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Detección del Dengue: Guía Práctica

Este documento proporciona información sobre las enfermedades metaxénicas y la detección del dengue. Explica que las enfermedades metaxénicas son transmitidas por vectores como mosquitos y que el dengue es una enfermedad viral aguda causada por el virus del dengue y transmitida por la picadura del mosquito Aedes aegypti. Además, describe las pruebas rápidas para la detección del antígeno NS1, los anticuerpos IgM y IgG del virus del dengue mediante inmunocromatografía.
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Detección del Dengue: Guía Práctica

Este documento proporciona información sobre las enfermedades metaxénicas y la detección del dengue. Explica que las enfermedades metaxénicas son transmitidas por vectores como mosquitos y que el dengue es una enfermedad viral aguda causada por el virus del dengue y transmitida por la picadura del mosquito Aedes aegypti. Además, describe las pruebas rápidas para la detección del antígeno NS1, los anticuerpos IgM y IgG del virus del dengue mediante inmunocromatografía.
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C Parasitología clínica

CURSO DE ACTUALIZACIÓN
BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

an os
PRUEBA RÁPIDA PARA LA DETECCIÓN DEL DENGUE
MEDIANTE INMUNOENSAYO CROMATOGRÁFICO
ENFERMEDADES METAXÉNICAS

i
be or
Aedes aegypti

t C CARIBBEAN
LABORATORIO
ACTUALIZACIONES
Tipos de heces
rib ra
Ca bo
La

PROFESOR Blgo. Martín Chumpén Zamora


Egresado de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo
Facebook: martin chumpen zamora
Laboratorios Caribbean
Correo electrónico: [email protected]
[email protected]

enfermedades metaxénicas - detección del dengue Pag. 1


C Parasitología clínica BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

an os
“ El presente manual es una recopilación de las diferentes técnicas

i
usadas en la detección de los agentes infecciosos en las enfermedades

be or
metaxénicas , sirviendo de herramienta para una capacitación práctica
del Profesional de Laboratorio Clínico.”

t
Blgo Martín Chumpén Zamora
rib ra
Ca bo
La

enfermedades metaxénicas - detección del dengue Pag. 2


C Parasitología clínica

Indice
BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

an os
Enfermedades Metaxénicas
Generalidades ............................................................... pag 4
Vectores.- Definición, tipos,

i
mecanismo de transmisión ............................................ pag 5

be or
DENGUE
Introducción ................................................................... pag 6
Definición ....................................................................... pag 6
t
Epidemiología y transmisión .......................................... pag 6
Virus del dengue ............................................................ pag 7
rib ra
Curso de la infección por dengue .................................. pag 8
Periodo de incubación ................................................... pag 8
Fases del dengue .......................................................... pag 8
Ca bo

PRUEBA RÁPIDA PARA LA DETECCIÓN CUALITATIVA


DEL VIRUS DEL DENGUE
Deteccióndel antígeno NS 1 ........................................... PAG 11
Detección de anticuerpos IgM ........................................ pag 12
La

Detección de anticuerpos IgG ........................................ pag 12


Descripción de las pruebas ............................................ pag 13
Fundamento de las pruebas ........................................... pag 13
Reactivos de la prueba ................................................... pag 14
Recolección de la muestra y preparación ...................... pag 14
Interpretación de los resultados ..................................... pag 17
Actividad de la clase ...................................................... pag 18

enfermedades metaxénicas - detección del dengue Pag. 3


C Parasitología clínica

ENFERMEDADES METAXÉNICAS
BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

an os
I.- GENERALIDADES

Antes de iniciar con el estudio de las enfermedades metaxénicas, sería bueno hacer
referencia a dos términos usados para hablar de un grupo de enfermedades que presentan
un cuadro clínico con Síndrome febril, en el que se pregunta y se busca el antecedente de
exposición relacionando con la procedencia del paciente.

i
Éstos términos son las ZOONOSIS y las ENFERMEDADES METAXENICAS.

be or
Las zoonosis constituyen un grupo de enfermedades de los animales que son transmitidas
al hombre por contagio directo con el animal enfermo, a través de algún fluido corporal como
orina o saliva, o mediante la presencia de algún intermediario como pueden ser los mosquitos
u otros insectos ( metaxénico ).
Ésto se debe entre otras causas, a la convivencia de las personas con animales silvestres.
t
Una vez que el microbio está en el humano, se podrá transmitir entre humanos.
.
rib ra
Una zoonosis es una enfermedad infecciosa
que ha pasado de un animal a humanos.
Los patógenos zoonóticos pueden ser bacterias,
virus, parásitos o agentes no convencionales y
propagarse a los humanos por contacto directo o
Ca bo

a través de los alimentos, el agua o el medio


ambiente.

Las enfermedades metaxénicas son


enfermedades transmitidas por vectores, ya sea
tipo mosquitos, triatominos u otros vectores, como
La

las pulgas.

En realidad Las enfermedades metaxénicas son también zoonóticas, ya que pasan


del animal al ser humano, pero se les ha clasificado bajo éste nombre más con fines de
estudios académicos y estadísticos,

enfermedades metaxénicas - detección del dengue Pag. 4


C Parasitología clínica

ENFERMEDADES METAXÉNICAS
BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

II.- VECTORES

an os
Para la transmisión de las diferentes enfermedaes metaxénicas, se pueden observar la
participación de los sgtes factores:
a.- El hospedero, que por lo general está una persona enferma
b.- El vector invertebrado, el cual es el que transmite el agente infeccioso y causa la enferme
dad. Éste artrópodo puede causar una transmisión mecánica o biológica.

i
Ejemplo de éstos vectores que causan una trasmisión mecánica son las moscas y cucarachas
y ejemplo de vectores que causan una transmisión biológica están los mosquitos.

be or
c.- y El agente biológico.

Veamos algunas definiciones de vectores:


1.- Vector mecánico.- Aquel artrópodo que transporta el agente infeccioso de una manera
inespecífica, sin que se modifique o reproduzca. Como es el caso de las moscas. El agente
t
contamina la superficie del vector, el aparato bucal o el tubo digestivo.
2.- Vector biológico.- El agente infeccioso se multiplica y/o se transforma en el interior del
rib ra
vector, asegurando una transmisión más efectiva. El vector forma parte del ciclo biológico del
agente. Tal es el caso de triatoma infectans, en la trypanosomiasis, mejor llamado el chinche
besucón o vinchuca.
3.- Vector reservorio.- el agente puede transmitirse de generación en generación por vía
transovárica , como en el caso de la garrapata.
Ca bo

Veamos algunas diferencias entre los vectores mecánicos y biológicos:

Mecánicos Biológicos
a.- El agente transmitido no evoluciona a.- El agente transmitido evoluciona y/o
La

ni se multiplica en el vector. se multiplica en el vector.


b.- La asociación patógeno - vector es b.- La asociación patógeno - vector es muy
inespecífica específica.
c.- El vector es un simple transportador c.- El vector es un huésped indispensable
del agente patógeno. para la sobrevivencia del patógeno.
d.- El vector no es la vía principal de d.- El vector es la vía principal de transmisión
transmisión del agente patógeno. del agente patógeno.

Entre los mecanismos de transmisión tenemos:


a.- Inoculación.- El agente infeccioso es introducido al huésped por medio de picadura.
Es un mecanismo de transmisión altamente efectivo, propio de los insectos hematófagos.
b.- Contaminación.- El agente infeccioso es depositadopor el vector sobre el huésped.
Es un mecanismo menos efectivo que depende luego de otras circunstancias para que
el agente infecte al hospedero ( deyecciones, secreciones, etc )

enfermedades metaxénicas - detección del dengue Pag. 5


C Parasitología clínica

III.- DENGUE
BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

A.- Introducción

an os
El Dengue es una importante enfermedad de transmisión vectorial. Afecta seriamente
a los países latinoamericanos y caribeños con abundante pérdida laboral y de vidas.
En el mundo hay 50 a 100 millones de casos al año y la mortalidad es alrededor del
5% de los casos anualmente.
B.- Definición

i
El Dengue es una enfermedad viral aguda, endemo - epidémica ( es decir, ser una

be or
enfermedad presente durante todo el año pero también puede causar brotes epidémicos),
causada por un arbovirus de la familia Flaviviridae y transmitida por la picadura de hembras
de mosquitos del género Aedes, en especial aegypti y A.albopictus (ahora conocidos como
Stegomyia aegypti y Stegomyia albopicta).
Existe otro ciclo menos conocido, el selvático, cuyo reservorio son los primates no
t
humanos. Se ha confirmado la transmisión vertical del dengue.
rib ra
El virus posee cuatro serotipos (DENV1, DENV2, DENV3,DENV4), los cuales están
circulando simultáneamente en nuestro país. Los serotipos no desencadenan inmunidad
cruzada, lo cual significa que una persona puede infectarse y enfermar hasta cuatro veces.

C.- Epidemiología y transmisión


Ca bo

El Dengue primitivamente fue una enfermedad enzoótica, transmitida a primates por


mosquitos del género Aedes en los bosques lluviosos de África y Asia. Cuando los seres
humanos invadieron la selva y se pusieron en contacto con los mosquitos Aedes infectados
se produjeron los primeros brotes en pequeñas poblaciones, y posteriormente la enfermedad
se diseminó a las grandes ciudades.

Cuando una hembra de Aedes aegypti (de hábitos intra-ó peri-domiciliarios y diurnos) ó
La

de A. albopictus (de hábitos más bien selváticos) pica a un enfermo de Dengue durante su
periodo febril (durante la viremia) ingiere sangre con virus, los cuales se van a replicar en el
aparato digestivo del mosquito. Al cabo de una semana los virus han migrado a sus glándulas
salivales y se vuelve infecciosa para toda su vida (de unos dos meses).
Cuando ella pica a una persona sana, inyecta su saliva infectada y los virus van a circular
por la sangre y se van a alojar principalmente en los macrófagos.

Los machos del género Aedes se alimentan de savia de vegetales, al igual que las hembras.
Cuando éstas son fertilizadas, buscan una fuente de proteínas más rica, como es la sangre
de animales, principalmente del hombre. Usualmente se alimenta al principio de las mañana y
del atardecer. Deposita sus huevos en los bordes de recipientes que contengan agua limpia,
que contenga sustancias orgánicas. Estos huevos pueden permanecer viables durante un año.
Cuando se ponen en contacto con el agua inician su ciclo de crecimiento.

enfermedades metaxénicas - detección del dengue Pag. 6


C Parasitología clínica

D.- Virus del Dengue


BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

El complejo dengue lo constituyen cuatro serotipos virales serológicamente diferentes


(1, 2, 3 y 4) que comparten analogías estructurales y patogénicas con una homología de

an os
secuencia de aproximadamente 70 %, que es mayor entre los serotipos 1-3 y 2-4.

El genoma viral es una cadena de ARN simple de polaridad negativa, que codifica
tres proteínas estructurales:
- la cápside (C), que rodea y protege al ácido nucleico,

i
- la proteína de membrana (M) y
- la envoltura (E).

be or
La glicoproteína E particularmente media la fusión de membrana, induce la formación de
anticuerpos neutralizantes, inhibidores de la hemaglutinación y anticuerpos
imunoamplificadores; además, en ella se localiza el receptor viral. (Figura 1).
t
rib ra
Ca bo

Además, el genoma viral codifica siete proteínas no estructurales 5'-C-prM-E-NS1-NS2A-


NS2B-NS3-NS4A-NS4B-NS5-3'; la proteína NS1 participa en la maduración viral,
la proteína NS3 tiene función helicasa y proteasa y en la NS5 radica la función polimerasa
del virus. La proteína prM (precursor de la proteína M) protege a la proteína E del pH ácido
La

del medio durante la maduración viral que evita su cambio conformacional irreversible.

La proteína NS1 se puede hallar soluble en el citoplasma de las células y en el espacio


extracelular; por ésta razón, la NS1 puede estimular al sistema inmunitario.
La viremia está presente durante el periodo febril.

enfermedades metaxénicas - detección del dengue Pag. 7


C Parasitología clínica

E.- Curso de la infección por Dengue


BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

El ciclo natural de la infección se establece entre el hombre y varias especies de

an os
mosquitos del género Aedes, subgénero Stegomyia, en especial A. aegypti y A.albopictus
(ahora conocidos como Stegomyia aegypti y Stegomyia albopicta).
Existe otro ciclo menos conocido, el selvático, cuyo reservorio son los primates no
humanos. Se ha confirmado la transmisión vertical del dengue.
El A. aegyptiis se encuentra en las áreas de trópicos y subtropicales, está bien adaptado
a la vida urbana y se reproduce en agua limpia, pero también en agua estancada en

i
recipientes (neumáticos desechados, latas, macetas y tanques de recolección de agua).

be or
El A. albopictus se originó en Asia, pero ahora está presente incluso en zonas de clima
templado (Sur de Europa y sur de Norteamérica), es menos eficiente que el A. aegypti en la
transmisión del dengue, pero es capaz de mantener la transmisión interepidémica.

El período de incubación para la replicación del DENV en mosquitos es de 8-12 días


t
(incubación extrínseca), los mosquitos se mantienen infecciosos toda su vida.
En seres humanos puede variar entre 3 y 14 días (incubación intrínseca).
rib ra
¿ Qué es el Periodo de Incubación?

El período de incubación es el intervalo de tiempo entre la invasión por un agente


infeccioso y la aparición de los primeros signos o síntomas de la enfermedad. También
Ca bo

puede definirse como el período de tiempo que transcurre desde que una persona entra en
contacto con el agente infeccioso hasta que aparecen los primeros signos y síntomas de la
enfermedad. ( Incubación intrínsica )

El período de incubación en un vector, es el intervalo entre la penetración del agente


infeccioso en aquel y el momento en que el vector se hace contagioso, es decir, cuando el
vector ya es capaz de transmitir el agente infeccioso hasta el huésped final.
La

También llamado “Período de incubación extrínseco”


F.- Fases del Dengue
El Dengue atraviesa por 3 fases:
1.- Febril , 2.- Crítica y de 3.- Recuperación

1.- La fase febril puede durar hasta 7 días ( La viremia está presente durante el periodo
febril) con los sgtes síntomas:
Fiebre, malestar general, eritema ( es el enrojecimiento y la inflamación que se producen
en la piel. Los sarpullidos que aparecen dan lugar a un malestar general en todo el
organismo que puede desembocar en fiebres e intenso picor), dolores de cabeza, ojos,
músculos y articulaciones.
En ésta fase se requiere reposo, hidratación, control de la fiebre y observación médica.

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C Parasitología clínica BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

an os
i
be or
2.- La fase crítica puede aparecer entre el tercer y séptimo día.
t
Se inicia cuando cae la fiebre, y aunque se experimenta sensación de mejoría, el reposo
y la hidratación deben mantenerse.
rib ra
En ésta fase pueden presentarse los signos de alarma, que llevan al Dengue Grave.
Los signos de alarma son:
- Vómitos reiterados
- Edema o hinchazón
- Dolor abdominal intenso
Ca bo

- Irritabilidad
- Somnolencia
- y Sangrado.
Basta un solo signo de alarma para acudir inmediatamente a los servicios de salud.
La

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C Parasitología clínica

Sino hay signos de alarma, inicia la fase de recuperación.


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3.- La Fase de Recuperación comienza entre el séptimo y décimo día.
Mejora el estado general de la persona y poco a poco se reincorpora a su vida cotidiana.

i
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La

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C Parasitología clínica

Prueba rápida para la detección cualitativa de antígeno NS1,


BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

los anticuerpos IgG e IgM del virus del dengue en

an os
sangre entera, suero o plasma humano.
El Casete de Prueba Rápida Combo Dengue (Sangre Entera/Suero/Plasma) es
un inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección cualitativa del antígeno
NS1 y los anticuerpos IgG e IgM del virus del dengue en sangre entera, suero o

i
plasma humano como ayuda en el diagnóstico de infecciones por dengue.

be or
t
rib ra
Ca bo

A.- Detección de Antígeno NS 1


La infección clásica por Dengue se caracteriza por un inicio repentino de fiebre,
cefalea intensa, mialgias, artralgias y exantema. ( Inicio de Viremia, momento de
detectar la NS1).
La prueba de NS1 detecta la proteína no estructural NS1 del virus del dengue.
La

Esta proteína se secreta a la sangre durante la infección por dengue.


Las pruebas de NS1 pueden ser tan sensibles como las pruebas moleculares
durante los primeros 7 días de síntomas. Después del día 7, no se recomiendan
las pruebas de Ns1.
Un resultado positivo en la prueba de NS1 es indicativo de una infección por
dengue, pero no brinda información sobre el serotipo.
Conocer el serotipo del virus de la infección no es necesario para dar atención al
paciente; sin embargo, si la información del serotipo es necesaria para fines de vigilancia,
se le debe hacer la prueba NAT a la muestra.
Un resultado negativo en la prueba de NS1 no descarta una infección.
Las personas que tienen resultados negativos en la prueba de NS1 deben hacerse la
prueba para detectar la presencia de anticuerpos IgM contra el dengue para determinar
una posible exposición reciente al dengue.

enfermedades metaxénicas - detección del dengue Pag. 11


C Parasitología clínica

B.- Detección de anticuerpos IgM


BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

La infección primaria del dengue provoca que los anticuerpos IgM incrementen a

an os
un nivel detectable dentro de los 3 a 5 días después del inicio de la fiebre. A medida
que el sistema inmunitario combate la infección, los anticuerpos IgM contra el virus del
dengue aumentan.
Los anticuerpos IgM generalmente persisten durante 30 a 90 días y son detectables de
manera fiable.
Un solo resultado de IgM positivo se clasifica como infección presunta reciente por

i
el virus del dengue.

be or
Los pacientes con resultados de IgM negativos antes del día 8 de enfermedad y sin
resultados o resultados negativos de las pruebas de NAT ( pruebas moleculares usadas
para detectar material genómico viral ) o de NS1 son considerados casos indeterminados
(resultados no concluyentes). En estos casos, se debe obtener una segunda muestra
después del día 7 de síntomas para realizar pruebas serológicas adicionales.
t
Los pacientes con resultados de IgM negativos después de 7 días de síntomas y
sin resultados o resultados negativos de las pruebas de NAT o de NS1 se clasifican como
rib ra
negativos con respecto a una infección reciente.
Los pacientes con un cambio de negativo a positivo en resultados de IgM en
muestras por pares (la primera muestra recolectada durante los primeros 7 días de
enfermedad y la segunda muestra recolectada después de que disminuyen los síntomas)
se clasifican como infecciones actuales por dengue.
Ca bo

C.- Detección de anticuerpos IgG


La detección de anticuerpos específicos de clase IgG contra los cuatro serotipos
del dengue contribuye al diagnóstico de una exposición pasada al dengue.
La presencia de niveles crecientes de IgG en sueros emparejados indica una infección
activa por dengue.
La mayoría de los pacientes con infección por dengue en las regiones endémicas
La

presentan infecciones secundarias, resultando en altos niveles de anticuerpos IgG


específicos antes o al mismo tiempo de la respuesta con anticuerpos IgM. Por lo tanto,
la detección de anticuerpos específicos anti-Dengue IgM e IgG puede ayudar a distinguir
entre las infecciones primarias y secundarias.

D.- Descripción de las pruebas


La Prueba Rápida en Casete para Dengue NS1 es una prueba rápida que utiliza
una combinación de anticuerpos contra Dengue recubiertos de partículas de color
para la detección del antígeno NS1 del Dengue en sangre entera, suero o plasma
humano.
La Prueba Rápida en Casete para Dengue IgG/IgM es una prueba rápida que
utiliza una combinación de partículas coloreadas recubiertas del antígeno de
Dengue para la detección de anticuerpos contra Dengue IgG e IgM en sangre
entera, suero o plasma humano
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C Parasitología clínica

E.- Fundamentos de las Pruebas


BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

La Prueba Rápida en Casete para Dengue NS1 e ?s un inmunoensayo cualitativo

an os
basado en membrana, para la detección del antígeno de Dengue NS1 en sangre
entera, suero o plasma.
1.- Durante la prueba, la muestra reacciona con un conjugado-Anticuerpo contra Dengue
en el casete de prueba.
2.- El anticuerpo conjugado con oro se unirá al antígeno de dengue en la muestra, que a
su vez se unirá con el anticuerpo Anti-Dengue NS1 recubierto en la membrana.

i
3.- A medida que los reactivos se mueven a través de la membrana, el anticuerpo

be or
anti-Dengue NS1 en la membrana se unirá el complejo antígeno-anticuerpo causando la
formación de una línea rosa pálido u oscuro en la zona de prueba de la membrana.
4.- La intensidad de las líneas variará dependiendo de la cantidad de antígeno presente en
la muestra. La aparición de la línea de color rosa en la región de la prueba debe
considerarse como resultado positivo.
t
La Prueba Rápida en Casete para Dengue IgG/IgM es un inmunoensayo
rib ra
cualitativo basado en membrana para la detección de anticuerpos contra Dengue
en sangre entera, suero o plasma.
1.- Esta prueba contiene dos componentes, un componente IgG y un componente IgM.
2.- En el componente IgG, anticuerpos anti-IgG humano están recubiertos en la región
de la línea de prueba IgG.
Ca bo

3.- Durante la prueba, la muestra reacciona con partículas recubiertas de antígeno


Dengue que se encuentran en el casete de prueba.
4.- La mezcla luego migra hacia arriba en la membrana cromatográficamente por acción
capilar y reacciona con el anticuerpo anti-IgG humano en la región de línea de prueba IgG.
5.- Si la muestra contiene anticuerpos IgG contra dengue, una línea de color aparecerá
en la zona de la prueba de IgG.
La

6.- En el componente IgM, anticuerpos anti-IgM humano están recubiertos en la zona


de la prueba IgM.
7.- Durante la prueba, la muestra reacciona con el anticuerpo anti-IgM humano.
Si la muestra contiene anticuerpos IgM contra Dengue, estos reaccionaran con el
anticuerpo anti-IgM humano y las partículas recubiertas con antígeno Dengue que se
encuentran en el casete de prueba; este complejo es capturado por el anticuerpo
anti-IgM humano, formando una línea coloreada en la región de la línea de prueba IgM.
8.- Por lo tanto, si la muestra contiene anticuerpos IgG contra Dengue, una línea de color
aparecerá en la zona de la prueba de IgG.
9.- Si la muestra contiene anticuerpos IgM contra Dengue, una línea de color aparecerá
en la zona de la prueba de IgM.
10.- Si la muestra no contiene anticuerpos contra Dengue, no aparecerá una línea
coloreada en ninguna de las regiones de prueba, indicando un resultado negativo.

enfermedades metaxénicas - detección del dengue Pag. 13


C Parasitología clínica BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

11.- Para servir como control del procedimiento, una línea coloreada aparecerá siempre
en la zona de control, lo que indica que se ha añadido un volumen apropiado de

an os
muestra y ha ocurrido su absorción en la membrana.

i
be or
t
rib ra
F.- Reactivos de las Pruebas
La Prueba Rápida en Casete para Dengue IgG/IgM c?ontiene partículas de oro
coloidal conjugadas con antígeno Dengue, anticuerpos anti-IgM humano,
Ca bo

anticuerpos anti-IgG humano recubiertos en la membrana.


La prueba Rápida en Casete para Dengue NS1 c?ontiene partículas coloidales
conjugadas con anticuerpo anti-Antígeno de Dengue, anticuerpos anti-antígeno
de Dengue recubiertos en la membrana

G.- Recolección de la muestra y preparación


La

La prueba Rápida en Casete Combo Dengue (Sangre Entera/Suero/Plasma)


puede llevarse a cabo utilizando sangre entera, suero o plasma.
1.- Para recolectar muestras de sangre total por punción dactilar:
- Lave la mano del paciente con jabón y agua tibia o límpiela con una torunda
alcoholada. Deje secar.
- Masajee la mano sin tocar el lugar de la punción, frotando hacia la punta del
dedo medio o anular.
-Puncione la piel con una lanceta estéril. Limpie el primer signo de sangre.
- Frote la mano gentilmente desde la muñeca hacia la palma y luego al dedo para
formar una gota redonda de sangre sobre el lugar de la punción.

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C 1
Parasitología clínica

Recolección de muestras
BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

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3
t
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2.- Coloque el casete en una superficie limpia y nivelada


3.- Para muestras de Sangre Entera (Punción dactilar/Venopunción)? :
Para NS1? :?
Utilizando un gotero: Sostenga el gotero de 25 µl en posicion vertical y anada 3
gotas de sangre entera (aproximadamente 75 µl) al pocillo de muestra, a continuacion,
La

anada 1 gota de buffer (aproximadamente 40 µl) e inicie el temporizador.


Consulte la imagen que se presenta mas adelante.
Para IgG/IgM:
Utilizando un gotero? : Sostenga el gotero de 5 µl verticalmente, llene con la muestra
hasta 1 cm por encima de la Linea de Llenado, y transfiera de 1 gota de sangre entera
(aproximadamente 10 µl) al pocillo de muestra del casete. A continuacion, anada 1 gota
de buffer (aproximadamente 40 µl) e inicie el temporizador.

4. Lea los resultados a los 10 minutos, no interprete los resultados después de 20


minutos.

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C 4
Parasitología clínica

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BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

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C Parasitología clínica
H.- Interpretación de Resultados
BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

an os
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Use la imagen de arriba como referencia
NS1 POSITIVO?
t : Dos líneas de color aparecen. Una línea de color debe estar en
la región de control (C) y otra línea de color debe estar en la región de prueba
(T).
rib ra
IgG e IgM POSITIVO? : Tres líneas aparecen. Una línea de color debe estar en la
región de control (C), y dos líneas de color deben aparecer en la región de la
línea de prueba IgG y en la región de línea de prueba IgM respectivamente. Las
intensidades de color de las líneas no tienen que coincidir. Un resultado positivo
para anticuerpos IgG e IgM, es indicativo de una infección primaria por Dengue
Ca bo

en etapa final y una infección secundaria por Dengue en etapa inicial.


IgG POSITIVO? : Aparecen dos líneas. Una línea de color debe estar en la región
de control (C), y una línea de color debe aparecer en la región de la línea de
prueba IgG. El resultado es positivo para anticuerpos IgG específicos contra el
virus Dengue y es indicativo de una probable infección de Dengue secundaria.
IgM POSITIVO? : Aparecen dos líneas. Una línea de color debe estar en la región
La

de control (C), y una línea de color aparece en la región de la línea de prueba IgM.
El resultado es positivo para los anticuerpos IgM específicos contra el virus
del Dengue y es indicativo de infección primaria del Dengue.
NOTA: L ?a intensidad del color en la región de línea de prueba (NS1 y/o IgG y/o
IgM) variará dependiendo de la concentración de antígeno de Dengue NS1 y/o
IgG y/o IgM presente en la muestra. Por lo tanto, cualquier tono de color rojo en
la región de la prueba debe ser considerado positivo.
NEGATIVO: U ? na línea de color aparece en la región de control (C). No aparece
ninguna línea roja o rosa en la región de prueba (T).
INVÁLIDO: L ?a línea del área de control (C) no aparece. Las razones más comunes
para un resultado inválido son tamaño de la muestra insuficiente o técnicas de
procedimiento equivocadas. Revise el procedimiento y repita nuevamente la prueba con
un casete de prueba nuevo. Si el problema persiste, descontinúe el uso del kit de prueba
inmediatamente y contacte a su distribuidor local.

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C Parasitología clínica

ACTIVIDAD DE CLASE Nº 1
BLGO. MARTÍN CHUMPÉN ZAMORA

( ENVIE SUS RESPUESTAS PARA SU EVALUACION

an os
EN FORMATO WORD )
Lea nuevamente y responda a las sgtes preguntas:
1.- ¿Una enfermedad metaxénica es también una zoonosis?

i
2.- ¿ Para Ud. qué diferencia sería la más relevante entre un vector mecánico y un vector

be or
biológico?
3.- ¿ Qué tipo de enfermedad es el Dengue y qué serotipos posee?
4.- ¿ Cuál es el comportamiento del vector del dengue en su estado natural?
5.- ¿ Qué proteína es responsable de estimular al sistema inmunitario en el periodo febril?
t
6.- ¿ Cuál fase del dengue es de mayor cuidado durante el proceso de la enfermedad?
Sustente su respuesta.
rib ra
7.- ¿ Qué es lo que se va a detectar en el Casete de Prueba Rápida de Dengue?
Especifique que antígeno y qué anticuerpos.
8.- ¿ Qué nos dice cuando es un resultado positivo a NS 1?
Ca bo

9.- ¿ Qué nos dice cuando es un resultado positivo de IgM Y IgG?


10.- ¿ Cuándo los resultados son negativos en NS 1 Y IgM/IgG?
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