tampoco se considera “Viridans)
Ésta especie no desarrolla en presencia de optoquina 5 U (mg/ml)
Si no hay desarrollo, la prueba se considera positiva
Identificación de Neisserias
N. gonorrhoeae
N. meningitidis Colonias 1-2 mm
N. catarrhalis (Moraxella catarrhalis) Grises
Convexas
Bordes regulares
Prueba de oxidasa
Posee una citocromo
oxidasa capaz de oxidar
diferentes sustancias
Positiva cuando despues de 3-4 minutos la colonia “problema” se torna oscura
Si se observan diplococos Gram- y reacción positiva a oxidasa, sin duda será
Neisseria sp.
Medios, crecimiento positivo o negativo, en caso de positivos, describir
características, cambio de color,
Descripción macroscópica (morfología colonial) y microscópica de los
cultivos (tinción de Gram, forma y agrupamiento.
Hacer prueba de catalasa a las colonias
Observar demostrativas de coagulasa y describir o dibujar
