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Ejercicios Tema 7

La clonación molecular permite amplificar fragmentos de ADN mediante la inserción de estos en vectores de clonación y su posterior replicación en células hospedadoras. Esto requiere un vector de clonación y células hospedadoras. Existen diferentes tipos de vectores como plásmidos, cosmidos y BAC, así como métodos para introducirlos en bacterias como transformación, transfección y electroporación. La selección de clones recombinantes se realiza mediante marcadores de selección como resistencia a antibióticos.

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Ejercicios Tema 7

La clonación molecular permite amplificar fragmentos de ADN mediante la inserción de estos en vectores de clonación y su posterior replicación en células hospedadoras. Esto requiere un vector de clonación y células hospedadoras. Existen diferentes tipos de vectores como plásmidos, cosmidos y BAC, así como métodos para introducirlos en bacterias como transformación, transfección y electroporación. La selección de clones recombinantes se realiza mediante marcadores de selección como resistencia a antibióticos.

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BIOLOGÍA MOLECULAR

Clonación de ácidos nucleicos


1. ¿Qué es la clonación molecular? Enumera sus ventajas como técnica de amplificación de
ADN. ¿Qué dos elementos son imprescindibles para clonar una molécula de ADN?

2. Define los siguientes conceptos:


a. Vector de clonación.
b. Vector recombinante.
c. Vector de expresión.
d. Vector lanzadera.
e. Célula hospedadora.
3. Di si son verdaderas o falsas las siguientes afirmaciones:

a. Mediante el proceso denominado transformación, cualquier bacteria puede


captar e internalizar moléculas de ADN desnudas presentes en el medio
externo.
b. La transfección es un método para introducir vectores recombinantes en
bacterias infectándolas con un virus.
c. La introducción de vectores recombinantes en células hospedadoras mediante
virus se denomina transducción.
d. En la electroporación, la introducción de vectores recombinantes en bacterias
se consigue mediante un láser que produce nanoporos en la pared y en la
menbrana plasmática.

4. Una suspensión de E. coli sensible a la ampicilina, la tetraciclina, el cloranfenicol y la


lactosa negativa se transforma con un vector recombinante, obteniéndose una mezcla de
bacterias no transformadas y transformadas con el vector recombinante o con el vector no
recombinante. Explica cómo realizarías la selección e identificación de los clones
recombinantes en los siguientes supuestos:
a. El vector es un plásmido con un gen de resistencia a la ampicilina, un gen de
resistencia a la tetraciclina y un polylinker en el centro del gen de resistencia a
la ampicilina.
b. El vector es un BAC con un gen de resistencia al cloranfenicol, un gen letal para
la bacteria y un polylinker en el centro del gen letal.
c. El vector es un cósmido con un gen de resistencia a la tetraciclina, un gen LacZ
y un polylinker en el centro del gen de resistencia a la tetraciclina.
d. El vector es un plásmido con un gen de resistencia a la ampicilina, el gen que
codifica para la GFP y un polylinker en el centro del gen GFP.
5. Respecto del análisis de bibliotecas de ADN, empareja cada proceso con su
correspondiente metodología:

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