APUNTES ANALÍTICA

TEMA 8, 9 Y 10 - ESPECTROSCOPÍAS

LIMITACIONES DE LA LEY DE LAMBERT BEER

 La concentración: Sólo es aplicable a disoluciones diluidas (menor 10-2
M). 
 La interacción no adsortiva entre el soluto y la radiación, que produce
alteraciones en la intensidad de la luz (dispersión, reflexión,
fluorescencia, etc). 
 Utilización de radiación no monocromática 
 Falta de uniformidad de la muestra o presencia de impurezas. 
 Desviaciones químicas: ej. Descomposición del dicromato, reacciones
del absorbente con el disolvente

ABSORCIÓN MOLECULAR UV-VIS 

Fundamento
Cuando una molécula absorbe radiación de la zona UV-Vis lo hace en forma de
unas bandas de absorción que se corresponden a diferentes transiciones
electrónicas de sus electrones externos (n→π*, π→π* normalmente,  n ,  *
menos comúnmente). Las transiciones pueden ser:
 Vibracionales
 Rotacionales
 Electrónicas

Instrumentación:

 Fotómetros: emplean filtros ópticos para obtener luz monocromática.

Ventajas:
Sencillos 
Robustos 
Portátiles 
Fáciles de mantener 
Fáciles de utilizar

Desventajas:
Poca versatilidad 
Incapacidad para generar espectros completos 
Mayores anchuras de banda efectiva

 Espectrofotómetro: emplean monocromadores (prismas, rejillas) para

obtener luz monocromática. 

o Tubo fotomultiplicador: convierte la luz detectada en un pulso

eléctrico
1. Un cátodo fotosensible convierte los fotones en fotoelectrones  
2. Se aceleran por un campo eléctrico hacia un electrodo (dínodo) 
3. Cada electrón arranca un número de electrones secundarios . 
4. Los electrones son multiplicados por una serie sucesiva de dínodos 
5. Amplificación de 107-1010 proporciona una señal de salida adecuada 
6. La magnitud de la señal es proporcional a la intensidad de la luz
incidente

Ventajas:
Versátiles  
Espectros completos 
Sensibles y precisos 
Buena exactitud y selectividad moderada/alta
Robustos 
Bandas efectivas estrechas 
Computarizados
Desventajas:
Más complejos y costosos 
Usuario especializado 
No son portátiles

Absorción en compuestos orgánicos

Aplicaciones:

 Cuantitativas (técnica más empleada para análisis cuantitativo):

o Análisis de mezclas: 
 O bien porque el analito absorba o porque se pueda
derivatizar a una especie que sí lo haga (método directo).  
 Las absorbancias de diferentes especies son aditivas.
o Valoraciones espectrofotométricas.
o Cálculo de constantes de equilibrio.
 Cualitativas:
o Identificación.
o Control de purezas.
o Asignación de estructuras de compuestos orgánicos.

ABSORCIÓN MOLECULAR IR 

Fundamento

Radiación IR: Provoca transiciones entre niveles vibracionales y rotacionales

de la molécula en estado fundamental. Es una técnica muy eficaz para
identificar compuestos orgánicos e inorgánicos. Los espectros IR tienen picos
de absorción estrechos, que son característicos de transiciones a niveles
cuánticos vibracionales.

Instrumentación

Tipos de instrumentos:

 Espectrofotómetros dispersivos

Características: Se usan para obtener espectros completos para análisis

cualitativo y cuantitativo. Tienen  un diseño muy similar a los
espectrofotómetros UV-Vis de doble haz. 
 Pasos: La radiación se dispersa en las longitudes de onda que la
componen mediante una red o prisma. Las fuentes de IR son sólidos
calientes, ya que los detectores de IR responden al calor (NO a los
fotones)

 Espectrofotómetros con transformada de Fourier (FTIR)

Características: No es dispersivo (no emplea red o prisma para dispersar

la radiación en las longitudes de onda que la componen). Se usan para
obtener espectros completos para análisis cualitativo y cuantitativo.
Tiene una sensibilidad muy alta, gran resolución y rapidez de datos
(menos de 1 segundo), no tienen elementos de dispersión (se detectan y
miden todas las longitudes de onda de forma simultánea con un
interferómetro) y la decodificación se realiza mediante la transformada
de Fourier.

Pasos: El haz de IR se divide en dos en el cortador de haz, los dos

haces se reflejan en los espejos (fijo y móvil) y se recombinan, el nuevo
haz recombinando pasa por la muestra (detectándose como
interferograma), se procesa con la transformada de Fourier y se genera
el espectro.

 Fotómetros de filtros 

No es dispersivo (no emplea red o prisma para dispersar la radiación en

las longitudes de onda que la componen).  Están diseñados para el
análisis cuantitativo.

Aplicaciones:

Análisis cualitativo: salen espectros sencillos, muy específicos y útiles para la

identificación de grupos funcionales.

Análisis cuantitativo: es más complejo que el UV-Visible, se utilizan bandas

específicas del compuesto en el espectro de una mezcla, necesario establecer
líneas base para esas bandas, y  para muestras sólidas se usa un patrón
interno en igual cantidad para patrones y muestras.
FLUORESCENCIA Y FOSFORESCENCIA MOLECULAR 
LUMINISCENCIA:  proceso de emisión de radiación como consecuencia de la
desactivación de una molécula que se encuentra en un estado excitado de
energía.
La emisión de vida corta que ocurre se llama fluorescencia , mientras la
luminiscencia que dura mas tiempo se denomina fosforescencia.
Fundamento
Primero tiene lugar el proceso de excitación, el cual tienen lugar en un tiempo
de 10 s. y posteriormente tiene lugar la emisión que puede darse como:
-15

proceso no radiante (10 -10 s); o proceso radiante (10 s- min)

-11 -9 -10

Dentro de la relajación radiante, tenemos la fluorescencia y la fosforescencia.

Es la perdida del exceso de energía en forma de fotones. La molécula debe
tener una estructura adecuada para captar la energía necesaria para excitarse
y originar emisión luminiscente.

Instrumentación:

Características:
Aplicaciones:

ABSORCIÓN ATÓMICA UV-VIS 

Fundamento

La espectroscopía de absorción atómica es una técnica analítica basada en

la absorción de la radiación electromagnética a una longitud de onda
determinada por átomos que tengan niveles energéticos cuantizados

-Es una técnica sensible para la determinación de 70 elementos metálicos con

líneas de absorción en la zona UV-VIS

-No se pueden determinar elementos no metálicos porque sus líneas de

resonancia caen en el ultravioleta lejano

-Algunos elementos no metálicos se pueden determinar indirectamente

determinando un componente formado (derivatización)
Instrumentación: mismos componentes básicos que un espectrofotómetro de
absorción molecular. Las diferencias en los espectrofotómetros radican en la
fuente y la celda de muestra

Fuente luminosa – cortador de haz – nebulizador, llama, cámara de muestra –

monocromador – detector

*una lámpara de cátodo hueco no se utiliza en emisión porque genera una

línea generalista de excitación

1) fuentes de radiación: no son fuentes continuas, sino que producen emisiones

de luz en líneas discretas atómicas características del elemento a analizar:
lámparas de cátodo hueco (HCL) y lámparas de descarga sin electrodos (EDL)
(lámparas en absorción atómica)

Lámpara de descarga de cátodo hueco (HCL) (la más utilizada). Etapas:

1) ionización

2) pulverización catódica: colisión con electrodo donde está la sal del metal

3) excitación

4) emisión (luz)

Lámpara de descarga sin electrodos (EDL) Ar. Ionizo el gas noble, lo excito,
se arranca un átomo del compuesto que quiero determinar y este se excita
mediante radiofrecuencia. Estas lámparas emiten radiaciones más intensas (1
o 2 órdenes de magnitud mayor intensidad que HCL), son más precisas y
presentan menores límites de detección

Amplio uso, sobre todo para elementos volátiles cuyas lámparas de cátodo
hueco tienen un tiempo de vida corto (metales alcalinos, As, Sb, Se, Sn, Pb,
etc)

2) modulación de la fuente (transformación de señal continua en señal alterna

para evitar la interferencia debida a la emisión procedente de los átomos del
propio analito)

3) sistema de atomización*

La atomización es el proceso con el que los componentes de una molécula se

convierten, por descomposición, en átomos gaseosos libres. La función del
sistema de atomización es generar átomos en estado fundamental en el paso
óptico del espectrofotómetro

Método Tipo de muestra

Atomización de llama Disolución o suspensión

Atomización electrotérmica (cámara / hornos de Sólido, líquido, disolución

grafito)

Otros sistemas:  

Generación de hidruros Disolución de ciertos

elementos

Atomización por descarga luminiscente Sólido, polvo

Atomización en vapor frío Solo Hg

3*) atomización de llama

La llama es un sistema de atomización donde la disolución de la muestra se

nebuliza mediante un caudal de gas oxidante, mezclado con el combustible, y
se transporta a la llama. La energía térmica de la llama provoca la atomización
de la muestra

Constituido por tres componentes principales

(1) nebulizador (se da la nebulización en una perla, esfera de impacto)

(2) cámara de premezcla

(3) mechero (de flujo laminar o de premezcla – ESQUEMA)

procesos en el atomizador (etapas)

Disolución de analito

0) nebulización: perla, una niebla que se mezcla con el carburante

1) desolvatación: se elimina el disolvente y se forma un aerosol sólido de la
muestra

2) vaporización / volatilización: el aerosol pasa a ser un gas atómico (H2O +

CO2) (moléculas gaseosas)

3) disociación (reversible): gas molecular – gas atómico

4) ionización (reversible): elementos (algunos de no interés) se ionizan con

bajas Ei y se eliminan

5) excitación

 3*) tipos de llama y características básicas

La temperatura de la llama es su característica más importante y depende de la

naturaleza del combustible y del oxidante

-A T de 1700-2400 ºC, alcanzadas utilizando aire como oxidante, solo se

excitan los metales alcalinos y alcalinotérreos

-Para los metales pesados se debe emplear oxígeno u óxido nitroso como
oxidantes

ejemplo: aire - acetileno

ESQUEMA ZONA DE LA LLAMA

1) zona del precalentamiento: T baja, zona de no interés analítico

2) zona primaria de reacción: muy energética

3) zona interconal: zona intermedia, sí de interés analítico

4) zona de difusión: T baja, la zona más alejada de burner head

3*) características generales de los sistemas de atomización

AA CON LLAMA (arriba está definido con más detalle)

Ventajas Limitaciones

simple Baja eficiencia de nebulización (<10%)

Versátil Sensibilidad limitada (orden mg/L)

 Bajo coste Consumo de muestra > 5 mL

Elevada Bloqueo del nebulizador con determinados tipos de

reproducibilidad muestra

Amplio intervalo de  
linear

CÁMARA DE GRAFITO: se introduce un volumen de muestra de 5-50 μL

aprox

Existe una etapa de secado (T aprox 100 ºC) de calcinación de la materia

orgánica. Atomización y los carbohidratos pasan a CO2 y H2O

Rampa de T programadas en una cámara de grafito

-Secado: 100 ºC

-Calcinación: (1200 º C aprox y la materia orgánica se transforma en CO2 +

H2O)

-Atomización: 2300 ºC

Ventajas:

-Muy poca pérdida de muestra

-Se pueden medir sólidos (algo que no se puede hacer con llama)

-Eficiencia en generar vapor atómico

-Muestras sólidas

Desventajas: es muy irreproducible porque se ensucia mucho

GENERACIÓN DE HIDRUROS: para As, Sb, Sn, Se, Bi, Pb

Esquema funcionamiento (gas inerte NaBH4 / cámara de cuarzo 800 ºC)

Desventajas: uso limitado

Aplicaciones analíticas EAA

-La espectroscopía de absorción atómica presenta escasas interferencias de
tipo espectral y muy pocas de otra naturaleza, por lo que no suele requerir
separaciones previas

-Proporciona una buena sensibilidad y exactitud

-No utilizable en análisis cualitativo (pura definición), porque ya sabemos lo

que estamos midiendo (las lámparas son selectivas al elemento a analizar) 

Aspectos cuantitativos EAA

-La absorción atómica sigue la Ley de Lambert-Beer (fórmulas, Kv etc)

-Para la sensibilidad, no interesa que los átomos estén cargados porque han
perdido al electrón

-Debemos controlar bien el sistema de atomización: control sobre la

temperatura (si es muy alta, todo mal)

HAY INTERFERENCIAS: físicas, químicas, de ionización (que se dan en el

atomizador) y espectrales (de línea atómica o de banda molecu lar)

EMISIÓN ATÓMICA UV-VIS 

La emisión atómica se basa en medir la radiación emitida por los átomos de la

muestra que antes habremos excitado. Hay que saber que cada elementos
posee un espectro de emisión característico que utilizaremos para identificar
los átomos.

para excitar los átomos, esta excitación puede proceder de distintas fuentes,
dando de esta forma lugar a diferentes técnicas:
 llama
  fuentes de elevada energía

LLAMA
como ya hemos comentado, se basa en medir la radiación de los átomos
excitados, sobre todo alcalinos y alcalinotérreos. los fotómetros utilizados son
mas simples, la llama es de baja temperatura (aprx 2200K) y tiene filtros de
absorción o de interferencia para aislar la linea de emisión deseada.

Se producen interferencias que hay que tener en cuenta

Químicas: igual que en abs atómica, se soluciona seleccionando la
temperatura de llama adecuada, y utilizando agentes liberadores o
modificadores de matriz que reaccionan con lo que interfiere para poder dejar
libre el analito
Espectrales: se produce superposición de líneas espectrales de otros átomos ,
en este caso esta interferencia tiene mayor probabilidad que en absorción
atómica
Para solucionarlo se debe aumentar la resolución del monocromador para
permitir solo la línea de emisión deseada, haciendo una separación previa, 
seleccionando las otras líneas espectrales en las que no haya interferencias,
corrigiendo el fondo de la banda de emisión y utilizando el método de línea
base, para lo que se barre lentamente la región de longitudes de onda de
interés unos nm antes y después del pico del analito y restando la altura del
fondo a la altura total del pico.
Autoabsorción: ocurre cuando el centro de la llama se calienta más que el
resto, entonces los átomos emitidos están rodeados por átomos no excitados
Autoinversión: es un caso externo de autoabsorción, la intensidad de la
radiación emitida en el centro de la línea puede ser menor (se absorbe de
forma muy eficiente) que en los bordes de la línea, solución: disminuir la
concentración del analito
de ionización: aparecen cuando un átomo excitado pierde un electrón
convirtiéndose en un átomo ionizado , se soluciona añadiendo elementos más
ionizables que liberen una gran concentración de electrones libres en la
llamada y desplace el equilibrio hacia la excitación

FUENTES DE ELEVADA ENERGÍA

ventajas: se puede hacer análisis multielemental a la vez, se pueden
determinar elementos refractario e incluso no metales y tiene un intervalo de
aplicación de varios órdenes de magnitud

desventajas: mas caros, personal mas especializado y peor precision 

de plasma: mayor reproducibilidad de las condiciones atomizadas y mayor

precisión. Es un gas caliente y parcialmente ionizado que tiene una
concentración suficiente de cationes y electrones que hacen que sea
conductor. Puede alcanzar una temperatura de hasta 10000K cuando los iones
se constituyen en un plasma son capaces de absorben suficiente potencia de la
fuente para mantener la temperatura 

de arco y chispa: atomización de muestras solidas sin necesidad de disolver

COMPARACIONES
 Técnicas espectroscópicas atómicas y moleculares en general
Similitudes
1. Usan monocromadores para escoger la longitud de onda 
2. Usan detectores fotónicos para determinar la intensidad de la
radiación 
3. Usan un recipiente para alojar la muestra
Diferencias

 Absorción molecular UV-vis y absorción molecular IR (nuria)

Similitudes

1. Emplean la Ley de Lambert-Beer

2. Usan espectrofotómetros y fotómetros
3. Ambas se pueden emplear para análisis cuantitativo y cualitativo

Diferencias

Absorción molecular UV-vis Absorción molecular IR

1. Transiciones entre niveles 1. Transiciones entre niveles

rotacionales, vibracionales y rotacionales y vibracionales.
electrónicos. 2. Análisis cuantitativo más
2. Análisis cuantitativo sencillo complejo (no muy útil) 
(técnica más empleada)

 Absorción atómica UV-Vis y emisión atómica (carlota)

Similitudes
Diferencias
 Absorción atómica UV-vis y absorción molecular UV-vis (marina)
Similitudes
1. Existe una relación lineal entre la absorbancia y la concentración
2. Usan monocromadores para escoger la longitud de onda 
3. Usan detectores fotónicos para determinar la intensidad de la
radiación (tubo fotomultiplicador)
Diferencias

3. Fuente de radiación de líneas 3. Fuente de radiación continua

(diferenciar señal de la llama) 4. Registramos bandas de
4. Registramos líneas de absorción absorción
5. Tránsitos electrónicos 5. Tránsitos electrónicos,
6. NO se puede emplear para análisis vibracionales y rotacionales.
cualitativo 6. SÍ se puede emplear para
7. Tenemos una etapa extra de análisis cualitativo
atomización 7. No se da la atomización

 Fluorescencia molecular y emisión atómica (celia )

 TEMA 11-  ELECTROQUÍMICA

TÉCNICAS ELECTROQUÍMICAS 

FUNDAMENTO DE LOS MÉTODOS POTENCIOMÉTRICOS 

Las técnicas electroquímicas de análisis se basan en las propiedades eléctricas
que poseen los analitos cuando se encuentran en disolución. En estas
técnicas, la muestra forma parte de un circuito eléctrico y se mide la variación
de alguno de los parámetros básicos: potencial eléctrico, intensidad de
corriente y resistencia
Las reacciones electroquímicas pueden darse en lo que se denomina una celda
electroquímica, donde se produce el fenómeno de la electrolisis • Las células
electroquímicas pueden ser de dos tipos: galvánicas o electrolíticas. • Para
describir una celda electroquímica se usa una notación esquemática abreviada

Cuando las actividades de las especies electroactivas no son iguales a 1 M, los

potenciales de electrodo ya no son los potenciales normales, y se calculan
recurriendo a la expresión simplificada de la Ley de Nernst:

CLASIFICACIÓN POTENCIOMETRÍA 

Hay dos tipos de modalidad de potenciometría:

 Potenciometría directa: se determina la actividad a través de la medida
del potencial eléctrico (se mide directamente, de ahí el nombre).
 Valoración potenciométrica: localiza el punto final de una valoración
analítica.

TIPOS DE ELECTRODOS Y EJEMPLOS

ELECTRODOS DE REFERENCIA

1) Electrodos de hidrógeno (0,00 V)

Electrodo de referencia por excelencia. En la práctica no se usa, aunque los

potenciales de los demás electrodos se fijan con respecto al potencial del
electrodo normal de hidrógeno (electrodo normal / estándar de hidrógeno NHE,
SHE)

2) Electrodo de calomelanos saturados

Su potencial depende de la concentración de KCl, por lo que suelen usarse

saturados en esta sal, llamándose electrodos ECS. Utilizable solo a
temperaturas inferiores a 70 ºC

3) Electrodo de plata / cloruro de plata

Su potencial depende de la concentración de KCl, por lo que suelen usarse

saturados en esta sal. A T = 25 ºC E (saturado con KCl) = +0,197 V

ELECTRODOS INDICADORES (de trabajo)

Los electrodos indicadores responden rápida y reproduciblemente a los

cambios en la concentración de un único ion sin analito o grupo de iones. Se
usan en combinación con el electrodo de referencia. Los electrodos indicadores
generan un potencial en función de la concentración del analito y deben ser
rápidos y reproducibles. Tipos:

1) Electrodos metálicos: primera, segunda y tercera especie 

2) Electrodos de membrana / electrodos selectivos de iones: son medios

de medición casi ideales debido a su aptitud para vigilar selectivamente la
actividad de ciertos iones en disolución de forma continua y no destructiva

Características electrodos de membrana:

-No intervienen en reacciones redox

-Responden selectivamente a una especie presente en la disolución

-Tienen una delgada membrana que separa la muestra y el interior del

electrodo
-La parte interna del electrodo contiene una disolución del ion de interés con
actividad constante

-La parte externa está en contacto con una muestra de composición variable

-La diferencia de potencial a través de la membrana depende de la diferencia

en la actividad de la especie del analito entre la disolución interna y la muestra

Mecanismo electrodos de membrana

-Inicialmente, la diferencia de potencial a través de la membrana es nula debido

a que las dos disoluciones son eléctricamente neutras

-Los iones presentes del lado donde hay mayor concentración tienden a
difundir hacia el lado donde hay menor concentración

-La diferencia de potencial es constante entre los dos lados de la membrana

Ventajas: amplio intervalo lineal, no destruyen la muestra y respuesta rápida 

Inconvenientes: fácil contaminación, frágiles, duración limitada

3 tipos de membrana:

a) electrodos de membrana cristalina

-Cristal iónico (ej: fluoruros, LaF3 dopado con Eu2+)

-Policristalinos (sales de Ag+)

-Son selectivos (aniones)

b) electrodos de membrana no cristalina (líquida). Elemento sensible con

fina membrana de vidrio, líquido hidrofóbico. 

c) electrodos sensibles a moléculas

-Gases: O2, CO2, cte

-Enzimas electroquímicamente activas

Electrodo de membrana selectivo a fluoruro*!: migración de F- a través de

LaF3 dopado con EuF2. VACANTES
El LaF3 es un conductor natural y su conductividad se puede exaltar dopándole
con fluoruro de europio EuF2

Las membranas se preparan cortando discos de un único cristal del compuesto

dopado

3) Electrodos de vidrio combinados para pH (Na+, Li+, NH4+)

La parte del electrodo que responde a las variaciones de pH es la delgada

membrana de vidrio, ubicada en el extremo del dispositivo

Reacción de intercambio iónico en la capa de hidratación

Incluye a un electrodo de referencia interno

El mecanismo de funcionamiento del electrodo de vidrio es similar a otros

electrodos selectivos de iones, excepto que la especie que emigra a través de
la membrana no es la misma que la cantidad que la que queda adsorbida
selectivamente sobre cada cara de la membrana.

Se mide la diferencia de potencial creada a ambos lados de la membrana. La

diferencia de potencial se origina por el desplazamiento de cargas

Componentes de la notación en electrodos de vidrio:

-EAg/AgCl: potencial del electrodo de referencia interno : constante

-EECS: potencial del electrodo de referencia externo : constante

-Eu: potencial de unión líquida

-EL: potencial límite, el más importante porque varía con el pH de la solución

del analito 

-Easim: potencial de asimetría