GUÍA DE PRÁCTICA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA

EXPERIENCIA CURRICULAR:
LABORATORIO CLÍNICO

2023-1
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PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA

1. DATOS GENERALES

2.1 Unidad Académica: MEDICINA

2.2 Modalidad de Estudio: PRESENCIAL (Híbrido - mixto)

2.3 Semestre Académico: 2023 – 1

2.4 Ciclo de estudios: V

2.5 Requisitos: Ninguno

2.6 Carácter: Obligatorio

2.7 Número de Créditos: 3.5

2.8 Duración: 15 sesiones

2.9 N° de horas totales: 80.00 (32.00 Teoría y 48.00 Práctica)

(80.00 presenciales y 0.00 virtuales)

2.10 Docente/Tutor:
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CONTENIDO

PRÁCTICA N° 1: Toma de Muestra de Sangre Venosa, Frotis y Coloración Wright…..…1

PRÁCTICA N° 2: Fórmula leucocitaria. Estudio de la serie roja y plaquetas……………...5
PRÁCTICA N° 3: Recuento de Glóbulos Blancos………………………………………….…9
PRÁCTICA N° 4: Hemoglobina – Hematocrito……………………………………………….12

PRÁCTICA N° 5: Leucograma Anormal Estudio de casos

clínicos…………………………………………………………………………………………….17
PRÁCTICA N° 6: Reforzamiento de prácticas de laboratorio……………………………....20
PRÁCTICA N° 7: Test de coagulación sangría Y Recuento de plaquetas……………..…21
PRÁCTICA N° 8: Determinación de grupo sanguíneo………………………………………24

PRÁCTICA N° 9: Examen de orina completo y

bioquímica…………………………………………………………………………………………28
PRÁCTICA N° 10: Reforzamiento de prácticas de laboratorio……………………………..32
PRÁCTICA N° 11: Glucosa ocasional Test de Tolerancia a la Glucosa…………….……..34
PRÁCTICA N° 12: Dosaje de Colesterol……………………………………………………...38
PRÁCTICA N° 13: Inmunología: Pruebas de Aglutinación……………………………….…41
PRÁCTICA N° 14: Inmunocromatografía para Helicobacter pylori……………………..….44

PRÁCTICA N° 15: Demostración de los procesos de Biología Molecular y su

interpretación……………………………………………………………………………………...47
Anexos………………………………………………………………………………………….….49
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1. INSTRUCCIONES GENERALES
● El estudiante deberá asistir a las prácticas en el horario programado,
puntualmente, portando su bata blanca y los equipos de protección personal,
mascarilla, gorro y guantes. Solo se tendrá una tolerancia de 5 minutos para el
ingreso.

● Los estudiantes deberán cumplir en todo momento las normas de bioseguridad

establecidas en los protocolos.

● Todos los estudiantes deben participar activamente en el desarrollo de las

prácticas.

● Los estudiantes tienen la obligación de cuidar todos los equipos y materiales del
laboratorio, si por descuido o manejo negligente malogran o deterioran los
mismos deberán reponerlos.

● Para la evaluación de las prácticas los estudiantes presentarán un informe de

la actividad realizada.

● El estudiante que no asista a la clase práctica, será calificado con cero.

2. SUMILLA
La experiencia curricular de Laboratorio Clínico pertenece al área de estudios
específicos; es de naturaleza teórico-práctica y de carácter obligatorio, está
orientado a que el estudiante identifique y analice la correlación clínica
patológica de los pacientes que están a su cargo, utilizando para ello
conocimientos previos para la evaluación de casos clínicos planteados y
establecer modos de trabajo uniforme.

3. COMPETENCIA ESPECÍFICA
Explica el diagnóstico presuntivo o definitivo del paciente asignado para
elaborar el plan de trabajo que incluya el tratamiento pronóstico y prevención
de los problemas de salud de mayor frecuencia del individuo; mediante la
elaboración de la historia clínica considerando fundamentos etiopatogénicos y
fisiopatológicos demostrando un buen manejo clínico y trato humanizado.
Determina los problemas de salud complejos brindando manejo inicial para
estabilizar las emergencias de ser necesario de acuerdo a los criterios para
referencia y a las normas del ente rector de salud respetando las costumbres
familiares y considerando la ética profesional
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PRÁCTICA N° 1: Toma de Muestra de Sangre Venosa, Frotis y Coloración Wright.

I. OBJETIVOS
● Obtener sangre venosa.
● Realizar frotis y coloración de Wright.

II. MATERIALES Y REACTIVOS

MATERIALES: POR MESA

● Tubos al vacío con anticoagulante EDTA para extracción de sangre (3)
● Agujas descartables hipoalergenicas (3)
● Sistema de extracción al vacío / holder (1)
● Torundas de algodón. (POR ALUMNO)
● Alcohol etílico. (70%) (POR ALUMNO)
● Marcador de vidrio. (1)
● Láminas esmeriladas. (3)
● Torniquete o ligadura. (1)
● Guantes descartables. (POR ALUMNO)
● Portaobjeto de vidrio con extremo esmerilado (3)
● Bandeja o soporte para la coloración. (1)
● Papel toalla.
● Reloj marcador/ cronómetro. (1)
● Perilla de hule. (1)
● Pizeta con agua destilada. (3)

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REACTIVOS:
● Aceite de inmersión.
● Solución de Wright. - Buffer pH 6.8 3 ML POR MESA

PROCEDIMIENTO
PARA SANGRE VENOSA:
⮚ Lavar, secar las manos y colocarse los guantes.

⮚ Identificar el tubo y la lámina adecuadamente.

⮚ Explicar al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.

⮚ Sentar cómodamente al paciente para la extracción tomando en cuenta que el

área de extracción debe contar con suficiente iluminación

⮚ Seleccionar la vena apropiada para la punción.

⮚ Realizar asepsia con torunda de algodón humedecida con alcohol etílico al 70%
de adentro hacia fuera.
⮚ Colocar el torniquete firmemente alrededor del brazo, y pedir al paciente que abra
y cierre la mano varias veces para favorecer la dilatación de las venas.

⮚ Proceder a puncionar la vena seleccionada.

⮚ Colocar la aguja con el bisel hacia arriba sobre la vena a puncionar.

⮚ Introducir la aguja en el centro de la vena y penetrar a lo largo de la vena de 1 a
1.5 cm.

⮚ Introducir el tubo en el dispositivo (holder) de manera que al ejercer presión se

atraviese el extremo inferior de la aguja, para que la sangre fluya hacia el tubo
por efecto del vacío.

⮚ Mezclar la sangre de cada tubo invirtiendo los tubos suavemente varias veces

⮚ Retirar torniquete tirando del extremo doblado y colocar una torunda de algodón
sobre la piel donde se encuentra oculta la punta de la aguja.

⮚ Extraer la aguja con un movimiento rápido por debajo de la pieza de algodón,

pedir al paciente que presione firmemente la torunda durante 3 minutos con el
brazo extendido.
⮚ Separar la aguja del holder cuidadosamente y eliminarla.

⮚ Verificar nuevamente la identificación del paciente

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PARA FROTIS:

⮚ Antes de utilizar los portaobjetos de vidrio, limpiarlos con alcohol

⮚ Identificar la lámina adecuadamente en el extremo del portaobjeto (parte

esmerilada).

⮚ Colocar en el portaobjeto una pequeña gota de sangre de 2 mm de diámetro a

una distancia de 2 a 3 mm del extremo del portaobjeto y hacer rápidamente el
extendido
⮚ Para evitar la coagulación; se puede utilizar sangre con EDTA. (Siempre conviene
realizar cuando menos dos frotis)

⮚ Poner la lámina extensora a un ángulo de 45° del portaobjeto y moverla hacia

atrás para que haga contacto con la gota, que debe extenderse rápidamente.
⮚ El extendido debe tener unos 30 mm. de largo. (Anexo 6).
⮚ Dejar secar a temperatura ambiente.

⮚ Colocar la lámina completamente seca, sobre un soporte. (no necesita fijación

previa pues el metanol del Wright fija la preparación).

⮚ Cubrir todo el frotis con coloración de Wright y dejarlo en reposo 3 minutos (o el

tiempo necesario según la maduración del colorante).

⮚ Agregar una cantidad igual de agua con buffer (pH 6.8) evitando derramar el
Wright, mezclar con una perilla de hule con suavidad para asegurar una mezcla
uniforme, aparecerá una película verde metálica, dejarlo en reposo por 5 minutos
o el tiempo necesario según la maduración del Wright.

⮚ Lavar la lámina con agua de chorro hasta quitar el exceso de la mezcla.

⮚ Limpiar la parte posterior del portaobjeto con una torunda de algodón impregnada
con alcohol, para eliminar todos los restos de colorante.

⮚ Dejar secar la preparación al aire colocando la lámina en posición vertical en una

rejilla para portaobjeto.

IV. CONCLUSIONES

El alumno sabe extraer adecuadamente sangre capilar y sangre venosa para

hemograma completo
El alumno realiza adecuadamente el proceso de coloración de lámina para lectura
de hemograma

V. EVALUACIÓN

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El alumno desarrollará y efectuará adecuadamente los procedimientos según la

guía y responderá a las preguntas del profesor

1. ¿Cuáles son los tipos de tubos de extracción con anticoagulante utilizados,

mencione las pruebas de laboratorio que se tomen en ellos?
2. ¿Cuáles son los tipos de tubos de extracción sin anticoagulante utilizados,
mencione las pruebas de laboratorio que se tomen en ellos?
3. Explique las principales características de la coloración wright y los principales
usos de esta coloración

VI. ENLACE DE REFERENCIA

[Link]
[Link]
[Link]

COLORACIÓN WRIGHT
[Link]
[Link]
[Link]

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta
reimpresión Bogota:Editorial Méedica Internacional; 2010
Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones
en el diagnóstico clínico. Panamericana 2015
Huaman S J. Laboratorio clínico. Procedimientos e interpretación. 2da. ed
Trujillo-Peru: Editorial Universitaria UNT; 2018
Kottke-Marchant K amp; Bruce Davis [Edit] Laboratory Hematology Practice
1st ed. United Kingdom: WileyBlackwell; 2
Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed
Madrid:Masson; 2015.
Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11
ed. Elsevier España 2014
Zurita Macalupú, Zurita . Manual de procedimientos de laboratorio:
laboratorios locales I: laboratorios locales II, minsa 2013

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PRÁCTICA N° 2: Fórmula leucocitaria. Estudio de la serie roja y plaquetas

I. OBJETIVOS
● Determinar tipos de células sanguíneas en frotis.
● Realizar formula leucocitaria.

II. MATERIALES y EQUIPOS:

Materiales: POR MESA
● Láminas de frotis sanguíneo coloreadas con Wright. (1)
● Papel limpia lente.
● Alcohol isopropilico.
● Guantes descartables. POR ALUMNO
Reactivos
● Aceite de inmersión.
Equipos: POR MESA
● Microscopio con objetivo 40x y 100x. (1)
● Contómetro diferencial manual (1)

III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

● La observación inicia con el objetivo 40x para obtener un cuadro general del
número de células, la distribución de las mismas y la calidad de la tinción.
● Seleccionar las áreas a observar con objetivo de inmersión 100x buscando una
distribución homogénea de las células.
● Realizar el recuento diferencial identificando las características y grado de
desarrollo de las células; estos se reportan en porcentajes para lo cual tiene que
contarse un mínimo de 100 leucocitos estos pueden convertirse en número de
células por mm³ (número absoluto).
● Observar en los eritrocitos: el tamaño, la forma, la coloración, las inclusiones
intracitoplasmáticas y la presencia de hematíes nucleados.
● Cada alumno debe aprender a observar todos los elementos del frotis mientras
lleva a cabo el recuento diferencial. verificar los puntos siguientes.
ERITROCITOS:

⮚ Tamaño: microcitos, macrocitos y normocitos. El grado de variación en

tamaño se reduce al término de anisocitosis.

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⮚ Forma: esferocitos, codocitos, eliptocitos, megalocitos, drepanocitos,

acantocitos,

⮚ equinocitos etc. El grado de variación en forma se reduce al término de

poiquilocitosis.

⮚ Concentración de hemoglobina: Grado importante de hipocromía, e

hipercromía aparente, observar el aumento aparente o evidente de la
proporción de glóbulos rojos policromáticos.

⮚ Otros hallazgos anormales: La policromatofilia (basófilia difusa), punteado

basófilo, anillo de Cabot, cuerpos de Howell-Joly, las células parasitadas
y la formación de Rouleaux

LEUCOCITOS:

⮚ Observar la madurez de los leucocitos, el número promedio,

anormalidades morfológicas, signos de malignidad, la variante de
leucocitos que predominan.

⮚ Comparar el recuento de leucocitos por milímetro cúbico con lo observado

en el frotis.

⮚ GB: Glóbulos Blancos.

N: Neutrófilos.

L: Linfocitos.

B: Basófilos.

M: Monocitos.

E. Eosinófilos

PLAQUETAS:

⮚ Observar si se encuentran en cantidades aproximadamente normales

⮚ La disminución de las plaquetas en un frotis puede deberse a la manera

de realizarlo, pero su falta o su disminución considerable, en un frotis bien
hecho pueden hacer sospechar de trombocitopenia. Debe observarse si
las plaquetas que se encuentran normales o existen alteraciones
(macroplaquetas, pequeñas)

⮚ Comparar el recuento de plaquetas por milímetro cúbico con lo observado

en el frotis.

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IV. CONSIDERACIONES

LÍNEA ROJA:

⮚ Anisocitosis: leve, moderada o severa (reportar predominio).

⮚ Poiquilocitosis: leve, moderada o severa (reportar predominio).

⮚ Hipocromía: leve, moderada o severa.

⮚ Otros: reportar cualquier hallazgo anormal.

LÍNEA BLANCA:

⮚ Madurez de los leucocitos.

⮚ Variante de leucocitos que predomina.

⮚ Alteraciones encontradas en los leucocitos.

LÍNEA PLAQUETARIA:

⮚ Cantidad.

⮚ Tamaño: macro o micro plaquetas.

VALORES DE REFERENCIA:

⮚ Eritrocitos sin alteraciones en forma, tamaño y color.

⮚ Leucocitos maduros sin presencia de anormalidades.

⮚ Plaquetas distribución y tamaño normal, comparar los observado en

recuento con mm³.

V. CONCLUSIONES
El alumno reconoce las células sanguíneas de la lamina periférica.

I. EVALUACIÓN
1. Cuáles son los tipos celulares encontrados en un recuento diferencial de un
hemograma completo

2. Mencione el cuadro de valores normales de los procesos realizados en un

hemograma completo.

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VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta
reimpresión Bogotá:Editorial Médica Internacional; 2010
Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el
diagnóstico clínico. Panamericana 2015
Huaman S J. Laboratorio clínico. Procedimientos e interpretación.2da. ed Trujillo-
Peru: Editorial Universitaria UNT; 2018
Kottke-Marchant K amp; Bruce Davis [Edit] Laboratory Hematology Practice 1st
ed. United Kingdom: WileyBlackwell; 2
Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed Madrid:Masson;
2015.
Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11 ed.
Elsevier España 2014
Zurita Macalupú, Zurita .Manual de procedimientos de laboratorio: laboratorios
locales I: laboratorios locales II, minsa 2013

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PRÁCTICA N° 3: Recuento de Glóbulos Blancos.

I. OBJETIVOS
● Contar glóbulos blancos usando cámara de neubauer.
II. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

MATERIALES: POR MESA

● Tubos al vacío con anticoagulante EDTA para extracción de sangre (3)
● Agujas descartables hipoalergenicas (POR ALUMNO)
● Sistema de extracción al vacío / holder (1)
● Torundas de algodón. (POR ALUMNO)
● Alcohol etílico. (70%) (POR ALUMNO)
● Torniquete o ligadura. (1)
● Guantes descartables. (POR ALUMNO)
● Pizeta con agua destilada. (3)
● Cámara de Neubauer (1)

REACTIVOS
● Liquido hemolizante TURK.

EQUIPO:
● Microscopio POR MESA

III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

Procedimiento:
● Realiza toma de muestra de sangre utilizando tubos con EDTA.
● Mezclar 20 ul de sangre total y 380 ul de liquido hemolizante TURK, esto
da una dilución 1:20. Por consiguiente debemos multiplicar por veinte.
(D=20)
● Dejar reposar 10 minutos y colocar una gota sobre la cámara de
neubauer.
● Finalmente colocar la cámara de neubauer sobre el microscopio para la
lectura.

Para obtener el resultado final se utiliza la siguiente formula:

Numero de leucocitos por mm3= L. D. CV

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L es el número de leucocitos contados.

D es el factor de dilución
CV es la corrección de volumen.

Para aplicar la formula anterior debes tener en cuenta lo siguiente:

Como el recuento lo hemos hecho en los 16 cuadros de los 4 cuadros grandes,
situados en las esquinas de la cámara, el volumen total en el que hemos realizado
el recuento será 0.1 mm3 .4= 0.4 mm3. Como el resultado del recuento lo tienes
que expresar por mm3 la corrección de volumen (CV) será igual a 1/0,4 mm3 =
2,5.
Si utilizas exactamente estas condiciones, es decir cuentas los leucocitos en 0,4
mm3 y realizas una dilución 1:20 la formula se simplifica bastante, tal y como
puedes ver.
Numero de leucocitos por mm3= Numero de leucocitos contados. 2,5. 20
Numero de leucocitos por mm3= Numero de leucocitos contados .50

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IV. CONCLUSIONES
Reportar el número de leucocitos contados en la cámara de neubauer y reportar
por mm³.
Describir los diferentes pasos que se realizan para realizar el conteo.

V. EVALUACIÓN
1. Mencione el cuadro de valores normales de los procesos realizados en la práctica
de laboratorio clínico
2. Mencione las patologías que podrían relacionarse con las alteraciones que
podrían presentarse al evidenciar la alteración de los valores normales en un
hemograma completo.

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta
reimpresión Bogota:Editorial Méedica Internacional; 2010
Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el
diagnóstico clínico. Panamericana 2015
Huaman S J. Laboratorio clínico. Procedimientos e interpretación.2da. ed Trujillo-
Peru: Editorial Universitaria UNT; 2018
Kottke-Marchant K amp; Bruce Davis [Edit] Laboratory Hematology Practice 1st
ed. United Kingdom: WileyBlackwell; 2
Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed Madrid:Masson;
2015.
Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11 ed.
Elsevier España 2014
Zurita Macalupú, Zurita .Manual de procedimientos de laboratorio: laboratorios
locales I: laboratorios locales II, minsa 2013

Cell Culture Manual 2008-2009, 3rd Edition. Sigma Life Science, pp 230-231.
SOP #290 Cell Counting and Viability Determination , Johns Hopkins University .
The Genetic Resources Core Facility: The Cell Center . MD, USA.
Wikipedia contributors. Hemocytometer. Wikipedia, The Free Encyclopedia. May
22, 2008, at 07:00 UTC. Available at: [Link]
Fundación Comprarte Vida, A.C. Manual de Procedimientos Serológicos y
Celulares de Histocompatibilidad. Departamenteo de Inmunología e
Inmunogenética del Instituto de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos, 2007.
[Link]
[Link]

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PRÁCTICA N° 4: Hemoglobina – Hematocrito.

I. OBJETIVOS
● Determinar el valor de hemoglobina y hematocrito de 5 estudiantes.

II. FUNDAMENTOS
HEMATOCRITO
El hematocrito es el volumen de eritrocitos expresados en porcentaje del volumen de
sangre como una fracción del volumen de sangre, para determinar si un paciente
presenta o no anemia Evaluar la presencia y la severidad de la anemia.

HEMOGLOBINA (CIANMETAHEMOGLOBINA)
Reactivo líquido para la determinación fotométrica de Hemoglobina en sangre.

SIGNIFICANCIA CLÍNICA
La Hemoglobina es una proteína conjugada normalmente presente sólo en los
eritrocitos. Está constituida por cuatro grupos heme (porfirinas), unidos a una cadena
polipeptídica. Los grupos heme son capaces de ligar reversiblemente oxígeno ó
dióxido de carbono. La Hemoglobina transporta el oxígeno desde los pulmones a los
diferentes tejidos corporales, donde es utilizado en el metabolismo energético, y retira
de ellos el dióxido de carbono producido por dicho metabolismo.
La cuantificación de la Hemoglobina ya sea en sangre venosa, arterial o capilar, es
de utilidad para el diagnóstico de variadas patologías que alteran su concentración,
puesto que su concentración en la sangre es esencial para que el transporte de los
gases sea adecuado.

FUNDAMENTOS DEL METODO

El reactivo de Hemoglobina VALTEK® se basa en el método de la
cianmetahemoglobina. Los eritrocitos son lisados por acción de un agente
tensioactivo presente en el reactivo, liberando su contenido de Hemoglobina en la
solución.
La Hemoglobina liberada es oxidada a metahemoglobina por el ferricianuro, siendo
esta última convertida en cianmetahemoglobina por la presencia de cianuro. La
absorbancia de la cianmetahemoglobina es medida a 540 nm., siendo la intensidad

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del color obtenida, directamente proporcional a la concentración de Hemoglobina en

la muestra.

III. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

MATERIALES: POR MESA

● Torundas de algodón (POR ALUMNO)

● Alcohol etílico (70%) (POR ALUMNO)
● Marcador de vidrio (1)
● Capilares heparinizados (3)
● Tubos al vacio con anticoagulante EDTA. (3)
● Plastilina (para sellar capilares con su respectiva base numerada)
● Lancetas desechables (3)
● Guantes descartables. (POR ALUMNO)
● sistema vacuteiner / holder (1)
● Micropipetas 10-100 ul (1)
● Micropipetas 100-1000 ul. (1)

REACTIVOS
● El reactivo de Hemoglobina VALTEK®
Reactivo Drabkin: Conservado entre 2° y 25°C. y protegido de la luz, estable hasta
la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
Composición:
Ferricianuro de Potasio 0,6 Mm, Cianuro de Potasio 0,7 Mm, Sterox-SE 1 ml/L,
Buffer y estabilizantes no reactivos c.s.

EQUIPO:

● Micro centrífuga para hematocrito con una fuerza de 10,000 - 13,000 rpm.
● Microscopio (1 por mesa)
● Espectrofotómetro (1 por practica)
● Baño maría (1 por practica)

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IV. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

HEMATOCRITO CON SANGRE CAPILAR:
⮚ Lavar, secar las manos y colocar los guantes.

⮚ Explicarle al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.

⮚ Seleccionar el dedo anular de la mano a puncionar y dar masaje para mejorar la

irrigación sanguínea.

⮚ Realizar asepsia con torunda de algodón humedecida con alcohol etílico al 70%.

⮚ Con lanceta desechable efectuar la punción limpia y rápida de 2 a 3mm. de

profundidad.

⮚ Eliminar la primera gota de sangre con un trozo de algodón seco. –

⮚ Colocar el capilar de modo que penetre la sangre libremente y que llene las dos
terceras partes.

⮚ Cuando se ha obtenido la cantidad de sangre adecuada se presiona el lugar de

la punción con un trozo de algodón humedecido con alcohol etílico al 70% hasta
que cese el sangrado.

⮚ Colocar los capilares verticalmente en la plastilina

⮚ Colocar el capilar sellado en una centrífuga de micro hematocrito, con el extremo

abierto hacia el centro de la microcentrífuga.
⮚ Centrifugar a velocidades de 10,000 a 13,000 rpm por 5 minutos.

⮚ Después del centrifugado leer en la tabla para hematocrito haciendo coincidir el

menisco del plasma con el final de la marca de la tabla y el fondo del empacado
de eritrocitos que coincidan con el inicio de la marca de la tabla.

⮚ Leer siempre en la dirección de la numeración ascendente cuantos mL de

empacados de eritrocitos tiene la muestra.

DETERMINACION DE HEMOGLOBINA

⮚ Hacer una serie de tres tubos con el estándar de hemoglobina para calcular el
factor de calibración.

⮚ Colocar al primer tubo 5 mL de estándar puro.

⮚ Colocar al segundo tubo 2.5 mL de estándar puro.

⮚ Colocar al tercer tubo 1 mL de estándar puro.

⮚ Llevar al volumen de 5 mL con cianometahemoglobina el segundo y tercer

tubo.

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⮚ Mezclar y dejar reposar 10 minutos.

⮚ Leerlos en espectrofotómetro a 540 nm y anotar la densidad óptica de los

tubos.

⮚ Obtener la concentración de cada tubo en gramos por decilitros.

⮚ Dividir la concentración de cada tubo entre la densidad óptica.

⮚ Sumar los 3 factores y sacar un promedio.

⮚ Este será el factor de calibración por el cual se multiplicarán las densidades

ópticas de las

⮚ muestras. (Anexo 7)

⮚ La preparación de la cianometahemoglobina estará sujeto a las indicaciones

del fabricante del reactivo.

⮚ Medir exactamente 5 mL de solución de cianometahemoglobina en un tubo de

13x100 mm.

⮚ Con pipeta automática colocar 20 microlitos de sangre.

⮚ Mezclar bien y dejar reposar por 10 minutos.

⮚ Transferir a la cubeta de lectura y leer en el espectrofotómetro a 540 nm.

V. CONCLUSIONES
Valores de referencia: Hematocrito
Hombre: 42%-51%

Mujer: 38%-42%

Niños: 33%-38%

Recién nacidos: Hasta 55%

Valores de referencia:Hemoglobina
Hombre: 14.0-17.0 gr/dL

Mujer: 12.5-15.0 gr/dL

Niños: 11.0-13.0 gr/dL

Recién nacidos: Hasta 18 gr/dL

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VI. EVALUACIÓN
1. Describir los diferentes pasos que se realizan para realizar una prueba de
hematocrito.

2. Analizar y describir los diferentes pasos que se realizan para realizar una prueba
de hemoglobina.

VII. ENLACES DE REFERENCIA

HEMATOCRITO
[Link]
[Link]

HEMOGLOBINA
[Link]
[Link]

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta reimpresión

Bogota:Editorial Méedica Internacional; 2010
Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el
diagnóstico clínico. Panamericana 2015
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United Kingdom: WileyBlackwell; 2
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Zurita Macalupú, Zurita .Manual de procedimientos de laboratorio: laboratorios
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PRÁCTICA N° 5: Leucograma Anormal Estudio de casos clínicos

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I. OBJETIVOS
● Realiza una adecuada interpretación de un leucograma.

II. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS. POR MESA

MATERIALES
● Laminas patológicas. (3)
● Diapositivas
● Guía de prácticas

REACTIVOS
● Aceite de inmersión.

EQUIPOS (POR MESA)

● Microscopio. (1)
● Proyector multimedia.

III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

Procedimiento:
Colocar las láminas patológicas sobre los microscopios, previamente adicionar
aceite de inmersión para poder observar con objetivo de 100X. Siempre leer en
la parte de final de la lámina periférica, observar mínimo 10 campos y anotar
células anormales de dicha lamina.
Dibujar y discutir las características de las células anormales.

IV. CONCLUSIÓN
Realiza una adecuada interpretación de un leucograma.

V. EVALUACIÓN
⮚ Esquematice la clasificación de leucemias
⮚ Defina los conceptos básicos de la mielodisplasia

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⮚ Resolver el siguiente caso clínico:

● Paciente femenino de 63 años que es diagnosticada en 1994 de carcinoma

epidermoide de cérvix IIA, tratada mediante histerectomía total, radioterapia externa
y braquiterapia endocavitaria.

● En febrero de 2004 presenta recidiva del tumor, por lo que inicia quimioterapia con
cisplatino 50 mg/m2 dia 1 y topotecan 0.75 mg/m2 dia 1 al 3.

● Posteriormente es diagnosticada de adenocarcinoma de mama estadio IIIC,

recibiendo quimioterapia neoadyuvante con adriamicina 50 mg/m2 t Docetaxel
75mg/m2 durante seis ciclos. En hunio de 2005 se realiza tumorectomia y
linfadenectomia axilar derecha, complementando el tratamiento con quimioterapia
esquema CMF durante 6 ciclos y radioterapia.

● La paciente pasa a revisión hasta octubre de 2007, fecha en la que presenta

neutropenia y anemia, motivo por el cual es ibngresada en el servicio de oncología.

● Los análisis microbiológicos realizados son negativos y en las pruebas de imagen

no se objeta recidiva de la enfermedad, siendo diagnosticada mediante aspirado de
médula osea de síndrome mielodisplasico anemia refractaria con exceso de blastos
tipo I con sideroblastos en anillo secundario.

PREGUNTAS CASO CLINICO

1. Explique usted como podría encontrar los resultados de laboratorio de la
paciente.
2. Explique la evolución natural de la enfermedad diagnosticada
3. Que exámenes de laboratorio solicitarías para confirmar el diagnostico

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta reimpresión

Bogota:Editorial Méedica Internacional; 2010
Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el
diagnóstico clínico. Panamericana 2015
Huaman S J. Laboratorio clínico. Procedimientos e interpretación.2da. ed Trujillo-
Peru: Editorial Universitaria UNT; 2018
Kottke-Marchant K amp; Bruce Davis [Edit] Laboratory Hematology Practice 1st ed.
United Kingdom: WileyBlackwell; 2
Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed Madrid:Masson;
2015.
Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11 ed.
Elsevier España 2014

18
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PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA

Zurita Macalupú, Zurita .Manual de procedimientos de laboratorio: laboratorios

locales I: laboratorios locales II, minsa 2013

[Link]

[Link]

[Link]

[Link]

19
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PRÁCTICA N° 6: Reforzamiento de prácticas de laboratorio

I. OBJETIVOS
Reforzamiento de prácticas de laboratorio

II. MATERIALES
Repasar materiales de interés de los alumnos de las sesiones tratadas para el
examen.

III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

Retroalimentación de temas de interés para los alumnos de las sesiones 1 hasta
la sesión 6 para el examen práctico.

IV. CONCLUSIONES
Alumnos están preparados para examen practico

V. EVALUACIÓN
El alumno realiza todos los pasos indicados en la guía evaluada
El alumno realiza satisfactoriamente los procedimientos evaluados

V. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta
reimpresión Bogota: Editorial Méedica Internacional; 2010
Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el
diagnóstico clínico. Panamericana 2015
Huaman S J. Laboratorio clínico. Procedimientos e interpretación. 2da. ed Trujillo-
Peru: Editorial Universitaria UNT; 2018
Kottke-Marchant K amp; Bruce Davis [Edit] Laboratory Hematology Practice 1st
ed. United Kingdom: WileyBlackwell; 2
Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed Madrid:Masson;
2015.
Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11 ed.
Elsevier España 2014
Zurita Macalupú, Zurita .Manual de procedimientos de laboratorio:
laboratorios locales I: laboratorios locales II, minsa 2013

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PRÁCTICA N° 7: Test de coagulación sangría Y Recuento de plaquetas

I. OBJETIVOS
Evaluar la cantidad de plaquetas existentes en la sangre para lo cual se diluye una muestra
de sangre con una sustancia con un líquido diluyente que hace a las plaquetas más visibles.
Evaluar en forma global el mecanismo intrínseco de la coagulación
Evaluar el funcionamiento y número de plaquetas, así como la contractilidad capilar.

II. MATERIALES
TIEMPO DE SANGRIA
MUESTRA:
Sangre capilar del dedo o del lóbulo de la oreja.

MATERIALES: POR MESA

- Lanceta descartable estéril.

- Papel filtro.

- Torundas de algodón humedecidas con alcohol. (POR ALUMNO)

- Guantes descartables POR ALUMNO

EQUIPO:

- Cronómetro. (POR MESA)

TIEMPO DE COAGULACIÓN
MUESTRA:
Sangre venosa.

MATERIALES: POR MESA

- Jeringas descartables. (POR ALUMNO)

- Tubos 12x75mm. (3)

- Torundas de algodón. (POR ALUMNO)

- Gradillas para tubos (1)

- Alcohol etílico al 70%. (POR ALUMNO)

- Torniquete.

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- Guantes descartables POR ALUMNO

EQUIPO:
- Baño de María a 37°C.

- Reloj marcador.

- Termómetro

III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

PROCEDIMIENTO: TIEMPO DE SANGRIA
- Lavar y secar las manos y colocarse los guantes.

- Explicar al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.

- Desinfectar cuidadosamente el área de punción.

- Puncionar el dedo índice a modo que corte transversalmente la dirección de las huellas

digitales, o el lóbulo de la oreja.

- Secar con el papel filtro cada medio minuto hasta que cese el sangramiento.

- Realizar el secado en forma descendente o circular sin tocar la piel.

- Anotar el tiempo desde que se punciona hasta que cesa el sangramiento y reportar.

PROCEDIMIENTOS: COAGULACION

- Lavar y secar las manos y colocarse los guantes.

- Identificar el tubo de acuerdo a la solicitud.

- Explicar al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.

- Desinfectar cuidadosamente el área de punción.

Obtener sangre venosa con una jeringa descartable y estéril.

- Poner en marcha el cronómetro en el momento en que la sangre penetre en la jeringa.

- Verter cuidadosamente 1 CC de sangre en 3 tubos, mantenerlos en baño María a 37ºC.

- Invertir cada medio minuto (sin agitar) los 3 tubos hasta que cada uno pueda invertirse sin

que se vierta su contenido.

- Tomar el tiempo de coagulación de cada uno de los tubos y luego sacar un promedio de

los tres.

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IV. CONCLUSIONES
El alumno sigue adecuadamente todos los procedimientos realiza adecuadamente la
obtención de la muestra
Analiza e interpreta los resultados

V. EVALUACIÓN FALTA REALIZAR UN CUESTIONARIO SOBRE EL TEMA QUE SE

TRATO
¿Que factores de la coagulacion analizan el tiempo de coagulacion y sangria?
¿Cuales somn los resultados normales?
¿Como se realiza el recuento de plaquetas?

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta reimpresión

Bogota:Editorial Méedica Internacional; 2010
Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el diagnóstico
clínico. Panamericana 2015
Huaman S J. Laboratorio clínico. Procedimientos e interpretación.2da. ed Trujillo-Peru:
Editorial Universitaria UNT; 2018
Kottke-Marchant K amp; Bruce Davis [Edit] Laboratory Hematology Practice 1st ed. United
Kingdom: WileyBlackwell; 2
Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed Madrid:Masson; 2015.
Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11 ed. Elsevier
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I: laboratorios locales II, minsa 2013

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PRÁCTICA N° 8: Determinación de grupo sanguíneo

I. OBJETIVOS
Investigar en la sangre la presencia o ausencia de los antígenos A, B y Rh que se localizan
en la superficie de los glóbulos rojos, utilizando anticuerpos específicos para cada uno de
ellos
Comprobar si una persona es verdadero positivo o negativo con respecto al factor Rh (D).
La variante Du se determina cuando el factor Rh es negativo.

II. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS POR MESA

MUESTRA BIOLOGICA: 1 mL de Sangre total con o sin anticoagulante.

MATERIALES Y REACTIVOS: 1 ML DE REACTIVO POR MESA

- Tubos de ensayo 12 x 75 mm. (3)
- Gradilla para tubos.
- Puntas plásticas. (3)
- Pipeta Pasteur con bulbo.
- Aplicadores de madera.
- Frasco lavador.
- Marcador de vidrio.
- Guantes descartables. (POR ALUMNO)
- Papel toalla.
REACTIVOS:
- Antisuero “A”
- Antisuero “B”
- Antisuero RH (anti- D)
- Albúmina bovina.
- Suero antihumano (coombs).
- Solución salina 0.85%.
EQUIPO:
- Baño de María.

- Centrífuga.

- Lámpara para lectura de aglutinación.

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III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

PRUEBA EN TUBO: Identificar previamente los tubos.
- Depositar 2-3 gotas de sangre en un tubo.

- Realizar 3 veces el lavado de células de la siguiente manera:

a) Agregar 1 mL de solución salina 0.85%.

b) Mezclar y llenar con solución salina 0.85% el tubo hasta 3/4 partes.

c) Centrifugar por 2 minutos a 3400 rpm .

d) Descartar toda la solución salina quedando en el fondo un paquete de glóbulos

rojos.

- Preparar una suspensión al 5%, colocando una gota de los glóbulos rojos lavados y 19

gotas de solución salina y mezclar.

- Rotular 3 tubos con las letras A, B, Rh por cada muestra a analizar, a cada uno agregar

una gota de glóbulos rojos al 5%.

- Depositar los antisueros respectivos:

a) Tubo A antisuero A.

b) Tubo B antisuero B.

c) Tubo Rh antisuero D.

- Centrifugar 15 segundos a 3400 rpm .

- Leer la presencia o ausencia de aglutinación agitando suavemente los tubos.

PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR GRUPO SANGUINEO
- Identificar dos tubos

- En el tubo 1: colocar una gota de suero anti D y agregar una gota de suspensión de

eritrocitos al 5% a estudiar.
- Mezclar suavemente.
- En el tubo 2 (control): colocar una gota de albúmina bovina y agregar una gota de

suspensión de eritrocitos al 5% a estudiar.

- Mezclar suavemente.

- Centrifugar ambos tubos a 3400 rpm por 15 segundos.

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- Desprender suavemente el botón de células del fondo del tubo.

- Observar presencia o ausencia de aglutinación frente a la luz de una lámpara.

- Si no se observa aglutinación se incuban los tubos a 37°C por 15 minutos.

- Lavar los glóbulos rojos de ambos tubos cuatro veces llenándolos con solución salina al

0.85%.

- Centrifugar por 2 minutos a 3400 rpm cada vez y descartar la solución después de cada

lavada.

- Agregar a cada tubo 2 gotas de suero Coombs.

- Centrifugar 15 segundos a 3400 rpm.

- Leer frente a la luz de una lámpara y buscar aglutinación tratando de desprender

suavemente

el botón de células.

- Observar aglutinación.

IV. CONCLUSIONES :FORMA DE REPORTE

Grupo A: si aglutina el tubo marcado A.
Grupo B: si aglutina el tubo marcado B.

Grupo O: si no aglutinan los tubos marcados A y B.

Grupo AB: si aglutinan los tubos marcados A y B.

REPORTE RH :
Du POSITIVO: (presencia de aglutinación o botón) = Rh POSITIVO
Du NEGATIVO: (ausencia de aglutinación) = Rh NEGATIVO

V. EVALUACIÓN
¿Que son los grupos sanguineos?
¿Cuantos clasificaciones existen?
¿Por qué es importante la determinación de grupo sanguíneo?
¿Cuál el prueba cruzada y para qué sirve?

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VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta reimpresión

Bogota:Editorial Méedica Internacional; 2010
Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el diagnóstico
clínico. Panamericana 2015
Huaman S J. Laboratorio clínico. Procedimientos e interpretación.2da. ed Trujillo-Peru:
Editorial Universitaria UNT; 2018
Kottke-Marchant K amp; Bruce Davis [Edit] Laboratory Hematology Practice 1st ed. United
Kingdom: WileyBlackwell; 2
Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed Madrid:Masson; 2015.
Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11 ed. Elsevier
España 2014
Zurita Macalupú, Zurita .Manual de procedimientos de laboratorio: laboratorios locales
I: laboratorios locales II, minsa 2013

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PRÁCTICA N° 9: Examen de orina completo y bioquímica.

I. OBJETIVOS
Obtener una muestra de orina con el volumen y condiciones adecuadas para
realizar un análisis físico, químico y microscópico Observar microscópicamente
en el sedimento urinario elementos celulares, cilindros, cristales, parásitos,
filamentos mucoides y bacterias. Con el fin de sugerir una patología del tracto
urinario u otras enfermedades que estén en diferente localización.

II. MATERIALES POR MESA

⮚ Frascos plásticos transparente de boca ancha con capacidad de 30 mL.

⮚ Bolsa pediátrica recolectora de orina. (1)

⮚ Papel toalla.

⮚ Marcador de vidrio.

⮚ Tubos cónicos con capacidad de 15 mL. (2)

⮚ Gradilla para tubos (1 )

⮚ Tiras reactivas para orina (2 )

⮚ Láminas portaobjetos. (6)

⮚ Laminillas cubreobjetos. (6)

III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

⮚ Identificar el tubo cónico.

⮚ Agitar la muestra de orina en forma circular sobre la mesa de trabajo.
⮚ Verter la orina en el tubo cónico.
⮚ Introducir la tira reactiva en la orina.
⮚ Eliminar el exceso de orina colocando la tira sobre un papel absorbente.
⮚ Esperar el tiempo recomendado por el fabricante para su lectura.
⮚ Anotar los resultados.
⮚ Centrifugar durante 5 minutos a 2,500 rpm .
⮚ Descartar el líquido sobrenadante.

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⮚ Suspender el sedimento urinario golpeando ligeramente con la mano.

⮚ Colocar una gota de sedimento sobre un porta y cubrir con laminilla.
⮚ Observar la preparación con el objetivo 10x y luego 40x para lograr una
visión general del sedimento.

IV. CONCLUSIONES
REPORTE FISICO QUIMICO:

COLOR: Amarillo.
ASPECTO: limpia.
PH: de 5 a 9.
DENSIDAD: de 1.000 a 1.030.
LEUCOCITOS: 0 a 500 Leucocitos por μl.
NITRITOS: Positivo ó Negativo.
PROTEÍNA: 0 a 1000 mg por dL.
GLUCOSA: 0 - 1000 mg por dL
CUERPOS CETÓNICOS: de una cruz a tres cruces.
UROBILINÓGENO: de <1 a 12 mg por dL.
BILIRRUBINA: de una cruz a tres cruces.
SANGRE/HEMOGLOBINA: de 0 a 250 eritrocitos por μL, siempre que en la tira
reactiva no se observe un cambio de color se reportará como negativo.

VALORES DE REFERENCIA:

PH: de 5 a 6.
DENSIDAD: de 1.005 a 1.010 .
LEUCOCITOS: 0 Leucocitos por μl .
NITRITOS: Negativo.
PROTEÍNA: 0 mg por dL.
GLUCOSA: 0 mg por dL .
CUERPOS CETÓNICOS: Negativo.
UROBILINÓGENO: <1 mg por dL.
BILIRRUBINA: Negativa.
SANGRE: 0 eritrocitos por Μl.

REPORTE DE SEDIMENTO URINARIO

CÉLULAS EPITELIALES, ESCAMOSAS Y REDONDAS: reportar escasas,
moderadas o
abundantes.
GLÓBULOS ROJOS: Reportar el número estimado por campo.
LEUCOCITOS: Reportar el número estimado por campo.

29
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CILINDROS: se pueden encontrar en la orina los siguientes cilindros: hialinos,

granulosos finos y gruesos, leucocitarios, hemáticos, grasos y céreos. Reportar
el número de cilindros observados por campo.
FILAMENTOS MUCOIDES: reportar escasos, moderados o abundantes.
CRISTALES: se pueden encontrar en la orina los siguientes cristales: oxalatos
de calcio, acido úrico, uratos amorfos, fosfatos amorfos, fosfatos triples, urato de
amonio, leucina, cistina y tirosina.
Reportar en la forma siguiente: escasos, moderados o abundantes.
LEVADURAS: Reportar escasos, moderada y abundantes.
PARÁSITOS: Se pueden encontrar en orina Trichomonas vaginalis, Phitirus
pubis, huevos y quistes de parásitos por contaminación con heces.
BACTERIAS: Reportar la presencia de bacterias moderadas o abundantes,
solamente cuando se observen más de 10 leucocitos por campo.

VALORES DE REFERENCIA
CÉLULAS EPITELIALES, ESCAMOSAS: Escasas a moderadas.
CÉLULAS EPITELIALES REDONDAS: No deben observarse.
GLÓBULOS ROJOS: No deben observarse.
LEUCOCITOS: .0-5 por campo.
CILINDROS: No deben observarse.
FILAMENTOS MUCOIDES: No deben observarse.
CRISTALES: Podrían observarse oxalatos, uratos y fosfatos amorfos de escasa
a moderada
cantidad.
LEVADURAS: No deben observarse.
PARÁSITOS: No deben observarse.
BACTERIAS: Escasas o no presentes

V. ENLACES DE REFERENCIA

[Link]
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[Link]
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VI. EVALUACIÓN
1. EXPLIQUE Y DESCRIBA EL PROCEDIMIENTO PARA REALIZAR UN
EXAMEN DE ORINA COMPLETA
2. EXPLIQUE Y DESCRIBA EL PROCEDIMIENTO PARA REALIZAR UN
EXAMEN DE SEDIMENTO URINARIO

3. MENCIONE EL CUADRO DE POSIBLES ETIOLOGIAS QUE CAUSAN

INFECCION URINARIA POR GRUPOS DE EDAD

4. ESQUEMATIZAR LOS DIFERENTES CILINDROS QUE SE

ENCUENTRAN EN LA ORINA

5. ESQUEMATIZAR LOS DIFERENTES CALCULOS Y HALLAZGOS

MICROSCOPICOS EN ORINA

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta
reimpresión Bogota:Editorial Méedica Internacional; 2010
Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el
diagnóstico clínico. Panamericana 2015
Huaman S J. Laboratorio clínico. Procedimientos e interpretación.2da. ed Trujillo-
Peru: Editorial Universitaria UNT; 2018
Kottke-Marchant K amp; Bruce Davis [Edit] Laboratory Hematology Practice 1st
ed. United Kingdom: WileyBlackwell; 2
Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed Madrid:Masson;
2015.
Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11 ed.
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PRÁCTICA N° 10: Reforzamiento de prácticas de laboratorio

I. OBJETIVOS
Examen práctico
II. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS
MATERIALES POR MESA
● Tiras reactivas de orina (2)
● Tubos de ensayo (6)
● Láminas portaobjetos (6)
● Laminillas cubreobjetos (6)
● Láminas de sangre periférica coloreada (3)
● Agujas y jeringas
REACTIVOS
● Aceite de inmersión
● Reactivos para grupo sanguíneo A, B y RH.
EQUIPOS (POR MESA)
● Microscopio (1)
III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
● El alumno realizará un examen de orina completamente.
● El alumno realizara la identificación de grupos sanguíneos.
● El alumno leerá plaquetas y leucocitos.
IV. CONCLUSIONES
● El alumno realiza correctamente todos los procedimientos.
● El alumno correlaciona los datos clínicos.
● El alumno procesa adecuadamente.
V. EVALUACIÓN
Interpretación de los resultados
¿Se realizaron los procedimientos adecuados?
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta reimpresión
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Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el diagnóstico
clínico. Panamericana 2015.

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Huaman S J. Laboratorio clínico. Procedimientos e interpretación.2da. ed Trujillo-Peru:

Editorial Universitaria UNT; 2018
Kottke-Marchant K amp; Bruce Davis [Edit] Laboratory Hematology Practice 1st ed. United
Kingdom: WileyBlackwell; 2
Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed Madrid:Masson; 2015.
Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11 ed. Elsevier
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PRÁCTICA N° 11: Glucosa ocasional Test de Tolerancia a la Glucosa

I. OBJETIVOS
● Determinar en valor de la glucosa basal y postprandial.

SIGNIFICACION CLINICA

Para comprender mejor el concepto de diabetes tenemos que explicar más

extensamente qué son la glucosa y la insulina:

Glucosa:
Es una forma de azúcar que constituye la principal fuente de energía para el cuerpo
humano y que se obtiene a través de los alimentos. Cuando llegan al tubo digestivo,
los alimentos contienen básicamente hidratos de carbono, grasas y proteínas; estos
hidratos de carbono son los que dan lugar a la glucosa.

Insulina:
Es una hormona que se encarga de recoger la glucosa y almacenarla en el hígado,
los músculos y el tejido adiposo. Para entrar en las células, la glucosa necesita de la
insulina que se produce en el páncreas cuando se comen alimentos que contienen
hidratos de carbono
La glucosa se determina después de la oxidación enzimática en presencia de glucosa
oxidasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo catálisis de la peroxidasa
con fenol y 4-aminofenazona produciendo un complejo rojo violeta usando la
quinoneimina como indicador.

II. MATERIALES, REACTIVO Y EQUIPOS. POR MESA

MATERIAL BIOLOGICO:
Para glucosa en ayunas: Se requiere suero tomado con ayunas de 8 horas.
Para glucosa posprandial: Se requiere primera muestra de suero en ayunas de
8horas y segunda muestra 2 horas después de haber ingerido un desayuno
completo rico en carbohidratos.

MATERIALES

- Tubos al vacío para extracción de sangre (3)

- Torundas de algodón (POR ALUMNO)
- Alcohol 70% (POR ALUMNO)
- Ligadura o torniquete (2)
- Holder / sistema vacuteiner (2)

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- Agujas hipo alergénica No 20 x 1 ½ (POR ALUMNO)

- Pipetas automáticas. (1)
- Puntas plásticas /tips. (6)

- Tubos de ensayo. (6)

- Gradilla para tubos. (1)

- Marcador para vidrio. (1)

- Papel toalla.

- Papel para film.

- Guantes descartables. (POR ALUMNO)

REACTIVOS (POR MESA)

- 75 g de glucosa anhidra (1)

- Estándar/ controles comerciales. (concentración 100 mg/dL).
- Reactivo para determinar glucosa.

EQUIPOS: UNO POR PRACTICA

- Espectrofotómetro.

- Baño María con termómetro.

- Reloj marcador.

- Centrífuga.

- Refrigeradora.

III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

PROCEDIMIENTO:

⮚ Llevar los reactivos a temperatura ambiente.

⮚ Los reactivos se preparan de acuerdo a las instrucciones del fabricante

en el cual estará indicado la estabilidad del reactivo.

⮚ Rotular 4 tubos de la siguiente manera: blanco, estándar, muestra y

control normal.

35
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⮚ En caso que los Espectrofotómetros no lean la cantidad de 1 ml, duplicar

las cantidades.

⮚ Mezclar e incubar de acuerdo a las indicaciones del fabricante.

⮚ Leer a la longitud de onda indicada por el fabricante generalmente de 500

a 546 nm y de acuerdo al equipo utilizado.

IV. CONCLUSIONES

FORMA DE REPORTE
Los valores de glucosa se reportan en mg/dL

Cálculo:

Se puede calcular usando factor de calibración:

La prueba es lineal hasta la concentración de 1000 mg/dL (Revisar inserto

incluido en el Set a utilizar).

Si la concentración de glucosa en la muestra es superior a estos límites diluir la

muestra 1+2 con agua destilada y repetir la determinación.

Multiplicar el resultado por 3.

VALOR DE REFERENCIA:

60 -115 mg/dL

V. EVALUACIÓN
¿Para qué sirve la determinación de la glucosa en sangre?
¿Qué es el método de tolerancia a la glucosa?
¿Puede evaluar los resultados de glucosa?
¿Pude correlacionar los resultados de la glicemia obtenida con la clínica?
¿Puede usted explicar los diferentes procedimientos para obtener los valores de
glucosa en sangre?

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VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta

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Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el
diagnóstico clínico. Panamericana 2015
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Peru: Editorial Universitaria UNT; 2018
Kottke-Marchant K amp; Bruce Davis [Edit] Laboratory Hematology Practice 1st
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Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed Madrid:Masson;
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Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11 ed.
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Zurita Macalupú, Zurita .Manual de procedimientos de laboratorio:
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PRÁCTICA N° 12: Dosaje de Colesterol

I. OBJETIVOS
● Determinar el valor del colesterol en paciente en ayunas.
El colesterol se determina después de la hidrolisis enzimática y la oxidación. En presencia
de un indicador el cual desarrolla el color de acuerdo a la concentración del colesterol
presente en la muestra.

II. MATERIALES: POR MESA

MUESTRA BIOLOGICA
Suero tomado con 12 horas de ayuno.

MATERIALES

- Pipetas automáticas. (1)

- Puntas plásticas. (6)
- Tubos. (2)
- Gradilla para tubos. (1)
- Marcador para vidrio. (1)
- Papel toalla.
- Papel para film.
- Guantes descartables. (POR ALUMNO)

REACTIVOS

- Reactivo enzimático.
- Estándar de colesterol (concentración 200 mg/dL).
- Sueros controles comerciales.

EQUIPO (UNO POR PRACTICA)

- Baño de María. con termómetro.

- Reloj marcador.
- Centrífuga.
- Refrigeradora con termómetro.

III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

PROCEDIMIENTO:
- Llevar los reactivos a temperatura ambiente.

- Los reactivos se preparan de acuerdo a las instrucciones del fabricante en el cual estará

indicado la estabilidad del reactivo.

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- Rotular 4 tubos de la siguiente manera: blanco, estándar, muestra y control normal.

En caso que los Espectrofotómetros no lean la cantidad de 1 mL, duplicar las cantidades.

- Mezclar e incubar de acuerdo a las indicaciones del fabricante.

- Leer a la longitud de onda indicada por el fabricante generalmente de 500 a 546 nm y de

- acuerdo al equipo utilizado.

IV. CONCLUSIONES
FORMA DE REPORTE:
Los valores de colesterol se reportan en mg/dL (Anexo 4).

Cálculo

Se puede calcular usando factor de calibración:

Concentración=Lectura de muestran por lectura del estándar x 200 (mg/dL)

La prueba es lineal hasta la concentración de 750 mg/dL (Revisar técnica ya que depende
de la

casa comercial).

Si la concentración del colesterol en la muestra es superior a estos límites diluir la muestra

1+2 con

solución fisiológica y repetir la determinación.

Multiplicar el resultado por 3.

Valor de referencia:

Hasta 200 mg/Dl

V. EVALUACIÓN
¿Qué es una dislipidemia?
¿Cómo se clasifican de las dislipidemias?
¿Cómo relaciona usted los resultado con la clínica?
¿Cuál es el mecanismo fisiopatologico de la ateroesclerosis?
Puede usted explicar el procedimiento.

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VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta reimpresión
Bogota:Editorial Méedica Internacional; 2010
Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el diagnóstico
clínico. Panamericana 2015
Huaman S J. Laboratorio clínico. Procedimientos e interpretación.2da. ed Trujillo-Peru:
Editorial Universitaria UNT; 2018
Kottke-Marchant K amp; Bruce Davis [Edit] Laboratory Hematology Practice 1st ed. United
Kingdom: WileyBlackwell; 2
Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed Madrid:Masson; 2015.
Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11 ed. Elsevier
España 2014
Zurita Macalupú, Zurita .Manual de procedimientos de laboratorio: laboratorios locales
I: laboratorios locales II, minsa 2013

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PRÁCTICA N° 13: Inmunología: Pruebas de Aglutinación

I. OBJETIVOS
Investigar en el suero del paciente anticuerpos producidos por infecciones causadas por
Salmonellas,
Brucellas, Rickettsias u otras infecciones bacterianas, por las cuales el organismo del
paciente reacciona con la producción de anticuerpos específicos.

II. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS POR MESA

MUESTRA BIOLOGICA: Suero de paciente.
MATERIALES Y REACTIVOS: REACTIVOS 1 ML POR MESA

- Tubos de ensayo 12 x 75 mm. (3)

- Tubos de ensayo 13 x 100 mm. (3)
- Gradilla para tubos. (1)
- Puntas plásticas. (3)
- Lámina de reacción. (2)
- Pipeta Pasteur con bulbo o pipeta transfer. (1)
- Aplicadores de madera.
- Marcador de vidrio. (1)
- Guantes descartables. (POR ALUMNO)
- Papel toalla.

REACTIVOS

- Solución salina 0.85%.

- Antígeno somático “O”.
- Antígeno flagelar “H”.
- Antígeno paratyphico “A”.
- Antígeno paratyphico “B”.
- Antígeno somático O X 19.
- Antígeno somático Brucella abortus.
- Control negativo y control positivo.
EQUIPOS (UNO POR PRACTICA)
- Centrífuga.

- Reloj marcador.

- Pipetas automáticas.

- Rotador serológico

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III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

PROCEDIMIENTO:
- Centrifugar la sangre a 2,500 rpm durante 5 minutos.

- Separar los sueros del paquete globular.

- Llevar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente.

Prueba cualitativa:

- Mezclar las suspensiones cuidadosamente antes de su uso.

- Colocar una gota de muestra en los 6 círculos y una gota de cada control positivo y

negativo en su respectivo círculo.

- Colocar sobre cada muestra o control una gota de reactivo.

- Mezclar con palillos descartables por separado y esparcir el líquido sobre el área completa

de cada círculo.

- Colocar la lámina en un rotador a 100 rpm durante 1 minuto.

- Leer los resultados bajo luz artificial inmediatamente.

- Examine macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación.

Prueba semicuantitativa:

- En caso de obtener resultados positivos hacer determinación semicuantitativa en lámina:

- Colocar en seis tubos 100 μL. de solución salina 0.85% y adicionar en el primer tubo 100

μL de muestra.

- Hacer diluciones seriadas en base a 2 en los siguientes tubos, de modo de obtener las

siguientes diluciones: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32 y 1:64.

- Continuar el procedimiento como se describe en la prueba cualitativa, empleando cada

dilución como muestra.

- Leer los resultados bajo luz artificial inmediatamente.
- Examine macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación.

- Reportar la última dilución en la que se observe aglutinación.

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IV. CONCLUSIONES
POSITIVO: Cuando se observa aglutinación macroscópica y reportar última dilución en la
que se observa aglutinación.
NEGATIVO: Cuando no se observa aglutinación.
V. EVALUACIÓN
● ¿Que dosa la prueba ags o acs?
● ¿Qué significa los resultados de las aglutinaciones?
● ¿Cuál es la diferencia ntre tubo y lamina en el procedimiento?
● ¿Cuáles son los antigenos de la bacteria y su estructura?
● ¿Puede uds explicar el procedimiento?

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta reimpresión
Bogota:Editorial Méedica Internacional; 2010
Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el diagnóstico
clínico. Panamericana 2015
Huaman S J. Laboratorio clínico. Procedimientos e interpretación.2da. ed Trujillo-Peru:
Editorial Universitaria UNT; 2018
Kottke-Marchant K amp; Bruce Davis [Edit] Laboratory Hematology Practice 1st ed. United
Kingdom: WileyBlackwell; 2
Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed Madrid:Masson; 2015.
Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11 ed. Elsevier
España 2014
Zurita Macalupú, Zurita .Manual de procedimientos de laboratorio: laboratorios locales
I: laboratorios locales II, minsa 2013

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PRÁCTICA N° 14: Inmunocromatografía para Helicobacter pylori.

I. OBJETIVOS
● Realizar e interpretar la prueba además las correlación con la clínica
II. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS
MATERIALES POR MESA
- Frascos recolección de muestra (1)
- Muestra de heces (1)
- Guantes POR ALUMNO
- Pipetas (1)
REACTIVOS
- Kit de detección por el proveedor
EQUIPOS
- Proyector multimedia
III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
Se trata de una técnica cualitativa (no cuantitativa) para detectar la presencia del antígeno
de H. pylori a través de una muestra de heces, que sería indicativo de infección por H. pylori
(7). Se dispone de métodos basados en enzimoinmunoensayo (ELISA) o métodos basados
en inmunocromatografía (ICA). Esta última técnica es en la que se basan los kits para el
diagnóstico rápido de H. pylori (6,9). Se han desarrollado múltiples kits comerciales para la
detección de antígeno en heces con diferentes resultados en cuanto a precisión (6). La
elección entre uno u otro kit debería basarse en la epidemiología local. Tanto los métodos
ELISA como los ICA pueden llevarse a cabo como anticuerpos monoclonales o policlonales
(9). Los métodos basados en ELISA parecen ser superiores en precisión a los basados en
ICA. Los métodos ELISA requieren el procesamiento por parte de un técnico de laboratorio,
lo que hace que sean difícilmente aplicables en el ámbito de Atención Primaria (6). En
cambio, los métodos de ICA no requieren un equipamiento especial y son fáciles de utilizar
A diferencia de la mayoría de los análisis de laboratorio, la muestra de heces suele ser
recolectada por los padres en casa, no por un profesional de la salud en el hospital o clínica.
Se le pedirá a su hijo que durante las 2 semanas previas al análisis no tome ciertos
medicamentos, como antibióticos, antiácidos, bismuto o medicamentos para tratar úlcera
péptica como inhibidores de la bomba de protones o agentes bloqueadores H2.
El médico o el laboratorio del hospital suelen entregar instrucciones por escrito sobre la
manera en que se debe recolectar la muestra de heces. Si no le dan instrucciones, aquí
tiene algunos consejos para recolectar la muestra de heces de su hijo:
1. Asegúrese de utilizar guantes protectores y de lavar bien sus manos y las de su hijo
al finalizar.

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2. Los niños más pequeños no siempre son capaces de avisar a sus padres cuando
van a mover el vientre. Por lo tanto, se utiliza recipiente plástico con forma de sombrero
para recolectar la muestra. Este dispositivo se puede colocar rápidamente sobre el inodoro
o debajo de la cola de su hijo para recolectar la muestra. El uso de un dispositivo de
recolección puede evitar la contaminación de las heces con agua o suciedad. Otra manera
de recolectar la muestra consiste en colocar una envoltura plástica floja sobre el asiento del
inodoro. Después, la muestra de heces se coloca en un recipiente limpio y sellado para
llevarla al laboratorio.

3. También se puede utilizar un envoltorio plástico para forrar el pañal de un bebé o un

niño pequeño que aún no usa el inodoro. El envoltorio se debe colocar de manera tal que
la orina se derrame hacia el pañal y no hacia el envoltorio. No permita que las heces toquen
el interior del pañal descartable ya que la tela tiene por lo general propiedades
antibacterianas que pueden interferir con el resultado del análisis.

4. Su hijo no debe orinar dentro del recipiente. Si es posible, pídale a su hijo que vacíe
su vejiga antes de mover el vientre.

5. Las heces se deben recolectar en frascos de plástico, limpios y secos con tapas a
rosca. Quizás su hijo tenga que recolectar la muestra de heces una o más veces. Para
obtener mejores resultados, es conveniente llevar la muestra rápidamente al laboratorio. Si
esto no es posible, las heces se deben refrigerar y luego llevar al laboratorio lo antes
posible.
También es posible que el médico o la enfermera recojan una muestra de heces insertando
un hisopo en el recto del niño.

IV. CONCLUSIONES
Positividad e interpretación de los resultados de la prueba inmunocromatograficas.
El alumno realiza todos los pasos indicados en la guía evaluada.
El alumno realiza satisfactoriamente los procedimientos evaluados.
Interpretación de los resultados.

V. EVALUACIÓN
¿De dónde se obtiene la muestra para diagnóstico de helicobacter pylori?
¿Qué parte del HP detecta la prueba realizad?
¿Puede Ud. explicar el procedimiento?
¿Cuál es la sensibilidad y especificidad de la prueba?
¿Correlacionar los resultados con la clínica?

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VI. BIBLIOGRAFÍA
Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta reimpresión
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Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el diagnóstico
clínico. Panamericana 2015
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Editorial Universitaria UNT; 2018
Kottke-Marchant K amp; Bruce Davis [Edit] Laboratory Hematology Practice 1st ed. United
Kingdom: WileyBlackwell; 2
Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed Madrid:Masson; 2015.
Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11 ed. Elsevier
España 2014
Zurita Macalupú, Zurita .Manual de procedimientos de laboratorio: laboratorios locales
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PRÁCTICA N° 15: Demostración de los procesos de Biología Molecular y su

interpretación.

I. OBJETIVOS
Analizar e interpretar los resultados de las diferentes pruebas moleculares
Correlacionar los resultados con la entidad clínica
(Algoritmos de estudio)
II. MATERIALES, MATERIALES Y EQUIPOS POR MESA
MATERIALES
- Diapositivas
REACTIVOS
- KIT DE PROCESAMIENTO DE BIOLOGÍA MOLECULAR.
EQUIPOS (POR PRACTICA)
- Proyector multimedia

III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

Revisa las diferentes técnicas para realizar las pruebas de BIOLOGÍA
MOLECULAR.
Obtención de la muestra según procedimiento a aplicar
-.a. esputo para genexpert
-.b. hisopado para covid
Procesamiento de la muestra, lectura de resultado y explicación de resultados.

IV. CONCLUSIONES
Graficar los diferentes pasos que se establecen para realizar una prueba de
biología molecular.

Explicar los resultados obtenidos

V. EVALUACIÓN
¿Cuáles son las pruebas que podrían realizarse utilizando la técnica de PCR para biología
molecular? describa y grafique

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● explique ud la reacciones que se presentan en un análisis de biología molecular,

describa y grafique.

● explique y describa el procedimiento para realizar una prueba para diagnosticar

hepatitis c (carga viral).

EXPLIQUE Y DESCRIBA EL PROCEDIMIENTO PARA REALIZAR UNA PRUEBA PARA

DIAGNOSTICAR HIV (CARGA VIRAL).
BIBLIOGRAFÍA
Angel MG y Angel RM. Interpretación clínica del laboratorio. 7a ed 4ta reimpresión
Bogota:Editorial Méedica Internacional; 2010
Antonozzi I Gulleta E. Medicina de Laboratorio Fundamento y aplicaciones en el diagnóstico
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Pagana Kathleen Deska. Guía de Pruebas diagnósticas y de laboratorio. 11 ed. Elsevier
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ANEXOS
A. RÚBRICA DE EVALUACIÓN

CRITERIO INDICADORES Y PUNTUACIÓN

No cumple con las normas de bioseguridad al ingresar al
0
laboratorio.

Bioseguridad 1 Sólo trae guardapolvo y guantes

2 Solo trae guardapolvo, guantes y mascarilla
3 Trae guardapolvo, guantes, mascarillas y gorro (cofia – toca)
0 No asistió a práctica
Asistencia y
1 Asistió dentro de 5 minutos de tolerancia
puntualidad
2 Asistió puntualmente
1 Trabajó en su mesa de manera desordenada
Orden en trabajo
2 Trabajó en su mesa de manera ordenada
de laboratorio
3 Trabajó ordenadamente y dejó material y ambiente limpio
0 No reconoce material ni equipos de laboratorio
Identifica el material y equipo de laboratorio pero manipula
Manejo de 2
con dificultad
materiales,
reactivos y Identifica y manipula adecuadamente el material y equipo de
3
equipos laboratorio
Manipula adecuadamente el material de laboratorio
4
observando en todo momento normas de bioseguridad
0 No contestó preguntas propuestas
1 Contestó parcialmente preguntas propuestas
Estudio y revisión
de protocolo 2 Contestó correctamente preguntas propuestas
Contestó correctamente preguntas y aportó información
3
relevante
0 Presenta dentro del tiempo
1 Precisa conceptos previos
Presentación del 3 Desarrolla organizadamente los contenidos de la práctica
Informe
Obtiene conclusiones adecuadas y pertinente, Cita
5 bibliografía relacionada, Se proyecta a problemas de salud,
Hace juicio pertinente y coherente
La suma de puntos acumulados corresponde a la nota final
Nota
de la sesión práctica

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