“OBSERVACION DE BACTERIAS DEL YOGUR”
INTRODUCCIÓN
Las bacterias, junto con las cianobacterias (antiguas algas cianofíceas)
constituyen el Reino Monera. Todos son organismos procariotas unicelulares. Las
células procariotas tienen un origen anterior a las eucarióticas en la evolución. Se
diferencian de las eucariotas en que:
No tienen núcleo diferenciado: su material hereditario no está separado del
citoplasma por una membrana.
Carecen de muchos orgánulos propios de las células eucarióticas.
Su tamaño es menor: Las bacterias miden de 0,2 a 5 micrómetros y las células
eucarióticas de 1 a 20 micrómetros.
Dentro de las bacterias se pueden distinguir diferentes tipos:
Según su nutrición hay bacterias:
Autótrofas: Fotosintetizantes, Quimiosintetizantes
Heterótrofas:
Saprófitas, que descomponen la materia orgánica mediante putrefaccciones
y fermentaciones.
Simbióticas, en simbiosis con otros organismos, como las de nuestra flora
intestinal o el Rhizobium de la raiz de las leguminosas.
Parásitas, que provocan enfermedades, como la tuberculosis, cólera, tifus,
tétanos, etc.
Todas las heterótrofas, según que utilicen oxigeno puro o no lo usen, se pueden
dividir en aerobias (que lo usan) y anaerobias (que no lo usan; para algunas de
estas el oxigeno es un veneno). Según su forma se distinguen:
Cocos: con forma esférica, que pueden aparecer aislados o en parejas
Diplococos: alineados: estreptococos: o en racimos: estafilococos
Bacilos: con forma alargada. A veces se encuentran en cadenas,
estreptobacilos
Vibrios o vibriones: cortos y curvados, en forma de coma
Espirilos: con forma de hélice
Las bacterias tienen una gran importancia, no solo porque hay algunas
perjudiciales, sino por las que son beneficiosas e incluso necesarias.
Las bacterias de la putrefacción y algunas quimiosintetizantes (las del nitrógeno,
por ejemplo) son pasos importantes en la circulación o reciclaje de la materia en la
naturaleza.
Muchas bacterias son utilizadas por la humanidad con fines industriales, como las
de las fermentaciones (fabricación de yogur y vinagre); fabricación de acetona,
butanol, caucho; fabricación de medicamentos como antibióticos o vitaminas, etc.
También se utilizan en investigación genética. Ingenieria genética que ya
comienza a experimentarse para curar enfermedades.
OBJETIVO
La finalidad de esta práctica es acercarte al mundo de las bacterias, su
observación al microscopio, a través de técnicas sencillas de preparación, fijación
y tinción.
Para ello, emplearemos un yogurt, ya que se trata de un alimento láctico
fermentado por bacterias, màs concretamente por Streptococcus termophilus y
Lactobacillus bulgaricus. En las preparaciones a realizar, podremos observar
diferentes morfologías bacterianas.
El pequeño tamaño de las bacterias exige el empleo de grandes aumentos para
verlas. Por otra parte, su resistencia al paso de la luz es semejante a la del medio
en que se encuentran, por lo cual deberá destacarse su presencia mediante el
empleo de un colorante que las tiña, dejando, a la vez, incoloro al medio
circundante.
Se empleará, pues, el mayor aumento posible con el microscopio óptico. Ello se
logra mediante un objetivo especial que se emplea con su lente frontal sumergida
en un aceite especial. Se llama "Objetivo de inmersión", produce 100 aumentos
que no todos los microscopios lo tienen.
Para realizar la tinción deberá realizarse primero la fijación del material, muerte y
estabilización del mismo, lo cual permitirá que no se modifique con las
manipulaciones posteriores y que el colorante penetre adecuadamente en la
muestra. Realizaremos la fijación mediante calor.
La grasa, abundante en el material que se va a emplear, dificultará la llegada del
colorante a la célula, pues se usará azul de metileno en solución acuosa, por lo
que será necesario eliminarlas mediante un disolvente, utilizaremos etanol
(alcohol).
MATERIALES
Portaobjetos
Cubreobjetos
Yogurt
Asa de siembra o palillo
Mechero
Pinza
Azul de metileno
Alcohol
Agua
Cuentagotas
Placa petri
Microscopio (con objetivo de 100x)
Aceite de inmersión
PROCEDIMIENTO
1. Antes de comenzar, hemos de asegurarnos de que el porta esté limpio.
2. A continuación, tomaremos una pequeña cantidad de yogur con un palillo o asa
de siembra y haremos un frotis en la zona central del porta, con ayuda de una
pequeña gota de agua.
3. Con cuidado y tomando el porta con dos dedos por el borde, con la muestra
hacia arriba y en posición horizontal, pasarlo por la llama del mechero de modo se
se pueda tocar con él el dorso de la mano sin quemarse. Repetir la operación,
siempre probando y sin quemarse, hasta que se haya secado la muestra. (Este
secado de la muestra tiene como finalidad matar las bacterias, aumentando de
este modo su mayor permeabilidad a la tinciión).
4. Una vez seca la muestra, colocaremos el porta sobre la placa petri y
añadiremos unas gotas de etanol sobre la muestra ya fijada. Esperar unos
minutos. Lavar con agua y escurrir.
5. Por último, colocaremos nuevamente la preparación sobre la placa de Petri y
añadiremos unas gotas de azul de metileno. Esperaremos cinco minutos y
lavaremos con abundante agua.
6. Colocamos un cubre. Secamos bien la preparación con papel de filtro y
observamos al microscopio, primero a pocos aumentos y luego al máximo
aumento disponible.
