CURVA DE CALIBRACIÓN DEL ANIÓN DICROMATO
(ESPECTROFOTOMETRÍA VISIBLE)
Práctica 4
9 DE DICIEMBRE DE 2022
ISABELLA FAGUNDES
1º laboratorio clínico y biomédico – 1º evaluación
ÍNDICE
OBJETIVO pg.
FUNDAMENTO TEÓRICO pg.
MATERIALES Y REACTIVOS pg.
PROCEDIMIENTO Y CÁLCULOS pg.
GRÁFICA pg.
OBSERVACIÓN Y RESULTADOS pg.
SEGURIDAD pg. +
- OBJETIVO:
Esta práctica trata de determinar la concentración de dicromato
(Cr2O72-) de una muestra problema a partir de la recta de
calibración correspondiente teniendo en cuenta que la longitud
de onda de máxima absorción (λ máxima) para el ion dicromato es de
340nm.
Para lograrlo, voy a hacer las siguientes pruebas:
Me voy a situar en la longitud de onda máxima y voy a medir la
absorbancia de 5 disoluciones diluidas con una concentración
conocida (patrones) de dicromato preparadas por mí. Esto me va
a proporcionar la recta de calibrado.
Voy a calcular la concentración en dicromato de la muestra de
concentración desconocida, teniendo en cuenta su absorbancia.
- FUNDAMENTO TEÓRICO:
Para poder realizar esta práctica, es muy importante primero conocer
qué es la longitud de onda y la absorbancia de la muestra.
La longitud de onda es la distancia entre los ciclos repetitivos de una
onda a una frecuencia dada. Cuando más elevada sea la frecuencia,
más corta va a ser la onda, que también se le conoce como periodo
espacial. La longitud de onda se suele representar con la letra griega λ.
La longitud de onda se mide en nanómetros y se ordena según la
cantidad de luz visible que pueda captar el ojo humano. Esta depende
del medio en el que la perturbación se propaga. En medios no
uniformes, la longitud de onda puede variar con la posición.
Ahora bien, la absorbancia o densidad óptica es la medida que refleja
la cantidad de luz absorbida por una solución y en la medida en la que
esta se atenúa cuando atraviesa un elemento.
Todo esto sirve para entender los conceptos que van a ser usados
cuando realice la práctica y para poder familiarizarme con el
intrumento que es necesario para llevarlo a cabo, el
espectrofotómetro.
Dicha máquina sirve para medir, en función de la longitud de onda que
mencioné anteriormente, la relación entre la cantidad de luz absorbida
y la cantidad de luz que ha atravesado la muestra. La cantidad de luz
absorvida dependerá de manera lineal de la concentración, es decir, a
mayor concentración, mayor absorvancia.
- MATERIALES Y REACTIVOS:
Balanza de precisión
Frasco lavador
Tubos de ensayo
Cubetas para espectrofotómetro
Matraz aforado
Pipeta graduada
Auxiliar de pipeteo
Espátula
Vaso de precipitados
Disolución 0.30 g/l de dicromato potásico (solución principal y que
yo voy a preparar)
Dilución 1:10 en un tubo de ensayo (dilución madre)
- PROCEDIMIENTO
Primero tengo que preparar la madre, y para ello debo disolver 0.30 g/l
de dicromato potásico en 100 ml de agua. A partir de aquí, mido 1 ml
de esta disolución con la pipeta graduada y el auxiliar de pipeteo, y lo
vierto en un tubo de ensayo y lo diluyo otra vez con 9 ml de agua
destilada (vertida en el mismo tubo). La dilución que ha quedado es la
madre, y su concentración es la siguiente:
0.3 g K 2 Cr 2 O7
∗100 g
1000 ml
∗1mol
99.5 g -> [Madre] = 10.25 * 10^ (-4)
∗1000 ml
294.19 g
[ Madre ] = =0.001025 M
1L
A partir de esta dilución se van a preparar los patrones, que se consiguen diluyendo una cantidad
de madre en una cantidad de agua destilada:
Patrón 1 [1:10] (1 ml de madre y 9 ml de agua destilada)
Patrón 2 [1:8] (1.25 ml de madre y 8.75 ml de agua destilada)
Patrón 3 [1:6] (1.6 ml de madre y 8.4 ml de agua destilada)
Patrón 4 [1:4] (2.5 ml de madre y 7.5 ml de agua destilada)
Patrón 5 [1:2] (5 ml de madre y 5 ml de agua destilada)
Una vez realizado este paso, lo siguiente es calcular la concentración de cada uno de los
patrones, y eso se consigue dividiendo la concentración de la madre, entre la concentración de
las diluciones de los tubos, por ejemplo, el patrón 1:8, su concentración es la de la madre
dividida entre 8.
- Patrón 1 = 1.025 * 10^ (-4)
- Patrón 2 = 1.281 * 10^ (-4)
- Patrón 3 = 1.708 * 10^ (-4)
- Patrón 4 = 2.562 * 10^ (-4)
- Patrón 5 = 5.125 * 10^ (-4)
Ahora debemos verter un poco de las diluciones de los tubos en una cubeta (cada dilución en una
cubeta), y eso nos deja con 5 cubetas, cada una con un patrón. Luego necesitamos una cubeta con
agua destilada, que se llama blanco, y una cubeta con una muestra de concentración desconocida.
Hay que poner las cubetas en el espectrofotómetro y anotar los datos de absorbancia, que son:
BLANCO: 0
PATRÓN 1: 0.415
PATRÓN 2: 0.438
PATRÓN 3: 0.521
PATRÓN 4: 0.824
PATRÓN 5: 1.959
MUESTRA: 0.298
Una vez que tenemos todos estos datos, debemos poner los datos en una gráfica de Excel, que los
va a representar, y con la regresión lineal vamos a determinar la concentración de la muestra
problema y el valor del coeficiente de correlación lineal de la recta de calibrado.
(adjunto foto de la gráfica)
