3.1.

1 Propiedades generales de la radiación electromagnética

Las propiedades de la radiación electromagnética se explican adecuadamente con

un modelo clásico de onda, sinuosidal, que utiliza parámetros como la longitud de
onda, la frecuencia, la velocidad y la amplitud. A diferencia de otros fenómenos
ondulatorios, como el sonido, la radiación electromagnética no necesita un medio
de apoyo para transmitirse y, por tanto, se propaga fácilmente a través del vacío.
El modelo ondulatorio falla al intentar explicar fenómenos asociados con la
absorción o la emisión de energía radiante. para comprender estos procesos, hay
que acudir a un modelo corpuscular en el que la radiación electromagnética se
contempla como un flujo de partículas discretas, o paquetes ondulatorios, de
energía denominados fotones, en lo que la energía de un fotón es proporcional a
la frecuencia de la radiación como partícula y como onda no es mutuamente
excluyente, sino complementario. De hecho, la dualidad onda-corpúsculo se aplica
al comportamiento de haces de electrones, protones y de otras partículas
elementales, y se racionaliza completamente por medio de la mecánica
ondulatoria.

¿Qué es la radiación electromagnética?

La radiación electromagnética es el producto de la variación periódica de los

campos eléctrico y magnético.

Un campo es una región del espacio en la que la materia está sometida a algún
tipo de fuerza.

En el caso de la radiación electromagnética, los campos son producidos por las

partículas cargadas en movimiento.

. Es una combinación de campos eléctricos y campos magnéticos oscilantes, que

se propagan a través del espacio transportando energía de un lugar a otro.

Propiedades
Difracción: Fenómeno producido cuando un sistema de ondas que atraviesa un
obstáculo por un orificio pequeño se propaga en todas direcciones detrás del
mismo

Reflexión: Fenómeno que se produce cuando un sistema de ondas que se

propaga en un medio homogéneo encuentra un obstáculo que lo hace retroceder
cambiando de dirección y sentido. No varía ni la frecuencia ni la velocidad de
propagación de la onda ya que se mueve por el mismo medio

Refracción: Cambio de dirección que experimentan las ondas cuando pasan de

un medio a otro por variar su velocidad de propagación. La frecuencia de la onda
no varía, pero la velocidad de propagación, y por tanto la longitud de onda son
distintas porque se trata de un nuevo medio.
3.1.2 Propiedades ondulatorias de la radiación electromagnética
. Las ondas electromagnéticas no necesitan un medio material
para propagarse. Así, estas ondas pueden atravesar el espacio interplanetario e
interestelar y llegar a la Tierra desde el Sol y las estrellas.

Todas las radiaciones del espectro electromagnético presentan las propiedades

típicas del movimiento ondulatorio, como frecuencia, longitud de onda y amplitud.

Las ondas electromagnéticas son ondas transversales, pues los campos eléctricos
y magnéticos oscilan perpendicularmente en relación con la dirección de
propagación de la onda.

3.1.2.1 Parámetros ondulatorios

· La longitud de onda (L): es la distancia entre dos máximos consecutivos de la
onda.

Se mide en unidades de distancia (f): por ejemplo, metros (m) o cualquiera de sus
submúltiplos.

• La frecuencia: se define como el número de máximos que pasan por un punto en

un tiempo determinado.

Sus unidades son los hercios (Hz), de forma que 1 Hz equivale a un ciclo por
segundo.

• La amplitud (A) es la distancia que hay entre el punto de inflexión de la onda y el

máximo.
3.1.2.2 Espectro electromagnético
• El espectro electromagnético es el conjunto de la radiación electromagnética de
todas las longitudes de onda. Un ejemplo es la luz.

• La luz no es más que radiación electromagnética en un rango de frecuencias a

las que el ojo humano (y el de la mayoría de las especies dotadas de visión) es
sensible.

El hecho de que estemos dotados para la visión en el rango visible, nos permite
aprovechar el máximo de emisión del Sol que se produce en este rango.

Probablemente, si nuestro Sol tuviese su máximo en el infrarrojo, nuestros ojos

estarían dotados para ese tipo de visión.

Pero el espectro electromagnético no tiene una frecuencia máxima o mínima, sino

que se extiende indefinidamente, más allá de los estrechos límites de sensibilidad
del ojo humano.

En orden creciente de frecuencias (y por tanto, de energía) el espectro está

compuesto por las ondas de radio, el infrarrojo, la luz visible, el ultravioleta, los
rayos X y los rayos gamma.
• Los diagramas que se incluyen en esta sección muestran el rango del espectro
electromagnético en el que se produce la mayor parte de la emisión de fuentes
astronómicas.

Los límites entre distintas regiones del espectro son difusos y, en muchas
ocasiones, dependen de las técnicas empleadas para detectar o producir la
radiación.
3.1.2.3 Transmisión y dispersión de la radiación Transmisión de la radiación

• Experimentalmente se observa que la velocidad a la que se propaga la radiación

a través de una sustancia transparente es menor que su velocidad en el vacío y
depende de los tipos y concentraciones de átomos, iones o moléculas del medio.

De estas observaciones se deduce que la radiación debe interaccionar de alguna

manera con la materia.

El índice de refracción de un medio es una medida de su interacción con la

radiación y se define como n; = c/Vi

Donde la ni es el índice de refracción para una frecuencia determinada i, v; es la

velocidad de la radiación en el medio y ces la velocidad en el vacío.

La interacción implicada en la transmisión puede atribuirse a la polarización

periódica de las especies atómicas y moleculares que constituyen el medio.

Polarización de la radiación: consiste en un haz de ondas electromagnéticas en

el que las vibraciones se distribuyen por igual entre una serie infinita de planos
centrados a lo largo de la trayectoria del haz

Dispersión de la radiación

· Como ya se indicó antes, la transmisión de la radiación a través de la materia

puede representarse como una retención momentánea de la energía radiante por
átomos, iones o moléculas, seguida de una reemisión de la radiación en todas las
direcciones cuando las partículas vuelven a su estado inicial.

En el caso de partículas atómicas o moleculares que son pequeñas respecto a la

longitud de ondas de la radiación, la interferencia destructiva elimina la mayor
parte, aunque no toda, de la radiación reemitida.

Dispersión Rayleigh

· La dispersión por moléculas o agregados de moléculas de dimensiones bastante

menores que la longitud de onda de la radiación se denomina dispersión Rayleigh;
su intensidad es proporcional al inverso de la cuarta potencia de la longitud de
onda, las dimensiones de las partículas dispersantes y al cuadrado de la
polarizabilidad de las partículas.

Dispersión por moléculas grandes

Con partículas de dimensiones coloidales, la dispersión llega ser lo bastante

intensa para que el ojo humano la perciba (efecto Tyndall).

Dispersión Raman
La dispersión Raman se diferencia de la dispersión ordinaria en que parte de la
radiación dispersada sufre cambios cuantizados de frecuencia. Estos cambios son
el resultado de transiciones entre niveles de energía vibracionales de la molécula
que se producen como consecuencia del proceso de polarización.
Propiedades mecano-cuánticas de la radiación
La radiación electromagnética debe de verse de forma como un flujo de partículas
discretas fotones y cuantos. No debe interpretarse como un conjunto de ondas. Se
produce una transferencia permanente de energía al medio absorbente cuando
dicha radiación electromagnética se absorbe o se emite. Las ondas
electromagnéticas no necesitan un medio para propagarse, dichas ondas son
capaces de atravesar el espacio interplanetario e interestelar, así pueden llegar
desde el Sol hasta la Tierra. Las ondas electromagnéticas se desplazan a en el
vacío a la misma velocidad independientemente de su longitud y su frecuencia.
C= 294.742 km/s
Todas las radiaciones del espectro electromagnético tienen las propiedades del
movimiento ondulatorio como seria la difracción y la interferencia. Para poder
conocer y determinar la energía, la visibilidad y el poder de penetración resulta
menester relacionar la longitud de onda y la frecuencia de las ondas
electromagnéticas.
λ•v = c
Donde:
λ=Longitud de onda.

v=Frecuencia de onda.

Estados de energía de las especies químicas

Max Planck en 1990 planteó la teoría cuántica,explicando las propiedades de
radiación emitida por cuerpos calientes, posteriormente se amplió tal teoría
hablando ahora también de absorción y emisión, donde tiene dos postulados de
suma importancia:
1. Los átomos, iones y moléculas sólo pueden existir en estados discretos,
caracterizados por cantidades definidas de energía. Cuando una especie
cambia su estado, absorbe o emite energía exactamente igual a la
diferencia de energía entre los estados.
2. Cuando los átomos, iones y moléculas absorben y emiten radiación al
realizar la transición de un estado de energía a otro, la frecuencia o la
longitud de onda de la radiación se relacionan entre los estados por la
ecuación.
E1-E0=hv=hc/λ
E1=Energía del estado superior.
E0=Energía del estado inferior.
c=Velocidad de la luz.
h=Constante de Planck.
Cuando las moléculas o iones se encuentran en estado elemental, la energía
proviene del movimiento de electrones alrededor del núcleo cargado
positivamente. Los estados de energía se denominan entonces estados
electrónicos. Las moléculas también tienen cuantificado el estados vibracionales,
asociados a la energía de las vibraciones interatómicas y los estados rotacionales,
provienen de la rotación de las moléculas alrededor de su centro de gravedad.
Hay dos estados de energía, uno cuando es más alto (estados excitados) y otro
cuando es más bajo (estado fundamental).

Absorción y emisión de la radiación:

Absorción: Cuando la radiación atraviesa una capa de un sólido, un líquido o un gas,

ciertas frecuencias pueden eliminarse selectivamente por absorción, proceso en el que la
energía electromagnética se transfiere a los átomos, iones o moléculas que componen la
muestra.
De acuerdo con la teoría cuántica, los átomos, moléculas o iones solo tienen un número
limitado de niveles de energía discretos; de modo que para que se produzca la absorción
de la radiación, la energía de los fotones excitadores debe coincidir exactamente con la
diferencia de energía entre el estado fundamental y uno de los estados excitados de las
especies absorbentes.
  Absorción atómica: El paso de absorción policromática ultravioleta o visible
a través de un medio constituido por partículas monoatómicas, como
mercurio o sodio gaseoso, produce la absorción de solo unas pocas
frecuencias bien definidas.
 Absorción molecular: Los espectros de absorción de las moléculas
poliatómicas, especialmente en estado condensado, son consideradamente
más complejos que los espectros atómicos, ya que el número de estados
de energía de las moléculas es generalmente enorme si se compara con el
de los átomos aislados.
 Absorción inducida por un campo magnético: Cuando los electrones o los
núcleos de ciertos elementos se someten a un intenso campo magnético,
se pueden observar niveles adicionales de energía cuantizada como
consecuencia de las propiedades magnéticas de estas partículas
elementales.

Emisión: La radiación se origina cuando las partículas excitadas se relajan a

niveles de menor energía cediendo su exceso de energía en forma de fotones. La
radiación emitida por una fuente excitada se caracteriza adecuadamente por
medio de un espectro de emisión, que generalmente toma la forma de una
representación gráfica de la potencia relativa de la radiación emitida en función de
la longitud de la onda o de la frecuencia. Los tres tipos de de espectros son: de
líneas, de bandas y continuo.

Aplicaciones:
En muchos aspectos, la tecnología moderna opera a una escala en la que los
efectos cuánticos son significativos.
Las aplicaciones más importantes de la teoría cuántica incluye en la química
cuántica, la computación cuántica, los imanes superconductores, los diodos
emisores de luz, el amplificador óptico y el láser, el transistor y semiconductores
como el microprocesador, imágenes médicas y de investigación como la
resonancia magnética y el microscopio electrónico. Ejemplos:

Electricidad: En España, más del 20% de la electricidad consumida anualmente

se produce en las centrales nucleares.

Medicina: Se utilizan para las técnicas de diagnóstico y tratamiento de la medicina

nuclear para así poder ser más fiables y precisas: radiofármacos, gammagrafía,
radioterapia, esterilización…

Hidrología: Los isótopos se utilizan para seguir los movimientos del ciclo del agua
e investigar las fuentes subterráneas y su posible contaminación.

Agricultura y alimentación: Para el control de plagas de insectos, para la mejora

de las variedades de cultivo, conservación de alimentos.
Mineras: A través de sondas nucleares se puede determinar la composición de
las capas de la corteza terrestre.

Industria: Los isótopos y radiaciones se usan para el desarrollo y mejora de los

procesos industriales, el control de calidad y la automatización.

Arte: Las técnicas nucleares permiten comprobar la autenticidad de las obras de

arte, así como llevar a cabo su restauración.

Medio ambiente: Se utiliza en las técnicas como el análisis por activación

neutrónica que permiten la detección y el análisis de diversos contaminantes.

Exploración espacial: Las pilas nucleares se utilizan para alimentar la

instrumentación de satélites y de sondas espaciales.

Cosmología: El estudio de la radiactividad de los meteoritos permite confirmar la

antigüedad del universo.
Espectrometría de absorción en el ultravioleta-visible
La espectroscopia UV-Vis está basada en el proceso de absorción de la radiación
ultravioleta-visible (radiación con longitud de onda comprendida entre los 160 y
780 nm) por una molécula. La absorción de esta radiación causa la promoción de
un electrón a un estado excitado. Los electrones que se excitan al absorber
radiación de esta frecuencia son los electrones de enlace de las moléculas, por lo
que los picos de absorción se pueden correlacionar con los distintos tipos de
enlace presentes en el compuesto.

Debido a ello, la espectroscopia UV-Vis se utiliza para la identificación de los

grupos funcionales presentes en una molécula.
Está basada en la absorción de la radiación a longitudes de onda entre 800 y
2700nm. En esta zona del espectro electromagnético el proceso de absorción es
debido a presencia de sobretonos y bandas de combinación originados por
transiciones vibracionales intensas que se producen a longitudes de onda
mayores.

ESPECTOFOTÓMETRO

Es el equipo que utilizamos para medir la absorción o transmisión de luz por parte
de una muestra. Consta de los siguientes partes:
-Fuente de luz: suele ser una lámpara que emite una luz (por incandescencia de
un filamento) policromática, es decir que contiene distintas longitudes de onda con
distintas intensidades, I0.
-Sistema óptico: a través de filtros, lentes y redes de difracción se focaliza el haz
de luz y se selecciona una longitud de onda fija.
-Compartimiento muestra: es donde se coloca la muestra, con un espesor
conocido, normalmente disuelta y en una cubeta de 1cm de paso óptico, sobre la
que se hace incidir el haz de luz monocromática
-Sistema óptico: recibe la luz transmitida por la muestra, la focaliza y selecciona
por longitudes de onda
-Detector: recibe la señal de la intensidad de la luz transmitida a cada longitud de
onda y la transforma en señal eléctrica que un ordenador pueda procesar

MEDIDA DE LA TRANSMITANCIA Y ABSORBANCIA

Instrumento óptico en medidas de absorbancia, muestra los componentes básicos
de un espectofotometro de absorción.

DICHOS COMPONENTES BASICOS SON:

-La fuente de luz.
-sistema monocromador.
-El monocromador está constituido por lentes, espejos, redes de difracción,
prismas de refracción, rendijas.
-Un compartimento para colocar la muestra en celdas o cubetas adecuadas,
dependiendo de la región del espectro utilizada.
TRANSMITANCIA Y ABSORBANCIA
Disponemos de una fuente emisora de radiación electromagnética (lámpara), unos
sistemas de enfoque (rendijas) para hacer que la radiación incida
perpendicularmente a la muestra, un dispositivo que permita seleccionar la
longitud de onda que incide sobre la muestra (red de difracción) y un sistema
electrónico de medida de intensidad de luz.
DOS MEDIDAS DE LA INTENSIDAD DE LA LUZ
1) La primera medida la muestra será una disolución con la misma matriz que el
analito que deseemos determinar pero en ausencia de éste (disolución blanco). La
intensidad de radiación (luz) que llega al lector será
2) La segunda medida se hará en presencia del analito (cromóforo) que
deseemos estudiar. En este caso la intensidad de luz que llega al lector será I.
Como trabajamos con analitos que absorben radiación a la longitud de onda que
selecciona la red de difracción, lógicamente.
La expresión matemática de ambos parámetros es:

Ley de Beer
. Sistemas electrónicos Sistemas de registro de señal o almacenamiento de dato
Ley de beer La ley de BOUGUER-LAMBERT-BEER también se conoce como ley
de Beer-Lambert-Bouguer y fue descubierta de formas diferentes e independientes
por el matemático y astrónomo francés Pierre Bouguer en 1729, Luego por el
filósofo y matemático alemán Johann Heinrich Lambert en 1760 y por último el
físico y matemático también alemán, August Beer en el año 1852.
Se puede decir que esta ley se trata de un medio o método matemático, el cual es
utilizado para expresar de que modo la materia absorbe la luz. En óptica la ley de
Beer afirma que la totalidad de luz que emana de una muestra puede disminuir
debido a tres fenómenos de la física, que serían los siguientes: Pierre Bouguer
Johann Heinrich Lambert August Beer
1. El número de materiales de absorción en su trayectoria, lo cual se denomina
concentración.
2. Las distancias que la luz debe atravesar a través de las muestra. Denominamos
a este fenómeno, distancia del trayecto óptico.
3. Las probabilidades que hay de que el fotón de esa amplitud particular de onda
pueda absorberse por el material. Esto es la absorbencia o también coeficiente de
extinción.
Esta relación puede ser expresada de la siguiente manera:
A= -Ɛ*c*d
Donde:
A = absorbencia
Ɛ = coeficiente molar de extinción
d = recorrido en cm
c = concentración molar
A medida que la luz atraviesa un medio que la absorbe, la cantidad de luz
absorbida en cualquier volumen corresponde a la intensidad de luz que incide,
luego se multiplica por el coeficiente de la absorción. Frecuentemente la
intensidad de un haz de luz incidente declina significativamente a medida que
pasa a través del medio absorbente. Cuando esta relación se expresa como Ley
de Beer-Lambert-Bouguer, tenemos que:
T = 10^ -Ɛ*c*d o T= 10^ -A
Donde:
T = Transmitancia
Ɛ = Coeficiente molar de extinción
c = Concentración molar del absorbente
d = Recorrido en cm
La transmitancia se puede expresar como la intensidad de la radiación incidente,
Io. Esto puede dividir a la luz que emerge de la muestra, I. Se refiere a la relación
I/Io como transmitancia o como T.
La transmitancia se puede trazar con relación a la concentración, pero esta
relación no sería Lineal.
Aunque el logaritmo negativo en base 10 de la transmitancia sí es lineal con la
concentración.
De esta forma, la absorción es medida como:
A=-log10(I/Io) o A=-log10(T)
Donde:
T = Transmitancia
Ɛ= Coeficiente molar de extinción
c = Concentración molar del absorbente
d = Recorrido en cm
Esta ley es también aplicada para representar la disminución de la radiación solar
al pasar por la atmósfera. En este caso hay una propagación de la radiación
además de la absorción. La ley de BOUGUER-LAMBERT-BEER para la atmósfera
se suele expresar de la siguiente forma.
I n = Io exp^-m(Ka + k g + kNO3 + kw + KO3 + Kr )
Cada kx corresponde a un coeficiente de extinción en el cual el subíndice se
encarga de identificar la fuente de absorción:
a = hace referencia a aerosoles densos (que absorben y dispersan)
g = son gases uniformemente mezclados (principalmente dióxido de carbono
(CO2) y oxígeno molecular (O2) que sólo absorbe)
NO3 = es dióxido de nitrógeno, debido principalmente a la contaminación (sólo
absorbe) w = es la absorción producida por el vapor de agua
O3 = es ozono (sólo absorción)
r = es la dispersión de Rayleigh para el oxígeno molecular (O2) y nitrógeno (N2)
(responsable del color azul del cielo).
m = es la masa del aire
Absorvatividad
Se denomina absortividad a la medida de la cantidad de luz absorbida por una
disolución, definida como la unidad de absorbancia por unidad de concentración
por unidad de longitud de la trayectoria de luz.
De acuerdo con la Ley de Beer-Lambert, la absortividad es proporcional a la
concentración del soluto absorbente.
Antiguamente recibía los nombres de índice de absorbencia, constante de
absorción, coeficiente de absorción y coeficiente de extinción.
Se conoce como absortividad molar (E) a la absortividad definida en términos de
concentraciones expresadas en mol por litro. Antes conocida como coeficiente
molar de extinción. La absortividad específica (a) es la absortividad definida en
términos de concentraciones expresadas en gramos por litro. Antes conocida
como coeficiente másico de extinción.
Absorvatividad molar
Una magnitud molar parcial asociada a una variable extensiva es la derivada
parcial de dicha variable extensiva con respecto a la variación del número de
moles de una de las sustancias del sistema manteniendo la presión, la
temperatura y el número de moles de las demás sustancias constantes. La
propiedad molar parcial se representa por. La expresión es la siguiente:
 Las magnitudes molares parciales se usan en mezclas para indicar la no
aditividad de las propiedades extensivas de las mismas, es decir, la propiedad de
la mezcla no es igual a la suma de la propiedad de los componentes puros por
separado. Por ejemplo, el volumen molar de una mezcla binaria no es la suma de
los volúmenes molares de los componentes puro.
La propiedad molar parcial de una sustancia pura es igual a la magnitud molar
Matemáticamente, las magnitudes molares parciales son funciones homogéneas
de grado cero, es decir, no dependen de la cantidad de sustancia, por tanto
variables intensivas.
Para el cálculo de la propiedad de una mezcla usamos la siguiente ecuación
general a partir de las magnitudes molares parciales.
Una propiedad molar parcial muy importante es la energía de Gibbs molar parcial
o potencial químico.
Especies absorbentes
La absorción de radiación ultravioleta y visible por una especie M, puede
considerarse como un proceso en dos etapas, la primera de las cuales
corresponde a la excitación según:
M+h.v→M*
donde M* representa la partícula atómica o molecular en su estado electrónico
excitado que se produce como resultado de la absorción del fotón h v. Este estado
excitado tiene un breve tiempo de existencia (10-8 a 10-9 s) y desaparece a través
de algunos de los diferentes procesos de relajación (calor).
M*→M+calor
La absorción de la radiación ultravioleta o visible, se produce por lo general como
consecuencia de la excitación de los electrones de enlace; debido a esto, la
longitud de onda de los picos de absorción se puede correlacionar con los tipos de
enlace existentes en la especie que se estudia.
Es útil reconocer tres tipos de transiciones electrónicas y clasificar las especies
absorbentes sobre esta base. Dichas transiciones incluyen (1) electrones σ, π y n,
(2) electrones d y f, y (3) electrones de transferencia de carga.
Las especies absorbentes que contienen electrones π, σ y n incluyen iones y
moléculas orgánicas, así como algunos aniones inorgánicos.
3.2.4.1. Especies absorbentes con electrones π, σ y n
La espectrofotometría de absorción molecular ultravioleta visible, comúnmente
llamada espectrofotometría UV-VIS está basada en la medición de absorción de
radiación U.V. o visible por determinadas moléculas.
La radiación correspondiente a estas regiones del espectro electromagnético
provoca transiciones electrónicas a longitudes de ondas características de la
estructura molecular de un compuesto.
La explotación analítica es:
Identificación proximal de los grupos funcionales en una molécula.
Método bastante selectivo para el análisis cuantitativo de compuestos cuyos
enlaces producen absorción.
Conviene considerar tres tipos de transiciones electrónicas que permiten explicar
por qué algunas especies pueden absorber energía radiante. Estos tres tipos son:
Los electrones π, σ y η.
Los electrones d y f.
Los electrones de transferencia de carga.
Especies químicas absorbentes que contienen electrones π, σ y η
La absorción de radiación ultravioleta y visible (200–800 nm) se restringe a un
número limitado de grupos funcionales, llamados cromóforos, que contienen
electrones de valencia con energías de excitación relativamente bajos.
Cuando un fotón UV-Visible de energía adecuada incide en una especie
absorbente, un electrón es promovido desde su estado fundamental a un estado
electrónico excitado.
En absorción UV-Visible, pueden observarse las siguientes transiciones
electrónicas:
Transiciones σ à σ* ë
< 150 nm. Este tipo de transiciones se dan sobre todo en hidrocarburos que
únicamente poseen enlaces σ C-H o C-C. La energía requerida para que tenga
lugar esta transición es relativamente grande, perteneciente a la región espectral
denominada ultravioleta de vacío.
Transiciones n à σ*
λ entre 150-200 nm. Correspondientes a hidrocarburos que poseen átomos con
pares de electrones no compartidos (electrones de no enlace). La energía
necesaria para que se produzca esta transición sigue siendo alta (aunque menor
que en las σ à σ) perteneciendo éstas a la región espectral UV lejano.
Transiciones n à π* y π à π*
λ entre 200-700 nm. La mayoría de las aplicaciones de espectroscopia UV-Visible
están basadas en transiciones que ocurren en esta zona. Se requiere que las
especies participantes aporten un sistema de electrones π (grupos cromóforos:
compuestos con insaturaciones, sistemas aromáticos multicíclicos, etc.). Las
energías de excitación en las transiciones π ◊ π * son medianamente altas,
correspondiendo a la región UV lejano y próximo, mientras que las n à π * son
considerablemente menores, correspondiendo a la región visible del espectro. En
espectroscopia UV-Vis se irradia con luz de energía conocida suficiente como para
provocar transiciones electrónicas, es decir promover un electrón desde un orbital
de baja energía a uno vacante de alta energía.
3.2.4.2 Absorción en la que participan d y f
Absorción en la que participan los electrones d y f
Iones de los metales de transición.
Serie de los lantánidos y actínidos.
Los iones y complejos de los 18 elementos de las dos primeras series de
transición son coloreados en uno de sus estados de oxidación o en todos ellos.
Dependiendo las características colorimétricas del complejo;del tipo de ligando
(agente complejante) y del estado de oxidación
La mayoría de los iones de los metales de transición absorben en la región
ultravioleta o visible del espectro. Para la serie de lantánidos y actínidos, los
procesos de absorción son el resultado de transiciones electrónicas de los
electrones 4f y 5f; para los elementos de la primera y segunda serie de los metales
de transición, los electrones responsables son los 3d y 4d.
Efecto de la conjugación de los cromóforos
En la teoría de los orbitales moleculares, se considera que los electrones π están
deslocalizados por conjugación; los orbitales, orbitales, por lo tanto, incluyen
cuatro (o más) centros atómicos. El efecto de esta deslocalización es el descenso
del nivel de energía del orbital π*, dotándole de menos carácter antienlazante.
Como consecuencia, los máximos de absorción se desplazan hacia longitudes de
onda más largas.
La conjugación entre el doble enlace del oxígeno de los aldehídos, cetonas y
ácidos carboxílicos y un doble enlace olefínico da lugar a un comportamiento
similar. También se observan efectos análogos cuando dos grupos carbonilos o
carboxilatos están conjugados entre sí. Para los aldehídos y cetonas α, β
insaturados, el débil pico de absorción correspondiente a las transiciones n à π* se
desplaza 40nm o más hacia longitudes de onda más largas. Además, aparece un
pico de absorción intenso correspondiente a la transición π à π*. Este último pico
sólo aparece en la región ultravioleta de vacío si el grupo carbonilo no está
conjugado.
Las longitudes de onda de los picos de absorción para los sistemas conjugados
son sensibles a la naturaleza de los grupos unidos a los átomos que forman el
doble enlace. Se han desarrollado varias reglas empíricas para predecir el efecto
de dichos sustituyentes en los máximos de absorción que han demostrado su
utilidad para las determinaciones estructurales.
APLICACIÓN DE LAS MEDIDAS DE ABSORCIÓN AL ANÁLISIS CUALITATIVO
Las aplicaciones de la espectrofotometría ultravioleta y visible en el análisis
cualitativo están en cierta medida limitadas, ya que el número de máximos y
mínimos de absorción es relativamente pequeño. Por tanto, una identificación
inequívoca es a menudo imposible.
MODALIDAD DE REGISTRO GRAFICO DE DATOS ESPECTRALES
En espectroscopia molecular cualitativa existen diferentes tipos de registros
espectrales. Lo más habitual es representar en ordenadas el porcentaje de
transmitancia, absorbancia, el logaritmo de la absorbancia o la absortividad molar.
En abscisas es habitual representar la longitud de onda o el número de onda,
aunque algunas ocasiones se emplea la frecuencia. La figura 1 muestra el efecto
de la concentración de analito en 3 de los modelos de los registros más comunes
puntos al comparar los registros (a) y (b) se observa que en el registro de
absorbancia las diferencias entre las alturas de los picos en función de la
concentración son mayores que en el registro de transmitancia. Por otra parte, las
diferencias entre las curvas son mayores cuando las transmitancias son elevadas.
Un registro en el que en ordenadas se representa el logaritmo de absorbancia
conduce a una pérdida de detalle espectral, pero es conveniente para comparar
espectros de disoluciones de distintas concentraciones, ya que las curvas se
desplazan la misma magnitud a lo largo del eje vertical para múltiplos iguales de
concentración.
DISOLVENTE
Al elegir un disolvente no sólo se debe tener en cuenta su transparencia sino
también sus posibles efectos sobre el mismo sistema absorbente. Con bastante
frecuencia, los disolventes polares como el agua, alcoholes, ésteres y cetonas
tienden a borrar la estructura fina del espectro que resulta de los cambios
vibracional es; es más probable obtener espectros parecidos a los originados en
fase gaseosa. En la figura 2 se puede ver cuando se utilizan disolventes no
polares FIGURA 1 como los hidrocarburos. Además, las posiciones de los
máximos absorción se ven afectadas por la naturaleza del disolvente. Es
imprescindible utilizar el mismo disolvente conoce comparan aspectos de
absorción con fines de identificación. En la tabla 1 se enumeran algunos
disolventes como unas y la longitud de onda aproximada por debajo de la cual no
pueden usarse debido a la absorción. Este mínimo depende en gran medida de la
pureza del disolvente. Entre los disolventes habituales para espectrofotometría
ultravioleta se incluyen agua, etanol del 95 por 100, ciclohexano y 1,4- dioxano.
para la región visible, cualquier disolvente incoloro es útil.
DETECCION DE GRUPOS FUNCIONALES
Aunque esta técnica no puede proporcionar la identificación inequívoca de un
compuesto orgánico, el espectro de absorción en las regiones del ultravioleta y
visible es, sin embargo, útil para detectar la presencia de ciertos grupos
funcionales que actúan como cromóforos. por ejemplo, una banda de absorción
débil en la región de 280 a 290 nm, que se desplaza hacia longitudes de onda más
cortas cuando aumenta la polaridad del disolvente, indica firmemente la presencia
de un grupo carbonilo. Una banda de absorción débil próxima a 260 nm con
indicación de estructura fina vibracional constituye una evidencia de la existencia
de un anillo aromático. Para confirmar la presencia de una Amina aromática o de
una estructura fenólica se pueden comparar los efectos del pH en los espectros de
las disoluciones de las muestras con los que se indica en la tabla 2 para el fenol y
la alanina. TABLA 1 TABLA 2 FIGURA 2
INSTRUMENTACIÓN DE ESPECTRÓMETRO DE UV-VISIBLE.
La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite determinar
la concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas
absorben las radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz
absorbida depende de forma lineal de la concentración. Para hacer este tipo de
medidas se emplea un espectrofotómetro, en el que se puede seleccionar la
longitud de onda de la luz que pasa por una solución y medir la cantidad de luz
absorbida por la misma. Los métodos espectroscópicos ópticos de análisis se
fundamentan en seis fenómenos:
1. Absorción
2. Fluorescencia
3. Fosforescencia
4. Dispersión
5. Emisión
6. Quimiluminiscencia
Las propiedades de estos componentes son las mismas independientemente de si
se aplican a la región ultravioleta, visible o infrarroja del espectro.
¿Cómo es un equipo de UV-Visible?
Los aparatos diseñados para la medición de absorción o emisión de radiación
electromagnética en función de la longitud de onda se denominan en: Fotómetro,
Espectrómetro & Espectrofotómetro.

 Fotómetro: Es un equipo que proporciona una relación o alguna función de

la relación de los poderes de radiación de 2 haces electromagnéticos.
Utilizan como monocromador, simplemente filtros.
 Espectrómetro: Es un instrumento con un sistema monocromador con el
que se llevan a cabo mediciones de un intervalo espectral, la cantidad
detectada está en función del poder de radiación. Utilizan rejillas difractoras
o prismas para dispersar la luz.
 Espectrofotómetro: Es un equipo con accesorios que proporcionan la
relación o una función de la relación, del poder de radiación, de 2 haces
electromagnéticos con respecto a la longitud de onda espectral. Utilizan
rejillas difractoras o prismas dispersar la luz.
El fotómetro: es un instrumento para medir la luz existente en una escena y que se
utiliza para calcular la exposición correcta de ésta. Todas las cámaras disponen de
un fotómetro interno que mide la luz reflejada en la escena. Este fotómetro permite
a la cámara calcular una exposición correcta. Sin embargo, el fotómetro de la
cámara no es el más exacto, y para cierto tipo de fotografía se utilizan fotómetros
de mano o fotómetros externos. Con ellos podemos medir la luz de forma más
exacta. Podemos dividir los fotómetros en dos en función del método que utiliza
para medir la luz:

 De luz reflejada: Mide la luz que se refleja en las superficies. Haciendo un

retrato con este método apuntaríamos con el fotómetro hacia la cara del
sujeto y mediríamos la luz reflejada en ésta.
 De luz incidente: Mide la luz que incide sobre el fotómetro. Haciendo un
retrato con este método pondríamos el fotómetro al lado de la cara del
 sujeto y apuntaríamos hacia el lado opuesto para medir la luz que incide en
su cara.
En general, el fotómetro mide la intensidad de la luz:

➢ Intensidad de la luz dispersa.

➢ Absorbancia.

➢ Fluorescencia.

La disposición de los elementos, pueden variar dependiendo del diseño del

instrumento, por lo general se maneja de 5 puntos importantes:
1. Fuente de energía radiante.
2. Monocromador.
3. Celda para la muestra.
4. Detector.
5. Registrador.
¿Para qué sirve un espectrómetro?
Sirve para medir la descomposición de la luz a través de diversas longitudes de la
onda, ésta se forma a partir del fenómeno de refracción que se desarrolla en el
prisma o desde la difracción de la luz.
¿Cómo funciona?
Cuando la muestra se encuentra en el aparato se coloca lo suficientemente
caliente y emite una luz visible en uno o varios puntos del espectro
electromagnético. Luego se dividen las olas de luz que entra en los colores que
muestran sus componentes, para luego emitir cual es el material que crea la luz.
¿Cómo se conforma un espectrofotómetro de luz UV-Visible?
Básicamente se componen de 7 partes.

➢ Fuente de luz o lámpara.

➢ Lentes.

➢ Monocromador.

➢ Celdas donde se colocan las muestras.

➢ Detector.

➢ Amplificador.
 ➢ Registrador.

Las lámparas o fuentes luminosas son usualmente en:

➢ UV: Deuterio, Mercurio, Xenón.

➢ Visible: Tungsteno.

Otra diferencia significativa en los equipos es que los espectrómetros de luz UV-
Visible suelen ser de dos tipos:
1. De un haz.
2. De doble haz.
A continuación, se presenta un diagrama para su mejor comprensión de un
espectrómetro de un haz o haz simple & posteriormente un diagrama esquemático
de un espectrómetro de doble haz.
Un haz

Doble haz:
Componentes de los instrumentos
Los instrumentos están compuestos por algunos o todos los siguientes
componentes:
Fuentes/ Fuente estable de energía radiante
Selectores de longitud de onda
Recipientes para la muestra
Detectores de radiación
Procesadores de señal
Dispositivos de lectura
Fibras ópticas
Fuentes: Cuando se trata de medidas de absorción molecular es necesario
disponer de una fuente continua cuya potencia no cambie bruscamente en un
intervalo considerable de longitudes de onda. En este caso las fuentes láser no
son utilizadas en instrumentos comerciales ya que son costosas. Las fuentes de
radiación utilizadas en espectrometría óptica deben ser capaces de generar un
haz de radiación con potencia suficiente para que se detecte y se mida con
facilidad para poderla usar en estudios espectroscópicos.Existen varias
posibilidades:
Fuentes continuas: usadas en espectroscopía de absorción y de
fluorescencia. La fuente más común para la región ultravioleta es la lámpara
de deuterio. Para la región visible del espectro se usa la lámpara de
filamento de wolframio.
 Fuentes de líneas: emiten un número limitado de líneas o bandas de
radiación, cada una de las cuales abarca un intervalo limitado de longitudes
de onda. Se usan en espectroscopía de absorción atómica, espectroscopía
de fluorescencia atómica. Otras son lámparas de vapor de mercurio, sodio,
lámparas de cátodo hueco.
Láseres: útiles debido a su elevada intensidad, su estrecha anchura de
banda y a la naturaleza coherente de su señal de salida. Consiguen la
amplificación de la luz mediante la emisión estimulada de radiación. Para lo
cual, es necesario que el número de fotones producidos supere el número
de los fotones que se pierden por absorción. Usados en la región
ultravioleta, visible e infrarroja del espectro.
Lámparas de deuterio e hidrógeno: La excitación eléctrica del deuterio o
hidrógeno a baja presión (aproximadamente 0.2 a 0.5torr) produce un
espectro continuo en la región ultravioleta. El mecanismo por el cual se
produce el espectro continuo requiere la formación inicial de una especie
molecular excitada seguida de la disociación de la molécula excitada para
dar dos especies atómicas más un fotón ultravioleta. Las reacciones para el
deuterio son:
D2 + Ee → D2* → D' + D'' + hν
donde Ee es la energía eléctrica absorbida por la molécula y D2* es la molécula
de deuterio excitada. La energía del proceso global puede representarse mediante
la ecuación:
Ee = ED2* = ED' + ED'' + hν
Aquí, ED2* es la energía cuantizada fija de D2* mientras ED' y ED'' son las
energías cinéticas de los dos átomos de deuterio. La suma de las dos últimas
puede variar continuamente desde cero hasta ED2*. Por ello, la energía y la
frecuencia del fotón también puede variar continuamente. Es decir, cuando las
energías cinéticas son pequeñas hν será grande, y viceversa. La consecuencia es
un verdadero espectro continuo desde aproximadamente 160nm hasta el
comienzo de la región visible. Las lámparas más modernas de este tipo contienen
deuterio y son de bajo voltaje, en ellas se forma un arco entre un filamento caliente
recubierto de óxido y un electrodo metálico. El filamento caliente suministra
electrones para mantener una corriente continua cuando se aplica un potencial de
aprox. 40V CD; para intensidades contantes es necesario una fuente de
alimentación estabilizada. Una característica importante de las lámparas de
deuterio es que produce una esfera de radiación intensa algo más grande que la
del hidrógeno entre los dos electrodos, lo cual intensifica el brillo de tres a cinco
veces, esto justifica el extenso uso de las lámparas de deuterio. Ambas lámparas
producen un espectro continuo útil para la región comprendida entre 160 y 360nm.
A longitudes de onda más largas (>380nm), las lámparas producen líneas de
emisión que se superponen sobre el espectro continuo. Estas líneas pueden ser
un problema para algunas aplicaciones (mediciones en el visible) pero resultan
útiles para calibrar los instrumentos.
Lámparas de filamento de wolframio o de filamento incandescente: La
fuente más común de radiación visible y del infrarrojo (350 a 2,500 nm) es
la lámpara de filamento de wolframio. La distribución de energía de esta
fuente se aproxima a la del cuerpo negro y, por ello, depende de la
temperatura. En esas lámparas se calienta un filamento del alambre hasta
la incandescencia por medio de corriente eléctrica. El filamento se
encuentra en un bulbo de vidrio herméticamente sellado al vacío o con gas
inerte. Los filamentos generalmente se enrollan para aumentar su
emisividad, eficacia y luminancia media. Las lámparas incandescentes son
unidades robustas, de bajo costo y lo suficientemente brillantes para casi
todos los trabajos de absorción en las regiones visible y del ultravioleta
cercano. Las lámparas de wolframio y halógeno representan una clase
especial de lámparas incandescentes que contienen todo añadido a los
gases normales de relleno. En la envolvente se utiliza el cuarzo para tolerar
las altas temperaturas de operación de la lámpara (2850 K). El yodo se
combina químicamente en las paredes del bulbo con el wolframio sublimado
desde el filamento. El diyoduro de wolframio (WI2) resultante regresa al
filamento caliente, en donde se descompone redepositando wolframio
elemental. El ciclo es continuamente repetido manteniendo limpio el bulbo.
Estas lámparas conservan más del 90% de su luz inicial a lo largo de su
vida útil. La lámpara de wolframio emite mucha de su energía en el
infrarrojo cercano, con un máximo en 1000nm, y cae rápidamente en la
región ultravioleta a 1/100 de ese valor a 300nm. Sólo 15% de la energía
radiante cae en la región visible. A menudo se inserta un filtro endotérmico
o un espejo dicroico frío entre la lámpara y el portamuestra para eliminar la
radiación infrarroja sin disminuir notablemente la energía radiante de menor
longitud de onda. las lámparas incandescentes son fuentes muy
importantes para aplicaciones espectrométricas debido a su excelente
estabilidad, más que debido a su radiancia espectral.
Lamparas de arco de xenón: Estas lámparas producen una radiación
intensa como consecuencia del paso de corriente a través de una atmósfera
de xenón. El espectro es continuo en un intervalo comprendido entre
aproximadamente 200 y 1000nm, con el máximo de intensidad a
aproximadamente 500nm. En algunos instrumentos, la lámpara funciona de
forma intermitente mediante descargas regulares que proceden de un
condensador; se obtienen altas intensidades.
Selectores de longitud de onda: Para la mayoría de los análisis
espectroscópicos, se necesita una radiación constituida por un grupo
limitado, estrecho y continuo de longitudes de onda denominado banda. Un
ancho debanda estrecho aumenta la sensibilidad de las medidas de
absorbancia y con frecuencia es un requisito para obtener una relación
lineal entre la señal óptica y la concentración. Idealmente, la señal de salida
 de un selector de longitud de onda correspondería a una radiación de una
única longitud o frecuencia. No existe selector alguno que se aproxime al
caso ideal; en su lugar, lo que se obtiene es una banda. En este caso, se
representa el tanto por ciento de radiación incidente de una determinada
longitud de onda que es transmitida por el selector en función de la longitud
de onda. El ancho de la banda efectiva es una medida inversa de la calidad
del dispositivo, siendo la resolución mejor cuanto más estrecha es el ancho
de banda. Existen dos clases de selectores de longitud de onda, los filtros y
los monocromadores.
Existen varios tipos de selectores de longitud de onda:
Los filtros de absorción: se utilizan en la región visible y se basan en
la absorción selectiva de ciertas longitudes de onda. Consisten en un
vidrio coloreado o una suspensión de un colorante en gelatina que se
coloca entre dos placas de vidrio.
Los filtros de banda: se caracterizan por su anchura de banda
(anchura a la mitad de la altura) que puede oscilar entre 30 y 250nm.
Los filtros de corte: tienen casi un 100% en una zona del espectro
visible, pero luego disminuye rápidamente hasta un valor de
transmitancia cero.
Los filtros de interferencia: consisten en un dieléctrico transparente
(fluoruro cálcico o magnésico) recubierto a ambos lados con dos
finas capas de plata semirreflectante.
Un monocromador: se caracteriza por producir un haz de radiación
de gran pureza espectral y permitir variar de forma continua y en un
amplio intervalo, la longitud de onda de la radiación. Los
componentes básicos son una rendija de entrada, que selecciona un
haz de luz policromática entrante, un elemento dispersante, prisma o
red, que dispersa la radiación en sus longitudes de onda individuales,
y una rendija de salida, que aísla la banda espectral deseada.
Recipientes para muestras:
A excepción de la espectroscopía de emisión, todos los estudios
espectroscópicos, requieren recipientes para muestras. Han de estar fabricados
con materiales transparentes a la radiación de la región espectral de interés.
Región ultravioleta: cuarzo o sílice fundida
Región visible: vidrios silicatados.
Región del infrarrojo: cloruro sódico cristalino.
Detectores de radiación:
Convierten la energía radiante en una señal eléctrica. Las características que
deben presentar son las siguientes:
Elevada sensibilidad.
Alta relación señal/ruido.
Respuesta constante en un intervalo considerable de longitud de onda.
Tiempo de respuesta corto.
Señal de salida igual a 0 en ausencia de iluminación.
La señal eléctrica producida por el transductor debería ser directamente
proporcional a la potencia radiante P, según la expresión S = K * P, donde
S es la respuesta eléctrica en términos de corriente o tensión, y K es la
sensibilidad de calibrado.
Hay dos tipos de detectores de radiación:
1. Respuesta a los fotones: tienen una superficie activa, capaz de absorber
la radiación. Son usados para medir las radiaciones ultravioletas, visible e
infarroja cercana. Si se usan para longitud de onda superiores a 3 µm han
de enfriarse a la temperatura del hielo seco o nitrógeno líquido para evitar
interferencias del ruido térmico de fondo. Células fotovoltaicas, fototubos,
tubos de fotomultiplicadores, detectores de fotoconductividad, fotodiodos de
silicio.
2. Responden a la potencia promedio de la radiación incidente: Usados
para la detección de radiación infrarroja. Termopares, bolómetros,
detectores piroeléctricos.
Procesadores de señal: Dispositivos de lectura. Un procesador es un
dispositivo electrónico que amplifica la señal eléctrica del detector. Puede
cambiar la señal de corriente continua a corriente alterna y viceversa.
Además, varía la fase de la señal y la filtra para eliminar los componentes
no deseados. Entre los posibles dispositivos de lectura, están medidor
d`Arsonval, medidor digital, escalas de potenciómetros, registradores, tubos
de rayos catódicos.
Fibras ópticas: Transmiten la radiación y las imágenes de un componente a
otro instrumento. Son hebras de vidrio o plástico capaces de transmitir la
radiación a distancia de varios centenares de metros o más. Los sensores
de fibra óptica constan de una fase reactiva inmovilizada en el extremo de
una fibra óptica. La interacción del analito con el reactivo produce una
variación en la absorbancia, reflectancia, fluorescencia luminiscencia, que
se transmite al receptor a través de la fibra óptica.
ESPECTROMETRIA DE LUMINISCENCIA MOLECULAR
Luminiscencia: Es una luz cuyo origen no radica exclusivamente en las altas
temperaturas. Se da en sustancias que pueden absorber energía, excitándose a
niveles mayores y emitirla bajo forma de radiación electromagnética.
En pocas palabras es la emisión de luz por un compuesto químico que ha sido
excitado por algún medio.
Hay tres tipos de luminiscencia
Fluorescencia, Fosforescencia y Quimioluminiscencia.
La quimioluminiscencia es el fenómeno por el que, en algunas reacciones
químicas, la energía liberada no se emite solo en forma de calor o energía
química, si no también en forma de luz. Por lo tanto y a diferencia de los dos tipos
anteriores no se necesita una fuente de luz, ya que esta se produce mediante una
reacción química, normalmente con oxidantes que emiten un fotón que se puede
medir.
Fluorescencia: Es un fenómeno de luminiscencia. La fluorescencia es un proceso
de emisión en el cual las moléculas son excitadas por la absorción de radiación
electromagnética instantáneamente.
Fosforescencia: Es un fenómeno de luminiscencia. La fosforescencia es un
proceso de emisión en el cual las moléculas son excitadas por la absorción de
radiación electromagnética y almacena la energía y la emite poco a poco durante
minutos u horas sin importar que la fuente de radiación excitadora inicial haya sido
apagada.
Una breve descripción del fenómeno de fluorescencia y fosforescencia ocurre así:
Hablando de una estructura molecular que es expuesta a la luz ultravioleta
(consecuentemente, dicha estructura también absorbe la luz ultravioleta). La
energía absorbida excita los electrones de las capas más externas de los átomos
que componen la estructura molecular, haciendo que pasen a orbitales de mayor
energía. Pero esta situación no es estable, y los átomos de la molécula tienden a
regresar a su estado original, es decir, aquellos electrones excitados se regresan a
los orbitales de menor energía. En este proceso, parte de la energía absorbida en
la irradiación se libera en forma de luz visible o infrarroja; de ahí, que podamos
verlos brillar.
Ejemplos del fenómeno de fluorescencia y fosforescencia:
Fluorescencia (elementos lantánidos) que permiten crear dispositivos emisores de
luz con una alta persistencia para señalética, como aquellas señales de tránsito
que observas de noche mientras conduces con las luces encendidas de tu
automóvil. Así mismo, los interruptores de luz que brillan en una habitación oscura
o los señalamientos de “EXIT” del cine o los antros, son ejemplos del fenómeno de
fosforescencia.
Algunos elementos que provocan la fluorescencia
ESTADOS EXCITADOS QUE PRODUCEN FLUORESCENCIA Y
FOSFORESCENCIA (SINGULETE Y TRIPLETE)
Estado singulete: Estado electrónico molecular en el cual todos los espines de los
electrones están apareados, por lo cual no tiene lugar un desdoblamiento del nivel
de energía cuando la molécula se expone a un campo magnético.

Estado triplete: Cuando uno de los electrones de una molécula es excitado a un

nivel de energía superior da lugar a un singulete excitado si el spin del electrón
esta apareado, de lo contrario están paralelos y estarán en el estado triplete. Este
estado es menos energético, la molécula es paramagnética. Una transición de
este tipo es menos probable. Los picos de absorción son menos intensos.
VELOCIDAD DE ABSORCION Y EMISION
En física, la absorción de la radiación electromagnética es el proceso por el cual
dicha radiación es captada por la materia. Cuando la absorción se produce dentro
del rango de la luz visible, recibe el nombre de absorción óptica. Esta radiación, al
ser absorbida, puede, bien ser reemitida o bien transformarse en otro tipo de
energía, como calor o energía eléctrica.
Las ecuaciones de maxwell predicen la velocidad de propagación en el vacío, se
representa c por la velocidad de la luz con un valor de 299.792.458
El término radiación se refiere a la emisión continua de energía desde la superficie
de cualquier cuerpo, esta energía se denomina radiante y es transportada por las
ondas electromagnéticas que viajan en el vacío a la velocidad de 3•108 m/s.
PROCESO DE DESACTIVACIÓN: FLUORESCENCIA Y FOSFORESCENCIA.
Una molécula excitada puede volver a su estado fundamental mediante una
combinación de varias etapas y mecanísticas.
El camino más propicio hacia el estado fundamental es aquel que minimiza el
tiempo de vida del estado excitado. Por ello, si la desactivación por fluorescencia
es más rápida que los procesos no radiantes, se observa tal emisión. Por otro
lado, si la desactivación no radiante tiene una constante de velocidad más
favorable, la fluorescencia desaparece o es menos intensa.
Conversión interna.
Esta describe los procesos intermoleculares por los cuales la molécula pasa a un
estado electrónico de más baja energía sin emisión de radiación.
La conversión interna parece ser particularmente eficaz cuando dos niveles de
energía electrónicos están lo suficientemente próximos como para que haya un
solapamiento de los niveles de energía vibracional.
La conversión interna a través de los niveles vibracionales solapados es
normalmente más probable que la perdida de energía por fluorescencia desde un
estado excitado más alto. Un ejemplo es la imagen.
La conversión interna puede también dar lugar al fenómeno de la predisociación.
En este caso, el electron se mueve desde un estado electrónico más alto hacia un
nivel vibracional superior de un estado electrónico más bajo en el que la energía
vibracional es lo suficientemente grande como para provocar la ruptura de un
enlace. En una molecula grande, hay una probabilidad apreciable de que existan
enlaces con fuerzas menores que la energía de excitación electrónica de los
cromóforos. La ruptura de estos enlaces puede ocurrir como consecuencia de la
absorción por un cromóforo, seguida de la conversión interna de la energía
electrónica a la energía vibracional, asoaciada con el enlace débil.
Conversión externa.
La desactivación de un estado electrónico excitado puede incluir la interacción y la
transferencia de energía entre las moléculas excitada y el disolvente y otros
solutos. Esos procesos llevan por nombre conversión externa o amortiguación
colisional.
La evidencia de la conversión externa incluye el marcado efecto que ejerce el
disolvente sobre la intensidad de fluorescencia, además, aquellas condiciones que
tienden a reducir el número de colisiones entre partículas (baja temperatura y
elevada viscosidad) tienden, generalmente, a aumentar la fluorescencia.
Las transiciones no radiantes al estado fundamental desde los estados excitados
singulete y tripletes más bajos incluyen, probablemente, conversiones externas al
igual que conversiones internas.
Cruce entre sistemas.
El cruce entre sistemas es un proceso en el cual se invierte el espín de un electrón
excitado y da como resultado un cambio en la multiplicidad de la molécula. Al igual
que en la conversión interna, la probabilidad de esta transición aumenta si los
niveles vibracionales de los dos estados se solapan.
El cruce entre sistemas es más común en moléculas que contiene átomos
pesados, como son el yodo o el bromo (efecto del átomo pesado). Los
acoplamientos espín/orbital se hacen grandes en presencia de tales átomos y de
ese modo se favorece un cambio de espín.
La presencia de las especies paramagnéticas en la disolución, como el oxígeno
molecular, esto también favorece el cruce entre sistemas y consecutivamente
disminuye la fluorescencia.
Fosforescencia.
La desactivación del estado electrónico excitado también puede incluir la
fosforescencia. Después delo cruce entre sistemas a un estado de triplete
excitado, la desactivación posterior puede tener lugar por conversión interna o
externa o por fosforescencia.
Las conversiones internas y externas compiten con tanto éxito con la
fosforescencia que este tipo de emisión se observa normalmente solo a bajas
temperaturas, en medios altamente viscosos o por moléculas que estas
absorbidas sobre superficies sólidas.
VARIABLES QUE AFECTAN A LA FLUORESCENCIA Y LA
FOSFORESCENCIA.
1 Rendimiento cuántico. Relación entre el número de moléculas que emiten
luminiscencia respecto al número de moléculas excitadas.
2. Rigidez estructural. La fluorescencia se ve favorecida en moléculas que
presenta estructuras rígidas. la influencia de la rigidez explica el aumento de la
florescencia en ciertos agentes que él antes orgánicos cuando están formando un
complejo con un ión metálico.
3. Temperatura. La fluorescencia disminuye en la mayoría de las moléculas
cuando aumenta la temperatura, ya que al aumentar la frecuencia de las
colisiones cuando la temperatura es elevada, aumenta la probabilidad de
desactivación por conversión externa.
4. Disolvente. La fluorescencia se reduce en presencia de disolventes que tienen
átomos pesados. Al disminuir la viscosidad del disolvente también aumenta la
probabilidad de la conversión externa y conduce a la disminución de fluorescencia.
5. pH. La fluorescencia de un compuesto aromático con sustituyentes ácidos o
básicos en el anillo depende normalmente del pH. Dicho efecto se ha utilizado
para la detección de puntos finales de valoración ácido/base.
6. Oxígeno disuelto. La presencia de oxigeno disuelto suele reducir la intensidad
de fluorescencia de una disolución.
7. Concentración. La intensidad de fluorescencia es proporcional a la
concentración para disoluciones diluidas. Hay dos factores responsables de la
desviación es negativas de la linealidad a elevadas concentraciones: La
autoamortiguación: es el resultado de colisiones entre moléculas excitadas. La
autobsorción: cuando la longitud de emisión se solapa con un pico de absorción.
Espectros De Emisión y Excitación Emisión
El espectro de emisión de un elemento químico o compuesto químico es el
espectro de frecuencias de radiación electromagnética emitida debido a átomo un
o molécula que realiza una transición de un estado de alta energía a un estado de
menor energía. La energía fotónica emitida es igual a la diferencia de energía
entre los dos estados. Hay muchas transiciones de electrones posibles para cada
átomo, y cada transición tiene una diferencia de energía específica.
Esta colección de diferentes transiciones, que conducen a diferentes longitudes de
onda radiadas, conforma un espectro de emisión. El espectro de emisión de cada
elemento es único. Por lo tanto, la espectroscopia se puede utilizar para identificar
los elementos en materia de composición desconocida. De manera similar, los
espectros de emisión de moléculas pueden usarse en el análisis químico de
sustancias.
Excitación Los espectros de excitación registran la intensidad de la emisión a una
frecuencia dada como función de la longitud de onda de la luz de excitación. La
excitación se realiza con luz de longitud de onda variable e intensidad fija. El
espectro de excitación se puede presentar representando el rendimiento cuántico
de emisión relativo a cada longitud de onda de excitación. Generalmente, la
mayoría de las moléculas fluorescentes tiene rendimientos cuánticos y espectros
de emisión independientes de la longitud de onda de excitación. En consecuencia,
el espectro de excitación de una molécula fluorescente se superpone a su
espectro de absorción.
La luminiscencia es la emisión de luz por una sustancia sin ser motivada por el
calor, por lo que es una forma de radiación en frío, es el proceso de emisión de luz
cuyo origen no radica exclusivamente en las altas temperaturas Puede ser
causada por reacciones químicas, energía eléctrica, movimientos subatómicos, o
el estrés en un cristal. Es un tipo de emisión que se presenta por debajo de la
radiación térmica (por debajo de una temperatura de 600°C), es decir, el material
no emite grandes cantidades de calor como en el fenómeno de emisión luminosa
por incandescencia (focos normales).
Dosimetría clínica
Se refiere a cuando un paciente es irradiado intencionalmente, con la consecuente
importancia que significa saber la dosis exacta que está recibiendo la persona y el
lugar de la exposición. La dosimetría retrospectiva se refiere a la dosis absorbida
por determinados materiales durante una radiación accidental, lo cual permitirá
estimar la dosis recibida por las personas durante la exposición a dicha radiación.
Dosimetría retrospectiva
Incluye la datación geológica y arqueológica. La edad podemos expresarla como
el cociente entre la dosis total recibida y la dosis que recibe la muestra cada año.
La dosis total se calcula a partir de la intensidad de la curva de TL,
estableciéndose para la muestra una relación entre la radiación ambiental
absorbida y la cantidad de luz emitida por medio de irradiación artificial con una
fuente calibrada. La dosis anual se estima a partir de los isótopos radiactivos
presentes en la muestra y en su entorno. La dosis anual procede del contenido de
U, Th y K natural, así como de la radiación cósmica.
Dosimetría ambiental
Se refiere al impacto de las radiaciones producidas por el hombre, por ejemplo, los
depósitos de residuos nucleares, las emisiones provenientes de una central
nuclear, de plantas procesadoras o de la industria de armas nucleares. Todo esto
como consecuencia de su funcionamiento, no de un accidente. Las técnicas
analíticas de TL, la RL y la OSL se utilizan para datar objetos arqueológicos. La
intensidad de emisión observada se relaciona con la cantidad de radiación
(radiactividad ambiental natural) recibida desde el último calentamiento importante.
En resumen, las técnicas luminiscentes se emplean en diversos campos y para
diferentes aplicaciones
Fototerapia
La técnica de fototerapia la inicia Niels Finser en 1903, al usar la luz ultravioleta
(UV) en la terapia para el tratamiento de Lupus vulgar, lo cual lo hizo acreedor del
premio Nobel de medicina, con lo que se inicia el desarrollo de la fotomedicina.
Hay distintos tipos de esta, algunas utilizan tubos fluorescentes de luz blanca y la
de la luz producida por una lámpara de halógeno y la que se lleva a cabo por
medio de LED.
El material que compone un LED es nitruro de galio y algunas de sus aleaciones
como el nitruro de galio-indio que han sido los más empleados. También están los
siguientes: GaAs (arseniuro de galio), GaP (arseniuro de galio-fosfato).
Oxímetro
Se basa en los fundamentos de la absorción y emisión de luz por parte de la
hemoglobina y es así como logra medir el O2 presente en la sangre. La
hemoglobina circula en la sangre como oxigenada y desoxigenada, situación que
hace que tengan diferentes ondas de absorción.
La utilización de diodos como emisores de luz roja e infrarroja y un fotodiodo como
detector en conjunto permiten efectuar la medición no invasiva de la saturación de
oxígeno en la sangre.
Para la obtención de luz roja es común la utilización de Arseniuro de galio-aluminio
(GaAlAs) y Arsenurio de galio (GaAs).
Tomografía Axial Computarizada
Es un método imagenológico de diagnóstico clínico que permite observar el
interior del cuerpo humano, a través de cortes milimétricos transversales al eje
céfalocaudal, mediante el empleo de rayos x.
Tiene un principio similar al oxímetro pero en este caso la fuente excitante son
rayos-X que se hacen pasar a través del volumen corporal del paciente
simultáneamente en distintos ángulos.
Los detectores utilizados son de tipo gaseoso como los gases de Xenón que están
a presión reducida en una cámara o detectores en estado sólido como CsI(Tl) o
(Bi(GeO4)3, BaF2, NaI(Tl), (HPGe), GeLi).
Características generales de los instrumentos utilizados para el análisis de
fluorescencia y fosforescencia
Casi todos los instrumentos de fluorescencia utilizan ópticas de doble haz, para
compensar las fluctuaciones en la potencia de la fuente. El haz de la muestra pasa
primero a través de un filtro o un monocromador de excitación, que transmite la
radiación que provocará la fluorescencia, pero excluye o limita la radiación de la
longitud de onda de la emisión fluorescente. La radiación emitida llega a un
fotodetector después de haber pasado por un segundo filtro o monocromador que
aísla la fluorescencia para su medida. El haz de referencia pasa a través de un
atenuador que reduce su potencia a aproximadamente la de la radiación
fluorescente Las señales procedentes del fotomultiplicador de la muestra y del de
referencia se dirigen a un amplificador diferencial cuya salida se visualiza en un
medidor o en un registro.
Componentes de los fluorómetros y de los espectrofluorímetros
- Fuentes
- Filtros y monocromadores
- Detectores
- Cubetas y compartimiento para las cubetas
Fuentes
- Lámparas
– Láseres
En la mayoría de las aplicaciones se necesitan fuentes más intensa que las
lámparas de wolframio o hidrógeno utilizadas en las medidas de absorción
• Lámparas: La lámpara más común para los fluorómetros de filtro es la
lámpara de arco de mercurio a baja presión equipada con una ventana de
sílice fundida. Esta fuente emite líneas útiles para producir la excitación
previa a la fluorescencia Para los espectrofluorímetros, en donde se
requiere una fuente de radiación continua, normalmente se utiliza una
lámpara de arco de xenón de alta presión. Estas lámparas requieren una
fuente de alimentación potente capaz de producir corrientes continuas de 5
a 20 A y de 15 a 30 V.
• Láseres: Desde los comienzos de los años setenta se utilizan también
diversos tipos de láseres como fuentes de excitación para medidas de
fotoluminiscencia. Un particular interés tiene los láseres sintonizables de
colorante que utilizan, como sistema de bombeo un láser de nitrógeno
pulsante.
• La mayoría de los espectrofluorímetros comerciales utilizan lámparas
como fuentes por ser menos caras y menos complicadas de uso. Sin
embargo, las fuentes de láser ofrecen importantes ventajas en
determinados casos: por ejemplo, cuando las muestras son muy pequeñas
como en cromatografía con microcolumnas y en electroforesis capilar donde
la cantidad de muestra es de un microlitro o menor.
Filtros y monocromadores
Tanto los filtros de interferencia como los de absorción se han utilizado en los
fluorómetros para la selección de la longitud de onda del haz de excitación y de la
radiación fluorescente resultante. La mayoría de los espectrofluorímetros están
equipados con al menos uno y a veces dos monocromadores de red.
Un monocromador es un dispositivo óptico que sirve para medir la composición de
la luz según su distribución de longitudes de onda (distribución espectral) ya sean
electromagnéticas o no a partir de una fuente emisora que produzca una amplia
gama de longitudes de onda.
Detectores
La señal de fluorescencia típica es de baja intensidad, por ello, para su medida se
necesitan ganancias de amplificador elevadas. Los tubos fotomultiplicadores son
los detectores más utilizados en instrumentos de fluorescencia sensibles.
Suelen trabajar en la modalidad de recuento de fotones para mejorar la relación
señal/ruido. También se utiliza a veces, la refrigeración de los detectores para
mejorar la relación señal/ruido. También se han propuesto, para los
espectrofluorímetros, los detectores de diodos en serie y de transferencia de
carga. Este tipo de detectores permite el registro rápido de los espectros de
excitación y de emisión y particularmente son útiles en cromatografía y en
electroforesis.
Cubetas y compartimiento para las cubetas
Para medidas de fluorescencia se utilizan tanto cubetas cilíndricas como
rectangulares, fabricadas con vidrio o con sílice. Se debe tener cuidado en el
diseño del compartimento de la cubeta para reducir la cantidad de radiación
dispersada que llega hasta el detector. Con este propósito. a menudo, se
introducen detectores en el compartimento. Incluso más importante que en las
medidas de absorbancia, es evitar dejar las huellas dactilares en las cubetas, ya
que la grasa de la piel con frecuencia fluorescente.
Diseño de instrumentos
-Fluorómetros
Este dispositivo de laboratorio utilizado para medir los parámetros de la
fluorescencia: su intensidad y la distribución de longitudes de onda del espectro de
emisión después de la excitación por un cierto espectro de luz.
Estos parámetros se utilizan para identificar la presencia y la cantidad de ciertas
moléculas específicas en un medio. Los fluorímetros modernos son capaces de
detectar concentraciones de moléculas fluorescentes tan bajas como 1 parte por
billón.
Tipos de fluorímetro:
Filtro: Es un tipo de fluorímetro que se emplea en la espectroscopia de
fluorescencia En el fluorímetro, una fuente luminosa emite luz de una longitud de
onda de excitación que está en relación al compuesto que va a ser medido. Los
fluorímetros de filtro producen la excitación del producto específico y las longitudes
de onda de emisión mediante el uso de filtros ópticos. El filtro bloquea otras
longitudes de onda y transmite las longitudes de onda adecuadas para el
compuesto en cuestión. La luz pasa a través de la muestra a medir, y una cierta
longitud de onda es absorbida, mientras que es emitida una radiación de mayor
longitud de onda. La luz emitida es medida mediante un detector. Al cambiar el
filtro óptico, se pueden medir las diferentes sustancias.
El de espectrofluorimetría: Es un tipo de espectroscopia electromagnética que
analiza la fluorescencia de una muestra. Cuando una sustancia química absorbe
un tipo de radiación, sus electrones pasan de un estado basal a un estado
electrónico excitado. Al suceder el fenómeno de absorción muchas sustancias
disipan el exceso de energía en forma de calor, sin embargo, solo un grupo de
especies pierde una cantidad del exceso de energía en forma de calor, y emite la
energía restante en forma de radiación electromagnética de mayor longitud de
onda que la absorbida. En este caso se utiliza un haz de luz, por lo general luz
ultravioleta, que excita los electrones de las moléculas de ciertos compuestos y
provoca que emitan luz de una menor energía, generalmente luz visible.
-Espectrofluorímetros Un espectrofluorómetro contiene 4 partes principales: la
fuente de radiaciones (por ejemplo, una lámpara de Xenón, o un láser, además de
otras lámparas que podrán cubrir un espectro mayor de longitudes de onda); un
monocromador de excitación (que selecciona la longitud de onda adecuada para
la excitación de la muestra); un monocromador de emisión (que analizará las
emisiones producidas por la fluorescencia de la muestra) y un fotomultiplicador,
que recibirá las ondas lumínicas y las transformará en un número medible de
"cuentas", que van a estar relacionadas con la intensidad de la luz (que es el
mismo tipo de fotomultiplicador presente en muchos equipos de Química
Analítica).
Algunas aplicaciones para un espectrofluorómetro:
Investigación de la fotoquímica de sistemas biológicos (clorofila fluorescente).
Estudio de cinética de reacciones. Estudio de interacciones lípidos-proteínas.
Determinación de calidad del agua mediante la medición de materia orgánica.
Determinación de autenticidad de vinos. Estudio de luminiscencia de LEDs.
Investigación de las propiedades del Grafeno. Estudio de la fotoluminiscencia de
celdas solares.
Espectrometría de absorción atómica
La Espectrometría de Absorción Atómica, como su nombre indica, consiste en
aplicar lo que llamamos una "fuente de radiación conocida". Si hay un elemento de
la misma naturaleza que la radiación suministrada, entonces esta energía será
absorbida por los átomos excitados de la muestra analizada.
Esta fuente de radiación se determina de acuerdo con el elemento químico que
queremos estudiar, por lo que varía.
La Espectrometría de Absorción Atómica es muy sensible a niveles de
concentración muy bajos.
Por lo tanto, es más común aplicar esta técnica en las áreas ambiental, alimentaria
y farmacéutica. Las muestras líquidas generalmente presentan pocos problemas
de pretratamiento; entonces todas las muestras sólidas son primero disueltas. Las
muestras gaseosas son casi siempre pretratadas extrayendo el analito por
burbujeo del gas en una solución y analizando entonces esa solución, o
absorbiendo los analitos en una superficie sólida y poniéndolo entonces en
solución por lixiviación con los reactivos apropiados.
Los componentes básicos de un equipo de absorción atómica son:
La fuente radiante más común para las mediciones de absorción atómica es la
lámpara de cátodo hueco, que consiste en un cilindro relleno con un gas inerte
dentro del cual se encuentra un cátodo (construido del metal a analizar) y un
ánodo. Al aplicar un cierto potencial a través de los electrodos esta fuente emite el
espectro atómico del metal del cual está construido el cátodo.
En la EAA se utilizan atomizadores con y sin llama para producir átomos libres del
metal en el haz de la radiación. El atomizador con llama está compuesto de un
nebulizador y un quemador. La solución de la muestra es convertida primero a un
fino aerosol, y luego llevada a la llama que entrega la energía suficiente para
evaporar el solvente y descomponer los compuestos químicos resultantes en
átomos libres en su estado fundamental. Las mezclas de gases más usados para
producir la llama adecuada son: aire/propano, aire/acetileno y óxido
nitroso/acetileno. Generalmente, la elección dependerá de la temperatura
requerida para la disociación de los compuestos y de las características químicas
del elemento a determinar.
En los atomizadores sin llama-atomización electrotérmica con horno de grafito el
vapor atómico se genera en un tubo de grafito calentado eléctricamente, en cuyo
interior se ubica la muestra. Estos atomizadores presentan diversas ventajas,
como una alta eficiencia en generar vapor atómico, permite el empleo de
pequeños volúmenes de muestra y análisis directo de muestras sólidas.
Los espectrofotómetros de absorción atómica poseen generalmente
monocromadores de red con montaje de Littrow o de Czerny-Turner. Estos
monocromadores permiten aislar una línea de resonancia del espectro emitido por
la lámpara de cátodo hueco.
Como detector, se emplea un fotomultiplicador que produce una corriente
eléctrica, la cual es proporcional a la intensidad de la línea aislada por el
monocromador. Un amplificador selectivo amplifica la señal pasando luego a un
dispositivo de lectura que puede ser un voltímetro digital o un registrador u otros.
Técnicas de atomización de la muestra
La atomización de llama utiliza el calor de la combustión de un gas combustible,
generalmente acetileno o propano, con oxígeno, para fundir el material de
revestimiento. En este proceso se calienta y propulsa un consumible,
generalmente un polvo o un alambre, sobre un sustrato para formar un
revestimiento.
La técnica de atomización electrotérmica permite bajar los límites de detección al
rango de partes por billón (ppb) con una instrumentación relativamente sencilla y
sin los esfuerzos y pérdidasde tiempo que conllevan las técnicas de extracción
previa.
Atomización con llama
Su función es convertir los átomos combinados de la muestra en átomos en
estado fundamental, para ello es necesario suministrar a las muestras una
cantidad de energía suficiente para disociar las moléculas, romper sus enlaces y
llevar los átomos al estado fundamental.
En un atomizador de llama, una solución de la muestra se nebuliza mediante un
flujo de oxidante gaseoso mezclado con un combustible también gaseoso y se
lleva hacia una llama donde ocurre la atomización.
Ocurre en una serie de procesos:
1) Desolvatación , en la que el disolvente se evapora para producir un aerosol
molecular finamente dividido.
2) Volatiliza para formar moléculas de gas.
3) La disociación de la mayor parte de dichas moléculas produce un gas atómico.
4) Algunos de los átomos del gas se ionizan para formar cationes y electrones.
5) Otras moléculas y átomos se producen en la llama como resultado de las
interacciones del combustible con el oxidante y con las distintas especies de la
muestra.
Función y condiciones de las llamas:
Condiciones llama satisfactoria:
-Que se forme un ambiente gaseoso que permita las funciones anteriormente
mencionadas.
-Que el ruido de fondo de la llama no debe interferir las observaciones a efectuar.
Estructura de la llama:
QUEMADOR
-El tamaño y aspecto de cada región depende del tipo de combustible oxidante y
de su relación.
-La temperatura máxima se localiza a 1 cm de la zona de combustión primaria de
la llama.
Atomización Electrotérmica.
Estos atomizadores por lo general son más sensibles debido a que la muestra
completa se atomiza en un corto periodo, y el tiempo de residencia promedio de
los átomos en la trayectoria óptica es de un segundo o más.
Se usan para medir la absorción y la fluorescencia atómicas, principalmente. En
este equipo se evaporan unos cuantos mililitros de la muestra primero a una
temperatura baja y luego se convierten en cenizas a una temperatura un poco más
alta en un tubo de grafito que se calienta eléctricamente. Después de convertirlos
a en ceniza, la corriente se incrementa con rapidez a varios cientos de amperes,
que hacen que la temperatura se eleve de 2000 a 3000°C; la atomización de la
muestra ocurre en un periodo que va de unos cuantos milisegundos hasta algunos
segundos. La absorción o fluorescencia del vapor atómico se mide entonces en la
región inmediatamente por arriba de la superficie calentada.
En este sistema, la atomización tiene lugar en un tubo cilíndrico de grafito abierto
en ambos extremos y que tiene un orificio central para la introducción de la
muestra mediante un inyector automático. El tubo presentado en la Figura 5.2
tiene unos 5 cm de largo y un diámetro interno algo menor a 1 cm (existen por
supuesto aparatos de dimensiones distintas). Este tubo intercambiable se ajusta
perfectamente a un par de contactos eléctricos que se ubican en los dos extremos
del mismo. Estos contactos se mantienen dentro de un módulo refrigerado por
agua. Dos corrientes de gas inerte circulan por este módulo: una corriente externa
que evita la entrada de aire exterior y permite que dentro del tubo se alcance la
atomización de la muestra y una corriente interna que fluye por entre los dos
extremos del tubo y sale por el orificio central del compartimiento de muestra. Esta
corriente no sólo elimina el aire sino que sirve también para desalojar los vapores
generados a partir de la matriz de la muestra durante las dos primeras etapas de
calentamiento.
Desempeño de los atomizadores electrotérmicos:
Los atomizadores electrotérmicos ofrecen la ventaja de ser inusualmente
sensibles para volúmenes pequeños de muestra. Por lo común, se emplean
volúmenes de muestra entre 0.5 y 10 μL, en estas circunstancias, los límites de
detección absolutos están en el intervalo de 10-10 a 10-13 g de analito. Debido a
los ciclos de calentamiento-enfriamiento, los métodos de horno son lentos, por lo
común requieren varios minutos por elemento. Una desventaja final es que el
intervalo analítico es relativamente estrecho, por lo regular de menos de dos
órdenes de magnitud. Como resultado, la atomización electrotérmica es el método
de elección cuando la atomización de llama o plasma proveen límites de detección
inadecuados. Análisis de sólidos con atomizadores electrotérmicos.
COMPARACIÓN DE MÉTODOS: ATOMIZACIÓN POR LLAMA Y POR HORNO
DE GRAFITO. VENTAJAS Y DESVENTAJAS
Comparando ambos métodos de análisis se observa que la llama ofrece
resultados en tiempos más cortos (3 a 5 segundos), permite trabajar con
volúmenes de muestra mayores y las interferencias que se presentan están a
menudo bien documentadas.
Sin embargo, la mayor limitación de la absorción atómica utilizando llama como
método de atomización es que el sistema de atomización es relativamente
ineficiente cuando se posiciona la muestra en el sistema atomizador. Sólo una
pequeña fracción (cerca del 10%) de la muestra es aspirada hacia la atomización
y alcanza la llama. Además, la muestra es diluida con grandes volúmenes de
gases, los cuales transportan el aerosol dentro de la llama.
Este proceso está gobernado por muchas variables de difícil control que influyen
además en el tiempo de residencia de los átomos, siendo éste un período corto de
tiempo. Esto limita la concentración mínima que se puede determinar en llama y,
por lo tanto, los niveles de detección alcanzados (niveles menores al mg),
adecuados para muchos analitos en muestras biológicas y ambientales.
La sensibilidad analítica puede mejorarse significativamente si, al ingresar, la
muestra se atomiza de una sola vez y los átomos remantes en el camino óptico
permanecen por un período de tiempo más prolongado. Estas mejoras en la
sensibilidad son alcanzadas en la técnica de absorción atómica por atomización
electrotérmica.
Otra ventaja de suma importancia en la atomización electroquímica consiste en la
posibilidad de trabajar con volúmenes pequeños de muestras, y descender así a
partes por billón los límites de detección para muestras biológicas y ambientales.
Dentro de las limitaciones que se encuentran en atomización electrotérmica se
observa la menor precisión y el mayor número de interferencias. El efecto en la
precisión es consecuencia de trabajar con volúmenes de inyección pequeños.
Técnicas analíticas de absorción atómica
En química analítica, la espectrometría de absorción atómica es una técnica para
determinar la concentración de un elemento metálico determinado en una
muestra.
Puede utilizarse para analizar la concentración de más de 62 metales diferentes
en una solución.
La absorción atómica es una técnica capaz de detectar y determinar
cuantitativamente la mayoría de los elementos del sistema periódico. Sus campos
de aplicación son, por lo tanto, muy diversos. Este método se puede aplicar para
la determinación de ciertos metales tales como: antimonio, cadmio, calcio, cesio,
cromo, cobalto, oro, plomo, níquel, entre otros. Se emplea en el análisis de aguas,
análisis de suelos, bioquímica, toxicología, medicina, industria farmacéutica,
industria alimenticia, industria petroquímica, etc.
Este método consiste en la medición de las especies atómicas por su absorción a
una longitud de onda particular. La especie atómica se logra por atomización de la
muestra, siendo los distintos procedimientos utilizados para llegar al estado
fundamental del átomo lo que diferencia las técnicas y accesorios utilizados. La
técnica de atomización más usada es la d absorción atómica con flama o llama,
que nebuliza y luego la disemina en forma de aerosol dentro de una llama de aire
acetileno u óxido nitroso-acetileno.
La técnica de espectrofotometría de absorción atómica está basada en el
fenómeno de absorción de luz. Es decir, en la absorción de luz a longitudes de
onda muy definidas por parte de átomos vaporizados en estado de reposo. El
elemento en estudio, es situado en una llama, donde es disociado de sus enlaces
químicos y, por ganancia de electrones, se sitúa en un estado atómico base neutro
no excitado ni ionizado. En este estado, el átomo es capaz de absorber la
radiación emitida por una fuente consistente en una lámpara de cátodo hueco,
constituida del material a estudiar, y que emite el espectro de líneas de éste.
En metalurgia, la absorción atómica es una técnica muy útil ya que permite
determinar diversos elementos en un amplio rango de concentraciones. Las
mayores dificultades radican en la puesta en solución de aleaciones, la que se
efectúa por ataque con ácidos fuertes, por ejemplo, nítrico, clorhídrico y perclórico.
Se determinan normalmente Fe, Pb, Ni, Cr, Mn, Co, Sb, etc. En rangos que van
desde los .003% hasta 30% en aleaciones con base Cu, Zn, Al, Pb, Fe y Sn entre
otras.
Elementos que pueden ser determinados por Espectrofotometría de
Absorción Atómica (EAA)
Por EAA es posible determinar más de 60 elementos. ¿Qué se debe tener en
cuenta para identificar los elementos susceptibles de ser determinados por esta
técnica?, tanto en Llama como en Horno de Grafito, hay que tener en cuenta la
temperatura en el proceso de atomización. Las temperaturas que se alcanzan en
el proceso de atomización son relativamente bajas, tanto en Absorción Atómica de
Llama como con Horno de Grafito (en Llama, utilizando como combustible óxido
nitroso/acetileno se alcanzan unos 3000°C siendo más baja la temperatura con la
Llama de aire/acetileno). Podemos ver qué elementos pueden determinarse solo
mediante
EAA de llama (en amarillo) y EEA de Horno de Grafito y Llama (en color naranja).
El parámetro que se utiliza para caracterizar la absorción de energía en
Espectrofotometría de Absorción, es la Absorbancia. Este parámetro sigue una
relación lineal con la concentración, siguiendo la ley de Lambert-Beer.
La característica de interés en las medidas de absorción atómica es la cantidad de
luz, a la longitud de onda seleccionada, que es absorbida, cuando la luz pasa a
través de una nube atómica. Con la ayuda de un monocromador, se selecciona la
longitud de onda de interés, y se mida la atenuación de la luz incidente a su paso
por la nube atómica. La Ley de Lambert Beer es válida para relacionar la
concentración de los átomos en la llama con la absorción de la luz, y de esta
manera se puede efectuar una determinación cuantitativa del analito presente,
midiendo la cantidad de luz absorbida.
Preparación de la muestra
Un requerimiento es la muestra.
• Debe introducirse en la fuente de excitación disuelta, ´por lo general en agua.
Desafortunadamente, muchos materiales de interés como sueles, tejidos,
minerales, derivados del petróleo, etc. Son difícilmente solubles en solventes
comunes. Por lo mismo requieren un tratamiento previo de descomposición y
disolución que a menudo consume tiempo e introduce más errores.
• Generalmente los tratamientos son drásticos y a elevadas temperaturas, con un
potencial perdida del analito, además que los reactivos utilizados generan
interferencias químicas y espectrales al presentar impurezas que alteran la
concentración del analito en la muestra.
Algunos métodos habituales son:
- Tratamiento con ácidos minerales en caliente
- Oxidación con ácido sulfúrico, nítrico o perclórico.
- Combustión en bomba de oxigeno
- Digestión a elevada temperatura
- Fusión a elevada temperatura con ácido bórico, carbonato sódico, peróxido
sódico o pirosulfato potásico
Algunos materiales pueden atomizarse directamente, evitando lo anterior como
líquidos, ya sea, por ejemplo: sangre, derivados del petróleo y disolventes
orgánicos.
Disolventes orgánicos
A principios del desarrollo de la espectrometría de absorción atómica se reconoció
que se podrían obtener absorbancias incrementadas si las soluciones contenían
alcoholes de bajo peso molecular, ésteres o cetonas. El efecto de los disolventes
orgánicos es atribuible en gran medida a la eficiencia incrementada del
nebulizador; la tensión superficial menor de tales soluciones da como resultado
tamaños de gota más pequeños y un incremento en la cantidad de muestra que
llega a la llama.
El disolvente orgánico más utilizado en los trabajos de absorción atómica es la
metilisobutilcetona. La elección del disolvente orgánico es importante.
Generalmente los metales disueltos en disolventes orgánicos presentan mucha
mayor absorción en la llama de la que dan en solución acuosa.
Aquellos que permiten obtener mayores picos de absorción, dado que mejoran la
eficiencia de la nebulización, su tensión superficial produce gotas de menor
tamaño, lo que aumenta la cantidad de muestra que llega a la flama permitiendo
el uso de relaciones bajas de combustible.
Causas que presentan los metales al ser disueltos en estos disolventes son:
• Es la mayor temperatura de la llama, pues, así como el agua, aspirada en una
llama la enfría, un disolvente orgánico combustible hace que la llama sea caliente.
• Tienen una tensión superficial más baja que el agua, por lo que la solución
aspirada se dispersa más fácilmente en gotitas finas
Usos de los disolventes orgánicos
• En combinación con otros agentes para disolver materias primas.
• En productos o materiales residuales, utilizándose para la limpieza.
• En las industrias para pegar, desengrasar, limpiar, pintar y lubricar.
• Como portador de otras sustancias que una vez depositadas quedan fijadas
evaporándose el disolvente.
Curvas de calibrado
Método más usado en la práctica.
Se preparan se miden una serie de disoluciones patrón de la sustancia que se
analiza de concentración variable entre cuyos límites se halla la concentración
problema y se representa la absorbancia en función de la concentración.
Generalmente la curva de calibrado es lineal. Desviaciones de la solución patrón
respecto a la curva de calibrado sirvan para corregir el resultado analítico.
De la medida de la absorbancia del problema se puede determinar su
concentración a partir de la curva de calibrado por extrapolación.
Para determinar concentraciones de analito en una muestra, primero deben
determinarse las absorbancias de disoluciones estándar o patrones de
concentraciones de analito sabidas.
Seguidamente se grafica el valor de estas absorbancias versus la concentración,
obteniéndose de esta forma la “curva de calibración”.
Generalmente se utilizan las concentraciones de analito que tienen una relación
lineal con la absorbancia, pasando a llamarse la relación
absorbancia/concentración
“Recta de calibración”.
Una vez establecida la recta de calibración se determina la Absorbancia de la
muestra y aplicando la relación Absorbancia/concentración de la recta de
calibrado, se puede obtener la concentración del analito.
Aplicaciones de la espectrometría de absorción atómica
La espectrometría de absorción atómica como método instrumental permite
realizar una cuantificación de metales de una muestra líquida por comparación de
la absorbancia de la solución muestra con la absorbancia de soluciones estándar
de concentración conocida.
Es una técnica bastante empleada por su alta especificidad, su sensibilidad y su
facilidad en la operación. Sus aplicaciones son muy diversas y son importantes en
distintos campos y constituye (junto con otras técnicas como la Espectroscopia de
Emisión de Plasma Inductivo ICPE o la espectroscopia de plasma inductivo
acoplado a espectrometría de masas ICP-MS) una de las técnicas recomendadas
para la medición de contaminantes en distintos tipos de matrices.
La espectrometría de absorción atómica por su versatilidad ocupa un lugar
privilegiado dentro de las técnicas analíticas con aplicaciones en las diferentes
áreas de la química:
• Análisis clínicos (metales presentes en orina, sangre y tejidos)
• Análisis ambientales (Monitoreo de varios elementos en ríos océanos, agua de
consume, aire, petróleo y bebidas)
• Farmacia (trazas de metales usados como catalizadores en la manufactura)
• Industria (presencia de impurezas tóxicas en materiales como Pb en concreto)
• Minería (cantidad de metales como oro en rocas).
Esta forma de espectrometría de absorción es muy potente. Por esta razón, la
gama de aplicaciones también es amplia. Tanto las aplicaciones comerciales
como las médicas son posibles. Por ejemplo:
Empresas de eliminación especiales utilizan esta tecnología para analizar
exactamente qué materiales están presentes en los residuos peligrosos. En la
producción, la pureza de los materiales se determina con la ayuda de análisis
elementales precisos o se llevan a cabo controles de calidad y pureza muy
precisos.
En medicina, en cambio, la espectroscopia de absorción atómica permite analizar
con precisión muestras de diferentes tipos. Esto se aplica, por ejemplo, a las
muestras de sangre o de tejido de los pacientes.
Además, este método se utiliza a menudo en geología.
La composición de las muestras de suelo y roca, por ejemplo, puede analizarse
con gran precisión. La arqueometría, por otra parte, implica la investigación de
herramientas y monedas, así como de recipientes de cerámica o vidrio. Aquí, la
espectrometría atómica ayuda a identificar la composición de las aleaciones. Esto
ayuda en la clasificación temporal y espacial de los objetos encontrados.
Incluso hay aplicaciones en criminalística. En el reconocimiento forense, por
ejemplo, los análisis capilares se realizan de esta manera. Estos pueden ser
usados para detectar elementos extraños o toxinas. Otras aplicaciones se
encuentran en la técnica medioambiental y en la seguridad laboral. En estas
áreas, la espectrometría atómica se utiliza para examinar muestras de agua o para
buscar toxinas.
Algunos ejemplos específicos que podemos mencionar son los siguientes:
• Cuantificación de zinc en agua por espectrometría de absorción. La
cuantificación de zinc en agua es un análisis obligado en el control de calidad de
aguas potables y residuales de acuerdo a la normativa EPA.
• Medición de cobre en agua por espectrometría de absorción atómica en modo
horno de grafito. El equipo de absorción atómica tiene la opción para realizar los
análisis en modo de horno de grafito. Esta opción requiere cantidades más
pequeñas de muestra, comparada con las que son succionadas en el modo llama
y hace más efectiva la vaporización del metal en la cámara, lo que mejora
notablemente la absorción de la luz por parte del metal en el estado fundamental.
Dado que muchas técnicas requieren una mínima sensibilidad del analito, las
normas internacionales recomiendan en algunas ocasiones realizar los análisis por
modo horno de grafito sobre el método de llama tradicional. Este es el caso de la
medición de cobre en agua, de acuerdo a la norma EPA 220.1, en la que se
establecen ciertos parámetros instrumentales para realizar la medición de este
metal.
Características generales de los instrumentos utilizados en la espectrometría de
absorción atómica
El diseño general de un instrumento para espectrometría de absorción atómica
consiste en una fuente de radiación, una zona de muestra, un selector de longitud
de onda, un detector y un procesador de la señal y de la lectura de salida. La zona
de muestra en estos instrumentos es el atomizador, que contiene la muestra
gaseosa atomizada.
Fuentes de radiación
La fuente de radiación característica debe poseer tres propiedades fundamentales:
• Monocromaticidad: la línea de resonancia se debe poder seleccionar con toda
precisión exactamente a la longitud de onda del elemento a determinar.
• Intensidad: deber ser lo suficientemente intensa a la longitud de onda de interés.
• Estabilidad: suficiente como para poder realizar las medidas sin fluctuaciones
considerables.
Actualmente hay varias fuentes de radiación utilizables: las de emisión continua,
que abarcan el espectro desde el ultravioleta lejano hasta el visible y las fuentes
de emisión discontinua, que emiten únicamente a longitudes de onda muy
concretas.
Atomizadores con llama
Su función es convertir los átomos combinados de la muestra en átomos en
estado fundamental, para ello es necesario suministrar a las muestras una
cantidad de energía suficiente para disociar las moléculas, romper sus enlaces y
llevar los átomos al estado fundamental.
Instrumentos
• Las lámparas de cátodo hueco (HCL). Son lámparas de descarga diseñadas
para su uso en instrumentos de Absorción Atómica (AA).
Consisten en un cátodo hecho del elemento de interés, un ánodo y un gas de
relleno inerte contenido en un sobre de vidrio.
• Chopper. Logra separar la señal de la fuente de la que nos da la llama (señal
calórica), se coloca entre la llama y la fuente consiguiendo que al receptor llegue
una señal alterna de la fuente y una continua de la llama. Se utiliza tanto en
absorción, emisión como en fluorescencia.
• Quemador. Estos quemadores emplean generalmente una cámara de
premezclado de combustible/oxidante en combinación con un sistema para aspirar
la solución muestra a la llama
• Monocromador. Los espectrofotómetros de absorción atómica poseen
generalmente monocromadores de red con montaje de Littrow o de CzernyTurner.
Estos monocromadores permiten aislar una línea de resonancia del espectro
emitido por la lámpara de cátodo hueco.
• Detector. se emplea un fotomultiplicador que produce una corriente eléctrica, la
cual es proporcional a la intensidad de la línea aislada por el monocromador. Un
amplificador selectivo amplifica la señal pasando luego a un dispositivo de lectura
que puede ser un voltímetro digital o un registrador u otros, Miden la intensidad de
la radiación antes y después de la absorción por la muestra. A partir de los valores
obtenidos se podrá calcular la radiación absorbida. En los aparatos comerciales se
emplean tubos fotomultiplicadores.
Modulación
La llama emite energía continuamente a longitudes de onda no deseadas,
produciendo interferencia y una gran inestabilidad en las lecturas. Los detectores
que se utilizan son sensibles a determinadas frecuencias, ignorando las señales
continuas ocasionadas por la llama. Por ello, se modula el sistema de alimentación
de las lámparas a la misma frecuencia que el tubo fotomultiplicador.
Incremento de la sensibilidad
En ocasiones, las concentraciones que deseamos detectar son demasiado bajas,
por lo que debemos recurrir a técnicas especiales que requieren complementar el
equipo con ciertos accesorios, los cuales mejoran notablemente la sensibilidad del
equipo. Algunos ejemplos de ellos son los siguientes:
• Cámara de grafito: El aporte energético más utilizado es la llama, pero en
ocasiones se necesita mayor sensibilidad. Una forma de controlar las etapas
necesarias para llevar los átomos que constituyen una muestra hasta el estado
fundamental es suministrar la energía programadamente por medios
electrotérmicos. Es decir, sustituimos la llama por la cámara de grafito. Con ello
aumenta la proporción de átomos en estado fundamental y, por tanto, la
sensibilidad aumenta. Con la cámara de grafito, se aumenta la sensibilidad unas
1000 veces la de la llama, pudiéndose llegar a detectar niveles de ng/L
.
• Generador de hidruros: Utilizando otros reductores y una cámara de cuarzo
calentada a una temperatura de unos 1000ºC, se pueden analizar los elementos
capaces de formar hidruros volátiles como el As, Se y Sb, llegando a detectarse
niveles de unos pocos ppb.