CREATINE KINASE-MB
COD 11792 1 x 50 mL
(CK-MB)
CONSERVAR A 2-8ºC
Reactivos para medir la concentración de CK-MB
CREATINA QUINASA-MB (CK-MB)
Sólo para uso in vitro en el laboratorio clínico Inmunoinhibición
FUNDAMENTO DEL MÉTODO CONTROL DE CALIDAD
Un anticuerpo específico inhibe las dos subunidades M de la CK-MM (CK-3) y la única Se recomienda el uso del Suero Control de CK-MB (cod. 18024) para verificar la funcionalidad
subunidad M de la CK-MB (CK-2), lo que permite la medición de la subunidad B de la de la CK- del procedimiento de medida. Reconstituir el suero con 0,5 mL de agua destilada. Agitar
MB (asumiendo la ausencia de CK-BB o CK-1)1,2. La concentración catalítica de CK-B, que suavemente el vial, procurando evitar la formación de espuma, hasta disolver por completo todo
corresponde a la mitad de la actividad CK-MB, se determina empleando las reacciones el liofilizado. Utilizar el Control en el procedimiento analítico de forma idéntica a los sueros de
acopladas de la hexoquinasa (HK) y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6P-DH), a partir de la los pacientes (Nota 2).
velocidad de formación del NADPH, medido a 340 nm3. Estable 7 días a 2-8ºC.
CK-B Las concentraciones de CK y CK-MB vienen indicadas en la etiqueta del vial. El valor de CK es
Fosfato de creatina + ADP Creatina + ATP trazable al sistema de referencia descrito por el Comité de Sistemas de Referencia para
HK Enzimas de IFCC y el de CK-MB al material de referència ERM-AD455/IFCC (IRMM). La
ATP + Glucosa ADP + Glucosa - 6 - fosfato trazabilidad solo se asegura empleando los reactivos y procedimientos de medida
G6P-DH recomendados por BioSystems.
Glucosa - 6 - fosfato + NADP+ Gluconato - 6 - fosfato + NADPH + H+ Los intervalos de valores aceptables que se sugieren han sido elaborados en base a la
experiencia previa en variabilidad interlaboratorio y se indican únicamente a título orientativo, ya
COMPOSICIÓN
que cada laboratorio debe establecer sus propios parámetros de precisión.
A. Reactivo. 1 x 40 mL: Anti-humano-CK-M capaz de inhibir 2000 U/L de CK-M, Imidazol 125
mmol/L, EDTA 2 mmol/L, acetato de magnesio 12,5 mmol/L, D-glucosa 25 mmol/L, CARACTERÍSTICAS METROLÓGICAS
N-acetilcisteína 25 mmol/L, hexoquinasa 6800 U/L, NADP 2,4 mmol/L, pH 6,1. − Límite de detección: 3 U/L = 50 nkat/L
B. Reactivo. 1 x 10 mL: Fosfato de creatina 250 mmol/L, ADP 15,2 mmol/L, AMP 25 mmol/L, − Límite de linealidad: 600 U/L = 10002 nkat/L. Cuando se obtengan valores superiores, diluir la
P1, P5-di(adenosina-5'-)pentafosfato 103 µmol/L, glucosa-6-fosfato deshidrogenasa 8800 muestra 1/2 con agua destilada y repetir la medición.
U/L. − Repetibilidad (intraserie):
CONSERVACIÓN Concentración media CV n
Conservar a 2-8ºC. 45 U/L = 750 nkat/L 2,8 % 20
Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se 129 U/L = 2150 nkat/L 2,3 % 20
conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su uso.
Indicaciones de deterioro: − Reproducibilidad (interserie):
− Reactivos: Presencia de partículas, turbidez, absorbancia del blanco superior a 0,400 a 340 Concentración media CV n
nm (cubeta de 1 cm).
45 U/L = 750 nkat/L 3,5 % 25
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS 129 U/L = 2150 nkat/L 3,2 % 25
Reactivo de Trabajo: Añadir el contenido de un frasco del Reactivo B a un frasco del Reactivo
A. Mezclar suavemente. Si se desea preparar otros volúmenes, mezclar en la proporción: 4 mL − Veracidad: Los resultados obtenidos con estos reactivos no muestran diferencias
de Reactivo A + 1 mL de Reactivo B. sistemáticas significativas al ser comparados con reactivos de referencia. Los detalles del
estudio comparativo están disponibles bajo solicitud.
Estable 15 días a 2-8ºC. El reactivo de trabajo debe estar protegido de la luz.
− Interferencias: La hemólisis (hemoglobina > 2,5 g/L) y la lipemia (triglicéridos >1,25 g/L)
EQUIPO ADICIONAL interfieren. La presencia en la muestra de concentraciones por encima de lo normal de
− Analizador, espectrofotómetro o fotómetro con cubeta termostatizable a 37ºC para lecturas a CK-BB o de adenilato quinasa, y de macro-CK o CK mitocondrial interfieren5. La bilirrubina
340 nm. (< 20 mg/dL) no interfiere. Otros medicamentos y sustancias pueden interferir6.
− Cubetas de 1 cm de paso de luz. Estos datos han sido obtenidos utilizando un analizador. Los resultados pueden variar al
cambiar de instrumento o realizar el procedimiento manualmente.
MUESTRAS
CARACTERISTICAS DIAGNÓSTICAS
Suero recogido mediante procedimientos estándar.
La creatina kinasa esta compuesta de 2 cadenas polipeptídicas, denominadas B (de cerebro) y
La concentración de CK total en la muestra debe ser inferior o igual a 1000 U/L. Si es superior,
M (de músculo), que dan origen a los tres isoenzimas diméricos: MM (CK-1), MB (CK-2) y BB
diluir el suero 1/2 con NaCl 150 mmol/L.
(CK-3).
La CK-MB en suero es estable al menos 7 días a 2-8ºC.
Los porcentajes de la actividad de CK-MB sérica respecto a la actividad CK total suele ser
PROCEDIMIENTO inferior al 6%. Sin embargo, estos valores aumentan al 10 a 30% después de un infarto de
1. Precalentar el Reactivo de Trabajo y el instrumento a 37ºC. miocardio dependiendo de la extensión de tejido miocárdico afectado y de la localización del
infarto. No obstante, pueden encontrarse índices bajos de CK-MB sérica tras un infarto de un
2. Pipetear en un tubo de ensayo: (Nota 1)
miocardio previamente sano. Por consiguiente, el diagnóstico de infarto de miocardio debe
Muestra 40 µL basarse en la historia clínica y otros datos, junto con la magnitud de la elevación de CK-MB y su
Reactivo de Trabajo 1,0 mL perfil en el tiempo4,7.
El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo,
3. Mezclar bien e incubar inmediatamente a 37ºC. Poner en marcha el cronómetro.
sino que debe integrar los datos clínicos y de laboratorio.
4. Leer la absorbancia (A) a 340 nm exactamente a los 5 minutos (A5) y a los 10 minutos (A10)
de incubación. NOTAS
1. Estos reactivos pueden utilizarse en algúnos analizadores automáticos. Solicite información
CÁLCULOS a su distribuidor.
La concentración de CK-MB en la muestra se calcula a partir de la siguiente fórmula: 2. Todos los componentes de origen humano han resultado ser negativos para el antígeno HBs
Vt x 106 y para los anticuerpos anti-HCV y anti-HIV. Sin embargo, deben tratarse con precaución
(A10 – A5) x x 2 = U/L como potencialmente infecciosos.
ε x I x Vs x 5 min
BIBLIOGRAFÍA
El coeficiente de absorción molar (ε) del NADPH a 340 nm es 6.300, el paso de luz (l) es 1 cm,
el volumen total de reacción (Vt) es 1,04, el volumen de muestra (Vs) es 0,04, y 1 U/L equivale 1. Würzburg U, Hennrich N, Lang H, Prellwitz W, Neumeier D and Knedel M. Bestimmung der
a 16,67 nkat/L. Se deducen los siguientes factores para calcular la concentración catalítica: aktivität von creatinkinase MB im serum unter verwendurng inhibierender antikörper.
Klinische Wochenschrift 1976; 54: 357-360.
A10 – A5
x 1651 = U/L 2. Gerhardt W and Waldenstrom G. Creatine kinase B-subunit activity in serum after
x 27522 = nkat/L immunoinhibition of M-subunit activity. Clin Chem 1979; 25: 1274-1279.
El índice de CK-MB se calcula utilizando la siguiente fórmula: 3. IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 7: IFCC
method for creatine kinase. JIFCC 1989; 1: 130-139.
CKMB concentración 4. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics, 4th ed. Burtis CA, Ashwood
x 100 = %
CKtotal concentración ER, Bruns DE. WB Saunders Co, 2005.
5. Urdal P and Landaas S. Macro creatine kinase BB in serum, and some data on its
VALORES DE REFERENCIA prevalence. Clin Chem 1979; 25: 461-465.
Se han descrito valores discriminantes de alrededor de 25 U/L = 417 nkat/L para el infarto
agudo de miocardio. No obstante, es preferible emplear el límite del índice de CK-MB del 6% de 6. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 5th ed. AACC Press, 2000.
la concentración de CK total4 como valor discriminante. 7. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Press,
2001.
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