Instituto Politécnico Nacional
Escuela Nacional de Ciencia Biológicas
Cuestionario. Práctica 1. Transporte de glucosa en
levaduras
Integrantes:
• Gutierrez Galicia Raisa Daney
• Hernández López Samuel Equipo 4/5QM1
• Hernández Pérez Dulce Abigail
• Luis Becerra Fernanda Marina
¿Cuál es el mecanismo de acción del Arsénico (a nivel de glicólisis) y del cianuro? ¿Ayudaría el empleo
de estas sustancias a dilucidar el mecanismo de transporte de un soluto en los organismos y como?
• El arsénico bloquea la capacidad de
formar ATP en la fosforilación a nivel
de sustrato, en la reacción catalizada
por la glucosa 3-fosfato
deshidrogenasa en la glucólisis
sustituyendo al grupo fosfato.
Esquema de la incorporación del arseniato en la
glucólisis
• Cianuro
Bloquea el transporte de electrones
McKee, T., McKee, J. R., Araiza Martínez, M. E., & Hurtado Chong, A. (2014). Bioquímica: Las bases moleculares de la vida. McGraw-Hill
¿Cuál es el mecanismo de acción del Fluoruro y de N-Etilmaleimida? ¿Ayudaría el empleo de estas
sustancias a dilucidar el mecanismo de transporte de un soluto en los organismos y cómo?
El fluoruro tiene intervención en reacción de conversión del 2-fisfoglicerato a fosfoenolpiruvato,
que es catalizada por la enzima enolasa, esa enzima cuenta con como cofactor al magnesio.
Como resultado de la intervención del fluoruro en
el sistema fosfotransferasa (PTS) no se puede
fosforilar a la glucosa y esta no podrá entrar en
forma de glucosa-6-fosfato.
Verhelst, J. et al. (2015)
Objetivo
Estudiar el mecanismo de transporte que utiliza
general:
Saccharomyces cerevisiae para la degradación de
glucosa.
OBJETIVOS Objetivos
particulares:
Con el método del DNS elaborar una curva tipo de
glucosa
Identificar que efecto tiene el DNS sobre el transporte
de glucosa en la levadura Saccharomyces cerevisiae
En función de tiempo analizar el transporte de
glucosa en Saccharomyces cerevisiae
PROTOCOLO
EXPERIMENTAL
Transporte de glucosa
20 minutos
Preincubar células y glucosa Agregar 6 mL de agua Agregar 4 mL de suspensión
por separado destilada celular
4°C x 30 minutos
Mantener en baño de hielo Agregar 10 mL de glucosa
20 minutos
Agregar 6 mL de agua Agregar 4 mL de suspensión Preincubar a Agregar 10 mL de
destilada celular temperatura ambiente glucosa
20 minutos
Agregar 6 mL de DNF Agregar 4 mL de suspensión Preincubar a Agregar 10 mL de
celular temperatura ambiente glucosa
20 minutos
Agregar 6 mL de NEM Agregar 4 mL de suspensión Preincubar a Agregar 10 mL de
celular temperatura ambiente glucosa
20 minutos
Agregar 16 mL de agua Agregar 4 mL de suspensión Preincubar a
destilada celular temperatura ambiente
Toma de alícuotas y obtención del sobrenadante
1 mL NaOH 0.5 N c/u Alícuotas 2 mL
Alícuotas 1.5 mL
• Explica del protocolo experimental la parte de la determinación de glucosa residual y explica
cómo se calcula el volumen de la alícuota para realizar la determinación. Describe el fundamento
de la determinación de azúcares por el método del DNS.
Reacción general oxidación de
azúcares reductores, método DNS.
Rajbhar, K., Dawda, H., & Mukundan, U. (2016). Quantitative spectrophotometric estimation of specific monosaccharides by DNSA method. IJRDO - Journal of Biological Science (ISSN: 2455-
7676), 2(1), 112-126. Retrieved from https://www.ijrdo.org/index.php/bs/article/view/1592
Referencias bibliograficas
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• Berg, University Jeremy M, Tymoczko, University John L, Jr, G. G. J., & Stryer, L. (2015). Biochemistry (8th ed.). W. H.
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• Escobar Rojas Alfonso (2017) ENFERMEDADES DE ORIGEN DENTO-BACTERIANO. DISTRIBUCIÓN DEL FLUORURO EN
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