NORMA:

UNIVERSIDAD DEL VALLE - VERSIÓN:

Resolución
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA 2023-1
2115 de 2007
FECHA DE REVISIÓN:
LABORATORIO DE ANÁLISIS INDUSTRIALES
12/03/2023

ANÁLISIS DE AGUAS
ELABORADO POR:
- Esteban Lopez Meneses REVISADO POR: APROBADO POR:
- Miguel Angel Londoño - Harold Humberto Diaz
- Oscar Daniel Arredondo

1. MÉTODOS

● Medición de pH y conductividad por potenciometría.

● Análisis DQO por espectrofotometría UV-Vis.
● Cloro residual por yodometría.
● Cuantificación de hierro por espectrofotometría absorción atómica
● Determinación de dureza cálcica, magnésica y total por titulación complexo
métrica.
● sulfitos

2. OBJETIVOS

● Aplicar diferentes métodos comunes en análisis industriales para diferentes análisis

de calidad en aguas.
● Determinar los parámetros fisicoquímicos de las muestras de agua conforme a lo
establecido en los estándares de calidad.
● Realizar la correcta recolección y preservación de muestras de agua según
especificaciones técnicas.

3. INTRODUCCIÓN
El agua es una fuente de vida de vital importancia en los seres humanos, esta es necesaria
para todo tipo de actividades, por tal motivo existen varios tipos de aguas. Normalmente es
contaminada por diversas fuentes, como lo son el vertimiento de desechos de las industrias,
los alcantarillados, la minería, etc. Esto genera materia orgánica, metales pesados,
bacterias, que pueden ser perjudiciales para las personas. Existen respectivos métodos
analíticos para determinar el estado del agua con los cuales se pueden estudiar parámetros
de carácter fisicoquímico como pH, cloro, alcalinidad, dureza, cloruros, dureza cálcica y
total, hierro, aluminio, DBO, DQO, Mn, Mg, Al, fosfatos, nitratos, nitritos, Cd, etc. Estos
análisis establecen criterios para determinar si el agua cumple o no con la calidad de los
estándares según la resolución 2115 de 2007.

1
Tipos de aguas
Agua potable: Agua previamente tratada para el consumo humano.
Agua dulce: Proveniente de ríos y lagos que generalmente proporciona el agua que
bebemos y la que se requiere para nuestra alimentación, la industria y la producción de
energía que representa 2.5% del agua del planeta.
Agua salada: Es agua que contiene una alta concentración de sales disueltas presente en
mares y océanos y representa 97% del agua del planeta.
Agua dura: Contiene un alto nivel de minerales, en particular sales de magnesio y calcio.
Agua blanda: Contiene un bajo nivel de minerales de sales de magnesio y calcio.
Agua residual: Son cualquier tipo de agua cuya calidad se vio afectada negativamente por
influencia antropogénica.
Agua destilada: Agua sometida a un proceso de purificación en el que se han eliminado las
impurezas y iones del agua de origen. Este proceso sirve para desproveer al agua de sales
minerales, electrolitos, microorganismos y posibles sustancias dañinas disueltas en ella.
Agua salobre: Tiene más sales disueltas que el agua dulce, pero menos que el agua de mar.

Análisis por desarrollar en la presente guía:

Medición de pH: es una medida que indica la acidez del agua. El rango varia de 0 a 14,
siendo 7 el rango promedio (rango neutral). Un pH menor indica acidez, mientras que un
pH mayor a 7, indica que el agua es básica. En realidad, el pH es una medición de la
cantidad relativa de iones de hidrógeno e hidróxido en el agua.
Medición de conductividad: La conductividad se define como la capacidad del agua para
conducir una corriente eléctrica a través de los iones disueltos. Los iones más positivos son
sodio (Na+), calcio (Ca+2), potasio (K+) y magnesio (Mg+2). Los iones más negativos son
cloruro (Cl-), sulfato (SO4-2), carbonato, bicarbonato.
Determinación de Hierro: la cantidad de hierro total en la muestra de agua de interés;
también permite comprobar si esta cumple con las normas establecidas por el país y si se
toma las medidas pertinentes del caso.
Determinación de dureza: indica la cantidad total de iones alcalinotérreos (grupo 2)
presentes en el agua y constituye un parámetro de calidad de las aguas de interés doméstico
o industrial.

4. MATERIALES Y REACTIVOS
MATERIAL O EQUIPO CANTIDAD
Brazo para electrodos 1
Electrodo de vidrio para pH 1
Conductímetro 1
Vasos de precipitados 50 mL 4
Magnetos 3
Saca magnetos 2
Matraz volumétrico de 100 mL 4
Matraces volumétricos de 25 mL 6

2
 Tubos digestores con tapa 9
Pesa sales 6
Micro espátulas 5
Balanza gravimétrica 1
Vasos de precipitados 100 mL 9
Pipetas volumétricas de:1 mL,3mL, 5mL, 10mL y 20 mL 1c/u
Campana desecadora 1
Erlenmeyer 100 mL 6
Bureta 3
Placa digestora 1
Matraces de 10 mL 10
Matraz de 200 mL 2

REACTIVOS
Cloruro de potasio
Solución buffer a pH 4
Solución buffer a pH 10
Solución buffer a pH 7
Sulfato de mercurio
Dicromato de potasio
Acido sulfúrico
Sulfato de plata
Ftalato de potasio
Tiosulfato de sodio
yodo
EDTA
Reactivo de Lugol
Negro de eriocromo t
Almidón
Sal de Mohr

5. PROCEDIMIENTO

5.1 TOMA Y TRATAMIENTO DE MUESTRAS DE AGUA

1. Antes de llenar el envase con la muestra, lave 2 o 3 veces el recipiente con el agua que va
a recolectar.
● Vaso de precipitados 50 mL 6
● Embudo con caña 2
● Crisol 2.

3
 ● Balón para Kjeldahl 3.
● Mechero 1.
● Bureta 25,00 mL 2.
● Triangulo de porcelana 1.
● Aro metálico 1.
● Pinza con nuez 1.
● Pinza para bureta 2.
● Erlenmeyer 125 mL 8.
● Frasco ámbar para indicador 25 mL 4.
● Gotero 4.
● Caja Petri 6.
2. Realice la toma con cuidado para garantizar que los resultados analíticos representen la
composición real.
3. Refrigere la muestra una vez la recolecte.
4. Antes de recoger las muestras de un sistema de abastecimiento, deje que el agua corra
por las tuberías, para asegurarse que la muestra sea representativa del suministro.
5.2 MEDICIÓN DE pH POR POTENCIOMETRÍA
1. Preparar una solución de KCl 3,5M: Disuelva 260,75 g del reactivo en agua destilada y
diluya hasta un litro.
Procedimiento
1. Remueva la cubierta de caucho en la parte inferior del electrodo.
2. Lave con agua destilada el bulbo de vidrio y seque con un papel o tela, sin tocar con los
dedos la superficie del electrodo.
3. Si la solución de referencia interna del electrodo está a un nivel inferior a 5 cm de altura,
llene con KCl 3,5 M; hasta 1 cm por encima del hueco de llenado.
4. Examine si hay burbujas de aire atrapadas. En caso de estar presentes, agite el electrodo
suavemente hasta hacerlas desaparecer.
5. Mantenga el electrodo en agua destilada por lo menos durante 4 horas si la membrana de
vidrio está seca.
6. Conecte el electrodo al pH-metro.
7. Encienda el instrumento, girando la perilla 1 a la posición ll.
8. Seleccione la temperatura a la cual va a determinar el pH de la muestra, con el selector
de temperatura 4.

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Calibración del equipo:
1. Enjuague el electrodo con agua destilada y séquelo.
2. Sumerja el electrodo en la solución buffer pH 7, y lea el pH, ajuste el dato al valor exacto
con la perilla.
3. Lave el electrodo con agua destilada.
4. Seque el electrodo sin tocar con la mano el bulbo.
5. Sumerja el electrodo en la solución buffer de pH ácido o básico según el caso ( pH 4 ó 10
por lo general).
6. Ajuste con el control 2 (mV/pl-1) hasta que la lectura marque el valor exacto de la
solución buffer.
7. Enjuague el electrodo con agua destilada y seque.
8. Sumerja el electrodo en la muestra y tome el valor de pH.
5.3 MEDICIÓN DE CONDUCTIVIDAD
Descripción del equipo: El equipo opera con 5 rangos de medición:
1. X0.1 0-2 micromhos
2. X1 0-20 micromhos
3. X10 0-200 micromhos
4. X100 0-2.000 micromhos
5. X1k 0-20.000 micromhos
El instrumento tiene una celda platinizada, la cual contiene interiormente un tennistor para
la compensación automática de temperatura.
● Operación
1. Gire la perilla 1 a Batt', luego a Batt", lea en la pantalla el voltaje, cuando el valor leído
esté por debajo de 4, la batería debe reemplazarse.
2. Gire la perilla 1 a la posición ON
3. Gire la perilla 3 a la posición XlK.
4. Enjuague la probeta con agua desionizada.
5. Coloque la muestra en un beaker de 50 mi y sumerja la probeta en la muestra, de forma
que el líquido cubra por lo menos una pulgada de la probeta, sin tocar las paredes del
beaker.
6. Lea en la pantalla la conductividad; con la perilla 3 disminuya el rango de operación
hasta que la lectura esté entre un 10 y 90% de la escala para determina el rango de
medición. Nota: La probeta compensa automáticamente la temperatura entre 5 y 45 °C.

5
7. Es necesario esperar uno minutos antes de la lectura para que la temperatura se
estabilice.
8. Después de determinar el rango de medición, calibre el equipo con la solución estándar
en el rango seleccionado.
● Calibración:
1. Enjuague la probeta primero con agua desionizada y luego con un poco de la solución
estándar.
2. Sumerja la probeta en la solución estándar, en lo posible esta debe estar a la misma
temperatura de la muestra.
3. Observe el valor en la pantalla y ajuste al valor exacto con la perilla 2 (cal).
4. Enjuague la probeta con agua desionizada y luego con la muestra
5. Sumerja la probeta en el beaker de la muestra y lea la conductividad.
6. Multiplique la lectura por el valor indicado según el rango seleccionado
Observaciones:
1. Las muestras con bajos niveles de conductividad se deben proteger de la atmósfera;
porque los gases disueltos cambian rápidamente el valor de la conductividad.
2. La precisión de la medición depende en gran parte de los cuidados que se tengan con la
probeta.
3. El electrodo está cubierto de una capa rugosa de platino, para aumentar el área
superficial; las impurezas de la muestra taponan esta capa, disminuyendo la linealidad de la
medición. Para evitar esto se debe enjuagar la probeta con agua y almacenarla en agua
desionizada.
4. La celda se debe reemplazar cuando el electrodo esté muy afectado por las impurezas y
no responda a la calibración.
5.4 ANÁLISIS DQO POR ESPECTROFOTOMETRÍA DE UV-Vis
Preparación de solución digestora:
1. Para preparar 25 mL de HgSO4 0,11 M y K2Cr2O7 0,035 M. Pesar 0,2587 g de
dicromato de potasio y 0,8237 g de sulfato de mercurio. Luego agregar 5,0 mL de agua
destilada y 4,2 mL de ácido sulfúrico. Dejar enfriar y trasvasar a un matraz de 25 mL, luego
se enrasa con agua destilada.
Preparación de solución catalizadora:
1. Para preparar 25 mL de Ag2SO4 al 0,032 M, pese 0,2545 g de sulfato de plata y
trasvasar a un matraz de 25 mL para enrasar con ácido sulfúrico concentrado.
Preparación solución estándar de nftalato de potasio:

6
1. Primero Secar en un horno por 1 hora a 105 °C y dejar atemperar en una campana
desecadora.
2. Pesar 0,0875 g de nftalato acido de potasio para elaborar una solución de 100 mL al 4,2
M KC8H5O4 esta concentración es equivalente a 1008 ppm O2 (DQO).
Ecuación General 2𝐾𝐶8𝐻5𝑂4+15𝑂2+𝐻2𝑆𝑂4→16𝐶𝑂2+6𝐻2𝑂+𝐾2𝑆𝑂4
Preparación de la curva:
1. Prepara en matraces de 25 mL una curva de 6 puntos entre 130 ppm O2 y 780 ppm O2:
130 ppm = 3,0 mL
260 ppm = 6,0 mL
390 ppm = 10,0 mL
520 ppm = 13,0 mL
650 ppm = 16,0 mL
780 ppm = 20,0 mL
Digestión de las muestras:
1. En 6 tubos de digestión adicione 3,0 mL de estándar, adicional a esto adicione 1,5 mL de
solución digestora y 3,5 mL de solución catalizadora, de esta misma forma se preparan las
muestras y el blanco.
2. Tape cada tubo y agite cuidadosamente de forma manual.
3. Introduzca los tubos en la placa digestora caliente (150 °C) y digiera durante 2 horas.
4. Retire los tubos de la placa digestora y deje enfriar unos 10 min.
5. Agite manualmente las soluciones para homogenizar con el agua condensada en las
paredes del tubo.
6. Deje en reposo durante 30 min para continuar con el enfriamiento y permitir la
sedimentación de los sólidos suspendidos.
Lectura en el espectrofotómetro:
1. Mida la absorbancia de cada una de las soluciones obtenidas después de la digestión en
el espectrofotómetro a 600 nm, ajustando el 0.00 de absorbancia con el blanco.
2. Realice las mediciones de la curva iniciando con el estándar más concentrado y
terminando con el blanco, realizando un lavado de la celda con agua destilada ente cada
punto.
3. Para la medición de las muestras, lave con agua destilada la celda y realice la medición
de la absorbancia en el espectrofotómetro de manera similar que los estándares.
CLORO RESIDUAL POR YODOMETRÍA.

7
La estandarización del tiosulfato de sodio (Na2S2O3) es un proceso esencial en la
yodometría con reactivo de Lugol para la determinación de cloro residual en muestras de
agua. A continuación, se describen los pasos para estandarizar el tiosulfato:
● Materiales:
● Tiosulfato de sodio (Na2S2O3) de alta pureza
● Reactivo de yodo al 0,1 N
● Solución de almidón al 1%
● Matraz aforado de 100 mL
● Pipeta de 25 mL
● Bureta

● Procedimiento:

1. Pese aproximadamente 5 g de tiosulfato de sodio en un vaso de precipitados y transfiera

a un matraz aforado de 100 mL.
2. Disuelva completamente el tiosulfato de sodio en agua destilada y llene el matraz
aforado con agua destilada hasta la marca de aforo. Mezcle bien para obtener una
solución homogénea.
3. Tome una muestra de 25 mL de la solución de yodo al 0,1 N en un matraz aforado y
añada 5 mL de solución de almidón al 1%.
4. Titule la solución de yodo con la solución de tiosulfato de sodio recién preparada,
agregando lentamente y agitando constantemente hasta que el color amarillo
desaparezca y se observe un color azul claro. Este punto indica el final de la reacción.
5. Repita el procedimiento de titulación al menos tres veces más para asegurar la precisión
de los resultados.
La yodometría se puede utilizar para la determinación de cloro residual en agua. En este
caso, se utiliza el reactivo de Lugol como indicador para determinar la cantidad de cloro
presente en la muestra.
Materiales necesarios:
● Reactivo de Lugol (solución de yodo en yoduro de potasio)
● Solución de la muestra que se va a analizar (agua)
● Solución de tiosulfato de sodio (Na2S2O3) de concentración conocida 0,1 M
● Solución de almidón 1%
● Bureta
● Pipetas
● Matraz aforado
● Erlenmeyer
● Agitador magnético

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● Procedimiento para la preparación de la solución de tiosulfato de sodio

1. Preparar una solución de tiosulfato de sodio al 0,1 M (disolver 2,48 g de tiosulfato de

sodio en 100 mL) de concentración conocida. Esta solución se utilizará para valorar la
cantidad de yodo liberado por el cloro presente en la muestra.

● Preparación de la muestra:

1. Tomar una alícuota de la muestra y transferirla a un Erlenmeyer.

2. Añadir una pequeña cantidad de reactivo de Lugol al Erlenmeyer y agitar suavemente.
La solución se tornará de color marrón oscuro debido a la reacción de yodo con el cloro
presente en la muestra.
3. Titular la solución de yodo generada en la reacción de yodación con la solución de
tiosulfato de sodio al 0,1 M. Agregar unas gotas de solución de almidón al 1% (1 g de
almidón en 100 mL de agua destilada) para detectar el punto final de la titulación. La
solución se tornará de color azul oscuro cuando todo el yodo se haya consumido.
4. Calcular la cantidad de cloro presente en la muestra

Es importante tener en cuenta que el cloro presente en la muestra puede reaccionar con
otros compuestos presentes en el agua, como el amonio y los compuestos orgánicos. Por lo
tanto, es recomendable que la muestra se analice lo más rápido posible después de la
recolección para minimizar la posibilidad de reacciones secundarias. Además, es
importante seguir las técnicas y procedimientos cuidadosamente para obtener resultados
precisos y confiables.

[Link]ÓN DE HIERRO POR ESPECTROFOTOMETRÍA

ABSORCIÓN ATÓMICA
Preparación de la muestra: La muestra debe ser preparada adecuadamente para su análisis.
En general, esto implica la disolución de la muestra en un ácido para liberar el hierro
presente. Se pueden utilizar ácido sulfúrico, ácido clorhídrico o ácido nítrico, dependiendo
de la naturaleza de la muestra.
1. Preparación de la solución patrón de hierro de 100 ppm
2. Prepare una serie de soluciones estándar de hierro de concentraciones conocidas de sal
de Mohr en un rango de 0,1-50 ppm, utilizar las siguientes concentraciones: 0.1, 0.2,
0.5, 1, 2, 5, 10, 20, 50 ppm. Enrasar con ácido sulfúrico 10%v/v
Tratamiento de la muestra
1. Filtrado: se recomienda filtrar la muestra para eliminar cualquier partícula sólida que
pueda interferir con la medición del hierro. Se puede utilizar un filtro de poro fino (0,45
μm) para retener partículas suspendidas y obtener una muestra clara.

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2. Ajuste del pH: es importante ajustar el pH de la muestra antes de la disolución de la
muestra para asegurar la estabilidad de los complejos de hierro. Para la mayoría de las
aplicaciones, se ajusta el pH a un valor de 1-2 mediante la adición de ácido clorhídrico
o ácido sulfúrico.
3. Disolución: después de ajustar el pH, se disuelve la muestra en ácido clorhídrico o
ácido nítrico, generalmente a una concentración de 1-10% (v/v). Es importante
asegurarse de que la muestra se disuelva completamente para liberar todo el hierro
presente.
4. Digestión: en algunos casos, puede ser necesario realizar una digestión para asegurar
que el hierro esté completamente disuelto. La digestión implica la descomposición de la
muestra a través de una reacción química para disolver completamente los componentes
de la muestra.
5. Dilución: después de la disolución o la digestión, la muestra puede ser diluida a una
concentración apropiada para la medición del hierro. La dilución puede ser necesaria
para asegurar que la concentración de hierro caiga dentro del rango lineal de la curva de
calibración.
Una vez que se ha tratado la muestra, se puede medir la concentración de hierro utilizando
un espectrómetro de absorción atómica. Es importante asegurarse de que la muestra se haya
tratado adecuadamente para obtener resultados precisos y confiables en la determinación de
hierro.
5.6. DETERMINACIÓN DE DUREZA CÁLCICA, MAGNÉSICA Y TOTAL POR
TITULACIÓN COMPLEXO MÉTRICA.
● Materiales:

● Solución valorada de EDTA (disódico de etilendiaminotetraacético) 0.01 M

● Solución buffer (pH 10) de hidróxido de amonio y cloruro de amonio
● Indicador de eriocromo negro T (Eriochrome Black T) en polvo
● Bureta de 50 ml
● Matraz aforado de 250 ml
● Pipetas volumétricas de 25 ml y 10 ml

● Procedimiento:

1. Preparar la solución buffer: disolver 5.74 g de cloruro de amonio en 5,70 ml de agua

destilada, agregar 5,70 ml de hidróxido de amonio concentrado y completar el volumen
hasta 200 mL con agua destilada. Mezclar bien.

2. Preparar la solución de EDTA 0.01 M: disolver 0,7444 g de EDTA disódico en 200 mL

de agua destilada.

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3. Preparar la solución indicadora: disolver 0.2 g de eriocromo negro T en 100 ml de agua
destilada.

4. Tomar una muestra de agua a analizar de 25 ml y agregar 10 ml de la solución buffer. Si

la muestra es turbia, filtrarla antes de proceder.

5. Añadir 5 gotas de la solución indicadora de eriocromo negro T. El indicador dará una

coloración azul.

6. Titular con la solución de EDTA 0.01 M desde la bureta hasta que el color azul del
indicador cambie a rosa pálido. Agregar los primeros ml de EDTA lentamente y agitar
la solución.

7. Registrar el volumen de solución de EDTA gastado en la bureta.

8. Realizar un blanco con una muestra de agua destilada y repetir el procedimiento.

Cálculos:
● Calcular la dureza en mg/L de CaCO3
● Calcular dureza total
● Calcular dureza magnésica

6. TRATAMIENTO DE DESECHOS
Recolectar los desechos en un recipiente grande, medir el pH con papel indicador,
neutralizar según sea el caso y desechar por el desagüe .
7. BIBLIOGRAFÍA
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12 de marzo de 2023, de
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water using iodometric titration with iodine solution. Bangladesh Journal of
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11
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Inorganic Substances in Environmental Samples (EPA/600/R-99/064). U.S.
Environmental Protection Agency, Office of Research and Development.

12
 UNIVERSIDAD DEL VALLE NORMA: VERSIÓN:
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
FECHA DE REVISIÓN:
LABORATORIO DE ANÁLISIS INDUSTRIAL

ANÁLISIS DE CERVEZAS
ELABORADO POR:
Sara Cordoba,
REVISADO POR: APROBADO POR:
Karen Giraldo,
Nicolh Enriquez

1. OBJETIVOS
● Aplicar técnicas analíticas clásicas e instrumentales para la determinación de
diferentes componentes de la cerveza.
● Conocer las propiedades fisicoquímicas de la cerveza y comparar los resultados de
cada análisis realizado con las normas establecidas con el fin de determinar su grado
de calidad.
2. INTRODUCCIÓN

La cerveza tiene infinidades de variables y muchas formas de elaboración, que finalmente

dan lugar a un producto personificado, permitiendo clasificarlos en distintas familias,
además, proporcionan una información legal exigida. El Instituto Colombiano de Normas
Técnicas y Certificación ICONTEC, es el organismo nacional de normalización, según el
decreto 2269 de 1993; cuya misión es brindar soporte, desarrollo al productor y protección
al consumidor.

La determinación de cenizas es referida como el análisis de residuos inorgánicos que

quedan después de la ignición u oxidación completa de la materia orgánica de un alimento.
Es esencial el conocimiento básico de las características de varios métodos para analizar
cenizas así como el equipo para llevarlo a cabo para garantizar resultados confiables.

En la cromatografía de gases se separan sustancias gaseosas con base en su absorción o

partición en una fase estacionaria a partir de una fase gaseosa, con esta técnica se pueden
separar mezclas complejas; cuando se acopla con la espectrometría de masas como sistema
de detección, es posible la identificación virtualmente positiva de los evaluados con una
muy alta sensibilidad, creando un sistema analítico muy poderoso. En la cromatografía de
gases, los componentes de una muestra vaporizada se separan al ser distribuidos entre una
fase móvil gaseosa y una fase estacionaria líquida o sólida retenida en una columna. Al
realizar una separación por cromatografía de gases, la muestra es vaporizada e inyectada en
la parte superior de una columna cromatográfica. La elución ocurre por el flujo de una fase
móvil inerte gaseosa. En contraste con la mayoría de los tipos de cromatografía, la fase
móvil no interactúa con las moléculas del analito. La única función de la fase móvil es
transportar al analito a través de la columna.

La obtención de una cerveza de calidad también depende del control de parámetros

fisicoquímicos, principalmente pH y temperatura. El pH expresa el grado de acidez o de
alcalinidad de una solución, en la actualidad existen varias soluciones en el mercado para la
medición de pH. La forma más fiable es a través de equipos digitales que realicen el
análisis por potenciometría. La cerveza suele tener un pH de entre 4,1 y 4,6, que inhibe el
crecimiento de ciertos organismos, un pH más bajo puede indicar proliferación de bacterias
productoras de ácido, resultando cervezas amargas; Por lo tanto, la determinación del pH es
fundamental, tanto para la calidad del producto final como por legislación.

La espectrofotometría a 430 nm se utiliza para medir el color de la cerveza. La

espectrofotometría es una técnica que se utiliza para la determinación de varios parámetros
de calidad en la cerveza.

A430: absorbancia a 430nm que proporciona el equipo.

x: factor de dilución (si no está diluida la muestra x=1, si es dilución 1:1 x=2) Si se quiere
obtener el valor del color en unidades SRM, se utiliza la siguiente ecuación:

La relación entre ambas unidades sería:

Nota: para la realización de este análisis, es importante la turbidez, ya que, si es muy turbia,
se debe filtrar. Se considera que tiene un alto valor de turbidez cuando se obtenga una
absorbancia de 1/25. Para cervezas oscuras, la muestra debe diluirse, esa dilución se
aplicará en el factor x

Tabla 1. Estilo de cerveza según el color

3. MATERIALES Y REACTIVOS
 MATERIALES REACTIVOS

Equipo de Cromatografía de Gases 1-Butanol

Columna capilar Inno wax Etanol

Equipo de ultrasonido

Potenciómetro y soluciones
amortiguadoras estándares

Electrodo mixto (1)

Frasco lavador (3)

Escobillon

Matraz volumétrico de 100.00 mL (7)

Pipeta volumétrica de 0.5 mL (1); 1.00 mL

(1); 2.00 mL (1); 3.00 mL (1); 10.00 mL
(1).

Agitador, magnético y saca magneto

Espectrómetro UV-VIS

Vaso de 100 mL (2); 50 mL (3)

Cubeta para espectrómetro

Crisol (3)

Desecador (1)

Picnómetro (1)

4. PROCEDIMIENTO

TRATAMIENTO DE LA MUESTRA

En todas las determinaciones, las muestras de cerveza deben de estar descarbonatadas, de lo

contrario aún tiene rastros gaseosos podría interferir en los análisis . Para ello, es empleado
un baño de ultrasonido, donde es eliminado el gas ocluido en la disolución, debido a la alta
presión que golpea la pared de una burbuja, esta explota y dicha energía facilita el
rompimiento de los lazos entre las partículas.
DETERMINACIÓN DE CENIZAS

a. Tratamiento de crisol

Para controlar las posibles contaminaciones se debe realizar un previo tratamiento al crisol;
se debe lavar con suficiente agua y llevar al horno durante 1 hora a 525°C, retirar el crisol y
dirigirlo al desecador.

b. análisis de la muestra

Pesar el crisol de porcelana seco y limpio, adicionar 10 mL de cerveza en varias tandas,

evaporar lentamente en la plancha de calentamiento y calcinarla. Después de quemar toda
la muestra pase al mechero y quemarlo. (Guarde la muestra en un desecador sin taparlo),
luego introducir el crisol de porcelana en la mufla a una temperatura de 550 a 600 °C por
dos horas hasta la carbonización completa de la muestra y obtención de peso constante.
(Colocar la muestra en un desecador).

Reportar el resultado como porcentaje en masa de cenizas en la cerveza. Utilice el dato de

la gravedad específica de la cerveza para este cálculo.

DETERMINACIÓN DE COLOR

Con la muestra acondicionada, se prepara el equipo seleccionando la longitud de onda a la

que se va realizar el análisis, en este caso 430nm. Se procede a llenar una cubeta con la
muestra a analizar; se necesita disponer de un blanco, para ello utilizara agua desionizada.
el equipo proporciona valores de absorbancia por lo tanto se deberán realizar, la siguiente
ecuación, que define la unidad de EBC como 25 veces la absorbancia.

DETERMINACIÓN DE GRAVEDAD ESPECÍFICA

Pesar un picnómetro vacío y seco, luego pesarlo con agua destilada y por último con la
muestra de cerveza descarbonatada. Determine la gravedad específica a la temperatura
ambiente como la relación de los pesos de la muestra y del agua. Tenga en cuenta la
densidad exacta del agua a la temperatura ambiente para realizar el cálculo.

DETERMINACIÓN DE pH

El pH es una medida de acidez o alcalinidad, este indica la concentración de iones de

hidrógeno presentes en determinadas bebidas alcohólicas.

a. Calibración de pH-metro

1. Presione (Cal)

2. Enjuague el electrodo de pH con agua destilada

3. En un vaso de precipitado de 25 mL tome 20-25 mL de solución Buffer pH 4,0, e
introduzca el electrodo de en el vaso con la solución Buffer.

4. Pulse la tecla (start o enter) y espere que el valor del pH en el medidor se estabilice,
cuando deje de parpadear y presione (aceptar) para aceptar el valor de pH mostrado

5. Presione (Siguiente) para pasar el siguiente Buffer y repita el procedimiento 2-4,

empleando las soluciones Buffer pH 7,0 y 10,0.

6. Si se desea terminar con la calibración, presione (start o enter), para poder visualizar el
resumen de la calibración incluyendo el % de la pendiente promedio de la calibración. En
este caso el valor de la pendiente debe estar entre 95-105%

b. análisis de la muestra

A continuación, se vierte, cantidad suficiente de analito en un vaso precipitado, teniendo en

cuenta el correcto tratamiento de la muestra. Los electrodos deben quedar sumergidos.

DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE ETANOL MEDIANTE

CROMATOGRAFÍA DE GASES

a. Preparación de curva de calibración y muestra

En matraces de 100.00 mL, preparar soluciones patrón para realizar una curva de
calibración de etanol en un rango de 0.5% a 3.0% (v/v); adicionalmente, agregar a cada
matraz 1.00 mL del estándar interno 1-butanol y enrasar con agua desionizada.

La muestra también deberá ser preparada en un matraz de 100.00 mL; se debe tomar una
alícuota respectiva a la muestra, adicionalmente agregar 1.00 mL del estándar interno y
enrasar con agua desionizada.

b. Cromatógrafo de gases

Encender el cromatógrafo de gases, asegurarse que la columna se encuentra instalada y con

suministro de fase móvil. Programar las condiciones de operación tales como temperatura
de inyector, temperatura de columna, gas de arrastre, detector, presión de hidrógeno y
presión de aire.

Identificar los tiempos de retención correspondientes al etanol y al estándar interno,

inyectando 0.5 μL de una solución de cada alcohol, preparada de forma cualitativa.
Inyectar 1.0 μL de cada solución estándar y de la muestra preparada.
5. TRATAMIENTO DE DESECHOS

Los desechos generados deben ser recolectados en un recipiente, medir el pH con papel
indicador, neutralizar y descartar por el vertedero.
BIBLIOGRAFÍA

I. Bernal de Ramírez, Análisis de Alimentos, 1a ed. Santa Fé de Bogotá: Academia

Colombiana de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales, 1993.

H.D Belitz, W. Grostch, Química de los Alimentos, 2a ed. Zaragoza: Editorial Acribia,
1992.

T. G Austin, Manual de Procesos Químicos en la Industria, 5a ed. México: Mc Graw-Hill,

1989.

Instituto Colombiano de Normas Técnicas, Normas Técnicas Colombianas NTC 86 y 79.

Bogotá: ICONTEC.

[Link]ó[Link]/RevistaN+Dmarzo2002/Vcongreso_publicaciones/cerveza/libroCERVE
ZA_6.pdf
 UNIVERSIDAD DEL VALLE NORMA: VERSION:
DEPARTAMENTO DE QUIMICA

LABORATORIO DE QUÍMICA INDUSTRIAL FECHA DE REVISIÓN

ANÁLISIS DE ALIMENTOS

ELABORADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR:

• Carlos Cuevas Harold Humberto Diaz

• Sheryl Ruiz

1. OBJETIVOS

• Expresar e interpretar con honestidad y ética profesional los resultados del análisis de un
componente químico en una matriz alimentaria, comparando los resultados obtenidos con
aquellos que deben esperarse, según las normas de calidad establecidas o los valores
reportados en la literatura, arribando a conclusiones acerca de las posibles causas que
condujeron a dicho resultado.
• Los análisis en comestibles se hacen con el objetivo de determinar o bien encontrar
sustancias extrañas que puedan suponer un peligro para el consumidor.

2. INTRODUCCIÓN
El Análisis de Alimentos es la disciplina que se ocupa del desarrollo, uso y estudio de los
procedimientos analíticos para evaluar las características de alimentos y sus componentes.
Esta información es crítica para el entendimiento de los factores que determinan las
propiedades de los alimentos, así como la habilidad para producir alimentos que sean
consistentemente seguros, nutritivos y deseables para el consumidor.
La importancia de la alimentación como necesidad vital es un hecho incuestionable conocido
por todos. Si bien es importante comprender esta verdad, también es necesario conocer como
nos alimentamos, es decir cuál es la calidad de los alimentos que ingerimos, sobre todo por
la gran relación que se ha demostrado que tiene la alimentación con la salud. El impacto y
alcance de los métodos químicos de análisis en la producción y la investigación es enorme.
Los diferentes campos de aplicación en el área de los alimentos, arriba referidos, constituyen
tan solo algunos ejemplos de la extraordinaria importancia de la química analítica como
herramienta indispensable para el desarrollo de investigaciones que pueden conllevar a
nuevos hallazgos y descubrimientos en las ciencias alimentarias.
3. MATERIAL Y REACTIVOS
1 caja Petri 2 Macro pipeteador
1 Desecador 3 Pinza para crisol
2 Espátula 1 Mortero
2 Frasco lavador 1 Mazo
1 Escobillón 2 Baño maría
1 Mechero bunsen 1 Matraz de 600 mL fondo plano
4 Crisol de porcelana 1 Condensador para matraz
2 Vasos de 100 mL 1 Crisol de filtración
1 Embudo de vidrio 1 Matraz de 250 mL
4 Vaso de 50 mL 1 Embudo Buchner
1 Matraz de 50 mL Éter de petróleo anhidro con p.e. de 35-
60°C
2 Bureta de 25 mL Ácido clorhídrico concentrado
2 Pinza para bureta Ácido nítrico concentrado
15 Matraz de 100 mL con tapa Alcohol etílico al 95%
1 Aparato de extracción soxhlet Antiespumante (alcohol octil)
1 Algodón absorbente Sal de Mohr
2 Papel filtro Whatman No. 2 o su Ácido sulfúrico (95-97%)
equivalente
1 Capsula de porcelana SOLUCIONES
1 Vidrio reloj Ácido sulfúrico 1,25%
2 Probeta de 10 mL Hidróxido de sodio 1,25%
1 Matraz de 500 mL Ácido clorhídrico 1%
1 Pipeta volumétrica de 2, 4, 10, 20 y 30 mL Ácido clorhídrico 2M
4. PROCEDIMIENTO
La practica se realiza de la siguiente forma: En primera instancia se evaluará la muestra
mediante un análisis de humedad, análisis del contenido de cenizas, análisis de contenido de
grasas, para procedera realizar la determinación de calcio (Ca) y Hierro (Fe) por el método
de absorción atómica.

4.1 ANÁLISIS DE HUMEDAD

1. En una caja Petri previamente tratada y pesada, pesar 5.0 gramos de la muestra.
2. Introducir la muestra en el horno a una temperatura 125°C por dos horas.
3. Se deja enfriar en el desecador y se pesar hasta que no se presenten variaciones en el
peso.
4.2 ANÁLISIS DEL CONTENIDO DE CENIZAS
1. Se Pesan de 3.0 a 5.0g ± 0,1g de muestra en un crisol de porcelana previamente
tratado
 2. Se calienta poco a poco el crisol en un mechero Bunsen procurando que el
calentamiento sea uniforme para lograr la carbonización completa de la muestra.
3. Cuando ya no se desprendan vapores, se introduce el crisol a la mufla a una
temperatura de 550°C (rojo sombra) hasta que las cenizas de la muestra queden gris
claro.
4. Se deja enfriar el crisol con la muestra en un desecador y se pesa hasta obtener un
peso constante.

4.3 DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE GRASA

1. Se pesa el matraz de extracción limpio y seco. Posteriormente, se pesa el papel filtro
2. Se pesan 5,0 g de la muestra triturada (molida y seca), sobre el papel filtro. Se coloca
en un cartucho de extracción en tal forma que no haya perdida de materia.
3. En la parte superior del cartucho se coloca un trozo de algodón absorbente,
previamente desengrasado para distribuir el solvente que gotea sobre la muestra.
4. Se procede a realizar la extracción con unos 50 mL de éter de petróleo anhidro.
5. Se calienta en baño maría de forma que el disolvente gotee desde el condensador al
centro del cartucho a una velocidad de por lo menos 300 gotas por minutos.
6. Se mantiene constante el volumen del disolvente y se continúa la extracción durante
3 horas.
7. Se verifica el agotamiento de la materia grasa repitiendo las extracciones en periodos
de 30 minutos como mínimo.
8. Dejar enfriar y separar el matraz de extracción, el papel filtro se deja en la campana
de durante 20 minutos para evaporar el éter de petróleo y se elimina totalmente
introduciendo el papel filtro sobre un vidrio reloj limpio y seco en el horno durante
una hora.
9. Deje enfriar el papel filtro en un desecador y se pesar con aproximación en
miligramos. Guardar la muestra libre de grasa para la determinación de fibra cruda.

DETERMINACIÓN DE CALCIO POR A.A

1. Pesar entre 0.1g a 0.2g de muestra y se pasan a un crisol de porcelana previamente tratado
2. La muestra pesada se lleva a cenizas a 550°C en mufla.
3. Se enfría y se agrega a las cenizas 25mL de una mezcla 2:1 de HCl:HNO3.
4. Se Filtra y se lleva con agua destilada a volumen un balón de 100mL.
5. Preparar una disolución de óxido de lantano al 1% en lantano, para esto, pesar 1,1727 g de
óxido de lantano
6. Adicionar 5 mL de HCl concentrado hasta disolución completa, pasar a un balón aforado de
100 mL y completar con agua.
7. Preparar 100 mL de una disolución stock de Calcio de 1000 ppm (preparada a partir de CaCO3
analítico previamente secado, se pesa en un vaso de precipitados de 50 mL la cantidad de
carbonato de calcio seco, se adicionan 5 mL de HCl concentrado hasta disolución completa,
se adicionan 50 mL de agua y se pasa a un balón aforado de 100 mL y se completa al aforo
con agua)
 8. A partir de esta disolución preparar una dilución para obtener una disolución de 10 ppm.
9. Pasar a 8 balones aforados de 100 mL, 1 mL de disolución de lantano al 1%, el primero llevar
al aforo con agua destilada
10. A dos de ellos se adicionan 10 mL de disolución de muestra problema y a los otros adicionar
disolución de calcio de 10 ppm para tener estándares de concentración 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 y 2,5
ppm de Ca.
11. Leer en el equipo de absorción atómica las absorbancias tanto de la muestra problema diluida
como de los estándares,

DETERMINACIÓN DE HIERRO POR A.A

1. Preparación de la solución de ácido clorhídrico 2M: se diluye 8mL de HCl en 50ml
de agua destilada

2. Preparación de la solución patrón de Hierro 1000 ppm: se pesan exactamente

0,7022 g de sal de Mohr, se diluyen en agua destilada, se añade 0,5 mL de ácido
sulfúrico y se diluye hasta 100 mL con agua destilada.

3. Solución intermedia de Hierro 50 ppm: se miden con una pipeta 5mL de la solución
patrón en un matraz aforado de 100mL y se diluye a volumen con agua destilada.
4. Soluciones de trabajo: Se transfieren con una pipeta 2, 4, 10, 20 y 30 mL de la
solución intermedia a matraces aforados de 100mL.
5. Se diluye a volumen con agua destilada. Estas soluciones contienen 1, 2, 5, 10 y 15
ppm de hierro respectivamente, y se procede a leer las absorbancias.

6. Tratamiento de la muestra: En crisol previamente tarada, se pesa la muestra del

alimento. Se seca en la estufa a una temperatura entre 100 y 110ºC hasta la
eliminación completa de la humedad en la muestra.
7. Se calienta cuidadosamente en el mechero con la llama muy suave al comienzo y
luego con la llama más fuerte y el crisol inclinado hasta que la muestra se carbonice
completamente, se tapa el crisol y se coloca en la mufla a 525ºC y se incinera hasta
que se obtenga un residuo (cenizas) blanco, gris pálido o amarillento.
8. Se deja enfriar y se humedecen las cenizas con una pequeña cantidad de agua
destilada. Se añaden 5mL de la solución de HCl 2M y se hierve en baño maría. Hasta
que las cenizas estén totalmente disueltas.
9. Se transfiere cuantitativamente a un matraz aforado de 50mL, se enfría a 20ºC y se
hacen diluciones con agua destilada hasta lograr concentraciones dentro del rango de
sensibilidad del equipo.
10. Se calibra el instrumento en condiciones óptimas de trabajo para el elemento hierro.
Se aspira la solución de la muestra con agua destilada entre cada lectura hasta obtener
un cero estable y se determina la absorción.
BIBLIOGRAFÍA

• Héctor Zumbado Fernández. Analisis químico de los alimentos, método clásico.

Instituto de farmacia y alimentos. Universidad de la Habana. 2004
• Leticia González G. Arq. Adrián Raúl Arroyo B. Facultad de química UNAM. Enero
2011
 UNIVERSIDAD DEL VALLE PREPARADO POR:
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANGIE PAOLA MORENO DURÁN
ANA MARIA LASSO BAHAMON

LABORATORIO DE ANALISIS PRACTICA No. 4.

INDUSTRIAL ANALISIS DE DETERGENTES Y
JABONES

FECHA REVISADO POR:

OBJETIVOS

1. Obtener un conocimiento claro sobre la importancia de los productos de limpieza en

polvo y sus diferentes modos y mecanismos de acción.

2. Mediante el análisis de los principales componentes de un detergente en polvo determinar

el tipo de producto y su incidencia en el medio ambiente.

3. Manejo de las diversas técnicas analíticas clásicas e instrumentales para la determinación

de la composición del producto.

INTRODUCCION
Aquellos compuestos orgánicos de origen animal o vegetal en agua, pero solubles en detergentes
orgánicos no polares se clasifican como lípidos. Estos comprenden principalmente las grasas y
las [Link] Jabonosos:la hidrolisis básica de un triglicérido produce glicerol y sales
de ácidos carboxílicos, las cuales se conocen como jabones. Por procedimientos sintéticos se han
preparado detergentes distintos a los jabones, pero que se parecen a estos en su carácter
anfipático, con una cadena larga de hidrocarbonada no polar que disuelve lípidos (material
grasoso), y un externo polar en agua. El uso de detergentes no jabonoso es ventajoso por la
solubilidad en agua de los sulfatos y sulfonatos correspondientes, incluyendo los de calcio y
magnesio. Los detergentes jabonosos tiene el problema de la baja solubilidad acuosa de las sales
cálcicas y magnésicas de los ácidos carboxílicos, lo que hace que un jabón se pone en contacto
con agua que contenga sales cálcicas o magnésicas disueltas (aguas duras), este se corte por
precipitación del carboxilato de calcio o de magnesio y se inhiba a su acción limpiadora.

Por otra parte, los detergentes no-jabonosos pueden originar serios problemas de contaminación
si se usan aquellos que poseen cadenas laterales ramificadas, los cuales no son biodegradables.
Los detergentes de cadenas laterales lineales son biodegradables y no presentan tal problema.
MATERIAL SOLUCIONES

2 vidrio de reloj Estándar silicio 1000 ppm

1 desecador
2 vasos de 250 mL
1 probeta de 100 mL
1 espátula
1 agitador magnético
1 plancha
1 equipo de filtración
1 pHmetro
1 electrodo mixto
1 matraz de 100 mL
2 vasos de 50 mL
2 probetas de 10 mL
1 probeta para tensoactivo
2 bureta de 25 mL
2 pinza para bureta
1 soporte universal
6 matraces de 100 mL
1 frasco lavador
1 tina

Lavar todos los materiales con ácido clorhídrico o ácido nítrico al 1.0 M
Lavar el material con jabón solamente cuando se queden pegados residuos orgánicos

ANÁLISIS DE HUMEDAD
Pesar 1,0 g ± 0,1 mg de la muestra en un vidrio de reloj previamente pesado, llevar al horno por
espacio de 2 horas o hasta peso constante, sin olvidar colocar la muestra en el desecador para que
ésta se enfríe antes de cada pesada. Hacerlo por duplicado.

DETERMINACIÓN DE pH
Pesar 1,0 g de la muestra en un vaso de 250 mL y adicionar 100 mL de agua destilada agitando
continuamente por espacio de 15 minutos, dejar reposar durante una hora y con el pHmetro,
previamente calibrado*, medir el pH.

*Calibración pHmetro:
1. El sistema de medida del pH debe estar funcionando durante al menos 30 minutos antes de
iniciar el proceso de calibración.
2. Ajuste de la compensación manual de temperatura en el valor al cual será realizada la puesta a
punto de las soluciones tampón. Este valor se determina midiendo con el termómetro la
temperatura de las soluciones tampón.
3. Examinar el electrodo para comprobar que no existe defecto alguno o presencia de burbujas de
aire en su interior, en el caso de que las hubiere sacudir el electrodo de forma similar a los
termómetros clínicos para bajar la temperatura.
4. Limpiar el electrodo exteriormente con abundante agua destilada.
5. Sumergir el electrodo (o electrodos si no son combinados) en la solución tampón a
temperatura controlada. La solución utilizada debe ser la de pH más próximo al pH interno del
electrodo de vidrio, que suele ser pH 7.
6. Esperar el equilibrio térmico durante aproximadamente 1 minuto. Una vez estabilizada la
lectura, accionar el mando de punto neutro calibración-estandarización-asimetría hasta conseguir
una indicación del pH de la solución tampón.
7. Retirar el electrodo/s de la disolución y lavarlas con abundante agua destilada o con la
solución tampón que será utilizada a continuación. Pueden secarse los electrodos sin frotar.
8. Sumergir el electrodo en otro vaso que contenga otra disolución tampón de pH diferente a la
anterior (suele utilizarse pH 4).
9. Esperar el equilibrio térmico durante aproximadamente 1 minuto. Una vez estabilizada la
lectura, accionar el mando de pendiente-escala para ajustar la indicación al valor de pH de la
solución tampón utilizada.
De esta forma el aparato queda ajustado en toda su escala y listo para realizar medidas de pH
sobre sustancias de pH desconocido. La escala ha quedado ajustada en dos puntos de la recta que
relaciona los potenciales (mV) generados por el electrodo en función del pH de las disoluciones
en que se sumerge. Si se requiriese el ajuste empleando además otro punto de calibración (por
ejemplo, pH 9) deberán repetirse los puntos de 7 a 9.

DETERMINACIÓN DE SILICATOS SOLUBLES

A partir de una solución de 1000 ppm de silicio, preparada con silicato de sodio Na2SiO3,
adicionar a matraces de 100 mL los volúmenes adecuados para preparar estándares de Sí de 30,
50, 100, 150 y 200 ppm. Medir las absorbancias de los estándares y de la muestra filtrada en el
análisis anterior en el espectrofotómetro de absorción atómica con llama de acetileno-óxido
nitroso. Expresar el resultado como porcentaje (m/m) de Na2SiO3 en la muestra de detergente.
BIBLIOGRAFÍA

Instituto Colombiano de Normas Técnicas, Normas Técnicas Colombianas NTC 512, 563, 785,
985, 1004, 1010, 1111 y 1785. Bogotá: ICONTEC.

G.F. Longman, The analysis of detergents and detergent product. Estados Unidos: Ediciones
John Wiley & Sons, 1975.

M. Geoffrey, The modern Soap and detergent Industry, 2a ed. Inglaterra: The Techical Press
Ltda, 1951.

[Link]

[Link]

PRACTICA No. 4. ANÁLISIS DE JABONES

OBJETIVOS

1. Conocer la importancia de los productos de limpieza y modo de acción.

2. Mediante los diferentes métodos analíticos, tanto clásicos como instrumentales, tener las
herramientas suficientes para poder determinar las características de calidad del jabón analizado.
MATERIAL SOLUCIONES

3 vidrio de reloj HCl 0,1 M (estandarizar)

2 erlenmeyer de 250 mL NaOH 0,1 M (estandarizar)
2 espátula KOH 0,2 M (estandarizar)
1 termómetro NaOH 1 M (estandarizar)
2 baño maría H2SO4 1:3 (ácido: agua)
3 vasos de 100 mL NaCl al 10% p/v
2 probeta de 100 mL
1 equipo de filtración
2 agitador magnético
1 plancha
1 balón de 500 mL
3 vasos de 50 mL
2 probetas de 10 mL
1 crisol Gooch
3 vaso de 250 mL
1 vaso de 25 mL
1 vaso de 150 mL
1 embudo de separación de 250 mL
1 embudo de separación de 500 mL
1 gotero
1 bureta 50 mL
1 desecador
1 pinza para bureta
1 soporte universal
1 pipeta volumétrica de 0,5 mL
1 frasco lavador
1 tina

Lavar todos los materiales con ácido clorhídrico o ácido nítrico al 1.0 M
Lavar el material con jabón solamente cuando se queden pegados residuos orgánicos

DETERMINACIÓN DE MATERIA INSOLUBLE EN ALCOHOL

En un vaso de 250 mL pesar 1,5000 g de muestra y disolver en 100 mL de alcohol etílico al 96%.
Calentar a 80°C en un baño de maría con agitación durante 10 minutos y filtrar en caliente con
un papel filtro previamente pesado. Secar al calor de la estufa sobre un vidrio de reloj
(preferiblemente en una esquina de ella, para evitar incineración). Llevar a un desecador y pesar
asegurándose de peso constante. Reportar el resultado como porcentaje de materia insoluble en
alcohol.
DETERMINACIÓN DE MATERIA INSOLUBLE EN AGUA

En un vaso de 250 mL pesar 1,5000 g de muestra y disolver en 100 mL de agua destilada y

proceder de igual forma que el método anterior.

DETERMINACIÓN DE ÁLCALI O ÁCIDO LIBRE

Pesar 2,0000 g de muestra y transferir a un vaso de precipitado de 250 mL, adicionar 100 mL de
alcohol etílico neutro y tapar el vaso con un vidrio de reloj. Calentar en un baño maría agitando
frecuentemente hasta disolución de la muestra. Filtrar a 60 °C con ayuda de succión en un crisol
tipo Gooch, Lavar tres veces usando en cada operación 50 mL de alcohol etílico neutro. Recoger
todo el filtrado en un Erlenmeyer de 250 mL y calentar en un baño maría hasta ebullición, luego
agregar 0,5 mL de fenolftaleína. Titular* inmediatamente la solución con HCl 0,1 M
estandarizada**, si es básica, o con NaOH*** 0,1 M patrón si la solución es ácida. Expresar el
resultado como porcentaje en masa de NaOH en el jabón o porcentaje en masa de ácidos libres
(como ácido oleico).

*Procedimiento de titulación:
1. Colocar la bureta en una pinza para bureta, con el vástago hacia abajo y la llave de paso
cerrada. La graduación debe quedar hacia el operador, para poder leer los enrases.
2. Colocar un embudo apropiado.
3. Agregar una pequeña alícuota de titulante, que no sobrepase la mitad de su volumen.
4. Abrir rápidamente la llave de paso, permitiendo que el líquido pase por el vástago y lo llene.
Controlar que no queden burbujas.
5. Cerrar la llave de paso y completar el volumen restante con titulante, llenando la bureta por
sobre el aforo de cero.
6. Retirar el embudo y secar la bureta por fuera.
7. Enrasar abriendo la llave de paso suavemente.
8. En un erlenmeyer colocar el volumen apropiado de solución del analito, de acuerdo con la
bureta que utilizará (si usamos una bureta de 25 mL, el volumen será 10,0 mL).
9. Colocar 1-2 gotas de indicador.
10. Colocar el erlenmeyer con el analito bajo el vástago de la bureta.
11. Colocar un papel o fondo blanco bajo la muestra. Con la mano hábil, rotar constantemente el
erlenmeyer mientras con la otra procede a abrir la llave de paso, dejando caer el titulante muy
lentamente. Durante este proceso, la vista estará en el erlenmeyer, atento color del indicador.
12. Cuando se observe la aparición del color en la solución, enlentecer el goteo de titulante.
13. Cuando el color permanece en toda la solución analito, cerrar la llave de paso y anotar el
volumen gastado. El color debe permanecer por lo menos 10 segundos.

**Estandarización de HCl 0.1 M:

1. Pesar exactamente (en la balanza analítica) entre 0.20 y 0.25 g de Na2CO3 sobre un vaso de
precipitado de 25 mL
2. Pasar la cantidad pesada a un erlenmeyer de 250 mL, y disolver con unos 25 mL de agua
destilada.
3. Lavar con agua destilada el vaso de precipitado y añadir al erlenmeyer.
4. Añadir 2 ó 3 gotas de disolución de naranja de metilo.
5. Valorar con la disolución de HCl 0.1M, lentamente y con agitación, hasta que la disolución
adquiera una tonalidad del indicador de amarillo a rojo naranja.
6. Anotar el volumen V (ml) gastado y calcular la concentración final

***Estandarización de NaOH 0.1M:

1. Pesar exactamente (en la balanza analítica) entre 0.40 y 0.50 g de ftalato ácido de potasio
sobre un vaso de precipitado de 25 ml. Previamente, es conveniente secar el ftalato de potasio
durante 30 minutos a 110ºC y dejarlo enfriar en un desecador.
2. Pasar la cantidad pesada a un erlenmeyer de 250 ml y disolver con unos 25 ml de agua
destilada.
3. Lavar con agua destilada el vaso de precipitado y añadir al erlenmeyer.
4. Añadir 2 ó 3 gotas de solución de fenolftaleína.
5. Valorar con la disolución de NaOH 0.1M, lentamente y con agitación, hasta que la disolución
adquiera una tonalidad rosa persistente.
6. Anotar el volumen V (ml) gastado y calcular la concentración final

DETERMINACIÓN DE ÁCIDOS GRASOS LIBRES

Pesar 5.0000 g de jabón en un Erlenmeyer de 250 mL y disolver en 50 mL de alcohol neutro, si
|es preciso se debe calentar en baño maría para que solubilice completamente. Transferir la
solución a un embudo de separación de 250 mL con tapa. Enjuagar el erlenmeyer con 50 mL de
agua caliente y transferirla al embudo de separación, se deja enfriar a temperatura ambiente y se
le agrega 50 mL de éter de petróleo. Luego agitar el embudo vigorosamente por espacio de un
minuto y dejar en reposo hasta que las capas se separen. Se desaloja el éter de petróleo a otro
embudo de separación de 500 mL y se repite la extracción* tres veces en forma similar usando
50 mL de éter de petróleo en cada extracción. Lavar los extractos combinados cuatro veces con
25 mL de alcohol etílico neutro al 10% agitando vigorosamente cada vez.
Transferir el éter lavado a un balón de 500 mL limpio y seco, previamente pesado. Filtrar si es
necesario y evaporar el éter hasta un volumen aproximado de 50 mL en campana de extracción.
Adicionar 50 mL de alcohol etílico neutro caliente, añadir cuatro gotas de solución de
fenolftaleína al 1% y titular** con KOH 0,2 M estandarizada*** hasta un color rosado
permanente. Reportar el resultado como porcentaje de ácidos grasos libres expresado como ácido
oleico.

* Extracciones con solventes se hace en campana (embudo de separación)

**Procedimiento de titulación: Revisar el proceso descrito anteriormente en determinación de
Álcali o Ácido libre
*** Estandarización de KOH 0.2M:
1. Pesar exactamente (en la balanza analítica) entre 0.40 y 0.50 g de ftalato ácido de potasio
sobre un vaso de precipitado de 25 ml. Previamente, es conveniente secar el ftalato de potasio
durante 30 minutos a 110ºC y dejarlo enfriar en un desecador.
2. Pasar la cantidad pesada a un erlenmeyer de 250 ml y disolver con unos 25 ml de agua
destilada.
3. Lavar con agua destilada el vaso de precipitado y añadir al erlenmeyer.
4. Añadir 2 ó 3 gotas de solución de fenolftaleína.
5. Valorar con la disolución de KOH 0.2M, lentamente y con agitación, hasta que la disolución
adquiera una tonalidad rosa persistente.
6. Anotar el volumen V (ml) gastado y calcular la concentración final

● DETERMINACIÓN DE ÁCIDOS GRASOS LIBRES TOTALES, ÁLCALI

COMBINADO Y JABÓN ANHIDRO (Jabón real)

Pesar 2,0000 g de jabón en un vaso de precipitado de 250 mL, adicionar 150 mL de agua
destilada caliente, colocar el vaso en un baño de maría hasta que la muestra se disuelva.
Transferir cuantitativamente a un embudo de separación de 500 mL y agregar unas gotas de
indicador naranja de metilo, adicionar H2SO4 1:3 (ácido: agua) a la solución hasta que se obtenga
un pH ácido (color rosado) y los ácidos grasos sean totalmente liberados, enfriar el contenido del
embudo. Dejar que los ácidos grasos se separen en una capa clara y adicionar 50 mL de éter de
petróleo, tapar e invertir el embudo varias veces y luego agitarlo en forma vertical. Precaución:
durante la operación de agitación liberar la presión dentro del embudo a intervalos frecuentes
como medida de seguridad.
Transferir la capa inferior acuosa a otro embudo de separación. Hacer otras tres extracciones más
a la capa acuosa en forma similar, utilizando porciones de éter de 30 mL, y reunir todas las
porciones etéreas en el primer embudo. Lavar el extracto etéreo con varias porciones de 10 mL
de solución de NaCl al 10%, en el embudo de separación, hasta que los lavados sean neutros al
naranja de metilo. Si se encuentra algún material insoluble en el extracto, se debe filtrar y lavar
el papel con éter para remover toda la materia grasa adherida.
Se transfiere el extracto etéreo a un erlenmeyer de 250 mL previamente pesado. En un baño
maría a 60 °C y en campana de extracción evaporar el éter*, luego de remover algún residuo de
éter en el baño maría, introducir el erlenmeyer al horno a una temperatura de 80 °C hasta peso
constante, anotar este dato. Con el peso obtenido, calcular el porcentaje de ácidos grasos totales
(AGT) en la muestra de jabón utilizada, guardar el recipiente.
Para la determinación del álcali combinado y jabón anhidro, adicionar 50 mL de alcohol neutro
al erlenmeyer que contiene los AGT y calentar en un baño maría hasta disolución completa.
Luego adicionar unas tres gotas de indicador fenolftaleína y titular con solución de NaOH 1,0 M
estandarizada hasta aparición de un color rosa tenue permanente.
Calcular el álcali combinado como porcentaje de Na2O de la siguiente manera:

% Na2O= mL de NaOH x M x 0.031** x100/ Peso muestra de jabón

Calcular el jabón anhidro de la siguient forma:

% de jabón sódico anhidro = % AGT + mL de NaOH x M x 0.022*** x 100/Peso
muestra de jabón

* El éter de petróleo lo pueden recuperar utilizando un sistema de tubo Soxhlet.

** Peso equivalente según la reacción 2RCOONa → (RCO)2O + Na2O
***Factor para jabón sódico anhidro que corresponde a las gramos de sodio menos los gramos
de H+ (a los AGT se les debe sustraer el H y adicionar Na)
Si desea expresar el jabón anhidro en forma potásica, debe usar el factor 0.038 en lugar del factor
0.022 de la expresión

BIBLIOGRAFÍA

Instituto Colombiano de Normas Técnicas, Normas Técnicas Colombianas NTC 514, 546, 609,
760, 823, 875, 876, y 1004. Bogotá: ICONTEC.

M. Geoffrey, The modern Soap and detergent Industry, 2a ed. Inglaterra: The Techical Press
Ltda, 1951.

[Link]
 UNIVERSIDAD DEL VALLE NORMA: VERSIÓN:
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
FECHA DE REVISIÓN:
LABORATORIO DE ANALISIS INDUSTRIALES

ANÁLISIS DE FERTILIZANTES
ELABORADO POR:
REVISADO POR: APROBADO POR:
Joel Muñoz y Juan Piñeiro

1. MÉTODOS

● Determinación de fósforo por espectrofotometría UV.

● Determinación de nitrógeno total por método Kjeldahl.
● Determinación de %Humedad.
● Determinación de acidez o basicidad libre.

2. OBJETIVOS

● Aplicar diferentes métodos de análisis industrial para la cuantificación de diversos

nutrientes en un fertilizante.
● Evaluar la precisión y exactitud de los componentes de la muestra conforme a lo
establecido en los estándares de calidad.

3. INTRODUCCIÓN
La fertilización es una de las prácticas más importantes en la agricultura moderna, los fertilizantes
son encargados de proporcionar a las plantas los nutrientes necesarios para su crecimiento y
desarrollo, lo cual beneficia a la productividad de los cultivos. Es importante resaltar que para lograr
una fertilización adecuada es elemental conocer el contenido nutricional del fertilizante a utilizar, ya
que cualquier deficiencia o exceso de nutrientes puede afectar negativamente el desarrollo de las
plantas. Por ello, se hace necesario determinar a través de uno o varios análisis químicos la cantidad
de nutrientes presentes, como el nitrógeno, fosforo y potasio; con ello se busca evaluar la calidad de
los fertilizantes para así poder sugerir recomendaciones en la fertilización, mejorando la producción
agrícola.
Tipos de fertilizantes:

Fertilizantes orgánicos: También conocidos como abonos, son de origen animal o vegetal. Estos
fertilizantes cuentan con la desventaja de que sus nutrientes son menos solubles en agua,
provocando que las plantas tarden más en absorberlos. Pero, por otro lado, el uso de este tipo de
fertilizantes, favorece al mejoramiento del suelo, aparte de hacer lograr una mayor retención de
agua y nutrientes.

1
Fertilizantes químicos: El mayor beneficio del uso de fertilizantes químicos, es la rapidez en
obtener resultados, ya que mejoran el estado de salud de las plantas y aumentan la producción de las
cosechas.
Biofertilizantes: Llamados así porque estos contienen microorganismos vivos en su composición, y
al igual que los fertilizantes orgánicos, estos favorecen al medio ambiente.

Fertilizantes foliares: Este tipo de fertilizantes es líquido, y se aplica diluido en agua sobre las
hojas de las plantas. Las hojas adquieren la capacidad de absorber los nutrientes muy rápido, por lo
que generan una mayor visibilidad de resultados.

4. MATERIALES Y REACTIVOS
MATERIAL O EQUIPO CANTIDAD
Frasco lavador 2
Escobillón 2
Micro espátula de acero inoxidable 2
Desecador 1
Espectrofotómetro UV/Vis 1
Gramera 1
Digestor para microKjeldahl 1
Plancha calentadora y calentadora 2
Magneto 4
Saca magneto 1
Mortero con mazo 2
Celda de cuarzo 1cm 2
Matraz volumétrico 200 mL con tapa 2
Matraz volumétrico 100 mL con tapa 3
Matraz volumétrico 25 mL con tapa 8
Gradilla para matraces 1
Macro pipeteador 2
Pipeta volumétrica (0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0; 10,0 y 20,0) mL 1c/u
Pipeta graduada 15,00 mL 1
Pesa sales 6
Vaso de precipitados 100 mL 6
Vaso de precipitados 50 mL 6
Embudo con caña 2
Crisol 2
Balón para microKjeldahl 3
Equipo destilación microKjeldahl 1
Bureta 25,00 mL 2
Triangulo de porcelana 1
Aro metálico 1
Pinza con nuez 1
Pinza para bureta 2
Erlenmeyer 125 mL 8
Frasco ámbar para indicador 25 mL 4
Gotero 4
Caja Petri 6

2
 REACTIVOS
Ácido perclórico
Fosfato monobásico de Potasio
Metavanadato de amonio
Molibdato de Amonio
Ácido bórico
Hidróxido de sodio
Óxido de Manganeso (IV)
Sulfato de cobre pentahidratado
Sulfato de sodio anhidro
Tiosulfato de sodio pentahidratado
Indicador mixto (Rojo de metilo – verde de bromocresol)
Ácido clorhídrico
Carbonato de sodio
Fenolftaleína
Naranja de metilo
Azul de bromotimol
Etanol

5. PROCEDIMIENTO

5.1 TRATAMIENTO DE LA MUESTRA

1. Pesar la cantidad necesaria de fertilizante y macerar hasta que quede con una contextura
palpable.
2. Dejar reposar durante 15 min antes de proceder a los análisis.

5.2 DETERMINACIÓN DE FÓSFORO POR ESPECTROTOMETRÍA UV.

Preparación de soluciones:

Solución madre P2O5:

1. Preparar en un matraz volumétrico de 100,00 mL una solución madre de 100,00 ppm P2O5 a
partir de fosfato monobásico de potasio, utilizando la relación estequiométrica.

Rx 1: 2𝐾𝐻2𝑃𝑂4 → 𝑃2𝑂5 + 2𝐻2𝑂 + 𝐾2𝑂

3
 Molibdovanadato de amonio:

1. Pesar 2 g de molibdato de amonio y colocarlo en un recipiente, y añadir 20,00 mL de agua

desionizada caliente con agitación constante.
2. Pesar 0,1 g de meta-vanadato de amonio y agregar 12,5 mL de agua desionizada caliente y
12,5 mL de ácido perclórico al 70%
3. Mezclar las dos soluciones anteriores, diluir y aforar en un matraz de 100,00 mL.

Preparación de la curva:

1. Tomar las alícuotas necesarias de la solución madre de 100,00 ppm P2O5 para preparar
patrones de 2 a 20 ppm P2O5.
2. Añadir en los patrones 3,00 mL de HCl concentrado y 10,00 mL de la solución de
molibdovanadato de amonio.
3. Añadir en un matraz aparte, solamente 3,00 mL de HCl concentrado y 10,00 mL de la
solución de molibdeno (esta solución es el blanco).
4. Enrasar con agua desionizada y agitar fuertemente cada patrón y el blanco.
5. Dejar las soluciones en reposo durante 20 min.

Preparación de la muestra:

1. Pesar 0,1 g en un vaso de 100 mL y adicionar 6,00 mL de agua desionizada y 4,00 mL de

HCl concentrado en agitación constante.
2. Filtrar y enrasar en un balón aforado de 100,00 mL haciendo lavados con agua desionizada.
3. Tomar una alícuota de 3,00 mL de la muestra diluida, y verter en un matraz de 25,00 mL y
al igual que en la preparación de la curva, añadir 3,00 mL de HCl concentrado y 10,00 mL
de la solución de molibdovanadato de amonio.
4. Enrasar con agua desionizada y agitar fuertemente.
5. Realizar el procedimiento por duplicado
6. Dejar las muestras en reposo durante 20 min.

Medición espectral:

1. Determinar la longitud de máxima absorción haciendo un barrido entre 300 a 420 nm en

intervalos de 5 nm usando el patrón de 3 ppm P2O5.
2. Proceder a tomar la absorbancia de los patrones comenzando por el blanco.
3. Proceder a tomar la absorbancia de la muestra.

4
 4. Calcular el %p/p a partir del resultado.

Nota: Si la absorbancia de la muestra está por fuera de la curva, repetir la disolución con una
alícuota mayor o menor a 3 mL según sea el caso.

5.2 DETERMINACIÓN DE NITRÓGENO POR MÉTODO KJELDAHL

Preparación de soluciones

Solución de ácido bórico al 6%

1. Calcular la cantidad en gramos necesaria para preparar 25,00 mL de una solución de ácido
bórico 6% (H3BO3).
2. Pesar dicha cantidad en una pesa sales y trasvasar a un matraz aforado de 25,00 mL usando
20,00 mL de agua desionizada caliente (40-50°C).
3. Disolver con agitación constante, una vez disuelto llevar el volumen al aforo y tapar el
matraz.

Catalizador Kelpak

Mezclar y triturar en un mortero 5,0 g de sulfato de cobre (II) Pentahidratado (CuSO4·5H2O)

con 10,0 g de óxido de manganeso (IV) (MnO2) y 15,0 g de sulfato de sodio (Na2SO4).

Solución alcalina

1. En un vaso de 50,00 mL disolver en agua desionizada 12,5 g de hidróxido de sodio y 1,25 g

de tiosulfato de sodio pentahidratado. (Na2S2O3·5H2O)
2. Diluir hasta un volumen aproximado de 25,00 mL.

Determinación de nitrógeno total

1. Pesar 500,0 mg (0,5 g) de fertilizante en un balón para micro Kjeldahl (NO LAVAR).
2. Adicionar al balón 0,5 g de catalizador Kelpak y 4,00 mL de ácido sulfúrico concentrado
(H2SO4). (Realizar este procedimiento y los posteriores en un blanco)
3. Ingresar el balón Kjeldahl con la muestra al digestor, se debe poner en posición inclinada,
formando un ángulo de 30-45°, la boca del balón debe ir junto a uno de los orificios de
extracción, calentar gradualmente hasta observar ebullición. (OJO: Evitar la formación de
espuma.)

5
 4. Continuar con una suave ebullición hasta que la solución sea incolora o amarillo claro, no
debe contener partículas en suspensión. Una vez terminada la digestión, dejar enfriar el
matraz, agitar y añadir agua desionizada (≈5 mL) para disolver los sólidos.
5. Transferir la muestra al destilador mediante el embudo de alimentación, realizar lavados
con pequeñas porciones de agua. (OJO: Que el volumen de lavados no supere más de 10
mL)
6. En un Erlenmeyer de 125 mL adicionar 6,00 mL de ácido bórico al 6% y unas gotas de
indicador mixto, en el cual se recogerá el destilado. (PRECAUCIÓN: No sumergir el
extremo terminal del condensador en la solución de ácido bórico)
7. Adicionar lentamente al destilador 15 mL de la solución alcalina (NaOH + Na 2S2O3·5H2O)
8. Enjuagar el embudo de alimentación con aprox. 5,00 mL de agua desionizada.
9. Encender el destilador con todas las válvulas cerradas, y recoger el destilado durante 15
minutos luego de que se presente cambio en el color de la solución de ácido bórico.
10. Retirar el Erlenmeyer y titular su contenido con una solución estandarizada de HCl 0,2 M
hasta viraje del indicador a una coloración rosado manzana. (OJO: La concentración de HCl
y el volumen mínimo a gastar depende del porcentaje teórico de nitrógeno)
11. Reportar el resultado como porcentaje % de nitrógeno total en el fertilizante.

5.3 DETERMINACIÓN DE % HUMEDAD.

1. Lavar el crisol y poner a secar durante 1h en horno a 105°C.

2. Dejar atemperar en desecador.
3. Pesar 1,0 g de muestra y poner a secar durante 2h en horno a 105°C.
4. Dejar atemperar en desecador.
5. Pesar el crisol con la muestra en intervalos de 30 min hasta peso constante.
6. Reportar el resultado como %Humedad

5.4 DETERMINACIÓN DE ACIDEZ O BASICIDAD LIBRE.

Preparación y estandarización de soluciones
Solución de HCl 0,02 M
1. Verter una porción de agua desionizada a un matraz volumétrico de 100,00 mL.
2. Calcular la alícuota necesaria de HCl para preparar una solución a 0,02 M y verter al matraz
volumétrico de 100,00 mL.
3. Enrasar con agua desionizada y agitar.

6
 4. Pesar en un vaso de precipitados de 100 mL la cantidad necesaria de Na2CO3 para titular
5,00 mL de la solución de HCl. (El patrón debe estar seco previamente a 105 °C por 1h).
5. Diluir el patrón en 30 mL de agua desionizada y añadir 2 o 3 gotas de indicador naranja de
metilo.
6. Titular con la solución de HCl 0,02M hasta cambio de viraje de naranja a rojizo.
7. Calcular la concentración real de la solución ácida a partir del volumen consumido de HCl
0,02 M.
Solución de NaOH 0,02 M
1. Calcular la cantidad necesaria de NaOH para preparar una solución a 0,02 M en un vaso de
100,00 mL.
2. Diluir con aproximadamente 30,00 mL de agua desionizada y trasvasar a un matraz
volumétrico de 100,00 mL.
3. Hacer varios lavados del vaso hacía el matraz y enrasar con agua desionizada.
4. Pesar en un vaso de precipitados de 100 mL la cantidad necesaria de KHP para titular 5,00
mL de la solución de NaOH. (El patrón debe estar seco previamente a 105 °C por 1h).
5. Diluir el patrón en 30 mL de agua desionizada y añadir 2 o 3 gotas de indicador
fenolftaleína.
6. Titular con la solución de NaOH 0,02M hasta cambio de viraje de incoloro a rosado.
7. Calcular la concentración real de la solución básica a partir del volumen consumido de
NaOH 0,02 M.
Determinación de acidez o basicidad libre
1. Diluir 2 g de muestra en 100,00 mL de agua en un vaso de 250 mL
2. Calentar y agitar por 15 min.
3. Dejar reposar la solución.
4. Filtrar la solución en un matraz volumétrico de 200,00 mL y realizar lavados.
5. Enrasar hasta aforo y añadir 2 o 3 gotas de azul de bromotimol. (Si la solución es ácida,
tendrá un color amarillo, si la solución es básica, tendrá un color azul).
6. Titular 20 mL de la solución con HCl o NaOH dependiendo del pH de la solución muestra.
7. Hacer blanco con 20 mL de agua desionizada.
8. Reportar la acidez como mmol de H+/g de muestra o la basicidad como mmol OH-/g
de muestra.

6. TRATAMIENTO DE DESECHOS
Los desechos sólidos, depositarlos correctamente en el cesto de basura correspondiente.
Recolectar los desechos líquidos en un recipiente grande, medir el pH con papel indicador,
neutralizar según sea el caso y desechar por desagües.

7. BIBLIOGRAFÍA
Cáñez-Carrasco, M. G., & García-Alegría, A. M. (2015). validación de un método analítico para la
determinación de fósforo por espectrofotometría ultravioleta-visible/validation of an analytical
method for uv-visible spectrophotometric phosphorus determination. Biotecnia, 17(1), 32-39.

7
Castillo, L. E. (1989). Determinación del nitrógeno total. Recuperado de:
[Link]
Icontec. (1998). Norma Técnica Colombiana 370: Abonos o fertilizantes. Determinación de
nitrógeno total (NTC 370). Bogotá, Colombia: Icontec.
ICONTEC. (2001). NTC 234: Abonos o fertilizantes. Método de ensayo para la determinación
cuantitativa del fósforo. Bogotá, Colombia: ICONTEC.
Álvarez-Pérez, S., Rodríguez-Díaz, M., & Peña-Cabriales, J. J. (2014). Aislamiento y
caracterización de bacterias solubilizadoras de fosfato a partir de suelos áridos de Sonora, México.
Biotecnia, 16(2), 54-59. Recuperado de
[Link]
Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura (FAO). (2006). Guía
para el Análisis de Suelos. Recuperado de [Link]
GRANULOMÉTRICA, B. A. (2014). Manual de métodos analíticos oficiais para fertilizantes
minerais, orgânicos, organominerais e corretivos.

8
 1

UNIVERSIDAD DEL VALLE NORMA: VERSIÓN:

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
FECHA DE REVISIÓN:
LABORATORIO DE ANALISIS INDUSTRIAL

ANÁLISIS DE MUESTRAS FARMACÉUTICAS CENTRUM

ELABORADO POR:
REVISADO POR: APROBADO POR:
Carolina Guzman y Helen Pelaez

1. Objetivos:

● Determinar la composición química de centrum por medio de diferentes técnicas

analíticas.
● Examinar los metales que contiene por medio de una curva de calibración.

2. Introducción

El análisis farmacéutico suministra información sobre la identidad, la pureza, el contenido y

la estabilidad de las sustancias básicas, los excipientes y los ingredientes activos
farmacéuticos, existen diferentes métodos por los cuales las farmacopeas garantizan la
seguridad de los medicamentos utilizando diferentes parámetros como medir el pH,
contenido de humedad e incluso el método espectroscópico de análisis pues se basan en la
medida de la radiación electromagnética absorbida por la materia, este consiste en la
disminución de la potencia radiante como consecuencia de la absorción que se produce
cuando se interacciona con el analito, dicha interacción trae como consecuencia una
transferencia de energía a electrones externos de átomos gaseosos del analito.

La espectroscopia de absorción atómica se ha impuesto como el método de análisis de la

mayoría de metales en el nivel de ppm y ppb, actualmente es ampliamente utilizada para
asegurar los límites de detección requeridos en calidad de aguas, medicamentos, alimentos
y reactivos de calidad analitica.

Minerales como el calcio, potasio, hierro y zinc que están presentes en multivitamínicos
como el centrum, son importantes para el adecuado funcionamiento del metabolismo óseo,
celular, para la adecuada transferencia de oxígeno molecular en la sangre, así como en los
mecanismos de transporte celular, el funcionamiento inmunitario, división y crecimiento
celular y la protección contra el daño oxidativo.

3. Materiales y Reactivos:
Materiales
Espectrofotómetro (1) Crisol de porcelana (2)
Desecador(1) Vaso de precipitados de 250 mL (2)
Celdas para espectrofotómetro(2) Probeta de 100 mL (1)
 2

Vidrio reloj (2) pHmetro (1)

Aro con trípode (1) Pinza para bureta (4)
Triangulo de porcelana (1) Balón aforado de 50 mL (2)
Mechero (1) Equipo de filtración al vacío (1)
Plancha de Calentamiento (2) Mortero con mazo (1)
Agitador Magnetico (2) Microespátula (2)
Vaso de precipitados de 50 mL (2) Probeta de 10 mL (2)
Frasco lavador (2) Pipeta graduada de 10 mL (2)
Balon aforado de 25 mL (28) Vaso de precipitados de 100 mL (2)
Balón aforado de 100 mL(10) Bureta de 10 mL (4)
Electrodo de vidrio (1) Reactivos:

ZnCl2 KCl

HCl CaCO3

Sal de Mohr Óxido de lantano

4. Procedimiento:

4.1 Tratamiento de Muestra:

Pesar 10 tabletas y sacar un peso promedio, trabajar con este peso para hacer los reportes
de los diferentes análisis (cantidad de analito/tableta). Se deben triturar en un mortero cinco
tabletas para obtener la cantidad de muestra que se va a necesitar en los diferentes
análisis. Guardar esta muestra en un secador para evitar que absorba humedad.

4.2 Tratamiento del Crisol:

Para controlar las posibles contaminaciones que se puedan presentar se realiza un

tratamiento para el crisol,se debe sumergir el crisol en agua durante unos minutos, luego se
coloca el crisol en el horno de mufla y se deja que la temperatur suba a 525 °C,se mantiene
esta temperatura durante 1 h, se retira el crisol para enfriar y colocar en un desecador para
posteriormente calcinar la muestra a analizar.

4.3 Análisis de humedad:

Pesar 1,0000 g de muestra en un vidrio de reloj limpio, seco y pesado, llevarla al horno a
una temperatura de 105 °C por espacio de tres horas. Sacar la muestra del horno y enfriar
en un desecador hasta temperatura ambiente,este proceso no puede tardar más de 2 horas,
 3

luego pesar. Introducir nuevamente la muestra al horno por media hora y repetir el proceso
de pesada hasta peso constante;reportar el resultado como porcentaje de humedad.

4.4 Análisis de contenido de ceniza:

Luego del tratamiento del crisol se registra el peso, posteriormente, se toma 1,0000 g de
polvo de muestra, se incinera cuidadosamente con el mechero hasta carbonización, luego
colocar el crisol en la mufla a una temperatura de 550 a 600 °C por espacio de dos horas,
sacarla y dejarla enfriar en desecador hasta peso constante. Analizar por duplicado y
expresar el resultado como % de cenizas en base húmeda.

4.5 Determinación de Minerales por Absorción atómica:

En un vaso de 100 mL coloque 100 mg de muestra pulverizada y seca,adicione 10 mL de

HCl concentrado y 5 mL de HNO3 concentrado, se inicia calentamiento suavemente a una
temperatura de 200 a 300 °C, se deja hervir hasta sequedad, luego en la campana de
extracción se adicionan 20 mL de agua destilada y se agita, en caso de que se presenten
sólidos suspendidos se filtra y se lleva a una matraz de 100 mL enrasando con agua
destilada.

Cuantificación de metales (Fe, Ca, K, Zn)

Preparar 100 mL de soluciones patrón de 1000 ppm de CaCO3, ZnCl2 ,KCl, a partir de la sal
de Mohr se prepara la disolución de Fe, pesar las cantidades necesarias de estos reactivos
[Link] sal de Mohr es soluble en agua, por lo tanto, la disolución de 1000 ppm en hierro
se prepara disolviendo en agua la sal de Mohr; igual sucede con el cloruro de zinc, se parte
de la sal seca y se disuelve en agua o en disolución de HCl al 1%; el KCl también es soluble
en agua por lo que la disolución de 1000 ppm se parte de disolver en agua el KCl. Para el
caso del CaCO3 es necesario disolverlo en 5 mL de HCl concentrado con calentamiento,
una vez disuelto se completa con agua hasta el aforo.

Recuerde que es necesario realizar los cálculos de peso de las sales para la preparación de
las soluciones madre a 1000 ppm para cada uno de los análisis.

Curvas de calibración

Calcio: 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 y 2,5 ppm

Potasio: 0,2, 0,4, 0,6, 0,8;1,0 ppm
Hierro: 5,0; 10,0; 15,0; 20,0; 25,0 ppm
Zinc: 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5 ppm

Calcio

Preparar una disolución de óxido de lantano al 1% en lantano, para esto, pesar 1,1727 g de
óxido de lantano, adicionar 5 mL de HCl concentrado hasta disolución completa, pasar a un
balón aforado de 100 mL y completar con agua.

Preparar 100 mL de una disolución stock de Calcio de 1000 ppm (preparada a partir de
CaCO3 analítico previamente secado, se pesa en un vaso de precipitados de 50 mL la
cantidad de carbonato de calcio seco, se adicionan 5 mL de HCl concentrado hasta
 4

disolución completa, se adicionan 50 mL de agua y se pasa a un balón aforado de 100 mL y

se completa al aforo con agua), a partir de esta disolución preparar 50,0 mL de una dilución
de calcio de 10 ppm.

Pasar a 7 balones aforados de 25 mL, 0,25 mL de disolución de lantano al 1%, el primero

llevar al aforo con agua destilada, a uno de ellos se adicionan 2,5 mL de disolución de
muestra problema y a los otros adicionar 1,25 mL, 2,50 mL, 3,75 mL, 5,0 mL y 6,25 mL de
disolución de calcio de 10 ppm para tener estándares de concentración 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 y
2,50 ppm de Ca. Leer en el equipo de absorción atómica las absorbancias tanto de la
muestra problema diluida como de los estándares, si la señal de la muestra no cae en el
rango de la curva, se debe de hacer una mayor dilución o tomar mayor cantidad de la
solución de la muestra según sea el caso. Reportar los resultados como porcentaje en masa
de Ca la muestra de Centrum.

Potasio:

Preparar 100 mL de una disolución stock de potasio de 1000 ppm (preparada a partir de KCl
analítico), a partir de esta disolución preparar 50,0 mL de una solución de potasio 10 ppm.

Pasar a 7 balones aforados de 25 mL, 0,25 mL de disolución de lantano al 1%, el primero

llevar al aforo con agua destilada, en otro se agregan 2,5 mL de disolución de muestra y a
los otros adicionar 0,5 mL, 1,0 mL, 1,50 mL, 2,0 mL y 2,5 mL respectivamente de disolución
de potasio de 10 ppm para tener estándares de concentración 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 y 1,0 ppm
de K. Leer en el equipo de absorción atómica las absorbancias tanto de la muestra
problema diluida como de los estándares, si la señal de la muestra no cae en el rango de la
curva, se debe de hacer una mayor dilución o tomar mayor cantidad de la solución de la
muestra según sea el caso. Reportar los resultados como porcentaje en masa de K2O en el
Centrum.

Hierro

A partir de una solución patrón de hierro de 1000 ppm se prepara una disolución de 50 mL
de 50 ppm. Posterior a esto se agregan 0,25 mL de disolución de lantano al 1% en 7
balones aforados, en otro se agregan 2,5 mL de disolución de muestra y a los otros
adicionar 2,5 mL, 5,0 mL, 7,50 mL, 10,0 mL y 12,5 mL respectivamente de disolución de
hierro de 50 ppm para tener estándares de concentración 5,0; 10,0; 15,0; 20,0; 25,0 ppm de
Fe. Leer en el equipo de absorción atómica las absorbancias tanto de la muestra problema
diluida como de los estándares, si la señal de la muestra no cae en el rango de la curva, se
debe de hacer una mayor dilución o tomar mayor cantidad de la solución de la muestra
según sea el caso. Reportar los resultados como porcentaje en masa de FeO en el
Centrum.

ZInc

A partir de una solución patrón de zinc de 1000 ppm se prepara una disolución de 50 mL de
zinc 10 ppm. Posterior a esto se agregan 0,25 mL de disolución de lantano al 1% en 7
balones aforados, en otro se agregan 2,5 mL de disolución de muestra y a los otros
adicionar 0,25 mL, 0,5 mL, 0,75 mL, 1,0 mL y 1,25 mL respectivamente de disolución de
hierro de 50 ppm para tener estándares de concentración 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5 ppm de Zn.
 5

Leer en el equipo de absorción atómica las absorbancias tanto de la muestra problema

diluida como de los estándares, si la señal de la muestra no cae en el rango de la curva, se
debe de hacer una mayor dilución o tomar mayor cantidad de la solución de la muestra
según sea el caso. Reportar los resultados como porcentaje en masa de ZnO en el
Centrum.

Condiciones instrumentales (espectrofotometro) para el análisis:

Llama oxidante: Aire-acetileno (esta mezcla alcanza la temperatura a la cual se obtiene la

niebla en la atomización de los elementos objeto de análisis)

Longitudes de onda: Fe: 248,3 nm

Ca: 422,7 nm
K: 766,5 nm
Zn:213,9 nm

4.6 Determinación de pH:

En un vaso de 50 mL coloque 5 g de muestra y adicione 12,5 mL de agua destilada, agitar a

intervalos durante 30 minutos, agitar nuevamente antes de sumergir el electrodo de vidrio
(mixto), leer el pH, repetir el proceso preparando una suspensión con 25 mL de disolución
de CaCl2 0.025 M.

[Link] de Desechos:

Los desechos generados durante la práctica se deben almacenar en envases debidamente

rotulados, medir el pH con papel indicador, neutralizar y finalmente desechar por los
desagües.

6. Bibliografía:

Londoño, [Link]ÓN DEL MÉTODO DE DETERMINACIÓN DE CALCIO Y

MAGNESIO POR ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIÓN ATÓMICA DE LLAMA PARA EL
LABORATORIO DE ANÁLISIS DE AGUAS Y ALIMENTOS DE LA UNIVERSIDAD
TECNOLÓGICA DE [Link] 36-40.

Velasquez, M., & Perez, F. (2020, 6 marzo). MANUAL DE LABORATORIO DE ANÁLISIS DE

FÁRMACOS Y MATERIAS PRIMAS II.

Instituto Colombiano de Normas Técnicas, Normas Técnicas Colombianas NTC 34, 35, 39,
204, 208, 1061, 1146, 1297 y 1301. Colombia: ICONTEC.

M. Martinez, Ciencias: Vida, Ambiente y Naturaleza. Colombia: Mc Graw Hill, 1992.

Aldabe, S., Aramendia, P., Bonazzola, C., & Lacreu, L. (2004). Química 2. Química en
acción (Colihue ed.). Ediciones Colihue S.R.L.

Baynes, J., Dominiczak, M. (2019). Bioquímica médica (5th ed.). Elsevier España, S.L.U.
6
 UNIVERSIDAD DEL VALLE NORMA: VERSIÓN:
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
FECHA DE REVISIÓN:
LABORATORIO DE ANALISIS INDUSTRIAL

ANÁLISIS DE SUELOS
ELABORADO POR:
REVISADO POR: APROBADO POR:

[Link]:

1. Caracterización del tipo de suelo analizado según los resultados obtenidos en el

laboratorio.
2. Utilización de las diversas técnicas analíticas, tanto clásicas como modernas, para la
identificación y cuantificación de los diferentes analitos.

[Link]ÓN

La toma de muestras de un suelo es una operación simple pero delicada, por cuanto una
muestra tomada incorrectamente no arrojará resultados representativos y el diagnóstico será
erróneo. Debe tenerse conocimiento de que existen distintos tipos de análisis de suelos, según
los objetivos para los que estén orientados, ellos son: de rutina y con fines especiales.

Los análisis de rutina comprenden los simples o detallados. Los análisis simples tienen como
objetivo las principales variables (Conductividad, Nitrógeno, Fósforo, Potasio, pH, textura al
tacto). Los análisis detallados aportan una evaluación completa del nivel de fertilidad edáfica
(los nutrientes principales más capacidad de intercambio catiónico, niveles de cationes
intercambiables, Humedad equivalente, textura). Los análisis con fines especiales corrigen
algunos aspectos como salinidad, necesidad de fertilización, enmiendas, deficiencias,
toxicidad etc.

Un análisis químico de suelo se realiza en varias etapas:

● Recolección de la muestra de suelo en el campo

● Transporte al laboratorio
● Preparación de la muestra
● Extracciones y determinaciones analíticas

1
[Link] Y REACTIVOS

MATERIALES REACTIVOS

Caja petri (2) Carbonato de calcio (CaCO3)

Vidrio reloj (1) Solución NaOH 0.1M

Crisol de porcelana (1) Cloruro de potasio (KCl)

Vaso de precipitados de 250 mL (2) Ácido clorhídrico (HCl)

Vaso de precipitados de 100 mL (3) Solución Stock CaCl2 0,01 M

Espátula (2) Buffer de 4,0; 7;0 7 10,0

Probeta de 100 mL (1) MgCl2

Pipeta graduada de 10 mL (1)

Pipeta volumétrica de 0.5 mL (1); 1.00 mL (1); 2.00

mL (1); 3.00 mL (1); 4.00mL /1); 5.00 mL (1); 10.0
mL (1).

pHmetro (1)

Electrodo de vidrio (1)

Matraz de 100 mL (2)

Matraz de 25 mL (8)

Matraz de 50 mL (5)

Frasco lavador (1)

Mortero y mazo (1)

Planta agitadora (1)

Magneto (1)

Equipo de filtración (1)

4. PROCEDIMIENTO

4.1 TRATAMIENTO DE MUESTRA

1. Recolectar la muestra en un recipiente limpio y seco, guardar en un lugar oscuro y

seco por 48 horas. (OJO: Recolectar la muestra de suelo a una profundidad de 20 a 30
cm de la superficie)
2. Macerar la muestra para eliminar terrones formados, antes de triturar se debe remover
piedras u otros agentes ajenos al análisis, ya sea por tamizado o a mano.
3. Pesar y registrar la cantidad total de muestra seca obtenida.

2
4.2 DETERMINACIÓN DE MINERALES POR ABSORCIÓN ATÓMICA

Potasio, Calcio y Magnesio

Curvas de calibración

1- Prepare soluciones de 100 mL a 1000 ppm de KCl, CaCO3, y MgCl2.

2- A partir de cada solución stock del paso 1, prepare 50 mL de cada disolución a una
concentración de 10 ppm.
3- Preparar 100 mL de una disolución de óxido de lantano al 1% en lantano, adicionar 5 mL de HCl
concentrado hasta disolución completa, pasar a un balón aforado y completar con agua. El objetivo de
este paso es evitar interferencias químicas entre los fosfatos presentes en la muestra que son
químicamente estables en la llama y por ende se pierde muestra por la reacción química entre ellos.
4- De cada solución de la sal del paso 2 realice las tres curvas de calibración preparando en
balones aforados de 25 mL estándares en un rango de concentración entre 0,2 y 1,0 ppm.
Tenga en cuenta, que debe tener un blanco y la muestra preparada en balones del mismo
volumen para poder realizar la curva. En total 7 balones aforados, en los cuales estará el
blanco, la muestra, y los estándares.

Condiciones del espectrómetro: llama de aire-acetileno, longitudes de onda para potasio,

calcio y magnesio (766,5, 422,7 y 285,2) nm respectivamente.

4.5 DETERMINACIÓN DE CENIZAS

1-En un crisol de porcelana limpio en el horno a 110ºC por 30 minutos, dejar enfriar en un
desecador y pesar en una balanza analítica.

2- Pesar 1.0 g ± 0,1 de suelo en el crisol y llevarlo a una mufla a una temperatura de 550 a
600 ºC durante dos horas.

3-Después del tiempo se retira de la mufla, se pone en un desecador para enfriar y luego
pesar.

4- Reiniciar el proceso de calcinación y repetir el proceso cada hora hasta obtener un peso
constante.

5- Analizar por duplicado y expresar el resultado como % de cenizas en base húmeda.

3
4. 6 ANÁLISIS DE HUMEDAD

1-Eliminar la humedad previamente del material de vidrio, en el horno a 105°C por una hora,
y posteriormente, enfriar en desecador y tomar el peso hasta que se estabilice.

2-Transferir 1,0 g ± 0,1 mg de muestra a una caja de petri o vidrio de reloj previamente
pesado.

3-Secar la muestra durante 3 horas en el horno a una temperatura de 110 °C, luego de este
tiempo se saca la muestra y se coloca en un desecador hasta que se enfríe la muestra, una vez
frío se determina su peso.
4-Introducir nuevamente la muestra en el horno por media hora, enfriar en desecador y pesar,
repetir el proceso hasta peso constante. Hacer el análisis por duplicado y expresar el resultado
como % de humedad.

4.7 DETERMINACIÓN DE pH

El pH es una medida de acidez o alcalinidad, este indica la concentración de iones de

hidrógeno presentes en determinadas bebidas alcohólicas.

a. Calibración de pH-metro

1. Presione (Cal)

2. Enjuague el electrodo de pH con agua destilada

3. En un vaso de precipitado de 25 mL tome 20-25 mL de solución Buffer pH 4,0, e

introduzca el electrodo de en el vaso con la solución Buffer.

4. Pulse la tecla (start o enter) y espere que el valor del pH en el medidor se estabilice,
cuando deje de parpadear y presione (aceptar) para aceptar el valor de pH mostrado

5. Presione (Siguiente) para pasar el siguiente Buffer y repita el procedimiento 2-4,

empleando las soluciones Buffer pH 7,0 y 10,0.

6. Si se desea terminar con la calibración, presione (start o enter), para poder visualizar el
resumen de la calibración incluyendo el % de la pendiente promedio de la calibración. En
este caso el valor de la pendiente debe estar entre 95-105%

b. análisis de la muestra

1. Pesar 20 g de muestra en un vaso de 100,00 mL y añadir 20 mL de agua desionizada

(relación 1:1), y agitar constantemente durante 20 min. (Si la solución queda
demasiado turbia, hacer una relación 1:3 o 1:5).
2. Dejar reposar por 15 min.
3. Volver a agitar y sumergir el electrodo mixto sin que este toque la pared ni la base del
vaso, y medir el pH.
4. Realizar el procedimiento por triplicado

4
 5. Repetir el análisis, pero usando una solución stock de CaCl2 0,01 M en vez de agua
desionizada.

5. TRATAMIENTO DE DESECHOS

Depositar todos los residuos sólidos en el cesto de basura correspondiente.

Recolectar los desechos líquidos en un recipiente grande, medir el pH con papel indicador,
neutralizar según sea el caso y desechar por desagües.

6. BIBLIOGRAFÍA

Beretta, A., Bassahum, D., & Musselli, R. (2014). Measure Soil pH at Rest or Stirring
the Soil:water Mixture? Agrociencia, 18(2), 90-94. [Link]

ICONTEC. (2018). NTC 3934: Suelos. Determinación de los contenidos de cadmio, cromo,
cobalto, cobre, plomo, manganeso, níquel y zinc por espectrofotometría de absorción atómica
de llama. Bogotá, Colombia: Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación.

ICONTEC. (2013). NTC-ISO 11464: Gestión ambiental. Calidad del suelo. Pretratamiento de
las muestras de suelo para análisis fisicoquímicos. Instituto Colombiano de Normas Técnicas
y Certificación.

Beretta, A., Bassahum, D., & Musselli, R. (2014). Measure Soil pH at Rest or Stirring the
Soil:water Mixture? Agrociencia, 18(2), 90-94. [Link]

Concrelab. (2020). QMC-021 Determinación de la densidad de masa y del volumen de áridos

por inmersión en agua. Recuperado de
[Link]

Laboratorio DA. (2013). Determinación de la densidad aparente y densidad real de suelos

según la norma INV E-131-13 [PDF]. Recuperado de
[Link]

5
 UNIVERSIDAD DEL VALLE PREPARADO POR:
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANGIE PAOLA MORENO DURAN
ANA MARIA LASSO BAHAMON

LABORATORIO DE ANALISIS PRACTICA No. 8.

INDUSTRIAL ANÁLISIS DE ACEITES
ESENCIALES

FECHA REVISADO POR:

OBJETIVOS
1. Determinar la calidad de un aceite esencial, de acuerdo a los resultados obtenidos en
el laboratorio, y comparación con las normas nacionales y/o internacionales.
2. Aplicación de las diversas técnicas analíticas tanto gravimétricas, volumétricas e
instrumentales para el análisis de los analitos de interés.

MATERIAL
1 agitador magnético y 2 pinzas para bureta 
3 crisoles de porcelana plancha 1 Erlenmeyer de 250 mL  
1 pipeta volumétrica de 1 bureta 2 vaso de 250 mL 
10 mL 1 pinza para bureta 2 vasos de precipitado 100
mL 
1 espatula 1 soporte universal
Equipo de destilación por
1 mechero pipeta volumétrica de 1,
arrastre de vapor
1 aro con nuez 2, 3, 4, 5, 10 mL completo   
1 jeringa 5 balones de 50 mL 1 vaso de 250 mL  
2 triángulos de porcelana 2 balones de 100 mL 10 matraces aforados de
2 gotero 1 multímetro digital 50 mL   
1 desecador 1 electrodo de calomel 1 matraz aforado de 10
1 equipo Cleveland 1 electrodo de plata mL 
1 termómetro 400 °C 1 frasco lavador Fe(SO4)2(NH4)2.6H2O 
1 probeta de 100 mL 2 vasos de precipitado 50 Amonio y hierro(II) sulfato
1 vaso de 600 mL mL   hexahidrato ZnO 
1 picnómetro 2 probetas de 10 mL  
2 buretas de 25 mL 

SOLUCIONES
(VER SOLUCIONES EN CADA DETERMINACIÓN)
Indicador fenolftaleína 
Zinc 1000 ppm (óxido de Zn) 
Fe 1000 ppm o (sal de Mohr)  
Solvente para acidez*  
● Tolueno  
● Alcohol Isopropílico 
 KOH etanòlico (estándar) 0.1M 
● Etanol 
AgNO3 etanòlico (estándar) 
● NaCl 
*Ver determinación de acidez. 
● Tolueno  
● Alcohol Isopropílico 
● HNO3 
Hexano o Pentano  

DETERMINACIÓN DE CENIZAS SULFATADAS

- Secar el material de vidrio en la mufla 105 °C durante 30/40 minutos, pasar el matraz al
desecador 15 minutos (Obtener peso constante)
- Limpiar los crisoles con una disolución de ácido clorhídrico y enjuagar en agua destilada,
dos crisoles (uno para el blanco), enjuagar e introducirlo a la mufla a 550 °C por 10
minutos, luego enfriar en el desecador hasta temperatura ambiente y determinar su peso.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
Cuidadosamente calentar el crisol con la muestra hasta ignición en la campana extractora,
cuando la llama cese, continuar calentando hasta que no haya liberación de humos, enfriar
el crisol, calentar nuevamente hasta que no se desprendan más humos y llevar a la mufla a
un intervalo entre 550 °C y 650 °C por 30 minutos, enfriar en el desecador. Luego calentar
nuevamente en el mechero hasta que no se desprendan más humos introduciéndose a la
mufla por 30 minutos, se enfría y determina su peso.
El crisol se lleva nuevamente a 650 °C por 15 minutos, se enfría y se determina su peso, se
repite este último proceso hasta peso constante. Expresar el resultado como porcentaje de
cenizas sulfatadas.

CÁLCULOS

El peso de cenizas residuales (sin deducción) es expresado como el % de cenizas sulfatadas

en la muestra original
𝑚2−𝑚1
%𝑐𝑒𝑛𝑖𝑧𝑎𝑠 𝑠𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑎𝑑𝑎𝑠 = 100𝑥 𝑚3
- m1: Peso del crisol después de la calcinación y enfriamiento
- m2: Peso del crisol con muestra después de la calcinación y enfriamiento
- m3: Peso inicial de la muestra

DETERMINACIÓN DE DENSIDAD (NTC 336)

Para esto, no se filtra ni seca la muestra (Norma 661)
Medir temperatura del aceite esencial y del agua destilada.
Limpiar y secar completamente el picnómetro
Pesar el picnómetro vacío y registrar datos.
Llenar el picnómetro con agua destilada, (tener cuidado de no incluir burbujas de aire
durante estas operaciones) limpiar el exterior del picnómetro y pesar.
Realizar el mismo proceso, llenando el picnómetro con el aceite esencial.
Calcular el volumen del picnómetro, teniendo en cuenta la temperatura y densidad del agua
a la temperatura en la que se trabaja.

𝑉𝐶 = 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒𝑙 𝑝𝑖𝑐𝑛ó𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 (𝑚𝐿)

𝑚1 = 𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑝𝑖𝑐𝑛ó𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 𝑣𝑎𝑐í𝑜 𝑐𝑜𝑛 𝑙𝑎 𝑡𝑎𝑝𝑎 (𝑔)
𝑚2 = 𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑝𝑖𝑐𝑛ó𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 𝑙𝑙𝑒𝑛𝑜 𝑐𝑜𝑛 𝑎𝑔𝑢𝑎, 𝑖𝑛𝑐𝑙𝑢𝑖𝑑𝑎 𝑙𝑎 𝑡𝑎𝑝𝑎.
𝑃𝑤 = 𝑑𝑒𝑛𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 (𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑐𝑜𝑛𝑣𝑒𝑛𝑐𝑖𝑜𝑛𝑎𝑙) 𝑑𝑒𝑙 𝑎𝑔𝑢𝑎 𝑎 𝑙𝑎 𝑡𝑒𝑚𝑝𝑒𝑟𝑎𝑡𝑢𝑟𝑎 𝑒𝑛 𝑞𝑢𝑒 𝑠𝑒 𝑡𝑟𝑎𝑏𝑎𝑗𝑎 𝑒𝑛 𝑔/𝑚𝐿

DETERMINACIÓN DE ACIDEZ (NTC 218)

Método con etanol caliente usando indicador
Preparación de la muestra 
La muestra se calienta a 10º Celsius por encima del punto de fusión, si la muestra es clara si
continúa con el Procedimiento. Si la muestra esa turbia o contiene algún sedimento se filtra
en caliente el filtrado debe ser claro
Muestra líquida  
La muestra se Filtra si presenta alguna impureza o turbidez 
PROCEDIMIENTO 
Se pesa en un matraz una masa de muestra cómo se indica en la tabla uno de acuerdo con el
porcentaje de acidez esperado y al color.  

DETERMINACIÓN
En un segundo matraz, se calienta a ebullición 50 ml de etanol 95% (v/v) que contiene 0,5
ml del indicador de fenolftaleína. Mientras la temperatura del etanol está aún sobre los 70°
Celsius, se neutraliza cuidadosamente con la solución de hidróxido de sodio o potasio de
0,1 mol/ L.  
El punto final de la titulación se alcanza cuando la visión de la gota de álcali produce un
cambio de color, ligero pero definitivo que permanece por lo menos 15 segundos 
  
Se agrega etanol neutralizado a la porción de ensayo en el primer matraz y se mezcla muy
bien. Se lleva el contenido a ebullición y se titula con la solución de hidróxido de sodio o
de potasio adecuada, dependiendo de la acidez esperada en la muestra, agitando el
contenido del matraz vigorosamente durante la titulación. 

REACTIVOS
● Etanol al 95% (v/v)
● Hidróxido de sodio o potasio, 0.05 M
● Hidróxido de sodio o potasio, 0.1 M
● Hidróxido de sodio o potasio, 0.25 M
● Hidróxido de sodio o potasio, 0.5 M
Fenolftaleína, 10 g/L en solución etanolica 95% (v/v)

DETERMINACIÓN DEL ÍNDICE DE REFRACCIÓN (NTC 289)

Preparación de la muestra de ensayo
Muestra líquida
La muestra se filtra si presenta alguna impureza o turbidez

PROCEDIMIENTO

Calibración del instrumento

Se verifica la calibración del refractómetro, (refractómetro del tipo Abbe, adecuado para
mediciones de índice de refracción hasta dentro de ± 0,000 1 en un intervalo de
𝑛𝐷 1, 300 𝑎 𝑛𝐷 = 1, 700), midiendo el índice de refracción de la placa de vidrio (Placa de
vidrio, de índice de refracción conocido) de acuerdo con las instrucciones del fabricante, o
midiendo el índice de refracción del laurato de etilo (Laurato de etilo de calidad adecuada
para refractometría, e índice de refracción conocido).

DETERMINACIÓN
Se mide el índice de refracción de la muestra de ensayo, a una de las siguientes
temperaturas:
A) Entre 20 °C y 25 °C para grasas y aceites que son completamente líquidos a
esta temperatura.
B) 40°C para grasas y aceites que están completamente fundidos a esta temperatura, pero
no a 20 °C.
C) 50 °C para grasas y aceites que están completamente fundidos a esta temperatura, pero
no a 40 °C.
D) 60 °C para grasas y aceites que están completamente fundidos a esta temperatura, pero
no a 50 °C.
F) 80 °C o superior para otras grasas y aceites, por ejemplo, grasas o ceras endurecidas.
● Se lleva a cabo la medición de acuerdo con las instrucciones de operación para el
instrumento que se está usando. Se lee el índice de refracción con aproximación a 0,0001
como un valor absoluto y se registra la temperatura del prisma del instrumento.

● Inmediatamente después de la medición se limpia la superficie del prisma con un

paño suave y luego con un trozo de algodón humedecido con unas gotas de solvente
(Hexano u otro solvente adecuado, como por ejemplo una fracción liviana de petróleo,
acetona o tolueno, para limpiar el prisma del refractómetro). Se deja secar.
● Se mide el índice de refracción dos veces más, se calcula la media aritmética de las
tres mediciones y se toma este valor como el resultado final.
REACTIVOS
● Se deben usar solamente reactivos de grado analítico reconocido y agua destilada
● Laurato de etilo de calidad adecuada para refractometría, e índice de refracción
conocido.
● Hexano u otro solvente adecuado, como por ejemplo una fracción liviana de
petróleo, acetona o tolueno, para limpiar el prisma del refractómetro.

EXTRACCIÓN POR ARRASTRE DE VAPOR

El equipo extractor de aceites ha sido diseñado para obtener la máxima pureza en el
proceso de destilación. Por ello, se utilizan materiales que no contaminan el producto, a la
vez que son resistentes a choques térmicos y altas temperaturas.

MATERIALES
- 1 Agitador de vidrio
- 1 condensador recto
- 1 Alargadera
- 2 balones de destilación de fondo Redondo
- 1 Varilla de vidrio
- 1 Vidrio reloj
- 3 pinzas con nuez
- 2 mecheros Bunsen
- 2 trípodes
- 1 tubo en U
- 2 erlenmeyer 100 mL
- 1 vaso de precipitado 100 mL
- 1 vaso de precipitado 250 mL
- 1 Balanza
- 1 Balón de destilación de 1000 mL vacío
- 1 Balón de 125 mL
- 1 Vial color ámbar
- Material para extraer
- Butanol
PROCEDIMIENTO
El proceso de extracción tiene muy bajo rendimiento que oscila entre 0,001 a 1,0%

- Llenar el balón generador de vapor hasta la mitad con agua del grifo, e instalar un tubo
largo de vidrio (servirá como sello de seguridad para la generación de vapor).
- El balón donde se realiza la extracción se llena con material a extraer en pequeños
pedazos de igual hasta ¾ de su altura, midiendo la masa de material adicionada. Anotar el
valor.
- Realiza el montaje de arrastre con vapor mostrando en la ilustración teniendo en cuenta lo
siguiente:

FIGURA 1. MONTAJE EQUIPO ARRASTRE CON VAPOR DE AGUA

- No olvidar conectar el condensador recto al Sistema de agua para asegurar su

enfriamiento, con la entrada de agua fresca en la parte de inferior y la salida por la superior,
recuerde que debe mantener un flujo de agua de tal manera que el condensador se mantenga
fría.
- Al finalizar el condensador se puede adaptar un tubo en U a modo de tubo florentino para
realizar la separación del aceite extraído o recogerlo en un Erlenmeyer pequeño y separarlo
posteriormente en un embudo de decantación.
- Se debe de verificar que el sistema se encuentra sellado de manera correcta para evitar la
pérdida de volátiles y que el condensador se encuentre lo suficientemente frío para poder
retener las sustancias de interés.

EXTRACCIÓN

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA:  
 
● Pesar balón de destilación de 1000 mL vacío.  
● Introducir los 20 mL del aceite esencial en un balón de destilación de 1000 mL y
pesar nuevamente para conocer el peso del aceite. Posterior a esto agregar a este 20 mL de
Butanol (relación 1:1 mL) y pesar antes de iniciar la agitación.  
● Agitar esta mezcla durante 15 minutos, hasta que esté totalmente homogénea. Una
vez terminado este paso, vuelve a pesar.  
● Destilar a temperatura constante durante 2-3 horas o según lo especifique la
literatura para cada especie, mantener el flujo de destilación de 2-3 mL por minuto. 
● Determinar el tiempo de destilación a partir de que empieza a obtenerse el aceite.  
● Medir la capa superior de aceite esencial recogido en el recipiente graduado. 
● Esperar 10 minutos después de terminar el calentamiento antes de colectar el aceite. 
● Abrir la llave, dejar caer el agua y descartarla. Recibir la parte orgánica en un balón
de 125 ml y agregar al balón aproximadamente 1 mL de disolvente orgánico utilizado
anteriormente (Butanol), para lavar y arrastrar todo el aceite recuperado.  
● Eliminar el disolvente orgánico utilizando rotavapor. 
● Pesar el aceite obtenido, verterlo en vial color ámbar y almacenar a 4ºC.  
● Determinar el porcentaje de rendimiento a partir del peso del aceite entre el peso de
la materia vegetal por cien.  
● Lavar el destilador con suficiente metanol y agua destilada para dejarlo
completamente limpio y evitar cualquier contaminación cruzada en la siguiente corrida. 

- En un Beaker de 100 mL (previamente pesado) agregar 20 mL del aceite esencial, pesar

nuevamente el Beaker con el aceite para conocer el peso del aceite. Posterior a esto agregar
a este 20 mL de Butanol (relación 1:1 mL) y pesar antes de iniciar la agitación.  
Agitar esta mezcla durante 15 minutos, hasta que esté totalmente homogénea. Una vez
terminado este paso, vuelve a pesar el Beaker.  
Filtrar la mezcla al vacío, y una vez terminado este paso traspasar el filtrado a un Beaker y
pesar.

Nota: pesar el papel filtro antes de usar.  

Para la evaporación del solvente, se controla la temperatura a 120°C.  
Butanol. Es el solvente  
- Iniciar el proceso de extracción aplicando calor al balón generador de vapor, este se
suministra a través de un mechero a gas o una manta de calefacción, si se va realizar con
plancha es necesario cambiar este balón por uno de fondo plano para mejorar la
distribución.

- A medida que se genera vapor en este balón, este se va a conducir a través del tubo de
vidrio, calentándolo, hasta el balón de extracción, recuerde vigilar que el sistema se va
calentando progresivamente. Si después de un tiempo prudencial no se calienta o no llega el
vapor hasta el balón de destilación es necesario aumentar el calor dado al balón de vapor,
para evitar la condensación excesiva del vapor en la línea o en el balón de extracción, se
debe aislar empleando algún material con baja conductividad térmica, por otro lado, si en el
balón de extracción se comienza a condensar el vapor de agua y se inunda, se puede colocar
otro mechero para calentar este, cuidando de no quemar el material vegetal.

- El vapor que sale del balón de extracción se conduce a través del tubo de vidrio (5) hasta
el condensador, donde este cambia de fase, se debe de observar una buena condensación,
manipulando el flujo de agua de refrigeración, para evitar el escape de compuestos volátiles
de interés.
- A medida que se realiza la extracción, se puede observar la separación del aceite de la fase
acuosa, para determinar el punto final de la extracción se puede observar un poco del
condensado en un vidrio de reloj para observar si aún se extrae aceite.

- Posteriormente se procede a la separación del aceite extraído, utilizando bien sea una
pipeta de 1 ml o un embudo de decantación si la cantidad es suficiente. Medir su volumen
con un instrumento adecuado (probeta pequeña, pipeta graduada, etc.) y su masa.

CARACTERIZACIÓN POR CG-MS

-La muestra de aceite esencial se le agrega cloruro de calcio para secar la muestra para
posteriormente determinar por CG-MS

La Cromatografía de Gases acoplada a Espectrometría de Masas (GC/MS, por sus siglas en

inglés) es una técnica analítica dedicada a la separación, identificación y cuantificación de
mezclas de sustancias volátiles y semivolátiles. La separación de dichas sustancias depende
de la diferente distribución de las sustancias estudiadas entre las fases móvil y estacionaria
que conforman el sistema. Una vez separadas las sustancias son fragmentadas y analizadas
en función de su patrón de fragmentación, el cual puede ser comparado con información
contenida en una base de datos de espectros de masas para su identificación preliminar. La
identificación definitiva, así como la cuantificación de cada sustancia debe hacerse
mediante el empleo de sustancia de referencia. El Instituto de Química Aplicada cuenta con
un cromatógrafo con detector de masas.

Para la determinación se fijaron las condiciones óptimas de trabajo tales como: 

● volumen de inyección de 0.2 µL,  
● flujo del gas de arrastre (He) de 0.5 mL/min 
● temperatura del inyector de 220 °C 
● temperatura del detector FID de 230 °C 
● modo Split 3:1 
● programa de temperatura del horno desde 50°C por 4 min 
● un incremento de 10°C/min hasta 220°C y mantenido por 2 min a esta temperatura
● La corroboración de los compuestos de interés se realizó por medio del detector de
espectrometría de masas con modo de ionización de impacto electrónico a 70 eV 
●  Un scanner del rango de masas entre 50 y 500 m/z 
● Al espectrómetro de masas se le realizó tunning empleando perfluorotributilamina
PFTBA y los espectros de masas de las muestras de aceite esencial fueron corroborados
usando la biblioteca Wiley instalada junto con el software del equipo. 
 
ESTANDARIZACIÓN DE LA METODOLOGÍA ANALÍTICA
Se prepara una solución estándar de referencia de 1000 ppm a partir de 11.32 μL de “aceite
esencial” y se diluye con metaanol grado análitico en un balón aforado de 10.0 mL. Se
prepara una solución estándar de referencia para el patrón interno de 1000 ppm, medir
11.39 μL de “aceite esencial” y se diluye con metanol grado análitico hasta 10.0 mL en un
balón aforado.

Se preparan soluciones por dilución del estándar de referencia, con el fin de obtener un
rango de concentraciones de 1 a 10 ppm y de 10 a 100 ppm del compuesto objeto de
estudio (“aceite esencial”). Los datos obtenidos de esta manera, se utilizan para hallar el
rango de linealidad del método y la sensibilidad del mismo por medio del límite de
detección y cuantificación.

VALIDACIÓN DEL MÉTODO

Para el método cromatográfico se evaluó linealidad, la precisión en cuanto a repetitividad y

reproducibilidad. Se evaluó la exactitud teniendo en cuenta la recuperación del patrón
interno usado y la sensibilidad fue evaluada en cuanto a límite de detección y
cuantificación.

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