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UNIVERSIDAD NACIONAL DE BARRANCA
INFORME N°5
RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS – ENZIMAS, EXTRACCION DE ADN
DOCENTE: ABAD VILCHEZ WILDER
SECCIÓN: 5°
CURSO: BIOLOGÍA - Laboratorio
INTEGRANTES DEL GRUPO
● GARAY SALINAS, BRYAN
● MACEDO CASTRO, YAMILETH
● MAZA DIAZ, LUIS
● MIYAMOTO GONZALES, GABRIEL
● MORI AGUILAR, ANGELA
ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL
ESTUDIOS GENERALES
BARRANCA-2022
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ÍNDICE
I. Reconocimiento de polisacáridos 4
ii. Reconocimiento de carbohidratos 5
iii. Reconocimiento de proteínas y enzimas 6
i. Desnaturalización de las proteínas 6
ii. Reacción de biuret 7
iii. Reacción xantoproteica 8
iv. Reacción de la cistina 9
v. Demostración de la especificidad de las enzimas 10
vi. Desnaturalización de la catalasa 11
CUESTIONARIO N°1 13
viii. Extracción de adn del tomate 15
CUESTIONARIO N°2 17
viii. Referencias bibliográficas 18
ix. Conclusiones: 20
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INTRODUCCIÓN:
¿Qué es el ADN? ¿El ADN lo tienen todos los seres vivos? ¿Las enzimas tienen distintas
funciones o son específicas? ¿El almidón es sintetizado por las plantas solamente si hay
sol? ¿Sabemos las distintas reacciones que pueden ocurrir en las proteínas? ¿Sabemos que
es la catalasa?
¿Tendremos respuesta a todas las preguntas formuladas anteriormente? En este trabajo
realizaremos experimentos para poder demostrar y fundamentar las preguntas
anteriormente mencionadas. Para así aprender un poco más sobre la biología de una manera
cooperativa y
sencilla.
Esta semana hemos realizado dos clases de experimentos que son la extracción de ADN y
el reconocimiento de proteínas y enzimas. Aprendiendo de las diversas formas de encontrar
las proteínas. Comprobamos si las plantas sintetizan el almidón, aunque hayan estado sin
luz solar dos días. Experimentamos también la presencia de catalasa en el hígado y otros
elementos. Verificamos si todos los seres vivos tienen ADN en su estructura. Inclus o
usaremos la albúmina para conocer distintas reacciones como: La de Biuret, Xantoproteica
e incluso de la Cistina. Como último experimento verificaremos si las enzimas tienen
acciones específicas usando sacarosa y
saliva.
Todos estos experimentos nos ayudaron a comprender de una manera eficaz los temas
llevados en la teoría. Profundizando nuestros conocimientos de las proteínas, enzimas y el
ADN para concientizar sobre su importancia.
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I. RECONOCIMIENTO DE POLISACÁRIDOS
i. MATERIALES Y MÉTODOS:
Calentamos agua destilada (500 ml) en un vaso precipitado a punto de ebullición.
Seguidamente introducimos 2 hojas grandes y 2 pequeñas de geranio por 5 minutos y las
retiramos, luego echamos el alcohol (200 ml) en un vaso precipitado y lo dejamos en la
estufa hasta el punto de ebullición aproximadamente unos 20 minutos. Después colocamos
las hojas con la ayuda de una varilla en el alcohol y lo dejamos por unos 5 minutos.
Retiramos las hojas y observamos que su color ha cambiado de un verde oscuro a uno
claro. Posteriormente agregamos unas 2 a 5 gotas de
Lugol a cada hoja. En la cual esperamos de 3 a 5 minutos.
ii. RESULTADOS:
Observamos que las hojas se habían puesto más claras con manchas negras. Debido al
alcohol limpio las hojas quitando los cloroplastos. Aun después de limpiar las hojas
con el alcohol existía la presencia de almidón, ya que reaccionó a la prueba de Lugol.
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II. RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS
I. MATERIALES Y MÉTODOS:
Usamos cuatro tubos de ensayo en los cuales colocamos, al primer tubo de ensayo
agregamos sacarosa al 1%; al segundo, maltosa al 1%; al tercero, lactosa al 1% y al cuarto,
almidón al 1% al tubo de ensayo, luego le echamos 2 gotas del Reactivo de Molisch y
agitamos. Luego de esperar
5 min vertemos cuatro gotas del ácido sulfúrico.
II. RESULTADOS:
Observamos la aparición del anillo color rojo violeta, dándonos positivo para
carbohidratos. En la cual la lactosa tiene más carbohidratos que los demás.
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III. RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS Y ENZIMAS
I. Desnaturalización de las proteínas
i. MATERIALES Y MÉTODOS:
Primero tuvimos que rotular los tubos de ensayo para evitar cualquier equivocación, luego
colocamos 3 ml de albúmina (clara de huevo) en 5 tubos de ensayo, utilizamos una pipeta
para poder verter 2 ml de HCL en el segundo tubo de ensayo, NaCl en el tercero, NaOH
en el cuarto y el quinto solo agua destilada. Luego de tener todas las muestras listas, las
exponemos al calor utilizando un mechero de alcohol.
ii. RESULTADOS
Las sustancias que vertimos en los tubos 1 ,2, 3 y 4. Pudimos observar que se produjo una
coagulación, ya que a simple vista se puede apreciar la presencia de dos sustancias que no
llegaron a mezclarse, en cambio en la primera unión de sustancias (HCl + Albúmina), se
observó la formación espuma y se formó una mezcla homogénea.
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II. Reacción De Biuret
i. MATERIALES Y MÉTODOS:
Primero cogimos un tubo de ensayo y con la ayuda de la pipeta colocamos 3 ml de albúmina
de huevo diluida en agua destilada, luego añadimos 2 ml de la solución de NaOH al 20%.
Después de realizar esos pasos nosotros tuvimos que agregar 5 gotas de solución de sulfato
cúprico al 1%.
ii. RESULTADOS:
Observamos que hay una coloración rosácea en la solución demostrando que la albúmina
si tiene proteínas. Según la Revista Cubana de Química (2014):
Es una prueba general para polipéptidos y proteínas, ya que sirve para reconocer las
uniones peptídicas. La positividad se manifiesta por la aparición de una coloración violeta,
debido a la formación de un complejo de coordinación entre los cationes cúpricos en medio
alcalino con las uniones peptídicas.
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III. Reacción Xantoproteica
i. MATERIALES Y MÉTODOS:
Cogimos un tubo de ensayo y usando la pipeta colocamos 2 ml de albúmina en el tubo de
ensayo, luego añadimos 1 ml de HNO3 en la solución de albúmina. Después usando las
pinzas cogemos el tubo y calentamos en el mechero hasta ver en la solución un color
amarillo. Luego tuvimos que enfriar el tubo con agua fría y agregamos 6 gotas de NaOH
al 20%.
ii. RESULTADOS:
Observamos la aparición de unos anillos o partes de un color trasparente y el fondo el
amarillo que apareció al calentar la solución. Según la Revista Cubana de Química (2014):
Es una reacción que reconoce los aminoácidos que poseen el grupo bencénico (tirosina,
fenilalanina, triptófano). Las proteínas que tienen en su composición estos aminoácidos
también darán la reacción. La positividad se reconoce por la aparición de un color amarillo
o verde debido a la formación de nitrocompuestos.
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IV. Reacción De La Cistina
i. MATERIALES Y MÉTODOS:
Para realizar este experimento nosotros tuvimos que coger un tubo de ensayo y usando la
pipeta colocamos 2 ml de albúmina en el tubo de ensayo, luego añadimos 2 ml de NaOH
al 20% al tubo de ensayo.
ii. RESULTADOS
Observamos la aparición de un color oscuro en la solución demostrando la alcalinidad de
la albúmina. Según la Revista Cubana de Química (2014), “es una prueba para identificar
aminoácidos azufrados y las proteínas que los contienen, se reconocen por la formación de
una coloración negra o gris”.
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V. DEMOSTRACIÓN DE LA ESPECIFICIDAD DE LAS ENZIMAS
i. MATERIALES Y MÉTODOS:
En este experimento tuvimos que utilizar los siguientes materiales: Fehling A y B, tubo de
ensayo, mechero, pinzas, y por último la sacarosa.
ii. PROCEDIMIENTO 1º
Preparamos la solución de Fehling (2 ml de Fehling A + 2 ml de Fehling B) en un tubo de
ensayo y con las pinzas lo cogemos. Ponemos la solución al mechero hasta observar un
primer hervor.
Añadimos 2 ml de sacarosa y lo seguimos calentando. Observamos si hay un cambio de
calor. iii. PROCEDIMIENTO 2º
Echamos 1 ml de sacarosa al tubo de ensayo. Agregamos 2 ml de saliva al tubo y con las
pinzas lo ponemos a calentar en el mechero. Calentamos hasta observar un hervor. Luego
realizamos la reacción de Fehling (2 ml de Fehling A + 2 ml de Fehling B). Observamos
si hay un cambio de color.
iv. RESULTADOS
Después de verificar con la prueba de Fehling no hubo un cambio de color lo que
demostraría la presencia de glucosa en ninguna de las dos muestras. Según la revista
PanReac AppliChem, el reactivo de Fehling se utiliza para la detección de sustancias
reductoras, particularmente azúcares reductores.
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VI. Desnaturalización De La Catalasa
i. MATERIALES Y MÉTODOS Nº1
Para poder realizar este experimento nosotros primero tuvimos que verter pocos trozos de
las muestras que utilizamos, en este caso vienen a ser trozos de hígado de pollo, trozos de
papa y también pequeñas proporciones de manzana.
Luego de ya tener pequeñas proporciones de nuestras muestras le agregamos 5 ml de agua
oxigenada, sin embargo, pudimos notar que al verter tan solo 2 ml de este compuesto al
primer tubo de ensayo el cual contenía hígado de pollo, en este hubo una reacción muy
rápida y eficaz, tanto fue la reacción que pudimos notar a gran velocidad que comenzó a
burbujear al final quedándonos espuma. En cambio, en los otros tubos los cuales contenían
papa y trozos de manzana no hubo una reacción tan notoria.
ii. RESULTADOS:
En resumen, solo en el tubo de ensayo que contenía hígado de pollo, pudimos notar un gran
cambio con respecto a que le agregamos el compuesto H2O2 (agua oxigenada). Se pudo
observar como el agua oxigenada hizo expulsar burbujas de la muestra.
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i. MATERIALES Y MÉTODOS Nº2
Para nosotros poder realizar la desnaturalización de la catalasa, primero tuvimos que cortar
pequeños trozos de hígado de pollo y luego estos verterlos en un tubo de ensayo, por
supuesto este estaba rotulado para poder evitar confusiones. Luego, a este mismo tubo le
agregamos una cierta proporción de agua destilada y lo pusimos al calor del mechero. Al
momento que este estaba por hervir nosotros retiramos el tubo con la muestra y le
agregamos a este mismo 5 ml de agua oxigenada.
ii. RESULTADOS:
Luego que nosotros le agregamos el agua oxigenada, pues no ocurrió algún efecto notorio
ya que al hervir la muestra el calor se encargó de expulsar el oxígeno que se encontraba
dentro de los trozos de hígado.
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CUESTIONARIO N°1
1. ¿CUÁL ES EL FUNDAMENTO DE LA REACCIÓN DE BIURET?
La concentración de proteínas se muestra según la intensidad del color violeta que nos
muestre.
2. ¿CUÁL ES EL FUNDAMENTO DE LA REACCIÓN DE XANTOPROTEICA?
Es una reacción que reconoce ciertos aminoácidos que se encuentran en las proteínas.
3. QUÉ SIGNIFICA CADA UNO DE LOS SIGUIENTES TÉRMINOS:
FLOCULACIÓN, DESNATURALIZACIÓN, Y COAGULACIÓN DE
PROTEÍNAS.
Floculación: La floculación es un proceso de agregación de partículas en dos pasos en el
que un gran número de partículas pequeñas forman una pequeña cantidad de grandes
flóculos. Las partículas pequeñas suelen tener cargas superficiales negativas que dificultan
la agregación y la estabilización.
Desnaturalización: La desnaturalización define el despliegue o la ruptura de una proteína,
modificando su estructura tridimensional estándar.
Coagulación de las proteínas: Esto hace que se conserven las sustancias nutritivas y
rápidas en el interior de los alimentos.
4. ¿LA DESNATURALIZACIÓN ES UN PROCESO REVERSIBLE? ¿PORQUÉ?
Una proteína desnaturalizada, cuenta únicamente con su estructura primaria. Por este
motivo, en muchos casos, la desnaturalización es reversible ya que es la estructura primaria
la que contiene la información necesaria y suficiente para adoptar niveles superiores de
estructuración.
5. ¿SOBRE QUÉ SUSTANCIA ACTÚA LA AMILASA SALIVAL?
Actúa sobre los carbohidratos y el almidón.
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6. ¿QUÉ COLOR MUESTRAN LOS TUBOS EN LOS CUALES HAY
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA, DESPUÉS DE AGREGAR LUGOL Y POR
QUÉ?
Tienen un color violeta, porque tienen en su estructura carbohidratos.
7. ¿QUÉ SIGNIFICA ESPECIFICIDAD ENZIMÁTICA?
Que las enzimas tienen funciones específicas y no realizan otras partes de las que ya tienen.
8. ¿QUÉ TIPOS DE ENZIMAS PRESENTES EN LOS VEGETALES
ENSAYADOS ACTÚAN SOBRE EL PERÓXIDO DE HIDRÓGENO?
ESCRIBA LA ECUACIÓN.
La papa reaccionó al peróxido de hidrógeno. H2O2
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VIII. EXTRACCIÓN DE ADN DEL TOMATE
i. PROCEDIMIENTO:
Colocar el alcohol a 96% en el congelador para que esté bien frío. En un vaso de
precipitación colocar dos cucharitas de sal y dos cucharitas de bicarbonato de sodio,
disolver. En otro vaso de precipitados colocar dos cucharadas de detergente líquido y
agregar agua hasta 200 ml y movemos con la solución con la cucharita. Agregar a la
solución de detergente la mezcla de sal con bicarbonato y revolvemos. Licuar 2 tomates
con un poco de agua fría. Mezclar el licuado de tomate con la solución salina más
detergente por 20 minutos. Colocar 10 ml de la mezcla licuado-sal detergente en un tubo
de ensayo. Añadir 2 ml de alcohol 96% helado y esperar o dejar reposar por 5 minutos.
Introducir la bagueta e ir removiendo en la misma dirección. Hasta que se adhieran unas
fibras blancas visibles a simple vista. Finalmente colocar orceína acética (colorante) a la
bagueta, para observar mejor el ADN.
ii. RESULTADOS:
Se obtuvo en la bagueta una fibra blanca que con la orceína se observó mejor estos grumos
de ADN arrojada por el tomate.
Este experimento comprobó que, si se puede extraer el ADN de los productos cotidianos
también el ADN está presente en cualquier estructura de nuestro cuerpo sea saliva, cabello,
piel hasta en los huesos, esto se logró al usar sal y detergente que rompen la pared,
membranas celular y nuclear. El bicarbonato sódico actúa manteniendo el pH constante
evitando la degradación de las biomoléculas como el ADN y el alcohol ayuda a separar las
proteínas a las que se encuentra unido el ADN.
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CUESTIONARIO N°2
1. SI TODOS LOS ORGANISMOS TIENEN ADN EN SUS CÉLULAS, ¿QUÉ ES
LO QUE LOS HACE DIFERENTE?
Una de las fuentes de estas diferencias son los denominados cambios epigenéticos:
modificaciones en el grado de empaquetamiento del ADN, lo cual facilita o dificulta su
expresión. La clave no está en los genes sino en su expresión.
2. ¿POSEEN TODAS LAS CÉLULAS DE UN MISMO INDIVIDUO LOS
MISMOS TIPOS DE ARN?
Si analizamos el ARN de los distintos tejidos vemos que este varía mientras que el ADN
sigue siendo el mismo.
3. ¿A QUÉ SE DEBE EL HECHO QUE EN LOS ESPERMATOZOIDES EL ADN
ES MÁS COMPACTO?
El ADN debe encontrarse más compacto en el núcleo de los espermatozoides. En este caso,
el ADN se une a proteínas de carácter más básico, denominadas Protaminas. El ADN se
enrolla sobre estas proteínas, formando una estructura muy compacta, denominada
estructura cristalina del ADN.
4. ¿CUÁL ES LA FUNCIÓN DE LA SAL, BICARBONATO, DETERGENTE Y
ALCOHOL EN EL PROCESO DE EXTRACCIÓN?
La sal y el detergente rompen la pared, membranas celular y nuclear; y el alcohol ayuda a
separar las proteínas a las que se encuentra unido el ADN.
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VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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octubre de 2022, de
https://www.wiki.cch.unam.mx/Desnaturalizaci%C3%B3n_de_prote%C3%ADna
Gómez Ochoa de Alda, J., Marcos-Merino, J. M., & Esteban Gallego, R. (2019).
Extracción de ADN con material cotidiano: desarrollo de una estrategia
interdisciplinar a partir de sus fundamentos científicos. Educación química, 30(1),
58. https://doi.org/10.22201/fq.18708404e.2019.1.65732
Guerra-Molina, Y. G. ;., Quintana-Tamayo, L. ;., Ramírez- Arzuaga, J. F. ;., Fernando-
Ballestero, J. ;., & Vázquez-Jorge, R. ;. (s/f). Redalyc.org. Recuperado el 21 de
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Proyecto Biosfera. (s/f). Mec.es. Recuperado el 21 de octubre de 2022, de
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tm
¿Qué diferencia a dos células con el mismo ADN? (s/f). Mheducation.es. Recuperado el
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celulas-con-el-mismo-adn
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(S/f). Com.ar. Recuperado el 21 de octubre de 2022, de
https://www.rionegro.com.ar/ciencia-en-casa-como-extraer-el-adn-de-una-
banana1369234/
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IX. CONCLUSIONES:
Pudimos comprobar la presencia de almidón en las hojas de geranio.
Todas las sustancias dieron positivo en carbohidratos.
Se produjo coagulación en algunas y no llegaron a mezclarse. En cambio, en la
sustancia (HCl + Albúmina) si se formó una mezcla homogénea.
La muestra viró a un color rosáceo demostrando la presencia de proteínas.
En la muestra salió un color amarillo demostrando la presencia de aminoácidos.
Comprobamos la alcalinidad de la muestra cuando se tornó de un color oscuro.
Las dos muestras salieron negativas, demostrando que no había glucosa en su
composición.
Todas las muestras expulsaron burbujas demostrando que tienen oxígeno dentro.
La muestra al ser hervida ya no tenía oxígeno por eso no expulso burbujas.
El tomate demostró tener ADN en su composición.
