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MCC P/A COSMETIKIT® DRY PLATES® MUGPLUS
CRIOTECA® CHROMOSALM DESINFECTEST® CCCNT
PLAQUIS® KITPRO-PLUS CROMOKIT® MBS
M-IDENT® SEILAGUA® SALMOQUICK AIRESANO
NEOGRAM ENVIROCOUNT
SPS (SULFITE POLIMIXIN SULFADIACIN) AGAR POLVO FÓRMULA
MEJORADA
Detección de clostridios sulfito-reductores (AOAC,ICMSF)
COMPOSICIÓN
Peptona de caseina 15,00 g
Extracto de levadura 10,00 g
Citrato de Hierro 0,80 g
Sulfito sódico 0,50 g
Polimixina-B sulfato 0,01 g
Sulfadiacina sódica 0,12 g
Agar-agar 13,90 g
(Fórmula por litro)
pH final: 7,0 ± 0,1
PREPARACIÓN Clostridios sulfito-reductores
Disolver 40 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando hasta ebullición para
su completa disolución.
Repartir en tubos o frascos. Autoclavar a 121 ºC durante 15 minutos, o mejor a 116 ºC
durante 15-30 minutos. Enfriar rápidamente el medio en un baño de agua fría. El uso a [2] es
más recomendable. Utilizar de inmediato a su preparación para evitar su oxigenación letal.
NOTA: Para mejorar el desarrollo de colonias negras de Clostridios, añada 1 vial del
suplemento estéril VMT136 a cada 100-1000 ml de medio estéril, hervido para eliminar su
oxigenación y una vez enfriado a unos 45-50 ºC.
LAS PARTÍCULAS NEGRAS QUE PUEDEN VERSE OCASIONALMENTE,
PRECIPITAN AL ENFRIARSE EL MEDIO Y SON BUENAS PARA EL AUMENTO
DE SU SENSIBILIDAD, DE ACUERDO CON LAS NORMAS UNE 13401 y UNE-
EN-26461.
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO
MANTENER EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y OSCURO.
DESHIDRATADO CODIGO:BCD901
1
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO
Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio siempre que varíen
las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras conservar a alta Tª,
cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de
la etiqueta,...)
DESHIDRATADO: Polvo, Beige PREPARADO: Estéril, Crema-blanquecino
CONTROL DE CRECIMIENTO CUANTITATIVO 24 h a 37°C aproximadamente, en
anaerobiosis:
Clostridium sporogenes WDCM 00008, colonias gris-negras. Con respecto a Schaedler, recuento 90-120 %,
pero de forma más selectiva y diferencial. Incertidumbre debida a la cepa y a las diferentes proporciones de
flora acompañante.
Clostridium perfringens WDCM00007, colonias gris-negras. Con respecto a Schaedler, productividad
>70%, en concreto recuento 110-150 %, pero de forma más selectiva y diferencial. Incertidumbre debida a
la cepa y a las diferentes proporciones de flora acompañante.
Staphylococcus aureus WDCM00033 y Escherichia coli WDCM00013, Inhibidos.
PRESENTACIÓN: TUBOS PREPARADOS (PARAFINADOS-9 ml O NO-18 ml),
FRASCOS 50 ml A DOBLE CONCENTRACION PARAFINADOS, FRASCOS 100 y 250
ml, MEDIO DESHIDRATADO.
Selectivo para aislamiento/recuento de clostridios sulfito reductores. La reducción del sulfito
ennegrece las colonias.
SIEMBRA
En profundidad en placa con tubos y frascos fundidos, o en el propio tubo/frasco; incluso las
membranas de MF, que se depositan entre 2 capas. Para esporas inocular tubos, calentando a
unos 98 ºC, dejando enfriar a unos 75 ºC y añadiendo entonces 1 ml de muestra. Voltear sin
agitar para mezclar con el medio y enfriar en posición vertical (en los tubos parafinados, para
que la parafina solidifique en superficie). Para buscar esporas en aguas, actuar igual pero con
frascos parafinados a doble concentración y añadiendo 20-50 ml de muestra. Incubar en
anaerobiosis (los tubos, tubos parafinados y frascos parafinados no lo necesitan) a 35-37 ºC
aproximadamente, durante 24 horas.
Resulta más recomendable sembrar 1 ml sobre un tubo (TPL089) hervido y enfriado a 75ºC
(para detectar y enumerar esporas) o a 45ºC (para La siembra en tubo ahorra la incubación en
detectar y enumerar formas vegetativas), cerrar, anaerobiosis y permite contar perfectamente las
colonias
voltear sin agitar para mezclar sin oxigenar, incubar
vertical (ahorrando las jarras y los generadores de
anaerobiosis) y contar directamente en el tubo las
colonias negras, que crecen en anaerobiosis en toda su
altura (por debajo de los 3-5 mm oxigenados de la
superficie).
INTERPRETACIÓN
Contar los puntos negros que aparezcan como clostridios sulfito-reductores. Las colonias
blancas son presuntivas si la anaerobiosis no ha sido correcta.
El usuario final es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la
legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
2
Esquema sobre el uso de los tubos de SPS Agar parafinados, realizado en 1989
Fabricado en la UE por MICROKIT desde 1989 bajo
ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020
Tubo y frasco de
SPS Agar parafinado