Generalidades de la sangre
Hematología: estudio de la sangre
Funciones de la sangre:
Transporte
Regulación
Protección
Composición de la sangre: tras centrifugar una muestra de sangre total por medio de
centrifugación a 3000 rpm obtenemos
Diferencia entre suero y plasma: El suero carece de factores de coagulación. El plasma guarda
factores de coagulación
Características de los Eritrocitos:
Diámetro: 7-8 micras
Forma bicóncava
Anuclear
Contiene Hemoglobina la cual es una proteína transportadora, principalmente de O2 en el
eritrocito
Vida media: 120 días
Cantidad promedio: 4.5 – 5 millones de eritrocitos por microlitro
Volumen: 80-100 fl (fentolitros)
Concentración de hemoglobina: 27-31 pg (picogramos)
Tubos al vacío para muestras sanguíneas y orden en que se toman
Color de tubo Anticoagulante Mecanismo de acción Uso frecuente
AZUL CITRATO DE SODIO Precipitación el calcio Tiempos de
coagulación:
Tiempo de
protrombina
Tiempo de
tromboplastina
ROJO SIN Química sanguínea:
ANTICOAGULANTE, bilirrubina T, BD Y BI
CON ACTIVADOR DE
COAGULACIÓN, CON
SILICÓN
VERDE HEPARINA DE
SODIO/LITIO
MORADO EDTA K2(AGENTE Quelación del calcio Biometría hepática en
QUELANTE) sangre total:
Grupo sanguíneo,
hematocrito,
hemoglobina,
recuento plaquetario
Practica 1- anatomía y fisiología de eritrocitos
La citometría hemática enfocada a la serie roja la cual constituye el objeto de estudio de la
presente práctica, es útil para el diagnóstico y vigilancia de diversos trastornos, pero se utiliza más
a menudo para el seguimiento de pacientes con quimioterapia o radioterapia, y también para
establecer el diagnóstico de síndrome anémico. Dentro de los datos más relevantes que arroja
dicho estudio se encuentra la medición directa de la hemoglobina, el hematocrito y la cuenta de
eritrocitos, además de cálculos adicionales que brindan más información, entre ellos los llamados
índices eritrocitarios.
Los índices eritrocitarios resultan de suma importancia pues generan información detallada de los
eritrocitos, a saber el primero de ellos llamado VCM (volumen corpuscular medio) expresa el
volumen de un eritrocito, el segundo, denominado HCM (hemoglobina corpuscular media) expresa
el peso promedio (contenido) de hemoglobina en un eritrocito, y el último de ellos conocido como
CMHC (concentración media de hemoglobina corpuscular) expresa la concentración promedio de
hemoglobina por unidad de volumen de eritrocitos
1ra medición- Hematocrito
Hematocrito: porciento de glóbulos rojos en una muestra de sangre total centrifugada a 3000 rpm
durante 30 min.
Técnica
Macrohematócrito.
• Utilizando una pipeta Pasteur larga, se llena de sangre el tubo de Wintrobe exactamente hasta la
marca de 10 evitando que se formen burbujas.
• Centrifugar a 3000 rpm durante 30 minutos.
• Realizar la lectura de la altura de la columna de glóbulos rojos en la escala ascendente del lado
derecho del tubo, cada línea equivale al 1%.
• Reportar en porcentaje.
Microhematócrito.
• Llenar dos terceras partes de un tubo capilar con sangre venosa o capilar.
• Sellar el tubo a la flama o con plastilina por el extremo más distante a la sangre con el objeto de
no hemolizarla.
• Centrifugar a 3000 rpm durante 30 minutos.
• Determinar el hematocrito utilizando el lector.
2da medición- concentración de hemoglobina
Seadicionan 5ml de reactivo Dabkin y 20 ml de sangre con pipeta Sahli
Concentración Hb = Absorbancia X factor
Factor cuantif. Hb= 35.4
3ra medición- Conteo de glóbulos rojos
Uso de cámara de Neubauer, se hace conteo en cuadrantes B.
#GR/mm3= (Numero de GR contados)(factor de dilución)/(Numeros de cuadrantes
usados)(0.2)2(0.1)
Índices heritrocitarios
Volumen cropuscular medio (VCM): Volumen de un solo GR. Valor de ref.: 80-96.1 fl
VCM(fl)= (Hto/GR)(10)
Hemoglobina corpuscular media (HCM): Cantidad de hemoglobina que tiene un solo eritrocito.
V.Ref: 27.5-33.2 pg
HCM(pg)= (Hb/GR)(10)
Concentración media de hemoglobina corpuscular: Cantidad de hemoglobina presente en 100mL
de sangre. V.Ref: 33.4-35.5%
CMHC(%)= (Hb/Hto)(100)
Leucocitos
Caracteristicas:
De 5000-10000 leucitos por microlitro de sangre
Son células
Se clasifican en: Granulositos y Agranulositos
Granulositos
Neutrofilos Pueden ser polimorfonucleares en su estado
maduro o en forma de banda en su estado
inmaduro.
Miden de 10-15 micras
Afinidad a colorantes morado-lila-azul pálido-rosa
Causas de aumento: infecciones bacterianas
Eosinofilos Parecidos morfológicamente a neutrófilos, pero
tienen afinidad a colorantes rosa-rojizos-naranja
Miden de 12-17 micras
Causas de aumento: alergias, parásitos
Basófilos Sin forma definida sin embargo permanece
compacta en forma de gránulos
Miden 10-14 micras
Causas de aumento: reacciones inflamatorias. No
es común encontrarlos 1 de cada 100. Puede ser
asociado a neoplasias (cáncer)
Agranulocitos
Linfocitos Presentan núcleo grande y su citoplasma se ve
homogéneo
Miden de 7-8 micras
Causas de aumento: infecciones de tipo viral
Monocitos Presentan núcleo en forma de frijol o riñón,
citoplasma espumoso
Miden de 12-20 micras
Causas de aumento: procesos acompañados de
daño tisular
Conteo total de leucocitos
#GB(mm3)= (N de GB)(DIL)/4(1)2(0.1)
-se usa pipeta Thoma de blancos en área de blancos
Bilirrubina
Formación de la bilirrubina
La porción hemo se va oxidar por medio de la enzima hemo oxigenasa, enzima del sistema retículo
endoteial, provocando cambios en el anillo tetrapirrolico o anillo de porfirina, generando
pigmento verde oscuro llamado BILIVERDINA.
La biliverdina se va a reducir a BILIRRUBINA por medio de una reacción catalizada por la biliverdina
reductasa.
Captación de bilirrubina en el hígado
Esta forma de la bilirrubina es insoluble y neurotóxica, por lo que la albumina, proteína sintetizada
por el hígado, se unirá a ella formando complejos y así transportarla al hígado. A esta bilirrubina se
le llama BILIRRUBINA NO CONJUGADA
Una vez ubicada en el espacio sinusoidal la albumina libera a la bilirrubina, posteriormente la
ligandina se une a ella y la transporta al retículo endoplásmico.
Conjugación de la bilirrubina
Aquí se conjuga rápidamente mediante una reacción química donde participan dos moléculas de
ácido glucoronico convirtiéndola en hidrosoluble, a esta bilirrubina se le conoce como
BILIRRUBINA CONJUGADA, y entonces se puede elimarmediante dos vías: vía digestiva y vía renal.
Elevación de bilirrubinas
Cuando el catabolismo del hemo es defectuoso, se acumula la bilirrubina en la sangre. Este
defecto se detecta en primer lugar por la aparición del color amarillento característico que
confiere la bilirrubina a la piel, lechos ungueales y a las escleróticas. Este hecho denominado
ictericia
NOTA: Hablar de bilirrubinas conjugadas y no conjugadas a nivel práctico es una herramienta
diagnóstica en donde se monitorea al hígado.
MEDICIÓN DE BILIRRUBINA TOTAL Y CONJUGADA
Las determinaciones colorimétricas de laboratorio se basan en las características de la bilirrubina,
la bilirrubina no conjugada o indirecta es una molécula no polar, insoluble en agua que en el
plasma se encuentra unida a la albúmina. Debido a estas características la bilirrubina no conjugada
sólo reaccionará con la solución de ácido sulfanílico diazotado (reactivo diazo) en presencia de un
acelerador (solubilizante). Por otro lado, la bilirrubina conjugada o directa es un compuesto polar y
soluble en agua que se encuentra en el plasma en estado libre (no ligado a ninguna proteína). Este
tipo de bilirrubina va a reaccionar con solución de ácido sulfanílico diazotado directamente (sin un
acelerador)
-Gracias al ácido sulfanilico se forma un complejo color rojo llamado azobilirrubina
-¿Por qué el blanco lleva muestra? Como la bilirrubina tiene varios grupos cromoforos el blanco
lleva muestra porque quita la interferencia de estos grupos cromoforos.
-El nitrito de sodio es un agente estabilizador y también es un catalizador de la reacción
-el Dimetilsulfoxido: cambia características de solubilización. Conjuga a la Bilirrubina no conjugada
Hemostasia
Mecanismo de protección del organismo ante una lesión vascular
