2022

BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

INDICE

 PARTE 1:
LA CÉLULA .......................................................................... 4

 PARTE 2:
MEMBRANAS: ESTRUCTURA, QUÍMICA Y
FUNCIÓN............................................................................. 33

 PARTE 3:
ESPECIALIZACIONES DE LA MEMBRANA ...................... 67

 PARTE 4:
COMPARTIMIENTOS INTRACELULARES Y
CLASIFICACION DE PROTEÍNAS ...................................... 81

 PARTE 5:
TRÁFICO VESICULAR MEDIANTE
LAS RUTAS SECRETORAS Y ENDOCÍTICAS.
MECANISMOS DE SECRECION......................................... 93

 PARTE 6:
TRAFICO VESICULAR MEDIANTE RUTA
SECRETORA Y ENDOCÍTICA ............................................ 105

 PARTE 7:
CITOESQUELETO .......................................................... 121

 PARTE 8:
ENERGÉTICA CELULAR:
GLUCOLISIS Y OXIDACION AEROBICA ...................... 135

 PARTE 9:
EL NÚCLEO ............................................................................... 153

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 PARTE 10:
NATURALEZA MOLECULAR
DEL GEN Y DEL GENOMA ..................................................... 181

 PARTE 11:
GENETICA MOLECULAR ....................................................... 219

 PARTE 12:
REPRODUCCIÓN CELULAR:
MITOSIS Y MEIOSIS............................................................... 239

 PARTE 13:
GENÉTICA MENDELIANA ...................................................... 259

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PARTE 1
LA CÉLULA

NTRODUCCIÓN
Las células son las unidades con que se construyen los organismos vivos.
El estudio del Universo viviente nos muestra que la evolución produjo una inmersa variedad de formas.
Existen alrededor de cuatro millones de distintas especies de bacterias, protozoos, vegetales y animales cuya
morfología, función y comportamiento son diferentes. Sin embargo, si estudiamos a los organismos vivientes
a nivel celular y molecular, exhiben un plan maestro de organización único. El campo de la biología celular y
molecular es, precisamente, ese plan de organización unificado, en otras palabras es el análisis de las
moléculas y células que constituyen los bloques con los cuales se construyen todas las formas de vida.
La célula es una entidad estructural y funcional fundamental de los seres vivos, así como el átomo es la
unidad fundamental de las estructuras químicas. Si por medios mecánicos o de otra naturaleza se destruye la
organización celular, la función celular también se altera, aun cuando pueda pueden persistir algunas
funciones vitales (la actividad enzimática, por ejemplo) la célula pierde su significado como unidad organizada
y muere.
Los estudios bioquímicos demostraron que la materia viviente está compuesta por los mismos elementos que
constituyen el mundo inorgánico, aunque puede haber diferencias fundamentales en su organización.

Características de los seres vivos

 Si bien definir o dar un concepto de “vida” no resulta nada sencillo, a través de la observación nos
es posible reconocer fácilmente si algo tiene vida o no. Todos los organismos compartimos
características comunes
 Organización específica: todos los seres vivos estamos formados por mínimas unidades llamadas
“células”, capaces de cumplir con todas las actividades necesarias para la vida, intercambiando
constantemente materia y energía con el medio
 Composición química: todos estamos constituidos por los elementos químicos primordiales C
(carbono) H ( hidrógeno) O (oxígeno) N (nitrógeno) Estos elementos se combinan para formar las
biomoléculas de importancia vital : hidratos de carbono, lípidos proteínas y ácidos nucleicos.
 Crecimiento: capacidad de incrementar el número de células o el tamaño de las mismas
 Movimiento: es una característica común a todos los seres vivos, ya que al menos en alguna
etapa de sus vidas tienen capacidad de movimiento. Si bien en el Reino animal o Protista esto es
mas obvio ya que se da un desplazamiento, los vegetales también se mueven, son capaces de
cambiar la orientación de sus órganos por ejemplo el movimiento de las hojas en busca de la luz (
tropismos)
 Irritabilidad: capacidad de los seres vivos de reaccionar ante un estímulo, cambios físicos o
químicos que ocurren dentro o fuera del organismo
 Adaptación: es la capacidad de los seres vivos que les permite sobrevivir en un mundo constante
de cambios. Las adaptaciones pueden considerarse rasgos que incrementan la capacidad de un
organismo de sobrevivir en un ambiente determinado. Las adaptaciones pueden ser estructurales,
fisiológicas, conductuales o una combinación de ellas
 Reproducción: es la capacidad de los seres vivos de originar nuevos individuos que heredan
características de sus progenitores y se la transmiten a sus descendientes. La reproducción puede ser
asexual, cuando a partir de una célula madre se originan dos células hijas idénticas de su progenitor.
En la reproducción sexual sin embargo, necesitamos de la intervención de dos sexos, con la
producción de las gametos femeninas (ovulo) y masculina (espermatozoide) las cuales se unen por el
proceso de fecundación para originar así un huevo o cigoto y a partir de él un nuevo organimso.
 Metabolismo: es el conjunto de reacciones químicas y física que se llevan a cabo en un organismo o
célula viva

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 Homeostasis: propiedad que le permite a los seres vivos mantener sus condiciones internas
constantes a pesar de los cambios o variaciones del entorno, esto es fundamental para mantener el
estado de equilibrio. Por ejemplo: mantener constante la concentración de sales, el equilibrio hídrico,
etc.
 Nutrición: los seres vivos se alimentan de sustancias nutritivas del medio ambiente, en su interior
circulan líquidos que transportan nutrientes y otros elementos indispensables para la vida.

NIVELES DE ORGANIZACIÓN
Niveles de organización en la biología celular y molecular.
La Biología, en general, trata de la compleja jerarquía o niveles de organización que van desde las células a
las poblaciones y ecosistemas.
El concepto de los niveles de organización implica que en el universo entero, tanto en el mundo inerte como
en el viviente, hay diversos niveles de complejidad, de manera que las leyes o reglas que se encuentran en
un nivel pueden no aparecer en los niveles inferiores
Este concepto puede aplicarse a las diferentes partes estructurales de una célula o a la asociación de
numerosas células en un tejido y de diferentes tejidos en un organismo. Por ejemplo todos los Vertebrados
están compuestos por un número limitado de tipos celulares (células musculares, epiteliales, nerviosas, etc.)
que se encuentran en diferentes proporciones para producir una enorme variedad de esos organismos.
Los niveles de organización desde los más sencillos hasta el más complejo son:
 Partículas fundamentales: quarks y leptones
 Subatómico: electrones, protones y neutrones
 Atómico: cloro, sodio, calcio, carbono, oxígeno etc.
 Molecular: agua, ClNa
 Macromolecular: proteínas, ácidos nucleicos, virus
 Estructura subcelulares u orgánulos : membrana plasmática, mitocondria
 Celular: Procariota : bacterias, cianobacterias
Eucariota: Paramecio, levadura, diatomeas.
 Tisular: tejido muscular, óseo, etc., medusas, hidras
 Órganos: hígado, estómago
 Sistemas de órganos: sistema digestivo, circulatorio
 Individuo u organismo
 Población
 Comunidad
 Ecosistema
 Bioma
Corresponden al área de estudio de la Ecología
 Biósfera
 Tierra
 Sistema solar
 Galaxia
 Universo

Detalles de cada nivel

 Partículas fundamentales: los componen los quarks y los leptones que son los constituyentes
fundamentales de la materia. Especies de leptones se unen para formar electrones y especies de
quarks se unen para formar protones y neutrones
 Subatómico: este nivel es el más simple de todo y está formado por electrones, protones y neutrones,
que son las distintas partículas que configuran al átomo.
 Atómico: es el nivel donde se encuentran los átomos. Estos son la mínima porción de materia que
conserva las propiedades de la misma. A nivel biológico podemos llamar a los átomos como
bioelementos y clasificarlos según su función

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 Si cumplen una función estructural son bioelementos primarios: son el carbono,

hidrógeno, oxígeno, nitrógeno fosforo y azufre, que forman por ejemplo la membrana
plasmática, las proteínas, los lípidos, los ácidos nucleicos.
 Si cumplen una función estructural y catalítica son bioelementos secundarios: calcio,
potasio, magnesio, sodio, son fundamentales para el funcionamiento de la célula pero no
forman parte estructural de las mismas.
 Si cumplen solo funciones catalítica son oligoelementos o elementos vestigiales porque
sus cantidades para el organismo son muy escasas: cobalto, zinc,
 Molecular: nivel en el que se encuentran las moléculas, estructura formadas por la unión de dos o
más átomos. Las moléculas pueden ser orgánicas o inorgánicas
 Macromolecular: nivel constituido por macromoléculas. De gran tamaño, alto nivel energético
 Estructuras subcelulares u orgánulos: unión de varias moléculas para formar orgánulos de las células,
membrana plasmática, aparato de Golgi. La citología se encarga de su estudio.
 Celular: es la unidad anatómica, funcional y genética o de origen de todo ser vivo. Pueden ser
eucariotas o procariotas dependiendo de su estructura.
 Tisular: los tejidos son conjunto de células semejantes en estructura, que se agrupan para cumplir
una función específica. La Histología se encarga de su estudio
 Órganos: los tejidos están estructurados en órganos: corazón, bazo, cerebro, en plantas, hojas tallo y
raíz
 Sistémico o de sistemas de órganos: digestivo, respiratorio, etc
 Organismo: nivel de organización superior. Células, tejidos, órganos y aparatos forman una
organización superior como plantas, animales
 Población: conjunto de individuos de la misma especie que viven en un mismo territorio en un
determinado momento: manada de leones, bosque de arces
 Comunidad: conjunto de poblaciones de un mismo lugar
 Ecosistema: es un conjunto de seres vivos que se relacionan entre si y con el medio físico en
determinado lugar BIOTOPO + BIOCENOSIS

La tabla 1-1 muestra los límites que separan el estudio de los sistemas biológicos en diferentes niveles de
dimensión. Los límites están impuestos artificialmente por el poder de resolución de los instrumentos
utilizados. El ojo humano sólo puede resolver (discriminar) dos puntos separados por más de 0,1 mm (100
micras), la mayoría de las células son mucho menores y necesitan todo el poder de resolución del
microscopio óptico (0,2 micras) para ser estudiadas. La mayor parte de las estructuras celulares son más
pequeñas aun y requieren del poder de resolución del microscopio electrónico. Con este importante
instrumento se puede obtener información de subestructuras que miden entre 0,4 y 200 nm. Los resultados
obtenidos por medio de la microscopía electrónica han cambiado el campo de la citología en un grado tal que
gran parte de este libro está dedicado al estudio de los conocimientos obtenidos con esta técnica.

La diversidad del mundo viviente depende, en última instancia, de un programa genético codificado por los
ácidos nucleicos, que es ejecutado por medio de complejos circuitos reguladores que controlan la actividad
bioquímica de la célula. En síntesis son resultado de la expresión de los genes.

Niveles de organización y poder resolutivo de los instrumentos utilizados

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Ley de Driesh: dice que en aquellos seres vivos de la misma especie e igual grado de desarrollo pero de
tamaño diferentes, lo que varía no es el tamaño de la célula sino el número de las mismas.

Quedando claro que el tamaño de la célula es constante, independiente del tamaño de un individuo, queda
por considerar la relación superficie volumen celular conocida como Relación de Spencer: cuando una célula
aumenta o crece en superficie el volumen de la misma aumenta el doble.

Así, si la superficie aumenta el doble, el volumen aumenta el cuádruplo. Si el proceso de crecimiento celular
se hace continuo, se arriba a una instancia donde se alcanza un punto crítico donde la única forma de
reestablecer el equilibrio metabólico es aumentando la superficie celular lo que las células consiguen
dividiéndose, por ello como éste es uno de los factores desencadenantes de la mitosis o división celular, es
esta relación establecida por Spencer se la conoce como factor mitógeno.

CARACTERISTICAS GENERALES DE LAS CELULA

Existen células procariotas y eucariotas

Al comienzo de este capítulo dijimos que la vida se manifiesta en millones de especies diferentes que poseen
una morfología especial y propia y que contienen información genética específica. Podemos ordenar las
especies en grupos de organismos cada vez más amplios –género, familias, órdenes- hasta llegar al nivel de
los reinos clásicos: vegetal y animal. Una de las clasificaciones –la de Whittaker- propone la división en cinco
reinos: mónera, protistas, hongos, vegetales y animales.

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CLASIFICACIÓN DE DE LOS REINOS DE SERES VIVOS (Whitaker 1959)

REINO EJEMPLOS CÉLULAS

MONERAS Bacterias y cianobacterias Procariontes
PROTISTAS Protozoarios eucariontes
FUNGI Mohos y hongos verdaderos eucariontes
VEGETALES Algas verdes, rojas y pardas. eucariontes
Briófitas y traqueofitas
ANIMALIA Animales (metazoos) eucariontes

Este cuadro se puede simplificar si se examinan las distintas formas vivientes a nivel celular. Así es posible
clasificar a las células en dos categorías reconocibles: procariotas y eucariotas

La Teoría Celular y su historia

Estos son algunos datos históricos referidos a la célula

 1608 Zacharias Jansen construye un microscopio con dos lentes convergentes.

 Robert Hoocke (1665) fue el primero en utilizar el término célula refiriéndose a las cavidades que
encontró en sus estudios del corcho con el microscopio. En realidad lo que observaba eran espacios
vacíos donde estaban las células en el tejido vivo rodeadas de la pared celular la cual se conserva a
pesar de la desaparición del contenido , y por eso les puso células (celdas) . El término actualmente
se utiliza para mencionar el contenido de dichos espacios.
 Leewenhoeck (1674) fue el primero en observar lo que luego se conoció como bacterias,
protozoarios y también descubrió los espermatozoides.
 Brown (1831) descubre el núcleo celular
 Purkinje denomino protoplasma a la materia viva.
 Schleiden (1838) Schwann (1839) enuncian la teoría celular
Los primero microscopios se construyeron a finales del siglo XVI.
El descubrimiento de la célula generalmente se acredita a Robert Hooke, microscopista inglés. La palabra
célula significa celda pequeña un espacio vacío, y fue usada primeramente en sentido biológico hace 300
años. Usando un microscopio de su propia construcción se fijó que el corcho y otros tejidos vegetales estaban
formados por cavidades pequeñas separadas por paredes. A estas cavidades las llamó células, sin embargo
el término célula no tuvo su significado actual -como unidad elemental de los seres vivos - hasta más de 150
años después. Una de las muchas preguntas que se hacía Hooke fue porque los tapones de corcho eran tan
adecuados para mantener el aire en una botella.
Entretanto, Antón van Leewenhoek, un holandés que se ganaba la vida vendiendo telas y botones, ocupaba
sus ratos de ocio tallando lentes y construyendo microscopios. Fue el primero en observar células vivas, al
descubrir a los protozoarios y bacterias (1670-80)
A mediados del 1800, ya había una considerable información sobre organismos, tejidos y órganos en general,
pero no se llegaba a comprender que existía una unidad en todos ellos. En 1838, muchos de estos trabajos
cristalizaron en el pensamiento del científico Mathias Schleiden, un investigador alemán que, después de
varios años de estudiar los vegetales, planteó sus hipótesis acerca de la célula, en su obra Sobre la
filogénesis.
Las palabras de Schleiden fueron: “Cada célula lleva una doble vida, una independiente, que pertenece sólo a
su propio desarrollo; la otra, como parte integrante de la planta. El proceso vital de las células individuales
representa la primera base fundamental e indispensable de la fisiología vegetal, - es decir, del funcionamiento
de los vegetales-. De esta manera pues, el pro lema consiste en saber cuál es el origen de este pequeño
organismo peculiar, la célula”

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Otro investigador, Theodor Schwan, luego de estudiar varios años los tejidos animales, al enterarse de los
postulados de Schleiden sobre las células vegetales, se dio cuenta de que estos también podían ser
aplicables a las células animales. De esta forma lo expresa en su obra Investigaciones microscópicas sobre la
semejanza de estructura y crecimiento de los animales y las plantas, publicada en 1839.
Todos los seres vivos están compuestos de una o más células.
La célula es la unidad estructural de la vida
Las ideas de Schleiden y de Schwann acerca del origen de las células fueron menos profundas, ambos
concluyeron que las células podrían originarse de materiales no celulares, algo que mas tarde fue demostrado
como erróneo, y que los organismos tampoco se originan por generación espontánea. Para 1855, las ideas
de que todos los seres vivos están formados por una o más células se amplía en un campo mayor cuando el
patólogo Rudholf Virchow, patólogo alemán, generaliza que todas las células provienen de células
preexistentes, "donde hay una célula, tiene que haber existido una célula anterior"
Las células sólo pueden originarse por división de una célula preexistente.
En 1861, el investigador francés, Luis Pasteur, extendería la formulación de Virchow en la siguiente: “todos
los seres vivos proceden de otro ser vivo”

- Desde la perspectiva que proporciona la teoría de la evolución de Darwin, que se publica al año siguiente, el
concepto de Virchow adquiere un significado aún mayor: hay una continuidad inquebrantable entre las células
modernas - y los organismos que las poseen - y las primeras células primitivas de la Tierra.
1865, Mendel, 1869: Miescher, 1876: Hewing y la fecundación, 1880 : Fleming y la división celular, 1898:
Golgi 1930 microscopio electrónico.
Las reacciones químicas de los seres vivos incluyendo los procesos de obtención de energía y las
reacciones de biosíntesis tienen lugar en el interior de la célula
Todas las células guardan su información hereditaria en un mismo código químico lineal (DNA) y
transfieren dicha información de las células madres a las células hijas.

Métodos de Estudio de la Célula

El conocimiento de la célula se desarrolló gracias a la invención de instrumentos especializados que

consiguen aumentar las imágenes y diferenciar como separados dos puntos aunque estos estén muy cerca.
Este es el concepto del llamado límite de resolución, que es la mínima distancia que separa dos puntos para
que estos se vean separados y no como uno sólo. Cuando menor el límite de resolución de un sistema de
observación, mejor será su capacidad para estudiar las estructuras.

Microscopio óptico y electrónico

El microscopio óptico se basa en que el objeto, que se encuentra en un portaobjetos de vidrio, es atravesado
por la luz proveniente de una lámpara o luz solar. Las imágenes se forman por que los rayos luminosos
atraviesan lentes de vidrio, que debido a las leyes de la refracción, forman una imagen que es la que se
observa directamente con el ojo.

El microscopio electrónico se basa , en cambio , en que el objeto es atravesado por una rayo de electrones
provenientes de una cañón de electrones , formado por un filamento emisor de los mismos , que puede ser de
tungsteno , el cual es sometido a altos voltajes. El objeto debe estar en un tubo al vacío para poder ser
atravesado por los electrones, y el portaobjeto en el que se encuentra no puede ser de vidrio, ya que este no
es un material que los electrones puedan atravesar, por lo que debe ser de otros elementos, como los que se
mencionan en el cuadro. Las imágenes se forman por la acción de bobinas electromagnéticas que modifican
la trayectoria de los rayos de electrones y son proyectadas sobre una placa fotográfica o un tubo de rayos
catódicos, similar a un televisor, ya que el ojo se destruiría si los electrones se dispararan sobre él

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MICROSCOPIO ÓPTICO ELECTRÓNICO

MECANISMO dispersión de rayos de luz dispersión de electrones
UTILIZA Lentes de vidrio bobinas electromagnéticas
AUMENTOS 500 a 1.500 30 mil a 1 millón
COLOR SI NO
FIJACION FORMOL GLUTARALDEHIDO
INCLUSION PARAFINA RESINAS
CORTE MICROTOMO ULTRAMICROTOMO
COLORACION SI CONTRASTANTES
MONTAJE PORTAOBJETOS DE VIDRIO GRILLAS DE METAL O
PLASTICO

MÉTODOS DE ESTUDIO:

TECNICA HISTOLOGICA
Es el procedimiento por el cual se realizan las preparaciones para estudiar las células con el microscopio.
Pasos de la Técnica histológica
I. Fijación.
II. Inclusión.
III. Montaje.
IV. Coloración.
V. Montaje final.

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I. Fijación:
Tiene por objeto producir la muerte de la célula y conservarla, buscando en lo posible no alterar su
morfología.
El fijador más común es el formol

II. Inclusión.
El objetivo es hacer un bloque sólido de material a estudiar.
Antes de cortar la pieza se le debe dar consistencia, para que los cortes puedan hacerse lo más delgados que
sea posible.
El material de inclusión más común es la parafina

III: CORTE
Consiste en cortar la pieza en láminas delgadas y ponerla sobre un portaobjetos. El aparato con el que se
corta se denomina micrótomo

IV. Coloración:
Colorante es una sustancia que es capaz de darles su color a otras, ó que puede fijarse a algún elemento
permitiendo su identificación.
La coloración más común se realiza con dos colorantes = hematoxilina (azul) y eosina (rojo)

V. MONTAJE:
Se pone el preparado histológico sobre un portaobjetos y se cubre con un cubreobjetos.

ORGANIZACIÓN CELULAR

Todas las células comparten dos características esenciales. La primera es la membrana externa, la
membrana celular – o membrana plasmática- que la separa el citoplasma de la célula de su ambiente externo
(segregación). La otra es el material genético – la información hereditaria – que dirige las actividades de la
célula y le permite reproducirse y transmitir su característica a la progenie.

PROCARIOTAS (sin núcleo verdadero) y EUCARIOTAS (con núcleo).

Tabla 1.3- Principales características comunes entre células eucariotas y procariotas

1- En ambos tipos celulares el ADN es el material genético.
2- Ambos tipos celulares poseen membranas plasmáticas como límite celular.
3- Poseen ribosomas para la síntesis proteica.
4- Poseen un metabolismo básico similar
5- Ambos tipos celulares son muy diversos en formas y estructuras.
Desde el punto de vista evolutivo, se considera que los procariotas son antecesores de los eucariotas. Los
fósiles que datan de tres mil millones de años se manifiestan únicamente como procariotas, en tanto que los
eucariotas aparecieron probablemente hace mil millones de años.

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Los procariontes son organismos unicelulares, seres vivos cuyas células no poseen núcleo, los principales
representantes son las Bacterias: son los organismos más sencillos que se encuentran en la mayoría de los
hábitats naturales. Se trata de células esféricas o alargadas, generalmente de un diámetro de uno a 10 u. Por
su parte los eucariontes son seres vivos cuyas células están dotadas de núcleo, pueden ser unicelulares
(euglenas, paramecios, amebas, etc.) de un tamaño mayor que las bacterias (de 10 a 100 micras o más) o de
organismos pluricelulares (plantas con flores, musgos, helechos, hongos, vertebrados e invertebrados)

Además de la presencia de un núcleo delimitado por una membrana las células eucariotas poseen en su
citoplasma orgánulos como las mitocondrias. Se trata de pequeños corpúsculos donde se efectúan las
reacciones químicas de la respiración celular que conducen a la producción de energía química necesaria
para la vida de la célula. Por lo contrario nunca hay mitocondrias en los procariontes. En las bacterias
aerobias, es decir, las que utilizan el oxígeno del aire para su respiración celular, las enzimas destinadas a
ese proceso forman parte de la membrana citoplasmática.

Además en los eucariontes capaces de llevar a cabo la fotosíntesis, como plantas con flores, musgos
helechos o las algas tienen células que contienen cloroplastos donde se encuentra la clorofila y donde se
lleva a cabo la fotosíntesis. Por el contrario, los procariontes capaces de realizarla- cianobacterias- y otras
bacterias nunca tienen cloroplastos en sus células. En éstas, las enzimas de la fotosíntesis y pigmentos como
la clorofila forman parte de la mp o se encuentran dispersos en el citoplasma.

Aún hay otras diferencias. Por ej. El material genético de los eucariontes se presenta en forma de cromatina
es decir, de una asociación compleja y precisa entre los largos filamentos de ADN y un grupo especial de
proteínas las histonas. En algún momento de la vida de una célula eucarionte, la cromatina, es decir el
material genético, en lugar de aparecer en el microscopio de forma difusa en el núcleo, adquiere la apariencia
de corpúsculos en forma de bastoncillos, los cromosomas. Las células eucariotas tienen al menos dos
cromosomas en sus núcleos y a veces muchos más, rodeadas de una envoltura nuclear. En los procariontes
solamente hay un cromosoma constituido por una molécula de ADN circular y nunca hay cromatina, si bien a
veces se encuentran proteínas no histónicas asociadas al ADN. El material genético ocupa una zona llamada
nucleoide.

En el citoplasma se encuentra una gran variedad de moléculas y complejos moleculares. Pe, tanto las
procariotas como los eucariotas contienen complejos proteicos y de RNA llamados ribosomas que
desempeñan la función clave en la unión de aa durante la síntesis de proteínas.
Otra diferencia es la presencia en las células eucariotas de membranas internas que cierran compartimientos
específicos, las organelas, y los separan del resto del citoplasma. Casi todas las organelas están rodeadas

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por una única membrana fosfolipídica, pero varias, entre ellas el núcleo, están encerradas por una doble
membrana. Cada tipo de organela desempeña una función específica: retículo endoplasmático liso y rugoso,
una red de membrana en las que se sintetizan lípidos y proteínas, el aparato de Golgi, que dirige los
componentes de las membranas a su destino adecuados, y los Peroxisomas, en los que se degradan ácidos
grasos y aminoácidos. Las células animales pero no las vegetales poseen lisosomas que degradan
componentes celulares desgastados y materiales extraños incorporados por la célula. .

El citosol de las células eucariotas posee un conjunto de proteínas fibrosas que en conjunto reciben el
nombre de citoesqueleto. Tres clases de fibras lo componen: los microtúbulos, microfilamentos o filamentos
de actina y los filamentos intermedios. El citoesqueleto le imparte rigidez y resistencia, con lo que contribuye a
que ésta pueda mantener su forma. Las fibras del citoesqueleto también controlan el movimiento de las
estructuras dentro de la célula.

Tabla 1.4- Características Diferenciales entre el Modelo Celular Procariótico y Eucariótico

Característica Célula Procariótica Célula Eucariótica
Núcleo No posee envoltura nuclear Posee envoltura nuclear
Cromosomas Un único cromosoma circular y Posee uno o más cromosomas
desnudo lineales unidos a proteínas
(cromatina)
ADN extracromosómico Puede estar presente como Presente en organelas
plásmidos
Organelas citoplasmáticas No posee Mitocondrias y cloroplastos, (los
cloroplastos presentes sólo en
células vegetales)
Membrana plasmática Contiene las enzimas de la cadena Semipermeable, sin las funciones
respiratoria, también puede poseer de la membrana procariótica
los pigmentos fotosintéticos
endomembranas ausentes presentes
Pared celular Capa rígida de peptidoglucano No poseen pared de
(excepto micoplasmas) peptidoglucano. Pueden poseer
una pared de celulosa o quitina
Citoesqueleto Ausente Presente. Formado por filamentos
proteicos.
Exocitosis y Endocitosis Ausente Presente
Ribosomas 70 S en el citoplasma 80 S en el retículo endoplásmico y
en el citosol
División Fisión Binaria (amitosis) Mitosis – Meiosis
Tamaño 0,2 a 10 um Siempre superior a 6 um
Aparecieron hace 3000 millones de años 1000 millones de años

Organización general de las células procariotas

BACTERIAS

Son organismos unicelulares procariontes. Miden entre 1 y 10 micrones

Son cosmopolitas, ya que se los encuentra distribuidos en todo el planeta.
Abundan en el aire, en líquidos y en el interior y exterior de los organismos animales y vegetales.
Pertenecen al reino de las moneras

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La célula bacteriana presenta los siguientes elementos

1- Membrana celular. Es similar en su estructura a la de las células eucariontes. Sin embargo, a diferencia de
ellas químicamente es distinta, ya que tiene las enzimas de la cadena respiratoria, que en el caso de las
células eucariontes, se encuentran en la membrana interna de la mitocondria.

2- Pared celular rígida situada por fuera de la membrana plasmática. La pared celular tiene función mecánica.

3-Capsula formada por mucopolisacáridos , ubicada por fuera de la pared celular

4- Carecen de mitocondrias

5- Carecen de Retículo Endoplásmico tanto liso como granular y de aparato de Golgi

6- Los ribosomas están libres en el citoplasma y son más chicos que los de las células eucarióticas, midiendo
250 A

7- Carecen de envoltura nuclear. El ADN por lo tanto está en el citoplasma en una región determinada llamada
ANALOGO NUCLEAR. El ADN bacteriano es una sola molécula circular de 1 mm de largo, conteniendo los
genes de la bacteria que son 2.500 aproximadamente. El ADN o cromosoma está unido a la membrana
plasmática

8- Algunas bacterias tienen flagelos, que pueden ser únicos, como en el caso del vibrión colérico que produce
el cólera, o pueden tener muchos como la bacteria causante de la fiebre tifoidea.

9- La membrana plasmática que rodea a las bacterias está plegada en forma compleja hacia el interior,
formando pliegues llamados mesosomas, invaginaciones de la membrana plasmática que se producen en
células procariotas como consecuencia de las Técnicas de Fijación utilizada en la preparación de muestras
para microscopía electrónica. En 1960 se le había dado participación en varias funciones: fosforilacion
oxidativa, formar la pared celular durante la división celular. Refutación en 1970 malformaciones y 1980 no
existen en células vivas y aparece como consecuencia de exposición a antibióticos.

Existen bacterias fotosintéticas que tienen unos corpúsculos denominados cromatóforos, formados por
tilacoides similares a los cloroplastos, conteniendo un pigmento especial, la bacterioclorofila.

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Algunas bacterias
tienen pequeñas
moléculas de ADN en el
citoplasma, independientes
del cromosoma,
llamadas plásmidos o
episomas. Estas moléculas de ADN tienen genes que dan a la bacteria
propiedades como la resistencia a los antibióticos. El episoma se puede
transferir a otra bacteria por lo cual le pasa la resistencia al antibiótico. Los
episomas se utilizan en ingeniería genética por esa propiedad que tienen de ser
transferidos de una célula a otra.

ESPORA BACTERIANA.

Ciertas bacterias Gram positivas pueden sintetizar un órgano de resistencia que

les permite sobrevivir en condiciones más desfavorables, y se transforma de nuevo en una forma vegetativa
cuando las condiciones del medio vuelven a ser favorables. Esta espora, bien estudiada gracias a la
microscopia electrónica, contiene la información genética de la bacteria la cual está protegida mediante dos
cubiertas impermeables. Se caracteriza por su marcado estado de deshidratación y por la considerable
reducción de actividades metabólicas, lo que contrasta con su riqueza enzimática. La facultad de esporular
está sometida a control genético y ciertos gérmenes pueden perderla. La germinación de las esporas es
siempre espontánea. Da lugar al nacimiento de una bacteria
idéntica al germen que había esporulado.

Las bacterias están rodeadas por dos membranas, separadas por

el espacio periplasmático, donde se encuentra una red de
proteoglicano. Algunas bacterias poseen pared celular delgada -
es rígida y sirve de protección mecánica- p.e. Echerichia coli, y
una poco común membrana externa (presenta unos poros
formados por una proteína llamada porina por los cuales entran y
salen las moléculas. Estas bacterias no se tiñen con Gram y por
consiguiente se clasifican como Gram negativas. Otras bacterias
tienen una pared celular más gruesa y carecen de membrana externa, sí se tiñen con Gram y por lo tanto se
las clasifica como Gram +.

La membrana interna - llamada membrana plasmática- es una estructura lipoproteica que sirve de
barrera para los elementos presentes en el medio circundante, tales como la resistencia a los antibióticos.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

CLASIFICACIÓN DE LAS BACTERIAS DE ACUERDO A SU FORMA

1-

BACILOS
Tienen forma de bastones, pudiendo estar aislados o formando largas cadenas, como el bacilo del
Carbunco.
Ejemplos de enfermedades transmitidas por bacilos
Tuberculosis - lepra
Difteria - tétanos

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2-COCOS
Tienen forma esférica. De acuerdo a la disposición que tengan se clasifican en:

DISPOSICION NOMBRE EJEMPLO ENFERMEDAD

DE a DOS diplococo gonococo gonorrea

Neumococo neumonía
FORMANDO
CADENAS estreptococo fiebre reuma-
Tica /escarlatina
FORMANDO
RACIMOS estafilococo infecciones en
piel
ESPIRILOS Y ESPIROQUETAS:

COMA o espirilos vibrio coma cólera

POCAS ESPIRAS

MUCHAS espiroquetas treponemas sífilis

ESPIRAS pálido

Nutrición de las bacterias:

a- heterótrofa:
La mayor parte son heterótrofas y deben utilizar alimento orgánico sintetizado por otros organismos, ya que
no son capaces de sintetizarlo por si mismas. La obtención de dicho alimento puede hacerse por varios
mecanismos:
1- saprofitas: viven sobre materia orgánica muerta. Tienen vida libre.
2- comensalismo
3- simbiosis
4- parasitismo
b- autótrofa:
Son las bacterias que pueden sintetizar su propio alimento orgánico a partir de sustancias inorgánicas.
Pueden ser:
1- fotosintéticas: son las bacterias purpureas y las sulfobacterias. Utilizan luz de tipo infrarrojo, por lo
cual pueden hacer fotosíntesis sin que exista casi, luz visible.
2- quimiosintéticas: utilizan la energía de ciertos compuestos orgánicos al oxidarse.

Las bacterias, de acuerdo a la utilización del oxígeno pueden clasificarse en:

1- aerobias: necesitan oxigeno
2- anaerobias: no necesitan oxígeno. Dentro de ellas existen las
a- anaerobias estrictas: no sólo no utilizan oxigeno sino que, además, cuando lo hay no
pueden vivir, el oxígeno es un veneno para ellas. Ejemplos: bacterias productoras del tétanos y la gangrena
gaseosa.
b- anaerobias facultativas: no utilizan el oxígeno, pero si hay, no les afecta y hasta pueden
aprovecharlo.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Reproducción de las bacterias:

Se reproducen por un mecanismo asexual de división celular simple o amitosis. La división de algunas
bacterias es muy rápida, ya que en 14 horas
por ejemplo pueden formar 250.000
descendientes.

Sin embargo, con este tipo de reproducción,

la única posibilidad de una bacteria para
adquirir nueva información seria por mutación
del ADN. Existen otros mecanismos de
pasaje de información genética de una
bacteria a otra, para compensar esa poca
variabilidad genética de la reproducción
asexual. Consisten en el pasaje de
información de una bacteria a otra de la
misma generación (hermanas) , llamado
mecanismo parasexual de transmisión
genética.

RICKETTSIAS : Son microorganismos causantes de enfermedades humanas , con una estructura similar a la
de las bacterias desde el punto de vista celular , pero con características que las asemejan a los virus , ya
que son parásitos intracelulares obligatorios , no se pueden reproducir si no es dentro de células vivas.
Tienen un tamaño intermedio entre bacterias y virus (0,3 a 0,7 um). Se ven con el microscopio óptico.
Ejemplos de enfermedades transmitidas por rickettsias: el tifus, que es producido por una rickettsias y
transmitido por la picadura de un piojo. La fiebre de las montañas rocosas (EEUU) es producida por una
rickettsias y transmitida por la picadura de una garrapata. Ej: el tifus es producido por una rickettsia
transmitida por el piojo, la fiebre de las montañas rocallosas (EEUU) es producida por una rickettsia
transmitida por la picadura de la garrapata.

MICOPLASMAS
Son organismos que se asemejan a las bacterias, pero de menor tamaño y sin pared celular. El tamaño es
similar al de los virus. Miden 0,1 a 0,2 micrones. Esto equivale a una masa mil veces menor a la de una
bacteria y un millón de veces menor que una célula humana. Se consideran las formas de vida más simples
que existen, ya que son del tamaño de los virus, pero son células y por lo tanto seres vivos. Parásitos
intracelulares.

EL CICLO VITAL DE LAS CELULAS

El ciclo celular de los procariontes es rápido y sencillo. La replicación del único cromosoma comienza en una
secuencia particular del ADN, el origen de replicación que está anclado en la membrana celular. Una vez
completada la replicación, la conjunción de la nueva membrana y pared celular forma un tabique que
finalmente divide a la célula en dos. (30 minutos) amitosis o división binaria

El ciclo celular de las eucariotas es más complejo y está bajo control celular
La dinámica de la célula se comprende mejor si se examina el curso de su vida. Surge una nueva célula
cuando una se divide o cuando dos de ellas, como el espermatozoide y el ovocito se fusionan. Cualquiera de
los dos fenómenos inicia un programa de replicación celular que está codificado por el ADN y es ejecutado
por las proteínas. Este programa suele incluir un período de crecimiento celular durante el cual se elaboran

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

proteínas y se replica el ADN, seguido por la división celular, cuyo resultado es la aparición de dos células
hijas. Que una célula dada crezca y se divida es una decisión muy bien regulada por el organismo, la cual
asegura que un individuo adulto reemplace las células desgastadas o produzca mas células en respuesta a
una nueva necesidad. P.e el crecimiento de un músculo en respuesta al ejercicio y la proliferación de
eritrocitos ante la escasez de oxígeno de las grandes alturas. Sin embargo, en una enfermedad muy
importante y devastadora, el cáncer, las células del cuerpo se multiplican aunque el cuerpo no lo necesita.
La vida de la célula comienza cuando esta se origina y
termina cuando muere o se divide para formar células
hijas. La serie de eventos que ocurren desde que la
célula nace hasta que origina células hijas, se
denomina ciclo celular.
Por lo tanto el ciclo celular puede dividirse en dos
grandes partes: la división celular y el periodo en el
cual la célula no se está dividiendo, equivocadamente
llamado periodo de reposo, que se denomina
Interfase.
La Interfase se divide en tres periodos llamados G1, S
y G2.
El periodo G1 se extiende desde que la célula se
origina hasta que comienza la duplicación del ADN de
la misma.
El periodo S es durante el cual se produce dicha
duplicación del ADN.
El periodo G2 es el que va desde el fin de la duplicación o síntesis de ADN hasta que la célula se divide.
S y G2 son periodos relativamente constantes en su duración.
G1, en cambio, es muy variable, pudiendo ser el único periodo en que se encuentre una célula durante toda
su vida.
La permanencia indefinida en G1 de una célula se denomina G0 .Una célula que se encuentra en G0 no
avanza en el ciclo celular , no pasa nunca al periodo S , ni al G2 , y por lo tanto no se divide . Está
"condenada" a permanecer siempre en G1.
Este es el caso de la neurona. El individuo humano nace con un número de neuronas determinado y no
pueden originarse nuevas neuronas después del período embrionario, de modo que las que mueren, ya sea
por envejecimiento o por patología, no pueden ser repuestas, y las consecuencias de esa muerte de
neuronas, ya sea parálisis u otras alteraciones, no pueden ser solucionadas en este momento de la ciencia.
El ciclo celular está cronometrado de manera muy precisa
La mayoría de las células eucariotas vive de acuerdo con un reloj interno; o
sea que progresan a través de una secuencia de fases, llamadas en
conjunto ciclo celular, en la cual se duplica el DNA durante la fase de
síntesis (S) y las copias se distribuyen en extremos opuestos de la célula
durante la fase mitótica (M) fig1-9
La mayor parte de las células eucariotas demora entre 10 y 20 horas en
duplicarse. Muchas células en animales adultos como las neuronas y las
células del músculo estriado, nunca se dividen. Han salido temporalmente
del ciclo celular después de la mitosis y han entrado en un estado de pausa
o latencia llamado G0. La mitosis es un mecanismo de los eucariontes para repartir en forma equitativa el
genoma en la división celular. Para realizar esta compleja tarea, las células vegetales y animales construyen

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

una máquina especializada (el aparato mitótico) que captura los cromosomas y luego los traccionan y los
empuja hacia los polos opuestos de la célula.

ORGANIZACIÓN DE LOS SISTEMAS VIVIENTES

En el planeta donde vivimos existen numerosas formas de vida. Básicamente hay tres niveles de complejidad
de los sistemas vivientes, con grandes diferencias entre ellos

Virus, viroides y priones

Procariontes o procariotes

Eucariontes o eucariotes

Virus: nivel de agregados macromoleculares

¿Qué tienen en común, el SIDA, la rabia y el mosaico del tabaco? La respuesta es que todas estas
enfermedades son causadas por virus, que se encuentran en el umbral entre los seres vivos y la materia
inanimada, por lo que no se les considera verdadero organismos. Presentan unas pocas propiedades de la
vida, como la reproducción, pero no metabolizan y son incapaces de reproducirse fuera de una célula
huésped.

Hacia fines del siglo pasado se formuló la teoría de que cada enfermedad era producida por un germen
específico. Hasta ese momento los patólogos estaban convencidos de que para cada enfermedad sería
posible encontrar el microorganismo responsable, utilizando las siguientes técnicas: a) observación del
germen con la ayuda del microscopio, b) cultivo sobre un medio nutritivo y c) retención por filtros. Sin
embargo, en 1892, Iwanowski (o Ivanovsky?) pudo demostrar que el agente productor de la enfermedad del
mosaico de tabaco pasaba a través de los filtros para bacterias y no podía ni verse ni cultivarse. Luego en
1898 Beijerinck, determinó que la enfermedad del mosaico del tabaco era provocada por un nuevo agente
infeccioso a los que denomino virus filtrables (virus: palabra de origen latino que significa veneno). Los virus
están ampliamente distribuidos en la naturaleza y afectan a todo tipo de organismos, tanto del reino animal,
vegetal o protista.

.A lo largo del siglo XX se descubrió a los virus como causantes de enfermedades infecciosas para las
cuales no se había encontrado una bacteria, hongo o protozoario como agente responsabl e. Fue el
desarrollo de nuevas técnicas como los cultivos celulares, el mejoramiento en microscopía y el advenimiento
a fines del siglo XX de técnicas de Biología Molecular, que han permitido no sólo aislar e identificar agentes
virales, sino además un avance extraordinario en el conocimiento a nivel molecular en detalle de la biología
de los mismos

CARACTERISTICAS GENERALES
Las primeras características diferenciales de los virus con otros agentes fueron: el tamaño estimado por su
capacidad de atravesar filtros que retienen a las bacterias y la incapacidad para reproducirse en medios
biológicos inertes (como medios de cultivos para bacterias), requiriendo para su propagación de animales o
cultivos celulares. Hoy día se sabe que estas características no alcanzan para diferenciar a los virus de
otros agentes biológicos, ya que existen bacterias cuyo tamaño puede ser similar al de los virus más
grandes, y que otros agentes como Chlamydias y Rickettsias, también son parásitos intracelulares
obligatorios

Los virus no son seres vivos

Virión : partículas virales o virus potencialmente infecciosos.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

TAMAÑO Y FORMA
Tamaño: 30 a 300 nm.
La forma de los virus está determinada por la disposición de los capsómeros clasificándose en:
a- helicoidales: los capsómeros se disponen en hélice y el ácido nucleico se encuentra entre las
vueltas de la misma. Ejemplo: virus del mosaico del tabaco, de la gripe
b- poliédricos: la cápside tienen forma de poliedro, con frecuencia de icosaedro. Ejemplo: virus de la
polio, virus de las verrugas.
c- combinados: tienen una cabeza poliédrica y una cola helicoidal. Ejemplo: bacteriófagos (son los
virus que parasitan sólo células bacterianas).

ESTRUCTURA Como ya se mencionó anteriormente la estructura de un virus está basada en su

simplicidad, a pesar de esto existe diversidad, lo que es utilizado para la clasificación de los virus.

1- Virus desnudos: La estructura de los virus más simples está compuesta por un solo tipo de ácido
nucleico (ADN o ARN) rodeado de una cáscara proteica que se denomina cápside (del griego capsa que
significa caja) que resulta de la reunión de subunidades proteicas codificadas por el genoma viral que se

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

ensamblan basados en principios geométricos y pueden determinar diferentes tipos de simetrías

(icosaédricas o helicoidal, principalmente)
Esta estructura básica de ácido nucleico y cápside recibe el nombre de nucleocápside y constituye en los
virus desnudos la partícula viral completa o virus que se diferencia del término virión el cual es utilizado
para aquellas partículas virales o virus potencialmente infecciosas.
Cuando se observa al microscopio electrónico una cápside viral, pueden observarse estructuras
morfológicas denominadas capsómeros que resultan de la unión por enlaces de las subunidades
proteicas. La forma de distribución de los capsómeros así como el número de ellos depende de cada tipo
de virus.

2- Virus envueltos: La estructura de las partículas virales del grupo de virus denominados envueltos, está
formada además de la nucleocápside por una envoltura que la rodea de origen celular ya que los virus
envueltos la obtienen en el proceso de liberación por brotamiento . En dicha envoltura se insertan
glicoproteínas de origen viral que reciben el nombre de espículas o glicoproteínas de superficie y que
tienen un importante papel de reconocimiento de receptores específicos de la superficie celular en el paso
inicial de relación con la célula huésped para la multiplicación viral.

Ácidos nucleicos:
El ácido nucleico que lleva la información genética y que constituye el genoma viral puede tener varias
formas. Como ya se mencionó, una partícula viral tiene en su estructura un solo tipo de ácido nucleico ADN o
ARN, pero la forma de estos puede ser de doble o simple cadena, segmentado o no, circular, lineal,
determinando pues, una gran diversidad, lo cual también es ampliamente utilizado en la taxonomía viral.
Entonces:
Están compuestos por:
1- ácido nucleico: ADN o ARN, nunca los dos juntos. Puede tener una molécula simple o doble y, en
el caso del ADN, esta puede ser además, circular. Ejemplos:
Virus de ARN único: virus de la polio
Virus de ARN doble: virus de la gastroenteritis del niño
Virus de ADN único: infecciones en perros
Virus de ADN único circular: bacteriófagos
Virus de ADN doble: herpes
Virus de ADN doble circular: verrugas
MULTIPLICACION VIRAL
Una partícula viral puede encontrarse en dos estados: inactiva o activa. Para demostrar el estado inactivo,
basta incluir una suspensión de virus en un medio de cultivo y observar que son incapaces de cumplir
actividades metabólicas necesarias para su multiplicación. Se deduce de ello, que los virus carecen como ya
se mencionó anteriormente de maquinaria enzimático que les permita autoreplicarse, aun cuando se les
brinde nutrientes que serían adecuados para la propagación de las bacterias más exigentes. Pero si una
partícula viral es incorporada a células vivas sensibles, se comporta en forma activa, y por lo tanto tomará el
comando de la maquinaria enzimático de la célula huésped logrando así su replicación. La multiplicación de
los virus animales, vegetales y bacteriófagos resulta similar en sus principios pero, cada una de ellas tiene
particularidades; esto basado principalmente en las diferencias entre las células que infectan. El desarrollo del
conocimiento sobre la multiplicación de los virus animales ha sido posible por la utilización en el laboratorio de
varios sistemas de aislamiento de virus en los cuales se puede estudiar el proceso de multiplicación viral. En
un principio fueron animales y huevos embrionados los sistemas más comúnmente usados, pero actualmente
esto ha sido casi totalmente sustituido por cultivos celulares, que ha favorecido el conocimiento de las etapas
de la multiplicación viral.

INFECCION VIRAL

Los Bacteriófagos que infectan células huésped, pueden establecer dos tipos de procesos:

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

1- Ciclo Lítico: en este tipo de ciclo el virus produce inmediatamente gran cantidad de ácidos nucleicos virales
y proteínas de la cápside. Estos se ensamblan produciendo nuevas partículas virales que son liberadas al
medio al producirse la lisis celular.

2- Ciclo Lisogénico: en este ciclo la relación entre célula huésped y virus, puede prolongase por periodos
variables de tiempo. El virus integra su genoma al cromosoma bacteriano, replicándose conjuntamente el
ácido nucleico del parásito y el del huésped. Un virus bacteriano integrado al cromosoma se denomina
profago. Por lo tanto el profago se replica junto con el ADN bacteriano. En determinadas circunstancias (por
ejemplo

Ruptura del ADN bacteriano por luz ultravioleta o agentes químicos), el profago se activa, y comienza la
producción de ácido nucleico viral y proteínas virales, produciendo luego la lisis celular. Las bacterias que
portan profagos se denominan lisogénicas. Los Bacteriófagos que pueden integrarse como profagos y que no
lisan inmediatamente a las células se denominan fagos atenuados.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Las etapas fundamentales de la infección viral son:-

1. Adsorción-
2. Penetración-
3. Denudación-
4. Latencia-
5. Replicación-
6. Maduración-
7. Liberación

1. Adsorción
Intervienen varios factores. Hay una atracción por fuerzas iónicas. A pH 7 los virus y las células tienen cargas
negativas de modo que es necesario la presencia de iones positivos, cumpliendo muy eficazmente este
requerimiento los iones de Magnesio. Otro factor importante en esta etapa es la interacción de sitios
específicos de la partícula viral con receptores celulares específicos. Esto determina la especificidad de
algunos virus para crecer en células de origen específico, por ejemplo, el virus de polio sólo puede crecer en
células de origen humano y de primates. Otros virus presentan estructuras especializadas en su superficie
que les permiten cumplir con esta etapa de forma muy especializada. Estas estructuras son glicoproteínas las
cuales reconocen receptores celulares específicos y se pueden aislar hoy día esos elementos en forma de
complejos virus-célula.

2. Penetración
La penetración de los virus una vez adsorbidos, puede realizarse de varias maneras

a. Por viropexis : Es un proceso de ENDOCITOSIS, por el cual se produce una invaginación de la membrana
plasmática, de modo que el virus queda englobado en una vesícula dentro del citoplasma celular. Es el
mecanismo más común de penetración de los virus.

b. Por penetración: En algunos, la penetración acontece por un simple cruce de la membrana plasmática, así
la partícula viral queda directamente incluida en el citoplasma.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

c. Por fusión: Otro tipo de penetración se da por fusión de la envoltura viral con la membrana plasmática.
También en este caso el virus es directamente incorporado al citoplasma.
3. Denudación
En esta etapa se produce la desintegración del virus, dejando libre al ácido nucléico, que comanda su propia
replicación y la de las proteínas necesarias para integrar nuevas partículas.
La forma en que un virus pierde la cápside y su envoltura, en el caso de tenerla, es característico de cada
grupo de virus.

4. Latencia
Los fenómenos descritos (adsorción, penetración y denudación) culminan con la desintegración de las
partículas, pero no siempre el proceso progresa hasta la replicación viral. Si interrumpimos el ciclo en esta
etapa llamada latencia, el ácido nucleico liberado de sus envolturas queda en la célula hasta que en algún
momento continúe el ciclo. También puede unirse al ADN de la célula, llamándose “provirus” y permaneces
ahí hasta que continúe el ciclo o incorporarse definitivamente al genoma .

Si el proceso normal continúa, comienza la replicación del ácido nucleico y síntesis de las proteínas
estructurales y no estructurales necesarias para la producción de virus.

5. Replicación del ácido nucleico

La replicación es un fenómeno muy heterogéneo por cuanto existe mucha variedad en los ácidos nucleicos de
origen viral; se recordará que hay ADN y ARN muy diferentes, de una o dos hebras, segmentados o no, etc.
En todos los casos, el genoma viral es el elemento capaz de gobernar su autoreplicación y de trasmitir la
información estructural y funcional a la progenie resultante de una infección. No obstante, la diversidad
señalada, intervienen en la replicación elementos comunes que vale la pena destacar, tales como la
formación de un ARN mensajero capaz de traducir en el ribosoma celular las proteínas codificadas por el
genoma viral. Además, sea cual sea el ácido nucleico, siempre se diferencian dos conjuntos de genes, los
precoces y los tardíos. Los primeros serían los encargados decodificar proteínas necesarias para la copia de
la molécula de ácido nucleico, y los tardíos encargados de codificar proteínas estructurales y proteínas para el
ensamblaje.

La replicación puede producirse en el núcleo o en el citoplasma de la célula, y eso dependerá del tipo de
ácido nucleico que constituye el genoma viral. Los virus que contienen ARN se replican en el citoplasma,
mientras que aquellos que tienen ADN se replican en el núcleo.
Los virus ADN sintetizan un ARN mensajero por intermedio de una polimerasa que pasa al citoplasma donde
se producirá la síntesis proteica; de estas proteínas algunas tienen funciones estructurales y formarán los
capsómeros que al unirse constituirán la cápside. Otras proteínas tendrán funciones enzimáticas, de
polímeros, y se introducirán en el ácido nucleico promoviendo la replicación del ADN vírico.
Los virus con ARN revisten un interés especial por la diversidad de formas de replicación que existen: esto
depende de que ARN pueda actuar como mensajero y se le denomina convencionalmente de polaridad
positiva o, por el contrario, que posea una secuencia de bases complementarias del mensajero y se le
denomina de polaridad negativa.

 En los virus con ARN positivo, el ARN sintetiza proteínas que se utilizan para armar la cápside y
replicar el virus directamente.
 En los virus con ARN negativo, el ARN primero tiene que sintetizar ADN, por medio de una enzima
llamada transcriptasa inversa . Luego ese ADN viral sintetiza proteínas que se utilizan para armar la
cápside y replicar el virus

6. Maduración

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Hay virus cuya única cubierta es la cápside, son virus desnudos, en contraposición a aquellos que poseen
envoltura por fuera de la cápside que son los virus envueltos. Es conveniente considerarlos por separado en
este punto que significa la culminación en la formación de una progenie viral.

Para los virus desnudos, el fenómeno de maduración consiste simplemente en la unión de los capsómeros
para formar la cápside y la posterior unión de esta con el genoma viral

En los virus que poseen envoltura, la maduración es más compleja ya que además de la unión del ácido
nucleico con la cápside, el virus debe rodearse de la envoltura. Luego de haberse formado la cápside, la
partícula se aproxima a la membrana plasmática, produciéndose la evaginación de la membrana con el
posterior desprendimiento del brote.

7. liberación
Se realiza por
 Brotamiento o gemación
 autolisis celular.

El rango de los hospedadores es restringido: bacteriófago, virus animales y virus vegetales. La especificidad
de los virus está dada por receptores de superficie, por ejemplo el del HIV es la proteína GP120 que
interactúa con una proteína específica de los Linfocitos T, la CD4 que permite su entrada.

Viroides y priones

Viroides Los viroides son agentes infecciosos que poseen al igual que los virus un solo tipo de ácido nucleico
y son parásitos absolutos, pero y esta es la gran diferencia con los virus, carecen de Cápside y envoltura. Por
lo tanto los viroides están constituidos solo por una secuencia de nucleótidos, además los Viroides carecen de
información para la síntesis de proteínas, en cambio los virus siempre poseen dicha capacidad.
Son partículas infecciosas extremadamente simples constituidos por ARN circular de muy bajo peso
molecular, sin cápside protectora. Producen enfermedades hasta el momento exclusivamente en plantas.
Alteran el mecanismo de la expresión génica – son parásito intracelulares (con posibilidad de supervivencia
extracelular) Se replican en el nucleolo de la célula huésped. Se transmiten de planta a planta a través de las
heridas de superficie.

Priones. Ciertos agentes de afecciones degenerativas del sistema nervioso central del hombre han sido
clasificados como virus no convencionales, ya que no ha sido posible determinar la presencia de estructura
similar a virus en el material infectante ni el tipo de ácido nucleico de estos agentes. Son agentes
extremadamente resistentes a sustancias que inactivan los virus comunes, y algunos han propuesto que
corresponderían a viroides patógenos del hombre. Los priones han sido descriptos en los últimos años como
causantes de muchas enfermedades del sistema nervioso comentadas anteriormente, principalmente el
llamado scrapie en el ganado ovino y la encefalopatía espongiforme bovina BSE o comúnmente conocida
como síndrome de la “vaca loca".

En el hombre serían los agentes relacionados con la enfermedad de Creutzfeld-Jacob y Kuru. Estos agentes
son estructuralmente más simples que los virus aun, pues estarían formados únicamente por proteínas.
Cuando se descubrieron estos agentes, parecía que se podía producir una gran revolución en el conocimiento
de la Biología ya que la idea de que una proteína pudiera autoreplicarse estaría en contradicción con el
dogma central de que la información genética es transmitida en el sentido ácido nucleico a proteína. El
hallazgo de los priones y el avance en el conocimiento de su biología podrán dilucidar probablemente muchas
enfermedades aún sin resolver. Muchas son las investigaciones que se realizan en estos momentos y las
hipótesis propuestas para explicar la Biología y permanencia de estas proteínas extremadamente resistentes
a sustancias que inactivan los virus comunes.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Es decir carecen completamente de ácidos nucleicos. Es esta la razón por la cual fue resistida durante mucho
tiempo, la hipótesis de que las proteínas por si solas podían ser la causa de enfermedades infecciosas. De
acuerdo al dogma imperante hasta 1980, las enfermedades transmisibles (infecciosas) necesitaban material
genético, para que la infección se asentara en el huésped. Hasta ese momento eran los virus los agentes
infecciosos más pequeños conocidos, y todos ellos poseen ADN o ARN como material genético necesario
para codificar sus proteínas y dirigir la replicación viral en el huésped.

Pero ahora sabemos que las partículas proteínicas infecciosas (priones), pueden ser el sustrato de diversas
enfermedades, hereditarias o contagiosas. Este comportamiento dual tanto infeccioso como hereditario era
desconocido. Posteriormente se descubrió que los priones se multiplican por una vía increíble y desconocida
hasta ese momento: convierten proteínas normales en MOLECULAS INFECCIOSAS, con solo alterar la
estructura proteica.

Las encefalopatías espongiformes transmisibles (EET), son las enfermedades degenerativas del sistema
nervioso central que afectan a animales y seres humanos causadas por los priones. Se denominan
espongiformes ya que el cerebro adquiere un aspecto parecido al de una esponja. Las EET que sufren los
seres humanos son el Kuru (o muerte de la risa), la enfermedad de Creutzfeldt -Jakob (ECJ), el síndrome de
Gerstman-Straussler-Scheinker (GSS) y el insomnio Familiar Fatal (IFF); las EET de animales, incluyen el
scrapie (del ingles to scrape, raspar, por la tendencia de los animales infectados a rasparse contra postes ,
troncos o cercas para combatir la picazón) de ovejas y cabras, la enfermedad de agotamiento crónico de
mulas y ciervos en cautiverio y la encefalitis espongiforme bovina (EEB), o enfermedad de la vaca loca.

Las EET se caracterizan por su prolongado periodo de incubación (en el hombre puede tener un periodo de
incubación de 30 o más años), generalmente asociadas a declives progresivos de las funciones motoras y
cognitivas (enfermedad activa), y por su evolución inevitablemente fatal. Las EET en el ser humano
generalmente aparecen en personas de edad avanzada.

Aparentemente todas las EET son causadas por el cambio en la estructura de una proteína normalmente
presente en las membranas celulares, denominada proteína priónica (PrP). La forma anormal de la PrP se
designa PrPsc (scrapie), para diferenciarla de la forma normal llamada PrP c (celular). La secuencia de
aminoácidos (estructura primaria) de la PrPc y la PrPsc es idéntica lo que varía es su conformación
(plegamiento en el espacio). De acuerdo a esta teoría la proteína alterada (PrP sc), puede unirse a la proteína
normal (PrPc) y cambiar su conformación, transformándola a su vez en una proteína alterada. De esta forma
se propagaría la enfermedad y se generarían nuevas proteínas infecciosas. De esta forma el pasaje de la
forma normal a la patológica es catalizada por el mismo prion (PrPsc), por lo tanto solo hace falta una pequeña
cantidad de este para provocar la transformación de toda la proteína normal, ya que se trata de un fenómeno
de crecimiento exponencial.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

MECANISMOS PARASEXUALES DE TRANSMISION GENETICA BACTERIANA

Existen tres formas de transmisión parasexual:

1 a- la transformación: Frederick Griffith (1928) estaba estudiando la posibilidad de desarrollar

vacunas contra Streptococcus neumoniae. En aquellos días, antes de los antibióticos, era una
enfermedad grave. Como sabía G. esta bacteria poseía formas virulentas y no virulentas o inocuas. Las
virulentas estaban encapsuladas y las no virulentas no, la presencia de la cápsula interfería con el
proceso de fagocitosis que efectúan los glóbulos blancos del hospedador. La producción de la cápsula
está determinada genéticamente. G. se preguntó ¿habían revivido? O algo había sido transferido? En
años siguientes se demostró en laboratorio que el factor transformante era el ADN. Fragmentos de ADN
de una bacteria, libre el medio, podían atravesar la m.p de otra bacteria y sustituir fragmentos homólogos
de su cromosoma, cambiando la información genética de la bacteria “aceptora”. De esta manera, si se
extrae ADN de una bacteria virulenta, con cápsula, y se lo mezcla con bacterias no virulentas, sin
cápsula, algún fragmento de ADN con los genes de la virulencia, pueden atravesar la m de la bacteria no
virulenta, insertarse en el cromosoma de ella y transformarla en virulenta.

b- la conjugación unidireccional: Es un proceso por el cual una bacteria, llamada "dadora"

transmite una réplica de su material genético a otra bacteria que lo recibe, llamada "aceptora". La
característica que confiere a las bacterias la capacidad de ser dadoras es la presencia del llamado factor F ,
una molécula de ADN de 100.000 nucleótidos que se encuentra libre en el citoplasma (bacterias F+) , o
integrado al cromosoma (bacterias Hfr). La bacteria que no tiene el factor F (F-) es receptora. El factor F ,
cuando está suelto en el citoplasma es un plásmido o episoma.

La bacteria que tiene factor F tiene unos filamentos llamados pelos sexuales, que le permiten hacer un puente
con otra bacteria que no los tenga, por el que puede pasar ADN. Si una bacteria Hfr se une con una F- le

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

pasa el factor F y algo de ADN de su cromosoma, ya que está todo junto , transformando a la bacteria en
dadora y al mismo tiempo , dándole genes que pueden sustituir los de la bacteria que los recibe , cambiando
sus características genéticas.

Si una bacteria F+ se une con una F- , sólo le pasa el factor F , transformándola en dadora o F+.

Hay otros plásmidos de importancia, como los factores R , que confieren a la bacteria resistencia a ciertos
antibióticos , la cual puede pasar de una bacteria a otra que no lo tenga.

c- la transducción: es la transferencia de ADN de una célula hospedadora a otra por medio de un virus.
Durante el ciclo lítico de muchos virus, el DNA del hospedador se fragmenta, cuando estos virus abandonan
la célula algunos pueden contener fragmentos del ADN hospedador. Dado que la cantidad de ADN que puede
incorporar o empaquetarse dentro de la cubierta proteica es limitada, este virus pierde parte de su información
genética propia y aunque son capaces de infectar a nuevas células hospedadoras no son capaces de
completar el ciclo lítico sin embargo los genes que llevan pueden incorporarse al nuevo hospedador. En caso
de virus atenuados, cuando los profagos se separan del cromosoma del hospedador para iniciar un ciclo
lítico pueden llevar un fragmento del cromosoma del hospedador. La cadena que a continuación se copia a si
misma obteniéndose ADN doble cadena. Por lo tanto este ADN doble cadena se obtuvo a partir de ARN. La síntesis del
ADN doble cadena ocurre junto con la degradación del ARN original. El ADN doble cadena (provirus), emigra hacia el
núcleo y se integra en el propio ADN celular. La integración de este ADN doble cadena en el cromosoma del huésped
es necesaria para la síntesis de nuevas moléculas de ARN, por la ARN polimerasa celular, ya que el virus carece
completamente de la maquinaria metabólica necesaria para realizar la transcripción y la síntesis de proteínas
necesarias para la cápside y la misma transcriptasa reversa.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Clasificación o taxonomía de los animales en orden evolutivo

Invertebrados

Son animales que carecen de huesos se clasifican en:

Poríferos.- Animales acuáticos, su cuerpo es cubierto por poros, viven adheridos en el fondo del mar.
Ejemplo: esponjas.

Celenterados.- Animales acuáticos en aguas dulces y marinas, viven en colonias, a cada individuo se le llama
zooide. Presentan células urticantes. Ejemplos: corales, medusas

Platelmintos.- Son gusanos planos, libres o parásitos, hermafroditas, se reproducen por medio de huevecillos
y algunas parasitan al hombre.

Nematelmintos.- Son gusanos redondos y lisos, unisexuales, su aparato digestivo es completo y abierto,
todos son parásitos. Ejemplo: lombriz intestinal, filaria, triquina.

Anélidos.- Son gusanos redondos y segmentados, a cada segmento se le llama metalero, pueden ser
acuáticos o terrosos, construyen galerías son hermafroditas con fecundación cruzada. Y se reproducen por
medio de huevo. Ejemplo: lombriz, sanguijuela.

Artrópodos. Son animales que ya presentan su cuerpo dividido en cabeza, tórax, abdomen y patas
articuladas.

Insectos.- Animales que presentan 3 pares de patas, 2 antena, 2 o 4 alas y sufren metamorfosis. Ejemplo:
mosca, mariposa.

Arácnidos.- presentan dos pedí-palpos que son estructuras para capturar a sus presas, tienen 4 pares de
patas, su cabeza está unida al tórax y viven en las regiones áridas. Ejemplo: araña, escorpión.

Crustáceos.- Su cuerpo está cubierto por una cabeza, tienen 4 pares de patas y 2 pares de antenas, se
reproducen por medio de huevos. Ejemplo: camarón, cangrejo.

Miriápodos.- Son animales de cuerpo aplanado y divididos en segmentos, presentan un par de patas en cada
segmento. Ejemplo: ciempiés,

Moluscos.- Animales acuáticos o terrestre, su cuerpo es blando, algunos tienen tentáculos. Se reproducen por
medio de huevo. Ejemplo: pulpo, caracol.

Equinodermos.- Son acuáticos y marinos, su cuerpo presenta cinco ejes, viven en el fondo del mar y pueden
adherirse a las rocas. Ejemplo: estrella de mar, erizo.

b. vertebrados

Son animales pluricelulares que poseen columna vertebral, se clasifican en:

Peces.- Son acuáticos, su cuerpo cubierto por escamas, sus extremidades se llaman aletas, su respiración es
branquial, acrecen de párpados, presentan vejiga natatoria que permite su estabilidad.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Anfibios.- Viven en 2 medios, tienen 4 extremidades que terminan en 4 o 5 dedos cada unas, su piel está
cubierta por viscosidad, son unisexuales, ovíparos y sufren metamorfosis. Ejemplo: rana, sapo, salamandra.

Reptiles.- Su cuerpo cubierto de escamas o caparazón, sus patas son muy cortas o carecen de ellas, por esta
razón se arrastran, su respiración es pulmonar, son ovíparos, algunos son venenosos o inyectan ponzoña al
hombre.

Aves.- Su cuerpo cubierto de plumas, sus maxilares se llaman pico, sus huesos de las alas son huecos, sus
patas están adaptadas al caminar, nadar, a la carrera. Su respiración es pulmonar y todos son ovíparos.

Mamíferos.- cuerpo cubierto de pelo, presentan glándulas mamarias que en las hembras producen leche para
alimentar a sus crías, es vivíparo, su respiración es pulmonar, sus extremidades: uña, pezuña, garra; su
alimentación es variada, pueden ser acuáticos y terrestres y son los seres más evolucionados.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

PARTE 2
MEMBRANAS: ESTRUCTURA, QUÍMICA Y FUNCIÓN.
A- Membrana celular o membrana plasmática.
Resulta difícil explicar la estructura y función de la célula y organelos celulares sin considerar el papel que
desempeña la membrana celular. Para llevar a cabo las reacciones necesarias para el mantenimiento de la
vida, las células necesitan mantener un medio interno adecuado; esto es posible por que la célula se
encuentra separada del medio extracelular por una membrana limitante. Membranas internas en células
eucariotas proporcionan compartimientos adicionales que limitados por membranas, llevan a cabo funciones
específicas necesarias para la supervivencia de la célula.
Las membranas celulares son cruciales para la vida celular. La membrana plasmática rodea a la célula
definiendo su extensión, constituye una barrera flexible y fuerte que envuelve y contiene el citoplasma o
matriz de la célula.
Esta membrana posee una estructura básica común a todas las células, aunque cada tipo celular contiene
proteínas específicas que le ayudan a controlar el intercambio de sustancias, según sus necesidades.
- Es una estructura continua que rodea a la célula. Por un lado, está en contacto con el medio interno
(citoplasma) y, por el otro, con el externo (medio extracelular).
- Tiene un espesor de 75 a 100 A.(10 nm)

Breve Historia de la membrana plasmática

Aunque los primeros estudios con el microscopio demostraron la existencia de células en todos los seres
vivos, la membrana que rodea las células no se podía ver debido a su pequeño tamaño que no alcanzaba a
ser resuelto por el límite de resolución de los microscopios utilizados.

1. Naegeli llamó membrana plasmática a una película invisible que envuelve a la célula y es responsable
de fenómenos osmóticos.
2. En 1890 Overton presentó las primeras nociones sobre la naturaleza química de la capa limítrofe
externa de la célula. Overton sabía que los solutos no polares se disolvían con más facilidad en
solventes no polares que en los polares, y que los solutos polares tenían una solubilidad contraria. El
razonó que para que una sustancia entrara a la célula a partir del medio, primero debía disolverse en la
capa limitante externa de esa célula. Para probar la permeabilidad de la capa limitante externa, Overton
colocó pelos de raíz vegetal en cientos de soluciones diferentes que contenían distintas combinaciones
de solutos. Descubrió que cuanto mas soluble fuera el soluto, entraba con más rapidez a las células de
los pelos radiculares. Concluyó que el poder de disolución de la capa limitante externa de la célula
concordaba con la de un aceite graso (que los lípidos presentes en la superficie celular son una especie
de “cubierta”. Una década después Langmuir, estudiando el comportamiento de los fosfolípidos
purificados disueltos en benceno, cuando este se evapora las moléculas permanecen como una lámina
de lípidos de una molécula de ancho-que se denomina monocapa-. Langmuir sabía que los fosfolípidos
son moléculas anfipática que poseen tanto regiones hidrofílicas como hidrofóbicas., y observó en un
estudio el comportamiento de los fosfolípidos en agua y vio que los grupos polares se disponen
perpendicularmente a ella.
3. En el 1925, Gorter y Grendel sacaron los lípidos de la membrana de los eritrocitos y al extenderlos sobre
agua vieron que ocupaban una superficie dos veces mayor a la superficie del eritrocito, deduciendo que
la membrana estaba formada por una bicapa lipídica. También sugirieron que los grupos polares de
cada capa molecular (u hoja) se dirigían hacia fuera, hacia el ambiente acuoso.
4. Cole, en 1932, estudio la tensión superficial de las membranas de óvulos de erizo de mar y vio que era
más pequeña que la tensión superficial teórica de la capa lipídica. En realidad es mayor pero se
confundieron al hacer los cálculos, aunque su interpretación fue correcta concluyeron que la membrana
plasmática tenía que estar formada por otros componentes a parte de los lípidos.
5. Danielli y Dauson, 1935, descubrieron que las proteínas son una parte importante en la membrana
plasmática. Propusieron una estructura de la membrana en forma de sándwich, de tres capas, en la que
los fosfolípidos estarían en el centro formando una bicapa y estarían rodeados por proteínas y para el
intercambio propusieron poros en la membrana plasmática. Este modelo influenció en los especialistas
en biología celular por más de 20 años.
6. Robertson en 1959 elevó el modelo de Danieli al status de teoría denominando la unidad de membrana
y diciendo que todas las membranas de todas las células están construidas por proteínas, doble capa de
lípidos y proteínas, que se ven con el microscopio electrónico en forma de tres líneas, una clara central y
dos oscuras, una a cada lado. Esta imagen de la membrana trilaminar se denomina hoy modelo de
Robertson. En realidad la microscopia electrónica y los estudios de difracción de rayos x concordaban

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

perfectamente con este modelo ya que con el microscopio electrónico se ve una línea electrodensa de
dos nanómetros, presumiblemente formada por proteínas, separadas por una capa interna de 3,5
nanómetros formada por lípidos.
6. Singer & Nicolson en 1972 propusieron el modelo de mosaico fluido de membrana. Este modelo
considera a la membrana una estructura fluida, formada por una doble capa de fosfolípidos (bicapa) en
la cual se encuentran incluidas las proteínas.
Todas las membranas están formadas por lípidos, proteínas e hidratos de carbono, en diferentes
proporciones, constituyendo una estructura dinámica, con una consistencia muy semejante al aceite.
Los lípidos de membrana, mayoritariamente fosfolípidos, se disponen formando una bicapa lipídica,
cumpliendo así una función básicamente estructural.
Las proteínas integrales o intrínsecas, insertas en la bicapa lipídica, tienen gran importancia desde el punto
de vista funcional ya que participan en el transporte de sustancias, en procesos enzimáticos y de
reconocimiento químico; mientras que las periféricas o extrínsecas cumplen básicamente la función de
recepción y transmisión de señales.
Los hidratos de carbono, confinados a la cara extracelular de la membrana, tienen la función de
reconocimiento entre células, interacción con el entorno y a su vez generan un microambiente particular
alrededor de la membrana.

Las membranas celulares ejercen actividades complejas como:

- Constituir verdaderas barreras permeables selectivas que controlan el pasaje de iones y de moléculas
pequeñas.
- Proveer el soporte físico para la actividad ordenada de las enzimas que se asientan en ellas.
- Mediante la formación de pequeñas vesículas transportadoras hacen posible el desplazamiento de
sustancias por el citoplasma.
- La mp participa en los procesos de endocitosis y de exocitosis.
- En la mp existen moléculas mediante las cuales las células se reconocen y se adhieren entre sí y con
componentes de la matriz extracelular.
- La mp posee receptores que interactúan con moléculas del exterior, como hormonas,
neurotransmisores, factores de crecimiento y otros. A través de estos receptores se desencadenan
señales que se transmiten por el interior de la célula.

LA BICAPA LIPIDICA

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La bicapa lipídica se ha establecido como la base universal de la estructura de la membrana celular. Es

fácilmente visible por microscopía electrónica. Sus propiedades son responsables de las propiedades
generales de las membranas celulares.

Lípidos
Son considerados como macromoléculas pero no polímeros, constituyen una categoría heterogénea de
componentes celulares, que se parecen entre si más por sus propiedades de solubilidad que por su
estructura química. El rasgo distintivo de los lípidos es su naturaleza hidrofóbica. Tienen poca, si alguna,
afinidad por el agua, pero se disuelven en solventes no
polares, tales como el cloroformo, el éter. Algunos lípidos son
anfipáticos, es decir, que tienen una región apolar y otra
polar. Cumplen con tres papeles principales en la célula:
reserva energética, estructura de membrana y funciones
biológicas específicas como la transmisión de señales
químicas al interior y en el entorno celular. En términos
de estructura química podemos distinguir seis tipos principales
de lípidos, que son los ácidos grasos, los
Triacilgliceroles, los fosfolípidos, los glicolípidos, los esteroides
y los terpenos

Los ácidos grasos son los ladrillos de varios tipos de lípidos

Hidrocarburos de cadena larga no ramificada con un solo grupo carboxilo en un extremo. Puesto que los
dos extremos de la molécula de ácido graso son diferentes también tienen propiedades diferentes, la
cadena de hidrocarburo es hidrofóbica y el grupo carboxilo es hidrofílico, por ello la molécula es anfipática
que en el agua puede formar micelas.
Los ácidos grasos pueden ser:
- Saturados carecen de doble enlace, es decir los C de la cadena se unen uno a otro por una sola valencia
o ligadura. Se encuentran en las grasas animales y se conserva a estado sólido a temperaturas mayores al
ambiente.
- Insaturados son ácidos grasos que poseen doble ligadura entre C y C, cuanto mas dobles ligaduras,
menor la temperatura de fusión, lo que explica que las grasas vegetales se encuentren a estado líquido y
por ello se denominan aceites.
Algunos ácidos grasos insaturados no son sintetizados por el hombre por lo cual deben ser incorporados
con la dieta, ácidos grasos esenciales. Son moléculas muy energéticas, la oxidación completa de un ácido
graso produce más calorías por gramo que la de cualquier compuesto orgánico.

Los Triacilgliceroles son lípidos de reserva

Están formados por una molécula de glicerol al cual se unen tres ácidos grasos por enlaces éster, que se
forman por pérdida de agua. La función principal es el almacenamiento de energía, también en algunos
animales como aislamiento en temperaturas muy bajas. Los Triacilgliceroles en los que predominan los
ácidos grasos saturados, son generalmente sólidos a temperatura ambiente y se denominan grasas. En los
vegetales, la mayoría de los Triacilgliceroles son líquidos a temperatura ambiente, como sugiere el término
aceites vegetales. Como los ácidos grasos de los aceites predominantemente insaturados, sus cadenas
hidrocarbonadas se retuercen, previniendo el empaquetamiento ordenado de las moléculas. El resultado es
que los aceites vegetales tienen puntos de fusión más bajos que la mayoría de las grasa animales

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Los Fosfolípidos son importantes en la estructura de la membrana

Son lípidos que poseen en su estructura una molécula de fosfato lo que determina su carácter anfipático.
Estas moléculas presentan la propiedad de tener un extremo hidrófobo, que rechaza al agua, y un extremo
hidrofílico, que la atrae. En consecuencia son parcialmente solubles en agua y en grasas. Esta propiedad
los hace muy importantes en las membranas biológicas donde su extremo polar (el fosfato con carga)
hidrosoluble atrae a las moléculas de agua o interactúa con ella en el medio extracelular e intracelular,
mientras que la región opuesta hidrocarbonada (apolar, hidrofóbica) se internaliza en la membrana lipídica.
Existen en las células dos tipos de fosfolípidos, los glicerofosfolípidos, que tienen dos ácidos grasos
unidos al glicerol ya que el tercer oxidrilo del alcohol está esterificado con un fosfato y unido a éste un
segundo alcohol ( colina, etanol amina, inositol , etc.), y los esfingolípidos que contienen un amino alcohol
llamado esfingosina que reemplaza al glicerol.
Todos cumplen importantes funciones estructurales y de señalización.

Glucolípidos: son compuestos que contienen un

grupo hidrocarbonato (carbohidrato), en lugar de un
grupo fosfato, también son antipáticos, debido a la
solubilidad del grupo hidrocarbonato. Al igual que los
fosfolípidos y el colesterol, los Glucolípidos
intervienen en la construcción de las membranas
celulares. Se clasifican en cerebrósido y
gangliósidos.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

LIPIDOS ASOCIADOS: no son lípidos químicamente, pero tienen ciertas propiedades comunes con ellos .

a - Esteroides: lípidos derivados de un compuesto llamado ciclo-pentanoperhidrofenantreno. Uno de los

más difundidos es el colesterol que se encuentra en las membranas y en otras partes de la célula. Los
esteroides asumen diferentes funciones según los grupos químicos, por ejemplo varias hormonas
(estrógeno, progesterona, testosterona, cortisol, aldosterona, etc,) y la vitamina A son esteroides.

b - CAROTENOIDES (vitamina A)
c - UBIQUINONAS
d - TOCOFEROL (VITAMINA E)
e - FILOQUINONA (VITAMINA K)

LOS LÍPIDOS DE MEMBRANA

Explica cuáles son las fuerzas químicas que gobiernan la distribución de lípidos en la bicapa de la
membrana. ¿Por qué se dice que dicha bicapa constituye una barrera? ¿Cuáles son las propiedades
biológicas que la bicapa dota a membrana plasmática? Explícalas

Los lípidos de membranas celulares combinan dos propiedades muy distintas en una misma molécula:
tienen una cabeza hidrofílica (“amante del agua”) y una o dos colas hidrocarbonada Hidrofóbica (que
rehuyen al agua). Todas las moléculas lipídicas de las membranas celulares son anfipáticas, es decir con
propiedades hidrofílicas e hidrofóbicas.
Las membranas están generalmente rodeadas por un medio acuoso, lo que hace que las moléculas de
fosfolípidos debido a su naturaleza anfipática se disponga formando una bicapa lipídica; donde se
diferencia una monocapa externa en contacto con el exterior celular y una monocapa interna en contacto
con el citoplasma o citosol. (Autoensamblado y autosellado)

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La bicapa lipídica dota a la membrana plasmática de dos propiedades muy importantes por su
significado biológico la fluidez y la asimetría.

Asimetría de la bicapa lipídica

La asimetría viene determinada por la composición lipídica de las dos mitades de la bicapa. En su cara
externa se sitúan fundamentalmente los lípidos que contienen colina, Fosfatidilcolina y esfingomielina,
mientras que sobre la cara interna están los fosfolípidos que contienen fosfatidilserina o
fosfatidiletanolamina. Estos lípidos tienen una función muy importante, ya que participan en procesos de
reconocimiento y de comunicación intercelular.

Fluidez de las membranas

Fue en 1970 cuando los investigadores reconocieron que las moléculas individuales de los lípidos son
capaces de difundir libremente a través de la bicapa lipídica. La demostración inicial surgió a partir de
estudios en bicapas sintéticas. El ambiente acuoso dentro y fuera de la célula impide a los lípidos de
membrana escaparse de la bicapa, pero nada impide que estas moléculas se desplacen y cambien de
posición las unas respecto a las otras dentro del plano de la bicapa. Por lo tanto, la membrana se comport a
como un fluido bidimensional a temperatura fisiológica.
La fluidez de la membrana depende de su composición química y de la temperatura, por lo tanto, ante
cambios de temperatura las células son capaces de regular la fluidez cambiando la composición de sus
lípidos
Las longitudes de las colas de los fosfolípidos así como el grado de saturación de las mismas, son factores
determinantes que afectan a la capacidad de las moléculas de empaquetarse unas con otras, determinando
así la fluidez de las membranas.
La cohesión entre las moléculas que constituyen las membranas es mayor si las colas de los fosfolípidos
están constituidos por ácidos grasos saturados, de cadenas simples largas; esta mayor cohesión determina
menos fluidez de las membranas.
En cambio, una menor longitud de las colas de los ácidos grasos y la presencia de dobles enlaces cis
reduce la tendencia a interaccionar entre sí, dificultando el empaquetamiento de los fosfolípidos y
permitiendo que las membranas permanezcan fluidas.
Lo expresado anteriormente, resulta vital para aquellos organismos cuya temperatura varía con la del
entorno; cuando la temperatura disminuye, los fosfolípidos gracias a su actividad enzimática, acortan sus
colas y sintetizan ácidos grasos con dobles enlaces cis, evitando así la perdida de la fluidez.
La conservación de la fluidez, puede considerarse como un ejemplo de homeostasis a nivel celular.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Las moléculas de colesterol también juegan un importante papel en la regulación de la fluidez de las
membranas, sobre todo cuando las temperaturas son bajas, previene el congelamiento, evitando que las
colas de los fosfolípidos se junten y se empaqueten.
Las membranas plasmáticas de las células eucarióticas, sobre todo de las células animales, presentan
cantidades importantes de colesterol (½ fosfolípidos ½ colesterol) mientras que en los vegetales, hongos y
bacterias, carecen de colesterol en su estructura.

Movimiento de los fosfolípidos

Los diferentes componentes de las membranas (lípidos y proteínas) interactúan entre si por interacciones
no covalentes, lo cual permite que se puedan mover o difundir en el plano de la bicapa, es decir que el
estado fluido de la membrana se caracteriza por una mayor libertad de movimiento de sus
componentes.
Decir que la bicapa se comporta como una estructura fluida significa que sus componentes rotan en torno a
sus ejes y flexionar sus colas. Además de estos movimientos, los lípidos pueden pasar de una capa a otra
por un tipo de movimiento llamado flip – flop, el cual es poco común, pero requiere la presencia de una
enzima translocadora o flipasa.

Diferencia entre las distintas membranas celulares

Los tipos de lípidos son sumamente variables encontrándose fosfatidilcolina en un 60% del total en la
membrana del retículo endoplásmico, mientras que solamente un 30% de la membrana de la mitocondria.
La existencia de tanta cantidad de fosfatidilcolina es un marcador característico de la membrana del
retículo endoplásmico .En ella también hay otro lípido llamado dolicol. La existencia de esfingomielina
y colesterol es el marcador diagnóstico de la membrana plasmática ya que se encuentra en mayor
cantidad que en cualquier otra membrana y la
cardiolipina (difosfatidilglicerol) es un lípido
que es característico de la membrana
mitocondrial interna sirviendo también como
marcador diagnóstico.
Vemos entonces como básicamente la
membrana plasmática tiene una bicapa formada
por una mayoría de fosfolípidos con variaciones
entre las membranas de distintos componentes
celulares.

Otras diferencias
 Colesterol

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

En la membrana plasmática la cantidad de colesterol es alta. La membrana de la mitocondria y retículo

endoplásmico tienen muy poco colesterol
 Fosfatidiletanolamina
En la membrana de la mitocondria está en gran cantidad; en la membrana plasmática está en muy poca
cantidad
 Esfingomielina
Está en la membrana plasmática. No está en la membrana de la mitocondria. Esta en muy poca cantidad en
la membrana del retículo endoplásmico.
 Glucolípidos (lípidos asociados con hidratos de carbono)
Están en la membrana plasmática. No están en la membrana de la mitocondria y la del retículo.

En resumen entonces decimos que la bicapa lipídica:

 es fluida,
 las moléculas pueden difundir rápidamente dentro de la bicapa, raramente pueden hacer movimiento de
flip-flop o de molinete,
 son anfipáticas,
 tienen fosfolípidos, colesterol y glucolípidos,
 es asimétrica porque es diferente el lado externo del lado interno de la bicapa.

PROTEINAS DE LA MEMBRANA PLASMATICA

La estructura básica de la membrana plasmática la da la bicapa lipídica, pero sin embargo, las funciones
las producen las proteínas. De acuerdo a la cantidad y a los tipos de proteínas, la composición de la
membrana es muy variable, puede ir desde un 25% de proteínas, hasta un 75%, siendo el promedio que
tenga un 50% de proteínas. Debido a que las moléculas de lípidos son más chicas, en comparación con las
moléculas de proteínas, hay más moléculas de lípidos que moléculas de proteínas a pesar de que están en
una cantidad de 50% de lípidos y 50% de proteínas.

PROTEÍNAS

Son polímeros cuyos monómeros son los aminoácidos

Esto significa que , así como los hidratos de carbono complejos están formados por unidades más simples
que se repiten , que son los monosacáridos , las proteínas , sustancias complejas , están formadas por la
repetición de unidades más simples , que son los aminoácidos

AMINOÁCIDO
Un aminoácido tiene un átomo de carbono central, cuyas cuatro valencias están ocupadas por:
a- radical
b- grupo amino
c- grupo carboxilo
d- H

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

O
C OH
NH2 C H

R
Los grupos amino y carboxilo pueden ionizarse, uno o ambos, dependiendo del aminoácido y del pH del
medio.

Aminoácidos codificados en el genoma:

Los aminoácidos proteicos, o naturales son aquellos que están codificados en el genoma; para la mayoría
de los seres vivos son 20: alanina, arginina, asparagina, aspartato, cisteína, fenilalanina, glicina, glutamato,
glutamina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, prolina, serina, tirosina, treonina, triptófano y
valina.

Sin embargo, hay unas pocas excepciones: en algunos seres vivos el código genético tiene pequeñas
modificaciones y puede codificar otros aminoácidos. Por ejemplo: selenocisteína y pirrolisina que están en
muy pocos seres vivos

Aminoácidos no codificados por el genoma: Existen además de los 20 aminoácidos genomicos

alrededor de 150 adicionales que no se consideran proteicos aunque aparecen en algunas proteínas. Son
derivados de otros aminoácidos, es decir, se incorporan a la proteína como uno de los aminoácidos
proteicos y, después de haber sido formada la proteína, se modifican químicamente; por ejemplo, la
hidroxiprolina.

Se unen entre sí, formando oligopéptidos , polipéptidos y proteínas por medio de una unión llamada
peptídico . Los aminoácidos se unen entre si por uniones amida denominadas uniones peptídicas, en las
cuales se pierde una molécula de agua. La formación de la unión se llama condensación, la ruptura de la
unión se llama hidrólisis

Los aminoácidos, al tener grupos ácidos y básicos, son anfolitos, pudiendo comportarse como ácidos o
como bases, dependiendo del pH del medio donde se encuentren.
Aminoácidos esenciales

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Los animales no pueden fabricar por si mismos todos los aminoácidos que necesitan, de modo que algunos
deben ser aportados por la dieta. A estos se los denomina esenciales
En el hombre hay 8 que son
valina lisina
leucina fenilalanina
isoleucina treonina
triptófano metionina

Nomenclatura
o dos Aa :se denomina dipéptido
o tres Aa : tripéptido
o Menos de 10 en general : oligopéptidos
o De 10 a 50 Aa(Peso molecular hasta 5.000 ): polipéptido
o Más de 50 Aa .( Peso molecular mayor de 5.000) : proteína
propiamente dicha.

Sin embargo todas ellas son llamadas proteínas en general

Estructuras de las proteínas:

1- Estructura primaria :
Es el número y la secuencia de Aa que la constituyen. Da la especificidad biológica, el nombre de la
proteína. Cualquier cambio en el número o la cantidad de aminoácidos en una proteína da como resultado
que esa cadena de Aa ya no sea la misma proteína sino otra con distintas propiedades y distintas producir
ese efecto.

Veamos un ejemplo en el cual el cambio de un sólo aminoácido produce consecuencias nefastas.

La anemia falciforme es una enfermedad que se produce por el cambio de un sólo aminoácido en la
molécula de globina, que es la proteína de la hemoglobina. Debido a ese mínimo cambio la hemoglobina se
altera y se produce la enfermedad. El cambio consiste en que en una de las cadenas de globina, la cadena
beta, el sexto aminoácido que es el ácido glutámico está sustituido por otro aminoácido, valina. Esta
sustitución hace que la hemoglobina transporte mal el oxigeno y provoque una grave anemia. Es una
enfermedad muy común en África central.

A principios de la década de 1950 Sanger y sus colaboradores de la Universidad de Cambridge

determinaron la primera secuencia aminoacídica de una proteína. Se seleccionó la insulina de vaca para su
estudio debido a la disponibilidad y pequeño tamaño: dos cadenas de aminoácidos de 21 y 30 aminoácidos
cada una. Con el advenimiento de las técnicas de secuenciación rápida de ADN, la estructura primaria de
un polipéptido puede deducirse a partir de la secuencia nucleotídica del gen que la codifica.

2- Estructura secundaria :
Se refiere a la disposición que adopta en el espacio la cadena de Aa. Dicha disposición puede
corresponder a alguna de las tres siguientes

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

a- en hoja plegada o beta conformación: ejemplo : queratina

b- en hélix :
I- simple o alfa hélix: miosina , fibrina
II- compleja: colágeno (triple hélix)

c- en configuración al azar o random-coil : no tiene

ninguna forma específica

La estructura secundaria es mantenida por puentes de

hidrógeno

3- Estructura terciaria :
Es la forma en que se enrolla la estructura secundaria en el
espacio. Puede ser:
a - globular: Hemoglobina, insulina, albúmina,
mioglobina. En este caso la estructura secundaria puede ser de
alfa helix
b - fibrosa : colágeno , elastina , fibrinógeno , seda. La
estructura secundaria que corresponde a estas proteínas
puede ser alfa, beta o una combinación de las dos.

Es mantenida por distintos tipos de uniones, entre las cuales destacamos

 enlaces covalentes entre Cys

 puentes de hidrógeno entre cadenas laterales
 interacciones iónicas entre cadenas laterales
 interacciones de van der Waals entre cadenas laterales
 efecto hidrófobo (exclusión de las moléculas de agua, evitando su contacto con los residuos
hidrófobos, que quedan empaquetados en el interior de la estructura).

4- Estructura cuaternaria: es la asociación de varias moléculas de proteína,

llamadas cada una protómero, para formar estructuras complejas llamadas
dímero, oligómero , etc.

También puede clasificarse a las proteínas en

1- SIMPLES: están compuestas sólo por aminoácidos
2-CONJUGADAS: tienen además de Aa (grupo proteico), otra sustancia (grupo prostético).
FOSFOPROTEÍNAS
GLUCOPROTEÍNAS

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

METALOPROTEÍNAS
CROMOPROTEÍNAS
NUCLEOPROTEÍNAS
LIPOPROTEÍNAS

Una tarea fundamental de las proteínas es actuar como enzimas-catalizadores que incrementan la
velocidad de prácticamente todas las reacciones químicas dentro de las células-. Aunque los ARN son
capaces de catalizar algunas reacciones, la mayoría de las reacciones químicas son catalizadas por
proteínas. En ausencia de catálisis enzimática, la mayoría de las reacciones bioquímicas son tan lentas que
no ocurrirían en condiciones de temperatura y presión compatible con la vida.

Enzimas (no están en el programa si en apuntes viejos)

Al final del siglo XIX había un feroz debate acerca de si el proceso de formación del etanol requería o no la
presencia de células intactas de levadura. En un lado del debate estaba el especialista en química von
Liebig, quien argumentaba que las reacciones de fermentación que producían el alcohol no eran distintas de
otros tipos de reacciones orgánicas que se habían estudiado en tubos de ensayo. En el otro lado estaba el
biólogo Louis Pasteur, que aducía que el proceso de fermentación podía ocurrir dentro de los confines de la
célula intacta, viva y muy organizada.
En 1897, dos años después de la muerte de Pasteur, un bacteriólogo y un químico (Buchner) prepararon
jugo de levadura, un extracto que obtuvieron al moler células de levadura con granos de arena para luego
tamizar la mezcla con papel de filtro. Querían conservar el jugo para usarlo mas tarde. Después de
mantener el extracto con antisépticos y fallar, intentaron proteger la preparación para que no se alterara
mediante la adición de azúcar, el mismo procedimiento empleado para conservar mermeladas y jaleas. En
lugar de conservar la solución, el jugo de levaduras produjo gas a partir del azúcar y emitió burbujas en
forma continua durante días. Después del análisis, descubrió que la fermentación producía alcohol y
burbujas de dióxido de carbono. Buchner había demostrado que la fermentación no requería de células
intactas.
Sin embargo, pronto se descubrió que la fermentación era muy diferente a los tipos de reacciones que
llevaban a cabo los expertos en química orgánica. La fermentación necesitaba la presencia de un conjunto
único de catalizadores que no tenían contraparte en el mundo inanimado. Estos catalizadores se llamaron
enzimas. Las enzimas son mediadores del metabolismo, encargados de todas las reacciones que ocurren
en la célula. Sin las enzimas las reacciones metabólicas se producirían con tanta lentitud que serían
imperceptibles. La primera evidencia de que las enzimas son proteínas la obtuvo James Summer en 1926
cuando cristalizó la enzima ureasa a partir de semillas. Sin embargo hace poco resultó evidente que los
catalizadores de ciertas reacciones biológicas son moléculas de ARN. A favor de la claridad, el termino
enzima se reserva en general para los catalizadores proteicos, mientras que el término ribozima se emplea
para los catalizadores de RNA.

Como todo catalizador:

1- acelera las reacciones químicas sin modificar su naturaleza
2- da sentido a la reacción
3- no se modifica durante la reacción
4- actúa en poca cantidad
Las enzimas además de ser como cualquier catalizador:
1- casi siempre son proteínas. La única excepción es el ARN que puede tener función enzimática.
2-son específicas: actúan sólo sobre cierta reacción
3- actúan a baja temperatura

Zimógeno:
Es un precursor inactivo de una enzima. Por acción de una sustancia se transforma en enzima activa.

Acción catalizadora de las enzimas

Como todos los demás catalizadores, las enzimas se caracterizan por dos propiedades fundamentales. En
primer lugar aumentan la velocidad de las reacciones químicas sin se consumidas o alteradas
permanentemente por la reacción. En segundo lugar, aumentan la velocidad de las reacciones sinalterar el
equilibrio químico entre sustratos y productos. Continuar pag 74 cooper
Función enzimática del ARN
Actualmente se ha descubierto que ciertos tipos de ARN tienen capacidad enzimática, ya que pueden
catalizar reacciones químicas por si mismas.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Esta combinación de características propia del ARN, la de actuar en el código genético, y la de tener
actividad enzimática, las hace ser las moléculas más aptas para ser consideradas como las moléculas
originales de la vida.
Esto significa que muchos investigadores suponen que la primera molécula en originarse fue el ARN, a
partir del cual se formó a posteriori el ADN y las proteínas.

Clasificación de las enzimas:

1- SIMPLES: sólo tienen aminoácidos

2- COMPLEJAS: tienen algo más que aminoácidos. Se dividen en:
a-HOLOENZIMAS : tienen 2 partes llamadas
I- APOENZIMA: es la parte proteica. Dirige la función
II- COENZIMA: es la parte prostética. Generalmente es una vitamina .Realiza la
función.
b- CONJUGADAS: son enzimas unidas a núcleos metálicos.

Las enzimas se mencionan por un nombre clásico, o agregando el sufijo asa al sustrato o a la reacción que
desencadenan o con su nombre técnico dado por la nomenclatura internacional.

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LA ESTRUCTURA Y FUNCIONES DE LAS PROTEÍNAS DE MEMBRANA

Aunque la estructura básica de las membranas biológicas está determinada por la bicapa lipídica, la
mayoría de las funciones específicas están desempeñadas por las proteínas. Por consiguiente, la cantidad y
el tipo de proteínas de una membrana son muy variables: en la vaina de mielina, cuya función principal
consiste en aislar los axones nerviosos, menos de una 25 % de la masa de la membrana es proteína,
mientras que en la membrana interna de la mitocondrias lo es en un 75%. La mp normal está situada entre
ambos extremos, un 50 % de su masa es proteínas.
Cada proteína de membrana posee una orientación definida en relación con el citoplasma para que las
propiedades de la superficie de la membrana sean muy distintas respecto de las de la otra superficie. Esta
asimetría se conoce como “lateralidad de la membrana”.
De acuerdo a su asociación con la bicapa lipídica, las proteínas de membrana se pueden agrupar en tres
tipos diferentes:
Las proteínas integrales se hallan
empotradas en las membranas, entre los lípidos de
la bicapa, por lo que para su extracción se necesita
procedimientos drásticos, mediante
detergentes o solventes especiales. A las que
atraviesan la membrana de lado a lado se las llama
de transmembrana. Comúnmente la zona
intramembranosa exhibe una estructura secundaria
en alfa hélice. Se caracterizan por se anfipática,
es decir constan de regiones hidrofílica e
hidrofóbicas. Las regiones hidrofílica están
expuestas al medio acuoso que se presenta a
ambos lados de la membrana,
diferenciándose así en la proteína un dominio
citosólico y un dominio extracelular (en contacto
con el entorno) la región hidrofóbica, sin embargo,
se ubica en el interior de la membrana en contacto
directo con las colas de los fosfolípidos.
Muchas proteínas transmembranas atraviesan la bicapa lipídica más de una vez – de ahí que se llamen
multipaso - por lo que forman una sucesión de asas cuyas curvas emergen por ambas caras de la
membrana.
Debe agregarse que hay proteínas que se comportan como integrales pero que tienen posiciones
periféricas. Su estabilidad en la membrana se debe a que se hallan ligadas mediante uniones covalentes a
un ácido graso o a un fosfatidilinositol, según estén en el lado citosólico o en lado no citosólico.
Proteínas periféricas o extrínsecas son aquellas que no penetran en el interior de la bicapa,
permaneciendo de una u otra cara de la membrana mediante interacciones no covalentes (débiles)
generalmente con otras proteínas de membrana. Las proteínas periféricas pueden ser liberadas de la
membrana mediante procedimientos suaves, por ejemplo a través de la utilización de soluciones salinas
muy concentradas.
Es importante tener en cuenta también, que las proteínas al igual que los fosfolípidos presentan
movimientos de rotación sobre su eje y difusión lateral, pero esta última se halla más restringida sobre todo
para aquellas proteínas que sirven de anclaje al citoesqueleto celular, anclaje a la matriz extracelular, o bien
aquellas que por la función que cumplen se hallan confinadas a un dominio de membrana particular o
específico.

Hidratos de carbono de la membrana

Características
Se encuentran en un 5% del total de moléculas de lípidos. Con respecto a los glicolípidos, son lípidos
asociados con azúcares que se encuentran solamente en la superficie externa de la bicapa lipídica aunque
se supone que tienen algún contacto con el espacio intracelular; esos hidratos de carbono se agregan a la
membrana plasmática en el aparato de golgi, Los más complejos de los glucolípidos son los
GANGLIOSIDOS que tienen un hidrato de carbono que es el ácido siálico o ácido N-acetil neuramínico ( se
abrevia NaNa ). Estos gangliósidos son muy abundantes en la membrana plasmática de las células
nerviosas, las neuronas. Hay más de 40 tipos diferentes de gangliósidos.

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QUIMICA DE LOS HIDRATOS DE CARBONO

Se denominan así por su fórmula general: C (H 2O)
También se denominan glúcidos o azucares por que muchos de ellos tienen sabor dulce. Están compuestos
por C H y O. Son polialcoholes que tienen un grupo aldehído o cetona. Son la mayor cantidad de
sustancia orgánica de la tierra.

CLASIFICACIÓN:

MONOSACÁRIDOS:
Son los glúcidos simples. No pueden dividirse en más simples. Son una cadena de carbonos sobre las que
se encuentran grupos aldehídos o cetonas.

Según el número de carbonos de la cadena se clasifican en

TRIOSAS (tres carbonos)

TETROSAS (4)
PENTOSAS (5)
HEXOSAS (6)
HEPTOSAS (7)

Según el grupo que se encuentre en el carbono 1

y 2 se clasifican en

Aldosas: tienen un grupo aldehído

en el carbono 1
Cetosas: tienen un grupo cetona
en el carbono 2

Combinando las dos clasificaciones tenemos:

ALDOTRIOSAS
ALDOTETROSAS
ALDOPENTOSAS
ALDOHEXOSAS
ALDOHEPTOSAS

CETOTRIOSAS
CETOTETROSAS
CETOPENTOSAS
CETOHEXOSAS
CETOHEPTOSAS

Dentro de cada grupo hay distintos ejemplos, pero los mas comunes son:

GLUCOSA
FRUCTOSA
GALACTOSA

La glucosa es la productora de energía por excelencia en los seres vivos. Un gramo de glucosa produce 4
K/calorías. La fructosa o levulosa es el azúcar de las frutas. La galactosa es el azúcar de leche

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POLÍMEROS DE LOS MONOSACÁRIDOS

Resultan de la unión de dos o más monosacáridos. La unión se denomina glicosidica.

Clasificación:

1- OLIGOSACÁRIDOS (unión de dos o más monosacáridos, hasta 10)

a- DISACÁRIDOS (unión de dos monosacáridos)
Ejemplos:
Maltosa: glucosa + glucosa
Sacarosa: glucosa + fructosa
Lactosa: glucosa + galactosa
b- TRISACÁRIDOS (unión de tres monosacáridos)
c- TETRASACÁRIDOS (unión de cuatro monosacáridos)

2- POLISACÁRIDOS (unión de más de 10 monosacáridos)

Ejemplos:
*celulosa (exclusivamente vegetal, el ser humano no puede digerirla, tiene de 200 a 2.500 moléculas de
glucosa) . La celulosa evita la ateroesclerosis ya que desciende el nivel de colesterol LDL (o colesterol
malo)
*almidón (exclusivamente vegetal, el hombre puede digerirlo)
*glucógeno (exclusivamente animal, se lo encuentra en el hígado y músculos,
reserva de energía de acceso rápido)

GLUCOSAMINOGLUCANOS (GAGs)
Son repetición de unidades formadas cada una por un disacárido que tiene un grupo amino.
Anteriormente se denominaban muco polisacáridos.
Ejemplos:
 acido hialuronico ( no sulfatado)
 dermatan sulfato
 condroitin sulfato
 queratan sulfato
 heparan sulfato

PROTEOGLUCANOS
Están formados por la unión de GAGs con proteínas.

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Ejemplos
 Sindecano
 Decorina
 Perlecano

DERIVADOS DE LOS MONOSACÁRIDOS DE IMPORTANCIA BIOLÓGICA

1- GLUCOSIDOS: (el OH es reemplazado por radicales diversos)
Ejemplos: digital (medicamento cardiotónico)
Estreptomicina (antibiótico)
2- DEOXIAZUCARES: (les falta un OH)
Desoxirribosa
3- AMINOAZUCARES: (se reemplaza un OH por un grupo amino)
Glucosamina
Galactosamina
4- ALCOHOL-AZUCARES: (se reduce el grupo aldehído)
Ácido neuramínico
Manitol
Sorbitol
5- ÁCIDOAZUCARES :( se oxida el grupo aldehído)
Ácido ascórbico (vitamina C)
6- ESTERES: (se une un ácido al grupo alcohol)
Ribosa fosfato
Glucosa fosfato

ROL BIOLÓGICO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO:

1- Energético: producen 4 K/calorías por gramo al metabolizarse. Su función normal es almacenarse para
luego ser metabolizados en forma rápida suministrando energía. Se almacenan en el hígado y músculos.
2- Estructural: forman parte de la materia viva.

Tipos de carbohidratos
 *GLUCOPROTEINAS : oligosacáridos unidos a proteínas
 *GLUCOLIPIDOS : oligosacáridos unidos a lípidos
 *PROTEOGLICANOS: polisacáridos que están unidos a proteínas integrales de la membrana. Son los
más largos.

Los carbohidratos de la membrana:

(2 a 10 %) se sitúan en la superficie extrema de las células eucariotas, por lo que contribuyen a la asimetría
de la membrana, Se unen covalentemente tanto a los lípidos como a las proteínas, constituyendo la cubierta
celular o glucocalix, que se encuentra en continuidad con la matriz extracelular, aunque es difícil establecer
el límite entre ambas. A los carbohidratos se les atribuyen numerosas funciones, aunque no son muy bien
conocidas.
Los glicolípidos se clasifican en cerebrósido y gangliósidos. Los cerebrósidos se forman por unión de una
galactosa o de una glucosa a una ceramida. La estructura de los gangliósidos es similar pero en lugar de un
monosacárido hay un oligosacárido.

Las funciones del glucocalix son:

* Protegen a la superficie de la célula de agresiones químicas y mecánicas. Por ejemplo el glicocaliz de las
células situadas en la superficie de la mucosa intestinal las protege del contacto con los alimentos y de la
agresión de las enzimas digestivas.
* En el endotelio de los capilares sanguíneos (por ejemplo los del glomérulo renal) el glicocaliz actúa como
filtro que regula el paso de las moléculas.
* Algunos oligosacáridos del glicocaliz son necesarios en los procesos de reconocimiento y de adhesión
celular. Por ejemplo, una de las bases de la respuesta inmunitaria que ayuda al cuerpo a destruir los
microorganismos invasores es la capacidad de los leucocitos para detectar un glucocalix extraño.
* La mp que circunda varias veces el axón de algunas neuronas para formar la vaina de mielina contiene
abundantes glicolípidos los cuales contribuyen al aislamiento eléctrico del axón.

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* La especificidad del sistema ABO de grupos sanguíneos se halla determinada por oligosacáridos presente
en la mp de los glóbulos rojos.
* Algunas toxinas, bacterias y virus se unen a la superficie de las células que atacan por medio de
oligosacáridos específicos presentes en la mp de esas células.
 Ante la presencia del ácido siálico, NANA, en oligosacáridos, la carga eléctrica negativa atrae cationes
del medio extracelular que quedan retenidos en la cara exterior de la célula. Esta condición es importante
en las células nerviosas y en las musculares, puesto que necesitan incorporar gran cantidad de Na+ de
fácil disponibilidad durante la despolarización de sus membranas
 En algunas células, determinadas glicoproteínas del glicocáliz tienen propiedades enzimáticas. Por
ejemplo, diversas glicoproteínas pertenecientes al glicocáliz de las células que revisten el intestino son
peptidasas y glicosidasas que tienen por función completar la degradación de las proteínas y de los
hidratos de carbono ingeridos, iniciada por otras enzimas digestivas.
 Determinados oligosacáridos de glucocalix intervienen en el reconocimiento de un óvulo por el
espermatozoide.
 También participan en procesos inflamatorios. Por ejemplo, en las primeras etapas de una infección
bacteriana, los carbohidratos de la superficie de los glóbulos blancos llamados neutrófilos son
reconocidos por las lectina de las células de los vasos sanguíneos donde se ha producido la infección.
Este reconocimiento determina que los neutrófilos se adhieran a los vasos sanguíneos y migren desde la
sangre hasta los tejidos infectados donde contribuirán en la eliminación de las bacterias.

La membrana del glóbulo rojo

La membrana plasmática es una estructura altamente especializada. Su estudio se realiza sobre las
membranas de los eritrocitos de la especie humana, pues son células de fácil obtención y aislamiento. Si se
trata los eritrocitos con soluciones hipotónicas, se produce primero el hinchamiento celular y posteriormente
la rotura o hemólisis, y a la membrana del eritrocito aislada se la llama fantasma del eritrocito.

La membrana plasmática es una estructura altamente especializada. Su estudio se realiza sobre las
membranas de los eritrocitos de la especie humana, pues son células de fácil obtención y aislamiento.
Si se trata a los eritrocitos con soluciones hipot6nicas, se produce, primero, un hinchamiento celular y
posteriormente, la rotura y la perdida de la hemoglobina. Este fenómeno se conoce con el nombre de
hemólisis, y a la membrana del eritrocito aislada. Fantasma de eritrocito.
La primera definición del llamado esqueleto de membrana provino de la observación de eritrocitos tratado
químicamente. Dado que no tienen ni núcleo ni orgánulos intracelulares, la única membrana que poseen es
la membrana plasmática, de forma que puede ser aislada sin contaminación de membranas internas.
Exponiendo las células a un medio en el que la concentración de sal sea menor que la del interior celular,
resulta fácil preparar membranas celulares de eritrocitos vacías o "fantasmas".
La espectrina constituye el principal componente del entramado proteico (el citoesqueleto) que se extiende
por el interior de la membrana celular del eritrocito, manteniendo la integridad estructural y la forma
bicóncava de su membrana
Como se ilustra en la figura, por debajo de la membrana del eritrocito subyace una malla filamentosa
formada por espectrina, cortos filamentos de actina - tropomiosina y otras proteínas asociadas. Toda esta
red continua permanece anclada a proteínas integrales de la membrana por medio de la ancrina o anquirina
y la proteína de banda 4.1.
La ancrina media la unión de la espectrina con el dominio citoplasmático de la proteína de banda 3,
glucoproteína transmembranosa de paso múltiple, que además de poseer este papel estructural en el
esqueleto de la membrana, funciona como canal de intercambio aniónico.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La proteína 4.1 se une a la espectrina y a la actina, junto con otras proteínas asociadas, en los complejos de
unión, y a su vez contribuye a la unión de este retículo con la membrana uniéndose tanto a la proteína
banda 3 como a la glucoforina que es otro componente proteico transmembranoso (de paso simple), cuya
función es desconocida.

La célula muscular y la proteína distrofina

En las células musculares debe remarcarse la existencia de una proteína conocida como distrofina que se
ubica en la superficie interna del sarcolema. Esta proteína juega un papel muy importante en el
mantenimiento de la integridad de la membrana de la célula muscular (miocito) durante los cambios
asociados a la contracción del músculo e integra el llamado esqueleto de membrana, asociándose tanto a
proteínas integrales de la membrana y a la actina.

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B- Matriz extracelular (MEC)

La evolución de los organismos multicelulares permitió la formación de células y tejidos especializados. Es
posible que un paso clave en la evolución de la multicelularidad haya sido la capacidad de las células de
establecer contactos estrechos e interactuar en forma específica con otras células. Diversas proteínas
integrales de membrana, denominadas en conjunto moléculas de adhesión celular (CAM), facilitan la
adhesión entre sí de muchas células animales, o con otras del mismo tipo o similares. Después de la
agregación las células forman uniones celulares especializadas, que estabilizan estas interacciones y
favorecen la comunicación local entre células adyacentes.
Los organismos multicelulares están compuestos no sólo por células sino también por elementos
intercelulares. Las células animales también secretan un complejo retículo de proteínas e hidratos de
carbono, la matriz extracelular (MEC), que crea un ambiente muy especial en los espacios entre las
células. La matriz contribuye a unir las células para formar los tejidos. Los tejidos –y por extensión, los
órganos y sistemas- son el resultado de asociaciones de distintos tipos de células y matrices extracelulares,
de ahí que para poder reconocer a un tejido deban tenerse en cuenta tanto sus células como la calidad y
cantidad de sus componentes intercelulares.
En los tejidos conectivos las células se encuentran dispersas en medio de una abundante MEC. En cambio
en los epitelios las células suelen estar adosadas sin que las separe prácticamente ningún elemento
extracelular. No obstante, en los epitelios de revestimiento existe una delgada MEC llamada lámina basal,
interpuesta entre las células y el tejido conectivo sobre el que se apoyan.
1. Actividad: ¿Cuáles son las funciones más importantes y que elementos e contiene la matriz

extracelular?
Las MEC tienen como funciones:
 Rellenar los espacios no ocupados por las células.
 Conferir a los tejidos resistencia a la compresión y al estiramiento. (fortaleza y resistencia a las
fuerzas de desgarramiento)
 Constituir un medio por donde llegar los nutrientes y se eliminan los desechos celulares.
 Proveer a diversas clases de células de puntos fijos donde aferrarse.
 Ser armazón por donde migran las células cuando se desplazan de un punto a otro del organismo.
 Ser un medio por el que arriban a las células las sustancias inductoras (señales) proviniendo de otras
células.
Componentes macromoleculares de la MEC son: fluidos: GAGs y proteoglicanos, muy viscosos, que
protegen a la célula; Fibrosos: proteínas estructurales como el colágeno, insoluble proporciona resistencia y
fortaleza; y proteínas de la matriz multiadhesiva, como la fibronectina, laminina.

La fase líquida de la MEC contiene una clase especial de polisacáridos llamados glicosaminoglicanos, los
cuales suelen hallarse asociados entre sí y con proteínas con las que componen grandes complejos
glicoproteicos denominados proteoglicanos. Los GAGs poseen, excepto el ácido hialurónico, sulfato y

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

numerosos grupos carboxilo, son moléculas muy ácidas, con cargas negativas que atraen al Na+ - y por lo
tanto al agua- lo cual aumenta la turgencia de la matriz extracelular. El ácido hialurónico, el más simple de
los GAGs desempeña una función de resistencia a la comprensión en tejidos y articulaciones. Es también
función de algunos proteoglicanos actuar como receptores de señales y regular las actividades de las
proteínas secretadas por las células.

Colágena: son una familia de glucoproteínas fibrosas que forman parte exclusivamente de MEC, se
observan en todo el reino animal y es la más abundante en el cuerpo humano. Se produce en los
fibroblastos, células presentes en diferentes tipos de tejidos conectivos y en células epiteliales. Las fibras
colágenas están compuestas por fibrillas que presentan una estriación característica. La unidad molecular
básica de la fibrilla es el tropocolágeno, molécula proteica fibrosa integrada por tres cadenas polipeptídicas
trenzadas en forma helicoidal. Existen alrededor de 25 clases de cadenas polipeptídicas que se combinan
de diferentes maneras dando lugar a 15 diferentes tipos de colágenos. El colágeno proporciona el armazón
insoluble que determina muchas propiedades mecánicas de la matriz, como la capacidad de resistir fuerzas
de tensión. No todas las colágenas forman fibrillas, el tipo IV por ejemplo se restringe a las láminas basales,
donde se organizan formando una red que sirve para el depósito de otros materiales. También desempeñan
un papel crucial en la migración de las células, dado que proveen puntos fijos de sostén para el anclaje
temporario de los filopodios.

Fibronectina y laminina: la primera es una glicoproteína fibrosa (proteína extracelular), con dos
subunidades, una se conecta a la membrana plasmática y el otro con la fibra colágena. Estas moléculas
establecen las vías seguidas por las células migratorias y median la conexión de los filopodios con las fibras
colágenas.
La laminina, otra glucoproteína fibrosa, abundante en láminas basales donde se halla asociada al colágeno
IV y a un proteoglicano rico en heparansulfato. Además de su papel estructural, la laminina puede actuar en
la capacidad reguladora e influir en el potencial de crecimiento y diferenciación de la célula.

Glucocalix o cubierta celular: formada por cadenas cortas de azúcares proyectadas hacia fuera de la
membrana plasmática, extendiéndose como una capa íntimamente aplicada sobre la superficie exterior de
la membrana. Además de carbohidratos contiene otros materiales extracelulares secretados por la célula.
Matriz extracelular: muchos tipos de célula la contienen, red organizada de materiales que halla más lejos
de la vecindad inmediata de la membrana plasmática. La MEC es algo más que un material pasivo protector
inerte, puede desempeñar un papel clave en la morfología y actividades de la célula.
Lámina basal: una de las matrices celulares mejor definida, capa engrosada que rodea a las células
musculares y adiposas y que cubre la superficie basal de tejidos epiteliales. Se piensa que puede participar
en el mantenimiento de la polaridad de las células epiteliales, en definir la vía de migración celular, en
separar tejidos adyacentes, actuar como barrera al paso de macromoléculas (de particular importancia en el
riñón, donde la sangre filtra a través de la doble membrana basal que separa los capilares del glomérulo de
las paredes del túbulo renal) de barrera contra la invasión de tejidos por células cancerosas. Las láminas
basales tienen funciones de sostén, adhesión, filtro y regulación de funciones como el crecimiento y la
diferenciación.

PERMEABILIDAD DE LAS MEMBRANAS CELULARES

Como el contenido de una célula está rodeado por su membrana plasmática, toda la comunicación entre la
célula y el medio extracelular debe estar mediada por esta estructura.
En cierto modo, la membrana plasmática posee una función doble. Por un lado, debe retener material
disuelto de la célula para que no se escapen hacia el ambiente, mientras que por otro lado debe permitir el
intercambio necesario de materiales al interior y exterior de la célula.

Los solutos y las macromoléculas atraviesan las membranas celulares mediante mecanismos
diferentes

Existe un flujo continuo de sustancias que entran y salen de la célula y circulan por su interior. Para ello, los
solutos (es decir los iones, y las moléculas pequeñas deben pasar a través de las membranas celulares, tal
fenómeno se llama permeabilidad.
En lo que respecta a las macromoléculas, para atravesar las membranas algunas utilizan canales
proteicos llamados translocones, otras pasan por poros y otras se valen de vesículas.

La permeabilidad celular es una propiedad de la membrana, no de la sustancia que difunde.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La permeabilidad de la membrana al pasaje de sustancias depende de la polaridad, la carga, el tamaño y la

solubilidad de la misma
 Polaridad se refiere a la distribución asimétrica de la carga eléctrica de una molécula. Cuanto más
polar es una molécula, mas hidrofílico es su comportamiento. Las moléculas más pequeñas y no
polares pueden atravesar más rápidamente las membranas, tal es el caso de los gases como el
oxígeno (O2), dióxido de carbono (CO2) nitrógeno (N2)
 Carga: las moléculas con carga (ya sea positiva o negativa), por más pequeñas que sean,
encuentran mayores dificultades para atravesar las membranas. Por ejemplo, un ion de sodio (Na)
tiene un elevado grado de hidratación, es decir que la carga hace que se rodee de una cantidad de
moléculas de agua, lo que les impide el pasaje a través de la bicapa.
 Tamaño: a menor tamaño de una molécula, mayor será la velocidad de difusión a través de una
membrana lipídica
 Solubilidad: si su estructura es afín a la membrana se disuelve y la atraviesa.
El agua, a pesar de ser una molécula hidrofílica, es una molécula no cargada y tan pequeña que no
encuentra dificultad para pasar de un lado al otro de la membrana, filtrándose entre las moléculas de
fosfolípidos, pero a pesar de ello es poca la cantidad de agua que ingresa a la célula de esta manera.
En resumen, las moléculas hidrofóbicas, pequeñas, como los gases (O2 CO2 N2) el benceno y otros
hidrocarburos, pueden difundir rápidamente a través de la bicapa de lípidos
Moléculas grandes, polares no cargadas como la glucosa, disacáridos o polisacáridos no pueden
atravesar la bicapa lipídica
Moléculas con carga como los iones sodio, potasio, cloro, tampoco pueden atravesar los lípidos de
membrana.

El pasaje de sustancias a través de la membrana celular puede efectuarse por varios mecanismos

1- SIN MODIFICACIONES DE LA MEMBRANA:

A-TRANSPORTE PASIVO O DIFUSIÓN SIMPLE
B-DIFUSIÓN FACILITADA
C-TRANSPORTE ACTIVO
2- CON MODIFICACIONES DE LA MEMBRANA (vesicular)
A-PINOCITOSIS
B-FAGOCITOSIS
C-ENDOCITOSIS MEDIADA POR RECEPTORES

 Se requiere que ciertas sustancias entren en la célula para que contribuyan a las reacciones
metabólicas, otras deben salir porque son productos de elaborados por las células que deben ser
exportados o materiales de desecho. Una cuestión importante con relación a cualquier proceso de
transporte es la razón por la que el transporte se produce en una dirección en lugar de hacerlo en la
dirección contraria.

El pasaje de solutos a través de las membranas celulares puede ser pasivo o activo.

Los desplazamientos de las moléculas “cuesta abajo”, desde una región de elevada concentración a otra de
baja concentración ocurren espontáneamente siempre que exista la vía necesaria. Este tipo de
desplazamiento se denomina pasivo porque no necesita de ninguna otra fuerza impulsora. Para desplazar
un soluto contra su gradiente de concentración, la proteína de transporte tiene que realizar un trabajo: tiene
que impulsar flujo “cuesta arriba” acoplándolo a algún proceso que aporte energía. Este desplazamiento de
solutos a través de la membrana se llama activo y sólo lo llevan a cabo tipos especiales de proteínas
transportadoras que pueden aprovechar alguna fuente de energía para el proceso de transporte.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

El transporte pasivo de solutos se produce por difusión

Cuando se disuelve un soluto en un solvente, las partículas del primero se dispersan en forma progresiva
por todo el solvente hasta quedar uniformente distribuidas. El movimiento del soluto – llamado difusión –
se realiza desde los sitios en que se halla más concentrado hasta los de menor concentración, con una
velocidad que es proporcional a la diferencia de las dos concentraciones. Esta diferencia se llama gradiente
de concentración. Si el soluto posee carga eléctrica, gravita además el gradiente de voltaje o potencial
eléctrico que se establece entre los distintos puntos de la solución. La suma de los gradientes de
concentración y de voltaje se conoce como gradiente electroquímico. La difusión a favor de tales
gradientes es un proceso que ocurre espontáneamente, sin gasto de energía, de ahí que lleve el nombre
de transporte pasivo.
¿Qué es difusión? Es el desplazamiento de una molécula de una región de alta concentración a una
baja concentración por la energía cinética o calórica inherente a la misma.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La difusión simple se produce a través de la bicapa lipídica

El transporte pasivo de soluto puede ocurrir entre compartimientos acuosos separados por membranas
semipermeables, como lo son las bicapas lipídicas de las membranas celulares. Este tipo de transporte se
Llama difusión simple. Dichas membranas se llaman semipermeables porque los solutos están obligados a
sortear el tamiz que representa su doble capa de lípidos.
Las sustancias que se disuelven en lípidos atraviesan con cierta facilidad la zona hidrofóbica de la
membrana. Existe una relación lineal directa entre solubilidad en lípidos de una sustancia y su velocidad de
difusión a través de las membranas semipermeables.
Las moléculas no polares pequeñas –como el O2, el CO2 y el N2- difunden libremente a través de las
bicapas lipídica. También lo hacen compuestos liposolubles de mayor tamaño, por ejemplo, los ácidos
grasos y los esteroides. A pesar de ser moléculas polares, el glicerol y la urea atraviesan fácilmente las
membranas celulares porque son pequeñas y no poseen carga.
La bicapa lipídica de las membranas celulares permite el paso de agua por difusión simple. Debido a que el
agua constituye el solvente en que hallan disueltos los solutos y dispersas las macromoléculas, el sentido
del movimiento de las moléculas acuosas depende del gradiente osmótico entre ambos lados de la
membrana.
La difusión de las moléculas polares a través de la bicapa lipídica es tanto menor cuanto mayor es su
tamaño, las hexosas, los aminoácidos y los nucleótidos, por ejemplo, prácticamente no difunden. En cuanto
a los iones, dada su carga eléctrica se unen a varias moléculas de agua, lo cual les impide atravesar la
bicapa lipídica por más pequeñas que sean.
La difusión simple se realiza de forma espontánea, con una velocidad directamente proporcional al
gradiente de concentración del soluto entre uno y otro lado de la membrana, del grado de permeabilidad del
soluto
Análisis clínico: en algunas enfermedades como el EFISEMA PULMONAR se reduce el área superficial de
la célula de los pulmones para la propagación del oxígeno del aire en la sangre ¿cuál es la consecuencia?
Más lenta la difusión, disminuye el ritmo respiratorio.

Ósmosis y presión osmótica

Diálisis y ósmosis son, simplemente, dos formas especiales de difusión. Diálisis es la difusión de
sustancias disueltas (solutos) a través de una membrana semipermeable, y ósmosis es la difusión de
moléculas del solvente a través de la membrana semipermeable.

En los sistemas vivientes, las moléculas de solvente están representadas casi siempre por el
agua.

En el líquido de toda célula viva hay sales, azúcares y otras sustancias en disolución, que le confieren
cierta presión osmótica. Cuando se coloca una célula en un líquido cuya presión osmótica es idéntica a la
de la misma, el agua no entra en la célula ni sale de ella, (es decir que la célula no se hincha ni se encoge)
y se dice que el líquido y la célula son isotónicos. Normalmente, el plasma sanguíneo y los líquidos
corporales son isotónicos, contienen la misma cantidad de sustancias disueltas que las células del cuerpo.
Si el líquido circundante contiene más sustancias disueltas que el protoplasma, el agua tiende a salir
de la célula, y ésta se encoge. Se dice que dicho líquido es hipertónico con respecto a la célula. Si un
líquido tiene menor cantidad de sustancias disueltas que la célula se dice que es hipotónico: el agua tiende
a penetrar a la célula y ésta se hincha. Una solución de cloruro de sodio al 0,9 % (llamada a menudo
solución fisiológica) es isotónica para las células humanas. Los glóbulos rojos colocados en una solución de

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

cloruro de sodio al 0,6% se hinchan y revientan, plasmólisis, mientras que en una al 1,3%, se encogen,
crenan.

La presión osmótica es la presión necesaria para anular la ósmosis. Siempre que una membrana
situada entre dos líquidos es permeable al agua pero no al soluto, y la © de sustancias no difusibles es
mayor de una lado de la membrana que del otro, pasará agua a su través hacia el lugar donde la © menor.
–el lado de la membrana donde hay menor partículas del soluto hay mayor © de agua. Ello significa que en
cada poro de la membrana golpearán más moléculas de agua cada segundo en el lado de la membrana que
tiene más baja la © de soluto no difunden y como resultado habrá un movimiento neto de moléculas de
agua desde este lado hacia el lado opuesto de la membrana en el que la © de partículas no dif es mayor. La
ósmosis de moléculas acuosas puede contrarrestarse aplicando una presión sobre la membrana en sentido
opuesto a dicha ósmosis.

Las moléculas de agua penetran esta barrera de dos maneras, por difusión a través de la bicapa
lipídica, y a través de acuaporinas, proteínas transmembranas que funcionan como canales de agua.
Aunque no se trata de canales iónicos, es un dispositivo molecular que permite el pasaje de agua a
través de algunas membranas celulares.
En varias clases de células –particularmente los glóbulos rojos y las epiteliales de los plexos coroideos,
la vesícula biliar y el túbulo proximal de la nefrona- la membrana plasmática es excepcionalmente
permeable al agua, mucho más de lo esperable si su transporte se realizara exclusivamente mediante el
mecanismo de difusión simple. Ello se debe a la presencia de canales de paso especiales conocidos con el
nombre de acuaporinas.
Si tenemos dos disoluciones acuosas de distinta concentración separadas por una membrana
semipermeable (deja pasar el disolvente pero no el soluto ), se produce el fenómeno de la ósmosis que
sería un tipo de difusión pasiva caracterizada por el paso del agua ( disolvente ) a través de la membrana
semipermeable desde la solución más diluida ( hipotónica ) a la más concentrada (hipertónica ), este
trasiego continuará hasta que las dos soluciones tengan la misma concentración ( isotónicas o
isoosmóticas).
Cuando las concentraciones de los fluidos extracelulares e intracelulares es igual, ambas disoluciones
son isotónicas.

Si los líquidos extracelulares aumentan su

concentración de solutos se hacer hipertónicos respecto a la célula, y
ésta pierde agua, se deshidrata y mueren (plasmólisis). Y si por el
contrario los medios extracelulares se diluyen, se hacen
hipotónicos respectos a la célula, el agua tiende a entrar y las células
se hinchan, se vuelven turgentes (en vegetales) llegando incluso a
estallar (en animales).

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

ANALICEMOS EL COMPORTAMIENTO DE LOS GLÓBULOS ROJOS EN DIFERENTES TIPOS DE

SOLUCIONES

SOLUCIÓN ISOTÓNICA HIPOTÓNICA HIPERTÓNICA

ClNa al 0.9% ClNa < 0.9% ClNa > 0.9%

Existe la misma concen- menor concen- mayor concen-

tracion dentro y fuera del tracion fuera tracion fuera
Glóbulo rojo del G.R. del G.R.

No hay movimiento neto entra agua sale agua

El G.R. no cambia se hincha y se arruga

Explota (hemolisis) (crenacion)

Y se entiende por presión osmótica la presión que sería necesaria para detener el flujo de agua a
través de la membrana semipermeable.
Las proteínas funcionan como canales y transportadores (carriers o permeasas)
Hacen que la membrana plasmática sea permeable a una variedad de moléculas pequeñas y medianas
polares y cargadas que no pueden cruzar la bicapa lipídica. Los tres tipos de proteínas de membrana
transportadoras (intramembranosa), de alta especificidad por la sustancia que transporta) son: Proteínas
canal, transportadores y bombas.

La difusión facilitada se
produce a través de canales iónicos y
de permeasas

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La mayoría de las sustancias que atraviesan las membranas celulares a favor de gradientes –es decir, sin
gasto de energía- lo hacen a una velocidad mayor a la esperable si su pasaje fuera por difusión simple. La
diferencia se explica por la presencia de ciertos componentes membranosos proteicos llamados canales
iónicos y permeasas, a través de los cuales se facilita –aunque también se regula- la transferencia de
solutos de un lado al otro de la membrana.
El sentido de la difusión se realiza siempre a favor de los gradientes de concentración y de voltaje. Así, ante
una inversión de esos gradientes, el sentido de la difusión también se invierte. Como vemos en la difusión
facilitada la fuerza que impulsa la movilización de las partículas del soluto es el gradiente, y por lo tanto no
consume energía. Desde este punto de vista la difusión facilitada es similar a la difusión simple; la diferencia
reside en que en la primera participan estructuras proteicas reguladoras y en la segunda no.
Existen dos clases de canales iónicos, los dependientes de ligando y los dependientes de voltaje
Los canales iónicos son poros o túneles hidrofílicos que atraviesan las membranas, formados por
proteínas integrales transmembranosas generalmente de tipo multipaso.
Existen canales iónicos en todas las células, tanto en la membrana plasmática como en las de los
Organoides. Son altamente selectivos, de modo que hay canales específicos para cada tipo de ion (Na +, K+,
Ca2+, etc.) los más abundantes en la membrana plasmática son los canales para el K+..
El flujo de un ion es impulsado por el gradiente electroquímico resultante, como vimos, de la suma de los
gradientes de concentración y de voltaje a ambos lados de la membrana. Normalmente el lado citosólico de
la membrana plasmática es electronegativo respecto al lado exterior, lo cual favorece el ingreso –o dificulta
el escape- de los iones con carga positiva. Con los iones negativos se da la situación inversa. Por ejemplo,
el gradiente de voltaje se opone a la salida de K+ de la célula mientras que el gradiente de concentración lo
favorece. Cuando estas fuerzas opuestas se equilibran, el gradiente electroquímico es igual a cero y el flujo
del ion se detiene.
La mayoría de los canales iónicos no están abiertos en forma permanente pues poseen un dispositivo de
apertura y cierre semejante al de una “compuerta” accionado por dos clases de factores: algunos canales
abren su compuerta en respuesta a un cambio en el potencial eléctrico de la membrana y otros cuando les
llega una sustancia inductora (ligando) por el lado citosólico o por el lado no citosólico, a los primero se los
llama dependiente de voltaje, a los segundos, canales dependiente de ligando. Surge de lo expuesto que
para que se produzca el pasaje de un soluto a través de un canal iónico no sólo es necesaria la existencia
de un gradiente electroquímico, sino también un estímulo apropiado, el cual, según los casos, corresponde
a un cambio en el potencial de membrana o al arribo de una sustancia inductora (ligando).
La estructura de un canal iónico semeja un cilindro hueco que atraviesa a la membrana. Su conducto central
se estrecha y se ensancha de forma semejante a un reloj de arena, de modo que posee amplias bocas de
acceso y de salida. En un punto el conducto alcanza un diámetro muy pequeño, esta zona le da la
especificidad al canal, puesto que en ella se produce el reconocimiento del ion según su tamaño y carga.
La pared del cilindro se forma con varias proteínas transmembranosas.

Fibrosis quística: es una enfermedad hereditaria grave caracterizada por la producción de una secreción de
densidad anormalmente elevada en varias glándulas exocrinas, entre ellas, el páncreas y las glándulas
secretoras de mucus de las vías aéreas y el tubo digestivo. Esto causa disminución del pasaje u obstrucción
de los conductos de excreción en las glándulas afectadas y retención de mucus espeso en las vías aéreas,
con tendencia a la aparición de infecciones bacterianas. En consecuencia, la causa más frecuente de
muerte, en esta patología, son las infecciones recurrentes de las vías aéreas.
Se ha demostrado que la fibrosis quística se debe a un defecto de los canales iónicos para lo iones de cloro
de las células epiteliales. También se demostró la localización del gen de la fibrosis quística en el brazo
largo del cromosoma 7 y se estableció la secuencia de nucleótidos. Aún no se sabe si el gen codifica la
proteína del canal o si la regula, pero esto permite el diagnóstico prenatal y de corregir el defecto mediante
tratamiento con terapia génica.

Existen distintas clases de permeasas pasivas, involucradas en procesos de monotransporte,

cotransporte y contratransporte

Como en los canales iónicos, la pared de las permeasas está comúnmente integrada de varias proteínas
transmembranosas multipaso. Cada permeasa posee sitios de unión específicos para una o dos clases de
solutos, accesibles desde una o desde ambas caras de la bicapa. La fijación del soluto produce un cambio
conformacional en el permeasa, merced al cual se transfiere el material hacia el otro lado de la membrana.

57
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

En esta sección solo analizaremos a las permeasas que permiten el traspaso pasivo de solutos,
correspondiente al mecanismo de difusión facilitada. La aclaración se debe a que la célula posee proteínas
transportadoras similares pero conformadas para el traspaso activo de solutos, con gasto de energía
Existen tres clases de permeasas:

 monotransporte: permite el pasaje de un solo tipo de molécula.

 cotransporte o simporte: permite el pasaje de dos o más moléculas a la vez en el mismo sentido.
Ejemplo glucosa con sodio.
 contratransporte o antiporte: permite el pasaje de una o más moléculas en un sentido y otras en el
sentido contrario. Ejemplo sodio con H.

Son ejemplos de difusión facilitada mediante permeasas: 1) el monotransporte de glucosa

La GLUT 1: prácticamente todas las células de mamífero utilizan la glucosa sanguínea como la principal
fuente de energía celular y la mayoría expresa GLUT1, un uniportador de membrana plasmática que
cataliza el movimiento de la glucosa a favor de su gradiente de concentración. Este transportador alterna
entre dos estados conformacionales: en uno de ellos, un sitio de fijación para la glucosa mira hacia fuera de
la membrana; en el otro, un sitio fijador de la glucosa mira hacia adentro.

2) el cotransporte de Na+ y glucosa en la membrana plasmática de las células de la mucosa intestinal

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

3) el contratransporte de Na+ y H+ a través de la membrana plasmática de casi todos los tipos celulares

TRANSPORTE ACTIVO
Las bombas (permeasas) impulsadas por ATP, son ATP asas que usan la energía de la hidrólisis del ATP
para mover iones y moléculas en contra del gradiente de concentración, se denomina TRANSPORTE
ACTIVO, cuesta arriba.

Existen dos tipos de transporte activo: el primario y el secundario, en estos casos se consume energía
directa o indirectamente, y ésta proviene sobre todo de la fosforilacion oxidativa en las mitocondrias. Como
consecuencia de ello, el transporte activo está acoplado a la respiración celular.

Transporte activo primario

Es el que se realiza en contra de gradiente electroquímico y con consume de energía metabólica

(ATP). Para que se lleve a cabo son imprescindibles dos condiciones:
 La existencia de proteínas transportadoras que actúen bombas en contra del gradiente.
 El consumo de energía que, generalmente, proviene hidrólisis de ATP. Este ATP es producido,
en su mayoría mediante la fosforilación oxidativa en las mitocondrias
El transporte activo mantiene la diferencia de potencial membrana. Son numerosas las proteínas
transportadas que utilizan la energía producida en la hidrólisis del ATP,

Un ejemplo ello es la bomba Na+ - K+, fundamental para el mantenimiento de los gradientes de ambos
cationes en la membrana plasmática las células animales. Durante su funcionamiento, la Na+ K+ -
ATPasa atraviesa ciclos de fosforilación y desfosforilación que determinan cambios alternados en su
forma.
El ATP se une a un sitio específico en la cara citosólico de la membrana y su hidrólisis se acopla al
transporte de los iones. Cada ATP que se hidroliza posibilita el transporte de tres iones de Na hacia el
espacio extracelular y de dos de K hacia el citosol.

Pronto se produce un cambio conformacional en la estructura de la permeasa. Como resultado, los Na+
quedan expuestos hacia el lado exterior de la célula. Disminuye su afinidad y son liberados en el medio
extracelular.
Entre tanto, dos K+ del líquido extracelular se unen a la permeasa y se fijan en sus sitios en las
subunidades alfa. Esta unión provoca la liberación del fosfato ligado al transportador.
Tal desfosforilación hace que el transportador recupere su configuración original, por lo cual los K+
quedan expuestos hacia el interior de la célula. Dado que además disminuye su afinidad, estos iones
ingresan al citosol, lo cual completa el ciclo.

Así, se mantiene la diferencia de potencial que permite la producción y la transmisión del impulso
nervioso.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Algunos fármacos cardiotónicos inhiben la bomba de Na+ K+

Los fármacos ouabaína y digoxina aumentan la fuerza de contracción muscular cardiaca y su uso está
muy difundido en el tratamiento de la insuficiencia cardiaca congestiva (se debilita el bombeo del
corazón). El efecto principal de estos fármacos es inhibir la ATP asa de Na+ / K+ con lo cual aumenta la
concentración intracelular de Na+ (y disminuye el K). Como el antiportador de Na+ / Ca2+ funciona
menos eficazmente con un gradiente de concentración de Na+ bajo, los iones de Ca 2+ que se exportan
son menos y la concentración intracelular del Ion aumenta. Este aumento hace que el músculo se
contraiga con más fuerza.

Diversos transportadores pasivos, aunque ajenos a la bomba de Na+ K+, funcionan bajo su
dependencia.

La dependencia del contratransportador de Na+ y Ca2+ de la actividad de la bomba de Na+ K+ es solo uno
de los ejemplos de los muchos que existen durante el funcionamiento normal de la célula. En efecto, una
amplia variedad de transportadores son impulsados por el gradiente de Na + generado por esa bomba, el
cual arrastra a los demás.

Otras BOMBAS
 Bomba de protones. Existen varias clases, algunas de ellas asociadas a la membrana plasmática y otras
a Organoides membranosos como los lisosomas, endosomas, etc. Una bomba de H disminuye el pH de
los lisosomas: una alta concentración de H en el interior de los lisosomas es crucial para la activación de
las enzimas hidrolíticas, las que se hallan en condiciones de actuar sólo cuando el pH en esos
Organoides se reduce a 5.0. El transporte de H + desde el citosol al interior del lisosoma es un proceso
activo que depende de una bomba de H+ heredada de la membrana del endosoma precursor.
 Bombas de calcio: distintas bombas de Ca2+ mantienen la concentración del ion en el citosol en niveles
muy bajos. Tanto en la membrana plasmática, como en la membrana del retículo endoplasmático -o del
sarcoplasmático, en la célula muscular- existen bombas de Ca++ que transfieren el catión desde el
citosol hacia el espacio extracelular y hacia el interior de dicho retículo respectivamente. Requiere de Mg+
y energía que la toma del ATP.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Transporte de macromoléculas Transporte vesicular

Una vesícula es un pequeño saco esférico que brota en la m y luego se desprende de ella. Las
vesículas transportan sustancias. Las células, para poder tomar y secretar sustancias a través de su
membrana, realizan procesos específicos denominados endocitosis y exocitosis.
Se denomina endocitosis al mecanismo por el cual las células toman partículas del medio externo
mediante invaginación de la membrana plasmática, hasta formar una vesícula celular de unos 0,1n de
diámetro.
Hay dos tipos de endocitosis, la Pinocitosis y la endocitosis mediada por receptor. La Pinocitosis
implica la toma de pequeñas gotas de fluido extracelular. La endocitosis mediada por receptor permite la
toma específica de proteínas y de pequeñas sustancias extracelulares. Para que se lleve a cabo se deben
dar algunas condiciones:
- La presencia de un receptor en la superficie de la membrana.
- La presencia de un ligando, sustancia que va a ser ingerida (colesterol, insulina).
- La interacción ligando-receptor y la formación de una vesícula revestida por una proteína, la
clatrina.
La vesícula se adentra en el citoplasma y pierde la clatrina; tras sufrir una serie de
transformaciones, el pH de la vesícula se acidifica, separándose, por un lado, una vesícula con los
receptores que vuelven a la membrana plasmática, y por otro, una vesícula diferente en la que quedan los
ligando, que se unirán a lisosomas para ser digeridos intracelularmente

La fagocitosis forma especial de endocitosis mediante la cual la célula ingiere partículas de gran
tamaño (de hasta unos micrómetros de diámetro), como microorganismos (bacterias) y restos celulares. Las
vesículas que se forman se llaman fagosomas, que se fusionan con los lisosomas constituyendo los fago
lisosomas, encargados de degradar el material ingerido.
Los protozoos se sirven de la fagocitosis para alimentarse, y los macrófagos, células del sistema
inmunitario, para ingerir y destruir bacterias
La exocitosis es el proceso mediante el cual se vierten al exterior macromoléculas intracelulares
encerradas en vesículas. Estas macromoléculas pueden ser liberadas de forma continua, como ocurre en
las glándulas de secreción externa, mientras que otras han de esperar una señal mediada por un mensajero
químico (hormona) que, al unirse a los receptores de superficie, aumenta los niveles de Ca++ y provoca la
exocitosis, como sucede en el sistema nervioso (Fig. 5.8).

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Los mecanismos de endocitosis y exocitosis permiten e establecimiento de una dinámica especifica

en la membrana plasmática. Así, cuando una vesícula de secreción se fusiona con la membrana plasmática
para verter su contenido al exterior, mediante exocitosis, provoca un aumento en su superficie. Este
incremento es transitorio, pues la célula, a través de la endocitosis, recupera nuevamente la porción de
membrana que aumentó la superficie celular.

Transporte a través de los epitelios. Transporte transcelular de glucosa en el epitelio intestinal

A raíz de la presencia de uniones oclusivas entre las células epiteliales, la glucosa debe atravesar las
células para llegar a los capilares sanguíneos situados por debajo del epitelio. Aunque la glucosa entra a la
célula en contra de su gradiente, lo hace pasivamente. Ello se debe a que entra junto con el Na + a través de
una permeasa cotransportadora pasiva, sin embargo este transporte de glucosa insume energía, ya que el
sodio debe ser expulsado hacia la matriz extracelular por el lado opuesto de la célula mediante una
permeasa activa, la bomba de Na+ K+

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

PARTE 3
ESPECIALIZACIONES DE LA MEMBRANA
Polaridad celular. Especializaciones celulares relacionadas con la cohesión y la absorción.
POLARIDAD CELULAR

El reconocimiento de que las membranas biológicas son fluidos bidimensionales fue un importante
avance para entender la estructura y función de las membranas. Pero una imagen de la membrana como un
mar de lípidos donde todas las proteínas flotan libremente como iceberg, es muy simplificada.
Las células disponen de diferentes sistemas para confinar determinadas proteínas de membrana en
áreas localizadas de la bicapa, dando lugar de este modo a regiones especializadas o dominios de
membrana, en la superficie de la célula o de un orgánulo. Algunas proteínas de membrana tienen
restringida su movilidad lateral por hallarse unidas a componentes del citoesqueleto, los cuales las
inmovilizan en determinados puntos de la membrana. Otras proteínas pueden unirse a estructuras fijas del
exterior celular, por ejemplo a moléculas de la matriz extracelular.

Existen regiones o dominios de la membrana adaptadas a diferentes funciones: adsorción, secreción,

transporte de líquidos, adherencia mecánica, interacciones con células adyacentes y con la Mec,
denominándose especializaciones o diferenciaciones de membrana, se lo encuentra solo en ciertas
células, fundamentalmente las células del tejido epitelial.
En células epiteliales (Epitelio: Es un tejido compuesto por células adyacentes sin sustancias
intercelulares que las separen e incluye todas las membranas compuestas por células que recubren el
exterior del organismo y algunas superficies internas) como las que revisten el intestino y los túbulos
renales, algunas enzimas y proteínas de transporte de membrana plasmática están confinadas a la
superficie apical de las células, en tanto que otras están confinadas a la superficie basal y lateral. Esta
distribución asimétrica de las proteínas de membrana es frecuentemente esencial para el funcionamiento
del epitelio-
.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Las células pueden crear barreras que restrinjan el desplazamiento de determinados componentes de
la membrana a un dominio de membrana. Por ejemplo en las células epiteliales intestinales es importante
que las proteínas transportadoras que intervienen en el transporte de nutrientes en el intestino se
encuentren en la cara apical de la célula (la superficie que limita con el contenido intestinal) y que el resto
de proteínas que intervienen en el transporte de solutos desde la célula epitelial hacia los tejidos y a la
sangre se encuentren en las caras basal y lateral de la
célula. Esta distribución asimétrica de las proteínas de
membrana se mantiene debido a la barrera formada por la
línea a lo largo de la cual se unen las células epiteliales
adyacentes mediante un tipo específico de uniones
intercelulares llamadas uniones estrechas o estancas. En
este lugar, proteínas de unión especializadas forman un
cinturón (anillo) continuo alrededor de la célula donde entra
en contacto con las células vecinas y sellan el espacio entre
las membranas celulares adyacentes. Las proteínas de
membrana no pueden difundir a través de tales uniones.
Los dominios se relacionan con la función y crea lo que se
conoce con el nombre de polaridad celular. En una célula
polarizada se reconocen un dominio apical que mira hacia la
luz, un dominio basal, que contacta con la lámina basal y
dominios laterales. Los dominios basal y lateral, a veces son
referidos en conjunto como dominio basolateral. Siendo
regiones funcionalmente diferentes, tienen modificaciones y
especializaciones de superficie para adaptarse a sus
funciones diferentes.
Los dominios de las regiones basal y lateral en general presentan especializaciones de unión y los apicales
muchas veces microvellocidades, esterocilios o cilios.

ESPECIALIZACION CELULAR RELACIONADA CON LA ABSORCIÓN Y COHESION

CONTACTO Y COHESION CELULAR

Las interacciones entre las células tienen gran importancia biológica en los organismos pluricelulares en
quienes esa relación es un prerrequisito de su evolución.
Justamente es a través de la adhesión entre sí y a la matriz
extracelular que las células permanecen unidas con las posiciones
espaciales definidas que caracterizan a los diversos tejidos.
Es, por lo tanto, una función indispensable de la membrana
a la hora de formar organismos multicelulares.
UNIONES TRANSITORIAS ENTRE LAS CÉLULAS

En varios procesos biológicos se producen uniones

transitorias entre tipos de células diferentes
Durante la respuesta inmunitaria, la reparación de heridas y la
detención de hemorragias es necesario que algunos tipos celulares
establezcan uniones transitorias con otras clases de células.
Las uniones se producen gracias a los procesos biológicos
llamados reconocimiento y adhesión celular.
Ambos tienen lugar cuando determinadas células de la sangre
(neutrófilos, monocitos, linfocitos, plaquetas) se conectan
fugazmente con las células endoteliales de los capilares sanguíneos, lo cual es un prerrequisito para poder
salir de la sangre y pasar a los tejidos. La adhesión se produce porque en la membrana plasmática de las
células sanguíneas existen glicolípidos y glicoproteínas que interactúan específicamente con glicoproteínas
complementarias –llamadas selectinas- presentes en la membrana plasmática de las células endoteliales.
Inversamente, en otras ocasiones los glicolípidos y las glicoproteínas se localizan en las células endoteliales
y las selectinas en las células sanguíneas.
Estas interacciones son necesarias para que las células sanguíneas se detengan en un lugar apropiado y
pasen entre dos células endoteliales contiguas, lo cual les permite alcanzan el tejido donde –según el caso-
participarán en la respuesta inmunitaria, la cicatrización de heridas o en la detención de la hemorragia.

66
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La especifidad de la unión es provista por un lado por los oligosacáridos de los glicolípidos y de las
glicoproteínas y del otro por lo oligosacáridos de las selectinas.

UNIONES ESTABLES

Las células del mismo tipo poseen la capacidad para

reconocerse selectivamente entre sí durante el desarrollo de los
distintos tejidos y órganos. Esta forma de adhesión celular es
mediada por distintos tipos de moléculas con la
denominación común de moléculas de adhesión celular (CAM)
(glicoproteínas transmembranosas). Entre éstas las
cadherinas, lectinas, integrinas, inmunoglobulinas.
Entonces en una célula epitelial polarizada tenemos
 Lado apical
 Lado basal
 Lado lateral

Cada lado o superficie de la célula epitelial tiene sus propias

especializaciones o diferenciaciones, por lo cual se las clasifica
en
Diferenciaciones de la superficie
 Apical
 Lateral
 basal

UNIONES CELULARES (ESTABLES) ESPECIALIZACIONES DE LA

SUPERFICIE LATERAL

Las uniones celulares especializadas ocurren en puntos de contacto célula - célula y célula – matriz, las
cuales pueden ser clasificadas en tres grupos funcionales:
1. uniones bloqueadoras que sellan las células en un epitelio para impedir que pequeñas moléculas
pasen de un lado para el otro de la capa epitelial.
2. uniones de anclaje que conectan mecánicamente las células (y sus citoesqueletos) a las células
vecinas o a la matriz extracelular.
3. uniones comunicantes, que median los pasajes de señales eléctricos o químicos de una célul a a
otra en interacción.

67
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Clasificación funcional de las uniones intercelulares.

1. Uniones oclusivas: unión estrecha

2. Uniones de anclaje.
A) Sitios de enganche de filamentos de actina.
1- uniones adherentes entre dos células: cinturón de adhesión o unión intermedia.
2- uniones adherentes entre una célula y la matriz: contactos focales.
3- uniones septadas: se encuentran solamente en invertebrados.
B) Sitios de enganche de filamentos intermedios.
1- entre célula y célula: desmosomas.
2- entre célula y matriz: hemidesmosomas.
3- uniones comunicantes.
a- unión de espacio o nexus
b- sinapsis químicas.
c- plasmodesmos: solamente en plantas.

Las uniones oclusivas, intermedias y desmosomas forman el COMPLEJO DE UNION

LA UNION OCLUSIVA impide el pasaje de sustancias por el espacio intercelular

La unión oclusiva (llamada también unión estrecha o zónula occludens) adhiere firmemente las
membranas de las células epiteliales contiguas por medio de una franja de conexión no muy ancha, situada
inmediatamente por debajo de la superficie libre del epitelio. Dado que en los epitelios cada célula se halla
rodeada por otras, en una célula individual la unión oclusiva compone un anillo que circunda sus paredes
laterales.
A nivel de la unión oclusiva las membranas plasmáticas de las células enfrentadas contienen, entre
otras, dos clases de proteínas integrales, llamadas ocludina y claudinas, que se disponen de modo tal que
forman tres o más hileras paralelas a la superficie del epitelio. En cada hilera las ocludinas y las claudinas
están unidas entre sí como cuentas de un collar, y cada proteína se adhiere firmemente a otra similar de la
membrana opuesta, lo que ocluye el espacio intercelular.

Además de unir a las células y de impedir el pasaje de sustancias a través de los epitelios, las
uniones oclusivas determinan que las composiciones moleculares de las regiones apicales y basolateral de
las membranas plasmáticas de las células epiteliales sean diferentes entre sí. Esta asimetría se debe a que
las uniones oclusivas forman barreras que impide la difusión lateral de las proteínas y los lípidos
membranosos parte de los cuales quedan confinados de un lado de las uniones y parte del otro. El
transporte transcelular de solutos es posible gracias a la segregación –a ambos lados de las uniones
oclusivas- de proteínas membranosas que funcionan como canales iónicos y permeasas.
Las claudinas y ocludinas se asocian con proteínas periféricas de membrana intracelular denominas
proteínas Z0 que sujetan a los filamentos de actina del citoesqueleto.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Con el microscopio electrónico se observa que las membranas plasmáticas de las dos células
adyacentes se ponen en contacto en varios puntos fusionándose la lámina externa de ambas membranas
formando una estructura pentalaminar, o sea constituida por cinco láminas que son:
 la lamina oscura de una membrana
 la lámina clara de esa membrana
 una lámina oscura formada por la unión de las dos láminas oscuras externa de las
membranas de las células adyacentes.
 Una lámina clara de la otra célula
 Por último la lámina oscura interna de la célula adyacente
La fusión de las láminas externas de ambas membranas forma una red lineal de crestas incrustadas en
surcos complementarios.

UNIONES DE ANCLAJE
Las uniones de anclaje conectan el citoesqueleto de una célula al citoesqueleto de la célula vecina o a la
matriz extracelular.
La bicapa lipídica es débil y no puede por si sola transmitir fuerza de una célula a otra o de una célula a la
matriz extracelular. Las uniones de anclaje solucionan este problema formando una fuerte estructura a
través de la membrana que es conectada al interior de la célula a los filamentos del citoesqueleto que
soportan tensión. Permiten la unión mecánica de las células del epitelio para hacer frente a las tracciones
que puedan sufrir. Sirven para robustecer la unión entre una célula y otra, o con la MEC.
Las uniones de anclaje están ampliamente distribuidas en los tejidos animales y son más abundantes en los
tejidos sujetos a mecanismos de stress mecánico, tales como el tejido cardíaco, o el músculo o la epidermis.
Estas uniones están compuestas por dos tipos de proteínas: las proteínas conectoras intracelulares que
forman una placa del lado citoplasmático de la membrana
 Proteínas conectora de transmembrana: son proteínas integrales de la membrana plasmática de la
célula, atraviesan la membrana plasmática y tienen tres regiones o dominios:

 una citoplasmática que va hacia adentro de la célula por la cual se une a proteínas intracelulares de
enganche de la misma célula.

 Una extracelular que interactúa con la MEC o con las regiones extracelulares de las proteínas ligadoras
de las otras células.

 Una región intramembranosa que queda atravesando la bicapa lipídica.

Las proteínas conectoras de transmembrana, también llamadas moléculas de adhesión celular o CAM
pueden ser cadherinas para la relación intercelular o integrinas para la relación célula MEC.
 Proteínas intracelulares de enganche: forman una placa en la superficie citoplasmática de la membrana
plasmática, o sea hacia adentro y conectan el complejo de unión a los filamentos de actina o a filamentos
intermedios de la propia célula, de acuerdo al tipo de unión de que se trate.
Las uniones de anclaje ocurren de dos formas funcionales:
 Las uniones adherentes y los desmosomas mantienen las células unidas y están formadas por
proteínas de adhesión transmembrana que pertenecen a la familia de las cadherinas.
 Las adhesiones focales y los hemidesmosomas unen las células a la matriz extracelular y están
formadas por proteínas de adhesión transmembrana de las familias de las integrinas.
Las uniones adherentes y los contactos focales actúan como sitios de conexión para los filamentos de
actina, en la porción intracelular de la membrana, en cuanto que los desmosomas y hemidesmosomas
actúan como sitio de conexión para los filamentos intermedios.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

UNIONES ADHESIVAS: UNIONES INTERMEDIA.

El cinturón adhesivo o zónula adherens presenta varias formas. En muchos tejidos no epiteliales ellas se
presentan en forma de pequeños puntos o líneas que, indirectamente, conectan los filamentos de actina
cortical debajo de la membrana plasmática, entre dos células vecinas. El modelo de unión adherente ocurre
en el epitelio, donde frecuentemente forma un cinturón de adhesión continuo debajo de las uniones
compactas, circundando cada célula de la capa epitelial. Las membranas plasmáticas de las uniones
celulares aparecen paralelas y separadas por un espacio de 15 a 20 nm.

En esta región se concentra la cadherina que aquí actúa como proteína de adhesión transmembrana, y a
través de proteínas adaptadoras de catenina, vinculina, placoglobina y alfa actinina se adosa a filamentos
de actina. A su vez todo el complejo está conectado con proteína motora de miosina y con el velo terminal
(banda de filamentos que recorre el citoplasma para apical), por lo que esta red puede contraerse con
auxilio de las proteínas motoras, lo que permite procesos como la morfogénesis animal. Los anticuerpos
anticadherinas pueden bloquear la formación de uniones adherentes y también bloquear la formación de
uniones compactas
La unión intermedia proporciona estabilidad mecánica a las agrupaciones celulares, al conectar entre si a
los citoesqueletos de las células adyacentes, resistencia lateral de los epitelios.
DESMOSOMA, DESMOSOMA PUNTIFORME O MÁCULA ADHERENTES

Son puntos de contacto (de remache) intercelular en forma de botones, que fijas las células. En el
interior de la célula estas uniones actúan como sitios de anclaje a los filamentos intermedios, semejantes a
cuerdas, que forman una red estructural de gran fuerza tensora. A través de los desmosomas, los
filamentos intermedios de células adyacentes son ligados a una red que se extiende por muchas células de
un tejido. Un tipo especial de filamento intermedio ligado a los desmosomas depende del tipo celular: ellos
son formados por filamentos de queratina en la mayoría de las células epiteliales y por filamentos de
desmina en las células del músculo cardíaco.
La estructura general de un desmosoma incluye una densa placa citoplasmática compuesta por un
complejo de proteínas de anclaje intracelular (desmoplaquina y placoglobina), que es responsable de la
conexión del citoesqueleto a las proteínas de adhesión transmembrana. Estas proteínas de adhesión

70
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

(desmogleína y desmocolina) pertenecen a la familia de las cadherinas. Ellas interactúan por sus dominios
extracelulares, uniendo membranas plasmáticas de células adyacentes.
La importancia de las uniones desmosómicas es demostrada por algunas formas de enfermedades
en la piel potencialmente fatales, pénfigo vulgar. Los individuos afectados producen anticuerpos contra una
de sus propias proteínas desmosómicas, las cadherinas. Esos anticuerpos rompen los desmosomas que
mantienen las células epiteliales (queratinócitos) unidas, dando como resultado la formación de ampollas
con extravasamiento de líquidos.
Le proporcionan fortaleza y rigidez a todas las células epiteliales. Resistencia mecánica

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

COMPLEJO DE UNION

Se denomina así clásicamente al conjunto de unión estrecha, intermedia y desmosoma que es observable
al microscopio óptico

UNIONES DE LAS CELULAS CON LA MATRIZ EXTRACELULAR

Los hemidesmosomas anclan a las células epiteliales en la lámina basal. Al igual que los contactos
focales, los hemidesmosomas poseen integrinas pero éstas se hallan agrupadas, sus dominios citosólicos
se unen a filamentos intermedios de queratina y sus dominios externos se conectan con fibras colágenas
mediada por la laminina. Además entre las integrinas y los filamentos de queratina se interpone una placa
discoidal que contiene una proteína BP 230 similar a la desmoplaquina del desmosoma

CONTACTOS FOCALES O PLACAS DE ADHESIÓN

Las células de algunos tejidos conectivos, suelen permanecer en sus sitios debido a que establecen
uniones más o menos duraderas con los componentes fijos de la matriz extracelular. En esas uniones
intervienen, del lado de las células, los contactos focales mientras que los componentes fijos de la matriz
extracelular corresponden a las fibras colágenas. Cada contacto focal consta de una proteína
transmembranosas llamada integrina, cuyo dominio interno está unido – mediante proteína ligadoras talina,
alfa actinina, paxilina y vinculina- a haces de filamentos de actina denominados fibras tensoras. Es
precisamente la integrina – a través de su dominio externo – el componente del contacto focal que se
conecta con la fibra colágena de la matriz extracelular y lo hace con la ayuda de la proteína adhesiva
fibronectina.
Uniones como estas se establecen durante la migración celular, cuando los contactos focales de los
filopodios se adhieren a las fibras colágenas en la ruta de la célula que se desplaza por la matriz
extracelular.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

En el siguiente cuadro resumimos los componentes proteicos de las uniones de anclaje.

Unión proteína ligando componente del proteínas intracelulares

ligadora extracelular citoesqueleto de enganche
transmem con el cual se
brana vincula
Unión [Link] caderina de la filamentos de catenina, vinculina, alfa
intermedia célula adyacente actina actinina , placoglobina
desmo caderina , ídem filamentos desmoglobina
soma desmoglei intermedios placoglobina
na ,
desmocoli
na
contacto integrina proteínas de la filamentos de talina , vinculina , alfa
focal matriz actina actinina
extracelular
hemides integrina proteínas de la filamentos desmoplaquina
mosoma lámina basal intermedios

UNIÓN COMUNICANTE O UNIÓN NEXO O GAP o UNION DE HENDIDURA

El concepto de que la célula es unidad de materia viviente no debe dejar de lado el hecho de que
los organismos multicelulares están constituidos por poblaciones celulares capaces de interactuar entre sí.
Esta interacción es esencial para la coordinación de actividades, además durante el desarrollo son
necesarios para la propagación de señales que controlen el crecimiento y la diferenciación. Actualmente se
sabe que en un tejido organizado la mayoría de las células está interconectada por canales de unión y que
comparte una fuente en común de pequeños metabolitos e iones los cuales pueden pasar libremente de
una célula a otra. Sin embargo la individualidad se mantiene por que las macromoléculas, incluidas ARN y
ADN no se intercambian. Estas interconexiones celulares están dadas por la presencia de uniones
comunicantes o nexos.
Llamadas también uniones en hendidura, uniones “gap” o nexus, son canales que comunican los
citoplasmas de las células epiteliales adyacentes. Este canal esta compuesto por un par de conexones que
son estructuras cilíndricas huecas que atraviesan la membrana plasmática de las células enfrentadas.
La pared del conexon resulta de la asociación de seis proteínas transmembranosas idénticas que
delimitan un conducto central. Estas proteínas se llaman conexinas y se unen con sus similares del
conexón de la membrana plasmática opuesta, lo que da lugar a un canal que comunica a las dos células.
Debido a que las conexinas sobresalen en el espacio intercelular entre 1 y 2 nm, las membranas
plasmáticas de dichas células quedan separadas por una distancia de 2 a 4 nm. Por ello la unión
comunicante se llama también unión de hendidura.
En las células epiteliales los conexones se encuentran entre los desmosomas.
Función: El conducto central del conexón tiene un diámetro de alrededor 1,5 nm por él pueden
pasar libremente los solutos (iones, monosacáridos, nucleótidos, aa, etc.) pero no las macromoléculas
(pasan monómeros, no polímeros). Permiten el acoplamiento metabólico y eléctrico de las células.
A través de las uniones comunicantes circulan 1) nutrientes, 2) desechos metabólicos, 3)
sustancias que actúan como señales, 4) potenciales de acción
Las uniones nexo permiten que el impulso electroquímico generado en una célula pase a la célula
adyacente y de allí a otra. Esto es importante en:
 órganos como el corazón, donde el impulso generado en una aurícula se disemina de célula en
célula determinando de este modo que todo el corazón se contraiga a partir de un único impulso
eléctrico. Este impulso pasa a través de los conexones que comunican las células musculares del
corazón.
 En el hígado, por ejemplo la liberación de noradrenalina de las terminales nerviosas simpáticas, en
respuesta al bajo nivel de glucosa sanguínea, estimula el aumento de la degradación del glucógeno
y la liberación de glucosa en sangre por los hepatocitos. No todos los hepatocitos están inervados
por nervios simpáticos. La señal es transmitido de los hepatocitos inervados par los no inervados a
través de las uniones comunicantes que conectan los hepatocitos.

73
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

 También es importante en el desenvolvimiento normal de los folículos ováricos, entre oocitos y

células foliculares, en la embriogénesis
La permeabilidad de las uniones nexos pueden ser
reguladas, ellos se abren y se cierran
continuamente. Comúnmente se hallan abiertos, y
se cierran cuando aumenta la concentración de Ca 2+
en el citosol, cuando la membrana se despolariza o
cuando desciende el pH. También señales
extracelulares como la dopamina, un
neurotransmisor, reduce la comunicación entre un
tipo de neurona de la retina en respuesta al
aumento de intensidades de luz
Están ampliamente distribuidas en todas las
especies animales y en la mayoría de los tejidos.

ESPECIALIZACIONES DE LA SUPERFICIE LIBRE

Mediante grandes aumentos con el microscopio óptico, en algunos epitelios cilíndricos se distingue un borde
a lo largo de la superficie libre de las células. En ocasiones sobre este borde se ven líneas verticales, de
donde deriva la designación de ribete o borde en cepillo. Mediante microscopía electrónica se observa
que el borde en cepillo está compuesto por prolongaciones citoplasmáticas, Microvellosidades, sobre la
superficie libre de la célula, cada una de ellas rodeadas por plasmalema. Son evaginaciones en forma de
dedo de guante que se encuentran en la superficie apical de las células animales. Son abundantes en los
tejidos epiteliales que requieren una superficie de absorción alta y eficiente. El diámetro es de alrededor 0,1
um y la longitud de 1 um. Una microvellosidad contiene un haz de 20 a 30 filamentos de actina incluidos en
el extremo en un material electrodenso, en la base de la microvellosidad el haz de filamentos se continúa
hacia la red Terminal, donde los filamentos de actina se mezclan
con los haces filamentosos que allí se encuentran (espectrina,
miosina). Los filamentos de actina se mantienen a distancia fija
entre sí mediante proteínas entrecruzadas denominadas villina y
fimbrina. Además el haz de filamentos de actina se fija al
plasmalema mediante “brazos” laterales compuesto por un
complejo de miosina y calmodulina. Las microvellosidades se
encuentran en el intestino con el nombre de chapa estriada y en
el riñón con el nombre de ribete en cepillo

CHAPA ESTRIADA: se observa en las células del intestino la función

es la absorción de sustancias y justamente para esto está tan
aumentada la superficie en contacto con la luz. Las
microvellosidades son muy parejas teniendo la mayoría el mismo
tamaño.

RIBETE EN CEPILLO: se ve también como una línea en la superficie

apical de las células epiteliales de los túmulos renales, está formada por microvellosidades un poco mas
desparejas que la chapa estriada y sirven para aumentar la superficie funcional de las células que reali zan
la función de absorción de líquidos en el riñón.

Esterocilios: esta especialización se encuentra en los epitelios que recubren el epidídimo, el conducto
deferente y las células sensoriales ciliadas del oído. Son estructuras filiformes de varios um de largo que se
mantienen unidas en pequeños penachos. Carecen del complejo filamentoso central, son flexibles. Se cree
que su función es aumentar la superficie y por lo tanto es posible que intervengan en la absorción de
líquidos en el caso del oído actúan en la recepción sensorial.

CILIOS Y FLAGELOS: ESTRUCTURA Y MOVIMIENTO

Los microtúbulos ciliares forman el eje de los cilios y los flagelos
Cilios y flagelos son dos versiones de una misma estructura que pueden distinguirse por su patrón de
movilidad. El aparato ciliar esta compuesto por el cilio: prolongación cilíndrica y delgada que se proyecta
desde la superficie libre de la célula, con un eje citosólico- la matriz ciliar- envuelto en una prolongación de

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

la membrana plasmática. En medio de dicha matriz, siguiendo el eje longitudinal del cilio, se encuentra un
armazón filamentoso, el axonema, integrado por varios microtúbulos paralelos entre sí asociados a
proteínas. En la base se halla el corpúsculo basal o cinetosoma, que es de donde se originan los
microtúbulos.
En el esquema general del axonema se puede distinguir la disposición microtubular típica de 9+2,, un
par de microtúbulos centrales y 9 grupos periféricos constituidos cada uno por dos microtúbulos. Los dos
microtúbulos de cada par periférico se disponen en forma oblicua, de modo que uno de los microtúbulos, la
subunidad A se encuentra más próximo al centro del axonema que el otro, la subunidad B. El A es más
pequeño pero completo, mientras que el B más grande pero le faltan dos protofilamentos en su pared
adyacente a A. Es decir el A tienen 13 subunidades de tubulina, el B tiene solo 11.

75
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Las proteínas ligadoras son: nexina, une al microtúbulo A con el B, proteínas radiales: unen al
microtúbulo A con la vaina, y las proteínas de la vaina: que forman la vaina interna que rodea al par central.
El movimiento de la cilia se debe a la dineína ciliar. Esta se diferencia de la dineína citoplasmática porque
es mas grande y tiene tres cadenas pesadas y tres cadenas livianas, en lugar de dos de cada una. Las
colas de las dineína ciliar están ancladas en el microtúbulo A de un doblete, mientras que las cabezas
globulares –con sus respectivas ATPasas- establecen uniones intermitentes con el microtúbulo B del
doblete vecino. Así, las dineínas forman puentes inestables entre los dobletes contiguos.
En el síndrome de Kartagener los cilios son inmóviles
El síndrome se debe a una o más mutaciones de los genes que codifican a la dineína ciliar o a otras
proteínas accesorias del axonema. Por consecuencia, los cilios y los flagelos son inmóviles, lo que provoca
cuadros de bronquitis crónica y esterilidad en la mujer y en el varón (los cilios del árbol respiratorio y de las
trompas uterinas y el flagelo de los espermatozoides carecen de movimiento). Por eso el paciente no
elimina las mucosidades de la tráquea y de los bronquios. Los pacientes en el caso de ser de sexo
masculino son estériles porque los espermatozoides son inmóviles. En el caso de ser mujeres algunas son
estériles porque no se mueven las cilias de la trompa de Falopio. El cigarrillo afecta enormemente al
movimiento de las cilias.
La estructura de los cuerpos basales es idéntica a la de los centríolos
Los microtúbulo ciliares nacen del cuerpo basal. Este se localiza por debajo de la membrana
plasmática, a la altura de la raíz del cilio, existen tantos cuerpos basales como cilios. Cuerpos basales y
centríolos del centrosoma son estructuralmente idénticos, constituyen cilindros huecos abiertos en sus
extremos y miden 0,2 um de diámetro por 0,4 um de largo. La pared del cuerpo basal o del centríolo está
formada por 9 unidades microtubulares, cada una compuesta por tres microtúbulos fusionados entre sí,
llamados A, B y C. El microtúbulo A es completo, pues posee 13 protofilamentos, en cambio los microtúbulo
B y C son incompletos, que contienen 11 protofilamentos cada uno. Como los dobletes en el axonema,
estos tripletes se disponen en forma oblicua, de manera que el microtúbulo A se halla mas cerca del centro
del centríolo que el microtúbulo C.
Los 9 tripletes del cuerpo basal están conectados por dos clases de proteínas ligadoras: unas son
fibras cortas que enlazan el microtúbulo A de un triplete con el microtúbulo C del triplete vecino. Las otras
fibras son largas que se unen a los tripletes en forma a los rayos de una rueda. Cabe agregar que los
microtúbulo A y B de los dobletes del cilio se continúan con los microtúbulo A y B de los tripletes del cuerpo
basal.
Los cuerpos basales se diferencias de los centriolos del diplosoma por las siguientes particularidades:
1) los primeros se localizan cerca de la superficie celular (en la raíz de los cilios) y los segundos cerca del
núcleo. 2) los cuerpos basales no poseen matriz centrosómica que envuelve a los centriolos 3) los cuerpos
basales suelen estar formados por una sola unidad, mientras que los centriolos se presentan de a dos,
ambos perpendiculares entre sí.
Origen de las cilias:
En la ciliogénesis los microtúbulos A y B del cuerpo basal cumplen la función de la gamma tubulina
del centrosoma, es decir, actúa como moldes para el nucleamiento (polimerización) de las primeras
tubulinas de los microtúbulos A y B del axonema. Las tubulinas del axonema naciente se unen a los
extremos + de los microtúbulos A y B del cuerpo basal, que apuntan hacia la superficie de la célula. Por lo
tanto, los extremos – de los microtúbulos de los cilios se localizan junto al cuerpo basal. Luego del

76
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

nucleamiento inicial se agregan nuevas tubulinas, lo cual alarga a los microtúbulos del axonema hasta que
el cilio alcanza su longitud definitiva.
Los cuerpos basales derivarían de los centriolos del centrosoma.
Por lo dicho, se deduce que antes de que los cilios nazcan se forman los respectivos cuerpos
basales. Estos aparecerían como consecuencia de la reproducción dicotómica por parte de los centriolos
del diplosoma, mediante el proceso basado en el desarrollo de procentríolos
La falla de los cilios produce una malformación llamada situs inversus viscerum totalis. En ella los
órganos están ubicados al revés en el cuerpo.

INTERDIGITACIONES

En algunas células epiteliales hay interdigitaciones que son proyecciones de la membrana de una célula
que se introducen en invaginaciones de la membrana de la célula adyacente como si fuera un gancho, estos
pliegues tienen por función aumentar la superficie de la membrana para el transporte de líquidos por
ejemplo, y contribuyen también a la unión de células.

PLIEGUES DE LA SUPERFICIE BASAL DE LAS CELULAS EPITELIALES.

Se los encuentra fundamentalmente en las células de los tubulos renales y en los conductos excretores de
las glándulas salivales. En el citoplasma basal de estas células se encuentra gran cantidad de mitocondrias
organizadas con su eje mayor paralelo al eje de los pliegues. La función de estas diferenciaciones es
aumentar la superficie de transporte de líquidos que es la función de estas células. Las mitocondrias
suministran energía para los procesos de transporte activo que ocurren en ellas.
Resumen de las uniones encontradas en células epiteliales de los vertebrados (diseño basado en células
epiteliales del intestino delgado.

77
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

78
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

PARTE 4
COMPARTIMIENTOS INTRACELULARES Y CLASIFICACION DE PROTEÍNAS

Introducción
Compartimentos celulares

Las bacterias o células procariontes no tienen organoides, son un solo compartimento que está
rodeado por la membrana plasmática; de modo que todos los procesos suceden en un solo lugar
sin estar separados; por ejemplo, la duplicación del ADN en las bacterias se realiza en el mismo
sitio que la traducción: el citoplasma de la célula. A diferencia de las bacterias, las células
eucariontes están dividas en compartimentos, hay una división de trabajo más compleja, por la
existencia de los organoides y del núcleo separados del resto del citoplasma.
A pesar de las diferencias estructurales entre una célula eucariota y procariota, existen notables
semejanzas entre ellas. La matriz citoplasmática de una célula eucariota contiene el mismo tipo de
componentes que una bacteria, es decir, moléculas de ARN, proteínas globulares, enzimas, etc.
Las células superiores poseen empero, nuevos componentes que surgieron por el proceso
evolutivo representados por los elementos citoesqueléticos y por las membranas intracelulares.
Estas últimas comprenden el sistema vacuolar o endomembranas y los organoides de membrana
pero que no se consideran parte de aquél, como mitocondrias, cloroplastos y peroxisomas. En
consecuencia en la célula eucariota aparecen diversos compartimientos entre los que sobresale el
núcleo.
Cada organoide es un compartimento rodeado por una membrana biológica (o dos) en el cual
suceden procesos totalmente distintos al otro compartimento. Cada compartimento tiene su propio
juego de enzimas, proteínas y otras moléculas especializadas, además de un sistema de
transporte y distribución de productos que lo comunican con otros organoides.
Para comprender el funcionamiento y la estructura de la célula eucarionte debemos imaginar
que hay distintas estaciones de trabajo que son los organoides y el núcleo y hay medios de
comunicación entre un compartimento y otro por el cual transfieren entre ellos distintas sustancias
como proteínas y otras moléculas.
Las proteínas son las que juegan un papel central en la compartimentalización de la célula ya
que las enzimas, que son proteínas, catalizan las reacciones que ocurren en cada organoide,
transportan moléculas hacia dentro o hacia afuera de cada organoide y actúan como marcadores
de superficie de cada organoide. Ese marcador sirve para que las proteínas distingan a cada
organoide y puedan ir selectivamente a uno u otro.
Debemos recordar que en una célula de mamífero hay aproximadamente cerca de 10 billones de
moléculas de proteínas de 10 mil tipos distintos y todas estas proteínas se sintetizan en el citosol.
Luego que es sintetizada tiene que ir a algún lugar específico que le corresponda, como a las
mitocondrias, al retículo endoplásmico, al Aparato de Golgi o a un lisosoma. Dicho destino lo
alcanzan porque la proteína también lleva una señal que le indica donde tiene que ir. Esta señal
se combina con el marcador del destino y el mecanismo hace que cada proteína vaya al lugar que
le corresponde. Esta hipótesis llamada de señales permite explicar gran cantidad de fenómenos
que ocurren en la célula y será desarrollada extensamente.
La parte de la célula que no corresponde al núcleo, es decir el citoplasma, puede ser subdividida
en dos espacios principales: por un lado el interior del sistema de organoides y estructuras
membranosas, y por el otro el exterior de éste, representado por la matriz citoplasmática o citosol,
verdadero medio interno de la célula que rellena todos los espacios no ocupados por el sistema de
endomembranas, las mitocondrias y peroxisomas.

Todas las células eucariontes tienen el mismo juego de compartimentos, todos rodeados por
membranas.

79
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

 EL CITOSOL O MATRIZ CITOPLASMATICA

 EL RETICULO ENDOPLASMICO LISO , GRANULAR y SECTOR INTERMEDIO o DE
TRANSICION
 APARATO DE GOLGI
 LISOSOMAS
 PEROXISOMAS
 ENDOSOMAS
 NUCLEO
 MITOCONDRIAS
 ENDOSOMAS TARDIOS y TEMPRANOS

Vista general de los compartimentos

 La MATRIZ CITOPLASMATICA O CITOSOL es más o menos la mitad del volumen de una

célula o sea que es abundante, es el sitio donde se fabrican las proteínas y el sitio donde
ocurren la mayoría de procesos metabólicos.
 El retículo endoplásmico LISO Y GRANULAR abarca la mitad de la cantidad de membrana
que tiene una célula.
 El APARATO DE GOLGI se caracteriza por estar organizado como pilas de membranas,
recibe lípidos y proteínas del retículo endoplásmico y después las envía a distintos destinos, al
mismo tiempo que modifica todos esos productos que recibe, usualmente en forma covalente
mientras van en su ruta al destino.
 Los LISOSOMAS que tienen enzimas digestivas y que se ocupan de digerir partículas
fagocitadas o lo que se incorporan por pinocitosis o sea partículas endocitadas
 En su camino hacia los lisosomas, las partículas que fueron endocitadas pasan por otro
compartimento que se llama ENDOSOMAS.
 Otro compartimento son los MICROCUERPOS O PEROXISOMAS que actúan en reacciones
de oxidación.
 Las MITOCONDRIAS producen energía
 El NUCLEO guarda la información genética que hace que todo funcione

Todos estos organoides en general hacen la misma función en cualquier célula pero una célula
difiere de otra en la cantidad que tiene de organoides. Por ej: si una célula se ocupa
fundamentalmente de procesos que requieren de mucha energía tendrá muchas mitocondrias.

Distribución de los compartimentos

Estos organoides o compartimentos no están distribuidos al azar. En la mayoría de las células,
el Golgi está cerca del núcleo mientras que el retículo endoplásmico se encuentra irradiando hacia
todas las direcciones, desde el núcleo. Esta distribución característica depende de la interacción
entre cada organoide y el citoesqueleto; por ej. : la localización del retículo endoplásmico y del
Aparato del Golgi depende de los microtúbulos , si los microtúbulos se destruyen en una célula, el
Golgi se dispersa , se desconcentra y el retículo endoplásmico se colapsa y queda ubicado en el
centro de la célula .

Evolución de los compartimentos

Las relaciones entre los distintos organoides o compartimentos pueden ser explicadas desde su
origen a través de la evolución. De ésta forma se puede suponer como fue originada la
mitocondria, el retículo endoplásmico, el Golgi a partir de una célula primitiva o procarionte que
carecía de ellas

La célula procarionte primitiva o arquibacteria pudo haber aparecido hace más de 3000 millones
de años, tiene ADN fijo unido a la membrana plasmática y también tiene ribosomas unidos por
ARN mensajero. Aparentemente ésta célula en algún momento determinado sufrió un proceso de
invaginación de la membrana plasmática que dio origen al MESOSOMA y entonces ésta célula se

80
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

transforma en eubacteria La invaginación se profundiza y termina envolviendo al ADN con lo cual

queda formado el núcleo, con sus poros y láminas nucleares; el ADN siempre está unido a la
envoltura nuclear como se sabe actualmente.
El retículo endoplásmico es la misma membrana invaginada que quedó en relación con la E.N con
los ribosomas unidos a la membrana del retículo endoplásmico. El origen de la mitocondria se
explica a través de la hipótesis de la simbiosis original que supone que la célula primitiva fagocito
una bacteria la cual quedo convertida en mitocondria.

El citosol

En promedio el citosol representa el 50 % del volumen del citoplasma, y el pH es de 7,2, En el

citosol se producen la mayoría de las funciones citoplasmáticas. La matriz citoplasmática contiene:
agua, iones, metabolitos de bajo peso molecular y proteínas como las enzimas que intervienen en
la glucólisis anaeróbica, síntesis y degradación del glucógeno, y además toda la maquinaria para
la síntesis de proteínas: ARN mensajero, ARN transferencia, ARN ribosómico, chaperonas,
elementos del citoesqueleto, proteosomas.
El citosol de muchas células presenta inclusiones, son gránulos no limitados por membrana,
acúmulos de moléculas. Moléculas transitorias no esenciales para la vida detectable al MO. Por
ejemplo, las células musculares y los hepatocitos contienen gránulos de glucógeno, un polímero
de glucosa con función de almacenamiento de energía celular utilizable, llamados glicosoma.
Cuando la disponibilidad de glucosa se eleva la glucógeno sintetasa citosólica elabora grandes
polímeros ramificado de glucógeno. Los hepatocitos constituyen un tipo único en el sentido de que
no acumulan glucógeno para su propio uso sino para enviar glucosa hacia la sangre a fin de
mantener en ella una concentración constante de glucosa (glucemia) aun después de varias horas
de ayuno.

81
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

El citosol de adipositos contiene grandes gotas de triacilgliceroles casi puros, una forma de
almacenamiento de ácidos grasos. En los adipocitos de del tejido conectivo.
En algunos tipos celulares el citosol contiene pigmentos –es decir sustancias con color propio-
que son producidas en la misma célula o que provienen del exterior. El mas difundido es la
lipofucsina de color marrón, compuesta por fosfolípidos combinados con proteínas. Debido a que
aumenta con la edad, se lo conoce como pigmento de desgaste.
Finalmente, algunas células contienen en el citosol cristales de proteínas, de significado
generalmente desconocido.

En el citosol los ribosomas sintetizan proteínas

El ADN genómico que es considerado como el conjunto de instrucciones que dirigen todas las
actividades celulares. Estas instrucciones se llevan a cabo por medio de la síntesis de ARN y
proteínas. El comportamiento de una célula está determinado no solo por el conjunto de genes
que ha heredado sino también por cuales de estos genes se expresan en un momento
determinado.
Las células musculares y hepáticas, por ejemplo, contienen los mismos genes; la función de estas
células está determinada no por la diferencias de sus genomas, sino por patrones regulados de
expresión génica que dirigen el desarrollo y la diferenciación.
El primer paso de la expresión de un gen, la transcripción del ADN a ARN, es el nivel primario de
regulación de la expresión génica en procariotas y eucariotas. En las células eucariotas los ARNs
son modificados de varias formas – por ejemplo, eliminando intrones por corte y empalme- para
transformar el transcripto primario en su forma funcional. Los distintos tipos de ARN tienen
diferentes funciones en las células, el ARNm sirve de molde para la síntesis de proteínas, los
ARNr y el ARNt participan de la traducción del ARNm.
La síntesis de proteínas es la etapa final de la expresión génica. Sin embargo, la traducción del
ARNm es sólo el primer paso en la construcción de una proteína funcional. La cadena peptídica se
debe plegar en una conformación tridimensional adecuada.

82
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

LE 17-3

DNA
TRANSCRIPTION

mRNA
Ribosome
TRANSLATION

Polypeptide

Prokaryotic cell

Nuclear
envelope

DNA
TRANSCRIPTION

Pre-mRNA
RNA PROCESSING

mRNA

Ribosome
TRANSLATION

Polypeptide

Eukaryotic cell

Resumen de las etapas que conducen desde el gen hasta las proteínas. Todas las proteínas que
se sintetizan en los ribosomas (excepto unas pocas elaboradas en las mitocondrias) se fabrican
en el citosol, pero solo una parte permanece en él. Las restantes se dirigen al núcleo, al sistema
de endomembranas, a las mitocondrias y a los peroxisomas.

Ribosomas o Gránulos de Palade

Los ribosomas o gránulos de Palade son organoides descubiertos a partir del Me debido a que
son muy pequeños. Pueden encontrarse en las células solas o unidas entre sí por una molécula
de ARNm formando poli ribosomas, o unidos a la membrana del RE formando el RER o REG.
Se caracterizaron como partículas subcelulares y normalmente se los designa de acuerdo a su
coeficiente de sedimentación: 70S para los ribosomas procariotas y 80S para los ribosomas de
células eucariotas, los cuales son de mayor tamaño. Tanto los ribosomas procariotas como
eucariotas están formados por dos subunidades distintas, compuesta por proteínas y por ARNr.
Proteínas y ARNr unidos por interacciones hidrofóbica no por uniones covalentes. Se
autoensamblan. La subunidad mayor del ribosoma es capaz de catalizar la formación de enlace
peptídico.
Durante la síntesis de proteínas un ribosoma se desplaza a lo largo de la cadena de mRNA,
mientras interactúa con diversos factores proteicos y el tRNA,
En la subunidad menor algunas proteínas forman dos áreas –una al lado de la otra- denominadas
sitio P (por peptidil) y sitio A (por aminoacil). La subunidad mayor las proteínas ribosómicas
formarían un túnel por el que saldría la cadena polipeptídica a medida que se sintetiza.
ARNr DE LOS RIBOSOMAS
El ARNr tiene actividad enzimática o catalítica o sea que realiza reacciones químicas como las
enzimas. Esta característica se considera fundamental en la evolución de la vida sobre la tierra, ya
que permitió el origen de las primeras células y su evolución.

83
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La letra s indica "unidades Svedver del coeficiente de sedimentación". Es una medida que es
proporcional al peso y tamaño de la partícula y que permite tener una idea de sus dimensiones,
expresarlas fácilmente y poder compararlas con otras. Si, en cambio, quisiéramos decir el peso o
el tamaño de los ribosomas, tendríamos que expresar números muy largos, difíciles de recordar;
por ese motivo se utilizan las unidades "s".
Composición química: ARN 50 % y proteínas 50 %

Cada ribosoma eucariótico está compuesto por dos subunidades –una mayor y otra menor-
identificadas con las siglas 40 S y 60 S. Los números hacen referencia a los coeficientes de
sedimentación de las subunidades. Juntas la subunidades 40S y 60S forman la unidad 80 S que
representa al ribosoma completo.
Cada unidad ribosómica está integrada por una o más moléculas de ARNr más un determinado
número de proteínas. Así, la subunidad mayor contiene los ARNr 28S, 5,8S y 5S más 50 proteínas
denominadas L1....L50; y la subunidad menor contiene el ARNr 18 S mas 33 proteínas S1...S33.
Dado que las 83 proteínas ribosómicas se construyen a partir de otros tantos ARNm, puede
decirse que en la formación del ribosoma intervienen 85 genes (83 corresponden a las proteínas,
uno al ARNr 45S y otro al ARN 5S)

Función: Interviene en la síntesis de proteínas, siendo el lugar donde se ordenan todos los
componentes que actúan en la misma. Es la "fabrica" donde se encuentran todas las maquinarias
biosintéticas de las proteínas. Sólo necesita al ARNm que le lleva el código de cómo tiene que ser
la secuencia de aminoácidos y el ARNt que trae cada uno de los aminoácidos a medida que se
van necesitando. El ARNm sería el "director " de la fabrica y el ARNt el que trae la "materia prima”,
que son los aminoácidos.
ARN de transferencia: Durante la traducción, cada uno de los 20 aa debe ser alineado con su
correspondiente codón del ARNm molde. Todas las células contienen distintas moléculas de ARNt
que sirven como adaptadores en este proceso.
Los ARNt tienen una longitud de 70 a 80 nucleótidos con una estructura en forma de hoja de
trébol y horquilla debida a la complementariedad de bases entre las distintas regiones de la
molécula.
Los ARNt para poder actuar como adaptadores necesitan dos regiones distintas, una secuencia
CCA en su extremo 3`al cual los aa se unen covalentemente, en concreto a la ribosa de la
adenosina. La secuencia del ARNm es reconocido por el lazo del anticodón, localizado en el

84
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

extremo de la molécula del ARNt plegada el cual se une al codón adecuado mediante
complementariedad de bases

Los ribosomas han sido considerados durante mucho tiempo estructuras pasivas en las cuales
ocurre la elongación de la cadena de proteína, sin embargo actualmente se considera que son
participantes activos en la biosíntesis de proteínas.

COMPARTIMIENTOS INTRACELULARES Y TRÁFICO DE PROTEÍNAS

Figura: los principales compartimientos de una célula eucariota son: el núcleo contiene el genoma
y es el lugar de la síntesis de DNA y ARN. El citoplasma que lo circunda consiste en citosol y
organelos citoplasmáticos. El citosol constituye la mitad del volumen celular. El RE presenta
ribosomas adheridos a su superficie citoplasmática, los cuales sintetizan proteínas integrales de
membrana, proteínas solubles destinadas a la secreción o a su transporte a otros organoides.
También produce los lípidos. El complejo de Golgi, una serie de compartimientos en sacos o
cisternas, recibe los lípidos y proteínas del RE y las distribuye hacia diferentes destinos
intracelulares modificándolas o a la membrana plasmática.
Los cloroplastos y las mitocondrias generan la mayor parte del ATP que se requiere. Los
lisosomas con sus enzimas digestivas que degradan tanto orgánulos celulares muertos o
desgastados como macromoléculas captadas del exterior de las células por endocitosis y
fagocitosis. Primero deben pasar por compartimientos como los endosomas. Los peroxisomas,
son pequeñas vesículas que contienen enzimas oxidativas. La distribución de los organoides no
es al azar e intervienen los elementos del citoesqueleto.

.Figura B: Las proteínas pueden

desplazarse entre compartimientos
de diferentes maneras.

85
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

El primer acontecimiento clasificatorio tiene lugar durante el crecimiento inicial de las cadenas
polipeptídicas nacientes en ribosomas del citosol. Para entender los principios generales de est
sistema de señales de clasificación es importante distinguir tres sistemas diferentes mediante los
cuales las proteínas se desplazan:
 el tráfico de proteínas entre el citosol y el núcleo a través de los poros nucleares (NPC) los
cuales actúan como puertas selectivas que pueden transportar moléculas específicas y
ensambles de macromoléculas y difusión de moléculas pequeñas: transporte por puerta
(gate transport).
 transporte de transmembrana: es este caso las proteínas atraviesan la membrana
directamente y se meten al interior de las mitocondrias, peroxisomas, RE y plástidos. Esto lo
hacen por translocación debido a proteínas translocadoras específicas que hay en la
superficie de estos organoides formando canales o translocones. La proteína transportada
usualmente tiene que estar desplegada, y tener estructura primaria para poder entrar a/t de
la membrana desde el citosol hacia un espacio topológico diferente.

 Transporte vesicular: las vesículas de transporte cargan proteínas de un compartimiento a

otro. A medida que la membrana produce vesículas por gemación se cargan de moléculas
del lumen del compartimiento. Tras el transporte, por fusión con la m del compartimiento
diana, estas vesículas descargan su cargamento en el interior del otro compartimiento.

86
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Las señales específicas,

secuencias orientadoras, pueden
hacer que las proteínas vayan
directamente a su destino, como por
ejemplo el núcleo, RE,
mitocondrias o peroxisomas. Pero
también las proteínas pueden tener una
señal que las mande a una estación
intermedia que es el RE. Del RE esa
señal les puede indicar también que
tienen que seguir y pasar al Golgi que
es otra estación intermedia de
clasificación y del Golgi van a los
endosomas, de ahí a los lisosomas
o a las vesículas de secreción, finalmente de las vesículas de secreción las proteínas pueden salir
de la célula.

Las señales pueden ser de dos tipos:

PEPTIDO SEÑAL
Es un segmento de la proteína situado en la punta o en el medio de la misma A veces después
que la proteína alcanzó su destino es eliminado por una enzima que es la PEPTIDASA de
SEÑAL. Los péptido señal se utilizan para el tráfico de proteínas del citosol a
retículo endoplásmico
mitocondrias
peroxisomas
núcleo
Tenemos entonces que cuando el lugar que hay que alcanzar es por transporte transmembrana o
por puertas se utiliza un PEPTIDO SEÑAL.

PARCHE SEÑAL

87
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Consiste en una estructura tridimensional formada por varios pedacitos de la proteína

relacionados. En éste caso los Aa que forman el parche se encuentran en distintas partes de la
proteína. En general no son eliminados después que la proteína alcanzó su destino a diferencia
del péptido señal. Se utilizan cuando las proteínas tienen que ir a
Golgi
lisosomas.
La síntesis de todas las demás proteínas codificadas por el núcleo se completan en los ribosomas
citosólica “libres”; y las proteínas terminadas son liberadas hacia el citosol.

Plegamiento y modificación de las cadenas polipeptídica

En la última fase de la síntesis de proteínas, la cadena polipeptídica naciente se pliega (acción de
las chaperonas) y modifica hasta obtener su forma biológicamente activa, hecho que puede
comenzar durante la síntesis o luego de producida ésta. No obstante, algunas proteínas no
obtienen su conformación biológica activa hasta después de haber sufrido una o más reacciones
de modificación o maduración, denominadas modificaciones post-traduccionales. Entre ellas
pueden consignarse:

SINTESIS DE PROTEINAS PARA MITOCONDRIAS, MECANISMOS PARA SU LLEGADA

La mitocondria requiere para su normal funcionamiento la incorporación de lípidos y proteínas
sintetizadas en el citosol, un proceso que ocurre de manera continua durante el período de
interfase del ciclo celular. Conforme las organelas aumentan de tamaño, una o más organelas
hijas se desprenden por brote de un modo similar a como lo hacen las células bacterianas durante
su división.
Las proteínas recién elaboradas en los ribosomas citosólicos, pasan al citosol y luego son
captadas de manera específica por la organela adecuada, mediante la unión a proteínas
receptoras en la superficie de la organela que reconocen secuencias de orientación-captación
específica.

88
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Estas

proteínas se asocian a chaperonas de la familia hsp70, que se encargan de mantenerlas

desplegadas para que pueden llegar a la mitocondria y atravesar sus membranas. Al contactar
con la membrana mitocondrial externa se asocia a una nueva hsp70, perdiendo a la anterior. Esto
incorpora a la proteína a la mitocondria con gasto de energía (ATP). Una vez ingresada en la
matriz, la proteína se despliega con la colaboración de las chaperonas hsp60. Todas las proteínas
importadas del citosol incluyen en el extremo amino de sus moléculas un péptido señal de 25
aminoácidos. Dada la información contenida en el péptido señal, apenas las proteínas surgen del
ribosomas son conducidas a las mitocondrias en cuyas membrana hay un receptor para el
péptido. Si la proteína está destinada a la matriz, una proteasa escinde el péptido señal y la
moléculas e libera en la matriz, por su parte las proteínas destinadas a las membranas poseen
señales adicionales que las retienen en la bicapa lipídica de la membrana apropiada.
Para atravesar las membranas interna y externa se valen de translocones que atraviesan estas
membranas y se encuentran unidos a este nivel

SINTESIS DE PROTEINAS PARA PEROXISOMAS, MECANISMOS PARA SU LLEGADA A

DESTINO
Es un mecanismo poco conocido. Tras ser liberadas desde los ribosomas citosólicos, las
proteínas peroxisómicas recién sintetizadas, a diferencia de las proteínas mitocondriales y de los
cloroplastos, por lo general se pliegan hacia su conformación madura en el citosol, antes de su
importación hacia la organela. Esta importación requiere la hidrólisis de ATP. Muchas proteínas de
la matriz peroxisómica utilizan una secuencia orientadora SKL (de tres aminoácidos), ubicada en
el extremo C-terminal que no se separa tras la importación. Esta secuencia requiere del
reconocimiento de una proteína receptora citosólica- peroxina- PTSR1; que lo acompaña hasta
entrar al organoide y luego en la luz del mismo se disocia, volviendo al citosol para captar otra
proteína destinada al peroxisoma.
Herencia de los organoides

Por último mencionamos con respecto a los compartimentos celulares que la célula no hace sus
organoides de novo (de nuevo; a partir de componentes nuevos) sino que se necesita información
que se encuentra en los mismos organoides; entonces los organoides se fabrican a partir de otros
organoides.

89
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Cuando la célula se reproduce por mitosis tiene que duplicar todos sus organoides primero, para
lo cual los agranda y los divide en organoides hijos que van a ir a cada una de las células hijas
que heredan de su madre un juego completo de organoides. Esta herencia es esencial sino la
célula hija no puede fabricar organoides. De ésta manera vemos que la información que se
requiere para construir un organoide no está en el ADN sino que está en el mismo organoide y
esto es lo que se llama INFORMACION O HERENCIA EPIGENETICA o también se llama
HERENCIA NO MENDELIANA O HERENCIA MATERNA. Esta información epigenética es
esencial para la propagación de una célula a la otra de los organoides así como la información
genética es esencial para la herencia de las proteínas. En el caso de la fecundación, la mayoría
de los organoides los aporta el ovulo, ya que los tiene en el citoplasma. Por lo tanto el cigote y a
posteriori el nuevo individuo hereda los organoides solo de la madre y no del padre, con algunas
excepciones.

90
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

PARTE 5
TRAFICO VESICULAR MEDIANTE LAS RUTAS SECRETORAS Y ENDOCÍTICAS
MECANISMOS DE SECRECION
Generalidades: ahora dirigiremos nuestra atención hacia la clase muy grande de proteínas que se
sintetizan y clasifican en la VÍA SECRETORA. Según con lo que acabamos de describir el interior
celular se encuentra compartimentalizado de un modo tal que la síntesis proteica, la síntesis
lipídica, la secreción se lleva a cabo en compartimientos distintos. Dentro de los compartimientos
se encuentra el sistema de endomembranas, llamado antiguamente sistema vacuolar
citoplasmático, cuya génesis se atribuye a un proceso de invaginación de la mp a modo de
horquilla la que ulteriormente perderá el istmo que lo comunica con el medio extracelular.
Los componentes del SE son:
 Envoltura nuclear
 ER
 Aparato de Golgi
 Lisosoma
 Endosomas
 Vesículas.
Estos componentes no deben ser considerados como entidades separadas e independientes, se
encuentran formando una unidad funcional de amplia intercomunicación entre sí
Cada uno de estos componentes está formado por una membrana biológica similar a la
membrana plasmática, que forma estructuras cerradas conteniendo en su interior distintas
moléculas. Estas estructuras o sacos pueden ser:
 vesículas o vacuolas son bolsas esféricas más chicas o mas grandes.
 Cisternas, son sacos aplanados.
 Túbulos son cilindros alargados, irregulares.

91
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Los organelos del sistema de endomembrana son parte de una red dinámica integrada en la que
los materiales se envían y regresan de una parte de la célula a la otra. Casi en su totalidad los
materiales se trasladan entre los organelos en pequeñas vesículas de transporte limitadas por
membrana que se desprenden de un compartimiento donador de membrana, se mueven por el
citoplasma en forma dirigida, a menudo tiradas por proteínas motoras que operan sobre rieles
formados de microtúbulos. Cuando llegan a su destino, las vesículas se fusionan con la
membrana del compartimiento receptor, el cual recibe el cargamento soluble de la vesícula así
como su envoltura membranosa.
Ya se han identificado varias vías: biosintética y secretora en la que se sintetizan proteínas en el
retículo endoplasmático, se modifican en el Golgi y se transportan desde el Golgi a varios
destinos, como la membrana plasmática, un lisosoma, o se descargan (secretan) de la célula ya
sea por secreción constitutiva o secreción regulada. En esta última los materiales se almacenan
en paquetes y se descargan solo como respuesta a un estímulo apropiado. La vía endocítica a
través de la cual los materiales se mueven de la superficie externa de la célula a los
compartimientos, como los endosomas y lisosomas que se localizan dentro del citoplasma.

92
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Retículo endoplasmático
Al ser observado al Me. se comprobó que se extendía a través del citoplasma naciendo en la
envoltura nuclear, cómo una continuidad de la misma. Está compuesto por una red tridimensional
de túbulos y sacos aplanados interconectados. A pesar de su extensión y de su intrincada
morfología, constituye un organoide indiviso, ya que posee una membrana continua y una sola
cavidad. Está dividida en una serie de laberintos con tubulos que se ramifican y sacos aplanados
que se llaman cisternas, todos intercomunicados de modo que el interior del retículo
endoplásmico o espacio intraluminal, forma una continuidad que encierra un solo espacio; ese
espacio es llamado también luz del retículo endoplásmico. Ocupa el 50% del total de membranas
y 10% del volumen celular. El citoesqueleto se encarga de mantener a sus componentes en
posiciones más o menos fijas dentro del citoplasma.
El ER juega un papel muy importante en la biosíntesis celular, su membrana es el lugar de la
síntesis de todas las proteínas de transmembrana y lípidos de la mayoría de los organoides
celulares, incluyendo el propio ER, complejo de Golgi, lisosomas, endosomas, vesículas
secretoras y mp. La membrana del ER también contribuye a la formación de membrana en
mitocondrias, peroxisomas y cloroplastos al sintetizar lípidos de membrana. Participa en la
producción de esteroides, metabolismo del glucógeno, destoxificación y secuestro de Ca++.
En su porción más cercana a la envoltura nuclear, este retículo posee en su superficie que
contacta con el citosol unas estructura ricas en ARN y proteínas, los ribosomas, y en su extremo
mas distal carece de los mismos. Basándonos en esta característica se clasificó al ER en ER
rugoso y liso, según la presencia o no de los ribosomas. Si bien esta división es sumamente útil a
los fines didácticos, es menester señalar que ER existe uno solo y posee dos porciones: una
porción con ribosomas (rugoso) y una porción carente de ellos (liso). Cada una de las porciones
además de poseer características morfológicas, difiere también en cuanto a sus funciones.

¿Por qué los ribosomas no se adhieren al REL y si a la envoltura nuclear externa?

¿Cuáles son las principales diferencias morfológicas entre el RER y el REL? ¿ las principales
diferencias funcionales?
¿Cuáles son las tres proteínas que se esperaría encontrar como componentes integrales de la
membrana del RER y que estarían ausentes de la del REL? ¿Cuáles son las dos proteínas del
REL que no están presentes en el RER?

Retículo endoplasmático rugoso

El RER se encuentra conformado por una trama tridimensional de cisternas, sacos aplanados
dispuestos en capas, paralelas que se originan en la envoltura nuclear con ribosomas adheridos
en su cara citosólica.
Los ribosomas adheridos a las membranas definen
al RE rugoso (RER o REG)
El proceso de síntesis de cualquier proteína
comienza en el núcleo celular con la
activación del gen respectivo, cuya
información se transcribe (se copia) a una molécula
de ARNm, información correspondiente para la
síntesis de una determinada proteína. Vale decir que
lo que sale del núcleo, no es el ADN sino la
información génica. Este mensaje génico es
interpretado en el citosol mediante un proceso llamado
traducción por la acción conjunta de ribosomas, ARNt que transportan los diferentes aminoácidos
y una multitud de enzimas.
La síntesis de péptidos a partir de la información del RNA comienza siempre en los ribosomas
libres del citosol. Se ha comprobado que a medida que la síntesis progresa, la cadena
polipeptídica crece y asoma al citosol, aquí caben dos caminos

93
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

 El proceso continúa en los ribosomas libres hasta completarse la síntesis de la proteína y

los ribosomas no se unen al RE.
 El péptido es reconocido con señal, y todo el conjunto (péptido mas ribosomas) es
transferido a la membrana del RER. Este es el mecanismo del péptido señal, cuya
secuencia es reconocida por una partícula llamada de reconocimiento de la señal o PRS.

Por lo tanto existen en el citosol dos poblaciones de ribosomas separadas espacialmente: los
ribosomas unidos a membrana, unidos a la cara citosólica del ER y los ribosomas libres. Ambos
son estructuralmente y
fisiológicamente idénticos. Difieren solo en la
proteína que están fabricando en un momento
dado. Cuando un ribosoma comienza a
sintetizar una proteína con péptido señal, la
propia señal conduce a todo el conjunto
(péptido más ribosoma) a la m del ER, este es el
mecanismo del péptido señal, cuya
secuencia es reconocida por una partícula
llamada de reconocimiento de la señal o
PRS. Dado que muchos ribosomas pueden
unirse simultáneamente a una misma molécula
de RNA mensajero, normalmente forma un
polirribosoma

Cada uno de los ribosomas asociados a una

molécula de ARNm puede volver al citosol
cuando termina la traducción cerca del extremo
3 de la molécula de mARN.
El péptido señal es quien dice al ribosoma cuando debe unirse al ER y si no hay péptido señal
permanecerá libre en el citosol.

Una vez que los ribosomas que sintetizan estas proteínas se unen al ER rugoso, las proteínas
penetran o atraviesan la membrana del ER de manera cotraduccional, o sea durante su síntesis.
Las proteínas solubles de esta clase primero se ubican en la luz del ER y luego son enviadas a la
luz de otras organelas, o se secretan de la célula. Del mismo modo, las proteínas integrales de m
de esta clase primero se insertan en la membrana del ER rugoso durante su síntesis; algunas
permanecen allí, pero muchas al final llegan a ubicarse en la membrana plasmática o en las
membranas del ER liso, el complejo de Golgi, los endosomas o los lisosomas.

94
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Translocación de proteínas de secreción a través de la m del ER

Recordemos que las proteínas del RER pueden ser:

 De transmembrana, que solo son translocadas parcialmente a través de la m del ER y por
lo tanto se mantienen unidad a ella, mantenerse en el ER o estar destinadas a las m de
otros organoide o a la membrana plasmática.
 Proteínas solubles o de exportación: que son completamente translocadas a través de la m
del ER y liberadas en el lumen, pasan al REL, luego al Golgi quien les otorga membrana.
Las proteínas se ubican ahora en el interior de vesículas de secreción que las transportarán
hasta la membrana plasmática y alcanzar el medio extracelular. Distinto es el caso de las
proteínas lisosomales, que emergen como una vesícula del aparato de Golgi y se fusiona
con los endosomas para alcanzar a los lisosomas.

Dado que la proteína de importación al ER no es liberada al citosol, porque la síntesis se detiene

hasta que el polirribosama alcance la m del ER, no es necesaria la ayuda de chaperonas, no
existe peligro que se pliegue antes de alcanzar el translocador de la membrana.

Entrada de proteínas al RE: Los péptidos señal fueron descubiertos por primera vez en proteínas
importadas al ER
A principios de los años 70 fue postulada la hipótesis de la señal la cual postulaba que la
secuencia líder actúa de péptido señal dirigiendo la proteína de secreción hacia la membrana del
ER, una vez en ella y antes de que la cadena polipeptídica esté completa, el péptido es
hidrolizado por una peptidasa señal de la m del ER. La secuencia de señal N-terminal emerge del
ribosoma sólo cuando el polipéptido alcanza una longitud de 70 aa, porque cerca de 30 aa
permanecen ocultos en el ribosoma.
El péptido señal es dirigido a la membrana del RE por lo menos mediante dos componentes: una
partícula de reconocimiento de la señal PRS o SRP, que se une al péptido señal por medio de una
proteína adaptadora NAC; y viaja en forma cíclica entre la membrana del ER y el citosol, y un
receptor de PRS conocido como proteína de
desembarcadero (docking) presente en la
membrana del ER. A su vez el ribosoma se apoya
sobre otra molécula que es receptora para la
subunidad mayor, llamada riboforina. Esta proteína
es la responsable del anclaje del ribosoma a la cara
citosólica del ER. La unión ribosoma- riboforina determina
la apertura de una estructura proteica en forma de túnel
denominada translocón, por donde la proteína se
introduce al lumen del ER.
La SRP es una ribonucleoproteína formada por 6
proteínas y ARN pequeño citosólico. La PRS y el
receptor de SRP están presentes en todas las células
eucariotas. Una de las proteínas de la SRP (P54)
puede unirse a secuencias señal para el ER. Otras proteínas de la SRP (o dominios) detienen la
síntesis del polipéptido en el ribosoma, hasta que el complejo (mRNA; ribosoma, aa-ARNt;
polipeptido naciente y SRP) contacta con la superficie citosólica del ER donde la SRP es
reconocida por una proteína receptora de SRP o proteína anclaje.
La SRP y su receptor sólo inician la transferencia de la cadena reciente a/t de la m el ER; luego se
disocian de la cadena, la cual es transferida a un conjunto de proteínas de transmembrana
llamadas translocón que atraviesa la membrana del ER como si fuera un túnel.

95
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

El complejo ha quedado dispuesto sobre le RE de tal forma que se favorece su interacción con
otra proteína integral de la m del ER, situada en posición vecinal al SRP-R. Esta nueva proteína
se llama proteína receptora de ribosoma o riboforina, porque su misión es la de reconocer la
subunidad mayor del ribosoma que forma parte del gran complejo y, mediar en la entrada del
polipéptido naciente al interior del ER, efectuando un papel como “poro” de la membrana. En la
riboforina se abre un “canal de translocación” que permite la entrada en el lumen de la cadena
polipeptídica creciente. De ahí el nombre de translocasa para la riboforina. Para De Robertis la
riboforina es una proteína receptora del ribosoma que se encuentra vecina al translocón. En
levaduras y células de mamíferos, los canales de translocación que atraviesan la membrana del
ER están constituidos por tres proteínas transmembrana denominadas Sec61.
 Normalmente la señal peptídica queda enganchada en la pared del translocón y se forma un
asa que a medida que la proteína se va volcando se hace mas grande. Ahora actúa una
enzima la peptidasa señal la cual corta al péptido señal y lo degrada, ya no le hace falta.
 La cadena de aa sigue fabricándose sin ninguna traba hacia el interior del ER. Una vez que
la proteína están fabricadas y dentro del RER, se pliega gracias a las chaperonas hsp 60.
Se desarma el sistema, el ribosoma se separa y se cierra el poro del translocón.

96
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Muchas proteínas en las levaduras, así como algunas proteínas en las células de mamíferos son
sintetizadas en ribosomas citosólicos libres, y su incorporación postraduccional al RE no
requiere de PRS. En su lugar, su secuencia señal es reconocida por proteínas receptoras
diferentes (el complejo Sec 62/63) asociadas al complejo Sec 61 en la membrana del RE. Se
requiere de chaperonas citosólica para mantener las cadenas polipeptídicas en una
conformación desplegada para que puedan entrar por el canal Sec 61; y se requiere otra
chaperona en el RE (denominada BiP) para tirar de la cadena peptídica a través del canal y
hacia adentro del RE.

Inser
ción
de
prote
ínas
de
mem
bran
a en
la
mem
bran
a del
ER
Lo anterior ocurre en el caso de proteínas solubles, ya que en proteínas de transmembrana, es
decir destinadas a permanecer en la membrana es más complejo, ya que algunas zonas de las
proteínas o cadena polipeptídica son translocadas a través de la bicapa lipídica y otras no
(translocación parcial).
 Un péptido señal amino terminal inicia la translocación, igual que para el caso de
proteínas solubles, pero un segmento adicional hidrofóbico de la cadena polipeptídica frena
el proceso de transferencia antes de que toda la cadena haya sido translocada (señal de
anclaje o stop o secuencias topogénicas, detención de la transferencia. Cuando esta
segunda secuencia entra al canal de translocación (Sec 61), el canal libera lateralmente a la
proteína en la bicapa lipídica, y la secuencia amino terminal es cortada, por la peptidasa
señal, dejando a la proteína transmembrana insertada en la membrana. La síntesis de la
proteína del lado citosólico continúa hasta completarse.
 Un péptido señal interno reconocido por la SRP, permanece en el interior de la bicapa
lipídicas como hélice alfa que atraviesa la membrana, la cadena naciente se alarga y la
porción del lado C-terminal de la secuencia señal pasa a través del translocón hacia la luz
del ER. Una vez completada la síntesis de la proteína, la secuencia interna de señal y
fijación se mueve desde el translocón hacia la bicapa lipídica, y se forma la proteína de
transmembrana de unipaso.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

 La proteína de multipaso como la GLUT1: la hélice N-terminal actúa como una

secuencia señal y fijación no escindida, que dirige la unión de la cadena polipeptídica
naciente a la m del ER rugoso y el comienzo de la inserción cotraduccional. En este paso
intervienen tanto la SRP como el receptor de SRP. Tras la síntesis de la hélice 2, que actúa
como secuencia de detención de transferencia y fijación a la m, la salida de la cadena hacia
la luz del ER a través del translocón se detiene. Entonces, las dos primeras hélices salen
del translocón hacia la bicapa lipídica de la m del ER. El terminal C de la cadena naciente
sigue creciendo en el citosol. Asas helicoidales subsiguientes podrán insertarse de manera
semejante, aunque la SRP y su receptor sólo se necesitan para la inserción de la primera
secuencia de señal y fijación. De Robertis propone que las señales adicionales que actúan
como péptidos señal serían dirigidas hacia la membrana del RER por sucesivas PRS y
todas abordarían la membrana por el mismo translocón. Para ello a medida que ingresan
nuevas señales en el translocón, las precedentes salen por un costado y se ubican entre los
fosfolípidos de la bicapa.
 Estas proteínas que quedan atravesadas en la membrana del RE pueden seguir varias vías:
quedarse en la membrana del ER, pasar a la membrana de otro compartimiento del sistema
de endomembranas, o pasar a la membrana plasmática.

Modificaciones postraduccionales y control de calidad en el RER

Los polipéptidos sintetizados en la membrana y la luz del ER rugoso pasan por modificaciones
antes de llegar a su destino:
 Formación de enlaces disulfuro entre cadenas laterales de los residuos de cisteína.
 Plegamiento adecuado
 Adición y procesamiento de carbohidratos (primeras etapas de Glicosidación)
Con respecto a la 1º y 2º, el ER contiene varias proteínas que aceleran el plegamiento de las
proteínas como ser la proteína disulfuro isomerasa PDI, es uno de los catalizadores de
plegamiento, las Hsp 70 la cual se une de forma transitoria a la proteína e impide que se
plieguen mal, las lecitinas, etc.
Sólo las proteínas correctamente plegadas son transportadas desde el ER rugoso hacia el
complejo de Golgi. Las proteínas de secreción y de m mal plegadas a menudo se degradan una o
dos horas después de su síntesis en el ER, pero se ha comprobado que se transportan desde la
luz del ER, en sentido retrogrado a/t de un translocón, hacia el citosol, donde son degradadas.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Otro aspecto del control de calidad del ER es la retención en la luz del ER de las proteínas
“residentes” solubles como las Hsc 70 y la PDI, que catalizan el plegamiento de las proteínas
recién elaboradas.
¿Cómo? La respuesta está en una secuencia C-terminal específica que hay en las proteínas
residentes del ER y en un receptor que reconoce esta secuencia. La PDI, la Hsc 70 luminal y
muchas otras proteínas residentes en el ER poseen una secuencia de cuatro aa, KDEL, en su
terminal C. Este receptor se encuentra principalmente en el cis Golgi y en las vesículas de
transporte de ER a Golgi; su función más importante es unirse a proteínas con la secuencia de
reconocimiento KDEL y retornarlas hacia el ER.
Glucosidación de las proteínas en el ER
La mayor parte de las proteínas que se sintetizan en el ER lo hacen en forma de glucoproteínas,
lo que significa que a la secuencia aminoacídica se le agrega un grupo glucídico. Este agregado
se lleva a cabo en el RER mismo, y consiste en la adición de un glúcido de 14 monosacáridos
preformados por un complejo mecanismo que incluye una enzima que transfiere la cadena de
monosacáridos a los grupos aminos de los aa asparagina. Posteriormente este grupo será
modificado en su camino hacia la mp, en el Golgi.
 Los oligosacáridos de las proteínas tienen varias funciones dependiendo de la proteína.
Pueden proteger a la proteína de la degradación, retenerla en el ER hasta que se haya
plegado correctamente o ayudar a guiarla hasta el orgánulo apropiado actuando como señal
de transporte, como en el caso de las proteínas lisosomales. Cuando se colocan en la
superficie celular, los oligosacáridos forman el glucocaliz y pueden participar en el
reconocimiento de una célula por otra. En el ER, los azúcares son añadidos al dolicol
fosfato, un fosfolípido que es el que transfiere al oligosacárido a la proteína que es
translocada a través de una enzima la oligosacárido transferasa u oligosacriltransferasa.
Funciones del RER
 Síntesis de proteínas en los ribosomas. Todas estas proteínas están destinadas a:
 La secreción
 Las que quedan en el RER
 Las que tienen que ir a los endosomas , lisosomas y complejo de Golgi
 Las que quedan en la membrana plasmática como pasaje simple y múltiple
 Plegamiento de las proteínas recién sintetizadas, este plegamiento es controlado por las
proteínas chaperonas hsp 70. Si reconocen tramos de proteínas incorrectamente plegadas
los asisten para que se plieguen bien, si no lo logran, las proteínas mal plegadas se
degradan en el propio RER o salen al citosol.
 Agregado de oligosacáridos a las proteínas, proceso que comienza en el RER y termina en
el Golgi.
 Síntesis de proteoglicanos, glicoproteínas formadas por la unión de proteínas con GAG,
polisacáridos complejos constituidos por una sucesión de unidades disacáridas

Retículo endoplasmático liso (REL)

Es un sistema laberíntico irregular y no de cisternas paralelas como se describe el RER. El REL
se halla libre de ribosomas. En la gran mayoría de las células estas regiones son escasas y solo
existe una pequeña región del ER que es lisa parcialmente y parcialmente rugosa, que se
denomina elementos transicionales porque de ella emergen las vesículas que transporten
proteínas y lípidos recién sintetizados hacia el Golgi. El REL es el lugar donde se sintetizan los
fosfolípidos de membrana, en el lado citosólico de la bicapa. Una vez fabricados deben cambiar al
lado luminal y para ello tienen translocadores fosfolipídicos llamados flipasas que mueven esas

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

moléculas de la cara citosólica a la cara luminal. El REL colabora en la fabricación de triglicéridos.

Síntesis de lípidos, fosfolípidos, esteroide y triglicéridos
No obstante en determinadas células especializadas el REL es abundante, por ejemplo:
 En las células pertenecientes a las gónadas y a las glándulas suprarrenales, el REL tiene
varias enzimas que intervienen en la síntesis de hormonas esteroides a partir del colesterol
(por ejemplo las células de Leydig secretora de testosterona de los testículos humanos, las
células granulosas del ovario secretan estrógenos, progesterona.
 Los hepatocitos son otro ejemplo, principal lugar de producción de partículas lipoproteicas
para la exportación. Las enzimas que sintetizan los componentes lipídicos de las
lipoproteínas se localizan en la membrana del REL, como también las enzimas que
catalizan una serie de reacciones de detoxificación de drogas liposolubles provenientes del
exterior y compuestos producidos por el metabolismo que resultan perjudiciales. Las
reacciones de detoxificación más estudiadas están catalizadas por las enzimas de la
familia de citocromos P450, los cuales junto a otras enzimas, convierten las sustancias
tóxicas en moléculas hidrosolubles que salen de la célula con facilidad.
 Desfosforilación de la glucosa 6-fosfato. En la membrana del REL de los hepatocitos se
encuentra la enzima glucosa 6-fosfatasa que tiene por función extraer el fosfato de la
glucosa 6-fosfato, que se convierte en glucosa libre. A diferencia de la glucosa 6-fosfato, la
glucosa libre puede abandonar la célula y pasar a la circulación sanguínea para ser
utilizada como fuente de energía por los tejidos. Debe señalarse que la glucosa 6-fosfato
proviene de la glucosa 1-fosfato, esta última surge de la degradación del glucógeno
depositado en el citosol de los hepatocitos en forma de inclusiones.
 El REL es el principal depósito de Ca++ de la célula. La concentración de Ca++ en el
citosol es muy inferior a la existente en el líquido extracelular y en la cavidad del RE. Las
diferencias se deben a la actividad de sendas bombas de Ca++ localizadas en la
membrana del REL y en la membrana plasmática. Ambas remueven el Ca++ del citosol,
que pasa al REL o al líquido extracelular. El traslado del ion en sentido inverso es pasivo,
pues se produce por canales iónicos. En las células en general los canales de Ca++ se
abren mediante un ligando, el IP3. En cambio, en las células musculares estriadas los
canales de Ca++ del retículo sarcoplasmático (una forma especializada del REL) son
dependiente de voltaje, ya que se abren cuando se modifica el potencial de membrana.
Esta liberación y posterior recaptación del Ca++ por el retículo sarcoplasmático median la
contracción rápida y la relajación de las miofibrillas durante cada ciclo de la contracción
muscular.
Aclaración: es interesante mencionar que esta capacidad de destoxificación es modificable por
determinados compuestos llamados inductores enzimáticos, los que tienen la capacidad de
aumentar el número de complejos enzimáticos, también como consecuencia de esto se observa al
Me un aumento en el Nº de cisternas del REL. Drogas inductoras enzimáticas son por ejemplo el
alcohol etílico, el fenobarbitol, etc. Esto es la base por el cual un bebedor asiduo puede tomas
más alcohol que una persona normal y mantenerse de pie aún, dado que posee mayor cantidad
de enzima encargada de degradar el alcohol ingerido, por lo que sus efectos se notan con una
ingesta etílica mayor. El término destoxificación hay que manejarlo con mucho cuidado dado que
en ciertas ocasiones, un compuesto de toxicidad despreciable es modificado en el REL y origina
un metabolito más tóxico que el compuesto original. Es lo que ocurre por ejemplo en la
intoxicación con alcohol metílico donde el compuesto en el REL se metaboliza dando por
resultado el ácido fórmico, quien puede desencadenar un deceso rápido y eficaz. El tratamiento
para estos pacientes es paradójicamente inhibir el sistema de destoxificación del Rel.
Otro ejemplo de efecto no positivo es el del compuesto relativamente inocuo el benzol pireno que
se forma cuando se requema la carne puesta en parrilla se convierte en un potente carcinógeno
por efecto de las enzimas destoxicantes del REL.

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BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

PARTE 6
TRAFICO VESICULAR MEDIANTE RUTA SECRETORA Y ENDOCÍTICA
Complejo de Golgi
Introducción:
Todas las células han de comunicarse con su entorno. En las células procariotas esta
comunicación tiene lugar a través de la mp, así por ejemplo, las enzimas son secretadas hacia el
exterior celular y los pequeños metabolitos generados por la digestión son captados por proteínas
de transporte presentes en la mp.
Por lo contrario, en células eucariotas han adquirido un sistema membranoso interno que les
permite captar las macromoléculas por un proceso denominado endocitosis y ponerlas en
contacto con enzimas digestivas que se almacenan intracelularmente en lisosomas, como
consecuencia de ello, a medida que se van produciendo, los metabolitos de la digestión van
saliendo de los lisosomas directamente hacia el citosol.
Además de proporcionar un sistema de regulación de la digestión de macromoléculas mediante la
vía endocítica, el sistema membranoso interno permite que la célula eucariota pueda regular la
liberación al exterior de las proteínas y glúcidos acabados de sintetizar. Todas esta moléculas que
viajan por la vía biosintética y secretora pasan por numerosos compartimientos, por lo que la
célula puede modificar estas moléculas en varios pasos, almacenarlos hasta que se los necesite y
entonces descargarlo en un dominio de la superficie de la célula mediante un proceso llamado
exocitosis.

 La vía biosintética o secretora va hacia fuera desde el ER al Golgi, y a la superficie celular, con
un vía o ruta lateral que va a lisosomas vía endosomas tardíos
 La via endocítica va hacia adentro, desde la mp a endosomas y lisosomas.
Para poder cumplir con su función, cada vesícula de transporte que emerge de un compartimiento
debe tomar solo las proteínas apropiadas y únicamente ha de fusionarse con la membrana diana
apropiada. Todos estos fenómenos de reconocimiento dependen de proteínas asociadas a las m
de las vesículas de transporte que viajan entre organelas.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Transporte del ER al Complejo de Golgi

La vía que va desde el ER al Golgi y a mp o superficie celular se llama ruta por defecto y parece
que las proteínas no necesitan presentar determinadas señales para seguirla: cualquier proteína
que entre al Er y que esté correctamente plegada será transportada automáticamente a /t del
Golgi a la superficie celular a menos que contenga señales que o bien las detengan o las desvíen
hacia lisosomas o vesículas de transporte. Las vesículas destinadas al Golgi emergen desde
regiones especializadas del RE llamadas elementos transicionales cuya membrana no tiene
ribosomas adheridos. Se cree que estas vesículas no son selectivas
El complejo de Golgi
En los últimos años del siglo XIX, un biólogo italiano, Camillo Golgi, inventó nuevos
procedimientos de tinción para revelar la organización de las células nerviosas dentro del sistema
nervioso central. En 1898, Golgi descubrió una red teñida de oscuro localizada cerca del núcleo
celular. Esta red, que más tarde se identificó en otros tipos celulares y se llamó Complejo de
Golgi, llevó a su descubridor a obtener el Premio Nobel en 1906. El complejo de Golgi permaneció
como controversia durante decenios entre los que creían que el organelo existía en las células
vivas y los que pensaban que era un artefacto, es decir una estructura artificial formada durante la
preparación para el estudio microscópico. No fue sino hasta que el complejo de Golgi se identificó
con claridad en células sin fijación, preparadas por congelamiento fractura que se comprobó su
existencia más allá de cualquier duda razonable.
Ubicación del Golgi
Se localiza normalmente cerca del núcleo celular y en una célula animal cerca del centrosoma o
centro celular. Está formado por una serie de cisternas de tres a 8, limitadas por membrana y de
forma aplanada con bordes dilatados, que se parecen a una pila de platos, llamado en conjunto
dictiosoma (unidades funcionales). Habitualmente existe un solo dictiosoma, pero algunas
células, como hepatocitos y neuronas, tienen más de uno, aunque siempre con un complejo de
Golgi. Muchas vesículas están asociadas a los dictiosomas del Golgi agrupadas en la cara
contigua al RE y a lo largo de los anillos dilatados de cada cisterna. Es un organoide intermediario,
recibe y envía sustancias. Estas sustancias que lo atraviesan suelen ser modificadas.

Describe los pasos que ocurren conforme una

proteína secretora soluble como las enzimas digestivas de una célula pancreática se desplaza
entre de las cisternas del Golgi, y desde el trans Golgi al exterior de la membrana plasmática.
El aparato de Golgi posee una polarización cis- trans. La cara cis se encuentra formada por un
tramo de vesículas y pequeños túbulos denominados red del cis Golgi, la cual converge en una
cisterna llamada cisterna cis. La red cis se forma por el adosamiento de vesículas provenientes
del RE. Hay dos modelos, el transporte vesicular o el modelo de maduración cisternal. Hasta
mediados de 1980 se aceptaba en general que las cisternas del Golgi eran estructuras

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

transitorias. Se presuponía que las cisternas del Golgi formaban la cara cis de la pila mediante la
fusión de los portadores membranosos desde el retículo endoplasmático y el ERGIC y que cada
cisterna se movía físicamente desde el extremo cis al trans de la pila y cambiaba de composición
conforme avanzaba. Esto se conoce como modelo de maduración de cisternas porque de acuerdo
con el modelo cada cisterna “madura” en la siguiente pila. Conforme ocurre esta progresión
cisternal, muchas proteínas luminales y de membrana sufren modificaciones, principalmente en
sus cadenas de oligosacáridos asociados. Algunas proteínas permanecen en las cisternas del
trans-Golgi, mientras que otras se mueven hacia la superficie celular o los lisosomas a través de
pequeñas vesículas.
De mediados del decenio de 1980 a mitad de la década de 1990, el modelo de maduración del
movimiento del Golgi casi se abandonó y se sustituyó por un modelo alternativo que proponía que
las cisternas de una pila de Golgi permanecían en su sitio como compartimientos estables. En
este último modelo que se conoce como modelo de transporte vesicular, el cargamento (proteínas
secretores, lisosómicas y de membrana) se lanzan a través de la pila de Golgi, desde la RCG
hasta la RTG, en vesículas que se desprenden de un compartimiento de membrana y se fusionan
con el compartimiento contiguo mas avanzado en la pila. Esto depende de dos tipos de
observaciones:
1. cada una de las diversas cisternas de Golgi de una pila tiene una población distinta de
enzimas residentes ¿cómo podrían las diversas cisternas tener propiedades tan
diferentes si cada cisterna diera origen a la que le sigue en la línea, como lo sugería el
modelo de maduración de cisternas
2. se pueden reconocer grandes cantidades de vesículas que se desprenden de los
bordes de las cisternas de Golgi.
Aunque ambos modelos de la función de Golgi aún tienen sus defensores, el consenso de opinión
regresó al modelo de maduración de cisternas. Dos de las principales razones para este cambio
son las siguientes:
1. se puede demostrar que ciertos materiales que se producen en el retículo endoplasmático
y viajan por el complejo de Golgi permanecen en las cisternas de Golgi y nunca aparecen
dentro de vesículas de transporte relacionadas con el complejo de Golgi.
2. hasta mediados de 1990 se asumió que las vesículas de transporte siempre se movían en
sentido anterógrado (adelante), esto es, de un origen cis a un destino mas trans. No
obstante, una gran cantidad de evidencia indicó que las vesículas pueden moverse en
sentido retrógrado (“hacia atrás), es decir, de una membrana donadora trans a una
membrana receptora cis.

105
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Describir el papel de las vesículas recubiertas de clatrina y las recubiertas por proteínas no de
clatrina que se forman en el trans Golgi.
En ciertos tipos celulares, neuronas, acinares pancreáticas, algunas proteínas solubles se
almacenan en vesículas de secreción y se liberan recién después de que la célula recibe una
señal nerviosa u hormonal adecuada (secreción regulada) pe enzimas digestivas, proteínas de la
leche, insulina, endorfina encefalinas. En todas las células ciertas proteínas se mueven hacia la
superficie celular en vesículas de transporte y se secretan de manera continua (secreción
constitutiva) pe la secreción de colágeno por fibroblastos, proteína sérica por hepatocitos. Lo
mismo que las proteínas solubles, las proteínas integrales de m se desplazan a través de
vesículas de transporte desde el ER rugoso hacia el cis-Golgi y luego desde allí hacia su destino
final.
¿Cuál es el papel de las vesículas de transporte en el modelo de maduración cisternal de la
función del aparato de Golgi?
Conforme ocurre esto, las proteínas de m y de la luz se recuperan de manera constante desde las
cisternas finales del Golgi hacia las iniciales, por medio de vesículas de transporte retrógrado.
Mediante este proceso enzimas y proteínas residentes del Golgi llegan a liberarse en la cisterna
adecuada. En un momento se creyó que las proteínas se movían del cis-Golgi a las cisternas
intermedias y desde allí al trans-Golgi a través de vesículas de transporte.
Funciones del Golgi
Agregación de hidratos de carbono a Lípidos y proteínas (glucosidación que comenzó en el ER)
Como vimos el esqueleto polipeptídico de la glucoproteína es sintetizado sobre los ribosomas
unidos a la membrana del ER por el mecanismo de péptido señal. Dentro del RER el núcleo
oligosacárido es transferido a la proteína. En el Golgi existen monosacáridos especialmente
manosa y se agregan cadenas laterales de galactosa, N-acetil galactosomina y N-acetil
neuramínico (NANA) o ácido siálico por varias enzimas, las glucosiltransferasas. Además se
agregan grupos fosfatos, sulfatos, ácidos grasos. Este proceso da lugar a miles de oligosacáridos
específicos para cada tipo de proteína que otorga a cada una un sello. Los proteoglicanos se
originan en el Golgi, agregando a los GAGs proteínas.

106
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Especialización de los sectores del Golgi

El compartimiento cis probablemente sea el
responsable de la fosforilación de la manosa
del oligosacárido precursor.
El compartimiento medial también remueve
manosa, pero agrega residuos de N- acetil
glucosamina al oligosacárido.
El compartimiento trans agrega
galactosa, ácido siálico o N-acetil
neuramínico. El sector de salida clasifica,
ordena empaqueta las vesículas y se las
manda a diferentes destinos.
Describir los pasos que aseguran que una enzima
lisosómica se dirija a un lisosoma y no a una
vesícula secretoria.
Los residuos de manosa 6-fosfato dirigen las proteínas hacia los lisosomas
Otra función de los oligosacáridos ligados es dirigir u orientar las enzimas lisosómicas hacia los
lisosomas e impedir su secreción. En el cis-Golgi, uno o más residuos de manosa en el
oligosacárido Man GlcNac resultante se fosforila. Los muchos residuos de M6P que se forman,
luego se unen a receptores de manosa 6 fosfatos en el retículo trans-Golgi. Desde el cual se
desprenden por brote vesículas con el receptor de M6P y enzima lisosómica unida, que luego se
fusiona con un organelo de distribución, el endosoma tardío, que tiene un pH interno de 5,5. Como
los receptores de M6P pueden fijar manosa 6-fosfato en el pH ligeramente ácido (6,5- 7) del
retículo trans Golgi pero no en un pH menor a 6, dentro de los endosomas tardíos las enzimas

Lisosómicas fijadas se liberan. Además dentro de los endosomas tardíos una fosfatasa suele
extraer el fosfato de las enzimas lisosómicas, lo que impide que se vuelvan a unir al receptor M6P.
Dos tipos de vesículas brotan desde los endosomas tardíos. Un tipo contiene enzimas lisosómicas
pero no el receptor M6P, una vez que estas vesículas han brotado de los endosomas tardíos, se
fusiona con los lisosomas y así entregan las enzimas lisosómicas a su destino final. El otro tipo de
vesícula recicla el receptor de M6P al devolverlo al retículo trans-Golgi, o a veces a la m celular.
Las enzimas lisosómicas de las que hemos hablado hasta ahora son en realidad precursores o
proenzimas catalíticamente inactivas, posteriormente cambia su conformación y se vuelve activa.
Esto ocurre en el endosoma tardío o en los lisosomas. Todo esto es un mecanismo de protección
de la acción degradativa de las enzimas hidrolasas ácidas.

107
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Clasificación de proteínas
Como se mencionó antes, en todas las células eucariotas ciertas proteínas de secreción se
mueven a través de vesículas de transporte desde el trans-Golgi hacia la mp, en donde se
secretan de manera continúa por ejemplo: el colágeno por fibroblastos y las inmunoglobulinas por
plasmocitos. En cambio, ciertas células secretoras especializadas almacenan algunas proteínas
de secreción en vesículas y las secretan sólo cuando son activadas por un estímulo específico. Un
ejemplo de secreción regulada es la que se lleva a cabo en las células B de los islotes
pancreáticos, que almacenan insulina recién elaborada en vesículas de secreción especiales y
sólo la secretan en respuesta a una elevada concentración de glucosa en sangre (otros ejemplos:
células endocrinas que liberan hormonas, células de los ácinos pancreáticos que liberan enzimas
digestivas y en las células nerviosas que liberan neurotransmisores. Estas y muchas otras células
utilizan en forma simultánea dos clases diferentes de vesículas para mover las proteínas desde el
trans-Golgi hacia la superficie celular: vesículas de secreción para la secreción regulada y de
transporte para la secreción continua. En algunas de estas células, los materiales se almacenan
en grandes gránulos secretorios densos y delimitados por membrana. Indicios morfológicos
sugieren que la distribución hacia la vía regulada es controlada por una cubierta en las vesículas,
de clatrina, una proteína fibrosa y contener un centro compuesto por proteína de secreción
aglomerada

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

RUTAS DE ENDOCITOSIS
ENDOSOMAS
Representan los centros de distribución a lo largo de la vía endocítica. Son organoides formados
por una membrana en forma de saco redondeado o vesícula con un pH=6 (intermedio entre el del
citosol y el del lisosoma) El compartimiento endosomal es ácido debido a la presencia en la
membrana del endosoma de bombas dirigidas por ATP que bombean H+ al lumen desde el
citosol. Se los ubica entre la membrana plasmática y el Golgi. Hay dos tipos de endosomas:
Temprano o primario, se los encuentra cerca de la membrana plasmática
Secundarios o tardíos cerca del Golgi.
Antes de analizar las funciones de los endosomas conviene describir el proceso de endocitosis.

En temas anteriores hemos estudiado la permeabilidad de la membrana celular y vimos que los
solutos atraviesan la membrana plasmática por transporte activo o pasivo e ingresan a la célula.
También hemos estudiado que las macromoléculas y partículas entran mediante un mecanismo
denominado endocitosis, que de acuerdo al tamaño y propiedades físicas del material que se va a
incorporar, este mecanismo es llamado: Pinocitosis o fagocitosis.
Las células puede introducir sustancias del entorno por fagocitosis, un proceso mediado por
actina, en la cual las células envuelven partículas grandes y luego la internalizan. Son
relativamente pocas las células que realizan.
Células fagocíticas especializadas pueden ingerir grandes partículas
En protozoos la fagocitosis constituye un sistema de alimentación: las grandes partículas
atrapadas por los fagosomas acaban en los lisosomas y los productos de los procesos digestivos
pasan al citoplasma donde son utilizados como alimento. En mamíferos existen dos tipos de
glóbulos blancos que actúan como fagocitos con propósitos distintos a la nutrición: los macrófagos
(que además de encontrarse en la sangre están distribuidos por los tejidos) y los neutrófilos. Estos
dos tipos de células nos defienden contra las infecciones mediante la ingestión de
microorganismos invasores.
Para que una partícula sea fagocitada, primero ha de unirse a la superficie del fagocito los cuales
tienen una gama de receptores de superficie. La fagocitosis a diferencia de la Pinocitosis es un
proceso regulado en la que los receptores activados transmiten la señal al interior de la célula
iniciándose la respuesta.
Los reguladores mejores caracterizados de este proceso son los anticuerpos o inmunoglobulinas
(producidos por los linfocitos B diferenciados en plasmocitos, al reconocer a los antígenos) que

109
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

nos protegen contra microorganismos infecciosos uniéndose a la superficie formando una cubierta
en la que las colas de los anticuerpos llamadas regiones FC, se hallan expuestas al exterior. Esta
cubierta de anticuerpos es reconocida por los receptores FC de la superficie de macrófagos y de
los neutrófilos. La unión de partículas recubiertas de anticuerpos a estos receptores induce a la
célula fagocítica a extender sus seudópodos que engullen la partícula formando fagosomas.

El fluido y las macromoléculas son captados por Pinocitosis

Prácticamente todas las células eucariotas ingieren continuamente zonas de su mp en forma de

pequeñas vesículas pinocíticas que posteriormente retornan a la superficie celular. La velocidad a
la que se internaliza la mp en este proceso de pinocitosis varía de un tipo celular a otro.
 Normalmente la parte endocítica de este ciclo comienza en regiones especializadas de
membrana llamadas depresiones revestidas de clatrina, que ocupan un 2 % del área total de
la membrana. Aparecen como invaginaciones de la mp revestidas en su superficie citosólica
por clatrina. La vida media de estas depresiones es corta, un minuto después de haber sido
formadas, se invaginan hacia el interior de la célula y se separan de la membrana formando
las vesículas revestidas de clatrina. Segundos más tarde se despojan de su revestimiento y
se fusionan con los endosomas tempranos. En este proceso se incorpora cualquier líquido
(con sustancias que vienen con el líquido o en el líquido) y se llama pinocitosis de fase
fluida. El objetivo de la pinocitosis inespecífica o endocitosis a granel es:
 incorporar líquido y recuperar membrana
 En la mayoría de las células animales, las depresiones y vesículas revestidas de clatrina
proporcionan una ruta eficiente para captar macromoléculas específicas del fluido
extracelular, un proceso llamado endocitosis mediada por receptor o pinocitosis regulada.
Las macromoléculas se unen a un receptor complementario de la superficie celular (proteína
de transmembrana) se acumulan en depresiones revestidas y entran a la célula en forma de
complejos receptor macromolécula en vesículas revestidas de clatrina. El proceso es muy
similar al empaquetamiento de las hidrolasas lisosomales en el complejo de Golgi. Las
moléculas que han de ser transportadas también se unen a un receptor específico de la
membrana, la cual se va invaginando, interviene el mismo sistema de reciclado del receptor
una vez que ya fue utilizada.
Este mecanismo de endocitosis mediado por receptor sirve para captar selectivamente
macromoléculas disueltas en fluidos
extracelulares y es altamente eficiente ya
que selecciona dentro de todas las
macromoléculas las que la célula necesita
captar aunque estén mezcladas con otras.
Un ejemplo conocido es la endocitosis
del colesterol
Muchas células animales captan el
colesterol por endocitosis mediada por
receptores y así adquieren la mayor parte
del colesterol que necesitan para la
síntesis de membrana. La mayor parte del
colesterol se transporta en sangre unida a
proteína formando una partícula conocida
como lipoproteínas de baja densidad
(LDL). Su superficie externa es una
monocapa de fosfolípidos y colesterol, en
el interior hay ésteres de colesterol (no
polar).

110
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Cuando la célula necesita colesterol produce una proteína receptora de LDL y las inserta en la
mp, una vez allí los receptores de LDL difunden hasta asociarse con depresiones revestidas de
clatrina que se hallan en proceso de formación. Dado que las depresiones revestidas se separan
constantemente en la membrana plasmática (mp) formando vesículas revestidas, cualquier
partícula de LDL que se halle unida a los receptores en las depresiones revestidas es rápidamente
internalizada. Después de desprenderse de su cubierta de clatrina, las vesículas de endocitosis
liberan su contenido en los endosomas tempranos.
De allí el LDL pasa al endosoma tardío donde debido al pH ácido hacia que la mayor parte de los
receptores y ligandos se disocien, y los receptores vuelven a través de vesículas de transporte a
mp. De los endosomas tardíos pasan a los lisosomas, donde se hidrolizan los ésteres de
colesterol dando lugar al colesterol libre el cual queda a disposición de la célula para la biosíntesis
de membrana. Si se acumula demasiado colesterol libre en la célula, ésta detiene tanto la síntesis
de colesterol como la síntesis de la proteína receptora de LDL, con lo que la célula produce y
absorbe menos colesterol.
Hipercolesterolemia: trabajo grupal.
Esta vía regulada para la absorción de colesterol está perturbada en algunos individuos que
heredan unos genes defectuosos para la producción de proteínas receptoras de LDL y por
consiguiente sus células no pueden captar el LDL de la sangre.
El compartimiento endosomal primario actúa como la principal estación de clasificación en la ruta
endocítica, tal como lo hace la red del trans Golgi en la vía biosintética y secretora. En el ambiente
ácido del endosoma temprano muchos receptores internalizados cambian su conformación y
liberan su ligando los cuales están predestinados a ser destruidos en los lisosomas conjuntamente
con los otros contenidos del endosoma no unidos a membrana, no obstante algunos ligandos
endocitados permanecen unidos a sus receptores y comparten su destino.
El destino del receptor –y de algunos ligando unidos a ellos- varía según el tipo de receptor de que
se trate:
 La mayoría de ellos retornan al mismo dominio de la membrana plasmática de donde proceden.
Por ej. El receptor de LDL, se disocia de su ligando LDL en el endosoma y es reciclado
hacia la membrana plasmática para su reutilización mientras que el LDL descargado es
transportado a los lisosomas.
 Algunos viajan hasta los lisosomas donde son degradados. Ej. : la ruta que sigue el receptor que
se une al factor de crecimiento epidérmico EGF, una pequeña proteína que estimula la
división de las células epidérmicas. Estos receptores se acumulan en depresiones después
que han unido EGF. Además muchos de ellos no se reciclan sino que son degradados en
los lisosomas con los EGF.
 Transcitosis las sustancias que llegaron a los endosomas tempranos por pinocitosis van hacia
otra parte de la membrana plasmática (otro dominio) y son eliminadas por exocitosis. En
este caso los endosomas actúan como un sistema de transporte de moléculas que para
pasar de un lado a otro atraviesan toda la célula. En capítulos anteriores se dijo que en los
tejidos epiteliales las uniones oclusivas imponen diferencias en la composición de la
membrana plasmática en las regiones apical y basolateral de las células. Tales diferencias
parecen ser necesarias para la Transcitosis. El ejemplo mas difundido de Transcitosis

111
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

corresponde a las células endoteliales de los vasos sanguíneos, ya que son atravesados
por las macromoléculas que pasan de la sangre a los tejidos. Otros ejemplos de
Transcitosis se registran en las células secretoras de las glándulas lagrimales y en las
mucosas de algunos órganos de los tractos digestivo, respiratorio y urinario. A través de
ellas, ciertos anticuerpos las inmunoglobulinas A (IgA) pasan del tejido conectivo a la luz de
estos órganos citados, donde ejercen sus funciones defensivas. Durante la lactancia se
produce un fenómeno semejante en las células secretorias de las glándulas mamarias. Aquí
las IgA se transfieren hacia la luz glandular, es decir, la leche.
Existe un flujo unidireccional de vesículas transportadoras para transferir el material endocitado
desde la membrana plasmática al endosoma primario y desde éste al endosoma secundario o
tardío. Para algunos autores existe una sola clase de endosoma que reside, alternadamente, en
las cercanías de la membrana plasmática, donde adquiere material endocitado, y en las cercanías
del aparato de Golgi, donde recibe las enzimas hidrolíticas. Esta organización requiere que el
endosoma realice incesantes traslados de ida y vuelta entre ambos puntos.
La relación entre endosomas tempranos y tardíos es incierta.
El transporte desde los endosomas tempranos a los tardíos tiene lugar mediante grandes
vesículas de transporte endosomal, las cuales contienen grandes cantidades de membrana
invaginada que o bien se desplazan hacia el interior celular a medida que maduran o bien como
compartimiento de transporte diferente. Su movimiento tiene lugar mediante microtúbulos.
Finalmente los endosomas tardíos se convierten en lisosomas.

Función en la fagocitosis: las vesículas originadas en la fagocitosis se unen con vesículas

originadas por endosomas tardíos para formar lisosomas.

Lisosomas
Se encuentran en las células animales, están limitados por una
única membrana y su función es degradar determinados
componentes que pasaron a ser obsoletos para la célula o el
organismo. En algunos casos las sustancias incorporadas en la
célula por endocitosis o fagocitosis también se degradan en los
lisosomas.
Los lisosomas se forman a partir de los endosomas que han
recibido dos clases de vesículas transportadoras, una con
material endocitado y otras con enzimas hidrolíticas.
La característica mas saliente de los lisosomas en su
heterogeneidad o polimorfismo, no sólo porque poseen
aspectos y tamaños disímiles, sino también por la irregularidad de sus componentes. La causa del
polimorfismo es doble, por un lado se debe a la diversidad del material endocitado y por el otro al

112
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

hecho de que cada clase de lisosoma posee una combinación singular de enzimas hidrolíticas de
las que existen alrededor de 50 diferentes (proteasas, lipasas, nucleasas, glucosidasas,
fosfolipasas, fosfatasas, sulfatasas). Todas ellas son hidrolasas ácidas, cuya actividad óptima se
expresa a un pH = 5, dicho pH se mantiene dentro del lisosoma gracias a una bomba de H
presente en la membrana del lisosoma, heredada del endosoma secundario.
La membrana del lisosoma se halla protegida del efecto destructor de las enzimas hidrolíticas
porque su cara luminal contiene una enorme cantidad de glicoproteínas. Por otro lado, si la
membrana del lisosoma se rompiera, las enzimas escapadas no afectarían a los demás
componentes celulares debido a que se inactivarían al tomar contacto con el citosol, cuyo pH =
7,2.
En el interior de los lisosomas las proteínas y los hidratos de carbono endocitados son digeridos a
dipéptido y monosacáridos. Esos y otros productos de la degradación atraviesan la membrana
lisosómica y pasan al citosol, donde terminan de digerirse o se aprovechan para construir nuevas
moléculas. Por su parte, culminadas sus funciones, las enzimas lisosómicas también pasan al
citosol, donde son degradadas por los proteosomas. Finalmente, libre de las enzimas y del
material digerido, los lisosomas se reconvertirían en endosomas.
Algunas sustancias endocitadas no terminan de digerirse y permanecen en los lisosomas, que por
ello adquieren el nombre de cuerpos residuales. En ocasiones, las sustancias no digeridas son
expulsadas de la célula mediante un proceso comparable con la exocitosis. Si esto no ocurre,
con el tiempo se convierten en pigmentos de desgaste depositados en el citosol.
Los materiales son transportados hasta los lisosomas por varias rutas.
En general los lisosomas son puntos de encuentro donde convergen diversas corrientes del tráfico
intracelular. Las enzimas digestivas son descargadas a ellos mediante una ruta que va por el ER y
el complejo de Golgi, mientras que las sustancias que deben ser digeridas llegan a ellos por
diferentes vías: endocitosis: fagocitosis, pinocitosis y endocitosis mediada por receptores.
Podría existir una cuarta ruta de degradación proteica que condujese a los lisosomas: algunas
proteínas poseen ciertas señales en su superficie llamadas secuencias KFERQ, que son
responsables de su selección para ser descargadas en los lisosomas y degradadas. Hay dos
posibilidades, que las secuencias KFERQ unan estas proteínas a determinados organelos que
vayan a ser auto fagocitados, de manera indirecta serían destruidas; o podría existir un
transportador específico en la membrana del lisosoma que reconozca estas señales y transfiera
estas proteínas a través de la membrana lisosomal. El lisosoma cuenta con un receptor que
reconoce la señal, llamado LGP 96.
 Autofagosomas. Los endosomas además pueden recibir enzimas del Golgi pero en lugar
de incorporar material extracelular, reciben componentes propios de la célula que están
deteriorados o en exceso. Estos, primero son rodeados por membranas del REL. Al
lisosoma que se forma se llama autofagosoma y al fenómeno autofagia. Por ejemplo las
células del útero luego del embarazo. Estos autofagosomas pueden convertirse en cuerpos
residuales (digestión incompleta) o endosomas (digestión completa). En algunas células los
lisosomas son capaces de efectuar un proceso de digestión extracelular, sus enzimas
pueden ser expulsadas al exterior, solo se da en casos especiales ya que las enzimas solo
pueden actuar a pH = 5. Ejemplo: en células osteoclastos del hueso
Trabajo de investigación: enfermedades producidas por alteraciones lisosómicas: enfermedad de
[Link]; enfermedad de Gaucher, enfermedad de Niemann-Pick y enfermedad de las células I.
Tay-Sachs: algunas neuronas aparecen repletas de un gangliósido. El defecto se debe a la
ausencia de la enzima hexosaminidasa A, que cataliza la hidrólisis parcial del glicolípido. Por
consecuencia, éste se acumula en las neuronas, lo que lleva a graves alteraciones neurológicas.
Gaucher: se caracteriza por la acumulación de glucocerebrósido en varios tipos celulares debido a
la ausencia de la glicosidadsa que cataliza la hidrólisis del glicolípido en ceramida y glucosa.

113
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Niemann-Pick: muestra una acumulación de esfingomielina en varios tipos celulares a

consecuencia de la falta de la esfingomielinasa, que es la enzima que hidroliza al
esfingofosfolípido en ceramida y foforilcolina.
De la célula I: a causa de trastornos genéticos los fibroblastos no poseen N-acetilglucosamina
fosfotransferasa, de modo que no se forman manosas 6 fosfatos en las enzimas hidrolíticas
destinadas a los endosomas. Por consecuencia las vesículas que transportan esta enzimas se
dirigen hacia la membrana plasmática y se secretan al medio extracelular. La falta de enzimas en
los endosomas impide la digestión de sustancias endocitadas, las cuales pasan al citosol y
pueden acumularse en inclusiones.
VESÍCULAS TRANSPORTADORAS
Mecanismos moleculares de transito vesicular
Tanto en la vía secretora como en la vía endocítica la comunicación se hace a/t de vesículas las
que brotan de la membrana de una organela progenitora y se fusiona con la membrana de la
organela diana.
 ¿Cuál es el mecanismo por el que se forman las vesículas de transporte? ¿Por qué ciertas
proteínas luminales solubles y proteínas integrales de membrana se incorporan
selectivamente en estas vesículas y otras no lo hacen?
 ¿Cuál es la señal molecular en una vesícula de transporte particular que hace que sólo se una
a un tipo particular de membrana de organela? ¿Cómo sabe por ejemplo, una vesícula con
contenido de proteínas de secreción del ER rugoso que tiene que moverse del cis-golgi y
fusionarse con él y no con las membranas del trans-Golgi?
 ¿Cuál es el mecanismo por el que las membranas de una vesícula de transporte y de la
organela objetivo se fusionan entre sí?
Por lo menos tres tipos de cubierta transportan proteínas de una organela a otra
Todas las células eucariotas contienen vesículas limitadas por membrana. Son organoides
formados por una membrana con aspecto de saco que se caracteriza por estar revestida en el
lado citosólico por una cubierta proteica durante su formación, denominándose a éstas vesículas
iniciales vesículas recubiertas. Luego pierden la cubierta y quedan formadas las vesículas
transportadoras maduras.
Las cubiertas de proteína tienen por lo menos dos funciones distintas: a) actúa como dispositivo
mecánico que hace que la membrana se curve y forme una vesícula desprendible; b)
proporcionan un mecanismo para seleccionar los componentes que transporta la vesícula
Los componentes seleccionados incluyen: a) cargamento consistente en proteínas secretoras,
lisosómica y de membranas y b) la estructura necesaria para dirigir y conectar la vesícula con la
membrana receptora.
Existen tres clases de cubiertas. Cada tipo de vesícula transporta proteínas desde organelas
progenitoras particulares hacia organelas de destino particulares. Pe las vesículas cubiertas de
clatrina se forman a partir de la membrana plasmática y del trans Golgi, y se mueven hacia los
endosomas tardíos. También participarían en la secreción regulada. Las vesículas con cubierta
COP II transportan proteínas desde el ER rugoso hacia el Golgi. Por último, las vesículas con
cubierta COP I transportan proteínas en sentido retrógrado, entre las cisternas del Golgi y entre el
cis-Golgi de retorno hacia el ER rugoso. Todavía no se han identificado las proteínas de las
cubiertas que rodean muchos tipos de vesículas de transporte, como las que se mueven desde los
endosomas tardíos hacia los lisosomas o las vesículas de secreción constitutiva que mueven
proteínas desde el trans Golgi hacia la mp.
El esquema general de brote vesicular que se presenta es válido para los tres tipos de vesículas
con cubierta. Durante la formación de estas vesículas, las subunidades proteicas de la cubierta
polimerizan alrededor de la cara citosólica de una vesícula en un proceso de brotación, con lo cual
contribuyen a que ésta se separe de la organela progenitora. Algunas subunidades de proteína de

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

cubierta o proteínas adaptadoras asociadas seleccionan que proteínas solubles y de membrana

entrarán en las vesículas de transporte como carga proteica,
Las vesículas cubiertas de clatrina median varios tipos de transporte intracelular
Habíamos dicho que las células que realizan mucha endocitosis (hepatocitos, fibroblastos) poseen
gran cantidad de fositas revestidas de clatrina en la cara citosólica de su mp. La formación de
estas fositas requiere diversas proteínas adaptadoras lo mismo que clatrina y su superación final
necesitan de una proteína fijadora de GTP llamada dinamina.
Clatrina: La cubierta de clatrina se forma por la asociación de un número variable de unidades
proteica llamadas trisqueliones. El trisquelión posee tres brazos flexibles doblados hacia un mismo
lado. Está integrado por tres cadenas polipeptídicas grandes y tres pequeñas. Para generar una
vesícula, los trisqueliones se ensamblan entre sí hasta formar un poliedro con aspecto de canasta.
La presencia de los trisqueliones sobre la cara citosólica de una membrana le confiere la fuerza
mecánica que provoca su evaginación, inicialmente se forma una fosita, esta se convierte en
vesícula que se desprende de la membrana y se libera al citosol.

Proteínas adaptadoras: entre la clatrina fibrosa y la membrana de la fosita cubierta hay un

espacio de 20 nm que contiene partículas de armado (adaptinas) las que se unen al dominio
globular de la cadena de clatrina en el trisquelión y promueven la polimerización de los
trisqueliones para formar jaulas. Al unirse también a la cara citosólica de proteínas de membrana,
las partículas de armado determinan qué proteínas específicas se incluyen o excluyen de las
vesículas de transporte en proceso de brote. Debido a que los dominios citosólicos de los
receptores son distintos entre sí y todos los trisqueliones son iguales, para conectarse con éstos
utilizan unas moléculas intermediarias llamadas adaptinas. Las adaptinas son proteínas
heterodiméricas que poseen dos dominios funcionales, uno para el
trisquelión y otro para el receptor. Obviamente el primero es igual
en todas las adaptinas.
Dinamina: indispensable para la formación completa de una fosita
cubierta de clatrina, la dinamina es una proteína citosólica que se
fija y luego hidroliza GTP. Después que las subunidades de
dinamina se polimerizan alrededor del cuello de una fosita, se cree
que la hidrólisis del GTP regula la contracción de la dinamina
polimérica hasta que la vesícula se separa.
Despolimerización de las cubiertas de clatrina
Las vesículas cubiertas de clatrina son estables en la composición
iónica y pH del citosol celular. Las vesículas normalmente pierden
su cubierta de clatrina y las partículas de armado, poco después de
su formación. Se cree que las hsp 70 citosólica, una proteína
chaperona que se encuentra en todas las células eucariontes, catalizan la despolimerización de la
cubierta de clatrina hasta sus trisqueliones constitutivos, éstos serán reutilizados para la formación
de otras fositas y vesículas.

115
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Las vesículas revestidas de clatrina no son todas iguales, las que participan del tránsito del Golgi
a los endosomas tardíos son ricas en receptores M6P, otras, las que participan en la ruta desde la
mp a los endosomas tempranos son ricas en receptores de componentes extracelulares como
LDL- pareciera que el revestimiento de clatrina es el mismo, lo que varía es la adaptinas.
La cubierta de coatómeros se construye a partir de proteínas COP
La cubierta de coatómero se forma cuando numerosos complejos moleculares, cada uno
compuesto por varias proteínas llamadas COP se colocan sobre la cara citosólica de una
membrana plana. Estos complejos proteicos llevan el nombre de coatómeros..
Para el brote de vesículas de transporte con COP hace falta varias proteínas: una pequeña
proteína fijadora de GTP en el citosol, llamada ARF, libera GDP que tiene unido y fija GTP es
promovido por una proteína perteneciente a la propia membrana llamada GRP

Es preciso señalar que además de anclarse a la membrana por medio de la ARF, los coatómeros
se ligan a ella directamente, ya que se conectan con el dominio citosólico del receptor
membranoso específico de la molécula que va a ser transportada. Esto es posible porque ese
dominio es igual en todos los receptores, adecuado para interactuar con las COP. A medida que
se construye la cubierta de coatómero, succiona la membrana hacia el citosol, lo cual genera
primero una fosita y luego una vesícula. Una vez que las vesículas de COP son liberadas por la
membrana donante, la cubierta de COP se despolimeriza y se disocia. La salida de la cubierta se
produce porque el GTP de las ARF es hidrolizado por acción de una proteína citosólica llamada
GAP (GTPasa activating protein). Existen varias clases de COP y ARF.
Las vesículas cubiertas de COP I median el transporte retrógrado dentro del Golgi y desde
éste de regreso hacia el RE
Investigaciones revelaron que las vesículas de COP I median el transporte de proteínas desde el
ER rugoso hacia el Golgi, pero su principal papel se relaciona con el transporte retrógrado de
proteínas entre las cisternas del Golgi y desde el Cis-Golgi de regreso al ER rugoso. Transportan
con selectividad proteínas luminales y de membrana desde el trans-Golgi hacia las cisternas
intermedias, mientras que dejan atrás otras proteínas en las cisternas del trans-Golgi; de modo
similar mueven proteínas selectivamente desde las cisternas intermedias hacia el cis-Golgi

Las vesículas cubiertas con COP II median el transporte desde el ER hacia el Golgi
Su formación es similar a las de COP I, en lugar de ARF las Sar 1, también contienen una familia
de proteínas de membrana que fijan con selectividad proteínas solubles en el ER destinadas a ser
transportadas al Golgi
Al contrario que las cubiertas de clatrina, las de coatómeros no se autoensamblan, sino que
necesitan de ATP que dirija su formación y en lugar de separarse en cuanto la vesícula se
desprende de la membrana dadora, la cubierta de coatómero se mantiene hasta que la vesícula
alcanza la membrana diana.
Cuando la vesícula revestida de coatómero alcanza la membrana destino, una proteína específica
de la membrana diana activadora de GTP asa activa la ARF para que hidrolice al GTP a GDP lo
que provoca un cambio en la conformación de ARF de manera que la cadena de ácidos graso se

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

desprende de la membrana causando el desensamblaje del revestimiento y permitiendo que se

produzca la fusión con la membrana.
Marcadores proteicos de orgánulos llamados SNARE colaboran en la dirección del tránsito
vesicular.
Las vesículas de transporte sean o no selectiva al tomar la carga del compartimiento dador ha de
ser altamente selectivas en cuanto a la membrana diana con la que se fusionan. Esto sugiere que
todos los tipos de vesículas de transporte de la célula han de expresar marcadores de superficie
que las identifiquen según su origen y su carga, y que sean reconocidos por receptores de las
membranas dianas.
A pesar de la gran variedad de proteínas de cubierta que median la formación de vesículas de
transporte, la fusión de todas las vesículas con su membrana objetivo tiene varias características
comunes. En todos los casos la fusión se produce cuando la cubierta se ha despolimerizado, y en
ello intervienen un conjunto de proteínas que median:
 La orientación de la vesícula hacia la pareja de fusión adecuada.
 El propio proceso de fusión.
La despolimerización de las cubiertas de las vesículas pone al descubierto un tipo singular de
proteínas de membrana llamadas V- SNARE que se incorporó a una vesícula cuando ésta brotó
de una organelas donante. La V-SNARE específica en cada tipo e vesícula de transporte dirige a
ésta hacia la pareja de fusión de membrana correcta. La membrana diana de cada tipo de
organela pose una proteína integral de membrana T-SNARE que actúa de forma cooperativa para
unirse de manera específica a un tipo particular de V-SNARE.

Se cree que las proteínas Rab aseguran la especificidad de la unión de las vesículas, es decir que
la unión entre una V-SANARE y su t-SNARE complementaria depende de una proteína llamada
Rab, que actúa sobre ambas. Se han identificado cerca de 30 proteínas Rab diferentes, una para
cada pareja de v-SN ARE/t-SNARE. Las proteínas Rab pertenecen a una familia de proteínas
monoméricas GTPasa, cuando una vesícula encuentra la membrana diana adecuada, la unión de
la v-SNARE y t-SNARE permite que la vesícula permanezca unida durante el tiempo necesario
para que las proteínas Rab hidrolice su GTP lo cual bloquea a la vesícula en la membrana diana
preparándola para su fusión posterior, se inactiva, y se separa de la membrana del
compartimiento donante. En el proceso de fusión intervienen proteínas fusógenas: SNAP y NSF.

Caveolas: las vesículas con caveolina no son estrictamente vesículas recubiertas ya que la
caveolina se encuentra incluida en la bicapa lipídica. Podrían actuar en la potocitosis, que es un
pinocitosis pero con un mecanismo molecular de ligando – receptor distinto. La fuerza mecánica
depende de estas proteínas ubicadas en la bicapa lipídica. No hay certidumbre en cuanto a su
función: internalizar solutos- y su posterior ingreso sin formar vesícula: POTOCITOSIS. Están
relacionadas con la contracción muscular en músculo liso (bombas de Ca++)

117
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Para ciertos autores van a endosomas especiales, caveosomas. Otros proponen que algunas
caveolas forman vesículas e internalizan material que se transporta a través de la célula y se
libera en otro lado transcitosis. Algunos receptores en caveolas participan del sistema de señal
como segundo mensajeros.

118
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

PARTE 7
CITOESQUELETO
MOVILIDAD Y FORMA DE LA CELULA
La capacidad de las células eucariotas de organizar la mayoría de sus componentes de su interior,
de adoptar una gran variedad de formas y de llevar a cabo movimientos coordinados depende del
citoesqueleto –una red compleja de filamentos proteicos que se extienden a través del citoplasma. Esta red
de filamentos ayuda a soportar el gran volumen citoplasmático de una célula eucariota; su función tiene
particular importancia en las células animales, que no disponen de paredes celulares. A diferencia de
nuestro esqueleto óseo, esta estructura es sumamente dinámica, reorganizándose continuamente mientras
la célula cambia de forma, se divide o responde al entorno. El citoesqueleto no es solamente “los huesos”
sino también los “músculos” de una célula, y es el responsable directo de movimientos a gran escala tales
como el deslizamiento de las células sobre un sustrato (fibroblastos y células blancas de la sangre) la
contracción muscular y los cambios de forma que ocurren durante el desarrollo embrionario.
El interior celular también está en constante movimiento, y el citoesqueleto constituye la maquinaria
de los movimientos intracelulares tales como el transporte de orgánulos desde un lugar a otro del
citoplasma, la segregación de los cromosomas en las dos células hijas durante la mitosis y la separación de
las dos células hijas en la etapa final de la división celular de las células animales.
Todos estos movimientos celulares son una manifestación de trabajo mecánico; requieren
combustible (ATP) y proteínas que conviertan en movimiento la energía almacenada en el ATP.
Los primeros investigadores suponían que el citoesqueleto estaba organizado prácticamente al azar
ya que se veían filamentos hacia todas direcciones, pero actualmente se sabe que es como el esqueleto
humano que tiene una perfecta conformación , con un número preciso de piezas , así como hay un numero
justo de huesos . Cada uno de los componentes del citoesqueleto tiene su forma propia y recorre de un
punto a otro la célula específicamente como un músculo que se inserta de un lado y del otro.
FUNCIONES DEL CITOESQUELETO
1. un andamio dinámico que brinda soporte estructural, el cual puede determinar la forma de
la célula y resistir fuerzas que tienden a deformarla.
2. un marco interno encargado de establecer posiciones de los organoides dentro de la célula.
Esta función resulta muy evidente en célula epiteliales polarizadas
3. una red de rieles que dirigen el movimiento de materiales y organoides dentro de las
células: traslado de moléculas de ARNm, el movimiento de portadores membranosos del RE
al Complejo de golgi, el transporte de vesículas que contienen neurotransmisores en a todo
lo largo de la célula nerviosa, el transporte de peroxisomas.
4. el aparato generador de fuerza que mueve las células de un sitio a otro. Los organismos
unicelulares se mueven por “arrastramiento” sobre la superficie de un sustrato sólido o
propulsarse por su ambiente acuoso con la ayuda de órganos locomotores especializados
que contienen microtúbulos (cilios y flagelos). Los animales multicelulares tienen diversas
células con capacidad de locomoción independiente, como los espermatozoides, los
leucocitos, y los fibroblastos.
5. un componente esencial de la maquinaria para la división celular.
Observado con Me, el citoesqueleto aparece como una densa disposición de fibras, constituida por
tres tipos de fibras citosólicas: microfilamentos, de 7-9 nm de diámetro, determinan la forma de la
superficie celular y son necesarios para la locomoción de la célula; filamentos intermedios, de 10 nm de
diámetro proporcionan la fuerza mecánica y la resistencia para enfrentar el stress; y microtúbulos, de 24
nm de diámetro, determinan la posición de las organelas y direccional el transporte intracelular. Estas fibras
citoesqueléticas están compuestas por polímeros bien ordenados, construidos a partir de unidades
proteicas que se mantienen unidas por enlaces no covalentes. La actina y al tubulina se han conservado a
través de la evolución de las células eucariontes y se las puede encontrar en todos los seres vivos
La funcionalidad de una célula depende de un gran número de moléculas accesorias que son
clasificadas como:
- Proteínas reguladoras controlan los procesos de alargamiento y acortamiento de los filamentos
principales. Estos procesos dependen de las propiedades moleculares de los filamentos, puesto que
son polímeros integrados por numerosas unidades monoméricas dispuestas linealmente.

119
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

- Las proteínas ligadoras conectan a los filamentos entre sí o con otros componentes de la célula
- Las proteínas motoras sirven para trasladar macromoléculas y organoides de un punto al otro del
citoplasma. También hacen que dos filamentos contiguos y paralelos entre sí se deslicen en
direcciones opuestas, lo cual constituye la base de la motilidad, la contracción y los cambios de forma
de la célula.

CADA TIPO DE
FILAMENTO DEL

CITOESQUELETO ESTÁ CONSTRUIDO A PARTIR DE SUBUNIDADES PROTEICAS MENORES

La célula es capaz de construir grandes estructuras por medio del montaje de un gran número de
pequeñas unidades repetitivas,
Los filamentos intermedios están formados por subunidades que son fibrosos y largos, los
filamentos de actina y los microtúbulos están compuestos por subunidades de proteínas globulares, actina y
tubulina.

120
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

MICROTUBULOS
Un microtúbulo es un polímero de
subunidades globulares de tubulina dispuestas en
un tubo cilíndrico que mide 24 nm de diámetro. La
subunidad de tubulina es un heterodímero de alfa y
beta tubulina con una unión lo bastante fuerte, por
lo que, en condiciones normales raramente se
disocian. Cada subunidad de tubulina fija dos
moléculas de GTP. En la alfa tubulina existen un
sitio fijador de GTP, que lo une en forma
irreversible sin hidrolizarlo, mientras que un
segundo sitio, localizado en la B tubulina, fija
GTP en forma reversible y lo hidroliza a GDP.
Este segundo sitio se denomina sitio
intercambiable, dado que el GTP puede ser
desplazado por el GTP.

Un microtúbulo es una estructura

cilíndrica, hueca construida a partir de 13
protofilamentos paralelos, cada uno de ellos
compuestos de moléculas de alfa y beta tubulina
alternadamente. Los contactos longitudinales
entre los extremos de las subunidades adyacentes forman uniones cabeza con cola entre ellas para crear
un protofilamento lineal, estos se asocian lado a lado a través de interacciones laterales, para formar una
lámina o cilindro –un microtúbulo-. La disposición exacta de los protofilamentos en la pared de un
microtúbulo aún es objeto de controversia. En un modelo los heterodímeros de los protofilamentos
adyacentes están algo desplazados, y forman hileras en espiral de monómeros alfa y B tubulina en la pared
del microtúbulo. En un modelo alternativo, las subunidades alfa y B tubulina se desplazan lo suficiente como
para conferir un patrón en damero a la pared del microtúbulo.
Debido a la polaridad de las tubulinas, el propio microtúbulo está polarizado, ya que en uno de sus

extremos quedan expuestas las subunidades alfa y en el otro las subunidades B. los heterodímeros pueden
agregarse (polimerizarse) o retirarse (despolimerizarse) por ambos extremos. Como es obvio, durante la
polimerización el microtúbulo se alarga y durante la despolimerización se acorta.

Casi todos los microtúbulos de una célula son tubos únicos, o microtúbulos simples, construidos por
13 protofilamentos. Además de esta estructura simple existen microtúbulos dobles y triples en estructuras
especializadas como cilios y flagelos (dobles) y centríolos y cuerpos basales (triple). Cada uno de ellos
contiene un microtúbulo completo de 13 protofilamentos (el túbulo A) y uno o dos túmulos adicionales (B y
C), compuestos de 10 protofilamentos.

Según su localización, los microtúbulos se clasifican en: 1)citoplasmáticos , presentes en la célula

en interfase, crecen a partir de una pequeña estructura próxima al núcleo de la célula llamada centrosoma,
generando un sistema de guías dentro de la célula, a lo largo de las cuales pueden desplazarse vesículas,
orgánulos y otros componentes celulares. ; 2) mitóticos, cuando la célula entre en mitosis, los microtúbulos
citoplasmáticos se desensamblan y se vuelven a ensamblar formando una compleja estructura llamada
huso mitótico el cual proporcionará la maquinaria que permitirá la segregación en partes iguales de los
cromosomas a las dos células hijas, ; 3) ciliares, localizados en el eje de los cilios, proyecciones de la

121
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

superficie celular las cuales las utilizan para impulsarse o para barrer fluido situado sobre la superficie
celular; es una estructura estable; y 4)
centriolares, pertenecientes a los cuerpos
basales y centríolos.
LOS MICROTUBULOS CITOPLASMATICOS
NACEN EN EL CENTROSOMA.

En las células, los microtúbulos se

forman creciendo a partir de centros
organizadores especializados –centrosomas-,
desde allí se extienden por todo el citoplasma
hasta arribar a la membrana plasmática, en la
que se fijan. El centrosoma está compuesto por
una matriz centrosomica con cientos de
estructuras con forma de anillo que contienen otro tipo de tubulina, la Y tubulina, cada anillo actúa como
punto de inicio, o lugar de nuecleación; para el crecimiento de un microtúbulo. Los dímeros de tubulina se
añaden al anillo de Y tubulina en una orientación específica de forma que el extremo menos queda dentro
del centrosoma, y el crecimiento sólo se produce en el extremo mas.
Los anillos de Y tubulina no deben confundirse con los centríolos, estructuras peculiares formadas
por microtúbulos, los cuales no juegan ningún papel en la nucleación de microtúbulos y su función es
todavía un misterio, especialmente porque las células vegetales carecen de ellos. Sin embargo los
centríolos son parecidos a los corpúsculos basales que forman los centros organizadores de microtúbulos
de cilios y flagelos.
Las células vegetales carecen de centrosoma y centríolos. Sus COMTs estan mas dispersos.
DINAMICA DE LOS MICROTÚBULOS Y PROTEINAS ASOCIADAS.

La polaridad estructural de los filamentos de actina y de los microtúbulos es creada por la orientación
paralela y regular de todas sus subunidades. Esta orientación hace que los dos extremos de cada polímero
sean diferentes entre sí, es decir que debido a la polaridad de las tubulinas, el propio microtúbulo resulta
polarizado, ya que en uno de los extremos quedan expuestas las subunidades alfa y en el otro las
subunidades B .
Los microtúbulos se ensamblan por polimerización de los dímeros alfa –beta tubulina. Una vez
ensamblado su estabilidad depende de la temperatura. (a 37ºC en presencia de GTP). La cinética de la
polimerización de las tubulinas es similar en muchos aspectos al de microfilamentos. Primero: a
concentraciones de alfa-B tubulina superiores a la concentración crítica (CC), los dímeros se polimerizan a
microtúbulos, mientras que a concentraciones inferiores a Cc los microtúbulos se despolimerizan. El
extremo preferido para el ensamblaje es el + y el que se ensambla con mayor lentitud es el -.
El ensamblaje de los microtúbulos comprende tres pasos: a partir de las subunidades alfa-B tubulina se
forman los protofilamentos, que se
asocian para formar la pared del
microtúbulo, este último se alarga con
el agregado de más subunidades a
los extremos de los protofilamentos
Una vez producida la nucleación
de un microtúbulo, su extremo más
crece a partir del centro organizador,
pero entonces, inesperadamente, el
microtúbulo sufre una transición que
provoca su encogimiento y
rápidamente se invierte su situación,
con lo cual empieza a perder
subunidades a partir de su extremo
libre.
Este comportamiento conocido
como inestabilidad dinámica, procede
de la capacidad intrínseca de las
moléculas de tubulina de hidrolizar el
GTP. Cada dímero de tubulina tiene unida fuertemente una molécula de GTP, que es hidrolizada a GDP
(que sigue unida al dímero) poco tiempo después de que la subunidad se haya agregado a un microtúbulo

122
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

en crecimiento. Las moléculas de tubulina asociadas a GTP se empaquetan entre sí en la pared del
microtúbulo de una manera muy eficiente, mientras que las moléculas de tubulina unidas a GDP presentan
una conformación distinta, y se unen unas a otras con menos fuerza.
Cuando la polimerización se produce rápidamente, las moléculas de tubulina se añaden al extremo del
microtúbulo a mayor velocidad de lo que se está produciendo la hidrólisis del GTP. Puesto que las
subunidades de tubulina que llevan unido GTP se unen fuertemente unas a otras, forman en el extremo del
microtúbulo un casquete, conocido como casquete de GTP,
que impide la despolimerización. El microtúbulo sólo puede
despolimerizarse por pérdida de subunidades de su extremo
libre. Además de la CC , la segunda condición que afecta a la
estabilidad de los microtúbulos es si el sitio de unión a
nucleótido intercambiable de la B tubulina del extremo (+) de
un microtúbulo está ocupado por GTP o GDP. Un microtúbulo
pasa a ser inestable y se despolimeriza con rapidez si el
extremo (+) queda recubierto por subunidades de GDP-B
tubulina en lugar de GTP-B tubulina. Esta situación puede
surgir cuando un microtúbulo se acorta con rapidez y exhibe
GDP-B tubulina en las paredes, o cuando el microtúbulo crece
con una lentitud tal que la hidrólisis del GTP unido a la B
tubulina lo convierte en GDP antes de que se agreguen
subunidades adicionales al extremo (+) del microtúbulo.
El extremo negativo de una alfa tubulina puede aportar el
residuo esencial al sitio catalítico de la beta tubulina y puede
servir como GAP (GTP asa) para la beta tubulina del dímero
adyacente en el protofilamento.
Recientemente se ha identificado en el citosol una proteína
reguladora que detiene el crecimiento de los microtúbulos, lo
que lleva a su despolimerización (tras la perdida del capuchón
de tubulinas-GTP). Ha sido denominada etatmina o prosolina (catratofina). La etatmina actuaría según
versiones actuales como secuestradora de dímeros de tubulina.
Ciertas drogas interfieren en la polimerización o despolarización de la tubulina
Cada heterodímero de tubulina es capaz de agregarse a una molécula del alcaloide colchisina o
colcemid y evita así su agregado a los extremos + de los microtúbulos, lo que provoca la rápida
desaparición de microtúbulos, en particular los del huso mitótico (inhibidores mitóticos). Esta propiedad
también la poseen otros alcaloides como la vinblastina y vincristina, que se utilizan en medicina como
drogas antimitóticas en el tratamiento antitumoral. El taxol se liga a los microtubulos y los estabiliza, inhibe
su dinámica, también agente oncológico.

Las MAP de ensamblaje establecen enlaces cruzados entre los microtúbulos, y entre éstos y
otras estructuras.
Una de las principales familias de MAP (proteínas asociadas a los microtúbulos), denominada MAP
de ensamblaje, es responsable de los enlaces cruzados entre microtúbulos en el citosol, impiden la
despolimerización de los microtúbulos del citosol, los organizan en haces y establecen enlaces cruzados
entre ellos y las membranas y los filamentos intermedios. Estabilizan a los microtúbulos. Las hay MAP de
tipo I y II, tau, muy bien estudiadas en neuronas. Una alteración en tau está relacionada con el Mal de
Alzheimer.

CINESINA, DINEINA Y TRANSPORTE INTRACELULAR

El transporte de vesículas con membrana lo hacen a lo largo de los microtúbulos, no todos sino
algunos, las de las vesículas del Golgi es el mejor estudiado. Esta función es realizada con la asistencia de
dos proteínas motoras, la quinesina y la dineína. Cuando se hallan “cargadas” con el material a
transportar la quinesina se desliza hacia el extremo (+) del microtúbulo, y la dineína hacia el extremo (-)
Las cinesinas fueron descubiertas en 1985, se mueven siempre sobre un protofilamento hacia el
extremo mas. Las dineínas constituyen el primer motor relacionado con los microtúbulos, se las descubrió
en 1963 como proteína encargada del movimiento en cilios y flagelos. Aunque casi de inmediato se
sospechó la existencia en formas citoplasmáticas. Las dineína citoplasmática se encuentra en todo el reino

123
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

animal, pero su presencia en plantas es una controversia. Las pruebas de motilidad in Vitro señalan que las
dineína citoplasmática se mueve de manera progresiva a lo largo del microtúbulo hacia el extremo menos
del polímero,
Estas proteínas motoras están compuestas por cuatro cadenas polipeptídicas, dos pesadas y dos
livianas, cada cadena pesada tiene un dominio globular o cabeza y
uno fibroso o cola. El fibroso se conecta con el material a transportar y
el globular se une al microtúbulos. En la membrana de los organoides
y de las vesículas transportadoras se han identificado dos proteínas
de transmembrana – la quinectina y la dinectina- con las cuales se
unen la quinesina o cinesina y la dineína respectivamente. Todo este
proceso consume energía que se obtiene de la hidrólisis del ATP por
ATPasas ubicadas en las cabezas de las proteínas motoras,
convirtiendo energía química en energía mecánica que se emplea
para mover el cargamento celular. Los tipos de cargamento celular
que estas proteínas transportan comprenden vesículas, mitocondrias,
lisosomas, cromosomas y otros filamentos del citoesqueleto. Las
proteínas se mueven por pasos en una sola dirección a lo largo del riel
del citoesqueleto, de un sitio de unión al siguiente. Conforme la
proteína avanza, experimenta varios cambios en la conformación que
constituyen un ciclo mecánico. Los pasos del ciclo mecánico se
coordinan con los pasos de un ciclo químico, el cual proporciona la
energía necesaria para impulsar la actividad del motor. Los pasos del
ciclo químico abarcan la unión de una molécula de ATP con el motor,
la hidrólisis del ATP, la liberación de los productos (ADP mas Pi) del motor y la unión de una nueva
molécula de ATP.
De ésta manera entonces la posición normal de los organoides está determinada por la
existencia en su superficie de una proteína que se une a las proteínas motoras asociadas a los
microtúbulos ; específicamente el R.E se une a las Kinesinas y el Aparato de Golgi se une a las Dineínas
para encontrar su ubicación .
MICROFILAMENTOS O FILAMENTOS DE ACTINA

Los filamentos de actina se encuentran en todas las células eucariotas y son imprescindibles para la
mayoría de los movimientos, especialmente los de la superficie celular: deslizarse a lo largo de una
superficie, incorporar una partícula por fagocitosis, dividirse en dos. Al igual que microtúbulos, muchos
filamentos de actina son inestables, pero en las células pueden formar estructuras estables como el aparto
contráctil de células musculares, los microvilli de las células epiteliales que revisten el intestino y túbulos
renales, haces contráctiles en células no musculares. También pueden formar estructuras temporarias como
lamelipodios y filopodios en el extremo director de un fibroblasto, el anillo contráctil que separa el citoplasma
en dos partes cuando una célula animal termina su división celular.
Son de localización periférica, reforzada en la parte apical de la célula proyectándose hacia las
microvellosidades que tienen por ejemplo las células epiteliales. El músculo tiene un gran desarrollo de
filamentos de actina y también de miosina, que son los que permiten la contracción; esa misma actina forma
parte del esqueleto celular., tiene la capacidad de formar líneas bidimensionales, redes y estructuras
tridimensionales o geles (un gel es una especie de red pero en tres dimensiones). Aunque están dispersos
por toda la célula, los filamentos de actina están fundamentalmente concentrados en la parte periférica que
es la corteza de la célula y sobre todo en la parte apical. El refuerzo de la parte apical del filamento de
actina se llama Velo Terminal, que tienen las células epiteliales; ese velo terminal proyecta en forma vertical
filamentos de actina hacia las microvellosidades formando el eje de las mismas.
Se los puede clasificar entonces según su localización en:
-Corticales
-Transcelulares

LOS FILAMENTOS DE ACTINA SON DELGADOS Y FLEXIBLES

Los filamentos de actina aparecen como fibras de 7 nm de diámetro, más flexible que los
microtúbulos. Cada filamento es una cadena trenzada de moléculas globulares de actina idénticas, cada
una de las cuales “apunta” en la misma dirección a lo largo del eje de la cadena.

124
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La actina es la proteína intracelular más

abundante en las células eucariontes, existe
como monómero globular, denominado actina G,
y como polímero filamentoso, la actina F, que es
una cadena lineal de actina G. Al igual que un
microtúbulo, un filamento de actina tiene una
polaridad estructural, con un extremo más y un
extremo menos, por el primero se alargan y se
acortan mas rápido que por el segundo.

Cada filamento de actina comienzan a crecer a partir de un núcleo de tres monómeros de actina G que se
combinan entre sí, en cualquier punto del citosol donde la construcción de filamentos de actina sea
necesaria, o bien a partir de proteínas nucleadoras formin o como las Arp 2/3-

El alargamiento del núcleo originario se produce mediante la adición de monómeros de actina a cada
uno de los extremos del filamento. Cada molécula de actina contiene Mg que forma un complejo con ADP o
ATP, en consecuencia hay cuatro estados de la actina, ATP-actina G, ADP-actina G, ATP-actina F, ADP-
actina F.
El agregado de iones de Mg+2, y K+ a una
solución de actina G induce a la polimerización de
ésta para constituir filamento de actina F, proceso
reversible. La polimerización va acompañada por
hidrólisis de ATP a ADP y Pi, lo cual afecta a la
cinética de la polimerización pero no es necesaria
para que éste tenga lugar.
En estas condiciones una vez formado el
microfilamento (Nucleación) éste crece diez veces
más rápido en uno de los extremos que en el otro.
El extremo de crecimiento mas rápido se
denomina extremo + (protuberante) mientras que
el de crecimiento mas lento – (puntiagudo). La
diferencia de las velocidades de elongación en los extremos opuestos de un filamento de actina es causada
por los distintos valores de concentraciones críticas (Cc) en los dos extremos que se pueden medir
mediante el bloqueo de uno y otro extremo con proteínas que cubren los extremos de los filamentos de
actina con un “casquete”.
Con concentraciones intermedias de actina G entre los valores de Cc para los extremos (-) y (+) las
subunidades de actina pueden fluir a través de los filamentos debido a la fijación preferente en el extremo +
y la disociación preferente en el extremo (-) del filamento, fenómeno llamado “noria”
Como en el caso de los microtúbulos, el crecimiento de los microfilamentos depende de la alta
afinidad que poseen para unirse entre si (en forma no covalente y reversible) los monómeros unidos a su
vez a ATP. Este ATP es hidrolizado a ADP poco tiempo después de que el monómero se haya ensamblado
a un filamento en crecimiento. Las moléculas de ADP permanecen retenidas en el filamento de actina,
incapaces de intercambiarse por ATP, hasta que el monómero que las trasporta se disocia del filamento
formando de nuevo un monómero.
Cabe notar que el fenómeno de inestabilidad dinámica observado en los microtúbulos es apenas perceptible
en los microfilamentos
El paso inicial y limitante en la formación de filamentos de actina es la nucleación, que requiere que los
monómeros interaccionen correctamente. Dos tipos de proteínas, la formina y el complejo Arp2/3
determinan donde se forman los filamentos en el interior celular al facilitar su nucleación. Las forminas son
unas proteínas grandes de unión a los extremos protuberantes (+) que tanto nuclean los monómeros
iniciales de actina como, a continuación, se desplazan a lo largo del filamento en crecimiento, añadiendo
monómeros nuevos al extremo protuberante. Se cree que la formina nuclea filamentos largos carecientes de

125
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

ramificaciones, que componen las fibras de estrés, loa anillos contráctiles, los filopodios y los filamentos
finos de las células musculares. Muchos de estos filamentos son estables debido a proteínas
estabilizadoras de los filamentos de actina como la tropomiosina.
Por el contrario, en el extremo de avance de los procesos celulares o de las células en movimiento, los
filamentos de actina se recambian y ramifican, estos filamentos se nuclean por el complejo Arp2/3 que se
une a la actina/ATP cerca de los extremos protuberantes.
Otro tipo de proteína de unión a la actina remodela o modifica los filamentos de actina favoreciendo la tasa
de disociación de los monómeros de actina/ADP del extremo puntiagudo, ADF/cofilina, también es capaz
de escindir fialmentos de actina.
¿Qué impide que la totalidad de monómeros polimericen formando filamentos?

Efectos de la timosina y de la profilina

en la polimerización de la actina: un
monómero de actina ligado a la timosina
es impedido de unirse al filamento y
promover el crecimiento del extremo + del
filamento de actina. Un monómero de
actina unido a la profilina es capaz de
promover al crecimiento del filamento. La
timosina y la profilina no pueden unirse
simultáneamente al mismo monómero de
actina. En unas células en la que la
mayoría de los monómeros de actina se
encuentran unidos a la timosina, la
activación de una pequeña cantidad de
profilina puede resultar en una rápida
asociación de filamentos. La profilina se
une a los monómeros de actina que son
temporariamente liberados del pool de
monómeros ligados a la timosina,
moviéndolos para las extremidades + de los filamentos de actina y es entonces liberadas y reciclada para
promover un nuevo ciclo de crecimiento del filamento. Para muchos autores es la proteína que intercambia
los nucleótidos de ADP por ATP.

Efectos de los fármacos sobre los microfilamentos

Drogas como la citocalasina actúan impidiendo la polimerización, provocando la despolimerización de los
filamentos de actina debido a que se une a sus extremos protuberantes y bloquea su crecimiento, con la
consiguiente desaparición de los capuchones de actinas con ÄTP. La faloidina evita su despolimerización,
se liga al filamento y lo estabiliza.

Muchas proteínas se unen a la actina y modifican sus propiedades.

Hay proteínas que se unen a los filamentos de actina controlando su comportamiento. Por ejemplo, las
proteínas que mantienen unidos a estos filamentos formando haces paralelos, como ser fimbrina, villina, alfa
actinina; o redes como la filamina. Un segundo grupo de proteínas se fijan a los filamentos de actina y
controlan su longitud, mediante cortes, como la gelsolina y la cofilina. Otro grupo de proteínas pueden
recubrir los extremos de los filamentos de actina como la Cap Z, se fija a los extremos (+) de los filamentos
e impide el agregado o pérdida de subunidades de actina desde el extremo (+). La tropomodulina recubre
los extremos (-).
Los filamentos de actina pueden asociarse a proteínas motoras formando haces contráctiles. Todas las
proteínas motoras dependiente de la actina pertenecen a la familia de las miosinas. Estas proteínas unen e
hidrolizan ATP, el cual proporciona la energía necesaria para su desplazamiento a lo largo de los filamentos
de actina, desde el extremo menos al extremo más. La miosina I y la II son las mas abundantes y mejor
estudiadas. La miosina II impulsa la contracción muscular y la citocinesis, mientras que la I interviene en el
transporte de vesículas de m., en la estructura de los microvilli y en los filopodios.
La miosina I posee una cabeza y una cola, pues uno de sus extremos es globular y el otro fibroso.
Cuando esta proteína motora funciona, su cola se liga a la membrana del organoide que va a ser trasladado
–por lo general una vesícula de endomembrana- y su cabeza se une a un filamento de actina vecino, las
uniones y desuniones alternadas hacen que la miosina I se deslice en dirección al extremo (+) del filamento
de actina. Los cambios de posición de la cabeza, consumen ATP, que es hidrolizado a ADP y P por una
ATP asa dependiente de Ca2+ situada en la propia cabeza.

126
BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

127
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La miosina II se compone de dos polipéptidos pesados, cada uno combinado con dos polipéptidos
livianos, generando una molécula fibrosa con dos cabezas en una de sus puntas, estas cabezas al igual que
la miosina I tienen actividad ATPasa y son responsables de las actividades mecánicas de las moléculas.
Las miosinas II no funcionan aisladas. Para poder actuar se asocian y forman conjuntos bipolares,
con las colas fusionadas entre sí y las cabezas dirigidas hacia el extremo del conjunto. Las cabezas
establecen uniones intermitentes con los filamentos de actina adyacentes. Dado que se deslizan sobre ellos
en direcciones contrarias –hacia los respectivos extremos (+)- los tensan y generan fuerzas mecánicas en
los contactos focales.

FUNCIONES DE LOS FILAMENTOS DE ACTINA

1. MECANICAS: constitución del esqueleto de membrana, mantenimiento de estructuras como los microvilli y
los esterocilios. Las transiciones de gel – sol que tienen lugar en la corteza celular
2. EL DESLIZAMIENTO CELULAR DEPENDE DE LA ACTINA.

La migración celular es un fenómeno común durante el desarrollo embrionario, y en el organismo

desarrollado cumple funciones vinculadas con la defensa y reparación tisular.
A diferencia de las células musculares, en las cuales los filamentos de actina ni se acortan ni se
alargan, en las células locomotrices el citoesqueleto presenta un gran dinamismo. Antes de ponerse en
movimiento, la célula migratoria adquiere un aspecto poligonal, luego, a consecuencia de rápidas
modificaciones en los filamentos de actina corticales, en el extremo de la célula correspondiente al futuro
movimiento se forma varias láminas citoplasmáticas llamadas lamelipodios, de cuyos bordes libres nacen
numerosas prolongaciones digitiformes denominadas filopodios. Los lamelipodios surgen y se alargan por
obra de una proteína reguladora Arp 2/3 que induce a su formación, y en colaboración con la profilina. El
acortamiento es generado por el desarme de tales armazones, al actuar la gelsolina, la timosina y ADF. Los
lamelipodios también se mueven, debido a las moléculas de miosina II entre los filamentos de actina y los
hacen deslizarse unos sobre otros en direcciones contrarias. Los filamentos de actina de los filopodios están
unidos entre si por una proteína ligadora llamada fimbrina, y además se encuentra la proteína motora
miosina I, que moverá el filopodio.
Los mecanismos moleculares de estas y otras formas de deslizamiento celular no están bien
aclarados. Sin embargo, a grandes rasgos, se sabe que son esenciales tres procesos:
 Avance hacia delante de la superficie celular, determinada por la polimerización de la actina. La
célula extiende profusiones en su “frente” o extremo director.
 Las profusiones se adhieren a la superficie por donde la célula se está deslizando

128
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

 El resto de la célula es arrastrado mediante tracción hacia los puntos de anclaje.

Ejemplo: el extremo director de un fibroblasto extiende regularmente finos lamelipodios que contienen una
densa red de filamentos. Muchas células también extienden prolongaciones mas finas los filopodios.
Cuando lamelipodios y filopodios entran en contacto con un punto favorable de la superficie, se adhieren a
él: unas proteínas de transmembrana, las integrinas, se unen a moléculas de la matriz extracelular o a la
superficie de otra células sobre la que se esta deslizando. Mientras tanto, en la cara intracelular de la
membrana que se esta desplazando, las integrinas nuclear o captura filamentos de actina, generando un
anclaje resistente. Para utilizar este anclaje y desplazar su soma celular hacia delante, la célula utiliza ahora
contracciones internas que ejercen la fuerza de empuje.
Una forma especial de locomoción se denomina movimiento ameboide, características de las amebas y lo
glóbulos blancos macrófagos. El movimiento ameboide se inicia cuando la membrana plasmática forma
como un globo en la parte anterior, el seudópodo o falso pie, similar a los Lamelipodios de las células de los
vertebrados. A medida que el seudópodo se fija al sustrato, se llena de citosol que fluye a través de la
célula. En el último paso del movimiento arrastra la parte posterior de la ameba y la fijación al sustrato se
rompe. El movimiento se acompaña por cambios en la viscosidad del citosol, con ciclos entre los estados de
sol y gel. La región central del citoplasma, el endoplasma, es un líquido que fluye con rapidez hacia la parte
anterior de la célula, hasta llegar al pseudópodo. Una vez allí el endoplasma se convierte en ectoplasma, un
gel que constituye la corteza justo por debajo de la mp. A medida que la célula se desplaza hacia adelante,
el gel ectoplasmático de su extremo posterior vuelve a convertirse en sol endoplasmático, para
transformarse después otra vez en ectoplasma, cuando llega al extremo anterior de la célula. La
transformación entre los estados de sol y gel es producto de la separación y reensamblaje de los retículos
de microfilamentos de actina en el citosol.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Los filamentos de actina intervienen en la citocinesis

La citocinesis tiene lugar al finalizar la mitosis, al formarse un anillo
contráctil compuesto por filamentos de actina y miosina II por debajo de la
membrana plasmática en la zona ecuatorial de la célula en división. Al igual
que en las fibras tensoras, las miosinas II son diméricas y se hallan entre
los filamentos de actina del anillo. La citocinesis se produce a raíz de que
cada miosina II se desliza sobre dos filamentos de actina en direcciones
contrarias. La suma de estos deslizamientos hace aparecer un surco en la
superficie celular, que al profundizarse genera un estrangulamiento que
culmina con la partición de la célula.

FILAMENTOS INTERMEDIOS
Los filamentos intermedios son fibras proteicas resistentes, duraderas, que se encuentran en casi
todas las células eucariotas de los organismos multicelulares. La organización de los mismos su asociación
a la membrana plasmática, sugiere que su función principal es estructural –para reforzar las células y
organizarlas en tejidos, proporcionando un soporte mecánico a la membrana plasmática o con la matriz
extra celular. No participan de la movilidad celular, son muy estables e insolubles, difieren en tamaño de las
otras dos fibras citoesqueléticas, y las subunidades, a diferencia de las otras dos globulares (actina y
tubulina) las subunidades de los IF son bastones alfa helicoidales que se ensamblan para formar cordones.
Por último las subunidades IF no se fijan a nucleótidos y su ensamblaje a filamentos intermedios no requiere
de la hidrólisis de nucleótidos (GTP o ATP)
Los filamentos intermedios proporcionan a la célula resistencia a la tensión mecánica.
Los filamentos intermedios pueden ser citoplasmáticos y nucleares
Se los ubica fundamentalmente:
 Formando las láminas nucleares
 Atravesando el citoplasma desde una lateral a otro lo que sirve para darle resistencia a la célula para
que no se deforme frente a la presión o stress mecánico.
 Se los encuentra convergiendo hacia unas diferenciaciones que tienen las células epiteliales que son
los desmosomas y que sirven para la unión con las células adyacentes.
 De la misma manera los filamentos se dirigen hacia la parte basal de la célula a los llamados
hemidesmosomas y de esta manera permiten la unión de la célula con los tejidos que estan
debajo.
La familia con más diversidad de subunidades es la de las queratinas. Llamados también
tonofilamentos, se encuentran en células epiteliales, particularmente en la epidermis y sus derivados (pelos,
uñas) en las mucosas y glándulas. Se asocian a los desmosomas y hemidesmosomas con los cuales
componen una trama filamentosa continua desplegada por todo el epitelio, al que le confieren gran parte de
su resistencia mecánica. La importancia de esta función queda demostrada por la extraña enfermedad
genética humana epidermolisis bullosa simple, en la cual algunas mutaciones en los genes de la queratina
modifican la formación de estos filamentos en la epidermis. El resultado es una piel muy vulnerable al daño
mecánico; es suficiente muy poca presión para romper a las células y provocar la descamación de la piel.
Una proteína ligadora filagrina une a los filamentos de queratina donde se entrecruzan. Los
monómeros de los filamentos de queratina se llaman citoqueratina.
Los filamentos de vimentinas son comunes en células embrionarias. En el organismo desarrollado se
localizan en las células de origen mesodérmico como fibroblastos, endoteliales, sanguíneas, etc. La
proteína ligadora que une a los filamentos de vimentina es la plactina.
Los filamentos de desmina se encuentran en el citoplasma de todas las células musculares y se
unen entre si mediante una proteína específica llamada sinamina.
Los neurofilamentos son los principales elementos estructurales de las neuronas, incluidas las
dendritas y el axón.
Los filamentos gliales se encuentran en el citosol de los astrositos y células de Schwann.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Laminofilamentos: apoyada sobre la superficie interna de la envoltura nuclear existe una delgada malla de
filamentos intermedios conocida como lámina nuclear formada por laminofilamentos. Es responsable de la
forma de la forma y la resistencia mecánica de la membrana nuclear.
Todos los filamentos intermedios muestran la misma organización estructural. Se trata de polímeros
lineales cuyos monómeros son proteínas que presentan una estructura en hélice fibrosa. Las proteínas
fibrosas (a diferencia de los microtúbulos y microfilamentos que están formados por unidades globulares )
están integradas por una sucesión de secuencias idénticas de siete aa (heptetos) cada una lo que les
permite combinarse entre sí lado con lado y componer dímeros lineales, éstos dímeros vuelven a
combinarse entre sí –también de a dos, pero en forma desfasada y antiparalela- se generan tetrámeros los
cuales se conectan por sus extremos y dan lugar a estructuras lineales llamadas protofilamentos. Los
filamentos intermedios se forman con el concurso de ocho protofilamentos que se adosan por sus flancos
hasta componer un tubo de 10 nm de grosor.

131
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

132
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

PARTE 8
ENERGÉTICA CELULAR: GLUCOLISIS Y OXIDACION AEROBICA

La mayor parte de la energía que usa la célula es provista por el ATP

Las células necesitan de energía para realizar casi todas sus actividades (mitosis, meiosis. Contracción,
motilidad, transporte activo, endocitosis y exocitosis etc.). La energía es tomada de la molécula de ATP,
depositadas en las uniones fosfato anhidro de alta energía. Cuando el ATP se hidroliza, junto con la
liberación de energía se genera ADP y un fosfato. Las usinas generadoras de ATP son la mitocondrias, que
toman la energía depositada en las uniones covalentes de las moléculas de los alimentos y la transfieren al
ADP. Una vez formado, el ATP sale de la mitocondria y se difunde por la célula (fig de Robertis)
Metabolismo
Las células llevan a cabo una gran variedad de reacciones químicas, responsables tanto de la
degradación de moléculas que sirven como alimento, como de la síntesis de los constituyentes celulares.
Conjunto de Intercambios y transformaciones físicas y químicas que ocurren en el interior de la célula,
los procesos químicos son catalizados por enzimas e incluyen transformaciones de energía. Estas
reacciones químicas se pueden agrupar en vías metabólicas: secuencias de reacciones químicas en las que
una enzima específica cataliza cada reacción química y el producto de una reacción es sustrato en la
siguiente, las cuales se pueden dividir en dos tipos muy amplios: catabólicas y anabólicas.
 Reacciones anabólicas: unen moléculas simples para formar moléculas complejas (síntesis) Ej. La
síntesis de proteínas a partir de aminoácidos. Estas reacciones almacenan energía en los enlaces
químicos que se forman y son reacciones endergónicas.
 Reacciones catabólicas: rompen moléculas complejas en mas simples. Son reacciones de
degradación y liberan energía almacenada, exergónicas. Ej. Proteínas a aminoácidos, ácidos
nucleicos a nucleótidos. La ruta catabólica tiene dos papeles: liberar energía libre necesaria para el
funcionamiento celular, generar pequeñas moléculas o metabolitos que son los ladrillos de
construcción para la biosíntesis (parte de la energía liberada se utiliza en los procesos anabólicos.
Las reacciones anabólicas y catabólicas suelen estar asociadas. La energía liberada en las reacciones
catabólicas se utiliza para realizar trabajo biológico e impulsar las reacciones anabólicas; se almacena por
un tiempo en dos formas: como fosfato de alta energía en el ATP y como electrones de alta Energía en
el NADH Y NADPH.
Las reacciones químicas y las vías metabólicas se
observan en casi todas las células, desde las
bacterias más simples hasta el animal o vegetal más
complejo. Es evidente que estas vías metabólicas
aparecieron muy temprano en el curso de la
evolución biológica y se han retenido.
¿Cuáles son los objetivos del metabolismo?
Obtener energía utilizable por la célula
Fabricar los componentes celulares
Transformar sustancias incorporadas del
medio en materia prima para la célula
Fabricar y degradar moléculas con funciones
especiales.
Ambas vías incluyen reacciones en las que se
transfiere energía.

 Una forma de transferir energía es a través del ATP

Todas las células vivas se basan en el ATP para capturar, almacenar y transferir energía libre necesaria
para realizar trabajo químico y mantener la célula. El ATP opera como una moneda energética, es decir,
parte de la energía liberada por ciertas reacciones exergónicas es capturada por el ATP, que entonces
puede liberar energía libre para impulsar reacciones exergónicas.

133
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La energía se encuentra depositada en las uniones químicas entre los fosfatos del ATP. Así cuando el
ATP se hidroliza, junto con la liberación de energía se genera ADP y un fosfato. El ADP se comporta como
una “batería descargada” que al cargarse por la unión de un fosfato se convierte en ATP, la “batería
cargada
-Enlace rico en energía: que la energía libre se libera cuando se hidroliza este enlace
-¿Qué es lo que hace que la hidrólisis de los enlaces de “alta” energía del ATP sean tan exergónicos?:
- la repulsión electrostática con el P adyacente cargado –
1941. Enlace de alta energía: erróneo, el enlace en si mismo contiene energía libre que se puede liberar.

Estructura química de la molécula de adenosina trifosfato (ATP)

Es un nucleótido formado por adenina, ribosa y tres moléculas de ácido fosfórico. La adenosina
(nucleósido: azúcar mas base) con una molécula de ácido fosfórico forma en AMP, dicha unión requiere
2000 a 3000 calorías para establecerse, el AMP mas una molécula de ácido fosfórico, es el ADP, la unión
requiere o libera 7000 calorías, y el ADP mas ácido fosfórico es el ATP y la unión requiere 7000 cal.
¿Cómo las células generan el enlace fosfato anhidro de alta energía del ATP a partir del ADP y Pi?
Esta reacción endergónica es inversa a la hidrólisis del ATP y requiere del aporte de 7,3kcal/mol para su
realización, puede anotarse:
Pi + H+ + ADP ATP + H2 O
En donde Pi representa el fosfato inorgánico (HPO4 2- ) la energía para propulsar esta reacción se genera a/t
de dos procesos: la oxidación aeróbica, que tiene lugar en casi todas las células, y la fotosíntesis que
sólo se lleva a cabo en las células de las hojas de los vegetales y en ciertos organismos unicelulares.

En la oxidación aeróbica los ácidos grasos y las hexosas (preferentemente la glucosa) son metabolizados a
CO2 y H2 O (paso a paso y en algunos de esos pasos liberan pequeñas porciones de energía); y la energía
liberada se convierte en la energía química de los enlaces fosfato anhidro del ATP.
El ATP acopla las reacciones exergónicas y endergónicas

134
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

 Otra forma de transferir energía es transferir electrones de “alta energía”

Una reacción en la cual una sustancia transfiere uno o más electrones a otra se llama reacción de óxido
reducción o reacciones Redox. La ganancia de uno o más electrones por un átomo o molécula se denomina
reducción y la pérdida oxidación. Toda oxidación de un átomo o molécula está atada a la reducción de otro
átomo o de otra molécula.

A pesar de que la oxidación y reducción son siempre definidas en términos de intercambio de electrones,
también podemos pensar en estos términos cuando los átomos de H (no los iones de hidrógenos) se
pierden o se ganan, porque la transferencia de átomos de Hidrógeno involucra la transferencia de
electrones, por lo tanto cuando una molécula pierde átomos de H, se oxida.
AH2 + B A + BH2
Durante el procesamiento de los alimentos en algunas reacciones de oxidación y reducción intervienen dos
moléculas intermediarias: las coenzimas nicotín amida adenina dinucleótido (NAD) y flavina adenina
dinucleótido (FAD). En su forma oxidada la primera se representa con la sigla NAD+ y en su forma reducida
con la sigla NADH. Ambos participan en las reacciones redox biológicas. Estas coenzimas actúan junto a
las enzimas que catalizan la reacción y actúan como dadores o aceptores de hidrógeno, en realidad.

135
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Reacciones de hidrogenación y deshidrogenación.

AH2 NAD+ BH2

A NADH + H B

FUENTES DE CARBONO Y ENERGÍA PARA EL METABOLISMO

Todas las células no utilizan la misma fuente para proveerse de material que necesitan cuando deben
construir sus biomoléculas.
Según la fuente de carbono se las puede dividir en
1.- AUTÓTROFAS: utilizan como fuente de carbono al CO2 atmosférico
2.- HETERÓTROFAS: utilizan al carbono de los compuestos orgánicos
La energía que utilizan las células provienen de distintos medios. Se pueden
clasificar de acuerdo a la fuente de energía en:
1.- FOTOSINTETICAS: utilizan como fuente de energía la luz solar
2.-QUIMIOSINTÉTICAS: utilizan como fuente de energía la liberada en las reacciones química
exotérmica o exergónicas
Teniendo en cuenta estos dos aspectos, combinando los dos grupos, habría teóricamente cuatro
posibilidades en la naturaleza:

ORGANISMO FUENTE DE C FUENTE DE E EJEMPLO

Fotolitotrofo CO2 Luz Vegetales
Cianobacterias

Fotorganotrofo Compuestos Luz Bacterias

orgánicos purpúreas
Quimiolitotrofo CO2 Reacciones Bacterias
redox desnitrificantes
Quimiorganotrofo Compuestos Reacciones Bacterias,
orgánicos redox Hongos, Animales

Las bacterias púrpurea del azufre – dadores de e- agentes reductores – H2S sulfuro de hidrógeno no el
agua, no liberan oxígeno.

OBTENCIÓN DE ENERGÍA Y ELECTRONES A PARTIR DE LA GLUCOSA

El combustible más común es un azúcar, la glucosa (C 6H12O6). Muchos otros compuestos sirven como
alimento, pero casi todos son transformados a glucosa. Las células obtienen energía de la glucosa mediante
oxidación. La conversión completa de la glucosa en C O 2 y agua libera 686 Kcal/mol, es una reacción
altamente exergónica y puede impulsar la formación endergónica de una gran cantidad de ATP a partir de
ADP + Pi.

Tres procesos metabólicos desempeñan papeles en la utilización de la glucosa para obtener energía:
 Glucólisis: Consiste en una serie de reacciones que comienzan con el metabolismo de la glucosa en
todas la célula, y produce un producto de tres C, piruvato y se obtiene una pequeña cantidad de
energía.

136
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

 Respiración celular: ocurre cuando el ambiente es aerobio y esencialmente transforma al piruvato en

CO2 , en este proceso una gran cantidad de energía contenida en los enlaces covalentes del piruvato se
libera y es atrapada por ATP
 Fermentación: ocurre cuando el ambiente es anaerobio, se obtienen otras moléculas relativamente ricas
en energía como ácido láctico o etanol de manera que la cantidad de energía extraída de la glucosa es
mucho menor que la obtenida en condiciones aeróbicas.

La oxidación aeróbica completa de la glucosa está acoplada con la síntesis de hasta 36 mol de ATP:

C6 H12 O6 + 6 O2 + 36 Pi + 36 ADP + 36 H+ 6 C O2 +
36 ATP + 4 2 H2 O

La glucólisis tiene lugar en el citosol

Los pasos iniciales de la oxidación de la glucosa, llamada glucólisis transcurren en el citosol, tanto en
eucariontes como procariontes, y no necesitan de oxígeno, los pasos finales si requieren de oxígeno,
generando la mayor parte de ATP.
En procariotas, las enzimas de la glucólisis, de la fermentación y las del ciclo de Krebs son solubles en el
citosol. Las enzimas involucradas en la oxidación del piruvato y la cadena respiratoria están asociadas a la
superficie interna de la membrana plasmática.
En Eucariontes, la glucólisis y la fermentación ocurre en el citosol y las demás reacciones metabólicas,
oxidación del piruvato y ciclo de Krebs en matriz de las mitocondrias, cadena respiratoria en membrana
mitocondrial interna.
Un conjunto de 10 enzimas cataliza las reacciones que degradan una molécula de glucosa a dos de
piruvato, en lo que se conoce como vía glucolítica. Todos los intermediarios metabólicos entre la glucosa y
el piruvato son compuestos fosforilados hidrosolubles. En la glucólisis se forman cuatro moléculas ATP a
partir de ADP. Sin embargo en las etapas iniciales de esta vía se consumen dos moléculas ATP, por lo tanto
la ganancia neta es de dos mol ATP.

137
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Además, una parte de la energía liberada durante la glucólisis no es transferida directamente al ATP
sino que promueve la reducción de dos NAD+, la ecuación química equilibrada para la conversión de la
glucosa a piruvato muestra que también se forman
cuatro átomos de H (4 protones y 4 electrones) Los
cuatro electrones y dos de los cuatro protones se
transfieren a dos moléculas de la forma oxidada del
transportador electrónico dinucléotido de
[Link] NAD+
Así la reacción general para esta primera etapa del
metabolismo de la glucosa es

C6 H12 O6 + 2 NAD+ + 2 ADP + Pi

2 C3 H4 O3 + 2 NADH + 2 ATP + 2 H+
+ 2H2O

METABOLISMO ANAEROBICO DE LA
MOLECULA DE GLUCOSA
Los eucariontes en su mayoría son aeróbicos
obligados: solo crecen en presencia del O2 y
metabolizan por completo la glucosa a CO2 con la
producción simultánea de gran cantidad de ATP.
Algunos procariontes son anaerobios obligados: no
pueden crecer en presencia del oxígeno y metabolizan
la glucosa sólo de modo anaeróbico.
Supongamos que se corta el suministro de oxígeno a una célula que respira (condición anaeróbica) tal
vez por asfixia o por un ejercicio extremo, la primer consecuencia observando la cadena respiratoria es que
se bloquea y se detiene la glucólisis, la oxidación del piruvato y el ciclo de Krebs, si la célula no tiene otra
manera de obtener energía, se muere.
En condiciones anaeróbica, muchas células (no todas) pueden continuar con la glucólisis y producir una
cantidad reducida de ATP mediante la fermentación, proceso que tiene lugar en el citosol junto a la
glucólisis.
La fermentación tiene dos características:
1. utiliza el NADH + H+ formado por la glucólisis para reducir al piruvato, en consecuencia se
regenera el NAD+ que se requiere para la glucólisis.
2. permite que la glucólisis produzca una pequeña pero sostenida cantidad de ATP. Cuando las
células capaces de llevar a acabo la fermentación se tornan anaerobias, la velocidad de la
glucólisis se acelera hasta diez veces o más. Por lo tanto se mantiene una velocidad sustancial
de producción de ATP aun que la eficiencia en términos de moléculas de ATP por moléculas de
glucosa es mucho menor en comparación con la respiración celular aeróbica.
Muchos diferentes tipos de fermentaciones se llevan a cabo en diferentes tipos de bacterias y células
eucariontes y se diferencian por el producto final.
Fermentación láctica

138
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

El piruvato se reduce a lactato, en microorganismos y células musculares, a diferencias de éstas las células
nerviosas son incapaces de fermentar porque carecen de las enzimas que reducen el piruvato a lactato. Por
esta razón, sin una provisión adecuada de oxígeno el sistema nervioso humano se destruye con rapidez.
En células musculares al acumularse el ácido láctico rebaja el pH, reduciendo la capacidad de contraerse y
produce fatiga muscular conocida como calambre, causando dolor en los músculos y articulaciones, a este
ácido se lo secreta a sangre, cierta cantidad pasa al hígado donde es reoxidado a piruvato y metabolizado.
Las bacterias ácido lácticas y otros Procariotas, también generan ATP mediante la fermentación de la
glucosa a lactato.
Fermentación alcohólica
Ciertas levaduras y algunas células vegetales en condiciones anaeróbicas llevan a cabo un proceso llamado
fermentación alcohólica, proceso que requiere de dos enzimas, la primera extrae CO 2 del piruvato formando
acetaldehído y la segunda reduce al acetaldehído a etanol.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

DESCRIPCION GENERAL Y ESTRUCTURA DE LAS MITOCONDRIAS

Las mitocondrias poseen dos membranas

distintas desde el punto de vista estructural y
funcional
En la segunda etapa de la oxidación
aeróbica, el piruvato formado en la glucólisis es
transportado a las mitocondrias donde es
oxidado por el O2 a CO2 estas reacciones
generan 34 de los 36 ATP.
Las mitocondrias están entre las organelas
más grandes de la célula, con el tamaño
aproximado de una bacteria. Son cilíndricas,
aunque experimentan cambios de forma sutiles,
derivados de su actividad. En promedio miden 2
um de largo y un diámetro de 0,5 um. Su
número varía según el tipo celular. En los
hepatocitos pueden hallarse entre 1.000 y 2.000
mitocondrias. Están ubicadas en las regiones de
las células donde la demanda de energía es
mayor, se desplazan por el citoplasma ayudado
por microtúbulos y proteínas motoras. Altman en
1884 las describió como estructuras vivas que
parasitan las células, muy dinámicas que viven
aproximadamente de 6 a 10 días. Recibió varios
nombres como bioblastos hasta que en 1889
Carl Benda las denominó mitocondrias.

Las mitocondrias poseen dos membranas

–una externa y una interna- y dos
compartimientos, el espacio intermembranoso y la matriz mitocondrial.

Matriz mitocondrial: contiene numerosas moléculas, entre ellas:

 Varias copias de ADN circular
 Trece tipos de ARNm,
 Dos tipos de ARNr, los cuales forman auténticos ribosomas, parecidos a los citosólicos.
 Veintidós tipos de ARNt para los veinte aa.
 El complejo enzimático piruvato deshidrogenasa responsable de la descarboxilación oxidativa.
 Las enzimas responsables del ciclo de Krebs.
 La coenzima A (CoA) la coenzima NAD+ ADP, fosfato, O2, etc.

Membrana interna: Hasta hace poco se pensaba que las crestas consistían en simples
invaginaciones de la membrana interna. Ahora, la mayoría está de acuerdo en que la membrana limitante
interna y las membranas internas de las crestas poseen funciones distintas aunque estén unidas entre sí
por conexiones estrechas. Para facilitar la explicación, se describen las crestas como parte simple de la
membrana mitocondrial interna. Las crestas aumentan la superficie de asentamiento para muchas enzimas.
En ella se localizan los siguientes elementos:
 Las moléculas que componen la cadena respiratoria o cadena transportadora de electrones. Existen
innumerables copias de estos conjuntos en el plano de la bicapa lipídica, cada uno integrado por
tres grandes grupos proteicos – llamados NADH deshidrogenasa, b-c1 y citocromo c oxidasa-
entre los cuales se encuentran dos transportadores de electrones pequeños, la ubiquinona y el
citocromo c.
La coenzima FAD y una de las enzimas del ciclo de Krebs, la succinato deshidrogenasa.
 La ATP sintasa, complejo proteico ubicado en las inmediaciones de la cadena transportadora de
electrones. Presenta dos sectores, uno transmembranoso (porción F0) que tiene un papel de
túnel para el pasaje de H+ , y otro orientado hacia la matriz mitocondrial ( porción F1). Este último
cataliza la formación de ATP a partir de ADP y fosfato, o sea, es el responsable de la
fosforilaciones a que hace referencia el término “fosforilación oxidativa”.
 Un fosfolípido doble, la cardiolipina, que impide el pasaje de cualquier soluto a través de la bicapa
lipídica, excepto oxígeno, CO2, H2 O, NH y ácidos grasos.

140
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

 La creatinfosfoquinasa o CPK que es una enzima que fundamentalmente está en el músculo

cardíaco y esquelético que actúa en el transporte de electrones; es importante conocer a esta
enzima ya que en el caso de infarto de músculo cardíaco la destrucción de las células y sus
mitocondrias hace que esta enzima se vuelque al torrente circulatorio y se eleve su concentración
en la sangre siendo un elemento de diagnóstico del infarto. Dicho de otro modo el paciente con
infarto de miocardio aumenta en la sangre la CPK porque se le estan destruyendo las
mitocondrias en sus células cardíacas.
 Diversos canales iónicos y permeasas que permiten el pasaje selectivo de iones y moléculas desde
el espacio intermembranoso a la m. mitocondrial y en sentido inverso.

MEMBRANA EXTERNA
Es permeable a todos los solutos del citosol, pero no a las macromoléculas. Ello se debe a que en su
bicapa lipídica posee numerosas proteínas de transmembranosas de multipaso llamadas porinas, que
forman canales acuosos por los que pasan libremente iones y moléculas de hasta 5 kDa.
ESPACIO INTERMEMBRANOSO
Dada la presencia de porinas en la membrana externa, el contenido de solutos en el espacio
intermembranoso es similar al del citosol, aunque suele tener una elevada concentración de H+.

RESPIRACION CELULAR
La siguiente etapa de la degradación de la glucosa luego de la glucólisis, en presencia de oxígeno que
implica la oxidación del ácido pirúvico a CO2 y H2O es la respiración celular. La generación anaeróbica de
ATP a partir de la glucosa y a través de las reacciones de la glucólisis es relativamente ineficiente. La
evolución del catabolismo oxidativo solo resultó posible después de que el oxigeno molecular se hubiera
acumulado en la atmósfera terrestre, como
resultado de la fotosíntesis, realizada por las
cianobacterias.
La adición al proceso catabólico de una
fase dependiente del oxígeno proporcionó a
la célula un método más potente y eficaz de
extraer energía de las moléculas alimenticias.

1. La oxidación mitocondrial del

piruvato comienza con la formación de
acetil CoA

Como resultado de la glucólisis se

generan 2 moléculas de piruvato.
Inmediatamente después de que el piruvato
es transportado, a/t de las membranas
mitocondriales desde el citosol a la matriz,
donde será descarboxilado, reacciona con la
coenzima A y forma CO2 y un intermediario
acetil CoA. Este proceso se denomina
descarboxilacion oxidativa del piruvato y
ocurre en la matriz mitocondrial por acción de
un complejo de enzimas llamado piruvato
deshidrogenasa, es muy exergónica e irreversible. El piruvato cede un H+ y 2 [Link] acetil CoA desempeña
un papel central en la oxidación de ácidos grasos y aminoácidos, además es un intermediario en muchas
reacciones biosintéticas.

2. La oxidación del grupo acetilo de la acetil CoA en el ciclo del ácido cítrico genera CO 2 y
coenzimas reducidas.
La etapa final en la oxidación de la glucosa comprende un conjunto de nueve reacciones en las cuales el
grupo acetilo de la acetil CoA es oxidado a CO2. Estas reacciones funcionan en un ciclo que se conoce por
varios nombres: ciclo del ácido cítrico, ciclo de los ácidos tricarboxílicos y ciclo de Krebs, llamado así
en honor del bioquímico británico Hans Krebs quien dilucidó la vía en el decenio de 1930. Intentó publicar
en la revista Nature y lo rechazaron, el editor había concluido que no era lo bastante importante.

141
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

El resultado neto es que por cada grupo acetilo que entra al ciclo en forma de acetil CoA, se producen
dos moléculas de CO2:

El ciclo del ácido cítrico comienza cuando la acetil CoA reacciona con un compuesto de 4C oxalacetato
produciendo el ácido cítrico de 6C , luego se van a producir un total de 9 reacciones químicas que llevaran a
originar nuevamente ácido oxalacético, que estará disponible para unirse a acetil CoA y reiniciar un nuevo
ciclo al formar ácido cítrico.
Durante cada vuelta del ciclo, 2 carbonos del total de los 6 iniciales del ácido cítrico se oxidaran a CO 2 y
se genera energía suficiente para formar un GTP (luego se transformara a ATP), 3 NADH y 1 FADH 2. En el
caso de que se este degradando una molécula de glucosa, debido a que a partir de esta se obtienen 2
acetilos, se necesitan 2 vueltas del ciclo para procesar a los 2 acetilos. De modo tal que, cada
monosacárido de glucosa degradado dará origen a 2 ATP (a partir del GTP), 6 NADH y 2 FADH2.

Las moléculas de CO2 que se originan durante la descarboxilacion oxidativa y el ciclo de Krebs, pasan al
citosol, desde aquí al espacio extracelular para llegar luego a la sangre que las traslada a la sangre para su
eliminación de los pulmones.

Gracias a la mitocondria, la célula le exprime hasta la última gota de energía a la glucosa de la que solo
quedan 6 moléculas de CO2 y 6 moléculas de H2O, a cambio de 36 jugosas moléculas de ATP. Ese CO2 y
el H2O lo eliminamos de nuestro organismo para que las células vegetales lo transformen en glucosa
nuevamente en los cloroplastos, utilizando la luz como fuente de energía en lo que conocemos como
fotosíntesis.
La glucosa es una molécula rica en energía química en sus uniones carbono-carbono. A medida que se
va degradando va perdiendo esa energía hasta quedar solo CO2 y H2O, ambas moléculas pobres en
energía. Esto se puede ejemplificar como una roca que corre barranca abajo. Cuando comienza a rodar
posee mucha energía, pero cuando llega al final de su recorrido su energía se ha extinguido totalmente.
Con la glucosa ocurre algo similar, cuando ingresa a la célula es rica energéticamente y muy pobre cuando
quedan solo moléculas de CO2 y H2O. Es decir que en todo ese camino que recorrió, la glucosa se ha
oxidado, es decir ha perdido su energía.

Pero siempre que alguien se oxida hay otro que se reduce, es decir que gana la energía que perdió el
otro, por eso a estas reacciones de reducción se las denomina reacciones de reducción-oxidación o,
reacciones redox. Podemos decir que en definitiva la energía de la glucosa se transformo en otra energía: la
energía del ATP. En otras palabras, la glucosa se oxida para que el ADP se reduzca y se transforme en
ATP.
Pero para llegar la energía de la glucosa a ser energía de ATP debe pasar por compuestos intermedios
que aceptan esta energía en forma transitoria para volver a cederla. Estos compuestos aceptan la energía
contenida en la glucosa. Esa energía circula en forma de protones ( H+) y electrones (e-) de alta energía.
Quien pierde los protones o electrones se oxida (la glucosa) y quien los gana se reduce. Los compuestos
aceptores de electrones y protones son el NAD+ y el FAD, que al reducirse se transforman en NADH y
FADH2.
Pero el NADH y el FADH2 vuelven a oxidarse (pierden energía) y su energía es traspasada a otro
compuesto que se reduce. Esa energía es aceptada por los citocromos que se encuentran en la cadena de
transporte de electrones de la membrana mitocondrial interna.

Cadena de transporte de electrones. Cadena respiratoria o fosforilación oxidativa

Un descubrimiento revolucionario en biología celular es que las bacterias, mitocondrias y cloroplastos

usan el mismo proceso (o casi el mismo), llamado quimiosmosis (o acoplamiento quimiosmótica), para
generar ATP a partir de ADP y Pi. Fue propuesta por Peter Mitchell, quien sugirió que el ATP se genera
utilizando la energía almacenada en forma de un gradiente de protones a través de las membranas
biológicas, en lugar de por una trasferencia química directa de grupos ricos en energía.
Las fuentes energéticas inmediatas que impulsan la síntesis de ATP son el gradiente transmembrana de
la concentración de protones y el potencial eléctrico (gradiente de voltaje), que se llaman colectivamente
fuerza protón-motriz. Esta fuerza es generada por el movimiento gradual de electrones desde un estado
de alta energía a uno de más baja energía, a/t de transportadores de electrones unidos a la membrana.
En las mitocondrias y las células bacterianas no fotosintetizadoras, los electrones del NADH (producidos
durante el metabolismo de las hexosas, los ácidos grasos y otras sustancias) son transferidos al oxigeno, el
aceptor electrónico final. Estos transportadores acoplan el transporte de electrones al bombeo de protones
(siempre desde la cara citosólica a la cara exoplasmática de la membrana), con lo cual se genera la fuerza
protón-motriz.

142
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Transferencia vectorial (bombeo) de protones desde matriz mitocondrial a espacio I.

La mayor parte de la energía libre que se produce durante la oxidación de la glucosa a CO 2 es retenida en
las coenzimas reducidas NADH y FADH2, generadas en la glucólisis y el ciclo del ácido cítrico. Durante la
respiración se liberan los electrones del NADH y FADH2, que al final son transferidos al oxígeno para
formar H2 O, según las siguientes reacciones generales:
La energía liberada en la oxidación de una sola molécula de NADH o de FADH2 por el oxígeno, es
suficiente para impulsar la síntesis de varias moléculas de ATP a partir de ADP y Pi. La mitocondria torna
máxima la producción de ATP mediante la transferencia de electrones del NADH y del FADH2 a través de
una serie de transportadores electrónicos, todos ellos menos uno componentes integrales de la membrana
interna. Esta transferencia de electrones se realiza a través de la cadena transportadora de electrones o
cadena respiratoria. Esta cadena de transporte de electrones recibe la energía del NADH y del FADH2,
energía que es utilizada para bombear protones desde la matriz mitocondrial hacia el espacio
intermembrana.
En las mitocondrias, cada molécula de NADH libera dos electrones hacia la cadena de transporte
electrónico; estos electrones al final reducen un átomo de oxígeno

NADH NAD+ + H+ + 2e-

2e- + 2H+ +1/2 O2 H2O

Conforme los electrones se desplazan del NADH al O2 su potencial declina. Mucha de esta energía es
conservada en tres etapas del transporte de electrones, por
medio del movimiento de protones desde la matriz al espacio
intermembranoso a través de la Todos estos transportadores
pueden reducirse (ganar e-) u oxidarse (perder e-). La primero
en reducirse es al NADH reductasa, como su nombre lo indica es
capaz de captar los electrones y cederlos al complejo siguiente.
En el traspaso esta involucrada la ubiquinona, cuando los e- de
alta energía de los H del NADH, ésta se oxida cuando cede sus
e- a la ubiquinona, la cual se oxida dándole sus e- al complejo b-
c1, éste le cede al citocromo c (siempre uno se reduce y otro se
oxida) y por último al complejo citocromo oxidasa que cede sus e-
al oxígeno y forma agua.
Los e- cedidos por el FADH tienen su punto de entrada la
succinato reductasa, a partir de la cual fluyen por los restantes
eslabones de la cadena en el mismo orden que lo hacen los e-
cedidos por el NADH.

143
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Los NADH generados durante la glucólisis no ingresan a la mitocondrias

Como ya fue mencionado, los NADH generados durante la glucólisis que se lleva a cabo en el citosol van
a desencadenar, cada uno, la síntesis de 2 o 3 moléculas de ATP, determinando una clara diferencia con
los NADH generados en la matriz mitocondrial quienes producirán siempre 3 moléculas de ATP. Esta
diferencia se explica por una serie de eventos que impiden al NADH citosólico ingresar a la matriz
mitocondrial, por lo que sus electrones para llegar a la cadena de transporte de electrones de la membrana
mitocondrial interna deben valerse de un intermediario denominado lanzadera.
Efectivamente, las moléculas de NADH citosólico no pueden ingresar a la mitocondria por lo que sus
electrones no encontrarán un modo de ceder su energía para que se transforme en ATP que es el objetivo
final de toda la energía celular. Por ello sus electrones son transferidos a un intermediario quien es capaz de
transferirlos al interior mitocondrial y
cederlos, para luego retornar al citosol
libre de electrones y reiniciar el ciclo.
Existen dos lanzaderas: la del Glicerol 3-
fosfato y la lanzadera Malato- Aspartato

En la lanzadera del Glicerol 3-

Fosfato, este proceso es llevado a cabo
por una molécula denominada
Dihidroxiacetona-Fosfato que se reduce
a glicerol 3-fosfato al captar los
electrones del NADH en el citosol y
luego se introduce en el espacio
intermembranoso y se pone en contacto
con la membrana mitocondrial interna,
mas precisamente con el FAD, al que
cede dos e- y los dos H+ , es decir una
molécula de H2. Se forma por lo tanto un
FADH2, que como sabemos cede sus
electrones a la ubiquinona. El electrón
proveniente del FADH2 se incorpora, a la cadena de transporte desencadenando el pasaje de 2 H+ menos
hacia el espacio intermembrana produciendo de este modo 2 moléculas de A TP y no 3 como el NADH
mitocondrial quien ingresa a la cadena desde el complejo NADH deshidrogenasa.

En el caso de la lanzadera
MaIato-Aspartato, el NADH
reducido del citosol transfiere
su energía al oxalacetato que
se transforma en malato. El
malato del citosol atraviesa
las porinas de la membrana
mitocondrial externa y
transportadores específicos
de la membrana mitocondrial
interna, que le permiten
ingresar a la matriz
mitocondrial. Una vez allí, el
malato transfiere su energía a
un NAD+ y lo reduce,
transformándose en NADH.
Como consecuencia el malato
se transforma en oxalacetato
mitocondrial que no puede
atravesar la membrana
interna de la mitocondria,
para pasar al citosol se transforma en aspartato, que sí la atraviesa. En el citosol el aspartato se reconvierte
en oxalacetato, lo cual cierra el ciclo.

144
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La ATP sintasa comprende dos porciones

Los protones debido a que se encuentran en mayor concentración en el espacio intermembrana que en
la matriz, van a tener la tendencia de retrodifundir hacia esta, lo que no les es posible dado que la
membrana mitocondrial interna es impermeable a los protones. Por consiguiente, lo hacen a través de un
túnel transmembrana que no es otra cosa que una proteína canal denominada partícula F 0, que se asocia
con otra denominada F1 (complejo enzimático) , formando el complejo F0 – F1. A través de este complejo
retrodifunden los protones desde el espacio intermembrana hacia la matriz logrando que, cada vez que
pasan, se forme una molécula de ATP. Es por ello que el complejo F0 – F1 recibe el nombre de ATP
sintetasa.
Es necesario recordar que la energía del NADH y del FADH 2, es utilizada por los citocromos para el
transporte de protones (H+) en contra del gradiente de concentración, desde la matriz mitocondrial hacia el
espacio intermembrana. Estos protones tendrán la tendencia de volver a la matriz mitocondrial y lo harán a
través de la ATP sintetasa.
Aunque el ciclo del ácido cítrico forma parte del metabolismo aeróbico, ninguna de las reacciones que
llevan a la producción del NADH y FADH utiliza directamente el oxígeno molecular. Casi toda la energía
disponible a partir de la combustión de hidratos de carbono, grasas y otros nutrientes, se almacena en
forma de e- de alta energía los cuales transportados por el NADH y el FADH reaccionan con el oxígeno
mol en la cadena respiratoria.
En síntesis, la ATP sintasa se comporta como una turbina que convierte una clase de energía (la
protonicomotora, derivada del gradiente químico de los H +) en otra mas provechosa para la célula, energía
química depositada entre el segundo y tercer fosfato del ATP. (energía del gradiente de protones – energía
mecánica – energía química).

Fosforilación oxidativa: por que la gran cantidad de energía que se libera en estas reacciones es utilizado
por las enzimas de la membrana interna de la mitocondria para impulsar la transformación de ADP + Pi
hasta ATP.

ATP sintetasa: acoplar de manera quimiosmótica el flujo de retorno (quimiosmosis)

(energéticamente favorable) desde el EI hasta la MM permitiendo de esta manera utilizar la energía
del flujo de e- en la cadena respiratoria que es almacenada en el gradiente electroquímico de
protones a la síntesis de ATP la quimiosmosis ES proceso de fosforilación oxidativa.

145
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Los transportadores de la membrana mitocondrial interna son impulsados por la fuerza protón motriz.
la membrana mitocondrial interna contiene varias proteínas que transportan diversos metabolitos, hacia
dentro y hacia fuera de la organela, entre ellos piruvato, malato, etc. Dos de estas proteínas transportan
ADP y Pi desde el citosol hacia la matriz mitocondrial en intercambio con el ATP formado mediante
fosforilación oxidativa dentro de la mitocondria. La fuerza protón motriz generado durante el transporte de
electrones se utiliza para impulsar este intercambio de ATP por ADP y Pi en contra del gradiente, que es
realizado por dos antiportadores como muestra la figura.

Reproducción de las mitocondrias

Las mitocondrias, al igual que los cloroplastos no se sintetizan nunca de novo, siempre surgen por
crecimiento y división de una mitocondria preexistente. Esta división se produce durante todo el ciclo celular
(Interfase y mitosis). Las mitocondrias que envejecen (10 días) se destruyen por autofagia. Es muy probable
que sea un órgano cuyas células son ricas en mitocondrias como ocurre en los riñones, quienes consumen
el 25 % del oxigeno que sale del corazón en la sangre con cada latido. Incluso el número de mitocondrias
que existe en cada célula varía con la actividad celular, de tal modo que en el músculo de un físico culturista
existen más mitocondrias por célula que en las células musculares de un vendedor de seguros.
Esto se debe a que las mitocondrias sufren cambios según la actividad metabólica celular, aumentando su
tamaño y número. Es decir que una célula es expuesta a un estimulo, lo primero que hace es “hinchar” sus
mitocondrias, que al microscopio electrónico aparecen mas voluminosas. Si el estimulo persiste las
mitocondrias se dividen por un mecanismo de fisión binaria merced al cual aparece un surco de
estrangulación en la superficie mitocondrial que se profundiza hasta formar dos mitocondrias hijas.
Aunque en aquellas células que pasan por interfases prolongadas o que no se multiplican, las mitocondrias
envejecen y se degradan por fago lisosomas, el número se mantiene constante debido a que se generan
nuevas mitocondrias.

Algunas proteínas mitocondriales se fabrican en la matriz

La mayor parte de las proteínas de la mitocondrias se generan en el citosol, pero solo unas pocas se
sintetizan en la matriz mitocondrial. La mitocondria tiene adherida a su membrana mitocondrial interna
varias copias de ADN circular, a partir del que se transcriben 13 copias de ARN mensajeros diferentes, 22
tipos diferentes de ARNt y 2 clases de ARNr ( uno para la subunidad menor y otro para la mayor). Todos
estos componentes se encuentran en la matriz mitocondrial. Con aminoácidos que provienen desde el
citosol se forman 13 proteínas, en su mayor parte de la cadena respiratoria: 7 del complejo NADH
deshidrogenasa, una del complejo b-c1, tres del complejo citocromo oxidasa y dos subunidades de la ATP
sintetasa.

Los fosfolípidos de las membranas mitocondriales son provistos por la membrana del retículo
endoplasmático.
La génesis de nuevas mitocondrias requiere que se duplique el área de sus dos membranas, para lo cual
debe sumarse nuevos fosfolípidos a sus bicapas. Estos fosfolípidos son provistos por la membrana del RE.
Para tomarlos del RE, la mitocondria recurre a proteínas citosólicas llamadas intercambiadores que los
sustraen de la m del RE y los descargan en la capa citosólica de la membrana mitocondrial externa. Una
parte de los fosfolípidos pasa a la capa opuesta gracias a un movimiento de “flip flop”. Finalmente el

146
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

traspaso de fosfolípidos de la m externa a la m interna se produce a través de puntos de contacto que se

crean entre ambas membranas para tal fin.

El ADN mitocondrial es diferente al ADN nuclear. El ADN mitocondrial a diferencia del nuclear se
caracteriza por: a) Ser circular, carecer de histonas y poseer varias copias. b) Tener un solo origen de
replicación, c) Ser pequeño, con tan sólo 37 genes, d) Tiene pocas y cortas secuencias que no se
transcriben, e) Genera dos clases de ARNr (12S y 16S) que originan ribosomas con coeficiente de
sedimentación de 55S (procariotas 70S y eucariotas 60S), f) Genera 22 tipos de ARNt (31 son nucleares) g)
Se transcriben sus dos cadenas, h) Tiene 4 codones que difieren de las instrucciones del ADN nuclear. 1)
Las moléculas de ARN se procesan mientras se transcriben. Se transcriben las dos cadenas.

Probablemente las mitocondrias deriven de bacterias aeróbicas.

No solo se parecen a las procariotas por su reproducción, sino por su forma, localización de la cadena
respiratoria en la misma membrana, crestas mitocondriales equivalentes a mesosomas, igual tipo de ADN y
similares ribosomas.
Esto ha llevado a sugerir que las mitocondrias son un producto evolutivo de bacterias aeróbicas. Teoría: se
cree que las primeras células eucariotas eran anaeróbicas y que cuando la atmósfera terrestre se hizo rica
en oxígeno incorporaron en su citoplasma bacterias aeróbicas que, tras sucesivos cambios adaptativos, se
convirtieron en las mitocondrias actuales. La simbiosis le permitió a la célula eucariota aprovechar el
oxígeno atmosférico, por lo que comenzaron a producir una mayor cantidad de energía a partir de la misma
cantidad de alimento. Paralelamente la membrana plasmática quedó eximida de realizar procesos
energéticos y pudo concentrarse en otras actividades, como controlar la transferencia de solutos, etc.

ADN MITOCONDRIAL ADN

NUCLEAR
ESTRUCTURA circular lineal

HISTONAS (proteínas) no tiene si tiene

ORIGEN DE LA único Múltiple

DUPLICACION
TAMAÑO chico grande

GENES 37 50. 000

PARTES SIN INFORMACION pocas muchas

GENES PARA ARNt 22 31

GENES PARA ARNr mas chicos mas grandes

CODIGO GENETICO diferente en 4 codones

SE TRANSCRIBEN las 2 cadenas una cadena

PROCESAMIENTO simultaneo a la posterior a la

trascripción trascripción
COPIAS IGUALES varias dos

147
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Recordemos que
Una forma de transferir energía es a través del agregado de grupo P al ADP para formar ATP: la célula tiene
dos caminos para realizar la fosforilación, fosforilación a nivel de sustrato, una enzima trasfiere un grupo
fosfato desde una molécula orgánica sustrato al ADP. El sustrato es una de las muchas sustancias
producidas a medida que la respiración celular convierte glucosa en CO2.. la reacción ocurre debido a que
el enlace que une el grupo fosfato en la molécula sustrato es menos estable que el nuevo enlace que lo une
en el ATP. Otra es la quimiósmosis, (Mitchel 1978) la célula usa la energía potencial en gradientes de [C]
para fabricar ATP. La teoría de la quimiósmosis se centra en la membrana en la actividad de la ATP
sintetasa, la cual utiliza la energía almacenada en gradientes de [C] de H+ a través de la membrana. (las
células generan la mayor parte de su ATP de esta manera). Dentro de la cadena, las reacciones redox
liberan energía de los electrones que caen cuesta abajo en la serie de transportadores de electrones. A
medida que estas reacciones exergónicas liberan energía, algunas de las proteínas de la cadena utilizan
esta energía para translocar protones a través de la membrana. Este flujo da como resultado un gradiente
en la [C] de H+, la ATP sintetasa utiliza la energía potencial de este gradiente para dirigir la reacción
endergónica que genera ATP a partir de ADP + Pi.
Otra manera de transferir energía es transferir electrones en las reacciones de óxido reducción. Estas
reacciones siempre ocurren juntas, a medida que un material se oxida otro se reduce, los electrones que
una cede otro los capta. En las reacciones redox, la energía es transferida (en los electrones) y el NAD+
actúa como intermediario.

148
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

PEROXISOMAS O MICROCUERPOS.

Todas las células animales (excepto los eritrocitos) y muchas células vegetales poseen Peroxisomas, una
clase de pequeñas organelas que se diferencian de mitocondrias y cloroplastos por: estar limitadas por una
única membrana, sin DNA propio y sin ribosomas, y se semejan por la forma de incorporación de proteínas
y fosfolípidos y se reproducen por división binaria. Son organoides ovalados parecidos a los lisosomas, pero
en menor número y de mayor tamaño. Este organoide subcelular fue el último organoide subceluar descrito.
Fue identificado por primer vez en 1954 en el riñón de un ratón y debido a su función desconocida se le
asignó el nombre de microcuerpo. El término peroxisoma fue asignado a esta organela por De Duve y
Baudhin debido a su papel en la formación y oxidación del peróxido de hidrógeno. En 1976 Lazarow y de
Duve mostraron que también desempeñaban un papel en la oxidación de ácidos grasos y de una amplia
variedad de reacciones.

149
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Microscopía electrónica: están limitados por una membrana algo ondulada. Tienen un contenido granuloso.
Tienen una zona de alta densidad en su interior llamada cristaloide.
Los Peroxisomas presentan varias oxidasas, (urato oxidasa, d-aminoácido oxidasa, otras) enzimas que
utilizan el oxígeno molecular para oxidar sustancias orgánicas en un proceso que forma peróxido de
hidrógeno, también contienen copiosas cantidades de la enzima catalasa, que degrada el peróxido de
hidrógeno para dar agua y oxígeno.

Los Peroxisomas al igual que las mitocondrias son sitios importantes en la utilización del O 2. Una hipótesis
es que los Peroxisomas son vestigios de una organela ancestral primitiva de las células eucariotas. Cuando
el oxigeno producido por las bacterias fotosintéticas comenzó a acumularse en la atmósfera, pudo ser tóxico
para la mayoría de las células y los Peroxisomas pudieron servir para reducir la concentración de oxígeno
intracelular. De acuerdo con este punto de vista el desarrollo posterior de las mitocondrias volvió a los
Peroxisomas obsoletos por que muchas de las mismas reacciones –realizadas en un principio por los
Peroxisomas sin producción de energía - fueron ahora acopladas con la formación de ATP por medio de la
fosforilación oxidativa. ¿Por qué no desaparecieron? – porque los Peroxisomas continuaron con reacciones
que no realizan las mitocondrias

I. Contienen enzimas (OXIDASAS) que utilizan el oxigeno molecular para remover átomos de H de
sustancias orgánicas (d-aminoácido oxidasa, uratooxidasa, alfahidroxilasaoxidasa)

RH2 + O 2 R + H2O2
Siendo RH2 el sustrato oxidable (aminoácidos, cetoácidos, ácido úrico, alantoína, acetil CoA, ácido glicolico,
ácido glioxílico, enoil CoA, etc.)

II. La catalasa utiliza al H2O2 generado por otras enzimas para oxidar sustratos (fenoles, ácido fórmico,
formaldehído, etanol) por reacciones de Peroxidación. Esto ocurre en células hepáticas, riñón, procesos
de destoxificación de moléculas tóxicas que entran al torrente sanguíneo ( 25% de etanol que bebe es
oxidado a acetaldehído de esta manera).

H2O2 + TH2 catalasa 2 H2O + T

III. Cuando se acumula H2O2 en la célula, la catalasa lo convierte en agua (neutralización)

H2O2 catalasa 2 H2O + O2

IV. Los radicales libres, O2 o aniones súper óxidos se originan por oxidación de sustratos, y deben ser
neutralizados porque destruyen a las proteínas, membrana celular, genes, pudiendo ser responsables
de ciertos tipos de cáncer y envejecimiento celular.
Una enzima la súper oxido dismutasa se encarga de eliminarlos mediante la siguiente reacción:
2 O 2 + 2 H+ H2 O 2 + O 2
A su turno este peroxido de hidrógeno pasa al peroxisoma donde es convertido a agua y oxígeno por acción
de la catalasa
Catalasa
2H2O2 2 H2O + O2
peroxidasa
H2O2 + 2 H+ 2H2O (no libera oxígeno)

150
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

PARTE 9
EL NÚCLEO

La existencia del núcleo es la característica principal que diferencia las células

eucariotas de las células procariotas. Por contener el genoma celular, el núcleo sirve de
almacén de la información genética y como centro de control celular.
El DNA de la célula eucariota se halla confinado en el núcleo, que ocupa alrededor del
10 % del volumen celular. El núcleo está delimitado por una envoltura nuclear de doble
membrana concéntrica, perforada por poros nucleares, a través de los cuales se produce el
transporte activo de determinadas moléculas entre el núcleo y el citoplasma. La envoltura
nuclear está en contacto directo con la membrana del R.E y se mantiene por dos redes de
filamentos intermedios, una denominada lámina nuclear formada por una fina lámina que
recubre la membrana nuclear interna, y otra que rodea la membrana nuclear externa.
Como ocurre con los procariotas actuales, la célula eucariota ancestral probablemente
carecía de núcleo, solo podemos especular que apareció como un compartimiento nuclear
separado que aísla al DNA del citoplasma

Características del núcleo

*Constancia: todas las células eucariotas tienen núcleo. Excepción, los glóbulos rojos
maduros de mamíferos.
*Forma: esférica, aplanado, oval, irregular, lobulado.
*Tamaño: constante para cada tipo de célula. Se expresa por medio de la relación de
tamaño con el citoplasma, o relación núcleo citoplasmática, 1:4 o 1:5 (un volumen de núcleo
en 4 o 5 volúmenes de citoplasma) En patología hay ruptura de esta relación, por ejemplo: en
células cancerosa se da una relación 1:2.
*Número: generalmente hay uno por célula (mononucleados) pero hay binucleadas,
como hepatocitos y condrocitos, o polinucleadas como las células musculares esqueléticas.
Las células multinucleadas pueden ser:
1.- plasmodios: masa multinucleada originada por endomitosis (cariocinesis sin
citocinesis). Se divide el núcleo de la célula sin que se divida el citoplasma, por lo cual la célula
tiene primero dos núcleos, luego cuatro…. Muscular, osteoclastos
2.- sincicios: masa multinucleada originada por la unión de células. Son varias células
que tiene un núcleo cada una y al unirse queda formada una célula con varios núcleos. Células
que se fusionan asociadas con infecciones virales. Sida, por ejemplo, son inducidas cuando la
GP 120 del HIV se ligan con la CD de las T4 vecinas no infectadas.
*Posición: central o polarizado.

151
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

¿Cuáles son las razones de la existencia del núcleo en células eucariotas?

Dos características especiales de las células eucariotas nos sugieren posibles
explicaciones. Una es la existencia del citoesqueleto compuesto por microtúbulos y
microfilamentos de actina responsables del movimiento de las células. Las bacterias, cuyo DNA
se encuentra en contacto directo con el citoplasma, carecen de dichos filamentos y se
desplazan mediante estructuras externas como flagelos. Por ello, una función de la envoltura
nuclear sería la de proteger las largas y frágiles moléculas de DNA de las fuerzas mecánicas
generadas por los filamentos citoplasmáticos.
Una segunda característica diferencial de las células eucariotas es la existencia de un
procesamiento del RNA previo a la traducción en proteínas. En las células procariotas la
síntesis de RNA (transcripción) y la síntesis de proteínas (traducción) tienen lugar
simultáneamente: los ribosomas traducen el extremo 5´ de la molécula de RNA mientras
todavía se está transcribiendo su extremo 3´. Para ello existen pocas oportunidades para
modificar el RNA antes de ser traducido a proteína. En eucariotas, por el contrario, la
transcripción (nuclear) está separada tanto espacial como temporalmente de la traducción
(citosol). Los transcriptos de RNA del núcleo se empaquetan en complejos ribonucleoproteicos
y son sometidos a un proceso de maduración (splicing) de RNA, en el cual se eliminan algunas
zonas de secuencia de nucleótidos. Las proteínas de empaquetamiento son desprendidas
cuando ha finalizado la maduración del RNA y éste es transportado desde el núcleo al citosol,
donde los ribosomas empiezan a traducir el RNA a proteínas. El proceso de maduración el RNA
es una etapa intermedia importante en la transmisión de la información genética en
eucariontes. Esto podría explicar porque las células eucariotas tienen un núcleo en el que se
pueda desarrollar la maduración del RNA en ausencia de interferencias par parte de los
ribosomas.

152
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

CARIOTECA O ENVOLTURA NUCLEAR

La envoltura nuclear encierra al DNA y define al compartimento nuclear. Está formado por
dos membranas concéntricas unidas a nivel de los poros, que se continúan con el RE
separadas por un espacio de 100 a 150 A llamado espacio perinuclear. Es la barrera entre el
núcleo y el citoplasma, y los poros nucleares son las compuertas para cruzar esta barrera.
Microscopia óptica:
La envoltura nuclear sola no se ve, porque está por debajo del límite de resolución de este
microscopio. Sin embargo se ve una línea por el agregado de ciertos componentes intra y
extranucleares que engrosan la envoltura nuclear. Por dentro del núcleo la membrana nuclear
esta engrosada por la cromatina que se encuentra adosada a esta. Por su parte citoplasmática
esta engrosada por la presencia de ribosomas que se encuentran solo en la membrana del lado
citoplasmático.

Diferencias entre las membranas de la envoltura nuclear

La composición de ambas membranas es diferente, la membrana interna contiene
proteínas que actúan como lugares de unión de la lámina nuclear que la soporta. La membrana
externa es similar a la del RE, generalmente tapizada de ribosomas (encargados de la síntesis
de proteínas). Las proteínas fabricadas por los ribosomas son transportadas al espacio
perinuclear el cual es continuo con la luz del RE.

Tráfico de moléculas desde y hacia el núcleo

Como otras membranas celulares, la membrana nuclear es una Bicapa fosfolipídica,
permeable sólo a pequeñas moléculas apolares. Existe un tráfico bidireccional continuo entre el
citosol y el núcleo a través de los complejos del poro nuclear, siendo los únicos canales que
permiten el paso de pequeñas moléculas polares y de macromoléculas a través de la envuelta
nuclear.
1. del citoplasma al núcleo: La gran cantidad de proteínas que actúan en el núcleo –
incluidas las histonas, las DNA polimerasa y RNA polimerasa- son importadas de forma
selectiva del citosol –donde se fabrican- hacia el compartimiento nuclear.
2. del núcleo al citoplasma: Al mismo tiempo los ARNm y ARNt son sintetizados en el
compartimiento nuclear y luego exportados al citosol (transporte selectivo).
3. En algunos casos el transporte es complejo: por ejemplo, las proteínas de los
ribosomas son fabricadas en el citosol, importadas al núcleo, donde se ensamblan con el ARN
ribosómico recién fabricado formando partículas, las cuales luego son exportadas nuevamente
al citosol como parte de las subunidades ribosómicas, cada uno de estos pasos implica
transporte selectivo a través de la envoltura nuclear.
La lámina nuclear
Es una envoltura formada por filamentos intermedios dispuestos en las más variadas
direcciones formando una red bidimensional (enrejado). Su espesor es de 10 a 20 nm, se halla
interrumpida sólo a la altura de los poros. Sus filamentos intermedios compuestos por una
proteína llamada lámina (o lamininas) se encuentran por dentro de la envoltura nuclear – o
sea dentro del núcleo- en relación con la membrana nuclear interna.
Sirve para:
 Mantener la forma del núcleo
 Es parte del citoesqueleto.
 Sirve para mantener firme a los elementos que forman el complejo del poro.
 Interacciona con la cromatina proporcionando una unión estructural entre el DNA y la
envoltura nuclear.

153
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Armado y desarmado de la envoltura nuclear

Cuando el núcleo se desorganiza durante la mitosis: la lámina nuclear se despolimeriza, al
menos parcialmente, como consecuencia de la fosforilación de las proteínas lámina en el inicio
de la mitosis, y se forman pequeñas vesículas.

Al mismo tiempo los poros nucleares se desorganizan en sus diversos componentes. La

despolimerización de la lamina nuclear es requisito previo para que la envoltura nuclear se
rompa formando vesículas de membrana, las cuales con el contenido nuclear se dispersan por
el citosol.
La reorganización de la lámina nuclear tiene lugar cuando las proteínas láminas son
desfosforiladas, y como resultado de ello repolimerizan en la superficie de los cromosomas,
entonces la lamina nuclear reorganizada une las vesículas de la envoltura nuclear, las cuales
se fusionan entre si formando de nuevo una envoltura nuclear. Se reorganizan los complejos
del poro.
Entonces la clave de todo este proceso de armado y desarmado del núcleo está en la
lámina nuclear y podría ser la fosforilación y desfosforilación de las proteínas láminas.

Los poros nucleares atraviesan la envoltura nuclear de todas las células

eucariotas
La envoltura nuclear en todas las
células eucariontes es perforada por los
poros nucleares. Cada poro está
constituido por una gran estructura
discoidal conocida como complejo del
poro nuclear (3000 a 4000 poros,
dependiendo el Nº de la transcripción de
ARN) compuesto por mas de 100 proteínas
diferentes ordenadas según una simetría
octogonal, se comportan como si tuvieran
90nm de diámetro. Sin embargo las
proteínas grandes y los complejos
ribonucleoproteicos, de hasta 25 nm de
diámetro, no pueden difundir y son

154
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

llevados por transporte activo a/t del obturador central del NPC
Cada complejo del poro presenta:
 Uno o mas canales acuosos abiertos a través de los cuales pueden difundir
pasivamente las moléculas solubles en agua que son mas pequeñas que un determinado
tamaño (las moléculas pequeñas de 5000 daltons difunden rápidamente, de 17000 daltons
tardan dos minutos en equilibrarse entre el citoplasma y el núcleo, una proteínas globular
mayor a 60000 daltons es incapaz de entrar al núcleo
 Un componente columnar que forma el
grueso del poro. Rodeando al canal hay ocho columnas
proteicas que atraviesan la envoltura nuclear de lado a
lado. En su extremo citosólico las columnas se unen
formando un anillo externo. Un anillo similar se forma
en el lado del poro que da al interior del núcleo a nivel de
la membrana interna. La lámina nuclear (sus filamentos
intermedios) se
hallan ligados al
complejo del poro
por medio del anillo
interno y le
confieren rigidez.
 Un componente anular que extiende radios
hacia el centro del poro. Dado que se acortan y se
alargan, permiten que el complejo del poro se
comporte como un diafragma.
 Un componente luminal que está
formado por una gran glucoproteína de
transmembrana que se cree participa en el anclaje del complejo del poro a la membrana
nuclear (proteína de anclaje). Cada proteína de anclaje se adhiere a una de las columnas,
atraviesa la membrana de la envoltura y su extremo opuesto sobresale en el espacio
perinuclear.
 De los anillos internos y externos nacen fibrillas que se proyectan hacia el
citosol y al interior del núcleo. En la parte nuclear las fibrillas convergen formando una
especie de jaula. Estas fibrillas tienen moléculas de proteínas llamadas nucleosporina que
actúan en el transporte de moléculas.

155
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Funcionamiento del poro

1. Pasaje por difusión por el canal acuoso
Las moléculas de menos de 5000 Dalton entran por difusión pasiva, directamente a través
de éstos poros, en forma rápida, o sea que la envoltura nuclear es permeable a moléculas de
menos de 5000 Dalton. Una proteína de 17000 Dalton por ej. le lleva dos minutos equilibrarse
con el núcleo , es decir que tarda más ,una más grande de 44000 Dalton tarda 30 minutos en
equilibrarse con el núcleo y una proteína de más de 60000 Dalton no puede entrar, es decir
que el núcleo es permeable a moléculas de menos de 5000 Dalton e impermeable a las
moléculas mayores de 60000.
2. Entrada regulada de macromoléculas
Se realiza por el método descripto en la hipótesis de la señal. Una proteína que tiene que
ir al núcleo debe ser sintetizada con la señal específica que se llama NSL (señal de localización
nuclear). Esta es un péptido y se une con la importina alfa, proteína que está en citosol. Esta
se une con la importina beta la cual se une con las nucleoporinas de las fibrillas, pasando de
una nucleoporina a otra, hasta entrar al núcleo.

3. Salida regulada de macromoléculas

Se realiza a la inversa de la entrada por el mismo mecanismo, pero la señal de salida se
llama NES (señal de exportación nuclear

Los receptores de señales de exportación nuclear transportan proteínas

Según el modelo actual, la NES promueve la exportación de una proteína “carga” desde el
núcleo, mediante la unión a un receptor de exportación nuclear, una proteína llamada
exportina 1. La exportación nuclear también requiere de una tercera proteína, la Ran , una
GTPasa pequeña que existe en dos conformaciones, una forma complejo con el GTP y la otra lo
hace con el GDP. La interacción simultánea de la exportina 1 con la Ran-GTP y la NES de una
proteína carga en el núcleo forma un complejo de carga. La interacción de un complejo de
carga con proteínas en el complejo del poro nuclear trae como consecuencia el movimiento del
primero a/t del segundo por mecanismos aun desconocidos.
Una vez que el complejo Ran-
GTP/exportina1/proteína carga llega
al citosol, la proteína activadora
de Ran-GTPasa (RanGAP)
estimula a la Ran para que hidrolice
el GTP que tiene unido y lo
transforme en GDP. El cambio de
conformación de Ran resultante
causa la disociación del complejo de
carga, lo que deja libre la proteína
carga poseedora de NES. La
exportina 1 y la Ran-GDP libres son
transportadas de regreso al núcleo,
en donde un factor de intercambio
de Ran-nucleótido, llamado RCC1,
hace que la Ran libere su GDP y se
vuelva a unir a un GTP. La Ran-GTP
regenerada y la exportina 1 entonces
pueden transportar otra proteína de
carga con NES hacia el citosol.

156
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Los receptores de señales de localización nuclear transportan proteínas hacia el

núcleo
Todas las proteínas que hay
en el núcleo se sintetizan en el
citosol y son importadas de
manera activa por el núcleo, por
ej. histonas, láminas, DNA
polimerasa, RNA polimerasa,
factores de replicación y de
transcripción, etc, las cuales
contienen una señal de
localización nuclear NLS. El
modelo para la importación de
proteínas “carga· citosólicas con
una NSL comparativamente es
semejante al de exportación de
proteínas. Se realiza por el
método de la hipótesis señal. Una
proteína destinada al núcleo,
producida en los ribosomas del
citosol, emanan de éstos con un
NLS, secuencia específica de
unos pocos aminoácidos, que es reconocida por la importina en el citoplasma y la NLS se
une a la importina . La importina interactúa con los componentes de NPC y transloca el
complejo hacia el nucleoplasma por un mecanismo poco conocido que requiere la hidrólisis del
ATP.
En el nucleoplasma, la Ran-GTP interacciona con la importina y causa la disociación del
complejo de caga con lo cual la proteína carga queda libre en el nucleoplasma. Para permitir
otro ciclo de importación, la importina y el complejo Ran-GTP importina son transportados
de regreso al citoplasma. La proteína activadora de Ran-GTP (Ran-GAP) en el citoplasma
estimula la conversión de Ran-GTP en Ran-GDP, lo cual produce un cambio en la conformación
en Ran que hace que se disocie de la importina . Ésta, ahora libre puede interactuar con la
importina y una nueva proteína carga portadora de NLS, con lo que se inicia una nueva ronda
de importación nuclear.
A diferencia de las proteínas que ingresan a mitocondrias y peroxisomas, las destinadas al
núcleo se pliegan apenas surgen de los ribosomas y en éste estado atraviesan los poros de las
envolturas nucleares.
Algunas proteínas, como las reguladoras de la actividad de los genes, debido a que tienen
que sintetizarse con cierta antelación, una vez emanada de los ribosomas son retenidas en el
citosol hasta la llegada de señales que les ordenen ingresar al núcleo. La retención tiene lugar
al unírseles proteínas chaperonas de la familia de las hsp 90. Las señales provocan la
separación de las chaperonas, tras lo cual las proteínas ingresan al núcleo.

157
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

ACIDOS NUCLEICOS
Introducción
En los primeros 40 años del siglo XX se pensaba que el ADN tenía pocas posibilidades de
ser una molécula importante y que llevara la información genética debido a que se consideraba
que el ADN solamente tenía una repetición de miles y millones de veces de secuencias de los
nucleótidos Adenina, Guanina, Citosina y Timina en ese orden. Actualmente, sin embargo
sabemos que la molécula de ADN es enormemente larga, no ramificada, lineal, que tiene
varios millones de nucleótidos (100 a 500 millones) y que están dispuestos en un orden
irregular pero no al azar sino que específico para cada individuo y que la información genética
está contenida en ese orden específico, lineal de los nucleótidos del ADN. Cada molécula de
ADN está empaquetada en un cromosoma asociada a proteínas. El total de la información
genética que se encuentra en los 46 cromosomas se denomina GENOMA.

COMPOSICIÓN QUÍMICA:
Están formados por los siguientes componentes
1- HIDRATO DE CARBONO: es una pentosa, que puede ser la ribosa (ARN) o la
desoxirribosa (ADN)

2- BASES CICLICAS NITROGENADAS:

a-púricas: tienen un anillo hexagonal y otro pentagonal. Tamaño 7 A
Adenina
Guanina
b- pirimídicas: tienen sólo un anillo hexagonal. Tamaño 4 A
Citosina
Timina
Uracilo

3- ÁCIDO FOSFÓRICO:

158
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

DIFERENCIA QUÍMICA ENTRE EL ADN Y EL ARN:

ADN ARN
HIDRATO DE CARBONO DESOXIRIBOSA RIBOSA

BASES CICLICAS no tiene uracilo no tiene timina

Los componentes químicos citados se unen formando los siguientes compuestos:

1- NUCLEÓSIDO: es el hidrato de carbono unido a la base nitrogenada.

Ejemplos: adenosina (adenina más ribosa)
Guanosina (guanina más ribosa)
Citidina (citosina más ribosa)
Uridina (uracilo más ribosa)
Se le agrega el prefijo desoxi cuando el azúcar es la desoxirribosa.

2- NUCLEÓTIDO: es un nucleósido más ácido fosfórico.

Funciones:
ATP (adenosintrifosfato)
ADP (adenosindifosfato)
AMP (adenosinmonofosfato)
AMP cíclico 5'3' (segundo mensajero del sistema hormonal)
NAD (nicotinamina - adenina - dinucleótido)
FAD (flavina - adenina - dinucleótido)

3- POLINUCLEÓTIDO:
Es la unión de muchos nucleótidos, que se efectúa por medio del ácido fosfórico, el cual,
recordemos, establece uniones sólo con el carbono 3´ y el 5´de la pentosa. Un polinucleótido
con determinadas características es un ácido nucleico
ÁCIDO RIBONUCLEICO (ARN)
Es un sólo polinucleótido que se caracteriza por tener ribosa y uracilo en lugar de timina.
Existen varios tipos, como el ARN ribosómico, el ARN de transferencia y el ARN mensajero.
Veremos algunas características, como ilustración

159
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

TIPOS DE ARN FUNDAMENTALES

ARN MENSAJERO RIBOSÓMICO TRANSFERENCIA

PORCENTAJE 5% 80 % 15 %
DEL TOTAL
NÚMERO DE hasta 5.000 de 120 a 5.000 70 a 90
NUCLEÓTIDOS

ÁCIDO DESOXIRIBONUCLEICO (ADN)

Es un doble polinucleótido, con desoxirribosa y timina en lugar de ribosa y Uracilo
Resumen de la historia del descubrimiento del ADN
El descubrimiento de la estructura y composición química de la molécula que transporta la
información a la descendencia ha sido uno de los grandes logros alcanzados en el desarrollo
de la investigación científica y en la propia historia de la biología. El modelo de doble hélice del
ADN, propuesto por Watson y Crick en 1953, abrió el camino hacia la comprensión de cómo
podía desempeñar esta molécula sus funciones: replicación, almacenaje de información,
expresión de esta información y variación por mutación . Desde entonces se ha
registrado un gran avance en el campo de la biología molecular, en un intento de explicar
cómo interactúa el ADN con los demás componentes de la célula viva para expresar su
información.
Las investigaciones que llevaron al descubrimiento de los ácidos nucleicos fueron reali-
zadas por F. Miescher (1844-95), quien aisló núcleos de células del pus, procedentes de
vendajes quirúrgicos, y demostró que contenían un extraño compuesto al que denomino
nucleina. Más delante demostró la existencia de unos compuestos en las cabezas de los
espermatozoides del salmón, los ácidos nucleicos, unidos a unas proteínas, las protaminas.
En 1884 Kossel reportó el aislamiento de un componente extraído por tratamiento de
acido nucleico: las histonas, recién en 1990 se reconoció su papel como regulador.
A comienzos de este siglo se descartó que los ácidos nucleicos pudieran transportar la
información genética. Ello se debía a su composición, en apariencia simple. Se creía que
estaban formados por las cuatro bases, dispuestas de una forma repetitiva (teoría de los
tetranucleótidos de Levene)- en la década de los 40, el trabajo de Edwin Chargaff hizo
comprender que la hipótesis de Levene era incorrecta.
En los años veinte, los científicos distinguían dos tipos de ácidos nucleicos, uno que se
obtenía del núcleo de las células animales y otro que provenía del núcleo de las células
vegetales.
La primera evidencia de que disponemos sobre la naturaleza del material hereditario se
la debemos a [Link], médico norteamericano que estudiaba, a finales de los años treinta,
las causas que producían la neumonía , enfermedad respiratoria grave, en ese entonces
,provocada por una infección de la bacteria Streptoccocus pneumoniae. Aisló dos cepas (tipos)
bacterianas, una virulenta (S), con cápsula y otra no virulenta, sin cápsula, llamada R. Al
inyectar bacterias S a ratones, estos enfermaban y morían, ya que las bacterias, protegidas
por su cápsula, podían reproducirse e infectar. Al estudiar los cadáveres de los ratones,
recuperó bacterias S. Por otra parte, tras matar bacterias S por medio del calor, las inyectó en
ratones que sobrevivieron. Por último, se inyectaba a los ratones bacterias del tipo R, los
ratones sobrevivían, pues los sistemas de defensa de estos destruían las bacterias, ya que no
poseían cápsula protectora. En busca de un mejor conocimiento del proceso infeccioso, Griffith
realizo una prueba que resulto decisiva: inyectó una mezcla de bacterias S muertas y de
bacterias R vivas; los ratones enfermaron y murieron, recuperándose las bacterias S
vivas. Que había ocurrido? Griffith no pudo explicarlo por completo, aunque concluyó que
alguna sustancia de las bacterias S, resistente al calor, había transformado a las bacterias R ,
convirtiéndolas en bacterias S virulentas .

160
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Unos años más tarde, Avery y sus colaboradores encontraron la explicación a este
fenómeno. La transformación tenía lugar cuando se añadía ADN de bacterias S al medio de
cultivo de las bacterias R De ese modo , las moléculas de ADN , libres en el medio , podían
entrar en contacto con la pared bacteriana , penetrar en su interior y , mediante un proceso de
entrecruzamiento , sustituir la información genética de la bacteria receptora . A partir de
ese momento, la bacteria, con la nueva información, fabricaba la cápsula protectora,
convirtiéndose en virulenta y transmitiendo dicha información a sus descendientes. El
investigador observa que un fragmento de ADN puede contener la información genética
necesaria para realizar una función, fabricar la cápsula, ya que previamente la bacteria
receptora no poseía esa información. La experiencia de Avery fue la primera prueba expe-
rimental de que la molécula química portadora de la información hereditaria era el ADN. No
obstante no se comprendió la importancia del descubrimiento, dado que el conocimiento que
se tenía de la estructura del ADN era incompleto. Aunque se pensó que podía ser el ADN el
material hereditario en bacterias y virus, su aparente simplicidad podía no ser suficiente para
los seres vivos superiores.
En 1952, Hershey y Chase demostraron que el ADN era el material genético de un virus
bacteriófago (T2). Denominado a menudo fago, este virus consta de una cubierta proteica que
envuelve al núcleo de DNA. Resumiendo: el fago entra en contacto con la célula bacteriana en
la que introduce alguno de sus componentes. Después de la infección lítica, la información
vírica recluta la maquinaria celular del huésped para llevar a cabo su reproducción. En un
período de tiempo razonablemente corto, se ensamblan muchos fagos nuevos, la célula
bacteriana se lisa y se liberan los hijos del virus. Parecía que algún componente molecular del
fago, el DNA y/o la proteína entraba en la célula bacteriana y dirigía la reproducción vírica.
¿Cuál de ellos era?
Para poder seguir los componentes moleculares del fago durante la infección, Hershey y
Chase utilizaron radioisótopos 32P y 35S para marcar el DNA y las proteínas respectivamente.
Pudieron demostrar, tras detectar los radioisótopos, que la mayoría del DNA marcado con 32P
se había transferido al interior de la bacteria después de la adsorción; por otro lado, la mayoría
de la proteína marcada con 32S permanecía en las cubiertas vacías de los fagos fuera de la
célula bacteriana.

La doble hélice de ADN: el modelo de Watson y Crick

A comienzos de la década de los cincuenta ya se conocía la composición del ADN. Los
trabajos de Chargaff y colaboradores habían permitido llegar a las siguientes conclusiones: La
proporción relativa de las cuatro bases presenta una gran
variabilidad entre las especies. Sin embargo, estas proporciones son
similares entre individuos de la misma especie. La cantidad de
adenina es igual a la de timina y la de guanina a la de citosina. Esta
relación, A=T , G=C , se denomina principio de equivalencia de
las bases . Como consecuencia de lo anterior, la cantidad de
purinas es igual a la de pirimidinas.
En esta época, Wilkins y colaboradores utilizaban métodos de
difracción de rayos X para determinar la estructura física del ADN.
Estos métodos se basan en la propiedad que tienen los átomos de
cualquier sustancia química de desviar un haz de rayos X. La
estructura de la sustancia es la que establece la desviación, que
resulta característica para ella. Al colocar una placa radiográfica
detrás de una sustancia y bombardearla con rayos X, los haces
derivados impresionan la emulsión fotográfica produciendo puntos y
líneas característicos. Cada punto representa el rayo desviado por
un grupo atómico específico. Midiendo distancias y ángulos, se
pueden calcular las posiciones relativas de los átomos en la
molécula.
De estos estudios se dedujeron algunas de las propiedades que debía cumplir la
estructura del ADN: La molécula debe ser larga y delgada, con un diámetro constante de 2 nm

161
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

. Debe poseer una estructura repetitiva, con dos tipos de repeticiones, una cada O, 34 nm y
otra cada 3,4 nm......Su estructura ha de ser helicoidal. Con todos estos datos y conociendo,
como poco antes habían demostrado Pauling y colaboradores, que muchas proteínas poseían
una estructura secundaria en doble hélice estabilizada mediante puentes de hidrógeno, Watson
y Crick propusieron en 1953 que la estructura del ADN era una doble hélice.

Estructura primaria del DNA: es la fórmula química

Estructura secundaria : modelo de Watson - Crick

El ADN está formado por dos largas cadenas de polinucleótidos enfrentadas y

paralelas.
Cada nucleósido está dispuesto en un plano perpendicular a la cadena
polinucleotìdica.
Ambas cadenas están unidas por puentes de hidrógeno doble o triple entre las bases
nitrogenadas que se enfrentan o aparean. El puente de H es una unión débil que puede rom-
perse fácilmente
El apareamiento es específico: siempre una base púrica se aparea con una base
pirimidina, ya que la distancia disponible para aparearse es fija (11 A). El apareamiento
también es específico según el número de puentes de H que puede establecer cada base.
Adenina : establece dos puentes-Timina : dos puentes
Citosina : tres puentes - Guanina : tres puentes
Por lo tanto las bases se aparean siempre de la siguiente manera :

Adenina con Timina

Citosina con Guanina

Esta doble cadena se encuentra formando un doble helicoide alrededor de un eje

imaginario. Cada vuelta del helicoide tiene 34 A y contiene 10 nucleótidos, por lo tanto cada
nucleótido ocupa 3,4 A
La mayor parte del ADN de una célula está enrollado hacia la
derecha, llamándose B-ADN , pero una parte está enrollada hacia
la izquierda , denominándose Z-ADN (por zig-zag) , formando
una estructura más larga y delgada que el B-ADN.
El B-ADN es más estable y por ende menos susceptible a
mutaciones y agentes cancerígenos.
El Z-ADN está más expuesto y se supone que tanto las
mutaciones como los agentes productores de cáncer actuarían
con más facilidad en ese sector de la molécula. También se
relaciona está zona de ADN con regiones inactivas del
cromosoma.
RESUMIENDO: DIFERENCIAS ENTRE B-ADN Y Z-ADN
DIFERENCIA B-ADN Z-ADN
ENROLLAMIENTO derecha izquierda
CANTIDAD mayor menor
ESTABILIDAD mayor menor

162
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

También existe una estructura del ADN llamada A-ADN que es artificial y se obtiene por
deshidratación de la forma B-ADN , pero se cree que las zonas de ARN de doble cadena , como
ciertas zonas de la molécula del ARNt y el ARNm , tendrían una estructura tipo A. Se
caracteriza por que los planos de los pares de bases están desplazados unos 20 grados con
respecto al eje, y el giro completo se produce cada 28 A en lugar de 34.
El cociente entre A+T/C+G es constante para cada especie y tipo celular. Esto se
denomina regla de Chargraff.
En 1952 la comunidad científica aceptó la idea de que los genes están constituidos por
DNA, esto dio respuestas a una pregunta de gran importancia pero no ayudó gran cosa a
explicar como funciona una molécula de ADN dentro de la célula. Para ello es indispensable
conocer como está constituida dicha molécula.

Características del material genético

El material genético presenta varias características: replicación, almacenaje de
información, expresión de esta información y variación por mutación. La “replicación”
del material genético es una de las facetas del ciclo celular, una propiedad fundamental de
todos los organismos vivos. Una vez que el material genético se ha replicado, se debe repartir
equitativamente en las células hijas. En la formación de los gametos, el material genético se
replica y se reparte de manera que cada célula recibe sólo la mitad de la cantidad original de
material genético. Este proceso recibe el nombre de meiosis.
Watson y Crick propusieron un modelo de replicación semiconservativa. Comparándolo
con los otros dos modelos o hipótesis propuestas:

La característica “almacenaje” debe verse como una información genética en la que

están depositadas todas las características hereditarias de un organismo. Sin embargo, esta
información puede o no expresarse. Está claro que, aunque la mayoría de las células contienen
un juego completo de DNA, en cualquier momento dado expresan sólo una parte de su
potencial genético. Por ejemplo: en vertebrados, las células epiteliales pueden tener los genes
de la melanina activos pero nunca activan los de la hemoglobina; las células digestivas activan
muchos genes específicos para su función, pero no activan los de la melanina. El lenguaje
químico del material genético debe ser capaz de almacenar esta información y lo hace en una
determinada secuencia de bases nitrogenadas.
La “expresión de la información genética almacenada es un proceso complejo y base
para el concepto de flujo de información en la célula.
Cada tipo de mRNA es el producto de un gen específico y dirige la síntesis de una proteína
diferente. La traducción se realiza en unión con los ribosomas, que contienen rRNA. En ella
participa el tRNA, que actúa como adaptador para convertir la información química del mRNA
en los aminoácidos que forman las proteínas.
El material genético es también origen de nueva variabilidad para los organismos por el
proceso de mutación. Si ocurre una mutación –un cambio en la composición química del
DNA-, la alteración se reflejará en la transcripción y en la traducción, afectando a menudo
a la proteína especificada. Si una mutación está presente en los gametos, ésta pasará a las
generaciones futuras y, con el tiempo, puede extenderse a la población. La variación
proporciona la materia prima para la evolución.

163
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

166
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Organización y secuenciación de los genomas celulares

Una vez que se comprendió que el DNA alberga la información genética fue muy
importante determinar como se organiza el DNA en genes y como estas unidades básicas de la
función genética se organizan en cromosomas.
Básicamente ¿cómo se organiza el material genético para formar el genoma de los
organismos?

En genética de eucariontes ¿cómo el DNA se organiza con proteínas para formara la

cromatina? ¿Cómo las fibras de cromatina característica de la Interfase se condensan en
estructuras cromosomicas visibles durante la mitosis y la meiosis?
Los genomas de la mayoría de los eucariontes son grandes y más complejos que los de
procariotas. Sin embargo, el tamaño del genoma en muchos eucariontes no parecer estar
relacionado con la complejidad genética. Por ejemplo, los genomas de las salamandras y lirios
contienen diez veces más cantidad de ADN que la encontrada en el genoma humano, y estos
organismos no son diez veces mas complejos que los humanos.
Esta aparente paradoja se resolvió con el descubrimiento de que los genomas de la
mayoría de las células eucariotas contienen no solo genes funcionales sin también grandes
cantidades de secuencias de ADN que no codifican proteínas. La diferencia de tamaños entre
los genomas de la salamandra y del hombre refleja grandes cantidades de ADN no codificante,
en lugar de más genes en el genoma de la salamandra.
Los genes no están estrechamente empaquetados. Además una porción considerable de
muchos genes eucarióticos poseen secuencias de DNA no codificantes llamadas intrones y
otras secuencias que no forman parte del transcripto final de RNA
En términos generales se define a un gen como una secuencia completa de ADN necesaria
para la síntesis de un polipéptido funcional. Si bien la mayoría de los genes se transcriben en
mARN codificadores de proteínas, se sabe que algunas secuencias de DNA se transcriben en
tARN y rARN por lo tanto se lo puede definir como un segmento de DNA o una secuencia de
nucleótidos de DNA que codifica para un ARN funcional o un producto funcional.

167
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Organización del DNA celular en cromatina

Cantidad de ADN: Sabemos que el ADN es un polímero lineal de millones de nucleótidos
organizados siguiendo una secuencia específica no al azar y que la información genética está
contenida en dicha secuencia. El genoma haploide humano contiene 3 x 10 9 pb en 24
cromosomas (22 autosomas y 2 cromosomas sexuales) o sea 24 moléculas de ADN diferentes,
cada una de las cuales contiene entre 50 a 250 x 106 p b. Cada molécula de ADN cuando está
desenrollada puede medir entre 1,7 a 8 cm de largo. En organismos diploides (2n) cuando
tiene dos copias de cada cromosoma, uno heredado del padre y otro de la madre, con el ser
humano 46 cromosomas, 6 x 10 9 p b.
El DNA genómico de las bacterias y los eucariontes debe estar muy compactado para
caber dentro de la célula.
Los experimentos de reasociación reconocen tres fracciones principales de DNA
eucarionte.
A través de la técnica de Reasociación (se separan por calor las cadenas complementarias
de fragmentos de ADN y posteriormente se reasocian por enfriamiento), se pudo demostrar
que determinados fragmentos se reasocian mas rápido que otros. Esto indica secuencias
nucleotídicas repetidas – DNA repetido.
Alrededor del 57 % del DNA de mamíferos se reasocia a baja velocidad lo que
indica que está formado, en su mayor parte, por DNA de copia única. De acuerdo con la
genética de Mendel, el conjunto de DNA haploide sólo contiene una copia de cada gen; en
consecuencia, es de esperar que la fracción de DNA de copia única contenga la mayoría de
los genes codificadores de mRNA. Sin embargo, la gran mayoría del DNA de copia única del
genoma de mamíferos es DNA no codificador ubicado entre genes e intrones. En
apariencia, solo una pequeña fracción del DNA total de seres humanos, del orden del 5 %,
realmente codifica proteínas o moléculas de RNA funcional. El resto de DNA de copia única,
que en la actualidad no tiene función conocida, salvo el de separar secuencias de DNA
funcional, se denomina DNA espaciador.
Otro 25 – 40 % del DNA de mamíferos se reasocia a una velocidad intermedia.
Este DNA repetido llamado DNA con repeticiones moderadas o DNA de repetición
intermedia, se distribuye por todo el genoma de mamíferos. Dado que estas secuencias se
pueden copiar y reinsertar en nuevos sitios del genoma, se denominan elementos de DNA
móvil los elementos de DNA móvil que se transponen a nuevos sitios directamente como
DNA se denominan transposones, los que primero se transcriben a una copia de RNA de
elementos se denominan retrotransposones. Esta categoría incluye en algunos casos genes
funcionales presentes en múltiples copias, por ejemplo muchas copias de genes que
codifican rRNA 5,8; 18 y 28 S en humanos están agrupados en el brazo p de los
cromosomas 13, 14, 15, 21 y 22. los genes que codifican ARNr 5S aparecen agrupados en
el extremo terminal del brazo p del cromosoma 1. Los genes que codifican las histonas
están repetidos en tandem.
Alrededor del 10 – 15 % del DNA de mamíferos se reasocia a una velocidad muy
grande, este tipo de DNA repetido se denomina DNA de secuencia simple o de secuencia
sencilla, está compuesto, en su mayor parte, por varios conjuntos diferentes de secuencias
cortas repetidas (5 a 10 pb) en largas disposiciones en tandem. A menudo estas largas
porciones de DNA de secuencia simple se denominan DNA satélite. En seres humanos una
de las secuencia de DNA mas conocido es la secuencia alfoide CEN (regiones centromérica
cada una con 170 pares de bases dispuestas en tandem. Otra secuencia es la de los
telómeros, TEL, secuencias cortas muy repetidas El ADN repetitivo generalmente es
descrito como basura y se descarta por no ser informativo. Sin embargo, él representa una
fuente extraordinaria de información acerca de diversos procesos biológicos. Las
repeticiones constituyen un record paleontológico que posee pistas claves de eventos y
fuerzas evolutivas que operan en la naturaleza. Cuando tienen un rol pasivo, pueden ser
usados para estudiar los procesos de mutación y selección. Cuando su rol es activo, el ADN
repetitivo ha producido cambios en el genoma, causando re-arreglos importantes en el
orden de los segmentos, creando nuevos genes o modificando y reordenando genes
existentes.

168
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Al comparar el ADN repetitivo humano con el de otras especies nos damos

cuenta de que la porción eucromática (segmento de cromosomas que contiene la mayoría
de los genes, en contraste con la heterocromática que contiene casi exclusivamente ADN
repetitivo) contiene una mayor densidad de copias de elementos transponibles que los
segmentos eucromáticos de las otras especies.
Además, el genoma humano está lleno de copias de transposones ancestrales y sólo un
6% se estima que está activo. En las otras especies, sin embargo, los transposones son de
origen reciente y entre un 25 a 87% está activamente moviéndose en el genoma (IHGSC,
2001). Por último, en el genoma humano, 2 tipos de repeticiones (LINE1 y Alu) representan el
60% de todas las secuencias repetitivas dispersas, mientras que en los otros genomas no
existe dominancia de tipos específicos de repeticiones.

3. secuencias imprescindibles en un cromosoma: Se requieren tres

elementos funcionales para la replicación y la herencia estable de Los
cromosomas.

Hasta el momento se vio que el cromosoma de los eucariotas es una estructura lineal
compuesta por una sola molécula de DNA, arrollada alrededor de los octámeros de histonas
cada alrededor de 200 pares de bases para conformar hebras de nucleosomas, las cuales se
pliegan en una fibra de 30 nm adosada a un armazón proteico en sitios específicos. El
plegamiento adicional del armazón compacta aun más la estructura hasta lograr la forma muy
condensada de los cromosomas metafásicos.
Si bien los cromosomas difieren en longitud y número entre especies, en estudios
citogenéticos se demostró que todos tienen el mismo comportamiento en el momento de la
división celular: para una duplicación y segregación correcta, los cromosomas deben contener
tres elementos funcionales, 1) orígenes de replicación; 2) el centrómero y 3) los dos extremos
o telómeros
Secuencias de replicación autónomas: (ARS) actúa como origen de replicación.
Aunque las secuencias de nucleótidos específicos de los orígenes de replicación de E. coli, la
levadura y el SV40 son muy diferentes, comparten varias propiedades. Primero, los orígenes
de replicación son segmentos de DNA que contienen múltiples secuencias repetidas cortas.
Segundo, estas unidades repetidas cortas son reconocidas por proteínas multiméricas que se
unen al origen. Estas proteínas desempeñan una función estratégica en el armado de las DNA
polimerasas y otras enzimas replicativas en los sitios donde comienza la replicación. Tercero,
las regiones de origen suelen contener un segmento rico en AT. Esta propiedad facilita el
desenrollamiento del dúplex de DNA, porque hace falta menos energía para disociar pares de
bases de A-T que de C-G. Las proteínas que se unen al origen controlan la iniciación de la

169
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

replicación del DNA, al dirigir el armado de la maquinaria replicativa en sitios específicos del
cromosoma.
Centrómero: el centrómero se identifica como una constricción del cromosoma
condensado, donde la asociación entre las cromátides hermanas es más estrecha. La
localización del centrómero y, por ende del cinetocoro, está controlada de manera directa por
una secuencia específica del DNA cromosómico denominado DNA del centrómero llamadas
secuencias CEN.
La estructura del cinetocoro se distingue como una pila de placas discoides. A partir de
experiencias con anticuerpos, se identificaron cuatro tipos de proteínas localizadas sobre la
capa interna del cinetocoro en mamíferos: CENP-A, CENP-B, CENP-C , CENP-D y CENP- E.
El análisis de secuencia de los DNA CEN de los cromosomas muestra que son muy
importantes para la función del centrómero. Esta región parece interactuar con los
microtúbulos a través de un complejo de Subunidades multiproteicas que se asocian a estas
regiones y de esta manera se controla la segregación. Este ADN está dispuesto en tandem de
secuencias repetidas.
Telómeros: Extremo de los cromosoma. Contiene una secuencia nucleotídica de ADN
especial, que se repite muchas veces. Además, debido a su ubicación está expuesto a los
siguientes riesgos: puede fusionarse con el ADN de otros telómeros o puede ser degradado por
una nucleasa. Normalmente esto no ocurre porque el ADN en el telómero se dobla sobre sí
mismo, (adopta la forma de un lazo) y es protegido por un capuchón de proteínas llamadas
TRF (telomeric repeat binding factor)
Obsérvese que el ADN se dobla por que una de
sus cadenas es mas larga que la otra e invade un
tramo cercano de la doble hélice lo que da lugar a
una triple hélice de ADN de unos 150 nucleótidos.
Cabe agregar que la cadena discontinua del ADN
telomérico se sintetiza de una manera singular. Es
que la ADN polimerasa beta no puede construir el
tramo de ADN que debe reemplazar al último
cebador que se elimina de la cadena porque carece
de un extremo 3´ a partir de la cual puede formarse.
Por consecuencia en cada una de las divisiones
celulares, con la eliminación del último cebador se
elimina se pierde o se elimina un tramo de ADN
telomérico lo que provoca acortamiento.
Naturalmente si al cabo de un determinado
número de divisiones los cromosomas no revirtieran
ese acortamiento, no solo perderían los telómeros
sin o que comenzarían a perder información
genética.
En la mayoría de las células esto no sucede
porque después de alrededor de 50 divisiones, el acortamiento telomérico llega a un nivel que
les impide volver a dividirse. Mas aún, estas células envejecen y mueren debido a que desde
sus telómeros agotados surgen señales que activan al gen P53 que se expresa en la proteína
P53 que bloquea la división y determina la muerte celular. Así, la muerte sobreviene antes de
que la célula pierda información genética-
En algunas células pertenecientes a la línea germinal de testículos y ovarios, lo anterior no
a pesar de que se divide repetidamente, lo cual se debe a que contienen un complejo
enzimático ribonucleoproteico diseñado para recuperar el ADN telomérico que pierden durante
las divisiones celulares. Este complejo se llama TELOMERASA.

170
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La telomerasa (polimerasa ribonucleoproteica) es

una enzima formada por un complejo proteico con
actividad transcriptasa inversa y un componente ARN
(acido ribonucleico) molde para sintetizar la repetición
telomérica, presentes en las células de la línea germinal,
en tejidos fetales, células madres poco diferenciadas que
permiten el alargamiento de los Telómeros. La telomerasa
es reprimida en células somáticas maduras desapareciendo
luego del nacimiento produciéndose un acortamiento del
telómero.
ARN (159 nucleótidos) 3´AACCCAAC
5´complementaria a la secuencia telomérica 5´TTGGGG
3´. Se encarga de la adición de dN a los extremos del
telómero pero dicha adición está dirigida por una secuencia
de ribonucleótidos (ARN) por lo que podemos decir que se
trata de una transcriptasa inversa de características
especiales. TERT o hTERT en el hombre. La telomerasa no
necesita de cebador.

¿Cómo actúa la telomerasa?

En los telómeros la cadena 3´ 5´del ADN está compuesto por numerosas secuencias
AATCCC consecutivas que junto a sus complementarias TTAGGG de la cadena 5´ 3´se
van perdiendo durante sucesivas divisiones celulares. La recuperación del ADN telomérico
comienza en un ciclo celular anterior; cuando la secuencia AUCCCAUC del ARN de la
telomerasa se une al extremo 3´ de la cadena 5´ 3´ colocándose al lado de la cadena
3´ 5´. A partir de ese momento la cadena 5´ 3´ tiene su extremo 3´ libre y una
secuencia de nucleótidos que le sirve de molde, la del ARN de la telomerasa. Puesto que a
medida que crece produce un corrimiento de la telomerasa, el proceso se reitera varias veces y
concluye cuando la cadena 5´ 3´ recupera su longitud y el telómero se libera de la
telomerasa. La cadena 3´ 5´ recupera su longitud, la ADN polimerasa alfa que utiliza como
molde a la cadena 5´ 3´ recién sintetizada agrega nucleótidos complementarios a partir del
extremo 3´ del ARN de un cebador previamente fabricado por una ARN primasa. Finalmente le
cebador es removido y la enzima ADN ligasa une el antiguo extremo 5´ de la cadena con el
extremo 3´ del segmento recién formado.
4. El DNA nuclear de los eucariontes se asocia con proteínas histonas, para formar
la cromatina
El problema de compactar el DNA genómico para que quepa dentro del núcleo de una
célula eucarionte se soluciona de otra manera. Se ha observado a través de experiencias que
el ADN se asocia con una masa equivalente de proteínas en un complejo muy compactado,
denominado cromatina. Las proteínas más abundantes asociadas al DNA eucarionte son las
histonas, una familia de proteínas básicas. Los cinco tipos de histonas –denominadas H1, H2A,
H2B, H3 y H4- son ricos en aminoácidos con carga positiva, que interactúan con los grupos
fosfatos con carga negativa del DNA.
La cromatina existe en forma extendida y condensada
Cuando se extrae el núcleo y se lo examina con el Me., Su aspecto depende de la
concentración salina del medio. Con baja concentración salina, la cromatina aislada se asemeja
a las “perlas de un collar”. En esta forma extendida, el cordón es un delgado filamento de
“eslabones” de DNA que conectan estructuras semejantes a perlas, denominadas
nucleosomas. Estos últimos se componen de DNA e histonas, miden unos 10 nm de diámetro
y son las unidades estructurales primarias de la cromatina.
Estructura de los nucleosomas. El componente de DNA de los nucleosomas es mucho
menos sensible a la digestión que el DNA que los une. Si se controla con cuidado el
tratamiento con nucleasas, es posible digerir todo el DNA de unión y liberar los nucleosomas
aislados, con su componente de DNA. Un nucleosoma está formado por un núcleo de proteína

171
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

y DNA arrollado a su alrededor, como el hilo de un carretel. El núcleo es un octámero que

contiene dos copias de c/u de las histonas H2A, H2B, H3 y H4. Los nucleosomas de todos lo
eucariontes contienen unos 146 pb de DNA, arrollados algo menos que dos vueltas alrededor
del núcleo de proteína. La longitud de DNA de unión varía entre especies, y contiene entre 15
y 55 pb llamado ADN ligador o espaciador. En el ensamblado de las histonas participan
proteínas no histónicas N1 (entre H3 y H4) y nucleoplasmina (entre H2A y H2B)
Estructura de la cromatina condensada: cuando se extrae la cromatina de las células en
un medio isotónico, en la mayoría de los casos aparece como fibra de 30 nm de diámetro. Se
cree que en estas fibras condensadas los nucleosomas están empaquetados en una disposición
en espiral o solenoide, con seis nucleosomas por giro. Una quinta histona, H1, se fija al ADN
en la cara interna del solenoide, con una molécula de ADN asociada a cada nucleosoma. La
cromatina condensada puede ser bastante dinámica, con regiones que se despliegan en parte
y luego se vuelven a plegar, en ocasiones en una estructura de solenoide. La cromatina de
regiones cromosómicas que no están en transcripción aparece, sobre todo, en la forma
condensada de fibra de 30 nm. Se piensa que las regiones de cromatina sometida a
transcripción activa adoptan la forma extendida de perlas de collar.

172
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Las H1 presentan una región globular con la cual se une a un

lugar único en los nucleosomas, quedando protegidos de la digestión
de la nucleasa 166pb (cromatosoma + H1)
Aparecen en el solenoide proteínas no histónicas que protegen
al ADN espaciador.
Cada una de las proteínas histonas que componen el núcleo del
nucleosoma contiene terminales amino que contienen lisina con carga
positiva, algunos de ellos interactúan con los fosfatos de DNA del
mismo nucleosoma, y otros pueden interactuar con el DNA de unión o
con nucleosomas vecinos. Estas lisinas sufren acetilación y
desacetilación reversibles por acción específica de enzimas sobre las
terminales N de las distintas histonas. En la forma acetilada se
neutraliza la carga positiva del grupo lisina y se elimina la interacción
con el grupo fosfato del DNA. En consecuencia, cuanto mayor es el
grado de acetilación de la terminal N de la histona, menor será la
probabilidad de que la cromatina forme fibras condensadas de 30 nm
y de esta manera se regula la transcripción.
La cromatina Activa (aquella que se transcribe) presenta
las H1 unidas con menos fuerza, las histonas mas acetiladas, y
a presencia de proteínas de alta movilidad movilidad HMG.
Código de HISTONAS: postula que el estado de actividad de
una región de la cromatina depende de modificaciones específicas de
las colas de las histonas en esa región.
1. Grado de compactación: eucromatina o heterocromatina

2. Probabilidad de que un gen o un grupo de genes vaya a ser transcripto: residuo

de lisina de la H3 heterocromatina METILADO tiende a desmetilarze dando
eucromatina aunque también pueden acetilarse.
El grado de condensación cromatínica varía durante el ciclo celular y juega un papel
importante en la regulación de la expresión génica. En las células en interfase, la mayoría de la
cromatina llamada eucromatina se encuentra relativamente sin condensar y distribuida por
todo el núcleo. Durante este período del ciclo celular, lo genes se transcriben y el ADN se
replica como preparación para la división. La mayoría de la eucromatina en los núcleos en
interfase parece presentarse en forma de fibras de 30 nm, o algo mas condensado de 60 a 130
nm. Los genes que son transcritos activamente, se encuentran en un estado menos
condensado, lo que permite la transcripción. Al contrario de la eucromatina, alrededor de un
10% de la cromatina en interfase (llamada heterocromatina) se encuentra en un estado muy
condensado, es transcripcionalmente inactiva y contiene secuencias de ADN altamente
repetitivas, como aquellas presentes en los centrómeros y telómeros.

173
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Las proteínas no histónicas proporcionan un armazón estructural para las largas asas de
cromatina.
Tercer nivel de enrollamiento: los lazos. Si bien las histonas son las proteínas
predominantes en los cromosomas, las proteínas no histonas también intervienen en la
organización de su estructura.
Se piensa que las largas asas de megabases de la fibra de cromatina de 30 nm se asocian
con el armazón cromosómico compuesto de proteína no histónica flexible, para dar la forma
extendida característica de los cromosomas durante la interfase. El arrollamiento del armazón
para formar una hélice y el posterior empaquetamiento de esta estructura helicoidal produce
una estructura muy condensada característica de los cromosomas en metafase. La fibra de 30
nm se compacta formando lazos o bucles, de variada longitud, los cuales nacen del armazón
proteico no histónico. A través de experiencias se ha determinado secuencias específicas de
DNA denominadas regiones asociadas con el armazón (SAR) unidas al armazón del
cromosoma. Por lo general las SAR se encuentran entre unidades de transcripción. En otras
palabras, la mayor parte de los genes se localiza dentro de estas asas de cromatina unidas en
sus bases a un armazón de cromosoma.

4. Cuarto nivel de enrollamiento: la cromatina

El cordón proteico con lazos de ADN se enrolla nuevamente sobre sí mismo, por acción
de la histona H1 y otras proteínas, formando la cromatina. Este grado de enrollamiento es
variable: se compacta mucho la cromatina se denomina heterocromatina; si se compacta poco
se denomina eucromatina.

5. Quinto nivel de enrollamiento: los cromosomas

La cromatina durante la división celular se enrolla aun mas, constituyendo los
cromosomas.
Con respecto a los cromosomas, con la excepción de algunos casos como los cromosomas
politénicos o plumulados en la interfase son muy delgados y entonces no son detectables con
el microscopio. Solo se ve la cromatina pero no se puede distinguir si es un cromosoma y no
se puede saber dónde empieza y dónde termina El enrollamiento de la cromatina para formar
los cromosomas reduce 10 veces el largo de la cromatina y eso permite que los cromosomas
sean fácilmente manipulables durante la mitosis. Esa condensación de la cromatina para
transformarse en cromosoma está producida por la fosforilación de la histona H1

Eucromatina y Heterocromatina
El grado de condensación de la cromatina determina la actividad de los genes. Cuando la
cromatina está muy condensada los genes están inactivos, esta es la HETEROCROMATINA.
Cuando la cromatina está menos extendida o menos condensada se llama EUCROMATINA y los
genes están activos.
La heterocromatina entonces son
regiones de la cromatina que permanecen
más condensadas durante la interfase y la
profase temprana, formando los
cromocentros o falsos nucléolos. El resto de
la cromatina se llama eucromatina. La
heterocromatina se colorea en forma más
intensa o menos intensa que las otras
regiones de la cromatina. A eso se lo llama
heteropicnosis positiva. El cromocentro o
falso nucléolo es entonces una zona de
heterocromatina con heteropicnosis positiva.
La heterocromatina se duplica tardíamente.

174
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La heterocromatina presenta regiones cromosómicas que no se desenrollan

A medida que las células salen de mitosis y se desenrollan los cromosomas condensados,
ciertas secciones de los cromosomas permanecen con coloración oscura. Estas zonas de tinción
oscura, denominadas heterocromatina, son regiones de cromatina condensada. Las porciones
de cromatina con coloración clara, menos condensadas, se denominan eucromatina. La
heterocromatina aparece con mayor frecuencia, pero no exclusivamente, en los centrómeros y
telómeros de los cromosomas, y la mayor parte de su DNA es de secuencia simple.
En un principio se consideró a las regiones heterocromáticas, sitios de genes inactivos, sin
embargo, se observó que algunos genes se localizan en regiones de Heterocromatina. Además,
no todos los genes inactivos y las regiones no transcriptas de DNA se visualizan como
Heterocromatina.
La Heterocromatina se duplica tardíamente y puede ser:
 Heterocromatina constitutiva: altamente condensada, como componente estable del
genoma, no convertible en eucromatina. DNA silencioso. Se ubica en la zona del centrómero,
brazo largo de cromosoma Y y telómeros.
Heterocromatina facultativa: es inactiva durante ciertas fases de la vida de un organismo.
Ejemplo: al comparar hembras y machos en mamíferos, el macho tiene un cromosoma Y
menor que el X, con pocos genes en común. Aunque las hembras poseen dos cromosomas X,
sólo un X es activo transcripcionalmente. El otro cromosoma permanece condensado formando
el corpúsculo de Barr. La inactivación del cromosoma X fue estudiada por Mary Lyon en 1961
quien propuso que todas las células de mamífero hembra ocurren heterocromatización de un
cromosoma X en etapas temprana del desarrollo embrionario (gastrulación). Es un proceso al
azar, en el sentido de que el cromosoma X derivado de la madre y el X del padre tienen igual
posibilidad de inactivarse en una célula y mantenerse activo en otra. Sin embargo, desde ese
momento el mismo cromosoma será inactivo en todas las células que se den por mitosis. La
reactivación del cromosoma X ocurre en la formación de las células germinales antes de la
Meiosis. En consecuencia, ambos X son activos durante la ovogénesis y todos los gametos
reciben un X eucromático.
Número de corpúsculos de Barr:
Número de cromosomas X - 1
Si un individuo tiene 3 cromosomas X tendrá 2 corpúsculos de Barr. Esto sucede en casos
llamados aberraciones cromosómicas.
Frecuencia con que aparece el corpúsculo de Barr en las hembras:
Contrariamente a lo esperado no aparece en el 100% de las células.
Su frecuencia de aparición varía de acuerdo a las células estudiadas. Ejemplos
 tejido nervioso : 85 %
 epitelio bucal : 20 a 50 %
 epitelio amniótico : 96 %
Como se comprenderá el estudio del epitelio amniótico del feto es un buen método para
diagnosticar el sexo del mismo.
Aplicación medica:
 diagnostico de sexo intrauterino
 diagnostico de estados intersexuales
 permite relacionar ciertas anomalías congénitas con anomalías cromosómicas.

Eucromatina: cromatina menos condensada, solo el 10 % es activa, el resto es inactiva.

La transcripción ocurre en zonas de eucromatina y el nucleolo.

175
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Morfología y elementos funcionales de los cromosomas eucariontes

La cromatina se organiza en grandes unidades de cientos a miles de kilobases de largo
denominados cromosomas.
El descubrimiento de los cromosomas
Alrededor de 1880, diferentes biólogos europeos observaban con atención la actividad de
las estructuras celulares recién evidenciadas con los MO. Estos científicos NO conocían las
leyes de Mendel pero concluyeron que:
 cualquier factor que gobernara las características heredadas debía pasar de una
célula a la otra y de una generación a la siguiente.
Esta inferencia por si misma, es fundamental: toda información genética necesaria
para generar y conservar una planta o un animal debe estar por completo dentro de
una célula.
Las observaciones realizadas sobre células en división por Fleming (biólogo alemán) en los
primeros años de la década de 1880 revelaron que los elementos del contenido citoplasmático
permanecen en una u otra célula hija al azar. Por lo contrario, había al parecer, una notoria
tendencia a que el contenido del núcleo se dividiera por igual entre las dos células hijas.
 Durante la división celular, el material del núcleo se organizaba en filamentos
visibles que se denominaron cromosomas (corpúsculos coloreados)
Por aquel tiempo se observó el proceso de la fecundación y se describió el papel de los
gametos ¿qué tienen en común estas células? El núcleo y los cromosomas.
La importancia de los cromosomas aportados por el elemento masculino se manifestó en
el trabajo o estudio efectuado por el alemán T. Boveri en huevos de erizo de mar, fecundados
por dos espermatozoides, en lugar de uno, como sucede en condiciones normales. Esta
situación conocida como polispermia, se caracterizaba por aleteracione en la división celular y
muerte temprana del embrión.
¿Por qué la presencia de un núcleo adicional del espermatozoide tan pequeño
dentro del oocito mucho más grande tiene tan evidentes consecuencias?
El segundo espermatozoide dona un grupo adicional de cromosomas y otro par de
centriolo. Estos elementos redundantes propician una división celular anormal en el embrión.
Boveri concluyó: que el proceso ordenado del desarrollo normal es “dependiente de una
combinación particular de cromosomas”
Los sucesos que tienen lugar en la fecundación fueron observados con mas detalles en el
gusano redondo Ascaris cuyos escasos cromosomas son grandes y fáciles de observar. En
1883, el biólogo belga Van Beneden, observó que las células del cuerpo del gusano poseen 4
cromosomas grandes fáciles de observar, pero los núcleos masculinos y femeninos presentes
en el huevo justo después de la fecundación (antes de la fusión) solo poseían dos cromosomas
cada uno.
En 1887 se describió el proceso de la meiosis y Weismann propuso que dicha división
incluía una “división reducida” durante la cual el número de cromosomas disminuía a la mitad
después de la formación del gameto.
Si la división reducida no ocurría, y cada gameto contenía el mismo número de
cromosomas, como la célula adulta, entonces la unión de dos gametos debería doblar el
numero de cromosomas en las células de la progenie- lo cual no puede suceder.
Cromosomas como portadores de la información genética
El redescubrimiento de las Leyes de Mendel y su confirmación, tuvieron una inmediata
influencia en la investigación en biología celular: cualquiera fuera su naturaleza física las
unidades hereditarias tenían que correlacionarse con los principios de Mendel.
1903- Sutton, publica un artículo en el que destaca de manera directa a los cromosomas
como portadores físicos de los factores genéticos de Mendel. Sutton observó la formación de

176
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

espermatozoides en testículos de saltamontes. En las células gonadales ocurren dos tipos de

divisiones, mitóticas, mediante la cual las espermatogonias dan más espermatogonias, y
meióticas durante la cual las espermatogonias dan lugar a los espermatozoides
 Durante la observación de la mitosis Sutton cuantificó 23 cromosomas y un
examen minucioso reveló que se presentan de a pares (11 pares y 1 extra o accesorio
X determinante del sexo XO
 Cromosomas de a pares u homólogos lo cual se correspondía a los factores de
a pares de Mendel
 Cuando Sutton examinó los cromosomas en las células que iniciaban la meiosis
encontró que los miembros de cada par se vinculaban unos con otros (bivalente –
tétrada) Se reconocieron 11 estructuras bivalentes. La primera meiosis aseguraba la
separación de dichos homólogos dentro de células diferenciadas (Weissmann quince
años atrás)=
 Se correlacionaba con la propuesta de Mendel.

La cantidad, el tamaño y la forma de los cromosomas en metafase son específicos de especie.

En las células que no están en proceso de división, los cromosomas no son visibles,
incluso con el auxilio de tinciones histológicas para el ADN ([Link]., Feulgen o Giemsa). Sin
embargo, durante la mitosis y la meiosis los cromosomas se condensan y se hacen visibles al
Mop. En consecuencia, casi todos los trabajos citogenéticos se llevaron a cabo sobre
cromosomas condensados en metafase, obtenidos de células en división.
Es probable que la condensación de los cromosomas en la metafase tenga lugar debido a
varios órdenes de plegamiento y arrollamiento de las fibras de cromatina de 30 nm.
Recuérdese que, en el momento de la mitosis, las células ya han progresado por medio de la
fase S del ciclo celular y replicaron el ADN, por lo que los cromosomas visibles durante la
metafase son estructuras duplicadas. Cada cromosoma en metafase está formado por dos
cromátidas, adosadas al centrómero. La cantidad, tamaño y las formas de los cromosomas en
metafase constituye el cariotipo, que es distintivo para cada especie. Conjunto de constantes
cromosómicas (forma tamaño y número) que caracteriza a una especie o a un género.
Complemento cromosómico típico de un individuo o de una especie, definido en cuanto a
forma tamaño y número, que se perpetúa normalmente en la progenie. Al complemento
cromosómico de una sola célula definido en cuanto a forma, tamaño y número de cromosoma
lo llamaremos Cariograma. Ideograma es la representación esquemática de un Cariotipo.
Las dos moléculas de ADN hijas producidas durante la replicación del ADN en la fase S del
ciclo celular, constituyen las cromátidas hermanas que mantienen unidas por el centrómero
(constricción primaria, ADN repetido, heterocromatina constitutiva en Interfase, contiene
genes para las proteínas del cinetocoro). La presencia del centrómero divide al cromosoma
metafásicos en dos brazos, en general uno mas largo que el otro. Al brazo corto se lo
identifica con p y al largo con q. De acuerdo a la posición del centrómero se clasifican a los
cromosomas en:
- Metacéntricos: con el centrómero en posición más o menos central.
- Submetacéntrico: el centrómero se encuentra alejado del punto central, de modo
que las cromátidas poseen un brazo corto y uno largo.
- Acrocéntricos : el centrómero se halla cerca del extremo del cromosoma

En el cariotipo humano los cromosomas aparecen ordenados de acuerdo con su tamaño

y morfología, los números de cada par. Los cromosomas acrocéntricos presentan pequeñas
masas de cromatina satélites, ubicadas en los extremos libres de los brazos cortos. Los
satélites se hallan ligados a los brazos cortos por delgados tallos de cromatina llamada
constricciones secundarias, en esta zona se localizan los genes del ARNr (organizador

177
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

nucleolar), a excepción de esta zona, los brazos cortos de los cromosomas acrocéntricos están
compuestos por heterocromatina, inclusive el satélite.
Cinetocoro: al inicio de la fase M cada cromosoma está replicado y se compone de dos
cromátidas hermanas con una constricción llamada centrómero, donde la cromatina parece
estar especialmente condensada. Durante la profase tardía, en cada centrómero se ensamblan
complejos de proteínas especializadas llamadas proteínas Cenp, que constituyen el cinetocoro,
de modo que los dos cinetocoros de cada cromosoma (uno en cada cromátide hermana) se
hallan dispuestos en direcciones opuestas. A través de los cinetocoros los cromosomas se
unirán a los microtúbulos cinetocóricos del huso mitótico. El cinetocoro es una estructura
trilaminar o multilaminar que contiene un par de discos densos y una zona intermedia más
clara. Muestran dos caras: una externa convexa, en la que se implantan 34 microtúbulos y
otra interna en contacto con la cromatina del centrómero, esta cromatina ingresa al cinetocoro
lo atraviesan y salen tras doblarse, volviendo.
En los cinetocoros se han identificado cinco proteínas: CENP- A, CENP- B; CENP – C,
CENP- D y CENP – E (proteína motora semejante a la cinesina)

A los cromosomas de un IDEOGRAMA: representación ordenada de los cromosomas de

una célula en orden de tamaño creciente y puestos de a pares, se los clasifica en siete grupos

Los cromosomas teñidos presentan patrones de banda característicos

Ciertos colorantes tiñen en forma selectiva algunas regiones de los cromosomas en
metafase con mayor intensidad que otras; esto produce patrones de bandas específicos para
cada cromosoma aislado. Si bien aún se desconoce la base molecular de la regularidad de las
bandas cromosomicas, éstas son muy útiles. Cuando los cromosomas teñidos se observan al
microscopio, estas bandas sirven para facilitar el análisis de un Cariotipo e identificar a los
cromosomas y en el caso de que las ubicaciones no coincidan con los patrones normales, las
bandas constituyen una guía para diagnosticar trastornos genéticos: translocaciones,
inversiones, duplicaciones y delecciones.
Las técnicas de bandeado más utilizadas son:
 Bandeado G: los cromosomas son tratados con
tripsina para desnaturalizar a las proteínas y luego
tenidos con Giemsa, aparecen las bandas G oscuras
que contienen ADN rico en A-T.
 Bandeado R: el tratamiento de los
cromosomas con solución alcalina caliente antes de la
tinción con Giemsa produce las bandas R en un
patrón que es similar a la inversa del patrón de

178
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

bandas G.
 Bandeado Q: con quinacrina, un colorante fluorescente que se inserta (intercala) entre
pares de bases de la hélice del DNA, produce las bandas Q, pero se necesita microscopio de
fluorescencia y dura muy poco.
 Bandeado C: tiñe los tramos de heterocromatina constitutiva compuesta de ADN tipo
satélite muy repetido, solo tiene la región centromérica y los bloques de cromatina C de los
cromosomas 1, 9 y 16 y del brazo largo del cromosoma Y.
 Bandeado F: utiliza Feulgen como colorante.

 Bandeado T. Tiñe los telómeros

 Bandeado N: tiñe las constricciones secundarias.

179
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

NUCLEOLO

Es un corpúsculo que se encuentra dentro del núcleo y es el lugar de síntesis de ARNr. La

masa del nucleolo está compuesta por: una matriz amorfa donde se apoyan:
- Un asa cromatínica asociada al nucleolo u organizador nucleolar que son
grandes bucles de ADN procedentes –en el hombre - de los cromosomas 13, 14, 15 21 y
22, donde están localizados los genes de ARNr. ( En 10 de los 46).
- Un área fibrilar: hacia el centro del
nucleolo, luego de la transcripción se obtiene
ARN 45 S precursor de los ARN 18 S, 5, 8 S y 28
S.
- Un área granular: ocupa la parte
periférica, precursor de partículas ribosomales
maduras.
- Una matriz es proteica. Es la parte
amorfa sobre la cual se encuentran las demás.

Ciclo nucleolar: el aspecto del nucleolo cambia durante las fases del ciclo celular. A medida
que la célula se aproxima a M, el nucleolo disminuye su tamaño y luego cuando los
cromosomas se condensan y la síntesis de ARN se detiene, el nucleolo “desaparece”

Las células metafásicas no tienen nucleolo. Cuando se inicia de nuevo la síntesis de ARN r
al final de la mitosis, durante la telofase, reaparecen diminutos nucleolos en las localizaciones
cromosómicas de los genes de RNAr.
El nucleolo desaparece aparentemente en la profase y reaparece en la telofase.
¿Qué sucede con el RNA y proteínas del nucleolo durante la mitosis?
Parece que por lo menos en parte queda distribuido sobre los cromosomas metafásicos, y
es transportada a los núcleos de las células hijas. Cuando durante la telofase, los cromosomas
se descondensan, estos componentes nucleolares viejos ayudan a restablecer a los nucleolos
de las células hijas. Es decir que el ADN nucleolar formado por cromatina (heterocromatina)
asociada al nucleolo que posee información para el ARNr (organizador nucleolar) al comienzo
de la mitosis se arrolla o espiraliza y forma los cromosomas y el área fibrilar y granular se
dispersan. Función: biogénesis de ribosomas.

180
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

PARTE 10

NATURALEZA MOLECULAR DEL GEN Y DEL GENOMA

INTRODUCCIÓN

Desde que el hombre se ha dedicado al cultivo o ha criado animales, resulta obvio que
cada semilla o cada óvulo fecundado ha de contener un plan o diseño para el desarrollo del
organismo. En la época moderna, la ciencia de la genética se desarrolló alrededor de la
premisa de que existen unos elementos invisibles portadores de información, denominados
genes, que son distribuidos a las células hijas cuando la célula madre se divide. Por
consiguiente, antes de dividirse una célula debe de hacer una copia de sus genes para poder
ceder a sus células hijas una colección completa de ellos. Los genes de los espermatozoides y
de los óvulos transmiten la información genética de una generación a la siguiente.

Hacia finales del siglo XIX, los biólogos habían reconocido ya que los transportadores de la
información hereditaria eran los cromosomas que resultan visibles en el núcleo cuando una
célula comienza a dividirse. Pero la evidencia de que es el ADN de estos cromosomas la
sustancia de la que están formados los genes, se obtuvo mucho más tarde a partir de estudios
sobre microorganismos. Hasta entonces se había creído que sólo las proteínas presentaban
una complejidad conformacional suficiente como para ser portadoras de la información
genética. El modelo del ADN propuesto por Watson y Crick en 1953 brindó una explicación
satisfactoria de la forma en que pueden operar los procesos relacionados con una molécula
depositaria de la información genética: el almacenamiento de información, su replicación, su
expresión, la mutación y la recombinación.

El presente capítulo tratará acerca de la naturaleza de los genes y su expresión en dos

pasos: la transcripción y la traducción; asimismo nos ocuparemos de los mecanismos de
regulación que controlan la expresión genética.

RESEÑA HISTÓRICA DE LA GENÉTICA

La construcción de la Genética constituye una de las aventuras intelectuales más

apasionantes y prodigiosas de la mente humana. Aunque la Genética es una ciencia del siglo
XX -pues se inicia con el redescubrimiento de las leyes de Mendel en 1900 y no fue hasta 1906
que el británico William Bateson acuñó el término y escribió el primer libro de texto-, los
avances conceptuales del siglo XIX fueron fundamentales para el pensamiento genético
posterior.
La segunda mitad del siglo XIX
Durante el periodo 1850-1900 la biología emerge de los últimos vestigios medievales y
aristotélicos y surge una visión unificada cuyo paradigma no es esencialmente distinto del
nuestro. La teoría celular se había establecido ya en los años 30, pero en 1858 el fisiólogo
alemán R. Virchow introduce una generalización adicional, el principio de la continuidad de la
vida por división celular, que sintetiza en su célebre frase omnis cellula e cellula. Se establece
entonces la célula como la unidad de reproducción. El reconocimiento de la célula como unidad
reproductora condujo al abandono de la generación espontánea y del preformismo. Un animal
o una planta se originan de una simple célula mediante un proceso epigenético, a través de
sucesivos estados de diferenciación de un huevo indiferenciado. La célula contiene las
potencialidades de generar un organismo. Esta generalización llevó casi compulsivamente a la
búsqueda de la base material de la herencia.
El naturalista británico Charles Darwin introduce en su libro de 1859 El origen de las
especies la segunda gran unificación del siglo XIX: la teoría de la evolución biológica. Según
ésta, la formas orgánicas ahora existentes proceden de otras distintas que existieron en el
pasado, mediante un proceso de descendencia con modificación. Darwin reunió una evidencia
arrolladora procedente de muy diversas disciplinas de investigación biológica en favor del

181
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

hecho evolutivo y logró que esas disciplinas convergieran en una única explicación: la selección
natural. Con el objeto de imponer estas dos revolucionarias concepciones Darwin introduce
una nueva y radical perspectiva metafísica: el pensamiento poblacional. En contraste con la
visión esencialista dominante en su tiempo, la variación individual, lejos de ser trivial, es para
Darwin la piedra angular del proceso evolutivo. Son las diferencias existentes entre los
organismos en el seno de una población las que, al magnificarse en el espacio y en el tiempo,
constituirán la evolución biológica. La teoría de la evolución fue casi inmediatamente aceptada
por la comunidad científica, pero su teoría de la selección natural tuvo que esperar hasta la
tercera década del siglo XX para su aceptación general.
El esquema de Darwin carecía de una explicación para el origen y el mantenimiento de la
variación genética sobre la que opera la selección. Años después del Origen, en 1868, Darwin
intenta explicar el fenómeno de la herencia a través de la hipótesis provisional de la
pangénesis. Esta hipótesis es el resultado de un intenso trabajo de recopilación e
interpretación conceptual de un gran número de observaciones y experimentos, que se
recogen en un tratado de dos volúmenes The variation of animals under domestication. En ella
postula la existencia de partículas hereditarias o de reproducción, que llamó gémulas. Cada
parte del organismo e incluso partes de las células producen sus propias y específicas gémulas
-los ojos, las gémulas de los ojos, el corazón las gémulas del corazón-. Las gémulas fluyen por
todas las partes del cuerpo, de modo que en cada parte, tales como en los óvulos y el
esperma, pueden encontrarse todos los tipos de gémulas. Así las células reproductoras tienen
la potencialidad de desarrollar un organismo completo. Contrariamente a las conclusiones del
Origen, su hipótesis de la herencia resultó errónea, como demostró, entre otros, su sobrino
Francis Galton en un experimento de transfusión sanguínea recíproca entre dos cepas de
conejos que diferían en su color. De cualquier modo, su trabajo estimuló el pensamiento
genético.
Tres años antes del tratado de Darwin sobre la herencia, en 1865, el monje austríaco
Gregor Mendel publicó el trabajo Experimentos de hibridación en plantas en el Boletín de la
Sociedad de Ciencias Naturales de Brno (Moravia, actualmente en la República Checa). En él se
resumían experimentos que había llevado a cabo durante 8 años en el guisante Pisum sativum.
El trabajo de Mendel se enmarcaba dentro del paradigma de la teoría de la evolución, pues una
de las razones para efectuar dicho trabajo era "alcanzar la solución a una cuestión cuya
importancia para la historia evolutiva de las formas orgánicas no debería ser subestimada".
Sus experimentos son el paradigma del análisis genético y su trabajo es considerado
fundacional de la ciencia de la Genética. Un diseño experimental sencillo junto con un análisis
cuantitativo de sus datos fue la fuerza principal de su trabajo. Los experimentos demostraron
que (1) la herencia se transmite por elementos particulados (refutando, por tanto, la herencia
de las mezclas) que (2) siguen normas estadísticas sencillas, resumidas en sus dos principios.
Pero el momento no era propicio y el nuevo paradigma de la ciencia de la Genética debería
esperar 35 años. Y no fue, como se ha creído, porque su trabajo fuera desconocido. El trabajo
de Mendel fue, simplemente, inapreciado. Mendel intercambió correspondencia con el alemán
Carl Nägeli, unos de los más preeminentes botánicos del momento. Éste no pareció muy
impresionado por su trabajo y le sugirió a Mendel que estudiara otras plantas, entre otras
Hieracium, en la que Nägeli estaba especialmente interesado. En ella Mendel no encontró
normas consistentes en la segregación de sus caracteres y empezó a creer que sus resultados
eran de aplicación limitada, por lo que su fe y entusiasmo en su trabajo disminuyó. No fue
hasta mucho tiempo después de la muerte de Mendel, en 1903, que se descubrió que un tipo
especial de partenogénesis ocurre en Hieracium, la cual produce desviaciones de las
proporciones esperadas. Debido al olvido y a la desidia hacia su trabajo, se puede afirmar que
sin Mendel la ciencia de la Genética posiblemente sería la misma.
Nuevas técnicas citológicas, el desarrollo del micrótomo y de las lentes de inmersión en
aceite en la década 1870-80, condujeron al descubrimiento de la fecundación, la fusión de los
núcleos del óvulo y del esperma para formar el núcleo del huevo, y la mitosis. En 1874 Nägeli
enuncia la teoría del idioplasma, que establece que el núcleo celular es el vehículo de la
herencia. En 1883 van Beneden trabajando en el nemátodo Ascaris descubre la meiosis y
reconoce la individualidad de los cromosomas. T. Boveri, en un programa de investigación que
se inicia en 1888 y acaba en 1909, demuestra que los cromosomas mantienen su estabilidad

182
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

entre generaciones. A partir de 1880 había un acuerdo general que el material hereditario
residía en los cromosomas -a pesar que esto no estuvo completamente claro hasta 1916.
El alemán August Weismann enuncia en 1885 su teoría de la continuidad del plasma
germinal. En ella reconoce dos tipos de tejidos en los organismos, el somatoplasma y el
germoplasma. El primero forma la mayor parte del cuerpo de un individuo, mientras que el
germoplasma era una porción inmortal de un organismo que tenía la potencialidad de duplicar
a un individuo. A diferencia de la teoría de la pangénesis, el germoplasma no proviene del
somatoplasma ni se forma nuevamente cada generación, sino que constituye la continuidad de
la información genética entre generaciones. Su teoría rechazaba rotundamente la herencia de
los caracteres adquiridos y supuso un mayor énfasis en el material hereditario. Se llamó
Neodarwinismo a la fusión de la teoría de la evolución por selección natural y la hipótesis del
plasma germinal de Weissmann. En 1883 Weismann propuso la teoría de que las partículas
hereditarias o bióforas eran invisibles, autorreplicativas y asociadas con los cromosomas de un
modo lineal y postuló que cada biófora estaba implicada en la determinación de una
característica. Su intuición fue realmente prodigiosa.
En 1871 el médico suizo Fiedrich Miescher aisló nucleína de núcleos de células de pus
humanos, hoy sabemos que esta nucleoproteína forma la cromatina. En 1886 el citólogo
americano E. B. Wilson sugiere una relación entre la cromatina y el material genético.

El siglo XX
1900-1940: la Genética clásica
La entrada en el siglo XX produce una explosión de nuevos descubrimientos que ya no se
detendrá, y que se continuará a un ritmo siempre creciente. Se resumirán brevemente los
avances principales.
En la primera década se produce la síntesis de los trabajos genéticos (de hibridación
experimental) y citológicos. Esta síntesis simboliza la mayoría de edad de la Genética,
iniciándose como ciencia propia e independiente. El siglo empieza con el redescubrimiento de
las leyes de Mendel por los trabajos de 3 botánicos: Carl Correns, Hugo de Vries y Eric Von
Tschermak, a las que el británico William Bateson dará un gran impulso. Se produce una
integración inmediata de los estudios genéticos y citológicos. En 1902, Boveri y Sutton se
percatan, de forma independiente, de la existencia de un estrecho paralelismo entre los
principios mendelianos recién descubiertos y la conducta de los cromosomas en la meiosis. En
1905 Bateson acuñó (en 1901 había introducido los términos alelomorfo, homocigoto y
heterocigoto) el término genética para designar "la ciencia dedicada al estudio de los
fenómenos de la herencia y de la variación". En 1909 el danés Wilhelm Johannsen introduce el
término gen como "una palabrita... útil como expresión para los factores unitarios... que se ha
demostrado que están en los gametos por los investigadores modernos del mendelismo".
Durante la segunda década de este siglo Thomas Hunt Morgan y su grupo de la
Universidad de Columbia inician el estudio de la genética de la mosca del vinagre Drosophila
melanogaster. En 1910 descubren la herencia ligada al X y la base cromosómica del
ligamiento. En 1913 A. H. Sturtevant construye el primer mapa genético y en 1916 Calvin
Bridges demuestra definitivamente la teoría cromosómica de la herencia mediante la no
disyunción del cromosoma X. En 1927 H. J. Muller publica su trabajo en el que cuantifica
mediante una técnica de análisis genético (la técnica ClB) el efecto inductor de los rayos X de
letales ligados al sexo en Drosophila. En 1931 Harriet Creighton y Barbara McClintock en el
maíz y Gunter Stern en Drosophila demuestran que la recombinación genética está
correlacionada con el intercambio de marcadores citológicos. Todos estos descubrimientos
condujeron a la fundación conceptual de la Genética clásica. Los factores hereditarios o genes
eran la unidad básica de la herencia, entendida tanto funcional como estructuralmente (la
unidad de estructura se definía operacionalmente por recombinación y por mutación). Los
genes, a su vez, se encuentran lineal y ordenadamente dispuestos en los cromosomas como
perlas en un collar.
Paralelamente a estos avances, otro conflicto que había surgido con el Origen de Darwin
empezó a resolverse. Era el problema de la naturaleza de la variación sobre la que se produce

183
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

la evolución. Mientras que Darwin puso énfasis en la evolución gradual y continua que
transforma la variación dentro de las poblaciones en variación entre poblaciones, otros, como
Thomas Huxley e, inicialmente, Galton (cuyo libro Natural inheritance, 1989, se considera
fundador de la ciencia de la Biometría) creían que la evolución procedía de forma rápida y
discontinua, por lo que la selección usaba primariamente variación discontinua, no teniendo
ningún valor evolutivo la variación continua. Con el mendelismo este antagonismo se acentuó
hasta convertirse en conflicto entre los mendelianos por un lado -que apoyaban la evolución
discontinua- y los biométricos por el otro -que estudiaban la variación en los caracteres físicos
cuantitativamente y creían en la evolución darwiniana-. Los primeros estaban capitaneados por
Bateson, Morgan y Hugo de Vries mientras que Karl Pearson y W. F. R. Weldom (junto con
Galton, que se les unió ideológicamente después) fueron los principales biométricos. En 1908
se formula la ley de Hardy-Weinberg que relaciona las frecuencias génicas con las genotípicas
en poblaciones panmícticas. Entre 1918 y 1932 la larga polémica entre biométricos y
mendelianos se zanja finalmente: Ronald Fisher, Sewal Wright y J. B. S. Haldane llevaron a
cabo la síntesis del darwinismo, el mendelismo y la biometría y fundan la teoría de la Genética
de poblaciones. Fisher demuestra en 1918 que la variación cuantitativa es una consecuencia
natural de la herencia mendeliana. El desarrollo de modelos matemáticos de acción de la
selección despejó las dudas en cuanto a si la selección podía o no producir cambios
importantes incluso cuando sus coeficientes eran débiles: la selección volvió a adquirir un
papel preponderante como agente evolutivo. En la Genética de poblaciones la teoría de la
evolución se presenta como una teoría de fuerzas -la selección, la mutación, la deriva genética
y la migración-. Estas fuerzas actúan sobre un acervo genético que tiende a permanecer
invariable como consecuencia de la ley de Hardy-Weinberg que a su vez es una consecuencia
de la extensión de la primera ley de Mendel a las poblaciones. La Genética de poblaciones se
estableció como el núcleo teórico, el componente explicativo, de la teoría de la evolución. La
integración de la Genética de poblaciones con otros programas de investigación evolutiva -
tales como la biología de poblaciones experimental, la sistemática, la paleontología, la zoología
y la botánica- produjeron durante el periodo de 1937-1950 la teoría sintética o neodarwinista
de la evolución. En ella se produce la mayor integración de disciplinas, nunca antes alcanzada,
de una teoría evolutiva.
Desde 1940 en adelante: el acceso al nivel molecular
Tras la segunda guerra mundial se produce el verdadero asalto a la naturaleza física del
material hereditario. La genética de procariotas inicia los nuevos horizontes de indagación. Se
establece finalmente el ADN como la sustancia genética. A ello le sigue el descubrimiento del
dogma del flujo de la información genética: ADN -> ARN -> proteínas. También se producen
grandes avances en el conocimiento de la estructura y función de los cromosomas. Por último
los setenta producen las técnicas de manipulación de ADN que afectarán revolucionariamente
a todas las disciplinas de la genética. A continuación se exponen, muy brevemente, los
principales hitos de este periodo.

A partir de los 1940 se aplican las técnicas moleculares sistemáticamente y con extraordinario
éxito en Genética. El acceso al nivel molecular ha empezado: la estructura y función de los
genes es el próximo frente del avance genético.

1941: George Beadle y E. L. Tatum introducen la revolución de Neurospora estableciendo el

concepto de un gen-una enzima: los genes son elementos portadores de información que
codifican enzimas.

1944: Oswald Avery, Colin McLeod y Maclyn McCarty demuestran que el "principio
transformador" es el ADN.

1953: Este año representa un momento culminante. James Watson y Francis Crick interpretan
los datos de difracción de rayos X de Maurice Wilkins junto con datos de composición de bases
de Erwin Chargaff concluyendo que la estructura del ADN es una doble hélice, formada por dos
cadenas orientadas en direcciones opuestas (antiparalelas). La estructura 3-D se mantiene
gracias a enlaces de hidrógeno entre bases nitrogenadas que se encuentran orientadas hacia el
interior de las cadenas. Dicha estructura sugería, de un modo inmediato, como el material

184
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

hereditario podía ser duplicado o replicado. Una estructura pasmosamente simple proveía la
explicación al secreto de la herencia: la base material (ADN), la estructura (doble hélice 3-D) y
la función básica (portador de información codificada que se expresa y se transmite
íntegramente entre generaciones) del fenómeno genético era, por fin, inteligible. No debe
sorprendernos que el descubrimiento de la doble hélice se considere el más revolucionario y
fundamental de toda la biología.

1958: Matthew Meselson y Franklin Stahl demostraron que el ADN se replicaba

semiconservativamente. El problema de cómo la secuencia del ARN se traduce en secuencia
proteica se empieza a resolver. Un triplete de bases codifica un aminoácido. Rápidamente se
establece el flujo de la información genética (el dogma). Ese mismo año Arthur Kornberg aísla
la polimerasa del ADN y un año después Severo Ochoa aísla la ARN polimerasa, con la que
inicia la elucidación del código.

1961: Sidney Brenner, François Jacob y Meselson descubrieron el ARN mensajero.

1966: Marshall Nirenberg y Har Gobind Khorana terminan de desvelar el código genético.

Simultáneamente a estos descubrimientos, Seymour Benzer publica en 1955 su primer trabajo

sobre la estructura fina del locus rII en el fago T4. En 1961 Jacob y Jacques Monod proponen
el modelo del operón como mecanismo de regulación de la expresión génica en procariotas.
Charles Yanofsky y su equipo demuestran la colinearidad entre genes y sus productos
proteicos en 1964. En 1966 R. Lewontin, J. L. Hubby y H. Harris aplican la técnica de la
electroforesis en gel de proteínas al estudio de la variación alozímica de las poblaciones
naturales, obteniéndose las primeras estimas de la variación genética de un sinnúmero de
especies. La teoría neutralista de la variación molecular introducida por el japonés M. Kimura
en 1968 suministra la primera explicación satisfactoria al exceso de variación hallada.

Los 70 presencian el advenimiento de las técnicas de manipulación del ADN. En 1970 se aíslan
las primeras endonucleasas de restricción y H. Temin y D. Baltimore descubren la transcriptasa
inversa. En 1972 se construye en el laboratorio de Paul Berg el primer ADN recombinante in
vitro. El año 1977 fue pródigo: se publican las técnicas de secuenciación del ADN de Walter
Gilbert y de Frederick Sanger; Sanger y sus colegas publican, a su vez, la secuencia completa
de 5387 nucleótidos del fago f X171; varios autores descubren que los genes eucariotas se
encuentran interrumpidos (intrones).

Los primeros ratones y moscas transgénicos se consiguen en 1981-82. Thomas Cech y Sidney
Altman, en 1983, descubren la autocatálisis del ARN. Este mismo año M. Kreitman publica el
primer estudio de variación intraespecífica en secuencias de ADN del locus Adh de Drosophila
melanogaster y S. Arnold y R. Lande introducen el análisis correlacional a los estudios de
selección fenotípica en la naturaleza. En 1986 Kary Mullis presentó la técnica de la reacción en
cadena de la polimerasa. En 1990 Lap-Chee Tsui, Michael Collins y John Riordan encontraron el
gen cuyas mutaciones alélicas son las responsables principales de la fibrosis quística. Ese
mismo año Watson y muchos otros lanzan el proyecto del genoma humano para cartografiar
completamente el genoma humano y, finalmente, determinar su secuencia de bases. No es
hasta 1995 que se secuencia el primer genoma completo de un organismo celular, el de
Haemophilus influenzae. En 1996 se obtiene en el laboratorio de I. Wilmut el primer mamífero
clónico (la oveja Dolly) obtenido a partir de células mamarias diferenciadas.

La era genómica

El proyecto Genoma humano, con una presupuesto de 3 mil millones de dólares y la

participación de un Consorcio Público Internacional, formado por EEUU, Reino Unido, Japón,
Francia, Alemania, China y otros países, tenía como objetivo principal la consecución de la
secuencia completa del genoma humano, el texto lineal formado por la secuencia de las
cuatros bases químicas del ADN que contiene las instrucciones para construir un ser humano.
Iniciado en 1990, el proyecto se dio por concluido en el 2003, dos años antes de lo previsto.

185
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Otros objetivos del proyecto eran la secuenciación de genomas de otros organismos modelos
sobre los que se tenía un amplio conocimiento previo, como la bacteria Escherichia coli, la
levadura Saccaromyces cerevisiae, el gusano Caenorhabditis elegans, o la mosca del vinagre
Drosophila melanogaster, y el considerar las implicaciones éticas, legales y sociales que
suscitarían los resultados del proyecto. Ocho años después del inicio del proyecto público
apareció en escena una empresa privada, Celera genomics, presidida por un brillante y
revolucionario científico, Craig J. Venter, que lanzó el reto de conseguir la secuencia humana
en un tiempo récord, antes del previsto por el Consorcio Público. Proponía una estrategia de
secuenciación alternativa a la secuenciación jerárquica que seguía el Consorcio, la
secuenciación aleatoria (shotgun), con la que había conseguido secuenciar el primer genoma
celular en 1995, el de la bacteria Haemophilus influenzae. Empieza a partir de ese momento
una carrera apasionante por la conquista del genoma humano, que acabaría finalmente en
tablas. El 26 de Junio de 2000, en un acto auspiciado por el presidente Bill Clinton y que tuvo
como escenario la Casa Blanca, se encontraron los dos máximos representantes de las partes
en competición, Venter por Celera, y el director del Consorcio Público, Francis Collins. Se
anunció de forma conjunta la consecución de dos borradores de la secuencia completa del
genoma humano. Las publicaciones correspondientes de ambas secuencias no aparecieron
hasta Febrero de 2001. El Consorcio Público publicó su secuencia en la revista Nature,
mientras que Celera lo hizo en Science. Tres años después, en 2004, el Consorcio publicó la
versión final o completa del genoma humano. El proyecto genoma humano había concluido con
un éxito rotundo y, en palabras de F. Collins, se iniciaba una nueva era de investigación
basada en la genómica que afectaría crucialmente a la biología, a la salud y a la sociedad. Con
ello se inaugura una nueva era, que dada la coincidencia con el nuevo siglo, bien podríamos
definir con el lema, el siglo XXI, el siglo del la Genética

EL CONCEPTO DE GEN

El genoma es el conjunto de genes de una especie. Pero ¿qué es un gen?. En principio es una
unidad informativa discreta, responsable de una característica transmisible, vg. el color de
ojos, la textura de la semilla, la longitud del tallo. Este es el concepto mendeliano del gen,
acuñado en el siglo XIX, cuando aún se desconocía su verdadera naturaleza química. Esta
definición del gen sigue siendo útil en determinado contexto, con la salvedad de que hoy
identificamos a dicha unidad de información con un fragmento de ADN localizado en
determinado lugar de un cromosoma. Una segunda concepción del gen surgió cuando los
genetistas demostraron de forma concluyente que los genes especifican la estructura de las
proteínas individuales. A principios de los años 1950 se llegó a conocer la secuencia de
aminoácidos de la proteína insulina y se descubrió que cada proteína consiste en una secuencia
de aminoácidos típica, de la cual, se supuso, dependerían sus propiedades. Al mismo tiempo
se correlacionaron mutaciones (alteraciones en la secuencia de nucleótidos del ADN) con
alteraciones de la secuencia de aminoácidos en las proteínas. Resultó evidente que la
secuencia del ADN especifica, mediante algún código, la secuencia proteica. Un gen es,
entonces, una secuencia de ADN con la información necesaria para la síntesis de una proteína
particular (desde el punto de vista molecular) También puede ser analizado desde el punto de
vista poblacional.

DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGÍA MOLECULAR

Dado que el ADN es una molécula relativamente inerte, su información se expresa
indirectamente, a través de otras moléculas. El ADN dirige la síntesis de proteínas y éstas
determinan las características físicas y químicas de la célula.
Es un conjunto de hipótesis que se consideran básicas para la biología celular actual.
1- los genes se componen de ADN y están situados dentro de los cromosomas.
2- Cada gen contiene información codificada en forma de una serie específica de nucleóti-
dos de purina y pirimidina dentro de la molécula de ADN
3- la unidad de información genética es el CODÓN que es un grupo de tres nucleótidos
adyacentes que especifican un Aa en una cadena de proteínas

186
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

4- el código genético es un código tripleto

5- la molécula de ADN consta de dos cadenas complementarias de polinucleótidos arro-

llados entre sí en una espiral y unidas por enlaces de hidrógeno entre pares específicos de
bases de purina y pirimidina.
6- la molécula de ADN se duplica cuando las dos tiras de la espiral se separan y cada una
actúa como modelo para la formación de una nueva cadena complementaria. Cada par de tiras
, uno antiguo y uno nuevo se arrollan formando dos espirales hijas.
El dogma central plantea entonces que el ADN origina al ARN, proceso denominado
TRANSCRIPCIÓN.
La excepción al dogma central es la síntesis de ADN a partir de ARN, la cual se realiza en
algunos virus, como el del sarcoma de Rous, por medio de una enzima denominada ADN
POLIMERAZA ARN DEPENDIENTE o TRANSCRIPTASA INVERSA.
Esto también se denomina "inversión del flujo de la información genética".
Como ya adelantáramos, las instrucciones genéticas contenidas en el ADN se expresan en
dos pasos. El primero de ellos, la transcripción, consiste en la síntesis de ARN a partir del ADN.
El ARN contiene toda la información de la secuencia de bases del ADN de la que ha sido
copiado. El segundo paso de la expresión genética es la traducción, momento en el cual el ARN
ejecuta las instrucciones recibidas cristalizándolas en la síntesis de una proteína específica.
Existen diversos tipos de ARN: el ARNm (mensajero), el ARNr (ribosómico), el ARNt (de
transferencia) y los ARN pequeños. De todos ellos, tan sólo el ARNm es portador de
información acerca de la secuencia aminoacídica de una proteína; sin embargo todos ellos son
transcriptos de ADN. Por lo tanto, resulta necesario revisar la segunda definición del gen.
Hoy se acepta que un gen es una secuencia de ADN transcripta que genera un producto
con función celular específica.
Cabe aclarar, no obstante, que esta definición no es completamente satisfactoria, en la
medida en que existen regiones reguladoras de los genes, que no se transcriben, y otras
regiones (llamadas intrones) que se transcriben pero se eliminan sin cumplir ninguna función
aparente.

LA ORGANIZACIÓN DEL GENOMA

Con la excepción de ciertos virus, que contienen un genoma de ARN, el resto de los
genomas utiliza el ADN como depositario de la información genética.
Sin embargo, debemos señalar algunas diferencias significativas en cuanto a la
organización del genoma en procariontes y eucariontes.
En primer lugar, el ADN procarionte se presenta como una única molécula circular, en
tanto el ADN eucarionte es de estructura lineal. Además las células eucariotas poseen
usualmente más de una molécula de ADN en sus núcleos. Cada molécula corresponde a un
cromosoma, cuyo número es constante para todas las células de una misma especie (con
excepción de las gametas).
El ADN eucarionte, por otro lado, se halla asociado íntimamente a diferentes proteínas,
entre las cuales las histonas juegan el papel más importante en lo que respecta al
empaquetamiento del ADN. Esta asociación a histonas no se verifica en el ADN procarionte,
por lo cual se lo ha denominado “ADN desnudo”.
En las células eucariotas los cromosomas están confinados en el compartimiento nuclear,
donde tiene lugar la transcripción, mientras que la traducción se localiza en el citoplasma; por
lo tanto, ambos procesos se encuentran separados espacial y temporalmente. Esto permite
que los transcriptos de ARN experimenten en el núcleo un proceso de maduración previo a la
traducción. En las células procariotas, donde no existe la envoltura nuclear, el ADN está en
contacto directo con el citosol, y los procesos de transcripción y traducción no se hallan

187
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

separados en espacio ni en tiempo. Los ARNs no son sometidos a modificaciones

postranscripcionales.
Los eucariontes tienen genomas mucho más grandes que los procariontes. Aunque el valor
C (cantidad haploide de ADN de una especie) es muy variable entre los mismos eucariontes
(ver tabla 1), es siempre notablemente mayor que el de los procariontes. No necesariamente
un mayor valor C refleja una mayor complejidad genética

En los procariontes se da una máxima economía de información: en casi todos los casos
cada cromosoma contiene una sola copia de cualquier gen particular, y, con excepción de las
secuencias reguladoras y señaladoras, prácticamente se expresa todo el ADN. En cambio, en
toda célula eucariota parecería haber un gran exceso de ADN, o por lo menos de ADN cuyas
funciones se desconocen por completo. Por ejemplo, la estimación del ADN “innecesario” en los
seres humanos llega a ser tan elevada como el 95% del genoma.

CONCEPTOS BÁSICOS:
Todos los caracteres de un individuo se producen en forma directa o indirecta por la
presencia de una o más proteínas.
Controlando la fabricación de proteínas, se tiene control entonces sobre las características
de un individuo-
El control de la síntesis de proteínas lo tiene el ADN, que también puede transmitir a la
herencia esa información.
La transmisión de célula a célula se efectúa en el momento de la división celular, de la
siguiente manera:
durante el período G1 cada célula tiene una sola copia de la información genética, ya
que tiene una sola copia de ADN
durante el período S se produce la duplicación del ADN, en la cual se origina una
molécula de ADN exactamente igual a la original, con la misma información para la
síntesis de proteínas y por lo tanto la misma información genética
durante el período G2 la célula tiene la información duplicada.
Durante la mitosis, cada célula hija recibe una de las dos cadenas de ADN. De esta
manera se efectúa la transmisión genética a las células hijas
La información genética también se transmite a la descendencia: en el caso del ser
humano debemos recordar que al comienzo de su gestación está formado por una sola célula,
la célula huevo o cigoto, formada por la unión del óvulo y el espermatozoide. Durante la
fecundación se produce la unión del material genético de la madre, contenido en el óvulo, con
el del padre, contenido en el espermatozoide. La forma en que se originan el óvulo y el
espermatozoide es algo distinta a la mitosis y se llama meiosis. Por lo tanto, la transmisión de
la información genética a la descendencia se produce cuando se originan las células
germinales, durante el proceso de meiosis.

188
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

ESTRUCTURA DEL GEN

EL PROMOTOR inicio de la transcripción, señala a partir de que nucleótido debe
transcribirse el gen. Suele localizarse en el extremo 5’ del segmento codificador, donde
comienza la síntesis de ARN.
Secuencias reguladoras que determina cuando debe transcribirse el gen y cuantas
veces debe hacerlo. Se localiza lejos del codificador. Hay dos tipos de reguladores,
amplificadores y los inhibidores.
Segmento codificador
Secuencia de terminación cerca del extremo 3’ del segmento codificador el gen posee
un tramo de ADN llamado secuencia de terminación (no confundir con codón de terminación
del ARNm) que marca la conclusión de la síntesis del ARN.

DUPLICACION DEL ADN

Tras la propuesta de Watson y Crick de la estructura del DNA, los científicos centraron su
atención en cómo se replica esta molécula. Este proceso es una función esencial del material
genético y debe ser ejecutado con precisión, si, tras la división celular, se ha de mantener la
continuidad genética entre células. Watson y Crack sugirieron en su artículo en 1953, que el
modelo de doble hélice les proporcionó una pista inicial de cómo puede producirse la
duplicación, y lo llamaron modelo de replicación semiconservativa, el cual ha recibido desde
entonces sólidas confirmaciones experimentales en estudios de virus, procariotas y eucariotas.
Este modelo supone que, debido a la ordenación y naturaleza
de las bases nitrogenadas, cada cadena de DNA de la doble hélice
podía servir de molde par la síntesis de su complementaria.
Propusieron que si la hélice estuviese desenrollada, cada
nucleótido a lo largo de las dos cadenas parentales tendría
afinidad por su nucleótido complementario. Si a lo largo de
ambos moldes estos nucleótidos se uniesen covalentemente en
cadenas polinucleotídicas, el resultado sería la producción de dos
dobles cadenas de ADN idénticas. Cada molécula de ADN
replicada consistiría en una cadena vieja y una cadena nueva, de
aquí su nombre.
Hay otras dos posibles formas de replicación que también se
basan en las cadenas parentales como moldes. En la replicación
conservativa, la síntesis de las cadenas polinucleotídicas
complementarias se produciría como se ha descrito
anteriormente. Después de la síntesis sin embargo, las dos cadenas recién creadas se
juntarían y cadenas parentales se reasociarían. Así se conservaría la hélice original. En la
tercera alternativa, denominada replicación dispersiva, las cadenas parentales se dispersarían
entre las dos nuevas dobles hélices después de la replicación.

189
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

De este modo, cada cadena estaría formada por DNA viejo y nuevo. Este modelo
implicaría el corte de las cadenas parentales durante la replicación. Es la mas complejas de las
tres y la menos probable.

El experimento de Mesenlson-Stahl
En 1958, Meselson y Stahl publicaron los resultados de un experimento que proporcionaba
sólidas pruebas de que la replicación semiconservativa es la forma que utilizan las células
para producir nuevas moléculas de ADN.
La replicación es asincrónica: no todo el ADN se duplica al mismo tiempo, hay diferencias
intracromosómicas e intercromosómicas
La duplicación es Secuencial y bidireccional desde puntos fijos.
Los orígenes de replicación son los puntos fijos a partir de los cuales se lleva cabo la
replicación, que avanza de forma secuencial formando estructuras con forma de horquilla. Por
otro lado, la replicación se lleva a cabo bidireccionalmente, es decir, a partir de cada origen se
sintetizan las dos cadenas en ambos sentidos.

El origen de replicación
La cantidad de ADN que se puede sintetizar a partir de un único origen de replicación se
denomina replicón o unidad funcional de replicación. Cada origen define un replicón. El
genoma bacteriano es un replicón único circular. En organismos eucarióticos, la
replicación del ADN se inicia en múltiples orígenes a la vez es decir, hay varios replicones.

190
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

En las células eucariotas hay varios replicones

Secuencialidad
Se realizaron estudios genéticos que permitieron determinar que desde los orígenes la
replicación avanza de forma secuencial. El experimento permitió demostrar, que la replicación
sigue un orden (es secuencial).Todo el ADN se duplica una sola vez y una vez que se duplica
se bloquea por un mecanismo desconocido.

La replicación avanza en forma de horquilla

Debido a que en la célula ambas cadenas de la doble hélice de ADN se duplican al mismo
tiempo, éstas deben separarse para que cada una de ellas sirva de molde para la síntesis de
una nueva cadena. Por eso, la replicación avanza con una estructura en forma de horquilla
formándose una burbuja u ojo de replicación (también llamada estructura θ cuando el ADN es
circular debido a la similaridad entre la letra griega y la forma que adopta el cromosoma
bacteriano en estados intermedios de replicación, no obstante pudiendo aparecer estructuras
alternativas), que avanza en dirección a la región de ADN no duplicado dejando atrás los dos
moldes de ADN de cadena simple donde se está produciendo la replicación.
Bidireccionalidad
El movimiento de la horquilla es bidireccional en la
mayoría de los casos, es decir, a partir de un punto se
sintetizan las dos cadenas en ambos sentidos. Esto ocurre en
la mayoría de los organismos, pero se dan excepciones en
algunos procariontes debido a que los mecanismos de
replicación que tienen lugar dependen de la propia estructura
de su material hereditario (si el ADN es circular, lineal,
bicatenario o monocatenario).
Así, en casos particulares como el ADN mitocondrial,
algunos plásmidos y algunos genomas monocatenarios de
fagos pequeños, la replicación se da unidireccionalmente
pudiendo haber uno o dos orígenes de replicación.
Distinción entre la replicación unidireccional y la
bidireccional mediante el recuento de copias de genes
marcadores. O es el origen de replicación y A, B, C, D, E
son genes marcadores.

MECANISMO MOLECULAR DE LA DUPLICACIÓN:

Desenrollamiento de la doble hélice en un sitio determinado de la molécula
Separación de las dos cadenas
Colocación en fase de los nucleótidos complementarios
Unión de los nucleótidos por acción de la enzima DNA polimerasa 5´ 3`
Enlaces por puentes de H

191
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

ENZIMOLOGÍA DE LA REPLICACIÓN DEL ADN

La primera publicación sobre la enzimología de la replicación del ADN la hicieron Arthur
Kornberg y sus colaboradores en 1957. Estos investigadores aislaron una enzima de E. coli
que podía dirigir la síntesis del DNA en un sistema exento de células (in Vitro). Actualmente
esta enzima recibe el nombre de DNA polimerasa I, ya que fue la primera en aislarse.
Konnberg determinó que hay dos requisitos importantes para la síntesis de DNA in Vitro
dirigida por esta enzima:
todos los desoxirribonucleótidos trifosfato (dNTP)
DNA molde
El dNTP precursor contiene los tres grupos fosfatos unidos al carbono 5` de la
desoxirribosa. Como durante la síntesis se cortan los dos fosfatos terminales, el fosfato
restante unido al carbono 5`se une covalentemente al grupo 3`-OH de la
desoxirribosa a la que se añade el nucleótido. Cada paso alarga en un nucleótido la
cadena que esta creciendo. Este alargamiento o elongación se produce en la dirección
5´ 3`.
Aunque el DNA sintetizado bajo la dirección de la polimerasa I demostró actividad
biológica, en 1969 a través de otras investigaciones se descubrió que una cepa de [Link] que
era deficiente para la actividad de la DNA poli I, todavía duplicaba su ADN y se reproducía con
éxito, pero no podía repara el DNA. Esto llevó a dos conclusiones:
Debe haber al menos otra enzima presentes en las células de [Link] que pueda replicar
al DNA in vivo
La DNA poli I debe tener una función secundaria in vivo.
Hasta la fecha se han aislado dos DNA polimerasas a partir de las células que no tienen
actividad para la DNA poli I: DNA polimerasa II y III. Las tres polimerasas comparten ciertas
características. Mientras que ninguna puede iniciar la síntesis de DNA a partir del molde, todas
pueden alargar una cadena existente a partir de un cebador. Las tres poseen actividad
exonucleasa 3` 5`, esto significa que pueden polimerizar en una dirección y luego
escindir los nucleótidos que acaban de añadir (corrección de prueba)
La DNA poli I muestra actividad exonucleasa 5´ 3`. Esta capacidad le permite
escindir nucleótidos empezando por el extremo donde se inició la síntesis y continuando en la
misma dirección que la síntesis, de este modo la DNA poli I tiene capacidad de eliminar el
cebador de RNA.
Se considera que la ADN poli III es la enzima imprescindible responsable de la
polimerización esencial para la duplicación.
La polimerasa II parece estar implicada en la síntesis reparadora del DNA dañado por
agentes externos, como la luz ultravioleta.

MODELO DE SÍNTESIS DE DNA

Hasta ahora hemos establecido que en bacterias
y en la mayoría de los virus la replicación es
semiconservativa y bidireccional en un solo replicón
(un solo oriC), a diferencia de los eucariotas en los
que la duplicación del ADN es generada a partir de
múltiples orígenes de replicación. No debemos
confundir con unidades de transcripción que son los
lazos, hay entre 20 a 30 orígenes por cada lazo de
cromatina de 30 nm. En los orígenes hay secuencias
de ADN especiales, que tiene en común secuencias conservadas denominadas ARS.(señal de
iniciación.)
También sabemos que la síntesis se produce en dirección 5` 3`bajo la dirección de la
DNA poli III, formándose dos horquillas de replicación. Estas se mueven en direcciones

192
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

opuestas a partir del origen de la síntesis. Debemos resolver muchas cuestiones para
establecer un modelo coherente sobre la replicación del ADN:
debe existir un mecanismo mediante el que la hélice se desenrolle localmente y se
estabilice de manera que la síntesis pueda realizarse a lo largo de las dos cadenas de
DNA.
a medida que va desenrollándose y sintetizándose el DNA, deber reducirse la tensión
que el incremento del enrollamiento causa en la hélice.
debe sintetizarse algún tipo de cebador para que pueda iniciarse la polimerización
dirigida por al ADN poli III
una vez que se han sintetizado los cebadores de RNA, la DNA poli III inicia la síntesis de
las moléculas complementarias de ambas cadenas parentales. Puesto que las dos
cadenas son antiparalelas, sólo es posible la síntesis continua de una de las cadenas en
el sentido en que se mueve la horquilla de replicación. En la otra cadena, la síntesis es
discontinua en el sentido opuesto.
deben eliminarse los cebadores de RNA antes de que termine la replicación. Los huecos
que temporalmente se forman deben rellenarse con DNA complementario al molde de
cada sitio.
las cadenas de DNA recién sintetizadas que rellenan cada uno de los huecos temporales
deben ser ligadas a la cadena de DNA adyacente.

La helicasa rompe los puentes de hidrógeno de la doble hélice permitiendo el avance de

la horquilla de replicación.
La topoisomerasa impide que el ADN se enrede debido al superenrollamiento producido
por la separación de la doble hélice.
Las proteínas SSB se unen a la hebra discontinua de ADN, impidiendo que ésta se una
consigo misma.
La ADN polimerasa sintetiza la cadena complementaria de forma continua en la hebra
adelantada y de forma discontinua en la hebra rezagada.
La ARN primasa sintetiza el cebador de ARN necesario para la síntesis de la cadena
complementaria a la cadena rezagada.
La ADN ligasa une los fragmentos de Okazaki.
El cebador: son pequeñas unidades de RNA que se unen a los fragmentos para que la
ADN polimerasa reconozca donde debe unirse. Los cebadores los quita la pol. I y coloca bases
a la cadena en crecimiento por la ligasa.
El proceso se puede dividir en 3 fases: iniciación, elongación y terminación.

193
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

INICIACIÓN:
Reconocimiento de los orígenes de replicación; separación de las hebras y
posicionamiento de la maquinaria de replicación
Mediante consumo de ATP en dirección a la horquilla de replicación, es decir, en dirección
5' → 3' en la hebra rezagada y 3' → 5' en la hebra adelantada, la helicasa actúa rompiendo los
puentes de hidrógeno que mantienen unida la doble hélice. El siguiente conjunto de
proteínas reclutadas son las denominadas proteínas SSB (single-stranded DNA binding
proteins, proteínas ligantes de ADN monocatenario) encargadas de la estabilización del ADN
monocatenario generado por la acción de las helicasas, impidiendo así que el ADN se
renaturalice o forme de nuevo la doble hélice, de manera que pueda servir de molde. Estas
proteínas se unen de forma cooperativa, por lo que su unión al DNA conforme avanza la
helicasa es rápida. Por otro lado, conforme las helicasas van avanzando se van generando
superenrollamientos en la doble cadena de ADN por delante de la horquilla y si éstos no
fueran eliminados, llegado a un punto el replisoma ya no podría seguir avanzando. Las
Topoisomerasa son las enzimas encargadas de eliminar los superenrollamientos cortando una
o las dos cadenas de ADN y pasándolas a través de la rotura realizada, sellando a continuación
la brecha.2
ELONGACIÓN
Crecimiento bidireccional de las horquillas, replicación semiconservativa
semidiscontinua y coordinada
En el siguiente paso, la holoenzima ADN Pol III cataliza la síntesis de las nuevas cadenas
añadiendo nucleótidos sobre el molde. Esta síntesis se da bidireccionalmente desde cada
origen, con dos horquillas de replicación que avanzan en sentido opuesto. Cuando el avance
de dos horquillas adyacentes las lleva a encontrarse, es decir, cuando dos burbujas se tocan,
se fusionan, y cuando todas se han fusionado todo el cromosoma ha quedado replicado.

LA HORQUILLA DE REPLICACIÓN
El desenrollamiento es realizado por las enzimas ADN-helicasas, las cuales recorren la
hélice desenrollando las hebras del ADN a medida que avanzan. Una vez separadas, las
cadenas se combinan con las proteínas SSB, llamadas también estabilizadoras que evitan el
autoapareamiento entre las bases complementarias libremente expuestas.

A medida que la helicasa abre la doble hélice, dos enzimas complementarias: la

Topoisomerasa I y la Topoisomerasa II o girasa, van disminuyendo la tensión torsional
acumulada por el superenrollamientos en el sector no replicado de la doble hélice. La
Topoisomerasa I primero corta una de las cadenas del ADN, luego la cadena cortada gira una
vuelta en torno a su propio eje y finalmente vuelve a unir los extremos cortados. La
Topoisomerasa II corta las dos cadenas, las cuales luego de girar una vuelta alrededor del eje
de la doble hélice, restablecen sus uniones.

194
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

El proceso de replicación es bidireccional: al abrirse la doble hélice se forma una “burbuja

de replicación”, cuyo tamaño aumenta a medida que avanza la separación de las dos cadenas
del ADN, fenómeno que se produce en ambos extremos de de la burbuja en forma simultánea.
Se establece de este modo, en cada uno de los extremos, una estructura en forma de Y a la
que llamamos horquilla de replicación, que representan las regiones de la síntesis activa del
ADN, cuyos brazos representan a las cadenas ya separadas del ADN y el tronco la doble hélice
en vías de separación. Así cada burbuja tiene dos horquillas de replicación que a partir de un
punto de origen avanzan en direcciones opuestas. Las horquillas desaparecen cuando se van
integrando las burbujas contiguas. Las horquillas recorren los telómeros y desaparecen cuando
se separa el último nucleótido.

Para iniciar la síntesis de las cadenas complementarias

se requiere además del ADN molde un cebador o primer,
que consiste en una pequeña cadena de ARN de unos diez
nucleótidos de largo. La síntesis del cebador es catalizada
por una enzima llamada ARN primasa, (ARN polimerasa
ADN dependiente) la cual no precisa de un extremo 3`libre
para iniciar la síntesis. Una vez sintetizado el cebador, el
cual queda temporariamente unido al ADN, la síntesis
continua si la ADN polimerasa tiene disponibles suficientes
dNTP, estos se agregan a la cadena nueva de acuerdo a la
secuencia de nucleótidos de la cadena que sirve de molde
(template). Luego el cebador es escindido y reemplazado
por ADN.

195
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Existen diferencias en el modo como se sintetizan las dos cadenas de ADN

Una de las características de la ADN polimerasa es que sólo puede actuar en dirección
5` 3`, por agregado de nucleótido en el extremo 3`de las cadenas nuevas. Debemos
recordar que las dos cadenas son antiparalelas y a nivel de cada horquilla de replicación,
conforme sus dos cadenas se separan, una presenta sus nucleótidos corriendo en dirección 5`
3` y la otra en dirección 3` 5`, de modo que la primera al ser copiada, debería gestar una
cadena hija que crezca en dirección 3` 5`, algo que ninguna ADN polimerasa puede hacer. La
célula resuelve esta situación utilizando distintas estrategias en la construcción de las cadenas
nuevas. La cadena hija que adopta como molde a la cadena progenitora que corre en dirección
3` 5` se construye, al crecer en dirección 5` 3` en forma continua denominándose cadena
líder o hebra conductora. En cambio la otra cadena hija, cuyo molde es la cadena del ADN
progenitor que corre en dirección 5` a 3`, es sintetizada de un modo singular, ya que para
poder crecer en esa dirección debe sintetizarse en dirección opuesta al avance de la horquilla
de replicación. El problema se supera haciendo que la síntesis sea discontinua, lo cual significa
que la nueva cadena se construye de a pequeños tramos – llamados fragmentos de Okazaki –
los cuales se ligan entre si a medida que se generan.
Cada fragmento de Okazaki se sintetiza mediante copia de un tramo de la cadena
progenitora relativamente alejado del ángulo de la horquilla, por “detrás del último fragmento
construido. Así el tramo progenitor más cercano a la horquilla, permanece sin copiar, aunque a
esa altura la cadena continua ya fue copiada. Por eso se la conoce como cadena retrasada.
Cebadores de ARN forman parte de estos fragmentos, los cuales se eliminan por acción de la
ADN polimerasa I y los irá rellenando con ADN
Finalmente interviene la ADN ligasa que empalma entre si los diferentes fragmentos de la
hebra de
crecimiento
discontinuo.

La mitad del dímero de la holoenzima ADN Pol

III sintetiza la hebra adelantada y la otra mitad la
hebra rezagada. La elongación de la hebra rezagada
ocurre por medio del modelo del trombón.
Síntesis simultánea de la cadena líder y de la
retrasada: ¿Cómo la holoenzima de la DNA
polimerasa III lleva a cabo la síntesis de la cadena
líder y de la retrasada?
Se cree que existe un mecanismo que permite la
síntesis simultánea de las dos cadenas en la horquilla
de replicación, ocurriendo la polimerización de los
nucleótidos sobre cada cadena molde bajo la
dirección de uno de los dos monómeros que forman
la enzima. Si la cadena retrasada forma un bucle, es

196
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

posible que ocurra síntesis simultánea. El bucle invierte la orientación del molde pero no la
dirección de la síntesis. Cabe señalar que las ADN polimerasa son sostenidas por un anillo
proteico llamado PCNA, una abrazadera, mientras realiza el deslizamiento por la cadena. Al
observar el mecanismo se puede constatar que al ADN polimerasa de la cadena continua no se
separa del ADN por el aro que la sujeta, cosa que si ocurre en la cadena discontinua, una vez
completa la síntesis de un fragmento la enzima se libera.

PRINCIPALES ENZIMAS QUE ACTUAN EN LA REPLICACIÓN

Enzimas Reacciones que catalizan
Elimina el cebador,
reemplazando los ribonucleótidos
ADN-polimerasa I (procariontes)
por desoxirribonucleótidos. Rellena
los huecos del ADN.
ADN-polimerasa II Nucleasa, corrige errores.
(procariontes)
Principal enzima de la
ADN-polimerasa III replicación. Sintetiza la cadena
(procariontes) nueva a partir del cebador. Realiza
corrección de pruebas.
ADN-polimerasa Sintetiza los fragmentos de ADN
alfa(eucariontes discontinuos a partir del cebador.
ADN-polimerasa beta Rellena los huecos dejados por
(eucariontes) el cebador y repara errores como un
segundo sistema de reparación.

Sintetiza la hebra continua a

ADN-polimerasa delta partir del cebador y realiza lecturas
(eucariontes)
de prueba.
Rompen los puentes de
Helicasas hidrógeno, separando las cadenas
del ADN.
Primasas Sintetizan el primer o cebador.
Se extienden sobre las hebras
del ADN evitando
Proteínas SSB
autoapareamientos entre las bases
libremente expuestas
Topoisomerasas I y II Corrigen el superenrollamiento
Degrada la hebra de ARN de los
ARNasa H
híbridos ARN-ADN
En procariotas los cebadores de ARN son eliminados mediante la acción de la polimerasa I.
Adicionalmente a su actividad como polimerasa, la poli I actúa como una exonucleasa capaz de
hidrolizar el ADN (o ARN) tanto en dirección 3´a 5´ como en la 5´a 3´. La acción de la poli I
como exonucleasa de 3´a 5´ elimina ribonucleótidos de los extremos 5´de los fragmentos de
Okazaki, permitiendo la sustitución con deoxirribonucleótidos para dar lugar a fragmentos
constituidos completamente por ADN. En células eucariotas, los cebadores de ARN son

197
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

eliminados por la acción combinada de la ARNasa H, una enzima que degrada la hebra de ARN
de los híbridos ARN-ADN, y es una exonucleasa en dirección 5´a 3´. Los huecos resultantes
son rellenados por la polimerasa (delta) y los fragmentos de ADN son unidos mediante la ADN
ligasa, generando una hebra tardía intacta.

EL PROCESO DE LA TRANSCRIPCIÓN

Mecanismo general de la transcripción

1. Para efectuar la transcripción se requieren modificaciones reversibles de las

HISTONAS, algunas de las cuales parecen estar relacionadas con la descondensación
del DNA para convertir los genes den activos. Para que el DNA se transcriba ha de sufrir
los siguientes cambios:

Perdida de la estructura de la fibra de 30 nm, mediante la eliminación de las H1,

y adquisición de la estructura de 10 nm
Acetilación de las otras histonas (H2A, H2B, H3 y H4) en las lisinas próximas al
extremo amino.
A los nucleosomas de los genes activos se unen las proteínas no histónicas del
grupo de alta movilidad (HMG)lo que contribuye a la descondensación de la cromatina

2. La transcripción se realiza por la enzima RNA polimerasa formada por varias

cadenas polipeptídicas. La subunidad sigma actúa como factor de iniciación en la
transcripción (en procariotas). En eucariotas tres clases de RNA polimerasas en
eucariotas según el tipo de RNA que van a transcribir.
3. La RNA polimerasa comienza a transcribir cuando encuentra una secuencia de
DNA llamada PROMOTOR, y termina cuando encuentra una secuencia de DNA llamada
señal de terminación. El DNA promotor consta de dos secuencias (secuencias consenso)
muy conservadas en la evolución.
4. La RNA polimerasa trabaja en cadena. Sobre el DNA se observan múltiples
moléculas de RNA polimerasa, cada una con un transcripto de RNA cuya longitud va
aumentando conforme la RNA polimerasa se aleja del punto de iniciación. Como el RNA
sintetizado no ha de formar doble hélice con el DNA patrón, se dispone de modo que las
cadenas de RNA transcrito cuelgan a uno y otro lado de la cadena de DNA que está
siendo copiada.
5. Aunque se encuentren
muchas ARN polimerasa
trabajando al mismo tiempo,
todas van copiando en la
dirección 5´ 3 por lo tanto se
copia una sola cadena del doble
helicoide. El DNA promotor
determina cual de las dos
cadenas es copiada, y como la
RNA polimerasa copia en el
sentido 5´ 3 solo puede
copiar la cadena que vaya en
sentido 3´ 5´. Puede ocurrir
también que se estén copiando
las dos cadenas a la vez, pero
nunca en los mismos segmentos.
6. En la transcripción intervienen factores de naturaleza proteica.

198
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

7. Los nucleosomas ( en eucariotas) se mantienen durante la transcripción. Se han dado

dos explicaciones :

 Los dos tetrámeros de cada octámero se separan solo momentáneamente

mientras pasa la RNA polimerasa; y
 El octámero libera primero una vuelta de DNA, que es copiada por la RNA
polimerasa; a continuación se enrolla de nuevo esa vuelta y se libera la otra
para que sea copiada y, terminado el proceso, esta segunda vuelta vuelve a
quedar enrollada.

Para regular la transcripción existen juegos de proteínas de regulación génica o proteínas

reguladoras que reconocen determinadas secuencias de la doble cadena de DNA y determinan
cual o cuales de los miles de genes debe iniciar la transcripción. Hay cientos de estas
proteínas, unas activadoras y otras represoras. Las proteínas activadoras se unen a la RNA
polimerasa y las represoras a los DNA promotores inhibiendo específicamente la transcripción.

LUGAR DE LA TRANSCRIPCION
1. TRANSCRIPCIÓN DEL ARN m: se origina en genes llamados estructurales
que se encuentran fuera del ADN organizador nucleolar.
2. TRANSCRIPCION DEL ARN t : se origina de genes llamados determinantes
que están fuera del organizador nucleolar
3. TRANSCRIPCION DEL ARN r: ARN r 18 S, 28S y 5,8 S, se originan a partir de
ARNr 45S, el cual se origina en genes determinantes que están dentro del
organizador nucleolar. El ARNr 5S se origina en genes determinantes fuera del
nucleolo.

La transcripción consiste en la síntesis de ARN a partir de un molde de ADN.

A continuación realizaremos una descripción general del proceso de transcripción tomando
en cuenta los aspectos comunes a la síntesis de los distintos tipos de ARN.
La transcripción, tanto en células procariotas como eucariotas, involucra la participación
de una enzima ARN polimerasa ADN dependiente. Ésta sintetiza una cadena de ARN cuyos
inicio, terminación y secuencia de bases vienen determinados por el propio gen.
El primer paso de la transcripción es la unión de la enzima ARN polimerasa a una región
del gen llamada promotor. El promotor es una secuencia específica de bases con alta afinidad
por la enzima, por lo que proporciona a la misma su sitio de unión al ADN. Es asimismo una
señal que indica cuál cadena se ha de transcribir. La transcripción es asimétrica, pues
usualmente sólo se transcribe una de las dos cadenas que forman cada gen. La cadena que
actúa como plantilla es la cadena molde, negativa o no codificante; la hebra no transcripta,
complementaria de la anterior, se denomina antimolde, positiva o codificante. La ARN
polimerasa se desplaza sobre la cadena molde, recorriéndola en dirección 3’ => 5’ o “río
abajo” y transcribiéndola a partir del nucleótido que el promotor señala como punto de inicio
de la transcripción. Este nucleótido se nombra +1 y los siguientes, río abajo, siguen la
numeración correlativa (+2, +3, etc.). Partiendo desde el punto de inicio en la dirección
contraria, es decir “río o corriente arriba”, los nucleótidos se numeran –1, -2, etc.
La ARN polimerasa sólo puede desplazarse y transcribir si previamente la doble hélice
sufre un desenrollamiento y fusión (separación de las cadenas complementarias por ruptura de
los puentes de hidrógeno entre las bases). La misma enzima cataliza ambos procesos,
generando hacia el extremo 3´ una burbuja de transcripción, un tramo de
aproximadamente 12 nucleótidos de longitud, en el cual las cadenas permanecen
desapareadas. La burbuja de transcripción aparenta avanzar río abajo junto con la enzima,
pues a medida que progresa la fusión por delante de ella, la doble hélice se recompone por
detrás.

199
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La formación de la burbuja causa una supertorsión o superenrollamiento de la doble hélice

en los sectores ubicados hacia el extremo 5’ del molde. Este fenómeno es corregido por la
acción de una enzima topoisomerasa I.

- Burbuja de transcripción
Cuando el molde ya ha sido desapareado en la burbuja de transcripción y expone sus
bases, éstas son reconocidas por la ARN polimerasa. A medida que la enzima “lee” la plantilla,
coloca junto a cada base de la misma el ribonucleótido trifosfato portador de la base
complementaria. A los desoxirribonucleótidos de A, T, C y G se le aparean, respectivamente,
los ribonucleótidos de U (recordemos que el ARN no contiene T), A, G y C mediante puentes de
hidrógeno. Una vez ubicados los dos primeros ribonucleótidos, la enzima cataliza la formación
del puente fosfodiéster entre ambos, iniciándose la cadena de ARN.

- Dirección de la transcripción
El enlace fosfodiéster se produce entre el
hidroxilo en posición 3’ del primer nucleótido y el
grupo fosfato interno, en posición 5’, del segundo.
Un grupo pirofosfato de este último es liberado
como producto y escindido rápidamente en dos
fosfatos por la acción de una pirofosfatasa. Dicha
ruptura es tan exergónica que la reacción inversa
se torna prácticamente imposible. Así, desde el
punto de vista termodinámico, se favorece la
síntesis de la nueva cadena. Por lo tanto, son los
mismos sustratos los que, por estar trifosfatados,
aportan la energía necesaria para su
polimerización.
Este procedimiento se repite tantas veces
como nucleótidos contenga el molde, de tal
manera que el ARN va creciendo en forma

200
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

antiparalela a aquél, es decir, desde su extremo 5’ (el que quedó libre en el primer nucleótido)
hasta su extremo 3’ (que quedará libre en el último nucleótido añadido). La dirección de la
síntesis del ARN es 5´ => 3´.
Siempre los nucleótidos recién incorporados al ARN forman una hélice corta ARN-ADN con
su plantilla. Esta hélice híbrida es transitoria, pues conforme el polímero se alarga por su
extremo 3’, el extremo 5’ se separa del molde, el cual vuelve a emparejarse con su hebra de
ADN complementaria.
La transcripción concluye cuando la ARN polimerasa alcanza una señal (una secuencia
específica de bases del ADN) que actúa como señal de terminación.
El producto obtenido, un ARN transcripto primario, resulta una copia complementaria y
antiparalela de una región del gen comprendida entre el punto de inicio y la señal de
terminación.

ARN en distintos estadios de transcripción sobres mismo gen

El transcripto primario repite la dirección y la secuencia (excepto porque lleva U en vez de
T) de la hebra no copiada o antimolde, lo que justifica que a esta última se apliquen las
denominaciones de hebra positiva o codificante. Es la cadena convencionalmente elegida para
representar un gen.
Cabe aclarar que al describir la transcripción en forma general, hemos omitido la mención
de regiones reguladoras de los genes, bajo cuyo control se encuentran los acontecimientos
analizados. Este aspecto del tema será desarrollado más adelante en el mismo capítulo.
En el siguiente cuadro resumimos los requisitos de la transcripción:
Una molécula de ADN molde, con región promotora, que indica el inicio de la
transcripción, con secuencia de terminación, que marca el fin del proceso, y un
segmento que será expresado.
Una enzima ARN polimerasa que:
-reconoce las secuencias señalizadoras,
-abre la hélice,
-lee el molde (de 3´a 5´),
-reconoce y ubica los sustratos complementarios,
-polimeriza los sustratos (de 5´a 3´).

201
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Cofactores enzimáticos de la ARN polimerasa: Mg++ o Mn++.

Sustratos: UTP, ATP, GTP Y CTP.
Una fuente de energía: los mismos sustratos.
Una pirofosfatasa.
Una topoisomerasa I.

A partir de distintos genes se transcriben diferentes clases de ARN: ARN

mensajero(ARNm),ARN de transferencia(ARNt),ARN ribosómico(ARNr),ARN
pequeños nucleares y citoplasmáticos (ARNpn/ARNpc respectivamente).

202
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

ARN pol
Promotor

203
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Transcripción mediante la ARN polimerasa en E. coli:

La polimerasa se une inicialmente al ADN de forma no específica y recorre la molécula
hasta que la subunidad sigma se une a los promotores -35 -10, danto lugar a un complejo
promotor cerrado. Entonces la polimerasa va separando las dos cadenas de ADN alrededor del
sitio de iniciación y comienza la transcripción mediante la polimerización de los NTP libres. La
subunidad sigma se separa del núcleo de la polimerasa, que se desplaza a lo largo del ADN y
va alargando la cadena de ARN en crecimiento. Durante la elongación, la polimerasa
permanece asociada a su molde mientras continúa la síntesis de ARNm. A medida que avanza,
la polimerasa desenrolla el molde de ADN que tiene por delante y vuelve a enrollar el ADN que
queda detrás, manteniendo una región desenrollada de unos 15 pb en la región de
transcripción.}
En el interior de esta porción desenrollada, unos 9 pb de la cadena creciente de ARn se
encuentran unidas a la hebra de ADN molde complementaria. La síntesis de ARN continúa
hasta que la polimerasa encuentra una señal de terminación, tras lo cual se detienen la
transcripción, se separan el ARN y la polimerasa y la enzima se disocia del molde de ADN.

ARN POLIMERASA EUCARIÓTICAS Y FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN GENERALES

Pese a que la transcripción se lleva a cabo siguiendo una serie de mecanismos comunes a
todas las células, es considerablemente más complejo en células eucariotas que en bacterias.
Mientras que en bacterias todos los genes se transcriben por medio de una ARN polimerasa
única, las células eucariotas contienen varias ARN polimerasas distintas que transcriben
distintas clases de genes. En segundo lugar, las ARN poli eucarióticas interaccionan con un
conjunto de proteínas específicas para iniciar la transcripción. Finalmente la transcripción en
eucariotas tiene lugar sobre la cromatina en lugar de sobre ADN libre, y la regulación de la
estructura cromatínica es un factor importante en la actividad transcripcional de los genes
eucarióticos
Las células eucarióticas contienen tres tipos de ARN polimerasas nucleares que transcriben
distintos tipos de genes. Los genes codificadores de proteínas son transcritos por la ARN poli II
para dar ARNm. Los ARN ribosómicos (ARNr) y de transferencia (ARNt) se obtienen por medio
de las ARN poli I y III.
Dado que la ARN poli II es responsable de la síntesis de ARNm a partir de genes codificantes
de proteínas, solo lo puede hacer si se añaden proteínas adicionales a la reacción. Por tanto, la
transcripción en sistemas eucarióticos precisa de distintos factores de iniciación que no forman
parte de la ARN polimerasa.
Han sido definidos dos tipos de factores de transcripción. Los factores de transcripción
generales están implicados en la transcripción en todos los promotores de la poli II y se
considera parte de la maquinaria transcripcional básica. Otros factores transcripcionales se
unen a secuencias de ADN que controlan la expresión de genes individuales y son por tanto
responsables de regular la expresión génica.
ARNm EUCARIOTA
1- se requieren cinco factores generales de transcripción para poner en marcha la
transcripción por la ARN poli II: TFIID, TFIIB, TFIIF, TFIIF Y TFIIH.
2- Dos de las subunidades de TFIIH son helicasas que desenrollan el ADN alrededor
del sitio de iniciación.
La mayoría de los ARNm eucariotas presentan la secuencia del mensaje interrumpida, es
decir coexisten a lo largo de la molécula sectores que codifican para la proteína llamados
EXONES, con secuencias intercaladas sin información denominadas INTRONES (Fig. 12.9).

204
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Los ARNm transcriptos primarios sufren una serie de modificaciones antes de salir al
citoplasma como ARNm maduro.
Algunos cambios consisten en el agregado de moléculas en los extremos 5' y 3' llamados
capping y poliadenilación.
Capping: Ésta es la denominación del proceso por el cual se adiciona en el extremo 5' del
ARNm una molécula de 7 metil-guanosina (un nucleótido metilado) a la que se conoce como
cap (del inglés, capuchón). Ésta molécula se agrega al ARNm naciente cuando éste alcanza,
aproximadamente, los 30 nucleótidos de longitud. Por ser esta modificación simultánea a la
transcripción se la considera co-transcripcional. La cap impide la degradación del ARNm
inmaduro por nucleasas y fosfatasas nucleares. También participa en la remoción de intrones y
en el inicio de la traducción. Y suministrar una estructura que sea reconocida por los ribosomas
para iniciar la traducción.
Poliadenilación: Este proceso consiste en el agregado de alrededor de unas 250
adenosinas o cola poli A, en el extremo 3' del ARNm. El ARNm presenta una secuencia de
nucleótidos específica AAUAAA conocida como señal de poliadenilación. Una nucleasa corta al
pre-ARNm a unos 20 nucleótidos después de la señal. Una vez liberado el pre-ARNm, la
enzima poliA-polimerasa le agrega
las adenosinas de a una por vez. Por
otra parte la ARN pol II continúa
transcribiendo un tramo más del
molde, para finalmente disociarse del
gen. Este último tramo de ARN es
totalmente infructuoso, pues resulta
rápidamente degradado por
nucleasas y fosfatasas.
Las funciones de la cola poli A
son: proteger el extremo 3' de la
degradación y ayudar a los ARNm a
salir del núcleo.
Carecen de cola poli A los ARNm
de histonas, dado que como ya se
mencionó, no presentan la señal de
poliadenilación. Otra excepción la
ejemplifican algunos genes que presentan más de una señal de poliadenilación. Cuando así
ocurre, el mismo gen puede ser transcripto en dos productos diferentes, dependiendo de cuál
sea la señal reconocida.

Otra modificación significativa afecta a la secuencia codificadora, que sufre un

acortamiento producto de la eliminación de los intrones, quedando como producto final los
exones empalmados en secuencia continua. Este tipo de procesamiento se llama empalme
(splicing) y fue descubierto en 1977.

Para que se lleve a cabo este tipo de maduración del pre-ARNm se necesita una batería de
ribonucleoproteínas nucleares: las RNPpn ( snRNP, del inglés, small nuclear
ribonucleoprotein). Estas partículas ricas en uridinas y diversas proteínas se denominan U 1, U2,
U4, U5, U6 y se combinan de a una por vez en los extremos de cada intrón (lindantes a sendos
exones). El complejo resultante del ensamblado de las distintas RPNpn se denomina

205
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

espliceosoma. La actividad enzimática residiría en los ARNpn del espliceosoma. Éstos serían
los responsables de reconocer las secuencias señalizadoras de corte, escindir a los intrones y
empalmar a los exones entre ellos, produciendo una molécula de ARNm maduro.
Si bien el proceso transcripcional es básicamente similar en procariotas y eucariotas,
existen diferencias que detallaremos a continuación:
EUCARIOTAS PROCARIOTAS
1- La transcripción es llevada a cabo por 1- La transcripción es llevada a cabo por
tres tipos de enzima ARN polimerasa, cada un solo tipo de ARN polimerasa que sintetiza
una especializada en la síntesis de los distintos las diversas clases de ARN.
tipos de ARN:
La ARN pol. Bacteriana es un complejo
La ARN polimerasa I transcribe genes del proteico oligomérico constituido por seis
ADN nucleolar que codifican para los ARNr 45S subunidades. Excepto la subunidad sigma (),
el resto conforma un núcleo enzimático.
La ARN polimerasa II transcribe genes
Todo el complejo constituye una holoenzima
del ADN no nucleolar que codifican para todos
capacitada para leer las secuencias
los ARNm y para la mayoría de los ARNpn.
promotoras.
La ARN polimerasa III transcribe genes
del ADN no nucleolar que codifican para los
ARNt, los ARNr 5S,los ARNpc y para el resto
de los ARNpn.
2- Las ARN polimerasas eucariotas no se 2- Si bien la ARN polimerasa bacteriana
unen al ADN molde en su sitio promotor si no no requiere de factores de transcripción, se
están presentes proteínas denominadas considera a la subunidad s como un factor de
factores basales de transcripción. Estos son inicio de la transcripción, ya que el núcleo
específicos de cada polimerasa y se encuentran enzimático despojado de la subunidad s no
en todos los tipos celulares. Las células puede por sí mismo leer adecuadamente las
eucariotas también cuentan con factores de secuencias promotoras y efectuar la
transcripción específicos los cuales transcripción.
relacionan a los factores basales con las
regiones reguladoras de un gen. Los factores
específicos controlan la tasa de transcripción de
los genes. Cada tejido presenta una
combinación particular de los mismos.

3- Cada ARN polimerasa reconoce una 3- La ARN polimerasa bacteriana también

secuencia particular de nucleótidos o señal para reconoce secuencias consenso indispensables
la transcripción, que es diferente para cada para la unión de la holoenzima y la
enzima. Por ejemplo la ARN polimerasa II, que señalización del punto de inicio. Una de las
transcribe los genes que codifican para ARNm, secuencias más conocidas es la caja TATAAT
reconoce varias secuencias de nucleótidos en el o caja Pribnow y TTGACA, ubicadas siempre
promotor, entre las cuales se encuentran las río arriba del punto de inicio de la
secuencias llamadas caja TATA o caja transcripción.
Hogness-Goldberg, caja CAAT y GC. Éstas
-35 -10 +1
secuencias se encuentran "río arriba" respecto
del punto de inicio de la transcripción. El 5' -----TTGACA----TATAAT --- inicio--3'
reconocimiento de dichas secuencias por parte
Promotor procariota
de la ARN polimerasa II y los factores basales de
transcripción son prerrequisitos para iniciar la
copia del gen.
Cabe destacar que las secuencias consenso
que reconocen las distintas ARN polimerasas y
sus correspondientes factores basales difieren
en composición y ubicación dentro del gen, esto
significa que no siempre se localizan delante del
promotor.

206
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Resumiendo, las principales diferencias en la transcripción en células procariotas

y eucariotas:
Existe una sola ARN polimerasa procariota y tres ARN polimerasas
eucariotas.
La ARN polimerasa procariota no requiere factores de transcripción. Las
eucariotas requieren la presencia de factores de transcripción basales y su actividad
es regulada por factores de transcripción específicos.
Las secuencias señalizadoras son diferentes.

LA MAQUINARIA TRADUCCIONAL
La traducción implica el funcionamiento coordinado de un gran número de moléculas entre
las que se encuentran los distintos tipos de ARN. Una vez transcriptos cada ARN sufre una
serie de modificaciones cuyas características difieren según hablemos de células procariotas y
eucariotas. Describiremos cada ARN en general y luego sus variantes en ambos tipos celulares.
ARNm (MENSAJERO)
Los ARNm son moléculas lineales de cadena simple en donde residen las instrucciones
para la elaboración de un producto proteico.
Los ARNm eucariotas y procariotas son esencialmente iguales en el sentido que presentan,
una vez listos para la traducción, una secuencia continua de codones que se extienden desde
el principio al fin del mensaje genético dictando con exactitud la secuencia lineal de
aminoácidos de una cadena polipeptídica en particular. Esta secuencia se lee en la dirección
5'® 3'. El principio de la secuencia presenta un codón iniciador (casi siempre AUG), y el final
de la secuencia o región codificadora es un codón de terminación o stop (UGA, UAA, UAG).
Además de la región codificadora presenta sectores extra en los extremos 5' y 3' del
mensajero denominados secuencias directora y seguidora respectivamente. Estas regiones no
se traducen en proteína aun cuando forman parte del ARNm transcripto del gen.

Fig. 11.8 - Correspondencia entre las regiones del gen eucariota, su transcripto maduro y
la cadena polipeptídica
CISTRÓN: total de codones que tiene información para la síntesis completa de una
proteína, equivalente a gen ADN
Los ARNm maduros son monocistrónicos, es decir el sector codificador dicta la secuencia
para una sola cadena polipeptídica.

207
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Fig. 11.13 - Estructura de la

molécula de ARNm maduro eucariota

ARNm PROCARIOTA

1- Los ARNm procariotas presentan las secuencias codificadoras continuas, pues carecen
de intrones.

2- No sufren modificaciones post-transcripcionales.

3- Muchos ARNm procariotas son

policistrónicos, es decir que una sola
molécula de ARNm contiene información para
varias proteínas. Este ARNm contiene
codones para la terminación y para la
iniciación de la traducción entre las secciones
codificadoras de proteínas, de modo que se
traduce como varias moléculas de proteína
distintas.

Fig. 11.14 - Estructura de la molécula de ARNm procariota

ARNt (TRANSFERENCIA)

Durante la traducción cada uno de los 20 aminoácidos deber ser alineado con su
correspondiente codón del ARNm molde. Todas las células contienen distintas moléculas de
ARN de transferencia que sirven como “adaptadores” en este proceso. Como es de esperar,
dada su función en la síntesis de proteínas, los distintos ARNt presentan una estructura similar.
Sin embargo, también poseen secuencias únicas que permiten la unión de un aminoácido
concreto con su codón en el ARNm.

Cada ARN t es una molécula de 70 a 93 ribonucléotidos. Enlaces puente hidrógeno entre

sus bases repliegan la molécula dando origen a una disposición espacial en forma de trébol.
Cada brazo presenta una zona de doble cadena y un asa o bucle de cadena simple sin
apareamiento de bases. Interacciones posteriores doblan la estructura de trébol formando una
"ele".

Los ARNt para actuar como adaptadores necesitan dos regiones distintas y separadas en
la molécula. Todos los ARNt poseen una secuencia CCA en su extremo 3´al cual los
aminoácidos se unen covalentemente. La secuencia del ARNm es reconocida por el lazo
anticodón, localizado en el otro extremo de la molécula de ARNt plegado, el cual se une al
codón adecuado mediante complementariedad de bases.

208
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

¿Por qué existen 64 codones y aproximadamente 31 ARNt, si en la naturaleza hay 20

aminoácidos?
Existen 64 combinaciones posibles en que las 4 bases pueden ordenarse en tripletes o
codones. De ellos, 3 son codones stop. Los 61 tipos restantes codifican para los 20
aminoácidos, existiendo para varios de ellos codones sinónimos, Los anticodones de los ARNt
reconocen a los codones del ARNm, sin embargo no hay 61 tipos distintos de ARNt porque no
se requiere la complementariedad exacta entre los 3 nucleótidos del codón y el anticodón.

En muchos casos, mientras coincidan las 2 primeras bases del codón, hay suficiente
"balanceo “en la tercera posición para permitir el acoplamiento con más de un tipo de
nucleótido en el anticodón, de manera que existen aproximadamente 31 tipos de ARNt.

Por ejemplo el aminoácido fenilalanina es codificado por dos codones sinónimo: UUU /
UUC. Sin embargo un solo anticodón AAG puede complementarse indistintamente con UUU y
UUC, realizando el trabajo de llevar a la fenilalanina al ribosoma para ser incorporada a la
cadena polipeptídica en formación.

Todos los ARNt presentan un porcentaje significativo de bases poco frecuentes que surgen
por modificación post-transcripcional de los cuatro ribonucleótidos estándar A, G, C y U (Fig.
11.16).

Fig. 11.15 - Estructura del ARNt

209
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Fig. 11.16 - Bases raras en el ARNt.

Por lo hasta aquí expuesto, podemos concluir que el ARNt debe poseer varias propiedades
específicas:
Debe ser reconocido por una aminoacil ARNt sintetasa que lo una al aminoácido
correcto.
Debe tener una región que actúe como sitio de
unión para el aminoácido.
Debe tener una secuencia complementaria (anticodón)
específica para el codón del ARNm correcto.
Las modificaciones que sufren los pre-ARNt son
semejantes en procariotas y en eucariotas en cuanto en
ambos se producen escisiones y modificaciones químicas,
por ejemplo se elimina un dinucleótido 3' del precursor y
se agrega el triplete CCA a los ARNt que no poseen todavía esta
secuencia terminal. También aparecen bases raras (Fig.11.16)
por modificación enzimática de nucleótidos estándar del
ARNt precursor.

ARNr (RIBOSÓMICO)
Los ARNr, junto a proteínas, son los componentes de los RIBOSOMAS. Los ribosomas y los
ARNt intervienen en la traducción de la información codificada en el ARNm por lo cual los
primeros son considerados fábricas de proteínas.
Cada ribosoma consta de dos subunidades: la subunidad MAYOR y la subunidad MENOR
La subunidad mayor contiene una depresión en una de sus superficies, en la cual se ajusta
la subunidad menor. El ARNm se inserta en el surco formado entre las superficies de contacto
de las subunidades.
Dentro de cada ribosoma hay dos huecos
llamados sitios A (AMINOACÍDICO) y P
(PEPTIDÍLICO), para el ingreso de los ARNt
unidos a sus correspondientes aminoácidos

Fig. 11.20- Sitios aminoacídico y peptidílico

del ribosoma

210
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Las subunidades ribosómicas trabajan conjuntamente para la síntesis proteica. La

subunidad menor aloja al ARNm sobre el cual se acomodan los ARNt para que puedan unirse
los aminoácidos que transportan.
La subunidad mayor cataliza la unión peptídica de los aminoácidos gracias a la acción de la
peptidil transferasa (enzima que forma parte de la estructura de esta subunidad).
Si bien cumplen idéntica función, los ribosomas procariotas y eucariotas se diferencian en
su tamaño, coeficiente de sedimentación, y en el tipo y número de moléculas de ARNr y
proteínas que los forman. Todos los ARNr procariotas y eucariotas sufren modificaciones post-
transcripción.

En eucariotas los ARNr 18S; 5,8S y 28S son transcriptos de un mismo gen que codifica
para un pre-ARNr 45S. La síntesis del este transcripto primario se realiza en la zona fibrilar del
nucléolo a partir de la ARN pol I. Una vez obtenido el largo transcripto primario, se eliminan las
secuencias espaciadoras(tramos de ARN inútiles para integrar la estructura ribosómica), las
que serán degradadas por enzimas. Las secuencias resultantes utilizables de ARNr (28S, 18S y
5,8S) son metiladas y junto con ARNr 5S extranucleolar, se ensamblan a proteínas importadas
del citoplasma para conformar la subunidades ribosómicas (Fig. 11.22).

Fig. 11.22 - Procesamiento de los ARN 45S

Las subunidades ribosómicas en distintos estadios de ensamblaje, se localizan en la

periferia del nucléolo, conformando la zona granular del mismo.

Finalmente, las subunidades ribosómicas por separado y antes de completar sus

respectivos ensambles, son exportadas al citoplasma a través del complejo del poro,
concluyendo el procesamiento de cada subunidad en el citosol.

Respecto del ARNr 5S no transcripto en el nucléolo, una vez sintetizado se incorpora al

resto de los componentes para conformar la subunidad mayor del ribosoma (Fig.11.23).

211
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Fig. 11.23 - Ensamblaje de subunidades ribosómicas

EL PROCESO DE LA TRADUCCIÓN O SÍNTESIS PROTEICA

La síntesis proteica consiste en la traducción de la información codificada en la secuencia

de nucleótidos del ARNm, en la secuencia correspondiente de aminoácidos en una cadena
polipeptídica.
La síntesis proteica se lleva a cabo en los RIBOSOMAS y si bien en esencia es un proceso
similar en todos los organismos, la maquinaria traduccional es más compleja en eucariotas.
La síntesis proteica incluye las siguientes etapas:
1. ACTIVACIÓN DE LOS AMINOÁCIDOS O AMINOACILACIÓN
2. TRADUCCIÓN DEL ARNm

1. ACTIVACIÓN DE LOS AMINOÁCIDOS

Antes de la traducción cada ARNt se engancha a su aminoácido específico. Esta reacción
de aminoacilación es catalizada por las enzimas aminoacil ARNt sintetasas. Existen 20 tipos
distintos de enzimas, una para cada aminoácido.
El proceso de aminoacilación ocurre en dos etapas:
a- En la primera fase se utiliza la energía de la hidrólisis del ATP para unir cada
aminoácido a un AMP, con un enlace de alta energía. Esta reacción da origen a un complejo
intermediario denominado aminoacil- AMP:

Fig. 11.24 - Etapa 1 de la aminoacilación

b- Sin abandonar la enzima, se transfiere el aminoácido del complejo aminoacil-AMP al
ARNt específico, con lo cual se origina la molécula final: AMINOACIL -ARNt

212
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

- Etapa 2 de la aminoacilación
En resumen, la aminoacilación o activación de los aminoácidos tiene dos funciones:
Proporcionar el primer paso en la traducción del mensaje genético a una secuencia
de aminoácidos ;
activar al aminoácido antes de incorporarlo a la proteína. El enlace entre el ARNt y el
aminoácido libera al hidrolizarse la energía necesaria para propulsar la formación del
enlace peptídico durante la traducción.

2. TRADUCCIÓN
El mecanismo por el cual se traduce el mensaje del ARNm puede describirse en tres
etapas:
Iniciación
Elongación
Terminación
En todas las fases se requiere la presencia de un complejo sistema de proteínas
citoplasmáticas conocidas como factores de iniciación, factores de elongación y factores de
terminación respectivamente. Dichos factores son diferentes en procariotas y eucariotas
aunque sus funciones son semejantes.

INICIACIÓN DE LA TRADUCCIÓN
En esta etapa se reúnen los componentes que constituyen el complejo de iniciación,
disparador de la síntesis proteica. El complejo está compuesto por una molécula de ARNm, una
subunidad mayor, una subunidad menor, el ARNt iniciador (cargado con metionina en
eucariotas y con N-formilmetionina en procariotas) y factores proteicos de iniciación (IF).
Dicho complejo comienza a formarse cuando se acoplan a la subunidad menor el ARNm y
el aminoacil ~ARNt iniciador. No está claro cual de las dos moléculas se une primero la
subunidad menor, pero ambas deben estar presentes antes que la subunidad mayor cierre el
complejo originando un ribosoma completo y funcional
La posible secuencia de acontecimientos durante la iniciación de la traducción en
eucariotas es:
1. El aminoacil~ARNt iniciador se une a la subunidad menor, con gasto de GTP.
2. El ARNm se acopla a la subunidad menor, para lo cual debe ser previamente
reconocida la cap y los nucleótidos contiguos en el extremo 5' del mensaje. Estimulada por
acción del factor IF3
3. La subunidad menor se desliza sobre el ARNm hasta localizar al codón de iniciación
AUG.
Este modelo de selección propuesto para eucariotas difiere del modelo de emparejamiento
descripto para procariotas, por el cual el acoplamiento de bases codón-anticodón iniciador se

213
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

produciría por un emparejamiento de bases que preceden a AUG del ARNm con el extremo
3'del ARNr de la subunidad menor.
4. Una vez localizado y acoplado el anticodón al codón AUG del mensaje se establece
la pauta de lectura correcta para el resto de los codones que contenga la región codificadora
del ARNm.
5. Finalmente se acopla la subunidad mayor, quedando el aminoacil ~ARNt iniciador
en el sitio P del ribosoma por acción del IF2 y GTP. Como todas las cadenas polipeptídicas han
sido iniciadas por un ARNt iniciador, todas las proteínas recién sintetizadas tienen metionina (o
N-formilmetionina en bacterias) como residuo amino terminal. En ambos casos la metionina
inicial es eliminada por una aminopeptidasa específica. La unión de las dos subunidades
ribosomas se hace mediante hidrólisis del GTP, una vez ocurrido esto se disocian los factores
IF2 y IF3.

Fases de la etapa de iniciación de la síntesis proteica

Cabe destacar que en eucariotas, en cuanto se han reconocido la cap y los nucleótidos
aledaños que preceden a AUG en el extremo 5' del mensaje, ningún otro codón AUG del ARNm
será utilizado como lugar de iniciación, por lo tanto de cada molécula de ARNm se sintetiza una
sola cadena proteica. Los ARNm eucariotas son monocistrónicos. En procariotas, dado que la
secuencia de iniciación puede aparecer varias veces a lo largo del mensaje, pueden originarse
varias cadenas polipeptídicas a partir de un ARNm. La mayoría de los ARNm procariotas son
policistrónicos.

En conclusión, tres clases de interacciones determinan el inicio de la síntesis

proteica:
 Reconocimiento del codón de iniciación AUG en la subunidad menor del
ribosoma

214
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

 Acoplamiento de bases del codón AUG con el ARNt iniciador

 Acoplamiento de la subunidad mayor del ribosoma cerrando el complejo
de iniciación

Las principales diferencias en la iniciación de la traducción en procariotas y eucariotas son:

Eucariotas Procariotas
Modelo de selección: Modelo de emparejamiento:
La subunidad menor se desliza sobre el El acoplamiento de bases codón-
ARNm hasta localizar al codón de iniciación. anticodón iniciador se produciría por un
emparejamiento de bases que preceden a
AUG del ARNm con el extremo 3' del ARNr
16S de la subunidad menor Dichas
secuencias fueron detectadas por Shine y
Dalgarno (1974) .
El ARNt iniciador transporta metionina. El ARNt iniciador transporta metionina
formulada (N-formilmetionina).
Se requiere la presencia de cap en el No existe cap.
extremo 5'.
La secuencia de iniciación aparece una La secuencia de iniciación puede
vez a lo largo del mensaje (ARNm aparecer varias veces a lo largo del
monocistrónico). mensaje(ARNm policistrónico).
Participan factores de iniciación eIF Participan factores de iniciación IF
(e= eucariota;I=iniciación;F=factor) (I=iniciación; F=factor) específicos de este
específicos de este tipo celular tipo celular.

En eucariontes no se ha detectado la secuencia (Shine-

Dalgarno) en el ARNr18S y la traducción siempre comienza por el
triplete AUG más cercano al extremo 5`del ARNm. Se ha propuesto
que el ribosoma se une al ARNm por su extremo 5`con el capuchón o
cap y se movería hacia el extremo 3`hasta encontrar el primer AUG.
Cuando el codon AUG está , no en el comienzo, sino dentro de la
secuencias de bases, el ribosoma lo reconoce de otra manera y el
aminoácido que se incorpora es la metionina.

ELONGACIÓN DE LA CADENA POLIPEPTÍDICA

El proceso de elongación o crecimiento de la proteína puede
resumirse en tres etapas:
6. Una molécula de aminoacil~ARNt ingresa al
sitio A vacante del ribosoma (adyacente al sitio P que está ocupado)
acoplándose por complementaridad de bases al segundo codón del
ARNm expuesto en ese lugar. Esta reacción requiere la intervención
de un factor de elongación y GTP.
7. El aminoácido iniciador se desacopla del ARNt
del sitio P, liberando energía que se utiliza en la formación del enlace
peptídico entre los dos aminoácidos alineados (reaccionan el
carboxilo del primer aminoácido con el grupo amino del segundo
aminoácido). Esta reacción es catalizada por una peptidil transferasa
integrante de la subunidad mayor. Como consecuencia de esta
reacción el ARNt iniciador del sitio P queda sin aminoácido y el

215
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

dipéptido resultante queda enganchado al ARNt del sitio A (peptidil ARNt).

8. El nuevo peptidil ARNt del lugar A es translocado al lugar P cuando el
ribosoma se desplaza tres nucleótidos a lo largo de la molécula de ARNm. Esta etapa requiere
energía y la presencia del un factor de elongación. Como parte del proceso de translocación la
molécula libre de ARNt que se ha generado en el sitio P se libera del ribosoma, puesto que su
lugar pasa a ser ocupado por el peptidil ARNt. Así el sitio A, que se halla desocupado, puede
aceptar una nueva molécula de aminoacil~ARNt, con lo cual se vuelven a iniciar los pasos
anteriormente analizados.
Resumiendo, el ciclo de elongación de la síntesis se caracteriza por:
 La unión del aminoacil-ARNt (reconocido por el codón)
 La formación del enlace peptídico
 La translocación del ribosoma

216
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

TERMINACIÓN DE LA SÍNTESIS PROTEICA

9. La finalización de la síntesis proteica ocurre ante la llegada, al sitio A del
ribosoma, de uno de los tres codones stop o de terminación: UGA, UAG, UAA. Durante la
terminación intervienen los factores proteicos de terminación RF1, RF2 y RF3. no hay ningún
ARN t que reconozca a los tripletes de terminación, son los factores de terminación o liberación
los que se encargan de reconocer los codones STOP. El factor RF1 reconoce los codones UAA y
UAG y el factor RF2 identifica los codones UAA y UGA. El factor RF3 también colabora en la
reacción de terminación. Cuando el peptidil ARN-t está en el sitio P los factores de terminación
en respuesta a la existencia de un codon de terminación en el ARN-m entran en la sede A.
como consecuencia el polipéptido se libera de la sede P, se disocian las dos subunidades del
ribosoma y se libera el ARN-t que estaba en la sede P. Esta reacción se lleva a cabo mediante
hidrólisis del GTP.
10. Como consecuencia de esta reacción el polipéptido se desacopla del ARNt,
liberándose en el citoplasma. El ARNm se desacopla del ribosoma y se disocian las dos
subunidades, las cuales podrán volverse a ensamblar sobre otra molécula de ARNm
reiniciándose el proceso de traducción.

Fases de la etapa de terminación de la síntesis proteica

Los acontecimientos que caracterizan a la terminación de la síntesis son :

 El reconocimiento del codón stop
 La disociación de las subunidades ribosómicas,el ARNm y la cadena
polipeptídica.

EL COSTO ENERGÉTICO DE LA SÍNTESIS PROTEICA

La síntesis proteica requiere más energía que cualquier otro proceso anabólico. Para
formar cada enlace peptídico se consumen tres enlaces de alta energía:
 Uno en la activación del aminoácido;
 Otro en la unión del aminoacil ~ARNt a la subunidad menor del ribosoma;
 El tercero en la translocación del ribosoma.

217
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

218
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

PARTE 11

GENETICA MOLECULAR

EL CÓDIGO GENÉTICO

Hemos visto que los genes son segmentos de ADN situados en los cromosomas, que se
comportan como unidades de transcripción. Hemos señalado también que muchos de los ARN
transcriptos son productos celulares finales con función propia (al margen de las modificaciones
postranscripcionales que requieran para completar su maduración), es decir que, en alguna
medida, la transcripción es un paso terminal de la expresión de ciertos genes. Sin embargo,
sabemos que muchos otros genes contienen la información necesaria para especificar la
secuencia de aminoácidos de las tantas proteínas que una célula es capaz de sintetizar. En estos
casos, la transcripción es tan sólo el primer paso de la expresión genética. Los ARN obtenidos,
ARN mensajeros, son, como su nombre lo indica, meros transportadores de información que aún
debe ser decodificada, información que debe traducirse en la síntesis de una proteína. La
traducción es el segundo paso de la expresión genética.

Fig. 11.1 - Flujo de información genética

¿De qué manera la estructura de una molécula de ARNm lleva implícita la información para
construir una proteína? La información reside en la secuencia de bases y está “escrita” en un
código propio al que llamamos código genético.

En 1799, se encontró una enorme tabla de piedra en Rosetta (Egipto) que llevaba la misma
inscripción extensa en 3 lenguas antiguas egipcia (jeroglífico) dos griegas. Esta piedra
proporciono la base para que los académicos descifrasen el código de jeroglíficos-

Muchas de las características del código genético fueron anticipadas en forma teórica a partir del
descubrimiento del ARNm. Pero en el año 1961, Nirenberg y Matthaei desarrollaron una técnica
que abrió el camino para que en los siguientes cuatro años el código genético fuera enteramente
descifrado. Al descifrar el código genético los científicos escribieron su propia piedra en Rosseta.

Ochoa, Nirenberg y Khorana

Una vez que Crick (1958) propuso la Hipótesis de la Secuencia ("existe una relación entre la
ordenación lineal de nucleótidos en el ADN y la ordenación lineal de aminoácidos en los
polipéptidos"), la comunidad científica la admitió y se plantearon dos preguntas:

¿Existe algún código o clave que permite pasar de la secuencia de nucleótidos en el ADN a la
secuencia de aminoácidos en las proteínas?

219
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

¿Cómo se convierte la información contenida en la secuencia de ADN en una estructura química

de proteína?

La primera pregunta conlleva el estudio del desciframiento del código genético y el estudio de sus
características. La segunda pregunta consiste en el estudio de los procesos genéticos de la
síntesis de proteínas: la transcripción y la traducción.

 La asignación de un aminoácido a cada triplete o el desciframiento de la clave genética, se

llevó a cabo fundamentalmente gracias al esfuerzo de tres grupos de investigación, el
grupo de M. W. Nirenberg, el grupo de S. Ochoa y el equipo de H. G. Khorana. Parece
lógico pensar que el desciframiento del código genético se debería haber realizado
comparando las secuencia de nucleótidos de un gen y la de aminoácidos del polipéptido
codificado por dicho gen. Sin embargo, en la época en la que se realizaron estos trabajos
no era posible todavía obtener la secuencia de los ácidos nucleicos.
 La mayoría de los trabajos realizados por estos tres grupos de investigación consistieron
en sintetizar ARN mensajeros (ARN-m) para utilizarlos posteriormente como mensajeros
artificiales en un sistema acelular de traducción "in vitro". Estos sistemas acelulares de
traducción "in vitro" procedían de la bacteria E. coli y contenían todo lo necesario para
llevar a cabo la traducción: ribosomas, todos los ARN transferentes, aminoácidos,
enzimas, etc. Sin embargo, a estos sistemas acelulares se les quitaban los ARN
mensajeros de E. coli y se les añadía un ARN sintetizado artificialmente. En estos sistemas
acelulares se sintetizaba un polipéptido.
 Posteriormente, se comparaba la secuencia del ARN -m sintético utilizado en el
experimento con la secuencia de aminoácidos del polipéptido producido.

CARACTERÍSTICAS DEL CÓDIGO GENÉTICO

Las características del código genético fueron establecidas experimentalmente por Francis Crick,
Sydney Brenner y colaboradores en 1961. Las principales características del código genético son
las siguientes:

Podemos pensar al código genético como un idioma. Los idiomas utilizan una cierta cantidad de
letras, éstas se combinan para formar palabras, y cada palabra tiene un significado, designa a un
objeto particular. En el código genético están presentes todos estos elementos: las letras son las 4
bases que forman las cadenas de ARN (A, U, C, G); las palabras son siempre agrupaciones de 3
letras o tripletes de bases, llamadas codones en la molécula del ARNm, y los objetos
designados por dichas palabras son cada uno de los 20 aminoácidos que componen las proteínas.

¿Por qué las palabras-codones se forman con 3 bases? Si cada palabra constara de 1 base,
habría 4 palabras, y si se formara con 2, las palabras posibles serían 16. En ninguno de los casos
alcanzarían para designar a todos los aminoácidos. Pero se pueden obtener 64 combinaciones
diferentes si las bases se combinan de a 3; 64 codones son más que suficientes para nombrar a
los 20 aminoácidos.

¿Cuál es la función de los 44 codones restantes? Así como en cada idioma existen palabras
distintas con un mismo significado, el código genético emplea codones diferentes para nombrar a
un mismo aminoácido. La mayoría de los aminoácidos están codificados por más de 1 codón:
existen codones sinónimos.

La presencia de codones sinónimos en el código genético habla de una degeneración,

característica que, lejos de resultar desventajosa, reporta a las células sus beneficios. Los
codones sinónimos son muy similares entre sí, por lo tanto la sustitución de una sola base en un
codón frecuentemente da por resultado otro codón que especifica al mismo aminoácido.

220
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Esta flexibilidad del código no debe confundirse con ambigüedad: el código no es ambiguo, en
tanto cada codón especifica a uno y sólo a un aminoácido. Así no da lugar a error en el momento
de ser traducido.

Los codones que codifican aminoácidos suman en total 61. Los 3 codones que no especifican
ningún aminoácido, UGA, UAG y UAA, actúan como señales de terminación en la traducción o
síntesis de proteínas. Son llamados codones de terminación o stop.

La tabla del código que se halla a continuación es válida para los seres vivos más diversos: el
hombre, las bacterias, las levaduras, las plantas. El código genético es universal, lo cual da
prueba de que todos los organismos comparten un mismo origen. Una de las contadas
excepciones a la universalidad del código es el ADN mitocondrial, en el cual algunos codones son
leídos de manera diferente.

Los anticodones AUU, AUC y ACU no existen, quedando 61 anticodones y por lo tanto 61 ARNt.
Por lo tanto, teóricamente, sobran muchos ARN t ya que alcanzarían 20. Los que sobran también
transportan a los mismos aminoácidos, por lo cual llegamos a la conclusión de que cada
aminoácido puede ser transportado por más de un ARNt, eso es la mal llamada degeneración del
código genético: no es “perfecto”

Las moléculas encargadas de transportar los aminoácidos hasta el ribosoma y de reconocer los
codones del ARN mensajero durante el proceso de traducción son los ARN transferentes (ARN-t).
Los ARN-t tienen una estructura en forma de hoja de trébol con varios sitios funcionales:

 Extremo 3': lugar de unión al aminoácido (contiene siempre la secuencia ACC).

 Lazo dihidrouracilo (DHU): lugar de unión a la aminoacil ARN-t sintetasa o enzimas
encargadas de unir una aminoácido a su correspondiente ARN-t.
 Lazo de T ψ C: lugar de enlace al ribosoma.
 Lazo del anticodón: lugar de reconocimiento de los codones del mensajero.
Normalmente el ARN-t adopta una estructura de hoja de trébol plegada en forma de L o forma de
boomerang.

La degeneración del código se explica teniendo en cuenta dos motivos:

 Algunos aminoácidos pueden ser transportados por distintas especies moleculares (tipos)
de ARN transferentes (ARN-t) que contienen distintos anticodones.
 Algunas especies moleculares de ARN-t pueden incorporar su aminoácido específico en
respuesta a varios codones, de manera que poseen un anticodón que es capaz de
emparejarse con varios codones diferentes. Este emparejamiento permisivo se denomina
Flexibilidad de la 3ª base del anticodón o tambaleo.

221
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Flexibilidad de la 3º base del anticodón, tambaleo: La tercera base del anticodón, la que ocupa la
posición 5' no está especialmente confinada de forma que en algunos casos puede emparejarse
con distintas bases del codón. En la siguiente gráfica se observa que cuando en la posición 5' del
anticodón hay una G, esta guanina puede emparejarse con un uracilo (U) de la posición 3' del
codón o con una citosina (C).

BASE VACILANTE u oscilante

SE DENOMINA BASE VACILANTE U OSCILANTE A LA TERCERA BASE DE CIERTOS ARNT

QUE NO TIENE INFLUENCIA EN EL CÓDIGO GENETICO YA QUE SI CAMBIA, EL ARNt
TRASNSPORTA AL MISMO AMINOÁCIDO.

La importancia que tiene este hecho, es que las mutaciones que afectan esa base vacilante no
tienen ninguna expresión, no afectan a ningún carácter, se denominan mutaciones silenciosas.

EL CODIGO GENETICO NO ES SOLAPADO

Un nucleótido solamente forma parte de un triplete y, por consiguiente, no forma parte de varios
tripletes, lo que indica que el código genético no presenta superposiciones. Por tanto, el código es
no solapado

LA LECTURA DEL CÓDIGO GENÉTICO ES “SIN SIGNOS DE PUNTUACIÓN.

Teniendo en cuenta que la lectura se hace de tres en tres bases, a partir de un punto de inicio la
lectura se lleva a cabo sin interrupciones o espacios vacíos, es decir, la lectura es seguida "sin
comas". De manera, que si añadimos un nucleótido (adición) a la secuencia, a partir de ese punto
se altera el cuadro de lectura y se modifican todos los aminoácidos. Lo mismo sucede si se pierde
(delección) un nucleótido de la secuencia. A partir del nucleótido deleccionado se altera el cuadro
de lectura y cambian todos los aminoácidos. Si la adición o la delección es de tres nucleótidos o
múltiplo de tres, se añade un aminoácido o más de uno a la secuencia que sigue siendo la misma
a partir del la última adición o delección.

EL MARCO DE LECTURA

¿De qué manera se leen los codones durante la síntesis proteica?

Consideremos la siguiente secuencia de bases de un ARNm:
5’-----GUUCCCAUA --- 3’

222
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Si comenzamos la lectura en la G situada hacia el extremo 5’, este mensaje podría ser traducido
como una secuencia de tres aminoácidos (las palabras del código se leen de corrido, sin ningún
“signo de puntuación” entre ellas):
Valina - prolina - isoleucina
¿Cuál sería la traducción del mensaje si en cambio la lectura se iniciara en la primera U desde el
extremo 5’?
fenilalanina - prolina
Con este simple ejemplo resulta evidente que el sitio de inicio de la traducción es de importancia
capital para la correcta traducción del mensaje.
¿Qué determina que la lectura comience en el sitio correcto?
Los ARNm portan un codón, el AUG (codifica metionina), que es interpretado por los ribosomas
como codón de iniciación. Este codón da el marco o cuadro de lectura que será empleado de allí
en más. En adelante, el ribosoma se desplazará a lo largo del ARNm en bloques consecutivos de
tres bases, garantizando la lectura de los codones apropiados.
Las mutaciones que implican ganancia o pérdida de un nucleótido resultan más destructivas que
las sustituciones, pues al modificar el marco de lectura, alteran por completo el mensaje.

223
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

TABLA 11.2 - Código genético

SEGUNDA LETRA
U C A G
UUU fenilalanina UCU serina UAU tirosina UGU cisteína U
UUC fenilalanina UCC serina UAC tirosina UGC cisteína C
U
UUA leucina UCA serina UAA stop UGA stop A
UUG leucina UCG serina UAG stop UGG triptófano G
CUU leucina CCU prolina CAU histidina CGU arginina U
CUC leucina CCC prolina CAC histidina CGC arginina C
C
CUA leucina CCA prolina CAA glutamina CGA arginina A
CUG leucina CCG prolina CAG glutamina CGG arginina G TERCERA
PRIMERA
LETRA LETRA
AUU isoleucina ACU treonina AAU asparagina AGU serina U
AUC isoleucina ACC treonina AAC asparagina AGC serina C
A
AUA isoleucina ACA treonina AAA lisina AGA arginina A
AUG metionina ACG treonina AAG lisina AGG arginina G

GUU valina GCU alanina GAU aspartato GGU glicina U

GUC valina GCC alanina GAC aspartato GGC glicina C
G
GUA valina GCA alanina GAA glutamato GGA glicina A
GUG valina GCG alanina GAG glutamato GGG glicina G

224
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

INGENIERIA GENETICA

Hitos:
1902: Teoría cromosómica de la herencia, Sutton, Boveri
Morgan en Dm, ligamiento, herencia ligada al sexo mapas genéticos
Avery McLeod, McCarty- DNA molécula que transporta la Información Genética
Watson y Crick y el modelo de doble hélice
Transcripción y traducción

Hasta 1970 el ADN fue la molécula más difícil de analizar químicamente, es enormemente larga
con (1,80 metro en cada célula) y químicamente monótona porque tiene solamente fósforo,
desoxirribosa y cuatro bases nitrogenadas.
La secuencia de nucleótidos del ADN solamente puede ser deducida en forma indirecta ya que no
se pueden ver los nucleótidos con ningún microscopio, ni hay ningún análisis directo químico que
me permita ver la secuencia de nucleótidos, lo cual hace que se tenga que estudiar mediante
análisis genéticos especiales que utilizan ARN y proteínas
En 1953 se descubre el fenómeno de RESTRICCIÓN: ciertos fagos que parasitan E. coli podían
desarrollarse en ciertas cepas de esta bacteria pero no en otras.
1960. Aber descubre las enzimas de restricción, la cepa bacteriana restrictiva producía una
endonucleasa que escinde el ADN del fago.
En 1971, un artículo publicado por K. Danna y Daniel Nathans, marco la era del DNA
recombinante. Este articulo describe el aislamiento de una enzima en una cepa bacteriana y la
utilización de esta enzima para cortar DNA vírico por secuencias nucleotídicas específicas.
Actualmente la situación cambió completamente y de ser la molécula más difícil de analizar, la
molécula de ADN pasó a ser una molécula muy bien conocida.
Actualmente es posible cortar regiones específicas de la molécula de ADN, se puede producir un
nº infinito de copias de cada pedacito que se corte en forma muy sencilla y se puede determinar la
secuencia exacta de los nucleótidos a un promedio actual de unos cientos de nucleótidos por día
utilizando las computadoras más sofisticadas.
Este conjunto de métodos, llamados tecnología del DNA recombinante (se utiliza en
investigación básica, desarrollo de vacunas, proteínas terapéuticas, plantas y animales
modificados genéticamente) , supusieron un avance en la investigación, permitieron a los
científicos
 aislar un gen y estudiar secuencias específicas
 clonar al gen
 transferir a otras células que sintetizarán el producto que codifica.
 alterar un gen

Y a eso se llama específicamente INGENIERIA GENETICA = modificar a los genes. Se los

puede transferir a una célula, se puede rediseñar un gen, se puede insertar un gen en un huevo
fecundado de un animal o de una planta para que nazca un individuo que tenga un gen que fue
fabricado en un laboratorio y que fue insertado después de la fecundación.

Estas técnicas han tenido un impacto dramático en todos los aspectos de la biología celular y han
permitido estudiar las células y las macromoléculas en una forma que no se imaginaba hace
pocos años; se han descubierto genes y proteínas y se ha observado que las proteínas están
mucho más conservadas a través de la evolución de las especies de lo que se suponía y ha
cambiado mucho el concepto de evolución.

En los laboratorios se ha provisto nuevas formas de determinar la función de las proteínas, de los
distintos dominios que hay dentro de cada proteína y de la relación que hay entre ellas; por último
al poder controlarse las regiones reguladoras de los genes, se puede actualmente estudiar y
modificar los mecanismos complejos por los cuales los genes están activos o están inactivos, se
puede activar o inactivar un gen a voluntad.

TECNOLOGIA DE RECOMBINACION DEL ADN

225
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

DNA recombinante hace referencia a la creación de nuevas combinaciones de segmentos o

moléculas de DNA que no se encuentran juntas de manera natural.
La tecnología del ADN recombinante utiliza técnicas que provienen de la bioquímica de los ácidos
nucleicos unidas a metodologías genéticas desarrolladas originalmente para la investigación de
bacterias y virus. Esta tecnología es una herramienta poderosa para producir cantidades
potenciales ilimitadas de un gen. Los procedimientos básicos incluyen:
1. se purifica el ADN a clonar (requisito imprescindible para realizar diversas técnicas de
Biología molecular. Lisis de la célula cuyo ADN se desea purificar por detergentes
aniónico, luego se desproteina la muestra, con precipitación salina, se aísla ADN mediante
precipitación en presencia de alcohol y se disuelve en agua.
2. para generar fragmentos específicos de ADN se utilizan unas proteínas denominadas
enzimas de restricción.

FRAGMENTACION DEL ADN que es el corte en sitios específicos de la molécula de ADN por
medio de unas enzimas que se llaman ENDONUCLEASAS DE RESTRICCION que actúan como
tijeras que permiten cortar pedacitos de ADN, aislarlos y después poder trabajar con esos
segmentos identificados de ADN, así que dentro de esa molécula enorme que es el ADN podemos
cortar un pedacito como si fuera con una tijera, sacar ese pedacito, modificarlo y eso es la
FRAGMENTACION o CLIVAJE DEL ADN.

3. los fragmentos producidos mediante digestión con enzimas de restricción se unen a otras
moléculas de DNA que sirven de vectores. Un vector unido a un fragmento de ADN es una
molécula de ADN recombinante.

4. la molécula de ADN recombinante se transfiere a una célula huésped, se replica dentro de

dicha célula, produciendo decenas de copias idénticas o clones, de sí misma

CLONACION MOLECULAR que consiste que a partir de una molécula de ADN se pueden hacer
millones de copias idénticas.

5. al replicarse la célula huésped, las células descendientes heredan el DNA recombínate,

generándose una población de células huésped que llevan todas ellas copias de la
secuencia de ADN clonada
6. el DNA clonado puede recuperarse de las células huésped, purificarse y analizarse.
7. también se puede transcribir el DNA clonado, se puede traducir su ARNm, y el producto
génico que codifica se lo puede aislar y usar en investigación o se puede vender
comercialmente.

SECUENCIACION DEL ADN o sea averiguar cual es el orden o la secuencia de los nucleótidos
que hay en el ADN, esto permite conocer exactamente los genes y también en cada proteína,
como es el gen que la tiene codificada.

HIBRIDACION DE ACIDOS NUCLEICOS que consisten mezclar dos ácidos nucleicos distintos y
fabricar uno solo siempre respetando el mecanismo de las bases complementarias; así que se
puede tomar un polinucleótido de ADN de una especie, un polinucleótido de ADN de otra especie
o fabricado en el laboratorio, se los puede juntar y fabricar una molécula en doble hélice de ADN
pero que sea mitad de una especie y mitad de otra por ejemplo.

FRAGMENTACION DEL ADN

Antes de 1970, aislar una gen, sacar un gen de dentro de un cromosoma era imposible y parecía
algo inalcanzable porque los genes no son como las proteínas que son entidades individuales y
observables y tienen una forma determinada ; los genes están dentro de la molécula de ADN y
no hay un límite que separe un gen de otro. Por lo tanto no hay forma de saber donde empieza un
gen y termina otro, ni de verlos con el microscopio.

226
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Aunque la molécula de ADN en una célula se puede romper en pequeñas piezas, los fragmentos
que se obtienen no contienen un gen porque al no verse el límite entre un gen y otro, no se sabe
por donde romper para sacar ese gen.

Como puede entonces ser purificado y aislado un gen?

La solución a éste problema comenzó con el descubrimiento de las llamadas ENDONUCLEASAS

DE RESTRICCION, cortan el ADN en segmentos.
Son enzimas de corte del ADN en un sitio específico de acuerdo a la serie de nucleótidos que
tenga y que es reconocida por cada enzima de restricción
Por ej. Una determinada enzima que se llama HPA1 corta el ADN donde encuentra la serie de
nucleótidos AACAA (secuencia de reconocimiento). Cuando ésta enzima encuentra ésta
combinación de bases en el ADN lo corta siguiendo un patrón de corte específico.
Estas enzimas las producen normalmente ciertas bacterias que las utilizan como mecanismo de
defensa contra los virus. Como tijeras genéticas, las enzimas de restricción cortan en pedacitos el
ácido nucleico que le introdujo el virus y lo desintegran.
Diferentes especies de bacterias producen distintas ENDONUCLEASAS DE RESTRICCION que
cortan en lugares distintos la molécula de ADN y es relativamente fácil encontrar una
endonucleasa de éstas que corte y produzca pedacitos específicos que uno desee tener.
Estos fragmentos pueden separarse según su tamaño por medio de electroforesis en gel –un
método por el cual se separan las moléculas basándose en su velocidad de migración en un
campo eléctrico- el gel, habitualmente compuesto de agarosa o poliacrilamida, se sitúa entre dos
compartimentos con electrodos en los que se dispone un tampón o buffer.

La muestra se deposita en ranuras preformadas y se aplica el campo eléctrico. Los ácidos

nucleicos tienen carga negativa, por lo que migran hacia el electrodo positivo. El gel se comporta
como un filtro poroso que retrasa la migración de los fragmentos más grandes. Las moléculas de
menor tamaño se mueven a través del gel con mayor rapidez, permitiendo la separación de una
mezcla de ácidos nucleicos en función de su tamaño.
El orden de los fragmentos de restricción se puede determinar por una serie de métodos,
obteniéndose un mapa de restricción.

227
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La digestión con endonucleasas de restricción por sí sola no proporciona suficiente resolución

para el análisis de moléculas de ADN mayores, como genoma celulares. Sin embargo, se pueden
obtener cantidades de fragmentos de ADN purificado a través de la clonación molecular.
¿Para que sirve cortar el ADN? Porque los pedacitos de ADN que se obtienen son el material
que se utiliza para las otras técnicas mencionadas de la ingeniería genética.
Entonces para poder clonar o duplicar un gen, primero se debe cortar pedacitos de ADN, después
averiguar cual es la secuencia, o sea secuenciar el ADN y una vez que se hizo todo esto se puede
fabricar copias exactas por millones en muy poco tiempo.

GENERACIÓN DE MOLÉCULAS DE ADN RECOMBINANTE

CLONACION
Conceptualmente, el proceso de clonación (clonado o clonaje) consiste en la obtención de un
clon, entendido como conjunto de “elementos” idénticos entre sí y a su precursor. Estos
“elementos” pueden ser moléculas, células, tejidos, órganos u organismos pluricelulares
completos. Cada componente individual del clon contiene la misma información genética, el
mismo genotipo, por ello se puede considerar que la clonación supone una amplificación
genética.
Debe indicarse que la clonación es un proceso fisiológico normal: son clónicas las células
embrionaria totipotentes formadas por mitosis a partir del cigoto; cada una de las células da lugar
(mediante complejos procesos de diferenciación y desarrollo) a individuos adultos formados por
células clónicas, genéticamente iguales entre si y a la célula embrionaria de partida. En el nivel de
organismos son clónicos los gemelos monocigóticos o univitelinos, procedentes del mismo óvulo
fecundado.
Globalmente, interesa describir la clonación desde el punto de vista de su finalidad, es decir:
 clonación de organismos
 clonación de células
 clonación de moléculas sean estos genes o fragmentos de ADN o ARN. De acuerdo con el
proceso experimental , esta clonación puede dividirse a su vez en dos tipos:
clonación acelular es decir, clonación de moléculas sin intervención de célula
alguna. Es sinónimo de amplificación in Vitro de moléculas de ADN o ARN mediante la
reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
clonación celular (con células, no de células) es la amplificación de moléculas de
acido nucleico mediante su introducción asistida por vectores, en células anfitrionas en
cultivo. Emplea la tecnología del ADN recombinante.
La estrategia básica en la clonación molecular es insertar un fragmento de ADN de interés ([Link].,
un segmento de ADN humano) en una molécula (llamada vector) que es capaz de replicarse de
forma independiente en una célula huésped. El resultado es una molécula recombinante o clon
molecular, compuesto de las secuencias del ADN insertado y del vector. Se pueden obtener
grandes cantidades del ADN insertado si se permite replicarse a la molécula recombinante en un
huésped apropiado. Por ejemplo, se pueden clonar fragmento de ADN humano, pueden ser
clonados en vectores plasmídicos. Los plásmidos son pequeñas moléculas circulares de ADN que
pueden replicarse independientemente – sin estar asociados con el ADN cromosómico- en
bacterias. Los plásmidos recombinantes que portan insertos de ADN humano pueden ser
introducidos en [Link], donde replican junto con las bacterias para dar lugar a millones de copias
del ADN plasmídico. El ADN de estos plásmidos puede aislarse, obteniéndose grandes cantidades
de moléculas recombinantes que contienen un fragmento único de ADN humano. Adicionalmente
el fragmento puede ser aislado de manera sencilla del resto de ADN del vector utilizando las
mismas endonucleasas de restricción usadas para su inserción y realizando una electroforesis en
gel, permitiendo el análisis y posterior manipulación de un fragmento puro de ADN humano.

228
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Los fragmentos de ADN utilizados para crear moléculas de ADN recombinante son generados por
digestión con endonucleasas de restricción. Muchas de esas enzimas cortan sus secuencias de
reconocimiento de forma escalonada, generando extremos complementarios o cohesivos de una
sola hebra que pueden asociarse entre si por apareamiento complementario de bases

Los extremos complementarios emparejados pueden conectarse de forma definitiva por medio de
una ADN ligasa, una enzima que repara roturas en las hebras de ADN. De esta forma dos
fragmentos distintos de ADN acondicionados tras digestión por la misma endonucleasa de
restricción pueden ser unidos para crear una molécula de ADN recombinante
Además del ADN, es posible clonar también secuencias de ARN. El primer paso es sintetizar una
copia de ADN a partir del ARN por medio de la transcriptasa inversa. El ADN producido
(denominado ADNc porque es complementario al ARN utilizado como molde) se liga al vector de
ADN del modo antes descrito. Dado que los genes eucarióticos están habitualmente interrumpidos
por secuencias no codificantes o intrones, que se eliminan del ARNm por corte y empalme o

229
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

splicing, la posibilidad de clonar ADNc además del ADN genómico ha sido crítica para el
entendimiento de la estructura y función de los genes. Además, la clonación del ADNc permite que
el ARNm correspondiente a un solo gen sea aislado como un gen molecular.
Vectores para el ADN recombinante
¿Qué es un elemento genético autoduplicante o vector de clonación molecular?

Son segmentos de ADN que pueden duplicarse solos, naturalmente, como lo hacen todas las
células, pero bajo un entorno controlado.

Primero se utilizaron los plásmidos y luego los virus.

Clonación con plásmidos

Los plásmidos, que son pequeñas moléculas de ADN que se encuentran en las bacterias
independientemente del cromosoma bacteriano
Se puede agregar al plásmido un segmento de ADN que deseamos clonar y la bacteria lo vá a
autoduplicar junto con el plásmido
Los plásmidos generalmente se usan para clonar insertos de ADN genómico o ADNc de hasta
unos pocos miles de pares de bases. Incluyen un origen de replicación – la secuencia de ADN
que señaliza a la ADN polimerasas ce la célula hospedadora par que replique la molécula de
ADN. Adicionalmente, los vectores plasmídicos portan genes que confieren resistencia a
antibióticos ([Link]., resistencia a ampicilina), de forma que las bacterias que portan el plásmido
puedan ser seleccionadas. Como lo muestra la figura, un grupo de fragmentos de ADNc son
ligados a un plásmido de ADN previamente digerido mediante una endonucleasa de restricción

para transformar a E. coli. Las colonias resistentes a antibióticos, que contienen el ADN
plasmídico, son seleccionadas. Puesto que cada plásmido recombinante da lugar a una sola
colonia resistente a antibióticos, las bacterias presentes en una cualquiera de estas colonias
contendrán un único inserto de ADNc. Las bacterias que contengan el plásmido de interés pueden

230
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

hacerse crecer en grandes cantidades y extraerse su ADN. Las pequeñas molécula circulares de
ADN plasmídico, de las que a menudo existen cientos de copia por célula, pueden separarse del
ADN cromosómico bacteriano; el resultado es ADN plasmídico purificado apropiado para el
análisis del inserto clonado.

Clonación con virus

Un segmento de ADN de un gen humano puede ser unido al cromosoma de un virus por la
TECNOLOGIA DE RECOMBINACION DEL ADN y entonces ese virus va a inyectar ese ADN
recombinado en una bacteria y los mecanismos normales de replicación del virus van a producir
en un día millones virus idénticos, por lo tanto yo obtengo esa cantidad de copias del pedacito de
ADN que se quería, fácil y rápido
Los vectores de bacteriófago lambda ( ) también son empleados para el aislamiento tanto de ADN
genómico como de clones de ADNc a partir de células eucariotas, y puede acomodar fragmentos
mayores de ADN inserto que los plásmidos. En los vectores de clonación Y, las secuencias del
genoma del bacteriófago que son dispensables para la replicación viral han sido eliminadas y
sustituidas por sitios únicos de restricción para la inserción de ADN clonado. Estas moléculas
recombinantes pueden ser introducidas en E. coli, donde se replican y generan millones de fagos
progenie que contienen un solo inserto de ADN. El ADN de estos fagos puede entonces aislarse,
danto lugar a grandes cantidades de moléculas recombinantes que contienen un solo fragmento
de ADN clonado.

También se hace clonación con otros vectores, como los siguientes

 Clonación con YAC (cromosoma artificial de levadura)

 Clonación con BAC (cromosoma artificial de bacteria)

 Clonación con cósmidos: los cósmidos son vectores híbridos construidos utilizando partes
del cromosoma de lambda y de plásmidos. Los cósmidos contienen la secuencia cos del
fago lambda, necesaria para el empaquetamiento del DNA del fago dentro de su cubierta
proteica, y secuencias plasmídicas necesarias para la replicación (ori C). También tienen
genes de resistencia a antibióticos de origen plasmídico que ayudan a identificar las
células huésped que contienen los cósmidos recombinantes. Después de insertar
fragmentos de DNA, los cósmidos recombinantes se empaquetan en la cápside proteica de
lambda para formar partículas mágicas infectivas. Una vez que entra a la célula huésped
bacteriano, el cósmido se replica como un plásmido.

231
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

SECUENCIACION DE LOS FRAGMENTOS DEL ADN

La clonación molecular de un fragmento individual de ADN permite el aislamiento de grandes
cantidades de material genético para su estudio detallado, incluyendo la determinación de su
secuencia de nucleótidos.
Consiste en averiguar la secuencia de bases nitrogenadas de los fragmentos para finalmente
conseguir la secuencia de bases nitrogenadas de todo el ADN de la célula en estudio.
La secuenciación del ADN generalmente se realiza con sistemas automatizados que son tanto
rápidos como precisos, de modo que la determinación de una secuencia de varias kilobases de
ADN es una tarea sencilla. De este modo es mucho más fácil clonar y secuenciar ADN que
determinar la secuencia de aminoácidos de una proteína.
El método más común de secuenciación de ADN se basa en la interrupción prematura de la
síntesis de ADN por la inclusión de dideoxinucleótidos (que no contiene el grupo hidroxilo en 3´)
terminadores de cadena en reacciones de la ADN polimerasa. La síntesis de ADN se inicia en un
punto único del ADN clonado a partir de un cebador sintético. La reacción de síntesis incluye a los
cuatro dideoxinucléotidos (ddNTP) además de sus homólogos habituales. Cada uno de los cuatro
está marcado con un marcador fluorescente diferente, de modo que su incorporación en el ADN
puede monitorizarse. La incorporación de un ddN detiene la síntesis de ADN porque no hay
ningún grupo hidroxilo en 3´disponible para la adición del siguiente nucleótido. Así, se generan
una serie de moléculas de ADN, cada una terminada en la base representada por un ddN
fluorescente especifico. Estos fragmentos de ADN son entonces separados en función de su
tamaño mediante ELECTROFORESIS en gel. A medida que se resuelven las bandas de ADN
recién sintetizadas a través del gel, pasan a través de un haz de láser que excita los marcadores
fluorescentes. La luz emitida es detectada por un fotomultiplicador que está conectado a un
ordenador que recolecta y analiza los datos que determinan la secuencia de ADN.
1. se calienta el DNA para que se desnaturalice y forme cadenas sencillas. El DNA de
cadena sencilla se mezcla con cebadores que hibridan al extremo 3`. Las muestras de
DNA de cadena sencilla unido al cebador se distribuyen en 4 tubos.

232
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

2. se añade a cada tubo la DNA polimerasa y los cuatros dNTP. Además cada uno también
recibe una pequeña cantidad de un desoxirribonucleótido modificado, denominado
dideoxidonucleótido ( ddATP, ddCTP, ddGTP, ddTTP) que tienen un grupo 3`-H en lugar
de 3`-OH. Para analizar la secuencia uno de los deoxirribonucleótidos o el cebador está
marcado radiactivamente. El cebador se elonga en dirección 5`- 3`formándose la cadena
complementaria al molde.
3. al producirse la síntesis de DNA, ocasionalmente la DNA poli inserta un ddNTP a la

cadena en crecimiento. Puesto que el ddNTP no tiene el grupo 3`-OH no puede formar el
enlace con ningún otro nucleótido, y la síntesis de ADN se detiene. Por ejemplo, en el tubo
que se ha añadido ddATP, la polimerasa inserta ddATP en vez de dATP, lo que causa la
terminación de la elongación de la cadena. En los otros tubos termina en una C, una G o
una T respectivamente. Los fragmentos de dNA de cada tubo se separan en carriles
adyacentes mediante electroforesis en gel, el resultado es una serie de bandas que forman
un patrón en escalera que se visualiza revelando la película expuesta al gel.

AMPLIFICACION DE ADN CON LA REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA -PCR

La posibilidad de purificar la ADN polimerasa y de sintetizar químicamente el ADN en el
laboratorio, hizo posible un 3er método de clonación, exclusivamente artificial que se denomina
PCR o REACCION EN CADENA DE LA ARN POLIMERASA (sin células huésped). Desarrollada
por Kary Mullis en 1988, es un método alternativo para conseguir un gran número de fragmentos
de material genético a partir de una única copia de ADN.
Considerada hoy como una herramienta imprescindible en el laboratorio de Biología Molecular e
Ingeniería Genética, el objetivo de esta técnica es la amplificación directa de un gen o un
fragmento de ADN, o indirecta de un ARN (en este caso, a través de su DNA complementario o
cDNA), presentes en muy diversas fuentes, sin necesidad de una purificación previa de la muestra
integra original. Se puede partir de homogenados, extractos crudos de tejido, sangre completa,
mezclas de fragmentos de DNA obtenidos con enzimas de restricción, muestras resultantes de lla
extracción y aislamientos de DNA, etc. Sin embargo debe resaltarse que es un requisito
imprescindible que se conozca la secuencia de una parte de la región de DNA o RNA que se
quiere amplificar

233
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Esta técnica de PCR es mucho más rápida, más fácil y más barata que las técnicas que utilizan
virus y plásmidos. La PCR copia secuencias específicas de DNA mediante una serie de
reacciones in Vitro, y puede amplificar secuencias diana de DNA presente en cantidades
infinitesimales. Uno de los requisitos para la PCR es que se precisa de alguna información sobre
la secuencia nucleotídicas del DNA a clonar. La información de la secuencia se utiliza para
sintetizar dos cebadores: uno para el extremo 5`y otro para el extremo 3`de la secuencia que se
clonará. Se añaden los cebadores a una muestra de DNA cuyas moléculas se han separado en
cadenas sencillas. Los cebadores se unen a los nucleótidos complementarios que flanquean la
secuencia a clonar. Después de la hibridación se añade una DNA polimerasa que sea resistente al
calor, y ésta sintetiza una segunda cadena de DNA. La repetición de estos pasos genera mas
copias de DNA.
La reacción de PCR implica tres pasos:
1. el DNA a clonar se desnaturaliza en cadenas sencillas. Este DNA puede provenir de
muchas fuentes diferentes, incluyendo ADN genómico, restos momificados, fósiles,
muestras forenses como sangre seca o semen, pelos. El DNA de doble cadena se
desnaturaliza calentándolo a 90-95ºC, lo que lo disocia en sus cadenas sencillas.
2. se disminuye la temperatura de la reacción hasta 50-70ºC, la denominada temperatura de
hibridación, a la que los cebadores se unen al DNA de cadena sencilla. Los cebadores
sirven de punto de inicio para la síntesis de nuevas cadena de ADN complementarias al
DNA diana.
3. a la mezcla de la reacción se añade
una DNA polimerasa (la polimerasa Taq) la
cual extiende los cebadores añadiendo
nucleótidos en dirección 5`- 3`haciendo una
copia de doble cadena del DNA diana.
(amplificación propiamente dicha)
4. Este proceso esta automatizado y lo
realiza una máquina termociclador, que se
puede programar en los números de ciclos
obteniéndose grandes cantidades de
segmentos específicos de DNA que se
pueden usar para muchos propósitos,
incluyendo la clonación en vectores
plasmídicos, la secuenciación del DNA,
diagnósticos clínicos y rastreos genéticos.

Limitaciones de la PCR
Aunque la PCR es una técnica muy valiosa,
también tiene sus limitaciones: se debe
disponer de alguna información sobre la
secuencia de nucleótidos del DNA diana, y
cualquier contaminación de la muestra con
DNA de otras fuentes, por pequeña que
sea esta, puede causar problemas. Por
ejemplo: células desprendidas de la piel del
investigador pueden contaminar las
muestras recogidas del escenario de un
crimen o tomadas de un fósil, lo que
dificulta la obtención de resultados
precisos.
La PCR, o Reacción en Cadena de la
Polimerasa, utiliza un paso de hibridación
de oligonucleótidos para completar el

234
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

proceso. Entre el paso de desnaturalización de las hebras del ADN y antes del paso de extensión
del cebador hay un paso de unión de los cebadores a la hebra de secuencia complementaria
mediante una hibridación de ADN. Es el paso de menor temperatura de la PCR y el que marca la
especificidad de la reacción

HIBRIDACION DE ACIDOS NUCLEICOS:

Consiste en sintetizar moléculas que tengan una parte de ADN de distintas células o ADN y ARN
mezclados.
Cuando se pone ADN en una solución a 100ºC y a un pH de 13, las bases complementarias se
separan porque se rompen los puentes de H de modo que los polinucleótidos quedan totalmente
separados, éste proceso se denomina DESNATURALIZACION DEL ADN.
Por mucho tiempo se pensó que ésta DESNATURALIZACION era irreversible pero en 1961 se
descubrió que cada polinucleótido separado puede reunirse con otro, siempre y cuando las bases
sean complementarias, si se baja la temperatura. Este proceso se denomina
RENATURALIZACION.

La técnica que se utiliza para renaturalizar el ADN o sea volver a unir los dos polinucleótidos es
simplemente mantenerlos durante un tiempo prolongado a 65º.
Se pueden unir dos polinucleótidos que provengan del mismo ADN, de distinto ADN, se puede
unir un polinucleótido de ARN con otro de ARN, se puede unir uno de ARN con uno de ADN o
cualquier combinación que uno quiera siempre y cuando las bases sean complementarias entre
un polinucleótido y otro. Esto es la HIBRIDACION o HIBRIDIZACION. Estas reacciones de
hibridación son muy utilizadas para detectar y caracterizar secuencias nucleotídicas específicas
en moléculas de RNA y DNA. Las moléculas de DNA de cadena sencilla (etiquetada con
marcadores radiactivos o químicos) utilizada para la detección de secuencias complementarias se
denominan sondas.

Técnicas de hibridación se utilizan a menudo para detectar una molécula diana partiendo de una
sonda complementaria a ella. Muchas técnicas moleculares están basadas en la hibridación. Entre
ellas están técnicas tan importantes como la PCR o las tecnologías de arrays de ADN. Técnicas
basadas en hibridación se usan habitualmente en el diagnóstico de enfermedades, la
identificación de microorganismos patógenos, el estudio de perfiles de expresión génica, la
localización de genes en cromosomas o de ARNm en tejidos (hibridación in situ) o en la
comparación de especies hibridando su ADN.

La transferencia de Southern: o Souther blotting la primera técnica de inmunotransferencia, se

utiliza para la detección de genes específicos en el ADN celular. El ADN problema es digerido por
una endonucleasa de restricción, y los fragmentos obtenidos se separan por electroforesis. El gel
se adhiere a un filtro de nitrocelulosa o nylon, al cual se trasfieren los fragmentos de ADN, para
dar una réplica del gel. El filtro es entonces incubado con una sonda marcada, que hibrida con los
fragmentos de ADN que contiene la secuencia complementaria, permitiendo la visualización de
estos fragmentos específicos en el ADN celular.

La transferencia Northern o Northern blotting . es una variante de la anterior,utilizada para la

detección de ARN en vez de ADN. La totalidad del ARN celular es extraída y fraccionada según su
tamaño por electroforesis en gel. De igual forma que en la transferencia de Souther, los ARN se
transfieren a un filtro y se los detecta por hibridación con una sonda clonada.

La transferencia de Western es otra variación de la transferencia de Southern, pero se separan

proteínas procedentes de un extracto celular, por electroforesis en gel de SDS-poliacrilamida y se
transfieren desde el gel al filtro con un anticuerpo dirigido contra la proteína de interés. El
anticuerpo unido al filtro se puede detectar mediante la reacción con varios agentes, como una
sonda radioactiva que se une al anticuerpo.

235
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Transferencia de genes en plantas y animales.

La metodología para la introducción de ADN en células animales fue desarrollada inicialmente
para ADN víricos infecciosa y, por tanto, a menudo se denomina transfección. El ADN puede
introducirse en células animales en cultivo mediante una variedad de métodos, incluyendo la
microinyección directa en el núcleo celular.
 Un gen eucariótico de interés es clonado en un plásmido que contiene un marcador de
resistencia a un fármaco, el cual puede seleccionar las células animales en cultivo. Se
introduce el ADN del plásmido en células cultivadas y estas pueden expresarlo durante
varios días (expresión transitoria).
 Las células transformadas de forma estable, en las que el ADN del plásmido se integra en
el ADN cromosómico) pueden seleccionarse por su capacidad de crecer en un medio que
contenga un fármaco.
 El ADN extraño se inserta en secuencias virales, y los plásmidos recombinantes pueden
ser aislados a partir de bacterias. En este momento se produce la transfección con el ADN
recombinante de las células animales en cultivo. El ADN es captado por una pequeña
parte de las células, que producen retrovirus recombinantes, los cuales contiene ADN
insertado. Estos retrovirus recombinantes pueden ser utilizados para infectar de manera
eficaz nuevas células, donde el genoma viral con los genes insertados se integra en el
ADN cromosómico en forma de provirus.
 Es también posible introducir genes clonados en la línea germinal de un organismo
multicelular, por medio de la inyección del ADN clonado en el pronúcleo de un óvulo
fertilizado se producen ratones que portan dichos genes extraños (ratones transgénicos)
los óvulos inyectados se implantan en madres adoptivas y se permite su desarrollo. En una
parte de la progenie (aproximadamente 10%) el ADN extraño se habrá integrado en el
genoma del ovulo fertilizado y está por tanto presente en todas las células del animal.
Dado que el ADN extraño está presente en las células germinales de igual forma que lo
está en las somáticas, al reproducirse dicho ADN se transmite a la descendencia como el
resto de los genes celulares.
 Introducción de genes en ratones a través de células madre embrionarias. Las
células madres embrionarias son células cultivadas que proceden de embriones tempranos
de ratón (blastoscitos). El ADN es introducidos en estas células en cultivo, y
posteriormente se aíslan las células madre embrionarias transformadas de forma estable.
Se inyectan estas células en un blastocisto receptor, donde son capaces de participar en el
desarrollo normal del embrión. Algunos de los ratones hijos que se desarrollan tras la
inyección de embriones en madres adoptivas contienen tanto células derivadas de las
células madre embrionarias transformadas como células normales del blastocisto. Como
estos ratones son mezcla de dos tipos de células diferentes se les denomina quiméricos.
Pueden obtenerse descendientes que contengan el gen transfectado cruzando ratones
quiméricos cuyos descendientes tendrán las células madre embrionarias transformadas
incorporadas en la estirpe germinal.
 También es posible introducir ADN clonado en células vegetales. Una posibilidad es
bombardear células vegetales con microproyectiles envueltos en ADN directamente al
interior de las células vegetales, algunas células mueren, pero otras sobreviven y pasan a
estar transformadas de forma estable. Otro vehículo de reciente desarrollo para la
introducción de ADN clonado en muchas especies de plantas es un plásmido de la bacteria
Agrobacterium tumefaciens (plásmido Ti) en la naturaleza esta bacteria se une a las hojas
de las plantas y el plásmido Ti se transfiere a las células vegetales, donde se incorpora al
ADN cromosómico. Dado que muchos tipos de plantas pueden regenerarse a partir de una
única célula cultivada, las plantas transgénicas se obtienen directamente de células en las
que se introduce el ADN recombinante en cultivo – un procedimiento mucho más sencillo
que la obtención de animales transgénicos-.

236
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Aplicaciones de la ingeniería genética

Las aplicaciones de la ingeniería genética son múltiples y crecen día a día. Se utilizan en
tratamientos médicos y en biotecnología y son la solución a corto y largo plazo de determinadas
enfermedades genéticas con la producción de sustancias diversas de origen transgénico. El
mundo está siendo revolucionado por la ingeniería genética.

Tratamientos médicos
A continuación mostramos algunas de las sustancias o tratamientos específicos obtenidos por
estos mecanismos de gran interés para la salud humana:

a) Fabricación de proteínas o péptidos de interés sanitario.

b) Fabricación de sustancias hormonales en la leche de vaca.
c) Sustancias paliativas del dolor.
d) Xenotransplantes y trasplantes de tejidos.
e) Solución a problemas cardiacos.
f) Vías de solución al Dengue.
g) Tratamientos contra el cáncer.
h) Diagnóstico y solución de enfermedades hereditarias: hemofilia, anemia falciforme, retraso
mental, fibrosis quística, hipotiroidismo congénito, esquizofrenia, maniacodepresión, hidrocefalia,
microcefalia, labio leporino y espina bífida.
i) Tratamientos contra el SIDA.
j) Fabricación de vacunas transgénicas.
k) Fabricación de antibióticos.

Biotecnología con ingeniería genética:

En la industria de la alimentación:
- Enzimas recombinantes alimentarias.
- Aditivos.
- Alimentos transgénicos: soja, maíz, tomate.
- Alimentos transgénicos animales.

Industria química:
- Detergentes.
- Aminoácidos.
- Colorantes.
- Plásticos biodegradables.
- Emulsionantes.
- Melaninas.
- Adhesivos.

237
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

238
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

PARTE 12
REPRODUCCIÓN CELULAR: MITOSIS Y MEIOSIS

REPRODUCCION CELULAR
De acuerdo con la tercera doctrina de la teoría celular, las células nuevas sólo se originan
de otras células vivas. El proceso por el que esto ocurre se llama división celular. Para un
organismo pluricelular, como un humano o un roble, innumerables divisiones del cigoto
unicelular producen un organismo de complejidad y organización celulares impresionantes. La
división celular no se detiene con la formación del organismo maduro sino que continua en
ciertos tejidos durante toda la vida, esto es necesario para reponer células viejas o muertas.
Por ejemplo: las células epidérmicas del ser humano se están desprendiendo y reemplazando
continuamente. Se estima que cada individuo desprende diariamente ¡unos 100 mil millones
de células!. En organismos unicelulares, como protozoos y algunos hongos y algas, la mitosis
como parte de la división celular proporciona el mecanismo básico para su reproducción
asexual.
Aunque la división celular ocurre en todos los organismos, se lleva a cabo de manera
muy diferente en los procariotas y los eucariotas.

CICLO CELULAR EN EUCARIOTAS

En una población de células en división, ya sea dentro del cuerpo o en un platillo de
cultivo, cada célula pasa por una serie de etapas definidas que constituyen el ciclo celular.
El ciclo celular puede dividirse en dos fases principales con base a las actividades
celulares visibles con un MO: la fase M y la interfase. La fase M incluye: 1) el proceso de
mitosis, durante el cual los cromosomas duplicados se separan en dos núcleos, y 2) la
citocinesis, en la que toda la célula se divide en dos células hijas. La interfase, el período
entre las divisiones celulares, es un intervalo en el que la célula crece y efectuar diferentes
actividades metabólicas, mientras que la fase M sólo suele durar alrededor de una hora en las
células de mamíferos, la interfase puede extenderse por días, semanas o más tiempo, según el
tipo celular y las condiciones imperantes.
Aunque la fase M es el período en el que el contenido de la célula se divide en realidad,
durante la interfase ocurren muchos preparativos para la mitosis próxima, inclusive la
duplicación del DNA celular.
La duplicación del DNA ocurre durante la fase S del ciclo celular, también es el período en
el cual la célula sintetiza las histonas adicionales que se necesitarán cuando la célula duplique
el número de nucleosomas en sus cromosomas. Existen dos períodos de brechas o intervalos,
uno entre la duplicación del ADN y el comienzo de la mitosis (G2) y otro, entre la mitosis y
previo a la síntesis de DNA (G1).

Ciclos celulares in vivo: se reconocen tras categorías celulares amplias:

1. células, como las nerviosas, musculares y eritrocitos, que son muy
especializadas y carecen de la capacidad para dividirse. Una vez que estas células se
diferencian, permanecen en ese estado hasta que mueren.
2. células que no se dividen en condiciones normales, pero que pueden
inducirse para iniciar la síntesis de DNA y dividirse cuando reciben el estímulo
apropiado. Este grupo incluye las células hepáticas, que pueden estimularse para que
proliferen mediante extirpación quirúrgica de una parte del hígado, y los linfocitos, cuya
proliferación puede inducirse por interacción con un antígeno apropiado.
3. células que tienen el nivel relativamente alto de actividad mitótica en
condiciones normales. Ciertos tejidos del cuerpo mantienen una renovación continua, con
formación constante de nuevas células por división celular. Esta categoría comprende las

239
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

espermatogonias que dan origen a los gametos masculinos, las células primordiales
hemopoyéticas que producen glóbulos rojos y blancos, y las células de la base de muchos
epitelios que recubren las cavidades corporales y la superficie del cuerpo.
La duración de los ciclos celulares varía desde 30 minutos en un embrión de rana que se
divide y cuyas células carecen de fases G1 y G2, hasta varios meses en los tejidos de
crecimiento lento, como hígado de los mamíferos. Con unas cuantas excepciones notables, las
células que dejaron de dividirse, ya sea en forma temporal o permanente, en el cuerpo o en un
cultivo, se encuentran en una etapa previa al inicio de la síntesis de DNA. Se dice que estas
células que se detienen en tal estado se encuentran en el estado G0 para distinguirlas de las
células en la fase G1 típica.

INTERFASE Y CICLO CELULAR

El uso de métodos citoquímicos brindó los
primeros indicios de que la duplicación del ADN ocurre
durante la interfase. Más adelante, la radioautografía
con timidina marcada permitió determinar el período
exacto en que se produce la duplicación del ADN, y
demostró que la síntesis tiene lugar solamente durante
un tramo limitado de la interfase, denominado S o
sintético, que es precedido y seguido por dos períodos
G1 y G2 (por gap – intervalo) en los que no hay síntesis
de ADN. Esto llevó a dividir el ciclo celular en cuatro
períodos sucesivos: G1, S, G2 y M (mitosis).
G2 es el tiempo que transcurre entre el final de la
síntesis de ADN y el comienzo de la mitosis. Durante G2
la célula contiene el doble (4C) de la cantidad de ADN
presente en la célula diploide normal (2n). Después de
la mitosis, las células hijas entran nuevamente en el período G1 y tienen el contenido de ADN
equivalente a 2C. Los períodos S, G2 y M son relativamente constantes en la mayoría de los
tipos celulares.
Etapa G1: (gap: intervalo) Esta etapa que sucede a la división celular es la más variable
en duración, puede durar horas, días, meses o años. Las células hijas recientemente
originadas presentan una gran actividad metabólica produciéndose un aumento acelerado del
tamaño celular. Las células que no se dividen (como las nerviosas o las del músculo
esquelético) o que se dividen poco (como los linfocitos) se hallan en el período G1, que en
estos casos se denomina G0 porque las células se retiran del ciclo celular.
Los organoides de la célula precursora han sido repartidos de manera más o menos
equitativa entre las células hijas, deben entonces aumentar de tamaño y también en número
para mantener las características de su tipo celular. Se sintetizan así ribosomas y microtúbulos
a partir de las proteínas y otras moléculas que la conforman. Los organoides del sistema de
endomembranas, aumentan considerablemente de tamaño, ya que ambas células hijas han
recibido parte de estos organoides. Todos los procesos de síntesis de nuevos organoides o
aumento de tamaño de los existentes, son regulados mediante activación de complejos
enzimáticos en un momento determinado.
En este período se observa, a su vez, una gran síntesis de ARNm como así también ARNt
y ARNr. Estos ácidos serán utilizados para la síntesis de proteínas estructurales, para la
construcción y o aumento de los organoides, como así también la producción de enzimas
necesarias para dicha síntesis. Cabe destacar que durante este período también se sintetizan
las enzimas que serán utilizadas en la etapa siguiente, es decir en la duplicación del ADN,
como así también moléculas precursoras de los ácidos nucleicos.
Cuando las células dejan de crecer (si se agotan los nutrientes o por inhibición por
contacto) lo hacen en G1. Esto implica que también se sintetizan las sustancias que estimulan
o inhiben distintas fases del ciclo celular.

240
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Cuando las células normales cesan su crecimiento por diversos factores, se detienen en
un punto tardío de la fase G1, –el punto R ("restricción"), primer punto de control del ciclo
celular–. En algunos casos, antes de alcanzar el punto R, las células pasan de la fase G1 a un
estado especial de reposo, llamado G0, en el cual pueden permanecer durante días, semanas o
años. Una vez que las células sobrepasan el punto R, siguen necesariamente a través del resto
de las fases del ciclo, y luego se dividen. La fase Gl se completa rápidamente y, en la fase S,
comienza la síntesis de DNA y de histonas.
Etapa S: el período S o de síntesis de ADN tiene como característica fundamental la
síntesis de nuevo material genético, para que las células hijas tengan la misma dotación. Sin
embargo persisten los altos índices de síntesis de ARN para obtener enzimas requeridas en la
síntesis de histonas que formarán parte de la macroestructura del ADN y tubulinas
relacionadas con el proceso de división celular.
Etapa G2: En esta fase, ya con el ADN duplicado, la célula ensambla las estructuras
necesarias para la separación de las células hijas durante la división celular y la citocinesis
(separación del citoplasma).

REGULACION GENETICA DEL CICLO CELULAR

La semejanza de los hechos que conducen a la duplicación celular en muchos organismos

evolutivamente distintos, sugiere que el ciclo celular está bajo estricto control genético y que
el programa genético que regula el ciclo celular se ha conservado a lo largo de la evolución. La
pérdida de dicho control puede dar lugar a una división celular incontrolada, que caracteriza a
las células malignas.
Requerimientos:
Lo primero y principal para que se produzcan un par de células genéticamente idénticas
es que el ADN se replique exactamente, que los cromosomas replicados se segreguen en las
dos células hijas.
La mayoría de las células también aumentan su masa y duplican sus orgánulos en cada
ciclo celular. De este modo durante el ciclo celular, un conjunto de procesos citoplasmáticos y
nucleares tienen que coordinarse, ¿cómo se consigue dicha coordinación?

CONTROL DEL CICLO CELULAR

La semejanza de hechos que conducen a la duplicación celular en muchos organismos
evolutivamente distintos, sugiere que el ciclo celular está bajo estricto control genético y que
el programa genético que regula el ciclo celular se ha conservado a lo largo de la evolución. El
estudio del ciclo celular no sólo es importante para la biología celular, también tiene enormes
implicaciones prácticas para combatir el cáncer, una enfermedad ocasionada por la pérdida de
la capacidad de la célula para regular su propia división. Rao y Jonson (1970- Colorado)
querían saber si el citoplasma de las células contiene factores reguladores que afectan las
actividades del ciclo celular. Realizaron una serie de experiencias fusionando células en G1 con
células de la fase S y en otras células G2 con células de la fase S y a través de observaciones

241
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

concluyeron que: el comienzo de la replicación requiere del ensamble de un complejo previo a

la replicación que solo puede ocurrir en G1. Los resultados de otros experimentos sugirieron
que la transición G2 a M también se induce por factores citoplasmáticos.

Sistema de control del ciclo celular

El sistema de control del ciclo celular es un dispositivo bioquímico compuesto por un
conjunto de proteínas reguladoras interactivas: las ciclinas y las quinasas dependientes de
ciclinas que inducen y coordinan los procesos básicos del ciclo, como la duplicación de ADN y la
división celular, a los que denominamos procesos subordinados.
Durante un ciclo típico, el sistema de control está regulado por factores de retraso que
pueden frenar el ciclo en puntos determinados denominados puntos de control. En estos
puntos, las señales de retroalimentación que contienen información sobre los procesos
subordinados pueden detener momentáneamente el avance del ciclo, evitando el inicio del
proceso siguiente antes que el precedente haya terminado. Sobre dichos factores también
actúan señales del entorno como puede ser una hormona o un factor de crecimiento,
nutrientes, temperatura.
Una analogía que puede ayudarnos a comprender este mecanismo es comparar al
sistema de control del ciclo celular con el funcionamiento de una lavadora automática, el
programador de la lavadora sólo avanza a través de los diferentes pasos del ciclo de lavado
(etapas del ciclo celular), si recibe determinadas señales. Adentro de la lavadora hay sensores
que miden el nivel de agua o jabón que ingresan. Estos sensores envían señales que pueden
provocar el retraso o la interrupción del ciclo de lavado. De igual manera en la célula, las
señales generadas en los procesos subordinados (por ej. la síntesis de ADN) o por el entorno,
detienen el ciclo.

Comenzando a partir de la citocinesis, la célula hija resulta pequeña y posee un bajo

contenido de ATP resultante del gasto experimentado en el ciclo anterior. La acumulación del
ATP necesario y el incremento de tamaño acontecen durante el intervalo (en inglés: gap) G1
de la Interfase, la parte más larga del ciclo celular. Cuando adquiere el tamaño suficiente y el
ATP necesario comienza la fase S, la célula sintetiza ADN (replicación del ADN) proceso que da
como resultado final "un original y una copia" del ADN, destinadas a las dos células que se
originan del proceso. Dado que el proceso de síntesis consume una gran cantidad de energía la
célula entra nuevamente en un proceso de crecimiento y adquisición de ATP la fase G2. La
energía adquirida durante la fase G2 se utiliza para el proceso de mitosis.
La regulación del ciclo ocurre de diferentes formas en las distintas células. Algunas de se
dividen rápidamente, otras como la mayor parte de las células nerviosas pierden la capacidad
de dividirse una vez que llegan a la madurez. Algunas, como las células hepáticas, conservan,

242
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

aunque no la utilizan, su capacidad de división. Las células del hígado se dividen si se remueve
parte del hígado y su división continúa hasta que el hígado retorna a su tamaño normal.
Factores ambientales tales como cambios en la temperatura y el pH, disminución de los
niveles de nutrientes llevan a la disminución de la velocidad de división celular. Cuando las
células detienen su división generalmente lo hacen en una fase tardía de la G1 denominado el
punto R (por restricción).
La regulación del ciclo celular se efectúa por medio de factores externos, como moléculas
llamadas factores de crecimiento y nutrientes. El tamaño celular también es un factor
primordial en esta regulación.

CONTROL DE CALIDAD DEL CICLO CELULAR

Durante el ciclo celular, la célula pasa al menos por tres puntos de control (checkpoints)
Punto de control en G1, en este punto el sistema de control de la célula
pondrá en marcha el proceso que inicia la fase S. el sistema evaluará la integridad del
ADN (que no esté dañado), la presencia de nutrientes en el entorno y el tamaño celular.
Aquí es donde generalmente actúan las señales que detienen el ciclo (arresto celular)
Punto de control en G2, en el se pone en marcha el proceso que inicia la fase
M. en este punto, el sistema de control verificará que la duplicación del ADN se haya
completado (que no esté dañado), si es favorable el entorno y si la células es
suficientemente grande para dividirse.
Punto de control de la metafase o del Huso, verifica si los cromosomas
están alineados en el plano metafásico antes de entrar en anafase. Este punto protege

contra perdidas o ganancias de cromosomas, siendo controlado por la activación del APC.

Los puntos de control proporcionan una manera de controlar diversas situaciones de la

célula y evitar la actividad prematura que dañaría a la célula si pasara mas allá de dicho punto.
Ejemplo: a medida que la célula pasa por la fase G1 se encuentra un punto crítico: la
transición a la fase S. en circunstancias normales una vez que se pasa este punto la célula está
obligada a recorrer lo que queda del ciclo incluida la mitosis
Una segunda transición importante es el punto de control en G2, se encuentra cuando la
célula ha terminado de replicar en DNA y se prepara para entrar a M.
La célula progresa hasta M solo si la concentración de este complejo aumenta, caso
contrario se detienen. el último control está en la misma mitosis. En este punto se comprueba,
antes de iniciarse la migración de los cromosomas en la anafase, tanto la formación de las
fibras del huso como su unión a los cinetocoros de los cromosomas. Si por alguna razón no se
ha formado completamente el huso o no ha ocurrido un adecuado enganche, la mitosis se
detiene.

243
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

PROTEÍNAS REGULADORAS
El pasaje de una célula a través del ciclo es controlado por proteínas citoplasmáticas
como ser:
las ciclinas: proteínas que controlan la actividad de sus proteinquinasas
dependientes. La concentración de las ciclinas varía en forma cíclica, aumentando o
disminuyendo durante el transcurso del ciclo celular. En mamíferos existen varias ciclinas: A,
B, D, E y, pero nosotros trabajaremos con algunas de ellas. Cuando las ciclinas alcanzan cierta
concentración en el citoplasma se unen a su kinasa dependiente formando el complejo ciclina-

kinasa
las quinasas dependientes de ciclinas (CDK). Enzimas que mediante la fosforilación
de determinadas proteínas desencadenan los procesos subordinados del ciclo celular. Como
toda quinasa, estas enzimas transfieren un grupo fosfato desde el ATP a otras proteínas que
intervienen en diversas actividades del ciclo celular y de la mitosis. Como consecuencia de la
fosforilación cambia el comportamiento químico de las proteínas blanco, lo que da lugar a que
aumente o disminuya la actividad celular relacionado con la regulación del ciclo celular. Cada
subunidad CDK puede unirse a distintas ciclinas y la ciclina asociada determina que proteína
blanco serán fosforiladas por el complejo ciclina-quinasa.

244
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La fosforilación inicia una serie de hechos que culminan con la activación de algún
factor de transcripción que promueve la transcripción de ciertos genes cuyos productos se
requieren para los siguientes estadios del ciclo celular.
Ejemplo: RB-E2F es un gen que está inactivo desde M a G1 y actúa como proteína
blanco del complejo CDK-C de G1 o FPS (ciclina A + cdk 2). Al fosforilarse RB-E2F cambia de
conformación y RB se separa de E2F el cual se vuelve activo e inicia la transcripción de ciertos
genes que codifican enzimas vitales para la replicación del ADN en la etapa S de la interfase
del ciclo celular.

Diferentes CDK – ciclinas fosforilan diferentes familias de RB que a su vez liberan

miembros específicos de E2F y diferentes E2F transcriben diferentes genes cuyos productos se
ocupan en diferentes momentos del ciclo celular.

Otras proteínas reguladoras corresponden al complejo APC (complejo promotor de la

ANAFASE), el cual desencadena los eventos que conducen a la destrucción de las cohesinas
permitiendo a las cromátidas hermanas separarse e iniciando la degradación de las ciclinas
mitóticas. Un grupo de investigadores del instituto de Patología en Viena, estudiando la
genética y bioquímica de la levadura de cerveza- y en el hombre- identificaron al complejo
securina / separasa- que mantiene unidos cromátidas hermanas. El APC activado ubiquitiniza y
degrada la securina y se activa la separasa que degrada a la cohesina.

245
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

APC cdc20 activa la transición metafase-anafase y APC Cdh1 (dos adaptadores) agregan
ubiquitina a las ciclinas mitóticas, lo que provoca la caída en la actividad de la CDK-C mitótica
y la progresión de la célula para que salga de la mitosis y entre en G1 del siguiente ciclo
celular-

MECANISMO DE REGULACIÓN DEL CICLO CEULAR

Al finalizar la mitosis aumenta la expresión de la ciclina G1 (E), esta ciclina se unirá a su

quinasa (cdk2) formando un complejo activo llamado factor promotor de la fase S (FPS).
Este FPS sólo puede actuar sobre cromosomas en estado pre-replicativo. Así se denominan por
poseer sobre cada origen de replicación un complejo multiproteico llamado Pre-replicativo.
Los orígenes de replicación (Ori) se presentan en número de 20 a 80 sobre cada lazo de
cromatina y se caracteriza por poseer una secuencia común llamada ARS secuencia de
replicación autónoma, formada por dos secuencias GAGGC sobre las que se halla unido el
complejo de reconocimiento del origen de replicación –ORC- uno de los complejos
proteicos que forma parte del complejo pre-replicativo. El segundo componente del complejo
PreR es la proteína Cdc6p (cell división cycle protein) que se sintetiza en G1 y se inserta
sobre los orígenes de replicación. El nivel creciente de FPS al inicio de la fase S induce la
apertura de los orígenes de replicación, activando las moléculas responsables de la síntesis de
ADN e induciendo la separación del complejo PreR del componente Cdcp6 y otros. Separados
estos componentes se inicia la síntesis y por lo tanto el FPS no se requiere mas, siendo su
componente lábil, la ciclina G1, degradada en proteosomas.
Los cromosomas a partir de este momento se llamarán cromosomas post-replicativos
hasta el inicio de la anafase.
Degradadas las ciclinas G1, el nivel de la ciclinas mitóticas aumenta. Un nuevo
participante entra en el ciclo, el complejo promotor de la mitosis FPM, formado por las
ciclinas mitóticas mas las quinasas dependientes de las ciclinas M (ciclina B + Cdc2). Este
inicia el ensamblado del huso mitótico, la desintegración de la envoltura nuclear y la
condensación de los cromosomas, al inducir la fosforilación de diferentes sustratos como las
láminas nucleares, conduciendo a la célula a la metafase.

A esta altura del ciclo, el FPM activa al complejo APC complejo promotor de la
anafase que permite la separación de las cromátides hermanas y su migración a los polos. Así
se completa la mitosis, se destruyen las ciclinas de la fase M y se activan las ciclinas G1 para
el próximo ciclo celular.

Proteína p53, el guardián del genoma

Como hemos mencionado en los párrafos precedentes, tanto en el punto de control G1
como G2 se verifica la integridad del ADN. Ante la presencia de ADN dañado se genera una
señal que retrasa la entrada en fase M. El mecanismo depende de una proteína llamada p53,
que se acumula en la célula en respuesta a las alteraciones de ADN, deteniendo el sistema de
control en G1 y por lo tanto impidiendo la posterior entrada en mitosis. El gen p53 es uno de
los genes supresores de tumores más conocidos, que no sólo detiene el ciclo (arresto celular),
sino también participa en la apoptosis (muerte celular programada) forzando a las células al
suicidio cuando el daño en el ADN es irreparable.

246
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Las células que presentan los dos alelos del gen p53 mutados, tendrán proteína p53 no
activa y por lo tanto continuarán dividiéndose a pesar del daño en su genoma, por lo tanto
desarrollarán cáncer. Las mutaciones del gen p53 presentan una alta incidencia en la mayoría
de los cánceres humanos. Por ello, la forma normal del gen se denomina genes supresores de
tumores o genes oncosupresores.
El producto génico p53
es una proteína que funciona
como activador
transcripcional por lo que
regula la expresión de otros
genes que controlan el ciclo
celular.
La p53 en condiciones
normales es inestable y no se
acumula (se la destruye en
proteosoma). Cuando hay por
ejemplo DNA dañado se
estabiliza y aumenta su
concentración y se
desencadena lo visto en la
figura y la célula se detiene
en G1 hasta que el DNA sea
reparado. Si el daño es
extenso, la p53 activa la
expresión de genes que
conducen a la apoptosis.

¿Cómo actúa la p53?

Cuando el ADN presenta un daño "limitado",

aumentan los niveles de proteína p53. Dicha
proteína activa la transcripción del gen p21, que
codifica a la proteína p21. Esta última proteína
ejerce su efecto inhibidor uniéndose al complejo
ciclina-Cdk2 y deteniendo el ciclo. Cuando el ADN
es reparado, la proteína p53 se libera del promotor
del gen p21, provocando el descenso en los niveles
de p21. Esto permite restaurar la actividad del
complejo ciclina-Cdk2.

Oncogenes y Cáncer
Los genes supresores de tumores, codifican para productos celulares que inhiben la
proliferación celular. Para impedir el efecto protector que ejercen sobre el genoma, se requiere
la mutación de sus dos alelos.
Los genes conocidos como protooncogenes codifican proteínas que estimulan la división
celular, por ejemplo, factores del crecimiento o receptores de factores del crecimiento.
La mutación de uno de los dos alelos que codifican para un protooncogen, lo transforma
en un oncogen capaz de originar productos celulares que estimulan la división celular de forma
incontrolada conduciendo al cáncer, con alteración de los mecanismos de control del ciclo
celular.

247
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Mitosis
El término mitosis proviene de la palabra griega mitos, que significa “hebra”. Lo acuñó en
1882 el biólogo alemán Walter Flemming para describir a los cromosomas filiformes que
aparecían en forma misteriosa en las células animales justo antes de dividirse en dos.
La mitosis cumple la función de distribuir los cromosomas duplicados de modo tal que
cada nueva célula obtenga una dotación completa de cromosomas. La capacidad de la célula
para llevar a cabo esta distribución depende del estado condensado de los cromosomas
durante la mitosis y del ensamble de microtúbulos denominado huso.
La división celular es un fenómeno complejo por el que
los materiales celulares se dividen en partes iguales entre las
dos células hijas. En una serie de pasos que en conjunto se
llaman MITOSIS se asigna a cada célula hija un juego
completo de cromosomas. Hacia el final de este proceso, se
produce la división o clivaje del citoplasma ( citocinesis ) y
las dos células hijas se separan, de modo que cada una no
sólo contiene un complemento cromosómico completo, sino
también más o menos la mitad del citoplasma y de los
organoides de la célula madre. La mitosis puede ocurrir en
células haploides o diploides
Este proceso es sólo la fase final y microscópicamente
visible de cambios ocurridos a nivel molecular y bioquímico.
El mecanismo mitótico
El mecanismo de la mitosis es semejante en todas las
células eucariontes, aún cuando existen diferencias entre
células animales y vegetales. La serie de fenómenos que
constituyen el ciclo mitótico comienza al finalizar el período G
2 de la interfase y termina al iniciarse el período G 1 de una
nueva interfase. Las principales fases de la mitosis son:
Profase, Metafase, Anafase y Telofase; de éstas la de mayor
duración suele ser la profase.
Al iniciarse la mitosis, la cromatina se arrolla
lentamente y se condensa en forma compacta. Esta condensación sería necesaria para los
complejos movimientos y separación de los cromosomas durante la mitosis. Cuando los
cromosomas condensados se tornan visibles, cada uno consiste en dos réplicas llamadas
cromátides unidas entre sí por el centrómero. Dentro de éste hay estructuras proteicas, los
cinetocoros.
Etapas de la Mitosis
PROFASE
Al comienzo de la profase la cromatina empieza a condensarse visualizándose los
cromosomas individuales. La condensina se activa al inicio de la mitosis mediante la
fosforilación de varias de sus subunidades por una ciclina-quinasa que se encarga de impulsar
las células de G2 a la mitosis. Como resultado es la compactación de los cromosomas. Cada
cromosoma consta de dos cromátidas duplicadas conectadas a nivel del centrómero. Al mismo
tiempo, la célula adopta una forma esferoidal y se hace más refringente y viscosa.
La envoltura nuclear se desintegra a medida que se condensan los cromosomas. Al final
de la profase, la envoltura nuclear desaparece, los cromosomas se han condensado por
completo. La marca distintiva mas notable de un cromosoma mitótico es la constricción
primaria, que marca la posición del centrómero. El centrómero es la residencia de secuencias
de DNA muy repetidas que sirven de sitios de unión para proteínas específicas. El cinetocoro,
una estructura proteica aparece en la superficie externa del centrómero de cada cromátide,
dicho cinetocoro funciona como 1) sitio de unión del cromosoma a los microtúbulos del huso
mitótico, 2) residencia de proteínas motoras participantes en la motilidad de los cromosomas.

248
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Los centrosomas con sus centríolos (si se encuentran presentes) ya están duplicados y
migran a los polos; se forma el huso mitótico. En el citoplasma, el retículo endoplasmático y el
complejo de Golgi se fragmentan en vesículas, se desorganiza el citoesqueleto por lo que la
célula pierde su forma original y se hace esférica, algunos organoides permanecen más o
menos intactos durante la mitosis, peroxisomas, mitocondrias, lisosomas.
Al término de esta fase, el
aparato mitótico está totalmente
organizado.
El APARATO MITÓTICO
El aparato mitótico
comprende el huso y los ásteres
que rodean a los centríolos. El
áster aparece como un grupo de
microtúbulos radiales
(microtúbulos astrales) que
convergen hacia el centríolo,
alrededor del cual se observa una
zona clara llamada centrosoma.
Las fibras del huso se
clasifican en tres tipos: continuas
(polares), que se extienden de
polo a polo de la célula;
cromosómicas (cinetocóricas), que
unen a los cromosomas a los polos
Los cinetocoros son los sitios
donde se implantan los
microtúbulos en los cromosomas y
actúan en el armado de los
microtúbulos.

METAFASE
Algunas veces se denomina
prometafase a la transición entre la
profase y la metafase. Se trata de un
período muy corto durante el cual se
termina de desintegrar la envoltura
nuclear y se acaba de armar el aparato
mitótico.
En la metafase, los cromosomas
unidos a las fibras del huso por sus
cinetocoros; sufren movimientos
oscilatorios hasta que se ordenan en el
plano central o ecuatorial, formando la
placa ecuatorial. Las fuerzas necesarias
para los movimientos cromosómicos
provienen de las proteínas motoras.
La célula llega a la metafase cuando
todos los cromosomas se alinean en el ecuador del huso, con un cromátide de cada
cromosoma conectado por su cinetocoro con los microtúbulos de un polo y su cromátide
hermano conectado por su cinetocoro con los microtúbulos del polo contrario.

249
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

ANAFASE
Al comienzo de la anafase, los centrómeros se separan simultáneamente en todos los
pares de cromátidas. Los cinetocoros y las cromátidas se separan y comienzan su migración
hacia los polos. En esta etapa actúa el complejo APC. El cinetocoro siempre precede al resto de
la cromátida o cromosoma hijo, como si
éste fuera traccionado por las fibras
cromosómicas del huso. Todos los
cromosomas de la placa de la metafase se
dividen en sincronía al principio de la
anafase y los cromátides (ahora
denominados cromosomas) comienzan su
migración hacia el polo. El movimiento de
cada cromosoma hacia el polo se debe al
acortamiento de los microtúbulos
cinetocóricos. Este movimiento es muy
lento lo que asegura que se separen con
exactitud y sin enredos. El movimiento de
los cromosomas hacia los polos se conoce
como Anafase A para distinguirlo de un movimiento distinto, pero simultáneo, la anafase B, en
la que los dos polos del huso se separan más.
Fuerzas necesarias para los movimientos de los cromosomas durante la anafase: dos
propuestas generales son motivo de debates en los últimos 20 años. De acuerdo con un grupo
de investigadores las proteínas motoras proporcionan las fuerzas necesarias, mientras que el
otro grupo argumenta que es la dinámica de los microtúbulos la que lo explica. Es probable
que ambos factores contribuyan a la generación de la fuerza.
La dineína citoplasmática (asociada al cinetocoro) se mueve sobre la superficie de los
microtúbulos hacia los extremos menos y por consiguiente tendería a mover un cromosoma
unido hacia los polos.
1960- se propuso que la despolimerización de los microtúbulos cromosómicos durante la
anafase no era una mera consecuencia de los movimientos de los cromosoma sino la causa de
éste.
Es aquí donde actúa un punto de control del ciclo celular, el punto de revisión del huso, el
alineamiento en el plano ecuatorial. Este punto de revisión del huso está ausente en muchas
células tumorales

TELOFASE
El final de la migración de los cromosomas hijos indica el principio de la telofase. Los
cromosomas comienzan ha desenrollarse y se vuelven cada vez menos condensados, mediante
un proceso que en cierta forma es inverso a la profase.
El huso se dispersa en subunidades de tubulina y se desintegra. Los cromosomas se
agrupan en masas de cromatina
rodeadas de segmentos discontinuos
de envoltura nuclear provenientes del
REG (retículo endoplásmico rugoso),
hasta que la envoltura nuclear queda
reconstituida, en cada grupo
cromosómico.
Los nucléolos aparecen en las
etapas finales a nivel de los
organizadores nucleolares de algunos
cromosomas.
Hasta este momento hemos
considerado la división nuclear

250
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

(cariocinesis), a ésta le suele seguir la segmentación y separación del citoplasma (citocinesis).

CITOCINESIS
Es el proceso de clivaje y separación del citoplasma. Puede producirse simultáneamente
a la anafase y telofase, o en una etapa posterior.
El clivaje se produce siempre en la línea media de la célula. La membrana celular
comienza a estrecharse en el área donde se situaba el ecuador del huso. Al principio aparece
un surco en la superficie, que luego se profundiza hasta que la célula se divide. Se supone que
en esta constricción intervienen microfilamentos de actina, pues se los observa en grandes
cantidades cerca de los surcos. Los filamentos de actina forman un anillo contráctil. Entre los
filamentos de actina se intercala una menor cantidad de filamentos bipolares cortos de miosina
II. Como resultado el anillo contráctil constriñe la región ecuatorial de la célula
Durante la citocinesis, los distintos organoides citoplasmáticos se distribuyen
equitativamente en ambas células hijas.

251
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

Meiosis y reproducción sexual

El tener dos juegos de cromosomas, uno heredado de cada progenitor, es un factor clave
en el ciclo de vida humano y en los ciclos de otras especies que se reproducen sexualmente.
Las células cuyos núcleos contienen dos juegos de cromosomas se llaman diploides y el
número total de cromosomas se denomina número diploide (2n). En humanos el número
diploide es 46 esto es, 2n=46. Se dice que los humanos son organismos diploides debido a que
casi todas nuestras células son diploides. Las excepciones son las células del óvulo y los
espermatozoides conocidos como gametos. Cada gameto tiene un solo juego de cromosomas y
se llama célula haploide n=23.
En el ciclo de vida humano, el intercambio sexual
permite a la célula espermática del padre llegar y
fusionarse con un óvulo haploide de la madre en el
proceso de fecundación. El huevo fecundado
resultante, llamado cigoto, es diploide. Cuenta con dos
juegos haploides de cromosomas: un juego del padre
y un juego homólogo del padre. El ciclo de vida se
completa conforme un adulto sexualmente maduro se
desarrolla a partir del cigoto (mitosis).
La reproducción sexual requiere, en general, de
dos progenitores y siempre involucra dos hechos: la
fecundación y la meiosis. La fecundación es el medio
por el cual las dotaciones genéticas de ambos
progenitores se reúnen y forman una nueva identidad
genética, la de la progenie.
La meiosis, un término acuñado desde 1905 y
significa “reduccion” es un tipo especial de
división nuclear en el que se redistribuyen los
cromosomas y se producen células que tienen
un número haploide de cromosomas (n). La
fecundación restablece el número diploide (2n).
En organismos con reproducción sexual, la
haploidía y la diploidía se suceden a lo largo de
los ciclos de vida.
En toda célula diploide, cada cromosoma
tiene su pareja. Estos pares de cromosomas se
conocen como pares homólogos. Los dos se
asemejan en tamaño y forma y también en el
tipo de información hereditaria que contienen.
Uno de los cromosomas homólogos proviene
del gameto de uno de los progenitores y su
pareja, del gameto del otro progenitor. Después
de la fecundación, ambos homólogos se
encuentran presentes en el cigoto.
En la meiosis, la dotación cromosómica
diploide, que contiene los dos homólogos de
cada par, se reduce a una dotación haploide, que
contiene solamente un homólogo de cada par.
Así, la meiosis compensa los efectos de la
fecundación.
Un estudio de varios eucariotas revela
diferencias marcadas con respecto a la etapa del
ciclo vital en la que la meiosis ocurre y la
duración de la fase haploide. Con esta base
pueden identificarse los tres grupos siguientes:

252
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

1. meiosis gamética o terminal, en este grupo, que incluye a todos los animales
pluricelulares y muchos protistas, las divisiones meióticas están muy vinculadas
con la formación de gametos. Por ejemplo, en los vertebrados machos la meiosis
ocurre justo antes de la diferenciación de los espermatozoides. Las
espermatogonias que están destinadas a pasar por meiosis se convierten en
espermatocitos primarios que luego pasan por las dos divisiones de la meiosis
para producir cuatro espermátidas hasta cierto punto indiferenciadas. Cada
espermátide pasa por una diferenciación compleja para convertirse en una célula
muy especializada espermatozoide. En los vertebrados hembra las oogonias se
convierten en oocitos primarios, que luego entran en profase meiótica muy
prolongada. Durante esta profase el oocito primario crece y se llena de vitelo. La
meiosis se completa después de la fertilización.
2. meiosis cigótica o inicial, en este grupo, que comprende protistas y hongos, las
divisiones meióticas ocurren justo después de la fertilizacion para producir
esporas haploides, las cuales se dividen por mitosis para producir la generación
adulta haploide.
3. meiosis en esporas o intermedia, en este grupo, que abarcan plantas y
algunas algas, las divisiones meióticas ocurren en una etapa no relacionada con la
formación de gametos ni con la fertilización. si se comienza el ciclo vital con la
unión de un gameto masculino (el grano de polen) con un gameto femenino (el
huevo), el cigoto diploide pasa por la mitosis y se desarrolla un esporofito
diploide. La esporogénesis (que incluye la meiosis) ocurre en alguna etapa del
desarrollo del esporofito, con lo que se producen esporas que germinan de
manera directa en un gametofito haploide. Los gametos se producen a partir del
gametofito haploide por mitosis.
La meiosis ocurre en diferentes momentos del ciclo vital, según en que especie se
produzca. Aunque la meiosis en los animales produce gametos, en las plantas produce
esporas. Una espora es una célula reproductora haploide que, a diferencia de un gameto,
puede producir un organismo haploide sin haberse fusionado previamente con otra célula. Sin
embargo, con la formación de gametos y esporas por meiosis, se obtiene el mismo resultado:
en algún momento del ciclo vital de un organismo que se reproduce sexualmente, se reduce la
dotación diploide de cromosomas a la dotación haploide.

Las fases de la meiosis

La meiosis es un tipo especial de división nuclear. Consiste en dos divisiones nucleares
sucesivas, designadas convencionalmente meiosis I y meiosis II. Durante este proceso de
división se redistribuyen los cromosomas y se producen células que tienen un número haploide
de cromosomas (n).
Durante la interfase que precede a la meiosis, los cromosomas se duplican. La fase S
premeiótica tarda varias veces mas que la fase S premitótica. Las células que habían estado
dividiéndose por mitosis tienen que tomar la decisión de entrar en meiosis, por ejemplo en las
plantas, en los sacos polínicos de las anteras de los estambres, súbitamente todas las células
de un saco polínico dejan de comportarse como proliferantes y se transforman en meiocitos.

253
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

La señal es desconocida, se supone que es una hormona. La replicación de los cromosomas no

es completa, solo 98% ya sea para que los meiocitos adquieran su compromiso de entrar a
meiosis o como para facilitar el apareamiento de los cromosomas homólogos. No hay G2, acá
comienza el leptonema.
La profase de la primera división meiótica (o sea profase I) suele prolongarse en forma
extraordinaria en comparación de la profase mitótica. Por ejemplo, en la hembra humana los
oocitos inician la profase I de la meiosis antes del nacimiento y luego entran en un período de
paro prolongado. Los oocitos reanudan la meiosis justo antes del momento de la ovulación,
que ocurre aproximadamente cada 28 días después que la mujer llega a la pubertad. Por
consiguiente muchos oocitos humanos permanecen detenidos en la misma etapa durante
varios decenios. La primera profase meiótica también es muy compleja y suele dividirse en
varias etapas similares en todos los eucariotas con reproducción sexual.
La primera etapa de la profase I es el leptoteno, durante la cual los cromosomas se
tornan visibles con el MO. Acá ocurre la búsqueda del homólogo. Se caracteriza por la
aparición de una figura llamada bouquet, que consiste en la disposición en forma de ramo de
los cromosomas orientados hacia el centro celular.
La segunda fase se llama cigoteno esta marcada por una relación visible de los
homólogos. Este proceso de emparejamiento de cromosomas se llama sinapsis y es un
fenómeno intrigante ¿Cómo se reconocen los homólogos entre si?
Durante años se asumió que la interacción entre los cromosomas homólogos comienza
cuando los cromosomas inician la sinapsis, sin embargo estudios realizados demostraron que
los cromosomas homólogos ya están en contacto en el leptoteno. También demostraron que
las roturas en el DNA ocurren en el leptoteno.
La sinapsis cromosómica se acompaña de la formación de una estructura compleja
llamada complejo sinaptonémico, similar a una escalera con filamentos de proteína
transversales que conectan los dos elementos laterales. La cromatina de cada homólogo se
organiza en asas que se extienden desde uno de los elementos laterales del CS. Los elementos
laterales están compuestos por cohesina que al parecer une la cromatina de las cromátides
hermanos. Durante muchos años se pensó que el CS sujetaba cada par de cromosomas
homólogos en la posición correcta para iniciar la recombinación genética entre las cepas de
DNA homólogo. Ahora resulta evidente que el CS no es necesario para la recombinación
genética, sino que las células de levadura mutantes incapaces de ensamblar el CS pueden
participar en el intercambio de la información genética entre homólogos. En la actualidad se
piensa que el CS funciona sobre todo como un marco que permite la interacción de cromátides
para que completen sus actividades de cruzamiento.
El complejo formado por un par de cromosomas homólogos unidos se denomina
bivalente o tétrada. El primer término refleja el hecho de que el complejo contiene dos
homólogos, mientras que el último llama la atención en cuanto a la presencia de cuatro
cromátides. El final de la sinapsis marca el final del cigoteno y el principio del paquiteno, que
se caracteriza por un CS totalmente formado. Los homólogos se mantienen juntos, al Se me
ven varios cuerpos densos al interior del CS, se denominaron nódulos de recombinación
porque corresponden a los sitios en los que se produce el cruzamiento, contienen la
maquinaria enzimática necesaria que facilita la recombinación genética, que se completa al
final del paquiteno. Para la recombinación genética o crossing over, se producen rupturas
transversales en las dos cromátidas al mismo nivel, seguidas por el intercambio y la fusión de
los segmentos intercambiados. La secuencia de sucesos que conduce a la recombinación puede
ser observada en el modelo de Holliday. (ruptura-transposición y fusión)
El principio del diploteno se reconoce por la disolución del CS, que deja los cromosomas
unidos entre sí en puntos específicos por estructuras con forma de X, llamadas quiasmas. Los
quiasmas se localizan en sitios de los cromosomas en los que antes ocurrió el cruzamiento
entre moléculas de ADN de los dos cromosomas. Los quiasmas se forman por las uniones
covalentes entre un cromátide de un homólogo y un cromátide no hermano del otro homólogo.
Los quiasmas se tornan mas visibles por una tendencia de los homólogos a separarse uno del
otro. Los quiasmas son la evidencia física o expresión morfológica del intercambio genético. En
vertebrados el diploteno puede ser una fase muy prolongada de la oogénesis, en la mujer

254
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

todos los oocitos I arriban a esta fase del ciclo celular antes del séptimo mes de vida
intrauterina y permanecen en tal fase hasta la pubertad.
Durante la diacinesis, el huso meiótico se ensambla y los cromosomas se preparan para
su separación. Los cromosomas se compactan, desaparece el nucleolo, rotura de la envoltura
nuclear y el movimiento de las tétradas a la placa de la metafase.
En la metafase I , los dos cromosomas homólogos de cada bivalente se conectan con
las fibras del huso de los polos opuestos. En contraste, los cinetocoros de los cromátides
hermanos se conectan como una unidad con los microtúbulos del mismo polo del huso. La
orientación de los cromosomas maternos y paternos en cada bivalente de la placa de metafase
I es aleatoria, en consecuencia cuando los cromosomas homólogos se separan durante la
anafase I, cada polo recibe una colección aleatoria de cromosomas maternos y paternos. Por lo
tanto la anafase I es el evento citológico que corresponde a la ley de Mendel de la distribución
independiente.
Para la separación de los cromosomas homólogos en la anafase I es necesario que los
quiasmas que mantienen unido el bivalente se disuelvan. Los brazos de los cromátides de cada
bivalente pierden la cohesina en contraste, la cohesión entre los centrómeros unidos de los
cromátides hermanos se mantiene fuerte porque la cohesina ahí situada está protegida contra
el ataque proteolítico, el resultado es que los cromátides hermanos permanecen unidos con
firmeza mientras se mueven juntos hacia un polo del huso durante la anafase I.
La telofase I de la meiosis I produce cambios menos drásticos que la telofase de la
mitosis I, los cromosomas no llegan al estado tan extendido del núcleo en interfase, la
envoltura nuclear puede o no reformarse durante la telofase I, la etapa entre las dos divisiones
se llama intercinesis y por lo general es corta.
Estas células se caracterizan por ser haploides porque contienen sólo un miembro de
cada par de homólogos, y aunque son haploides contienen dos veces mas DNA que un gameto
haploide, porque cada cromosoma aún está representado por dos cromátides hermanos. Si
dice que los espermatocitos secundarios tienen una cantidad 2C de DNA, la mitad que un
espermatocito primario, que tiene un contenido 4C de DNA y dos veces mas que una célula
espermática, cuyo contenido de DNA es 1C.
Tras la intercinesis, sigue la profase II, mucho más sencilla, si la envoltura nuclear se
reformó en la telofase I, se rompe de nuevo. Los cromosomas se compactan otra vez y se
alinean en la placa de metafase. A diferencia de la metafase I, los cinetocoros de los
cromátides hermanos de la metafase II se dirigen a polos contrarios. La progresión de la
meiosis en los oocitos de los vertebrados se detiene en metafase II, por factores que inhiben la
degradación de la ciclina B, lo que hace que se mantenga la actividad de la Cdk y las células no
pueden avanzar a la siguiente etapa de la meiosis. El paro de la metafase II sólo se libera
cuando el oocito (ahora llamado huevo) se fertiliza. La anafase II comienza con la división de
los centrómeros, que mantuvieron juntos los cromátides hermanos, lo que les permite
moverse hacia los polos contrarios de la célula. La meiosis II concluye con la telofase II en la
que los cromosomas están encerrados por la envoltura nuclear. Los productos de la meiosis
son células haploides con una cantidad 1C de ADN nuclear, con una combinación casi única de
de genes (variabilidad)
Pero….Existen importantes diferencias entre los procesos de mitosis y meiosis. Durante la
meiosis, cada núcleo diploide se divide dos veces, produciendo un total de cuatro núcleos. Sin
embargo, los cromosomas se duplican sólo una vez, antes de la primera división nuclear. Por
lo tanto, cada uno de los cuatro núcleos producidos contiene la mitad del número de
cromosomas presentes en el núcleo original. A diferencia de lo que ocurre en la meiosis, en la
mitosis, luego de la duplicación de los cromosomas, cada núcleo de divide sólo una vez. En
consecuencia, el número de cromosomas se mantiene invariable.
Debido al fenómeno del entrecruzamiento y al de segregación al azar de los cromosomas,
durante la meiosis se recombina el material genético de los progenitores, lo que no ocurre en
la mitosis.
La mitosis puede ocurrir en células haploides o diploides, mientras que la meiosis ocurre
solamente en células con un número diploide (o poliploide) de cromosomas.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

¿Cómo se replica el ADN una sola vez? ¿Cómo se mantiene la euploidia celular?
En la fase G1, la Cdk cliclina promueve la adición al complejo de replicación del OR de
ADN de unos reguladores llamados Cdc 6 los cuales reclutan a MCM formando un complejo
prereplicativo del ADN que recluta a la maquinaria de Replicación Genética. Una vez iniciado S
la Cdk-S produce la disociación de Cdc6 y su posterior proteólisis así como la exportación al
citosol del MCM, con lo que el OR no puede hasta el ciclo siguiente reclutar al complejo de pre
replicación
¿Cómo se entra en mitosis?
Ciclina B – de la Cdk – M existe e todo el ciclo celular. Sucede que la Cdk está inhibida
por fosforilación mediante proteína Wee pero a final de G2 se activa una fosfatasa llamada
Cdc25 elimina el P inhibidor y permite el aumento de su actividad. Cdk – M inhibe a Wee y
activa Cdc 25 (retroalimentación positiva, permite la acumulación de Cdk-M
¿Cómo se separan las cromátida hermanas?
En mitosis, las cromátidas han de eliminar su esqueleto de adhesión cohesina para ello
Cdk-M activa APC por unión a Cdc20 –ubiquitiniza y favorece la posterior degradación de la
segurina –inhibidora de la enzima separasa que debe escindir a la cohesina. ¿Cómo se sale?
APC ubiquitiniza ciclina B cesa de actividad de Cdk-M

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

258
 PARTE 13
GENÉTICA MENDELIANA
GENETICA: MENDEL Y LO QUE SIGUIÓ
La ciencia de la Genética tiene raíces antiguas
Los intentos por explicar la herencia se remontan a la antigua Grecia. Hipócrates,
conocido como el padre de la Medicina, sugirió una explicación llamada pangénesis.
De acuerdo con esta idea, las partículas llamadas pangenes viajan de cada parte
del organismo, a los óvulos y a los espermatozoides, para luego pasar a la
generación siguiente; aún mas, los cambios que se presentan durante la vida de un
organismo son transmitidos de esta forma. El filósofo Aristóteles rechazó esta idea
por su simplicidad, argumentando que lo que es heredado es el potencial para
producir características corporales, en vez de partículas de las características en sí
misma.
De hecho la pangénesis probó ser incorrecta en varios casos. Las células
reproductoras no están formadas por partículas de células somáticas (cuerpo), y los
cambios en las células somáticas no influyen en los óvulos o en los
espermatozoides. Por ejemplo, sin importar qué tanto aumente usted los bíceps
levantando pesas, las células musculares de los brazos no transmitirán la
información genética a los gametos, y su descendencia no cambiará por su esfuerzo
de levantar pesas. Esto podría parecer de sentido común hoy en día, pero la
hipótesis de la pangénesis y la idea de la herencia de caracteres adquiridos durante
la vida de un individuo prevalecieron hasta el siglo XIX.
Al rastrear los patrones en plantas ornamentales, los biólogos de principios del siglo
XIX establecieron que la descendencia hereda caracteres de ambos progenitores. La
explicación más favorecida de la herencia se convirtió entonces, en la hipótesis de
la “mezcla”: la idea de que los materiales hereditarios proporcionados por los
progenitores macho y hembra, se mezclan para formar la descendencia de la
manera en que los colores azul y amarillo se mezclan para formar el verde. De
acuerdo a esta hipótesis, una vez que la información genética para los colores de
los periquitos australianos azules y amarillos se mezcla en el material hereditario,
serán inseparables como pigmentos de pintura. Toda la descendencia de los
periquitos verdes serán verdes, y eventualmente todos los periquitos australianos
en todas partes serán verdes. Pero como vimos, los periquitos verdes pueden
producir una descendencia azul. Se encontró finalmente que la hipótesis de la
mezcla era insostenible debido a que no explicaba como los caracteres que
desaparecen en una generación, pueden volver a aparecer en generaciones
posteriores.

La genética experimental comenzó en el jardín de una abadía

La ciencia moderan de la genética comenzó en la década de 1860 cuando el monje
agustino llamado Gregorio Mendel descubrió los principios fundamentales de ha
genética al cultivar chícharos de jardín.
Mendel vivió y trabajó en una abadía en Brunn, Austria, ahora Brno, en la República
Checa. En una publicación hecha en 1866, Mendel argumentó correctamente que
los progenitores transmiten a su progenie factores hereditarios separados. Puso
énfasis en que los factores (llamados actualmente genes) retenían su
individualidad generación tras generación. La explicación de Mendel difería tanto de
la pangénesis como de la hipótesis de la mezcla.
La revolución genética se produjo cuando la Teoría de la herencia por Mezcla fue
reemplazada por la Teoría de unidades enunciada por Mendel. La gran contribución
de Mendel fue demostrar que las características hereditarias son llevadas en
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

unidades discretas o Factores individuales que se distribuyen de diferente manera y

se redistribuyen en cada generación. Estas unidades discretas llamadas por Mendel
Elemente finalmente fueron conocidas como genes.
Dichas experiencias, realizadas en el jardín del monasterio, fueron publicadas en la
revista de la Sociedad de Historia Natural de Brunn en 1866, siendo olvidadas al
poco tiempo. Mendel llego a ser abad de su Monasterio en 1868, lo que lo aparto de
sus investigaciones sobre la transmisión hereditaria. Años más tarde, sus artículos
revolucionarían el mundo científico.
El material vivo que en la reproducción sexual conecta una generación con la
siguiente es microscópico. Consiste en una pequeña célula, el óvulo, producida por
el progenitor femenino, que es fecundada por otra célula, aún más pequeña, el
espermatozoide, producida por el progenitor masculino. El cigoto así formado se
desarrolla de acuerdo con un conjunto de instrucciones codificadas en las moléculas
de ADN del núcleo celular.
Tras un período de desarrollo, el nuevo individuo se asemeja a sus progenitores en
casi todos los aspectos, pero difiere también de uno de ellos o de ambos en varios
aspectos importantes. ¿Cuáles son los factores que contribuyen a esas semejanzas
y diferencias entre los organismos?.
 Uno de ellos la HERENCIA. Podríamos decir, entonces, que:

La HERENCIA de un individuo es el conjunto de instrucciones codificadas en el

ADN que recibe a través de las células sexuales de sus progenitores.
ES LA POSIBILIDAD QUE TIENEN LOS INDIVIDUOS DE UNA GENERACION DE TRANSMITIR SUS
CARACTERES A LA DESCENDENCIA
Un segundo factor importante que afecta el desarrollo y la vida posterior del
individuo es el AMBIENTE. Una planta puede heredar la capacidad de florecer y
fructificar, pero no lo hará si se la mantiene en la oscuridad.
La comprobación del parecido de los hijos con los padres o abuelos es un hecho que
se repite de generación en generación. Si bien fue fácil de observar, resultó sin
embargo, difícil de interpretar.
Fue GREGOR MENDEL quien en 1856 llegó a establecer que:

➣ Las características biológicas de los individuos están determinadas

por "factores", que pasan de padres a hijos sin que la transferencia
modifique la naturaleza de estos "factores".

➣ El comportamiento de los "factores hereditarios" podía predecirse

aplicando leyes o relaciones matemáticas sencillas (por lo menos en
algunos casos).

[Gregorio Mendel (1822 - 1884). En su juventud Mendel tuvo una intensa

formación práctica en el cultivo de la mayoría de las especies vegetales de consumo
cotidiano. Como monje agustino tuvo oportunidad de estudiar botánica, matemática
y química en la Universidad de Viena. A mediados del siglo XIX propuso la primera
explicación científica en relación al modo en que se transfieren los caracteres
hereditarios entre padres e hijos, la que hoy se conoce como las Leyes de Mendel]
El éxito científico de los experimentos realizados por Mendel en la huerta del
monasterio de la que hoy es la ciudad de Brno en Checoslovaquia, radica en el
Material Biológico elegido, es decir, la capacidad de auto polinizarse de las flores de
la planta de arveja y la sencilla identificación de sus caracteres; en la metodología
empleada en la planificación de sus experimentos, es decir, en la aplicación del
método científico y en la aplicación de las leyes de las probabilidades, aplicadas al

260
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

lanzamiento de 2 monedas y de 4 monedas, que le sirvió para predecir sus

resultados experimentales.
Para llegar a estas conclusiones trabajó paciente y metódicamente durante años,
con plantas de arvejillas. Con la enorme cantidad de datos recogidos, y sus
conclusiones, publicó en 1866 un informe que presentó en la Asociación Naturalista
de Brünn. Su trabajo recorrió toda Europa y América, sin embargo pasarían muchos
años antes de que alcanzara repercusión.
Recién en 1902, WALTER SUTTON (estadounidense), redescubrió el trabajo de
Mendel. Determinó que los factores hereditarios de los que él hablaba corresponden
a segmentos de ADN llamados GENES, ubicados en los cromosomas.

TIPOS DE CARACTERES

➣ HEREDITARIOS : son los que pueden transmitirse de padres a hijos

a) CONGÉNITOS: los tiene el individuo desde el nacimiento. Ejemplo: cada una de

las características físicas visibles o no de un bebe recién nacido
b) POSTNATALES: aparecen después del nacimiento, a pesar de ser hereditarios.
Pueden aparecer inmediatamente después del nacimiento (ejemplo: el color de los
ojos), o en forma tardía (ejemplo : Corea de Huntinton , enfermedad caracterizada
por la aparición de movimientos involuntarios anormales que comienza entre los 30
y 40 años; no tiene tratamiento y lleva a la invalidez )

➣ NO HEREDITARIOS: son los caracteres que no pueden trasmitirse a los hijos.

Son adquiridos. También se llaman somaciones.

a) CONGÉNITOS: los tiene el individuo desde el nacimiento , pero no porque los

halla heredado de los padres , sino porque los adquirió en la panza de la madre o
durante el nacimiento . Pueden clasificarse en:
I- PRENATALES: los adquirió durante la gestación Ejemplo : sífilis , SIDA

II- PERINATALES: los adquirió inmediatamente antes o durante el parto . Ejemplo :

traumatismos por el uso de fórceps ,
conjuntivitis gonocócica.
B-POSTNATALES: los adquirió el individuo
después del nacimiento, a los largo de
toda su vida. Ejemplo: amputación de una
pierna.
RECORDAR QUE LOS CARACTERES
ADQUIRIDOS NO SE HEREDAN

Mendel ideó un plan de investigación

cuidadoso
Mendel eligió la planta de arbeja (guisante
común – Pisum sativum) debido a su fácil
cultivo, la factibilidad de polinización
controlada, la disponibilidad de variables
con diferentes rasgos. Controlaba la
fertilización de las plantas parentales,
moviendo manualmente el polen de una
planta a otra. Así conocía el parentesco de
la descendencia en sus experimentos. Si

261
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

permanecen si ser tocadas, las plantas de arbeja se autopolinizan naturalmente, es

decir que el órgano femenino de la flor recibe el polen de los órganos masculinos de
la misma flor.

1.- En primera instancia evitó la autofecundación al cortar los estambres de una flor
inmadura antes que produjeran los granos de polen. Esta planta sin estambres
sería la planta femenina en el experimento. Remoción de los estambres de la
flor morada
2.- para efectuar una fecundación cruzada en esta planta femenina, espolvoreó su
carpelo con el polen de otra planta. Polen transferido de los estambres de una
flor blanca al carpelo de la morada
3.- después de la polinización, el carpelo se desarrollo en una vaina, conteniendo
semillas (chícharos) que
4.- sembró. Las semillas germinaron para dar la descendencia.
Por tanto, Mendel podía dejar que la planta se autofecundara o por fecundación
cruzada con una fuente de polen conocida. En cualquier caso, el podía esta siempre
seguro del parentesco de las plantas nuevas.
El éxito en la formulación de sus principios de la Herencia se debió al enfoque del
problema:
Sometió a prueba una
hipótesis muy específica
en una serie de
experimentos lógicos.

Planeó diseñó sus

experiencias con
cuidado, imaginación,
eligiendo par su estudio
aquellas diferencias
hereditarias bien
definidas y
mensurables.

Estudió la progenie en
varias generaciones.

Contó los
descendientes (de cada
tipo en cada
generación) y luego
analizó
matemáticamente los
resultados.

Sus conclusiones
podían ser aplicadas a
la herencia del resto de
los seres vivos.

262
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

El éxito de Mendel se debió no solo a su modelo experimental y elección de

organismos, sino también a la selección de las características a estudiar. El eligió
trabajar con siete características, cada una de las cuales se presentan en dos
formas distintas. Un carácter es una característica como el color de la flor y un
rasgo es una forma particular de ese carácter; un carácter heredable es el que pasa
de padres a hijos. Mendel buscó caracteres que tuvieran rasgos bien definidos y
alternativos contrastantes, como flores blancas y flores violetas. Mendel trabajó con
sus plantas hasta que estuvo seguro de tener variedades de raza pura, esto es,
variedades en las que la autofecundación produjo descendencia idéntica a la planta
progenitora.
Para ser considerada una LINEA PURA el rasgo observado debía ser la única forma
presente en muchas generaciones. En otras palabras arbejas de flores blancas,
cuando se cruzaban entre sí debían dar origen solo a progenie de flores blancas
durante muchas generaciones.
Mendel aisló cada una de las cepas puras realizando endogamia
Ahora Mendel estaba listo para preguntarse qué pasaría si entonces cruzaba sus
diferentes variedades entre ellas. Por ejemplo, ¿qué progenie resultaría si se
fecundaban en forma cruzada plantas de flores moradas con plantas de flores
blancas? En el lenguaje de los criadores de plantas y animales y los genetistas, la
descendencia de dos variedades diferentes, como éstas, se llaman híbridos, y la
fecundación cruzada es referida, en sí misma, como hibridación o simplemente
cruza. Las plantas parentales se denominan generación P, y la descendencia
híbrida se llama generación F1 (filial 1)
La ley de la segregación de mendel describe la herencia de una sola
característica
Mendel y sus colaboradores, observaron, examinaron cada planta de la F1 para ver
que rasgos tenían y registraban el número de plantas que expresaban cada rasgo.
En algunas experiencias se permitió que las planta F1 se autofecundaran y
produjeran la SEGUNDA GENERACION FILIAL O F2- Nuevamente cada planta de la F2 eran
examinada y contada.
El primer experimento de Mendel examinó un cruzamiento MONOHÍBRIDO
Cada planta de arbeja parental era una línea pura para un carácter dado, pero en
este caso una presentaba una forma distinta de ese carácter (un rasgo diferente).
Descripción: tomó el polen de una planta de una cepa de L.P. con flores moradas y
lo colocó sobre el estigma de flores de una cepa de L.P. de flores blancas. También
realizó el cruzamiento recíproco. En todos los casos todas las semillas de la F1
fueron de flores moradas. No eran un morado claro, según lo predecía la hipótesis
de la mezcla. ¿se perdió el factor hereditario para flores blancas como resultado de
la hibridación? Al aparear las plantas F1,
Mendel encontró que la respuesta era
negativa. En 929 plantas F2, Mendel
encontró que 705 (cerca de 3/4) tenían
flores moradas y 224 (cerca de ¼) tenían
flores blancas, una proporción de cerca de
tres plantas con flores moradas por cada
planta con flor blanca en la generación F2.
Mendel concluyó que el factor hereditario
para las flores blancas no desaparecía en las
plantas F1, pero que solamente el factor
para flor morada estaba afectando al color
de la flor en F1. Asimismo, dedujo que las
plantas F1 deberían portar dos factores de la
característica para el color de la flor, uno
para la morada y otro para la blanca. A

263
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

partir de estos resultados y muchos otros, Mendel desarrolló cuatro hipótesis.

Utilizando la terminología moderna (incluyendo “gen” en lugar de factor hereditario)
sus hipótesis son:
Hay formas alternas de los genes, las unidades que determinan los caracteres
hereditarios. Por ejemplo, el gen para el color de la flor en plantas de chícharo
existe en una forma para morada y en otra para blanca. Ahora llamamos alelos a
las formas alternas de los genes.

por cada característica heredada un organismo tiene dos genes, uno de cada
progenitor. Estos genes pueden ser ambos el mismo alelo, o pueden se alelos
diferentes

un espermatozoide o un óvulo portan solo un alelo para cada carácter

hereditario, debido a que los pares de alelos se separan (segregan) entre ellos
durante la formación de gametos. Cuando el espermatozoide y el óvulo se unen
en la fecundación, cada uno contribuye con su alelo, restaurando la condición de
un par de alelos en la descendencia

cuando los dos genes de un par son alelos diferentes y uno se expresa
completamente, mientras que el otro no tiene un efecto notable en la apariencia
de un individuo, se lo denomina como alelo dominante y alelo recesivo
respectivamente.

Por sí solo los resultados del experimento 1 rechazaban la idea de que la Herencia
era un fenómeno de mezcla. ¿Cómo deberían ser de acuerdo a la teoría de la
Mezcla, las plantas de la F1?
La teoría de la herencia por mezcla además no ofrecía ninguna explicación acerca
de la reaparición del rasgo arrugado en la F2 luego de su aparente desaparición en
la F1.
Mendel propuso que las unidades responsables de rasgos específicos están
presentes como partículas separadas, que aparecen de a pares y se segregan una
de la otra durante la formación de gametas. De acuerdo a esta teoría las unidades
de la herencia retienen su integridad
en presencia de otras unidades. La
teoría por mezcla pensaba que las
unidades hereditarias perderían su
identidad al combinarse.
Dicha unidad pasó luego a llamarse gen.
Mendel explicó el resultado de la
siguiente manera:
Usamos letras mayúscula y minúscula
para distinguir el alelo dominante del
recesivo. P representa al dominante,
para flores moradas, y p representa al
alelo recesivo, para flores blancas.
Ambas plantas progenitora son
variedades de raza pura, y las primeras
dos hipótesis de Mendel proponen que
una variedad parental tiene dos alelos
para flores moradas (PP), mientras que
la otra variedad tiene dos alelos para
flores blancas (pp). Un organismo de

264
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

raza pura tiene un par de alelos idénticos para una característica llamada
homocigótico para esa característica.
En concordancia con la hipótesis 3, los gametos de las plantas parentales de Mendel
portan cada una un alelo; por tanto, los gametos parentales son P o P. como
resultado de la fecundación, los híbridos F1 heredaron, cada uno, un alelo para
flores moradas y uno para blancas. Las hipótesis 4 explica por qué todos los
híbridos F1 (Pp) tienen flores moradas: el alelo dominante P se expresa
completamente, mientras que el alelo recesivo p no tiene efecto alguno sobre el
color de la flor. Un organismo con dos alelos diferentes para una característica,
como en la planta de chícharo con alelos P y p, se denomina heterocigótico para
esa característica.
Las hipótesis de Mendel también explican la proporción 3:1 (3/4 de flores moradas
contra ¼ de flores blancas) en la generación F2. Debido a que los híbridos F1 son
Pp, ellos forman gametos P y P en números iguales. El cuadrado de Punnet muestra
las cuatro combinaciones de gametos posibles.
El cuadro de Punnet muestra las proporciones de las plantas F2 predichas por las
hipótesis de Mendel. Si un espermatozoide que porta el alelo P fertiliza a un óvulo
que porta el alelo P, la descendencia (PP) producirá flores moradas. Las hipótesis
de Mendel predijeron que esta combinación se presentaría en ¼ de la
descendencia. Las hipótesis también predijeron que 2/4 de la descendencia
heredarían un alelo P y otro alelo p. Esta progenie (Pp) presentaría toda ella flores
moradas debido a que P es dominante. El ¼ restante de las plantas F2 heredaría
dos alelos p y tendrían flores blancas.
Debido que la apariencia de un organismo no siempre revela su composición
genética, los genetista han distinguido entre los caracteres expresados o físicos de
un organismo llamado su fenotipo (tal como flores moradas y blancas) y su
constitución genética, su genotipo (en este ejemplo PP; Pp y pp). Para la progenie
de nuestras cruza F1, la proporción de plantas con flores moradas respectos a
aquellas de flores blancas (3:1) es denominada proporción fenotípica. La
proporción genotípica, como se muestra en el cuadrado de Punnet es [Link]
(1PP; 2Pp y 1pp).
Mendel encontró que cada una de las siete características que estudió exhibían el
mismo patrón de herencia.
Lo que Mendel no pudo ver: los genes son regiones de las moléculas de ADN
ubicados en los cromosomas, mas específicamente, un gen es una porción de DNA
que reside en un lugar particular llamado locus (en plural loci) dentro del
cromosoma, y que codifica una función en particular.
Mendel llegó a la ley de la Segregación sin ningún conocimiento de los
cromosomas, de la meiosis y del ADN, pero actualmente podemos representar los
diferentes alelos de un gen que se segregan como cromosomas que se separan
durante la meiosis
Los cromosomas homólogos portan dos alelos para cada característica
Cada individuo diploide, ya sea una
planta de chícharo o un humano, tiene
dos juegos de cromosomas
homólogos. Un juego proviene de la
progenitora (hembra) del organismo,
y el otro proviene del progenitor
(macho)
Las bandas con letreros en los
cromosomas representan loci del gen,

265
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

ubicaciones específicas del gen a lo largo del cromosoma. Los homólogos tienen
genes para las mismas características localizadas en las mismas posiciones a los
largo de su longitud. Estos dos cromosomas pueden portar ya sea, los mismos
alelos o diferentes. Los alelos (formas alternativas del mismo gen) de un gen
residen en el mismo locus de cromosomas homólogos.

Por ejemplo, si se descubre que el gen situado en la posición "Z" del cromosoma
14, lleva información para el color de los ojos, significa que en todas las células de
ese individuo y de todos los de la misma especie , siempre el gen del locus "Z" del
cromosoma 14 llevara información referida al color de los ojos.
Si se estudia ahora el cromosoma homólogo se demostrara que el gen situado en el
mismo locus de dicho cromosoma lleva información referente al mismo carácter, en
este ejemplo, al color de los ojos.
Esos dos genes, situados en la misma posición de cromosomas homólogos, que
llevan información referente al mismo carácter, se denominan ALELOS O
ALELOMORFOS.
Hemos dicho que los alelos llevan siempre información sobre el mismo carácter,
pero la información que llevan no tiene por qué ser la misma, puede ser distinta.
El termino carácter no es sinónimo del término información. Carácter es el color de
los ojos, en el ejemplo anterior. Información es ojos celestes o marrones o verdes.
Si los dos alelos, que llevan información sobre el carácter color de los ojos, llevan
además la misma información, por ejemplo, ojos celestes, decimos que esa célula
y, por consecuencia, ese individuo, tiene genotipo homocigota para ese carácter.
Si los dos alelos llevan información distinta, por ejemplo uno lleva información ojos
celestes y otro ojos marrones, decimos que la célula o el individuo son
heterocigotas para ese carácter.

1- LEY DE LA PUREZA DE LOS CARACTERES

EN EL HÍBRIDO (sinónimo de heterocigota) CADA FACTOR (actualmente
denominado gen) MANTIENE SU INDIVIDUALIDAD Y ES TRANSMITIDO A LA
DESCENDENCIA
Con esto Mendel quiso explicar que en el individuo que tiene dos genes distintos
para el mismo carácter (heterocigota) ninguno de los dos genes se pierde ni se
mezcla con otro, sino que se mantienen intactos y se transmiten a la descendencia,
aunque en el individuo que tiene esos dos genes distintos, el fenotipo es el
correspondiente a uno sólo de ellos, el llamado gen dominante (exceptuando la
llamada dominancia incompleta)
De esta manera Mendel echaba por tierra teorías de la época que decían que
cuando dos individuos tenían descendencia, sólo se conservaban factores fuertes,
que eran los que aparecían en los hijos, mientras que los factores que no aparecían
en la descendencia, que eran considerados débiles, desparecían.
Otro modo de expresar la primera ley: cuando los dos miembros de cualquier par
dado de unidades hereditarias (genes) son diferentes uno del otro, en el fenotipo el
carácter que aparece será el determinado por el factor (gen) dominante.
También expreso que los alelos procedentes de los progenitores, que en los
híbridos de la primera generación se habían reunido, se separan al formarse las
gametas, que por lo tanto contienen un alelo o el otro, pero nunca los dos juntos.
Mendel verificó su hipótesis realizando un cruzamiento de prueba.

266
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

El cruzamiento de prueba es una forma de

evaluar si un individuo dado que muestra
un rasgo dominante es homo o
heterocigoto. En este cruzamiento, el
individuo en cuestión es cruzado con un
individuo que se sabe que es homocigoto
par el rasgo recesivo, individuo fácil de
identificar porque para que tenga fenotipo
recesivo debe ser homocigoto para el rasgo
recesivo.
En nuestro ejemplo: la flor morada puede
portar dos genotipos distintos que no se
pueden distinguir en el fenotipo: PP o Pp. Si
observamos la descendencia que puede
resultar de un apareamiento entre una
planta PP de flor morada con una planta de
flores pp blanca, esperaríamos que toda la
descendencia fuese morada. Por otro lado,
si el progenitor morado es Pp esperaríamos en la descendencia tanto morada como
blancas.
¿Qué sucede si dos padres que difieren en dos o más loci se cruzan?

La ley de la distribución independiente se revela al rastrear dos características a la

vez

La Tercera ley de Mendel afirma que los alelos de diferentes genes se

separan o segregan de manera independiente.
En estos experimentos Mendel comenzó con arbejas que diferían en dos caracteres
de las semillas: forma y color. Una cepa de línea pura producía solo semillas
esféricas y amarillas (SS YY), y la otra cepa producía arrugadas y verdes (ss yy).
Un cruzamiento entre estas dos cepas produjo una generación F 1 en la cual todas
las plantas fueron Ss Yy. Debido a que S e Y son dominantes estas semillas de la F1
eran todas amarillas y redondas.
Mendel continuó este experimento hasta la
segunda generación: cruzamiento dihíbrido.
Se transmitirán las dos características de los
progenitores a la descendencia como un
paquete, o se heredará cada característica
independientemente de la otra?
Existen dos formas en las cuales estas plantas
doblemente heterocigotos pueden formar
gametos:
En primer lugar: si los alelos mantienen
asociaciones que tenían en los padres originales (es decir si están ligados) entonces
las plantas de la F1 deberían producir solo dos tipos de gametos: SY e sy, y la
progenie F2 resultado de la autofecundación de F1 consistiría en tres veces la
cantidad de planta que tienen semillas esféricas amarillas respecto de las que
tienen arrugadas y verdes. De ocurrir así no habría ninguna razón para suponer que
la forma de la semilla y su color estuvieran regulados por dos genes diferentes
porque las semillas esféricas siempre serían amarillas y las arrugadas verdes.
Segunda posibilidad: es que la segregación de S y s sea independiente de la
segregación de Y e y durante la producción de gametos (es decir que no estén
ligados). En este caso se producirían cuatro clases de gametos en número igual SY;
Sy; sY; sy. Cuando estos gametos se combinen aleatoriamente deberán producir
una F2 con 9 genotipos posibles. Esta progenie tendrá cualquiera de los tres

267
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

genotipos posibles para forma SS, Ss; ss y cualquiera de los tres genotipos posibles
para el color. Los nueve genotipos combinados deberán producir solo cuatro
fenotipos (amarillo-esférico; amarillo – rugoso; verde – esférico y verde rugoso).
Utilizando el cuadro de Punnet se puede demostrar que se espera que estos cuatro
fenotipos ocurran en una relación 9: 3: 3: 1.
Los cruzamientos dihíbridos de Mendel produjeron los resultados predichos en la
segunda posibilidad.
56,25 % amarilla lisa
18,75 % amarilla rugosa
18,75 % verde lisa
6,25 % verde rugosa
Pasando estas proporciones a números quebrados tenemos:

9/16 amarillo liso

3/16 amarillo rugoso
3/16 verde liso
1/16 verde rugoso

Aparecieron cuatro fenotipos diferentes en la F2 en una relación cercana a la 9: 3:

3: 1. Los rasgos parentales aparecieron en nuevas combinaciones de las dos clases
fenotípicas (amarillo arrugado y verde esférico) estas nuevas combinaciones se
conocen como fenotipos recombinantes o clases recombinantes.
Estos resultados condujeron a Mendel a formular lo que se conoce como segunda
ley de Mendel: los alelos de genes diferentes se distribuyen en forma independiente
uno de otro durante la formación de gametos.

Ley de distribución independiente, lo cual no es tan universal como la ley de la

segregación, porque se aplica a genes ubicados en cromosomas separados pero no
necesariamente a los que se ubican en el mismo cromosoma. Sin embargo es
correcto decir que los cromosomas se distribuyen en forma independiente durante
la formación de gametos, de la misma manera que lo hacen dos genes cualquiera
en pares de cromosomas separados.

RECORDEMOS QUE PARA QUE

SE CUMPLAN ESTAS
PROPORCIONES DEBEN
OBTENERSE MILES DE
DESCENDIENTES YA QUE SI LA
POBLACIÓN ESTUDIADA ES
CHICA, NO SE CUMPLEN.
Recuerde entonces que 9/16
descendientes tienen los dos
caracteres dominantes en el
fenotipo, 3/16 el primer carácter
dominante y el segundo recesivo,
3/16 el primero recesivo y el
segundo dominante y , finalmente
, sólo 1/16 tiene los dos
caracteres recesivos.
Se pueden sacar también las
siguientes conclusiones, utiles
para recordar rápidamente las
proporciones genotípicas:

268
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

_
GENOTIPO PROPORCIÓN HAY
_
HOMOCIGOTA PARA LOS 2 1/16 4
CARACTERES
HOMOCIGOTA PARA 1 CARÁCTER y
2/16 4
HETEROCIGOTA PARA 1 CARACTER
_
HETEROCIGOTA PARA LOS 2 4/16 1
CARACTERES
_

RETROCRUZA DIHÍBRIDA
ES LA CRUZA ENTRE UN HOMOCIGOTA RECESIVO PARA DOS CARACTERES CON UN
HETEROCIGOTA PARA DOS CARACTERES
Conclusiones
AaBb = 1/4
Aabb = 1/4
aaBb = 1/4
aabb = 1/4
Simplificando:
Proporción genotípica [Link]

ENFERMEDADES QUE SE TRANSMITEN EN FORMA AUTOSOMICA DOMINANTE

En estos casos la enfermedad se produce por genes que se encuentran en cromosomas
somáticos (no sexuales) llamados autosomas. Dichos genes son dominantes
OTOESCLEROSIS : endurecimiento de la cadena de huesecillos del oído medio que produce
sordera y ruidos.
HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAR : aumento muy grande del colesterol desde la infancia o
juventud. Produce infarto en edades muy tempranas
RINON POLIQUISTICO DEL ADULTO : quistes múltiples en el riñón
EXOSTOSIS MÚLTIPLES: protuberancias en los huesos
COREA DE HUNTINTON : enfermedad caracterizada por la existencia de movimientos
anormales involuntarios . Aparece entre los 20 y 40 años .
NEUROFIBROMATOSIS MÚLTIPLE DE VON -RECKLINGHAUSSEN : existen manchas color café
con leche en la piel y tumores diseminados en todo el cuerpo originados en las vainas que
recubren las terminaciones nerviosas.
DISTROFIA MIOTÓNICA : trastornos musculares
ESFEROCITOSIS CONGÉNITA : enfermedad de la sangre
POLIPOSIS COLONICA : tumores benignos del colon
CEGUERA DOMINANTE
SORDERA CONGÉNITA DOMINANTE
BRAQUIDACTILIA : dedos anormalmente cortos

269
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

ENFERMEDADES QUE SE TRANSMITEN EN FORMA AUTOSOMICA RECESIVA( cerca de 1.200)

En estos casos los genes responsables se encuentran también en cromosomas no sexuales ,
pero tienen carácter recesivo
FENILCETONURIA : trastorno en el metabolismo de la fenilalanina
FIBROSIS QUÍSTICA : aparecen quistes en el páncreas
ALBINISMO : falta de pigmentación de la piel y mucosas

270
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

VARIACIONES DE LAS LEYES DE MENDEL

Los alelos y sus interacciones.
Si una característica no sigue el patrón mendeliano, ¿significa que la característica
no se hereda?
No, muchas de las características hereditarias no siguen un patrón mendeliano
simple en la relación entre genotipo y fenotipo.
Analicemos ahora extensiones de la genética mendeliana que han sido
desarrolladas por otros investigadores principalmente en la primera parte del siglo
XX.
 Décadas después del trabajo de Mendel, otros investigadores descubrieron que
las partículas hereditarias, los genes, son entidades químicas, secuencias de ADN
que suelen expresarse en proteínas. De acuerdo con esto los alelos de un gen
son secuencias algo diferentes de DNA en un mismo locus, lo que determina
productos proteicos ligeramente diferentes.

 Los alelos surgen por mutación. En 1902, el botánico holandés Hugo de Vries
comunicó los resultados de sus estudios sobre la hierba de asno o dondiego de la
noche. Si bien observó que la herencia era ordenada y pronosticable, encontró
ocasionalmente una característica que no estaba presente ni en los padres ni en
ningún antecesor. De Vries conjeturó que estas características surgían como
resultado de cambios en genes y que las características producidas por un gen
cambiado se transmitía a la progenie. De Vries llamó a estos cambios
hereditarios MUTACIONES y a los organismos mutantes. Más tarde se observó
que 2 de los 2000 cambios observados por De Vries eran en realidad mutaciones.
El resto eran o se debían a combinaciones de alelos. Sin embargo el aporte de De
Vries de las mutaciones como fuente de variabilidad fue muy importante sobre
todo en Evolución. El trabajo de Mendel llenó el vacío en la Teoría de la Evolución
de Darwin, tanto en la segregación como en la independencia, de cómo se
mantienen las variaciones a lo largo de las generaciones y cómo surgen nuevas
combinaciones.

 Un alelo en particular de un gen puede definirse como de tipo salvaje o estándar

porque está presente en la mayoría de los individuos en la naturaleza y da origen
a un fenotipo esperado. Otros alelos del mismo gen, a menudo llamados
mutantes pueden producir un fenotipo de tipo diferente. Los alelos mutantes y
salvajes residen en el mismo locus y se heredan de acuerdo a las reglas
establecidas por Mendel.

 Morgan eligió como organismo experimental a la mosca de la fruta o Drosphila

melanogaster de muy fácil crianza, con generaciones cada dos semanas. Tal vez
el más importante de los principios de Morgan fue que los factores de Mendel
están ubicados en los cromosomas. El gen en esta etapa era una abstracción, no
tenía realidad física. El trabajo de Sutton y otros, aportaron la idea de que
partículas de cromatina, indistinguibles, podían conferir las propiedades de la
vida, (algo irrelevante) Sin embargo nuevas líneas de investigación estaban
suministrando evidencias que relacionaban a la cromatina con la herencia.

La dominancia no suele ser completa

271
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

La descendencia F1 de las cruzas de chícharo de Mendel, siempre resultó parecida a

una de las dos variedades parentales debido a que los alelos dominantes tenían el
mismo efecto en una o dos copias. Pero para algunas características, los híbridos F1
tenían una apariencia intermedia respecto a los fenotipos de las dos variedades
parentales, un efecto conocido como dominancia incompleta.
Ejemplo: si una línea pura de boca de dragón rojo se cruza con una línea pura de
flores blancas, todas las flores F1 son rosadas. En heterocigotos, tanto el alelo rojo
como el alelo blanco afectan a las flores.
La dominancia incompleta no apoya la hipótesis de la mezcla, cuya predicción sería
que los caracteres rojo y blanco
jamás se obtendrían a partir de
híbridos rosas. Como se observa
en la figura, la descendencia en
la F2 se daría en la proporción
fenotípica 1 roja, 2 rosadas por
un blanco, debido a que los
alelos rojo y blanco se segregan
durante la formación de los
gametos en las híbridos F1. En
la dominancia incompleta los
heterocigotos son
fenotípicamente distintos
respecto a las dos variedades
homocigóticas, y la proporción
fenotípica y la proporción
genotípica son ambas de 1: 2:
1.

También veremos dominancia incompleta en humanos. Un caso particular involucra

a un alelo recesivo (h) responsable de la hipercolesterolemia, es decir niveles altos
de colesterol en sangre. Los individuos normales son (HH). Los heterocigotos, (Hh,
cerca de 1 cada 500 personas) tienen niveles de colesterol en sangre cerca del
doble del normal. Por lo general, tienen propensión a la arteriosclerosis, el bloque
de arterias por el depósito de colesterol en la pared arterial, lo que puede
provocarles ataque cardíaco por bloqueo de las arterias cardíacas a la edad
aproximada de 30 años. La hipercolesterolemia es mas grave en los individuos
homocigóticos (hh), los que tienen cerca de cinco veces la cantidad de colesterol
sanguíneo y pueden presentar ataques cardíacos a la edad temprana de dos años.
Las bases moleculares de la hipercolesterolemia son: el alelo dominante, el cual
portan por duplicado los individuos normales, especifica una proteína de la
superficie celular llamada receptor de LDL. Las LDL son lipoproteínas que
transportan el colesterol en sangre, y los receptores de LDL, retiran las partículas
de LDL de la sangre y promueven su metabolismo en la célula. Este proceso ayuda
a prevenir la acumulación de colesterol en sangre. Los heterocigotos solo tienen la
mitad del número normal de receptores de LDL y los homocigotas (hh) no tienen
del todo.
¿Por qué es innecesario un cruce de prueba para determinar si una boca de dragón
con flores rojas es homocigota o heterocigoto?
Muchos genes poseen más de dos alelos en la población
Hasta ahora hemos hablado sobre patrones de herencia que involucran a sólo dos
alelos por gen. No obstante, muchos genes tienen ALELOS MULTIPLES. Aunque cada
individuo porta, cuando más, dos alelos diferentes para un gen en particular, en los
casos de alelos múltiples, pueden existir en la población más de dos alelos posibles.

272
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

Ejemplo: el color de los pelajes en conejos está determinado por un gen con cuatro
alelos. Existe una jerarquía de dominancia en las combinaciones génicas: C>cch >
ch > c. Cualquier conejo con el alelo C (junto con cualquiera de lo otros cuatro) es
gris, el conejo cc es albino. Los colores intermedios se producen por las diferentes
combinaciones alélicas: cch cch y cch ch chinchilla, ch ch y ch c: himalaya.

En la codominancia se expresan ambos alelos.

Los grupos sanguíneos ABO
en los humanos son un ejemplo
de alelos múltiples. Hay tres
alelos para esta característica,
la cual en diferentes
combinaciones, produce cuatro
fenotipos: el tipo de sangre de
una persona puede ser O, A, B
o AB. Estas letras se refieren a
dos carbohidratos nombrados A
y B, que se encuentran en la
superficie del glóbulo rojo. Los
glóbulos rojos de una persona
pueden llevar un carbohidrato o
el otro (A o B) o ambos (tipo
AB), o ninguno (tipo O). La identificación de los grupos sanguíneos compatibles es
crítica para las transfusiones sanguíneas. Si los glóbulos del donante tienen un
carbohidrato (A o B) diferente al del receptor, entonces la persona receptora
produce proteínas sanguíneas llamadas anticuerpos que se unen específicamente a
los carbohidratos ajenos y ocasionan que los glóbulos del donante se aglutinen.
Este aglutinamiento puede matar a la persona receptora.
Las varias combinaciones de los tres alelos
Fenotipos Genotipos diferentes simbolizados como IA (por su capacidad de
I AI A ; IA I O elaborar la sustancia A), I (por B) e i (ausencia de A
B

Grupo A y B). Cada persona hereda uno de estos alelos de

(I A i)
cada padre. Debido a que hay tres alelos, hay seis
I BI B ; I BI O genotipos posibles: ii, IA IA, IA i, IB IB, IB i, IA IB .Tanto
Grupo B (I B i)
el alelo IA como IB son dominantes respecto al alelo
Grupo AB I A I B i. Por tanto las personas IA IA y las IA i tienen sangre
A. los homocigotos ii tienen sangre tipo O debido a
Grupo O I O I O (i i) que no produce la sustancia A ni la B. se dice que los
alelos IA IB exhiben codominancia, que significa que
ambos alelos se expresan en individuos heterocigotas (IA IB), quienes tienen sangre
tipo AB.
Obsérvese que en estos casos el carácter resultante del genotipo heterocigota es
intermedio entre el producido por el gen dominante y el gen recesivo
Es la única diferencia con la dominancia incompleta propiamente dicha , en la cual
el carácter resultante del genotipo heterocigota es completamente distinto del
correspondiente al gen dominante y al del gen recesivo , cuyo ejemplo típico es la
herencia del color del plumaje en los pollos andaluces.

GENES LIGADOS
SON LOS GENES QUE SE ENCUENTRAN EN EL MISMO CROMOSOMA

273
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

Los genes que están ligados, o sea, que se encuentran en el mismo cromosoma,
permanecen juntos en la transmisión hereditaria, ya que al formarse las gametas ,
ellas reciben al cromosoma entero , no fragmentado.
Dicho de otro modo:
Si dos genes que estamos estudiando, se encuentran en el mismo cromosoma en
una célula, las gametas que origina esa célula reciben el cromosoma entero con
esos dos genes, no pudiendo recibir sólo uno de ellos.
Cuando los genes están ligados, no se forman gametas que contengan
combinaciones entre los alelos de los dos pares de genes.
Como consecuencia, cuando se efectúa una cruza di híbrida con dos genes ligados,
las proporciones genotípicas y fenotípicas que se obtienen son distintas que cuando
los genes no están ligados, como es el caso de los experimentos de Mendel que
dieron lugar a la segunda Ley. Por lo tanto las proporciones fenotípicas 9 = 3 = 3 =
1 no se cumplen
Recuerde:
SI HAY LIGAMIENTO NO SE CUMPLE LA SEGUNDA LEY DE MENDEL
LIGAMIENTO Y CROSSING-OVER: Si una célula productora de gametas tiene dos
genes que estamos estudiando , ligados , por lo tanto en el mismo cromosoma , y
se produce durante la meiosis un proceso de crossing-over justamente entre esos
dos genes , por azar , se formaran gametas que , a pesar de tener la célula original
los genes ligados , poseerán combinaciones entre esos genes .
Dichas gametas se llaman entrecruzadas.
EL CROSSING - OVER ROMPE EL LIGAMIENTO ENTRE LOS GENES
Resumiendo
Si tenemos 25 células que originaran por meiosis 100 gametas y los dos genes que
estudiamos, que llamaremos Aa y Bb no están ligados, se formaran 25 gametas AB
, 25 Ab , 25 aB y 25 ab. La proporción de gametas es 1 = 1 = 1 = 1, que es lo
necesario para que se cumpla la proporción fenotípica 9 = 3 = 3 = 1 de la segunda
ley de Mendel.
Si tenemos ahora 25 células que originaran 100 gametas y los genes A y B están
ligados en un cromosoma, mientras que los a y b están en el homólogo, se
originaran 50 gametas AB y 50 gametas ab , ninguna Ab ni aB.
Si ahora tenemos esas mismas 25 células y hay por azar crossing-over en la mitad
de las meiosis que originan las 100 gametas, entre los genes A y a, se originaran
gametas entrecruzadas en las mismas proporciones que si no hubiera ligamiento, o
sea. 1 :1 :1 :1.
Para que esto ocurra debería haber crossing-over en exactamente el 50 % de las
meiosis y en el mismo lugar, fenómeno que tiene muy pocas posibilidades de
ocurrir
Lo que ocurre normalmente es que haya crossing-over en algunas de las meiosis en
ese lugar y que por lo tanto no se cumpla tampoco el porcentaje de la segunda ley
de Mendel.
La probabilidad de que haya entrecruzamiento entre dos genes determinados,
depende de la distancia que separa esos dos genes en los cromosomas.
Cuanto mayor la distancia, más probabilidades de que haya entrecruzamiento
Por lo tanto se puede conocer la distancia entre 2 genes, sabiendo con qué
frecuencia se entrecruzan.

274
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

La distancia que separa dos genes, se mide en unidades que derivan de estas
deducciones, efectuadas por Morgan, llamadas en su honor "centimorgans".

DETERMINACIÓN DEL SEXO EN EL HUMANO

CROMOSOMAS SEXUALES Y GENES LIGADOS AL SEXO

Los cromosomas determinan el sexo en muchas especies

Muchos animales incluyendo la mosca de la fruta y el humano cuentan con un par
de cromosomas sexuales denominados X e Y, que determinan el sexo en el
individuo. En el ser humano los individuos con un cromosoma X y un cromosoma Y
son hombres; los individuos XX son mujeres. Tanto los machos como las hembras
en el humano tienen 44 autosomas. Como resultado de la segregación de
cromosomas durante la meiosis, cada gameto contiene un cromosoma sexual y un
juego haploide de autosomas (22 en el humano). Todos los óvulos contienen un
solo cromosoma X. Respecto a las células espermáticas, la mitad contiene un
cromosoma X y la mitad contiene un cromosoma Y.
Las bases genéticas para la determinación del sexo en humanos no se han
comprendido completamente, un gen en el cromosoma Y juega un papel crucial.
Este gen descubierto por un equipo de investigadores en 1990,es conocido como
SRY y activa el desarrollo de los testículos. Con la ausencia de una versión funcional
del SRY, un individuo desarrolla ovarios. También son necesarios otros genes del Y
para la producción de espermatozoide normal.
Por lo tanto , el sexo se determina en el momento de la fecundación , ya que es
entonces cuando se reúnen los cromosomas del óvulo y del espermatozoide ,
formando el contenido cromosómico del cigote , el cual formara un embrión y luego
un feto masculino o FEMENINO dependiendo de la formula cromosómica de la célula
huevo
Como los óvulos siempre llevan el cromosoma sexual X pero los espermatozoides
pueden llevar el X o el Y, es el macho el que aporta el cromosoma sexual que
determinara el sexo de la descendencia.
Normalmente existe un 50 % de espermatozoides con el cromosoma X y un 50 %
con el cromosoma Y, por lo cual la cantidad de cigotes XX y XY es la misma,
determinando que en la población, la mitad sean hembras y la mitad machos,
aunque existe una ligera diferencia a favor de espermatozoides X razón por la cual
existe también un porcentaje ligeramente superior de mujeres.
También podemos deducir que se podría elegir el sexo de la descendencia si
existiera un método para destruir los espermatozoides X o Y selectivamente en un
individuo.
Los genes ubicados en los cromosomas sexuales se heredan de una manera
especial
En Drosophila y en humanos el cromosoma Y lleva pocos genes conocidos, en
cambio el X lleva una gran variedad de genes para diferentes características no
determinantes del sexo, y son llamados genes ligados al sexo. El resultado de esta
disposición es una desviación en las relaciones mendelianas habituales. Cualquiera
de estos genes está presente en dos copias en las hembras y una sola en el macho,
los cuales siempre serán hemicigóticos para los genes ubicados en el X, solo
presentará una de cada uno y será expresado.
¿por qué todos los portadores de la hemofilia en la familia de la Reina Victoria eran
mujeres y por qué todos los descendientes con esta enfermedad eran hombres?
La respuesta a esta y otras preguntas se investigaron en estudios de la mosca de la
fruta D.m. A partir de 1909 Morgan y posteriormente Sutton ubicaron a los genes

275
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
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en los cromosomas, describieron su comportamiento, los clasificaron en sexuales y

autosomas. El primero, y todavía hoy uno de los mejores ejemplos de herencia
ligada al sexo (herencia de caracteres gobernados por locus ubicados en
cromosomas sexuales, X) es el color de ojos en Drosophila.
En 1910 Morgan descubre una mutación que produce ojos blancos, lo común eran
ojos rojos y experimentó realizando cruzamientos de moscas de tipo salvaje con
fenotipo mutante. Utilizamos R para el alelo dominante, ojos rojos, y r para el alelo
recesivo, ojos blancos. Debido a que estos alelos se ubican en el cromosoma X, los
mostramos como superíndice de la letra X.
 Cuando cruzaron hembras homocigóticas de ojos rojos
con machos (hemicigóticos) de ojos blancos, todos los hijos
e hijas presentaban ojos rojos, porque el color rojo es
dominante sobre el blanco, y toda la progenie había
heredado el cromosoma X de tipo salvaje.

 Del cruzamiento de dos individuos de la F1, dan como

resultado hembras de ojos rojos y machos, algunos de ojos
blancos y otros rojos.

 Del cruzamiento recíproco del primero, en el cual las

hembras de ojos blancos se aparean con machos de ojos
rojos, todos los hijos tendrán ojos blancos y las hijas ojos
rojos. Los hijos heredan el único cromosoma X de su madre
de ojos blancos y el Y que heredan de su padre no lleva el
locus para el color de los ojos, es vacío. Por su parte, las
hijas obtenían un cromosoma X con un alelo blanco de la
madre y un cromosoma X que portaba el alelo rojo de su
padre, eran por lo tanto heterocigotas de ojos rojos.

Cuando Morgan cruzó hembras heterocigotas con

machos de ojos rojos observó que la mitad de los
hijos tenían ojos blancos pero las hijas eran de ojos
rojos.
 Conclusión o hipótesis: el gen para el color de los
ojos en D.m. es llevado solo por el cromosoma X y
no sobre el Y.

Los seres humanos despliegan muchos caracteres ligados al sexo

276
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

La discromatopsia, la hemofilia, distrofia muscular de Duchene, son el resultado de

alelos recesivos ligados al sexo, que se heredan de la misma manera que el
carácter ojos blancos en la mosca de la fruta.
La discromatopsia es un tipo de daltonismo, ve menos colores que una persona
normal, débiles al verde, débiles al rojo, y tienden a confundir estos colores.
La hemofilia es un carácter recesivo ligado al sexo. Los hemofílicos sangran
excesivamente cuando se hieren pues han heredado un alelo anormal para el factor
involucrado en la coagulación sanguínea. Los individuos mas gravemente afectados
pueden sangran hasta morir por rasguños o cortaduras menores.
La distrofia muscular de Duchenne, una condición caracterizada por un
debilitamiento y pérdida progresiva del tejido muscular. Casi todos los casos son
hombres, y los primeros síntomas aparecen en la niñez temprana, cuando el niño
comienza a tener dificultades para ponerse de pié. Inevitablemente estará en una
silla de ruedas a los doce años, finalmente presentará cansancio grave y dificultad
para respirar. La muerte llega por lo general a la edad de 20 años.

ENFERMEDADES QUE SE TRANSMITEN LIGADAS AL SEXO

En estos casos los genes responsables se encuentran en los cromosomas sexuales
A- GENES LIGADOS AL CROMOSOMA X (cerca de 300)
1- RECESIVOS
- HEMOFILIA A y B

- CEGUERA AL COLOR ROJO Y VERDE

- ICTIOSIS: enfermedad de la piel, con formación de escamas

- DISTROFIA MUSCULAR DE DUCHENE : Produce debilidad y parálisis de los

miembros inferiores que comienza en los primeros años de vida y lleva al
paciente a la silla de ruedas progresivamente a los 10-12 años y a la muerte a
los 20

- SÍNDROME DE HUNTER (MUCOPOLISACÁRIDOSIS TIPO II)Se produce

acumulación de mucopolisacáridos por déficit enzimático. Tienen facies tosca,
enanismo , retardo mental. Mueren alrededor de los 10 años

- SÍNDROME DE MARTIN-BELL: Se debe a la fragilidad del cromosoma X. Son

varones con baja talla, cabeza grande, orejas protuberantes, macrogenitalia
(testículos grandes), retardo mental variable con un patrón de repetición de las
palabras y conducta amigable. Es la segunda causa de retraso mental luego del
síndrome de Down.

2- DOMINANTES
RESISTENCIA A LA VITAMINA D
PSEUDOHIPOPARATIROIDISMO

DESARROLLO DE EJEMPLOS TÍPICOS

1- GENES LIGADOS AL CROMOSOMA X
a- HEMOFILIA:
Es una enfermedad en la cual la sangre no coagula por la falta de un factor de la
coagulación normal.
Existen tres genes cuyas mutaciones dan lugar a tres tipos de hemofilia, llamadas A
,B y C.
La hemofilia A representa el 80 % del total de los casos y se debe a una menor
producción del factor VIII de la coagulación. La hemofilia B representa el 20 % del

277
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

total de los casos y se debe a la menor producción del factor IX de la coagulación.

La hemofilia C es muy rara y es por menor producción del factor XI , pero no es
ligada al sexo.
El tratamiento de la hemofilia consiste en suministrarle al paciente por vía
endógenos el factor faltante concentrado. Antes de que se descubriera el
tratamiento y la forma de obtener el factor faltante, el paciente moría por la menor
herida.
La hemofilia ha sido una enfermedad muy bien estudiada en sus aspectos
hereditarios debido a que la reina Victoria de Inglaterra, tatarabuela del rey Juan
Carlos I de España, transmitió la hemofilia a uno de sus hijos que murió de
hemorragia interna luego de una caída, y a dos de sus hijas, que fueron las que
extendieron la enfermedad por las familias reales europeas. Como no se conocían
casos de hemofilia entre los antepasados de la reina Victoria se supone que la
enfermedad apareció por una mutación de uno de los alelos del gen normal que se
produjo en la reina.
La enfermedad sólo pueden tenerla los hombres. Las mujeres no la padecen, pero
pueden ser portadoras del gen que la produce. Dicho gen es recesivo, mientras
que el gen normal es dominante. El gen normal produce la globulina anti hemofílica
necesaria para la coagulación, mientras que el gen anormal recesivo no la produce
y la sangre no coagula.
El gen responsable de la hemofilia es recesivo, no produce el factor VIII
normalmente.

Para que la enfermedad se produzca, es necesario que no exista ningún gen

dominante, ya que con uno sólo alcanza para que se fabrique el factor de la
coagulación. Al mismo tiempo, este gen anormal es letal, lo que significa que,
cuando existen dos alelos iguales (homocigota), alteran de tal manera el desarrollo
embrionario que se produce la muerte del mismo, que se manifiesta por un aborto
espontaneo en el primer trimestre del embarazo.

Partiendo de los conceptos mencionados, concluimos que las posibilidades

genéticas son las siguientes:
_
GENOTIPO SEXO FENOTIPO COMENTARIOS
_
X-H X-H FEMENINO SANA TIENE LOS 2 GENES NORMALES
_
H -h
X- X FEMENINO SANA TIENE 1 GEN ANORMAL = ES PORTADORA
_
-h -h
X X FEMENINO MUERTE EMBRIONARIA TIENE LOS 2 GENES ANORMALES
_
X-H Y MASCULINO SANO EL ÚNICO GEN QUE TIENE ES EL NORMAL
_
X-h Y MASCULINO HEMOFILICO EL ÚNICO GEN QUE TIENE ES NORMAL
_

2- GENES LIGADOS AL CROMOSOMA Y:

PELO EN EL PABELLON AURICULAR DEL HOMBRE
GEN DEL ANTIGENO DE LA MASCULINIDAD
LOS HEREDAN SOLAMENTE LOS HOMBRES

278
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

CARACTERES HEREDADOS POR GENES MÚLTIPLES Y FACTORES

AMBIENTALES O HERENCIA MULTIGENICA O MULTIFACTORIAL

SON CARACTERES O ENFERMEDADES QUE SE TRANSMITEN POR MÁS DE UN PAR

DE GENES Y DONDE TAMBIÉN ACTÚAN FACTORES AMBIENTALES

- La mayoría de los caracteres de un individuo se transmiten por este sistema

- Los genes pueden estar en el mismo o en distintos cromosomas.

Ejemplos :

Color de la piel : está determinado por 4 pares de genes con dominancia

incompleta. Cuantos más genes dominantes hay, más oscura es la piel.

Estatura : intervienen 10 o más pares de genes

ENFERMEDADES QUE SE HEREDAN POR FACTORES MÚLTIPLES POR LO MENOS EN

ALGUNOS CASOS. En muchos casos de las enfermedades que siguen, se ha de-
mostrado la herencia multifactorial, pero no siempre el paciente que tiene alguna
de estas enfermedades, la ha heredado por este sistema, ya que se desconoce
muchas veces el mecanismo de la enfermedad

ESPINA BIFIDA: el feto nace con un defecto del cierre del tubo neural que puede
tener varios grados. En el peor de los casos toda la médula está abierta al exterior.
En los casos más leves sólo hay una malformación del arco posterior de las
vertebras que puede originar parálisis o ser asintomática.
ANENCEFALIA: malformación congénita en la cual el feto no tiene cabeza por un
defecto en la formación del tubo neural y del cráneo. El cráneo esta abierto
quedando el sistema nervioso central
LABIO LEPORINO: malformación facial que consiste en una hendidura
la deglución y el habla.
LUXACION CONGÉNITA DE CADERA: malformación congénita
ESQUIZOFRENIA: enfermedad mental caracterizada por un desdoblamiento de la
personalidad.
ESTENOSIS PILORICA: estrechamiento del píloro por hipertrofia del mismo. Produce
vómitos en el recién nacido. Debe diagnosticarse y operarse de inmediato por que
el bebe se deshidrata y muere por desnutrición. El resultado de la cirugía es
excelente.
EPILEPSIA
ALERGIA
GLAUCOMA: aumento de la presión intraocular . Produce dolor en el ojo y pérdida
de la visión si no se trata.
CANCER

GENES LETALES
Muchos productos génicos son esenciales para la supervivencia de un organismo.
Las mutaciones que dan lugar a la síntesis de un producto génico no funcional
pueden a veces tolerarse en situación de heterocigosis. Es decir que un alelo tipo
silvestre puede ser suficiente para producir bastante producto esencial como para
permitir la supervivencia. Sin embargo, tal mutación se comporta como alelo letal
recesivo y los individuos homocigóticos recesivos no sobreviven. El momento de la

279
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

muerte dependerá de cuan necesario es el producto génico en el desarrollo o

incluso en el adulto.
En los casos en los que una copia del alelo silvestre no es suficiente para un
desarrollo normal, el heterocigoto NO sobrevive. En este caso la mutación se
comporta como alelo letal dominante, ya que su presencia, de alguna manera anula
la expresión del producto silvestre o, simplemente la cantidad de producto silvestre
no es suficiente para realizar su función esencial.
Los ratones silvestres normales tienen la piel color homogéneo más bien oscuro. En
1904 Cuenot estudió ratones que tenían un color mas claro denominados amarillos.
Al cruzar ratones amarillos con un normal agutí, observó en la descendencia una
razón de ratones amarillos: normales 1:1. Esta observación sugiere que un único
gen determina el aspecto de la piel y que el alelo amarillo es dominante sobre
normal. Sin embargo al cruzar ratones amarillos entre sí la situación se hizo muy
confusa
A= agutí X agutí todos agutí
B= amarillo X amarillo 2/3 amarillos 1/3 agutí

C= amarillo X agutí ½ amarrillo ½ agutí

Dos aspectos hay que destacar en estos resultados: en primer lugar la razón 2:1 es
una desviación a las proporciones mendelianas; en segundo lugar Cuento había
sido incapaz de detectar un ratón homocigótico amarillo en cualquier generación de
los cruzamientos. Cuenot sugirió que: un cruzamiento entre heterocigotos debería
producir la razón genética genotípica [Link].

Si una de las clases homocigóticas muriera antes de nacer, los descendientes vivos
mostrarían la razón de heterocigotos a homocigotos de 2:1. Estos resultados se
explican teniendo en cuenta un solo par de alelos. El alelo mutante AY es
dominante sobre el alelo aguti de tipo silvestre A, por lo que los ratones
heterocigotos serán amarillos. Sin embargo el alelo mutante A Y en homocigosis se
comporta como letal.

AYAY mueren antes de nacer

Por ello no se recuperan ratones amarillos homocigóticos

Cruce A Cruce B cruce C

P1 AA X AA AAY X AAY AA X AAY

Agutí agutí amarillo amarillo agutí amarillo

AA AA ; AAY ; AYA; AYAY AA ; AAY

Todos agutí, 2/3 agutí 1/3 amarillo ½ agutí ½ amarillo

Todos sobreviven sobrevivientes todos sobreviven

El alelo AY para amarillo es dominante sobre el alelo normal A con respecto a su

efecto sobre el color y actúa como ALELO LETAL recesivo respecto a la
característica sobrevivencia.
Esta hipótesis fue confirmada mediante la observación en el útero de la hembra
preñadas de un cruzamiento amarillo por amarillo, lo cuarta parte de los embriones
estaban muertos.

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 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

Estos genes de los que sabe tener más de un efecto fenotípico diferente se
denominan pleitròpicos. Color amarillo en dosis simple y muerte en dosis doble.

SON GENES RECESIVOS QUE, CUANDO ESTÁN EN CONDICION HOMOCIGOTA,

PRODUCEN LA MUERTE DEL INDIVIDUO O DEL EMBRIÓN
Ejemplos:
# hemofilia
# pollos trepadores (creepers) : un gen recesivo produce patas y alas muy cortas ,
que le permiten trepar con facilidad . Los dos genes recesivos causan la muerte
embrionaria. Ningún gen recesivo, por lo tanto los dos dominantes, producen
tamaño normal de patas y alas

GENES SUBLETALES

SON GENES DOMINANTES QUE CUANDO ESTÁN EN CONDICION DE HOMOCIGOTA

PRODUCEN LA MUERTE DEL INDIVIDUO o DEL EMBRIÓN. CUANDO ESTÁN EN
CONDICION HETEROCIGOTA PRODUCEN UN FENOTIPO ANORMAL

EJEMPLOS :
# COREA DE HUNTINTON: enfermedad caracterizada por la aparición de
movimientos anormales involuntarios característicos
# BRAQUIDACTILIA : es una malformación congénita consistente en que los dedos
son más cortos que los normales. Como hemos dicho es producida por un gen
dominante subletal

Si una mujer con braquidactilia (Aa) tiene descendencia con un hombre con
braquidactilia (Aa) , tendrán 25 % de probabilidades de tener hijos con dedos
normales (aa) , 25 % de tener abortos embrionarios (AA) y 50 % de tener hijos con
braquidactilia (Aa) , como demuestra la siguiente cruza :

FENOCOPIA:

ES UN CARACTER EXISTENTE EN UN INDIVIDUO QUE , APARENTEMENTE ES LA

EXPRESIÓN DE UN GENOTIPO , PERO QUE , SIN EMBARGO , ES LA COPIA DEL
MISMO y NO ES PRODUCIDO POR GENES

El ejemplo más común es el cabello teñido : copia un color producido en otra mujer
por genes .

ENDOCRÍA:
ES EL CRUZAMIENTO DE DOS INDIVIDUOS QUE TIENEN PARENTESCO CERCANO.

Es lo contrario a la exocría, que es el cruzamiento entre dos individuos que no

tienen relación de ascendencia próxima.
La endocrina tiene efectos particulares sobre la descendencia, que pueden ser
beneficiosos o perjudiciales.
Se utiliza la endocría para mejorar muchas especies animales y vegetales.
En el humano los efectos son perjudiciales .Ello se explica de la siguiente manera:
Un individuo normal, tiene en su genotipo genes recesivos que producen mal-
formaciones o enfermedades que no se manifiestan por que están acompañados
por los genes dominantes normales. Dichos genes recesivos son producidos por
mutaciones que han ocurrido en algún antepasado y que se han transmitido a la
descendencia.
Esto significa que cada uno de nosotros lleva en su genotipo el material genético
capaz de producir un gran número de malformaciones y procesos patológicos, que

281
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

afortunadamente, están en condición recesiva. A esto se lo ha denominado el

monstruo genético que todos llevamos latente.
Dichos genes son prácticamente propios de la familia en la cual se ha producido la
mutación , ya que estadísticamente es extremadamente improbable que dos indivi-
duos que no pertenezcan a la misma familia hayan sufrido la misma mutación .Pero
si un individuo tiene descendencia con una persona de la misma familia , en grado
cercano , existen probabilidades mayores de que los dos padres tengan los mismos
genes recesivos anormales y que los hijos tengan un genotipo homocigota para
dichos genes , los cuales si se manifestarían entonces en el fenotipo , causando
malformaciones o enfermedades genéticas .

CARACTERES AUTOFENOS:

SON CARACTERES PRODUCIDOS DIRECTAMENTE POR LOS GENES

INVOLUCRADOS, SIN INTERMEDIARIOS.

CARACTERES ALOFENOS:

SON CARACTERES CUYA PRODUCCIÓN DEPENDE DE INTERMEDIARIOS QUE

ACTÚAN ADEMÁS DE LOS GENES INVOLUCRADOS

CARACTERES LIMITADOS AL SEXO:

SON CARACTERES QUE ESTÁN DETERMINADOS POR GENES QUE SE ENCUENTRAN

EN CROMOSOMAS SOMÁTICOS, PERO QUE SE MANIFIESTAN EN UN SEXO
FENOTÍPICO O EN EL OTRO.

No debe confundirse a estos caracteres con los llamados ligados al sexo, de los
cuales ya hablamos, que se encuentran determinados por genes que están en los
cromosomas sexuales.

Ejemplos de caracteres limitados al sexo:

Esto se explica porque el carácter es alofeno y el gen necesita para manifestarse un
nivel alto de hormona sexual masculina que actúa como intermediario. Por ese
motivo, la mujer luego de la menopausia comienza también a tener calvicie.
1-Septum vaginal transverso
2- lactancia
3- cáncer de próstata: su desarrollo depende en gran medida de la existencia de
hormona masculina, por lo cual parte de su tratamiento consiste en anular la fuente
de hormonas masculinas, o sea los testículos, produciendo la castración quirúrgica
y dar medicamentos que antagonizan las hormonas masculinas.
4- caracteres sexuales secundarios: son los caracteres que diferencian un sexo de
otro pero que aparecen después de la pubertad. Ejemplos: mamas, forma de las
caderas, forma del vello pubiano, voz, barba, etc. Dichos caracteres se encuentran
en genes que están en cromosomas somáticos pero se manifiestan sólo en un sexo
o en otro de acuerdo a las hormonas que se encuentren presentes.

Un grado menor de esta característica se denomina herencia controlada o influida

por el sexo En este caso el carácter se encuentra algo más en un sexo que en el
otro, pero no de modo excluyente.
Ejemplos: calvicie prematura: está determinada por genes que se encuentran en
cromosomas somáticos, por lo que están tanto en el hombre como en la mujer. Sin
embargo son los hombres los afectados mayoritariamente por la calvicie prematura.
Gota: enfermedad producida por aumento del ácido úrico. Se produce con mayor
frecuencia en el hombre que en la mujer.

CÁLCULO DE PROBABILIDADES EN GENÉTICA:

282
 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

La genética es una especialidad en la cual todos los conceptos cobran valor cuando
son estudiados en grupos grandes de individuos. Cuando se estudia un caso
particular, sólo se le puede dar como respuesta cuales son las probabilidades de
que ocurra un fenómeno determinado.
Por ejemplo, si nos preguntan en general cuales son las probabilidades de una
pareja de tener un hijo varón, diremos que son 1/2 (50%); las probabilidades de
tener una hija mujer son también de 1/2.
Si una pareja ya tiene un hijo varón, las probabilidades de que tenga una hija
mujer siguen siendo de 1/2, por que el hecho de que ya tenga un hijo no afecta el
cálculo de las probabilidades de los siguientes.
Dicho de otro modo, para cada hijo, las probabilidades de que sea varón son
siempre las mismas, no importa si ya tiene hijos o no.
Otro ejemplo:
En la cruza monohíbrida realizada por Mendel, las probabilidades de que en F2
salga una planta con semilla amarilla son 3/4. Si ya se han realizado tres cruzas y
salieron tres amarillas, la cuarta cruza también tendrá 3/4 de probabilidades de
salir amarilla.

LEY DEL PRODUCTO:

Cuando se quiere saber cuáles son las probabilidades de que ocurran dos hechos o
más, uno a continuación del otro, se aplica esta ley

LA PROBABILIDAD DE QUE OCURRAN DOS O MÁS HECHOS INDEPENDIENTES EN

FORMA SUCESIVA ES IGUAL AL PRODUCTO DE LA PROBABILIDAD DE QUE OCURRA
CARA UNO DE ELLOS POR SEPARADO

Ejemplo: Si queremos saber cuál es la probabilidad de que una pareja tenga un hijo
varón primero y una hija mujer después, debemos multiplicar la probabilidad de
que tenga un hijo varón (primer hecho) , por la probabilidad de que tenga una hija
mujer ( segundo hecho ).
Hijo varón: 1/2
Hija mujer: 1/2
Dos hijos, primero un varón, después una mujer: 1/2 x 1/2 = 1/4 = 25 %
Ejemplo de utilización de la ley del producto

LEY DE LA SUMA:

LA PROBABILIDAD DE QUE OCURRA UN HECHO U OTRO, EN FORMA EXCLUYENTE E

INDISTINTA ES IGUAL A LA SUMA DE LAS PROBABILIDADES DE QUE OCURRA
CADA HECHO POR SEPARADO

Esta ley se aplica cuando se desea averiguar la probabilidad de que ocurra un

hecho u otro indistintamente.
Ejemplo: la probabilidad de que una pareja tenga un hijo varón o mujer es igual a
la de tener un hijo varón más la de tener una hija mujer.
Hijo varón: 1/2 Hija mujer: 1/2
Hijo varón o hija mujer: 1/2 + 1/2 = 2/2 = 1 = 100% (obviamente)
Las dos leyes, la del producto y la de la suma, pueden combinarse en la solución de
un caso determinado.
Ejemplo: Cual es la probabilidad de que una pareja tenga tres hijos, dos varones y
una mujer, pero en cualquier orden? Aquí se aplica desarrollo polinomial.
N! (a)s(b)t
s! t!

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BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
SILVIA SUSANA DE BRUM

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