HISTOLOGÍA ANIMAL
TECNICATURA EN HIGIENE Y SALUD ANIMAL
PROFESORA: M.V MARÍA EUGENIA PAZ
CONDICIONES DE REGULARIDAD/
PROMOCION
• REGULARIDAD:
• Asistencia de 80% a clases Teóricas y asistencia al
90% a clases Teóricas/Practicas
• Aprobar los exámenes escritos o sus recuperatorios
con %60 o mas
• PROMOCION:
• Asistencia de 80% a clases Teóricas y asistencia al
90% a clases Teóricas/Practicas
• APROBAR LOS EXAMENES O SUS RECUPERATORIOS
CON UNA NOTA IGUAL O SUPERIOR AL 80%.
INTRODUCCIÓN
Histología es la rama de la anatomía que estudia los
tejidos de animales y plantas. En su aspecto más
amplio, la palabra histología se emplea como
sinónimo de anatomía microscópica. Su materia no
sólo incluye la estructura microscópica de los tejidos
sino también como funcionan la célula, órganos y
sistemas.
MICROSCOPIA DE LUZ
Preparación de los tejidos
Los pasos necesarios para la preparación de tejidos para microscopia de luz incluyen
a) fijación, b) deshidratación y aclaramiento, c) inclusión, d) corte y e) montaje y
tinción de los cortes.
Se han desarrollado diversas técnicas para preparar los tejidos con el
fin de estudiarlos, de tal manera que semejen cuanto más su estado
natural en vivo. Las etapas incluidas son fijación , deshidratación y
aclaramiento, inclusión en un medio estable, sección en cortes
delgados para poderlos observar mediante transiluminación, montaje
en una superficie para facilitar su manipulación y tinción para
diferenciar los diversos componentes tisulares y celulares.
Preparación de los tejidos
Fijación
La fijación se refiere al tratamiento del tejido con sustancias químicas que no sólo retardan
las alteraciones tisulares subsecuentes a la muerte (o después de su remoción del
organismo) sino que también conservan su configuración normal. Los agentes para
fijación usados son formalina amortiguada y fijador de Bouin. Estas dos sustancias
conservan una imagen del tejido similar al vivo.
Deshidratación y aclaramiento
Debido a que una gran parte del tejido está constituida por agua, se aplica una serie
gradual de baños de alcohol iniciando con alcohol al 50% y alcanzando de manera
paulatina el alcohol al 100% para eliminar el agua (deshidratación). A continuación, el
tejido se trata con xileno. Este proceso se conoce como aclaramiento, ya que el tejido se
torna transparente en xileno.
Inclusión
Con objeto de distinguir entre sí las células superpuestas en un tejido y la matriz
extracelular, el histólogo debe incluir los tejidos en un medio apropiado y a continuación
seccionarlos en cortes delgados.
Para la microscopia de luz, el medio habitual de inclusión es la parafina. Se coloca el
tejido en un recipiente adecuado con parafina fundida hasta que se infiltra por completo.
Una vez que se impregna el tejido con parafina, se coloca en un receptáculo pequeño,
recubierto con parafina fundida y se deja endurecer para formar un bloque de parafina que
incluya al tejido.
Sección
Esta labor se lleva a cabo mediante un micrótomo, un aparato equipado con una hoja y un
brazo que desciende en el bloque de tejido. También es posible efectuar los cortes en
especímenes congelados. Los cortes se colocan en portaobjetos de vidrio previamente
enfriados, se permite que alcancen la temperatura ambiente y se tiñen después con
colorantes específicos (o se tratan para estudios histoquímicos o inmunocitoquímicos ).
Montaje y tinción
Los cortes de parafina se montan (colocan) en portaobjetos de vidrio y a continuación se
tiñen mediante colorantes hidrosolubles que permiten diferenciar los diversos componentes
celulares.
Los cortes para microscopía de luz convencional, se montan en portaobjetos de vidrio
recubiertos con un adhesivo. La tinción para microscopia de luz se lleva a cabo con
colorantes hidrosolubles, es necesario eliminar la parafina del corte, después de lo cual se
rehidrata y tiñe el tejido. Una vez teñido, pueda fijarse de modo permanente el cubreobjetos
con un medio adecuado para montaje.
El cubreobjetos no sólo protege el tejido de algún daño sino que también se requiere para
observar el corte con el microscopio.
Aunque existen varios tipos de colorantes para observar los múltiples componentes
de células y tejidos, pueden agruparse en tres clases:
• Colorantes que diferencian los componentes ácidos y básicos de la célula.
• Colorantes especializados que distinguen los componentes fibrosos de la matriz
extracelular
• Sales metálicas que se precipitan en los tejidos y forman depósitos de metales en
ellos
Tinción tricromica de Masson.
Tejido conectivo- Tendón.
Tinción Hematoxilina-Eosina
Epitelio cilíndrico simpe
Los colorantes empleados con más frecuencia en histología son
Hematoxilina y Eosina (H y E)
La Hematoxilina es una base que tiñe de La Eosina es un ácido que tiñe los
manera preferencial los componentes componentes básicos de la célula de
ácidos de la célula. Puesto que casi todos color rosado. Debido a que muchos
los componentes ácidos son DNA y RNA, constituyentes del citoplasma tienen un
el núcleo y las regiones del citoplasma pH básico, las regiones del citoplasma
ricas en ribosoma se tiñen de color azul se tiñen de color rosa; se dice que estos
oscuro; estos elementos se denominan elementos son acidófilos.
basófilos.
1. FIJACION CON FORMOL
2. DESHIDRATACION CON ALCOHOL
4. INCLUSION EN PARAFINA
3. ACLARAMIENTO 5. SECCIÓN
Micrótomo
6. MONTAJE EN PORTAOBJETOS
7. ELIMINACION DE PARAFINA
9. TRABAJO TERMINADO
8. TINCION CON H.E
TECNICAS HEMATOLOGICAS
Frotis sanguíneo
Al ser la sangre un líquido, se hace imposible la elaboración de un corte
histológico para observar la morfología de las células.
Es por eso que se recurre a la realización de un frotis sanguíneo.
Se usan colorantes especiales para destacar los componentes celulares y
así diferenciarlos
DESCRIPCIÓN DE LA TÉCNICA
Luego de realizar el frotis
se somete a un proceso
de fijación y tinción.
La tinción mas usada es
la de May Grunwald-
Giemsa ya que destaca
las granulaciones
leucocitarias y mejora
la coloración de los GR.
El frotis ideal debe estar
comprendido de estas
áreas para una mejor
observación
TINCIÓN MAY GRUNWALD GIEMSA
COMPONENTES CELULARES DE LA
SANGRE