GPT (ALT)

GPT (ALT)
NADH. Cinético UV. IFCC rec.

Determinación cuantitativa de alanina aminotransferasa 6. Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto
GPT (ALT) (∆A/min).
IVD CALCULOS
Conservar a 2-8ºC ∆A/min x 1750 = U/L de ALT

Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 µmol

PRINCIPIO DEL METODO de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en
La alanina aminotrasferasa (ALT) inicialmente llamada transaminasa unidades por litro (U/L).
glutámico pirúvica (GPT) cataliza la transferencia reversible de un grupo
amino de la alanina al α-cetoglutarato con formación de glutamato y Factores de conversión de temperaturas
piruvato. El piruvato producido es reducido a lactato en presencia de Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
lactato deshidrogenasa (LDH) y NADH: Temperatura Factor para convertir a
ALT
Alanina + α-Cetoglutarato ⎯⎯⎯→ Glutamato + Piruvato de medición 25ºC 30ºC 37ºC
LDH 25ºC 1,00 1,32 1,82
Piruvato + NADH + H+ ⎯⎯⎯→ Lactato + NAD+ 30ºC 0,76 1,00 1,39
La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio, 37ºC 0,55 0,72 1,00
determinado fotometricamente, es proporcional a la concentración
catalítica de ALT en la muestra ensayada1. CONTROL DE CALIDAD
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
SIGNIFICADO CLINICO SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
La ALT es una enzima intracelular, se encuentra principalmente en las Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe
células del hígado y el riñón. revisar el instrumento, los reactivos y la técnica.
Su mejor aplicación es en el diagnóstico de las enfermedades del hígado. Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
Se observan niveles elevados en enfermedades hepáticas como la correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
hepatitis, enfermedades de los músculos y traumatismos. 4,5
Cuando se emplean en conjunción con la AST ayuda en el diagnóstico de VALORES DE REFERENCIA
infartos de miocardio, ya que el valor de la ALT se mantiene dentro de los 25ºC 30ºC 37ºC
límites normales y aumenta en los niveles de AST1,4,5. Hombres Hasta 22 U/L 29 U/L 40 U/L
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos Mujeres Hasta 18 U/L 22 U/L 32 U/L
clínicos y de laboratorio. En recién nacidos normales se han descrito valores de referencia hasta el
doble del de los adultos, debido a su inmadurez hepática, estos valores se
REACTIVOS normalizan aproximadamente a los tres meses.
R1 TRIS pH 7,8 100 mmol/L Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
Tampón L-Alanina 500 mmol/L establezca sus propios valores de referencia.
NADH 0,18 mmol/L
R2 CARACTERISTICAS DEL METODO
Lactato deshidrogenasa (LDH) 1200 U/L
Substrato Rango de medida: Desde el limite de detección 1,20 U/L hasta el limite de
α-Cetoglutarato 15 mmol/L
linealidad 262 U/L.
PREPARACION Si la concentración de la muestra es superior al limite de linealidad, diluir
Reactivo de trabajo (RT): 1/10 con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 10.
Precisión:
Ref: 1001170 Disolver ( → ) una tableta de R2 Substrato en un vial de R1.
Ref: 1001171 Disolver ( → ) una tableta de R2 Substrato en 15 mL de R1. Intraserie (n= 20) Interserie (n= 20)
Media (U/L) 34,9 118,4 34,1 118,3
Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido.
SD 0,64 1,17 1,03 1,53
Estabilidad: 21 días a 2-8ºC o 72 horas a temperatura ambiente.
CV (%) 1,84 0,99 3,04 1,29
CONSERVACION Y ESTABILIDAD
Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,000557 ∆A / min.
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias
indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a
2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
No usar las tabletas si aparecen fragmentadas. comerciales (x).
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
Indicadores de deterioro de los reactivos: Coeficiente de regresión (r): 0,99.
- Presencia de partículas y turbidez. Ecuación de la recta de regresión: y= 0,98x + 0,38.
- Absorbancias del Blanco a 340 < 1,00. Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
MATERIAL ADICIONAL INTERFERENCIAS
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340 nm. Los anticoagulantes de uso corriente como la heparina, EDTA oxalato o
- Baño termostatable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC (± 0,1ºC) fluoruro no afectan los resultados. La hemólisis interfiere con la
1
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. determinación . Se han descrito varias drogas y otras substancias que
2,3
- Equipamiento habitual de laboratorio. interfieren en la determinación de la ALT .

MUESTRAS NOTAS
1
Suero o plasma . Estabilidad de la muestra: 7 días a 2-8ºC. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de este
reactivo en distintos analizadores.
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo: BIBLIOGRAFIA
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm 1. Murray R. Alanine aminotransferase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm paso de luz Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1088-1090.
Temperatura constante . . . . . . . . . . . . . .25ºC / 30ºC / 37ºC 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire. 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC 2001.
4. Burtis A. et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd edition. AACC 1999.
3. Pipetear en una cubeta: 5. Tietz N. W. et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. AACC 1995.
RT (mL) 1,0
PRESENTACION
Muestra (µL) 100
4. Mezclar, incubar 1 minuto. Ref: 1001170 20 x 2 mL
Cont.
5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el Ref: 1001171 10 x 15 mL
cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.

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