1 IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLÉCULAS ORGÁNICAS:
CARBOHIDRATOS Y LÍPIDOS
I. INTRODUCCIÓN.
Las cuatro clases principales de moléculas biológicas orgánicas son los carbohidratos, los lípidos, las
proteínas y los ácidos nucleicos, y están compuestas por bloques de armado denominados monómeros, a
excepción de los lípidos que son un grupo muy heterogéneo. Los monómeros de los carbohidratos son los
azúcares simples, de las proteínas son los aminoácidos, y de los ácidos nucleicos los nucleótidos. Algunos
lípidos están compuestos por una molécula pequeña, el glicerol, unida covalentemente a ácidos grasos.
Muchas de estas biomoléculas pueden alcanzar gran tamaño a escala molecular, por los que se las denomina
macromoléculas.
Los carbohidratos son compuestos muy abundantes en la naturaleza, están constituidos por unidades
básicas denominadas monosacáridos. El principal monosacárido es la glucosa, que es el combustible principal
para la mayoría de los organismos. Los oligosacáridos están formados por dos a diez unidades de
monosacáridos unidas covalentemente. Los polisacáridos contienen gran número de unidades de
monosacáridos unidos covalentemente, los cuales pueden alcanzar grandes pesos moleculares. Los
polisacáridos desempeñan dos funciones biológicas principales: almacenar energía metabólica (almidón,
glucógeno) y aportar elementos estructurales a la célula (celulosa). La glucosa actúa en el organismo como
combustible energético de uso inmediato, mientras los polisacáridos son de reserva que deben ser
catabolizados antes de su aprovechamiento como fuentes de energía.
Los lípidos son grupos heterogéneos de compuestos que poseen una consistencia grasosa o aceitosa,
siendo más o menos insolubles en agua y saludables en disolventes orgánicos (como por ejemplo: éter,
cloroformo, benceno, etc.). Entre los lípidos de importancia biológicas se encuentran los triacilgliceroles,
fosfolípidos, esteroides, etc. Estas moléculas son combustibles biológicos importantes, sirven de
componentes estructurales de las membranas celulares y algunas son importantes. Los más abundantes en
los seres vivos son los triacilgliceroles (grasas neutras). Ellos producen más del doble de energía por gramo,
que los carbohidratos por lo que son una forma económica de almacenar reservas alimenticias
Es posible detectar por medio de pruebas bioquímicas colorimétricas, la presencia de estas moléculas,
ya sea en muestras obtenidas de tejidos animales o vegetales.
II. MATERIAL
Biológico y No biológico Laboratorio Reactivos y soluciones
1 Aceite 125mL * Pipetas de 2, 5 y 10 ml Soluc. de glucosa al 1%
1 Papa * Tubos de ensayos de 10 ml (10) Soluc. de sacarosa al 1%
Jugo de fruta * Vaso de precipitado de 500 ml (2) Suspens. de almidón al 1%
Orina de diabético * Mechero Reactivo de Fehling
1 caja de fósforo * Pinzas Solución de lugol
1 plumón indeleble * Gradilla Hidróxido de sodio al 10%
Con (*) material a traer por el estudiante el día del práctica.
III. INSTRUCCIONES.
Reconocimiento de carbohidratos
Para saber si una muestra contiene azúcares y de que tipo son se pueden utilizar diferentes métodos de
determinación.
Método Detecta Resultado
Reacción de Benedict Glúcidos Positivo: precipitado rojo ladrillo, Negativo: solución azul
Reacción de Fehling Glúcidos Positivo: precipitado rojo ladrillo, Negativo: solución azul
Reacción con Lugol Polisacáridos Positivo: solución violeta, Negativo: solución amarilla
a. Test para la detección de azúcares simples (monosacáridos)
Una de las propiedades más destacadas de los monosacáridos en general (glucosa, fructosa, etc.) y de
algunos disacáridos (sacarosa, lactosa, etc.) es el poder reductor que les confiere el grupo funcional
aldehído o cetona de sus moléculas. Esta propiedad de los azúcares se pone de manifiesto frente a
sales de cobre II (Cu++). El reactivo de Fehling es utilizado para detectar la presencia de azúcares con
capacidad reductora, tiene un color azul intenso. El resultado positivo de la presencia de un azúcar
reductor es la formación de un precipitado rojo ladrillo de óxido de cobre (Cu 2O). La reacción que
ocurre es de tipo óxido-reducción, en la cual el grupo funcional aldehído o cetona del azúcar reductor
se oxida a ácido y el Cu++ se reduce a Cu+.
El color de la mezcla sirve como guía para determinar la cantidad de azúcar presente en la muestra.
Reporta la concentración de azúcar según lo siguiente:
b. Test para la detección de polisacárido-almidón
El almidón es un polisacárido de reserva característico de los vegetales. En las células vegetales el
almidón se encuentra como una mezcla de amilopectina (80-90 %) y amilosa (10-20%). Esta última se
colorea de azul violeta en presencia de una solución de iodo llamado reactivo de lugol, debido a una
reacción física (no química) de adsorción. La molécula de iodo (I 2), se introduce en la estructura
helicoidal de la molécula de almidón dando como resultado el color violáceo.
En el cuadro siguiente se describen las actividades a desarrollar para la determinación en muestras
biológicas de hidratos de carbono.
Rx. con Fehling Rx. con Lugol
Reactivos Tubo 1 2 3 4 5 6 7 8
Sol. de glucosa (ml) 7 - - - - - -
Sol. de sacarosa (ml) - 7 - - - - - -
Sol. de almidón (ml) - - 7 - - 5 5 5
Jugo de fruta (ml) - - - 7 - -
Orina de diabético (ml) - - - - 7 - - -
Rx. de Fehling (ml) 3 3 3 3 3 - -
Sol. de Lugol (gotas) - - - 4 4 4
Alcohol etílico - - - - - - 5 -
Hidróxido de sodio (ml) - - - - - - 5
Calentar a ebullición x x x x x x - -
Qué ocurrió?, registre lo observado (+/-)
RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS
Los lípidos se definen como compuestos orgánicos insolubles en agua o ligeramente solubles, que se
encuentran en los sistemas biológicos. Los lípidos son hidrofóbicos (no polares) y/o anfipáticos.
a. Test para la detección de lípidos
El sudán III es un colorante soluble en grasa que permite identificar la presencia de lípidos. Pertenece
al grupo de colorantes indiferentes, que son aquellos que no tienen afinidad por estructuras ácidas o
básicas. El colorante (rojo) es insoluble en el agua y tiñe del mismo color aquellas sustancias que tienen
un poder de disolución superior al del líquido empleado para preparar la solución colorante.
Protocolo para la determinación de lípidos
Rx. Sudan III Solubilidad
Reactivos Tubo 1 2 3 4 5
Agua destilada 5 - 5 - -
Aceite (ml) - 5 5 5 5
Sudan III (gotas) 10 10 - - -
Cloroformo - - - 5 -
Benceno - - - - 5
Agitar los tubos y dejar en reposo durante 5’ x x x x x
RESULTADOS
DISCUSION
CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
