INSTITUTO DE EDUCACION SUPERIOR PRIVADO
“DANIEL ALCIDES CARRION”
LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA
“INFORME N° 6”
TEMA:
PRUEBA DE COMPATIBILIDAD. PRUEBA CRUZADA MAYOR Y MENOR
CURSO:
Banco de Sangre y Hemoterapia
ESTUDIANTE:
Sandoval Suclupe Jonathan Antoni
DOCENTE:
Calachahuin Rondan, Eddie Frankie
SECCIÓN:
6NLA51-08
LIMA – PERU
2023
INTRODUCCION
En cada banco de sangre, para asegurar la transfusión esperada de los
individuos, se debe determinar el grupo sanguíneo y el factor Rh del receptor, la
elección de una transfusión de sangre debe ser igual al grupo sanguíneo y al
factor Rh del paciente, y en base a esto, los análisis se realizan en el
laboratorio para que podamos"in vitro" detectar anticuerpos anormales que
causan aglutinación o hemólisis de glóbulos rojos que circulan en la sangre del
receptor. La correcta identificación de la sangre donada, la identidad del
paciente que recibe la transfusión, la actitud, la rapidez, la prevención y el
control de calidad, y la omisión de errores son aspectos muy importantes del
cotejo, ya que el error humano se detecta una vez comenzada la transfusión.
no se puede corregir y pone en peligro la vida del paciente.
Las pruebas cruzadas y la búsqueda de anticuerpos son indispensables ya que
permiten detectar a los antígenos y anticuerpos estudiados en el laboratorio;
nos ayudan a prevenir la transfusión de sangre incompatible, y a proveer al
paciente de máxima seguridad y beneficio. Antes de llevar a cabo cada
procedimiento es muy importante contar con un excelente control de calidad, el
cual nos permitirá verificar todos los procesos y etapas que influirán en la
detección de los anticuerpos. Las pruebas cruzadas normalmente se llevan a
cabo en 3 fases: lectura rápida, lectura 37º/Coombs, validación con eritrocitos
sensibilizados. El medio que rodea la prueba está muy relacionado con los
potenciadores y con la fuerza iónica que favorece la reacción antígeno-
anticuerpo, por lo que debe ser capaz de detectar anticuerpos activos a bajas
temperaturas y diferenciar entre reacciones positivas verdaderas y falsas. La
investigación de anticuerpos.
Continuación se indica el procedimiento que se siguió respectivamente, los
resultados e interpretación de resultados.
OBJETIVOS
❖ Compatibilizar al donante y receptor e interpretar los resultados
relacionándolo a las anemias y otras entidades clínicas
MARCO TEORICO
DEFINICIONES
MUESTRA: Alícuota de sangre, plasma, suero para realizar la determinación
de test de Coombs es sangre completa con o sin anticoagulante (EDTA).
PRUEBA COMPATIBILIDAD CRUZADA: esta nos permite analizar la sangre
comparándola con la del donante para asegurarse de que sea una
compatibilidad exacta.
PRUEBA TEST DE COOMBS INDIRECTO: es una prueba que nos permite
detectar glóbulos rojos sensibilizados in vitro.
PRUEBA TEST DE COOMBS DIRECTO: también llamada prueba de
antiglobulina directa. Detecta la sensibilización de los glóbulos rojos a IgG o
complemento. Se llama directa porque los glóbulos rojos del paciente están
sensibilizados en su propio organismo. (sensibilización in vivo).
SUERO DE COOMBS – ANTI Ig G C3d: es un reactivo para la detección de
inmunoglobulinas IgG o complementos unidos a los glóbulos rojos. Asimismo,
es útil para demostrar los anticuerpos adheridos a los glóbulos rojos in-vivo.
SOLUCIÓN DE ALBÚMINA BOVINA AL 22%: es utilizado como potenciador
proteico. Indispensable para las pruebas de compatibilidad, rastreo e
identificación de anticuerpos irregulares. También ayuda a la sensibilización in-
vitro de los eritrocitos por anticuerpos IgG.
GENERALIDADES
PRUEBA DE COMPATIBILIDAD
Este es un procedimiento que realiza el laboratorio que nos permite determinar si
existe compatibilidad serológica entre la sangre de un individuo donante y la de
un receptor.
Fundamento Teórico
Su objetivo de las pruebas cruzadas de compatibilidad es investigar anticuerpos
específicos activos a 37grados centígrados, en el suero del paciente contra los
eritrocitos del donador y viceversa.
La prueba cruzada se divide en tres partes:
❖ La prueba Mayor, consiste en poner el suero del paciente con eritrocitos
del donador bajo condiciones optimas para la actividad de los Ac en el
laboratorio.
❖ La prueba Menor contiene el suero del donador y eritrocitos del paciente,
es poca empleada. Esta prueba no obstante puede poner de manifiesto la
presencia de anticuerpo (Ac) del donante contra los antígenos (Ag) de
baja frecuencia.
❖ El Autotestigo permite detectar una prueba de antiglobulina directa
positiva, así como la presencia de rouleoux y otras anormalidades
autoinmunes. Contiene el suero y eritrocitos del paciente.
La mayoría de hematólogos concuerdan en que las pruebas cruzadas deben
efectuarse mediante tres métodos por lo menos, como es:
- Prueba en tubo con solución salina
- Prueba con proteína concentrada
- Prueba de Coombs indirecta
Las pruebas de Coombs indirecta y la prueba con Albumina- suero, son los
métodos más seguros para detectar la mayoría de las incompatibilidades.
En la aglutinación de la prueba cruzada con aglutinas descubre las
incompatibilidades debidas a anticuerpos Anti A, Anti B, etc. Ya que esta sola no
es efectiva en el caso de anticuerpos incompletos, como los del sistema Rh.
MAREIALES Y METODOS
MATERIALES
❖ Tubos de ensayo de 13 x 100 mm
❖ Gradilla para tubos de ensayo 13 x 100 mm
❖ Pipetas Pasteur de plástico
❖ Agujas para sistema al vacío 21G x 1
❖ Holder o capuchón
❖ Ligadura
❖ Tubo al vacío c/anticoagulante EDTA (tapa lila)
❖ Tubo al vacío s/anticoagulante (tapa rojo)
❖ Papel Parafilm (cortado)
❖ Algodón
❖ Punta para micropipeta 10-100 ul
❖ Punta para micropipeta 100-1000 ul
REACTIVOS:
❖ Solución salina 0.85% 1 litro
❖ Alcohol
❖ Suero de Coombs – Anti Ig G C3d
❖ Albumina bovina al 22%
EQUIPOS
❖ Centrifuga
❖ Baño maría
❖ Micropipeta de 10-100 ul
❖ Micropipeta de 100-1000 ul
MUESTRA
En este caso utilizamos Sangre total de tipo O+
MÉTODOS
Para esta práctica se realiza con el método de tubo y la técnica del Coombs
indirecto, se utilizó como problema de estudio una muestra de un paciente de
grupo sanguíneo O y de tipo RH +.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Toma demuestra
Importante contar con un área de trabajo que disponga de todo lo necesario
para trabajar con la comodidad adecuada sin tener ningún impedimento en el
desarrollo de la práctica.
PROCEDIMIENTO
Para realizar esta práctica sobre la prueba de compactibilidad y prueba
cruzada, se empezó a desarrollar con la técnica del test de Coombs indirecto, lo
cual su desarrollo se basa en tres fases, como se recalca siempre para la
elaboración de nuestro experimento tenemos que tomar en cuenta como
primer punto los materiales listos, equipos, reactivos y sobre todo una
adecuada muestra, en esta ocasión se utilizó una muestra sanguínea de tipo O
positivo, a continuación, se observará el procedimiento de dicha técnica:
Técnica para la prueba de Coombs Indirecto
FASE I
1. Para empezar la prueba de determinación del test de Coombs primero se
realizó la preparación de una suspensión de hematíes “O” positivo al 5%.
Como se sabe para preparar una suspensión al 5% se coloco 50 ul del
paquete globular y 950 ul de solución salina. Previamente hacer lavado.
2. Ya preparado la suspensión, se coloca 2 gotas de suero del paciente en
estudio en un tubo de ensayo.
3. Después se centrifuga 1 000 RPM x 1 minuto.
4. Se observa el sobrenadante para detectar hemolisis.
5. Desprendemos suavemente el botón de células del fondo del tubo para
observar si hay aglutinación y finalmente, de anota los resultados.
Fase II
1. En esta fase continuamos con el dicho procedimiento, en tubo limpio
dispensamos 2 gotas de albumina bovina al 22 %, mezclamos y
centrifugamos por 1 minuto.
2. Enseguida se incuba a 37°C por 15 a 30 minutos en baño de María.
3. Luego centrifugamos 1 000 RPM x 1 minuto.
4. Se observa el sobrenadante para detectar hemolisis.
5. Después se desprende suavemente el botón de células del fondo del
tubo y finalmente se anota los resultados.
Fase III
1. Para finalizar nuestro experimento, lavamos 4 veces con solución salina.
2. En el último lavado decantar bien toda la solución salina.
3. Se agrega 2 gotas del reactivo antiglobulina humana poliespecifica y
mezclamos.
4. Centrifugamos inmediatamente por 1 minuto.
5. Se debe leer desprendiendosuavemente el botón de células.
6. Anotar los resultados. Y para concluir nuestro procedimiento agregamos
una gota de células control de Coombs, si es que la prueba es negativa.
Centrifugar, leer y anotar los resultados.
RESULTADO
Interpretación: ante este experimento obtuvimos un resultado de prueba
cruzada compatible. Ya que no se observo aglutinación.
CONCLUSIONES
✓ Concluyo que las practicas son de gran ayuda para poder formarnos desde ya
para nuestro futuro profesional.
✓ Es de interés llevar a cabo el desarrollo de la práctica paso a paso como se nos
orienta y lo q se nos brinda.
✓ Se concluye que para una buena práctica de laboratorio es necesario dejar los
equipos, materiales u otros instrumentos en la ubicación que le pertenece, para
que luego sean hallados con facilidad en una próxima práctica.
✓ Concluimos que tanto los reactivos y equipos deben estar en buen
funcionamiento y que sean de calidad para tener unos buenos resultados.
CUESTIONARIO
- En qué se diferencia la prueba cruzada de la técnica de la variante Du.
Las pruebas cruzadas (PC), es un procedimiento que se utiliza para excluir la
incompatibilidad entre donante y receptor. Utiliza suero o plasma del paciente
y GR de las unidades de sangre a transfundir a un paciente y la técnica del
DU es un análisis de sangre que se realiza para detectar
anticuerpos contra los glóbulos rojos. Estos anticuerpos destruyen
los glóbulos rojos que son diferentes a los suyos (extraños). Además
este es una variante débil del antígeno D que tiene interés desde el
punto de vista transfusional.
- ¿Cuál es el fundamento de la prueba cruzada menor?
Es una prueba que se e realiza cuando se le administra al receptor
cualquier hemoderivado que contenga plasma, el objetivo de este
ensayo, es detectar anticuerpos en el plasma del donante que puedan
afectar los hematíes del receptor.
- Si no cuento con albumina bovina, puedo reemplazarlo con otro u otros
reactivos ¿habrá diferencias?
Suero de Coombs, solución salina,
- ¿Por qué debemos realizar la prueba en medio salino o albuminoso?
Debemos realizarlo para detectar todos los anticuerpos presentes.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
❖ Seguir C. PRUEBAS CRUZADAS [Internet]. Slideshare.net. [citado el 29 de
marzo de 2023]. Disponible en: https://es.slideshare.net/CarolineGiss/pruebas-
cruzadas-39611367
❖ Bonilla-Zavala R. Medigraphic.com. [citado el 29 de marzo de
2023]. Disponible en: https://www.medigraphic.com/pdfs/imss/im-
2006/ims062j.pdf
❖ Tipo de sangre y compatibilidad cruzada [Internet]. ucsd.edu. [citado el 29 de
marzo de 2023]. Disponible en:
https://myhealth.ucsd.edu/Spanish/Encyclopedia/167,blood_type_crossmatch_
ES
❖ Martínez DM, Perfil VT mi. CUADERNO DE PRÁCTICAS HEMATOLOGÍA
[Internet]. Blogspot.com. [citado el 29 de marzo de 2023]. Disponible en:
http://deliamm96cuadernopracticashema14.blogspot.com/2015/05/practica-
prueba-cruzada-mayor.html
❖ Fundacionsigno.com. [citado el 29 de marzo de 2023]. Disponible en:
https://www.fundacionsigno.com/bazar/1/IT-75-HEM-2D_Prueba_Cruzada.pdf
❖ Seguir C. PRUEBAS CRUZADAS [Internet]. Slideshare.net. [citado el 29 de
marzo de 2023]. Disponible en: https://es.slideshare.net/CarolineGiss/pruebas-
cruzadas-39611367
❖ Compatibilidad de grupos sanguíneos en Banco de Sangre [Internet].
Slideplayer.es. [citado el 29 de marzo de 2023]. Disponible en:
https://slideplayer.es/slide/3413015/
ANEXOS
