NORMAS QUE DEBERAN CUMPLIR LOS ESTUDIANTES PARA EL

DESARROLLO DE LAS PRACTICAS EXPERIMENTALES

Presentarse puntualmente con su grupo de laboratorio, en la fecha, día y

1 hora estipulada para el desarrollo de sus prácticas correspondientes.
(10% nota de apreciación)
Cargar con su propio manual o guía de laboratorio actualizada y presentar
2 los investigues / resultados de laboratorio, cuando sea requerido por parte
del instructor en la práctica de laboratorio. (30% nota de apreciación)
Todos los estudiantes deberán presentarse correctamente vestidos a todas
3 las prácticas de laboratorio, con gabacha gris y cumplir con las normas de
bioseguridad pre - establecidas con anterioridad (10% nota de apreciación)

Los estudiantes deberán estar atentos a todas las explicaciones e

4 indicaciones dadas por su instructor durante el desarrollo de la práctica,
debiendo solicitar permiso cuando necesiten realizar otra actividad. La no
acatación de esta norma influirá sobre la nota de apreciación.
Todos los estudiantes se someterán a una evaluación o examen corto que
5 se realizará al inicio de la práctica, durante su desarrollo no se permitirá el
préstamo entre estudiantes de ningún tipo de material, tales como:
calculadoras, bolígrafos, lápices, borradores y otros.
En las prácticas experimentales se formarán sub - grupos de alumnos, los
6 cuales serán distribuidos en mesas de trabajo, donde tendrán que
permanecer para desarrollar su respectiva práctica de laboratorio.

7 Se prohíbe fumar, comer, el uso de cualquier equipo audiovisual o material

que no tenga relación alguna con la práctica.

El uso de mascarillas, guantes y gafas protectoras será de carácter

8 obligatorio cuando se tenga contacto con sustancias contaminantes, toxicas
/ infecciosas o en la manipulación de animales de experimentación.
Todo el equipo o material que se proporcione, para el desarrollo de una
9 práctica de laboratorio, deberá tenerse el cuidado de no dañarlo y en caso
de darse tal situación tendrá que ser reparado o sustituido por uno nuevo si
la circunstancia lo amerita, por su(s) respectivo(s) infractor(es).
Deberán tener el cuidado de evitar la contaminación de frascos que
10 contengan soluciones reactivas o drogas, así como también el contacto con
jeringas y agujas contaminadas con líquidos biológicos.
 En aquellas situaciones en que el sujeto de experimentación sea un alumno,
11 la administración del fármaco o extracción de sangre la deberá hacer
únicamente el instructor.
Toda administración de reactivos, fármacos (enteral o parenteral), deberá
12 realizarse con la supervisión del respectivo instructor de la práctica
experimental.

13 En algunos experimentos los resultados serán discutidos de manera

simultánea durante su desarrollo.
Antes de retirarse del aula de laboratorio, los estudiantes deberán dejar
14 limpio y en orden el material, equipo y mesa de trabajo; de no ser así se le
afectara al grupo en la nota de apreciación.

Si uno o más estudiantes se presentasen a su práctica correspondiente,

15 después de finalizado el respectivo examen corto de laboratorio, no tendrán
derecho de realizar dicha actividad y se tomara como inasistencia.

Todos los estudiantes realizaran sus laboratorios con el grupo al cual

16 pertenecen, de no ser así se tomará como inasistencia. Solamente en casos
especiales los alumnos podrán realizar su práctica experimental con otro
grupo, con el permiso de la autoridad pertinente.

La no asistencia sin un previo permiso justificable dado por la autoridad

17 pertinente inválida todo derecho a evaluación sobre dicha práctica y su
sesión de discusión correspondiente.
La justificación legal de inasistencia a un laboratorio, podrá presentarse a la
18 autoridad pertinente a más tardar tres días hábiles después de realizada
dicha actividad.
Para la realización de prácticas de laboratorio, donde se necesiten sujetos
19 de experimentación, deberán ser previamente seleccionados por el grupo y
presentados al laboratorista con anticipación para ser informados sobre los
pormenores a los que serán sometidos en dichas prácticas.
En el caso de que se necesite material, reactivos de laboratorio, fármacos
20 o animales de experimentación, para el desarrollo de una práctica de
laboratorio, cada grupo de trabajo deberá presentarlos en la cantidad
requerida, en la fecha, día y hora estipulada.
El incumplimiento de los literales 19 y 20 antes mencionados, será
21 penalizado con la suspensión de la práctica de laboratorio correspondiente.
Perdiendo el derecho su respectiva evaluación y de la sesión de discusión.
 INVESTIGACION – PRELABORATORIO #1
PRIMERA PARTE: DIFUSION Y MEDIO AMBIENTE INTERNO

 Esquematice o pegue imagen con los mecanismos de transporte

Que se dan a través de la membrana celular

 Defina Difusión

 Diferencias entre la difusión simple y facilitada

 Defina transporte activo

 Haga un recuadro con dos columnas y mencione las características

Del transporte activo primario y secundario

 Defina Homeostasis

 Defina Medio Ambiente Interno

 Mencione los compartimientos de líquidos que conforman el medio

Ambiente Interno con su respectivo porcentaje

 Esquematice o pegue una imagen con los elementos minerales

Que están presentes en el líquido intracelular y extracelular con

sus respectivas concentraciones

 Mencione la diferencia entre lo que son sistemas y aparatos en el

Organismo en relación al mantenimiento de la homeostasis

  Mencione como el sistema nervioso colabora con el proceso de

Homeostasis del organismo

 Mencione de forma breve como el sistema endocrino colabora en

El control de la homeostasis en el organismo

SEGUNDA PARTE: OSMOSIS Y PRESION OSMOTICA

 Defina Osmosis

 Defina Presión Osmótica

 Mencione los factores determinantes de la Presión Osmótica

 Defina Osmolaridad y el valor que esta tiene en el plasma sanguíneo

 Característica de la Solución Isotónica y los efectos que produce en el

Glóbulo rojo

 Característica de la Solución Hipotónica y los efectos que produce en

El Glóbulo rojo

 Característica de la Solución Hipertónica y los efectos que produce en

El Glóbulo rojo

 Uso de las siguientes soluciones fisiológicas utilizadas en humanos:

Solución Hiposal, Harman, Salina normal y Suero mixto según su

Osmolaridad y tonicidad
LABORATORIO No. 1
PRIMERA PARTE: DIFUSIÓN Y MEDIO AMBIENTE INTERNO

INTRODUCCIÓN
Para realizar la práctica experimental el estudiante deberá tener el
conocimiento teórico necesario que le permita comprender el fenómeno
de la difusión en el organismo; Así como analizar la importancia del
mantenimiento y composición físico - químico del medio en que se
encuentran las células para su adecuado funcionamiento.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS
1. Explicar la influencia que genera la temperatura, el gradiente de
concentración del soluto y la naturaleza del medio en la velocidad de
difusión del soluto azul de metileno, utilizando como solventes agua
a diferentes temperaturas, gelatina y glicerina.

2. Deducir la importancia biológica de las condiciones en que se da la

difusión en el organismo.

3. Interpretar la importancia de las características del medio ambiente

interno y su mantenimiento para la preservación de la vida,
comparando el tiempo de vida de corazones de sapo colocados en
solución de Ringer para anfibio y solución salina.

4. Conocer el uso de las soluciones fisiológicas utilizadas en el ser

humano, a través de la comparación entre la composición
electrolítica del líquido extracelular y la de los sueros.
COMPONETE 1. DIFUSION

En esta parte se observará el fenómeno de la difusión del azul de

metileno en un solvente líquido (agua a diferentes temperaturas),
semisólido (gelatina) y oleoso (glicerina)

Los procedimientos serán:

Difusión del azul de metileno en agua a diferentes temperaturas.
Difusión del azul de metileno en gelatina.
Difusión del azul de metileno en glicerina.
Efecto del gradiente de concentración en la velocidad de difusión.

Material de laboratorio por mesa de trabajo:

▪ 3 probetas de 100 ml
▪ Agua a temperatura ambiente aproximadamente 25 ºC
▪ Agua caliente aproximadamente 70 ºC
▪ Agua fría aproximadamente 4 ºC
▪ Un tubo con gelatina
▪ Un tubo con glicerina
▪ Solución de azul de metileno
▪ Gradilla

 DIFUSIÓN DEL AZUL DE METILENO EN AGUA A

DIFERENTES TEMPERATURAS
Procedimiento:
1. Colocar en cada una de tres probetas: 100 ml de agua destilada
a las siguientes temperaturas: fría, al ambiente y caliente
 2. Agregar simultáneamente en cada una de las probetas que
contienen el agua destilada a diferentes temperaturas, cuatro
gotas de solución de azul de metileno.

3. Compare a través de la observación la velocidad con que se

distribuye el azul de metileno en cada una de las probetas.

➢ Explique los resultados obtenidos:

 DIFUSIÓN DEL AZUL DE METILENO EN GELATINA

Procedimiento:

▪ En el tubo pequeño que contiene gelatina simple, agregue cuatro

gotas de solución de azul de metileno
▪ Colóquelo en una gradilla y observe la velocidad de
difusión
▪ Compare los resultados con los obtenidos anteriormente, donde se
utilizo agua destilada:

➢ Explique los resultados obtenidos:

 DIFUSIÓN DEL AZUL DE METILENO EN GLICERINA

Procedimiento:

▪ Usando dos tubos de ensayo, colocar en uno de ellos 5 ml de agua

destilada y en el otro 5 ml de glicerina

▪ Agregar a cada uno de los tubos, cuatro gotas de solución de azul de

metileno

▪ Comparar a través de la observación el proceso de la difusión en

ambos tubos:

➢ Explique los resultados obtenidos:

  EFECTO DEL GRADIENTE DE CONCENTRACION EN LA
VELOCIDAD DE DIFUSION DEL AZUL DE METILENO EN AGUA
DESTILADA
Procedimiento:

➢ Colocar en cada una de tres probetas: 100 ml de agua destilada a

temperatura ambiente

➢ Agregar simultáneamente azul de metileno en cada una de las

probetas: en la primera 4 gotas, en la segunda 8 gotas y en la tercera
12 gotas de la misma solución concentrada de azul de metileno.

1 2 3

➢ Compare a través de la observación la velocidad con que se

distribuye el azul de metileno en cada una de las probetas.

➢ Explique los resultados obtenidos:

COMPONETE 2.
MEDIO AMBIENTE INTERNO

En esta parte se observará como influye el medio ambiente interno en

el tiempo de vida de dos corazones de sapos colocados de forma
separada en diferentes soluciones (Solución de Ringer para anfibio y
solución salina normal)
 INFLUENCIA DE DOS SOLUCIONES DIFERENTES

EN EL TIEMPO DE VIDA DEL CORAZÓN DEL SAPO

Material de laboratorio por mesa de trabajo:

▪ 2 sapos GRANDES
▪ Material de disección
▪ Punzón (opcional))
▪ Lidocaína 2% (anestésico)
▪ Solución de Ringer para anfibio
▪ Solución salina
▪ 2 Beaker de 100 ml.
Las soluciones que se utilizarán tienen la siguiente composición:
Solución de Ringer Solución Salina

NaCl ----------- 6.0 gramos

ClK ------------ 0.14 gramos NaCl ------------ 0.9 gramos
NaHCO3 -------- 0.20 gramos
CaCl2 ------------- 0.12 gramos H2O ------------- 1 litro
Glucosa ------ 1.0 gramo
H2O ----------- 1 litro
Procedimiento:

1. Colocar en un Beaker solución de Ringer para anfibio y en otro

Solución Salina.
2. Descerebrar o anestesiar los sapos y extraerles el corazón,
utilizando la técnica que le explicará su instructor.
3. Eliminar el exceso de sangre de los corazones extraídos de los
sapos, pasándolos ligeramente por Solución de Ringer
4. Colocar uno de los corazones en el Beaker que contiene la
solución de Ringer y el otro en el Beaker que contiene la Solución
Salina. Tome este momento como tiempo cero
5. Mida la frecuencia cardiaca en el tiempo cero y continué
midiéndola cada minuto o lo que indiqué el tutor.
6. Anotar los resultados en el siguiente cuadro:

Solución de Ringer Solución Salina

Tiempo
(latidos/minuto) (latidos/minuto)
0
1
2
3
4
5
6
7
8
▪ A través de una gráfica de barras en relación al tiempo, comparé la
actividad de los corazones de los sapos (frecuencia cardiaca)
colocados en la solución de Ringer para anfibio y solución salina;
Analicé los resultados obtenidos:

COMPONETE 3.

CONOCER EL USO DE LAS SOLUCIONES FISIOLÓGICAS

UTILIZADAS EN EL SER HUMANO, A TRAVÉS DE LA
COMPARACIÓN DE LA COMPOSICIÓN ELECTROLÍTICA
DEL LIQUIDO EXTRACELULAR Y LA DE LOS SUEROS.

Valores de referencia de electrolitos

Electrolitos Valor de Referencia

[ Na+ ] Extracelular 142 mEq / L
[ Na+ ] Intracelular 10 mEq / L
[ K+ ] Extracelular 4 mEq / L
[ K+ ] Intracelular 140 mEq / L
[ Cl- ] Extracelular 103 mEq / L
[ Cl- ] Intracelular 4 mEq / L
[ Ca++ ] Extracelular 2.4 mEq / L
[ Ca++ ] Intracelular 0.0001 mEq / L
[ Mg++ ] Extracelular 1.2 mEq / L
[ Mg++ ] Intracelular 58 mEq / L
 PREPARACION DE SOLUCIONES FISIOLOGICAS

Hiposal:
• Dextrosa para inyección …………………………… 5 g
• Cloruro de Sodio ……………………………………. 0.3 g
• Agua para inyección csp ………………………..... 100 ml
Solución de Hartmann:
• Cloruro de Sodio ……………………………………. 6.0 g
• Cloruro de Potasio ………………………………….. 0.3 g
• Cloruro de Calcio ……………………………………. 0.2 g
• Lactato de Sodio …………………………………….. 3.0 g
• Agua para inyección csp ………………………….. .1000 ml

Solución Salina normal:

• Cloruro de Sodio ……………………………………. 9 g
• Agua para inyección csp ………………………….. 1000 ml

Dextrosa 5 % en Solución Salina Normal (Suero Mixto)

• Dextrosa inyectable …………………………………. 50 g
• Cloruro de Sodio …………………………………….. 9 g
• Agua para inyección csp …………………………... 1000 ml
SEGUNDA PARTE: OSMOSIS Y PRESION OSMOTICA

INTRODUCCIÓN
En el presente experimento se tendrá la oportunidad de estudiar el
proceso de la osmosis, utilizando como membranas semipermeables el
papel celofán (no biológica) y la membrana de los glóbulos rojos
(biológica). El estudio de este proceso le permitirá a su vez comprender
los conceptos de osmolaridad, presión osmótica y tonicidad.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS
1. Interpretar el fenómeno de la ósmosis utilizando un modelo de
membrana de papel de celofán y la membrana del glóbulo rojo
verificando su permeabilidad al soluto y al solvente utilizados

2. Deducir de manera indirecta la presión osmótica con base a los datos

obtenidos en el modelo de la bolsa de papel celofán

3. Interpretar el cambio del volumen celular que puede ocurrir al colocar

las células sanguíneas en soluciones de diferente osmolaridad y
tonicidad

Los procedimientos serán:

Osmosis y presión osmótica a través de una membrana de papel
celofán.
Osmosis a nivel celular

Clasificación de las soluciones fisiológicas utilizadas en humanos

 OSMOSIS Y PRESIÓN OSMÓTICA A TRAVES DE UNA
MEMBRANA DE PAPEL CELOFÁN

Material de laboratorio por mesa de trabajo:

▪ Un soporte de metal
▪ Una varilla de vidrio con tapón de hule
▪ Una cinta métrica
▪ Un Beaker
▪ Papel celofán
▪ Solución de sacarosa 1 M
▪ Agua destilada

Procedimiento:

1. Fije el papel celofán a un tapón de hule perforado formando una

bolsa.

2. Introduzca por el orificio del tapón un tubo capilar de 60 cm. de largo

hasta que su extremo quede a la mitad de la bolsa de papel de
celofán.

3. Introduzca a través del tubo hasta la bolsa de papel celofán (con

ayuda de un catéter conectado a una jeringa) solución de Sacarosa
1 M.

4. Coloque la bolsa dentro de un beaker que contiene agua destilada y

fije el tubo capilar a un soporte de metal
5. El nivel del agua destilada contenida en el beaker debe coincidir con
la parte inferior del tapón de hule.

6. Tome como tiempo cero el momento en que el nivel del líquido dentro
del tubo capilar este a nivel de la superficie del tapón de hule

7. Mida el desplazamiento de la solución de Sacarosa en el tubo capilar

cada 20 minutos durante una hora

8. Calcule la velocidad del desplazamiento de la solución Sacarosa en

el tubo capilar en cada intervalo de tiempo

9. Anotar en el siguiente cuadro de resultados:

Velocidad de
Tiempo Altura de la Columna
Desplazamiento

0’

20’

40’

60’

➢ Explique los resultados obtenidos:

 OSMOSIS A NIVEL CELULAR

Material de laboratorio por mesa de trabajo:

▪ 1 gotero
▪ 1 jeringa de 3 ml
▪ Algodón y alcohol
▪ heparina (anticoagulante)
▪ 4 tubos centrífuga
▪ 2 ml de sangre
▪ Papel parafina
▪ Soluciones de cloruro de sodio al 0.3%, 20% y 0.9%
▪ Solución de urea al 1.8%

Procedimiento:
1. Extraer a un estudiante del grupo 2 ml de sangre venosa y colóquela
en un tubo que contiene anticoagulante (sustancia que permite que
la sangre se mantenga líquida)
2. Colocar en cada uno de 4 tubos centrífuga 5 ml de las siguientes
soluciones: NaCl 0.3%, NaCl 20%, NaCl 0.9% y Urea 1.8%

3. Agregar a cada tubo una gota de sangre, tapar los tubos con papel
parafina y luego mezclarlos suavemente por inversión.

4. Centrifugar los tubos por 15 minutos, observar el color del

sobrenadante y anotarlo en el cuadro correspondiente.
5. Calcular la osmolaridad de cada solución y anote en el cuadro 1.
CUADRO #1
No. Osmolaridad Color del
Solución Utilizada
Tubo De la Solución Sobrenadante

Hacer correspondientes cálculos:

6. Anotar en cuadro 2, las conclusiones obtenidas a través del análisis

de los resultados experimentales.
CUADRO #2
Cambio del Tonicidad de la
No. Tubo Solución Utilizada
Volumen Celular solución

➢ Explique los resultados obtenidos:

 CLASIFICACION DE LAS SOLUCIONES
FISIOLOGICAS UTILIZADAS EN HUMANOS

Completar el siguiente cuadro y anotar en sus dos últimas columnas,

el valor de la osmolaridad y la tonicidad, respectiva de cada solución,
con base a ello discutir su clasificación

Na+ K+ Ca++ Cl- Lactato Dextrosa Osmolaridad

Tonicidad
Solución Meq/L Meq/L Meq/L Meq/L Meq/L % /100 ml (mOsmoles /L)

Hiposal

Sol. de
Harman
Sol.
Salina
Normal
Suero
Mixto

➢ Explique los resultados obtenidos:

 SESION DE DISCUSION #1
DIFUSION Y MEDIO AMBIENTE INTERNO

1. Esquematice los mecanismos de transporte que se dan a través

De la membrana celular y explique cada uno de ellos.

2. A través de un esquema, analizar cómo influye la temperatura, el

estado físico, la Naturaleza química del medio y el efecto del
gradiente de Concentración en la velocidad de difusión de un
soluto, visto en La práctica de laboratorio.

3. Explique que es medio ambiente interno de la célula y

Homeostasis; mencione la importancia en general del proceso de
transporte a través de la membrana celular para el mantenimiento
del mismo.

4. Mencione el porcentaje de agua corporal total en un recién nacido,

adulto joven y anciano y la importancia del proceso de homeostasis
en tales casos.

5. Por medio de un gráfico de barras, Explique los resultados

obtenidos en el mantenimiento de la vitalidad de los corazones de
los sapos, tomando en consideración la composición química del
medio ambiente interno en el cual fueron colocados.

6. Uso de las soluciones fisiológicas en función de su composición

electrolítica.
• Hiposal:
• Solución de Hartmann:
• Solución Salina normal:
• Dextrosa 5 % en Solución Salina Normal (Suero Mixto)

OSMOSIS Y PRESION OSMOTICA

7. Explique la importancia fisiológica de los siguientes procesos que

se generan en el organismo:

- Osmosis

- Presión osmótica.

- Osmolaridad del plasma

- Tonicidad de la célula

8. Explique los resultados obtenidos del proceso de osmosis y

presión osmótica a través de una membrana de papel celofán.

9. Explique los resultados obtenidos del proceso de osmosis a nivel

Celular

10. Sobre la base de los resultados experimentales, clasifique las

Soluciones electrolíticas para humanos (sueros) según su
Osmolaridad y tonicidad