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EJERCICIOS Tema 8

Este documento describe tres métodos de secuenciación de ácidos nucleicos: 1. El método químico de Maxam y Gilbert que modifica las bases nitrogenadas mediante reacciones químicas específicas y genera fragmentos de distintos tamaños que se separan por electroforesis en gel para determinar la secuencia. 2. Un método de secuenciación química de un oligonucleótido que proporciona una imagen autorradiográfica cuya secuencia se debe determinar. 3. El método original de Sanger de secuenciación

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Este documento describe tres métodos de secuenciación de ácidos nucleicos: 1. El método químico de Maxam y Gilbert que modifica las bases nitrogenadas mediante reacciones químicas específicas y genera fragmentos de distintos tamaños que se separan por electroforesis en gel para determinar la secuencia. 2. Un método de secuenciación química de un oligonucleótido que proporciona una imagen autorradiográfica cuya secuencia se debe determinar. 3. El método original de Sanger de secuenciación

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EJERCICIOS DE SECUENCIACION

BIOLOGIA MOLECULAR Y CITOGENETICA.

Métodos de secuenciación de ácidos nucleicos

1. Respecto del método químico de secuenciación de Maxam y Gilbert, responde si son


verdaderas o falsas las siguientes afirmaciones. Justifica las afirmaciones que te parezcan
falsas.
a. Se basa en la modificación de las bases nitrogenadas mediante reacciones
químicas específicas.
b. Es un método que requiere marcaje radiactivo con 32P. El marcaje se introduce en
cada base nitrogenada durante la reacción química de modificación.
c. La muestra se divide en cuatro tubos y en cada uno de ellos se realiza una reacción
química específica que modifica una de las cuatro bases.
d. Las reacciones químicas generan fragmentos de distintas longitudes que se
separan mediante electroforesis en gel de poliacrilamida en condiciones
desnaturalizantes. Los productos de las cuatro reacciones químicas se corren en
paralelo en calles adyacentes del mismo gel.
e. La lectura del gel se realiza iluminándolo con luz UV y obteniendo una fotografía.

2. En la secuenciación química de un oligonucleótido de ADN se ha obtenido la siguiente


imagen autorradiográfica. ¿Cuál es la secuencia del oligonucleótido?
3. Mediante secuenciación enzimática por el método original de Sanger de un
oligonucleótido de ADN se ha obtenido la siguiente imagen autorradiográfica.

¿Cuál es la secuencia del oligonucleótido?

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